Roteiro Aulas Praticas - Bioquímica Básica

UNIVERSIDADE ESTADUAL DE SANTA CRUZ - UESC
Departamento de Cincias Biolgicas - DCB
ROTEIROS PARA
AULAS PRTICAS DE BIOQUMICA
Profa. Dra. Ktia Regina Pimentel de Arajo Sgrillo
Ilhus - Bahia
2006
APRESENTAO
A presente apostila foi elaborada a partir de uma coletnea de roteiros de aulas

prticas de bioqumica, considerando tcnicas apresentadas em obras semelhantes.
Este trabalho tem o objetivo de facilitar o acompanhamento da parte prtica da

disciplina Bioqumica, aprimorando o aprendizado e, consequentemente, melhorando a
qualidade de ensino na UESC.
Roteiro de Aulas Prticas de Bioqumica Bsica e Metablica Sgrillo, KRPA (2006)
NDICE
1.
1.1.
2.
2.1.
2.2.
2.3.
2.4.
3.
4.
5.
5.1.
5.2.
5.3.
5.4.
5.5.
5.6.
5.7.
5.8.
5.9.
5.10.
5.11.
5.12.
5.13.
5.14.
5.15.
6.
6.1.
Pag.
4
Introduo ao trabalho em Laboratrio ...............................................
Observaes ..........................................................................................
Programa da Disciplina Bioqumica Bsica ........................................
Ementa . ..................................................................................................
Objetivos ................................................................................................
Avaliao ................................................................................................
Contedo ................................................................................................
Como elaborar um Relatrio ................................................................
Relao das principais
vidrarias e materiais utilizados em
Laboratrio ............................................................................................
Roteiro de Prticas ................................................................................
Experimento 1 - Medidas de pH ..........................................................
Experimento 2 - Utilizao do pH-metro ............................................
Experimento 3 - cido carbnico ........................................................
Experimento 4 - Titulao ....................................................................
Experimento 5 - Separao de aminocidos em uma mistura
utilizando a tcnica de eletroforese em papel ....................................
Experimento 6 - Separao de aminocidos em uma mistura
utilizando a cromatografia em papel ................................... ...............
Experimento 7 - Caracterizao de protenas .....................................
Experimento 8 - Solubilidade de protenas Desnaturao .............
Experimento 9 - Calibrao e sensibilidade do mtodo
fotocolorimtrico ...................................................................................
Experimento 10 - Estudo da POLIFENOLOXIDASE (PPO) extrada
da batatinha ...................................................................... ....................
Experimento 11 - Hidrlise cida e enzimtica do amido ..................
Experimento 12 - Caracterizao de carboidratos .............................
Experimento 13 - Extrao de Amido ..................................................
Experimento 14 - Extrao de cidos nucleicos ................................
Experimento 15 - Caracterizao de Lipdios ....................................
Literatura Consultada ..........................................................................
Web sites recomendados .....................................................................
1. INTRODUO AO TRABALHO EM LABORATRIO

No Laboratrio de Bioqumica o aluno dever:
Ser rigoroso na ateno, tcnica e disciplina, evitando desta forma, a ocorrncia de

erros que invalidam parcial ou totalmente o trabalho realizado e acarretam em
desperdcio de material, reagentes e tempo;
No realizar experincias extras a ttulo de curiosidade, pois podem levar a reaes

inesperadas;
Afim de alcanar a eficincia desejada, necessrio ler as prticas com antecedncia;
Colocar sobre a bancada apenas o material estritamente necessrio como lpis,

borracha, caneta, rgua e apostila de trabalhos prticos. Demais objetos devero ser
deixados fora da bancada de trabalho, em lugar designado;
Conservar a bancada de trabalho sempre limpa, durante e ao trmino das aulas. Ao

trmino da aula a bancada dever estar em condies de ser novamente utilizada.
Reagentes e respectivas pipetas estaro dispostas junto aos mesmos, em uma

bancada especifica e devero ser utilizadas com ateno para evitar trocas. Tambm
devero ser transferidas alquotas dos reagentes para beckers para evitar
contaminao.
Sempre que necessrio, utilizar mscara, luvas, culos e/ou qualquer outro artigo de
proteo indicado;
No fumar no laboratrio;
Cautela no trabalho com substncias custicas, txicas, cidos em geral, substncias
inflamveis e vidraria;
Os reagente corrosivos ou txicos (cidos ou bases fortes, quando muito concentrados)
no devero ser pipetados diretamente, sendo medidos em provetas ou, em alguns
casos, em buretas ou com auxlio de uma pra;
Evitar tocar, cheirar ou manusear produtos que tenham derramado ou extravasado de
algum recipiente;
Manter o rosto o mais distante possvel durante as operaes de mistura ou
aquecimento de reagentes;
No degustar nada no laboratrio, exceto se for especialmente orientado a faz-lo;
Ao acender o bico de Bunsen, ter o cuidado de no abrir a torneira do gs antes que

tenha mo a chama que deve acend-lo;
Terminado o uso do bico de Bunsen, verifique se as torneiras do gs esto bem
fechadas, evitando assim exploses e intoxicaes;
Cuidado com as substncias inflamveis (lcool, ter) nas proximidades de uma
chama;
Jamais aquecer um sistema completamente fechado;
Os reagentes utilizados no devem retornar ao recipiente estoque;
Use uma pipeta para cada reagente evitando a contaminaes;
Antes de introduzir pipetas nas solues certifique-se de que esto limpas;
Ao preparar solues de cidos fortes (sulfrico, clordrico, ntrico, etc.), deve-se verter
o cido sobre a gua, nunca o contrrio pois provoca reao exotrmica violenta;
Deve-se ter precauo ao preparar solues alcalinas (NaOH, KOH, etc.), pois a
reao exotrmica e corrosiva. Mantenha o frasco em banho de gelo e no aspire os
gases desprendidos;
Quando preparar solues alcolicas, o lcool e gua devem ser medidos
separadamente e depois reunidos, porque h reduo do volume total;
Os dispositivos para a medio de volumes so calibrados com gua destilada a uma
dada temperatura, conforme vem registrado (15, 20, 25C);
Para medir volumes entre 0 e 1 ml deve-se usar pipetas de 1 ml graduada em
centsimos. Entre 1 e 2 ml usar pipetas de 2 ml graduada em centsimos. Entre 2 e 5
ml usar pipetas de 5 ml graduada em dcimos. Entre 5 e 10 ml usar pipetas de 10 ml
graduada em dcimos;
As pipetas volumtricas so de maior preciso e so utilizadas para o preparo de
solues padres;
O lquido no interior de medidores de volume (pipetas, buretas, provetas, bales
volumtricos, etc.) forma menisco. A leitura de ser feita na parte inferior do menisco e
na altura da linha dos olhos.
1.1. Observaes
obrigatrio o uso de jaleco, sapato fechado e calas compridas, portanto no

ser permitida a entrada do aluno no laboratrio sem estar usando-os.
Alunos com cabelo comprido devero prende-los durante s aulas prticas para evitar
acidentes com chamas e reagentes corrosivos.
A pontualidade importante para a boa conduo dos trabalhos. Ser tolerado um

atraso de 10 minutos do incio da prtica, aps o qual o aluno ser considerado
ausente.
De acordo com a legislao vigente h um limite de faltas de 25% para essa disciplina.
Acima desse limite, o aluno est reprovado por faltas.
No permitido assistir ou pagar aula em outra turma, pois todas as turmas esto
completas com o nmero mximo de alunos.
Em caso de acidentes (oral, contato com a pele, com os olhos, etc.) tomar as
precaues de acordo com a lista de primeiros-socorros da Merck, afixada na parede
do Laboratrio.
S deixar a aula quando terminado o trabalho ou, em qualquer caso, com a

autorizao do professor, caso contrrio o aluno receber falta.
2. Programa da Disciplina Bioqumica Bsica

PROFESSORA.:
Profa. Dra. Ktia Regina Pimentel de Arajo Sgrillo
Cursos: Cincias Biolgicas Bacharelado, Licenciatura, Ecologia e Biomedicina

Enfermagem
2.1. Ementa
Protenas; Hemoglobina; Sentido das reaes; Enzimas; Estrutura de lipdios;
Membranas; Metabolismo de carboidratos; Fosforilao oxidativa; Metabolismo de lipdios;
Metabolismo de aminocidos; Aspectos bioqumicos da nutrio; Estrutura de
nucleotdios; Estrutura de cidos nucleicos; Duplicao; Transcrio em eucariotos;
Cdigo gentico; Sntese de protenas; Regulao alostrica e hormonal do metabolismo;
Aspectos da integrao metablica.
2.2. Objetivos
Conhecer as principais formas de energia evolvidas no metabolismo celular, bem

como o fluxo dessa energia nas clulas, tecidos e organismos;
Reconhecer as principais biomolculas, suas estruturas e funes enquanto
participantes do metabolismo celular;
Estudar e reconhecer as principais vias metablicas, incluindo metabolismo de

carboidratos (via glicoltica), de lipdios (cidos graxos), de protenas (nitrognio), de
cidos nuclicos, bem como suas inter-relaes e as enzimas envolvidas;
Estudar o controle hormonal e a integrao das vias metablicas.
2.3. Avaliao
A avaliao da parte prtica ser realizada atravs de:
relatrios toda prtica corresponde a um relatrio que vale de 0 a 10;
*
participao em aula ;
*
auxlio no processo de correo dos relatrios .

_______
* A somatria destes dois itens permitir um acrscimo de at 0,5 ponto na mdia final da
parte prtica da disciplina.
Os relatrios sero elaborados em grupo e entregues na aula da semana seguinte a
realizao da prtica;
Na primeira aula os alunos devero escolher o grupo a que pertencero durante e
semestre, no ser permitida a permuta de alunos durante o mesmo.
No ser permitido a troca do horrio de aula prtica.
2.4. Contedo
Aula
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
Data
Aulas Prticas
Introduo ao Laboratrio
Normas e cuidados nos trabalhos em laboratrio
Medidas de pH
Medidas de pH
Utilizao de pH-metro
Utilizao de pH-metro
cido Carbnico
cido Carbnico
Titulao
Titulao
Separao de aminocidos em uma mistura utilizando a tcnica de eletroforese
em papel
Separao de aminocidos em uma mistura utilizando a tcnica de eletroforese
em papel
Separao de aminocidos em uma mistura utilizando a cromatografia em papel
Separao de aminocidos em uma mistura utilizando a cromatografia em papel
Caracterizao de protenas
Caracterizao de protenas
Calibrao e sensibilidade do mtodo fotocolorimtrico
Calibrao e sensibilidade do mtodo fotocolorimtrico
Estudo da Polifenoloxidase (PPO) extrada da batatinha
Estudo da Polifenoloxidase (PPO) extrada da batatinha
21
22
23
24
25
26
27
28
29
30
Hidrlise cida do amido

Hidrlise cida do amido
Caracterizao de carboidratos
Caracterizao de carboidratos
Extrao de amido
Extrao de amido
Extrao de cidos nucleicos
Extrao de cidos nucleicos
Caracterizao de lipdios
Caracterizao de lipdios
3. Como elaborar um RELATRIO

Para orientar a elaborao de relatrios sero apresentados a seguir um roteiro e
algumas sugestes prticas.
Professora: Dra. Katia Sgrillo

Email: katiasgrillo@uesc.br
1. Capa
2. Sumrio (ou ndice)
3. Introduo
4. Objetivo
5. Materiais e Mtodos
6. Resultados e Discusso
7. Concluso
8. Bibliografia
Modelo de uma Capa

Universidade Estadual de Santa Cruz UESC
Departamento de Cincias Biolgicas
Curso de Biologia
Disciplina: Bioqumica
No
topo e centrado deve-se apresentar o

nome da Instituio (e logotipo), Curso,
Disciplina
Titulo do Relatrio - centrado com letras

grandes (maiores que as demais)
Autores: nome componentes do Grupo

Professor responsvel: nome do professor
Centrado e abaixo: Local, ano
1. Introduo ..................... 1
2. Ojetivo.............................2
3. Materiais e Mtodos ..... 2
Autores:
Joo Almeida
Pedro Mascarenhas
Silvia Peixoto
Profa.: Dra. Ktia Sgrillo
Ilhus, Ba
Maro, 2003
Relao de ttulos e indicao do nmero da pgina onde aparece.
Texto com o referencial terico sobre o tema desenvolvido no relatrio. Utilizar

nas citaes bibliogrficas as Normas ABNT.
Deve-se apresentar de forma clara e concisa o

objetivo previsto na realizao da prtica.
10
Descrio completa de todos os materiais

equipamentos utilizados no experimento.
Deve-se tambm apresentar de forma clara e objetiva

cada passo da metodologia utilizada.
Neste item so apresentados todos os resultados encontrados no

experimento e a discusso dos mesmo. Pode-se utilizar figuras
(esquemas, desenhos, grficos, etc.) e tabelas para facilitar a
visualizao dos mesmos. Deve-se apresentar tanto as figuras como
as tabelas o mais prximo possvel de sua citao no texto
(chamadas).
OBS - Nunca esquecer: figura rtulo abaixo e tabela ttulo acima.
A discusso deve ser feita considerando as informaes
bibliogrficas disponveis sobre o assunto, comentando se os
resultados encontrados foram coerentes ou no. Tambm neste
item deve-se apresentar os pontos crticos do mtodo e possveis
fontes de erros.
Este item deve responder a cada um dos objetivos propostos.

Como o prprio nome diz, deve concluir algo sobre o
experimento realizado. O grupo deve apresentar sua opinio
(ainda de forma impessoal), sobre a metodologia e um
fechamento sobre os resultados alcanados.
11
Toda citao deve obedecer as Normas da ABNT

Em caso de dvidas consultar Biblioteca ou a Editus (editora da UESC).
No texto (introduo e discusso) deve aparecer somente o ltimo nome do
autor e o ano da publicao. Veja os exemplos abaixo:
(um) Xxxxx (1999)

(dois) Xxxxx & Aaaa (2000)
(mais de dois) Xxxx et al, (2001)
Apresentao MUITO IMPORTNTE. Voc sempre ser avaliado pelo que

apresenta.
Limpeza, ateno aos prazos, esttica, tamanho de papel e distribuio de
figuras, tabelas no texto, assim como, o contedo sero parte integrante
da avaliao.
ATENO: ERROS de portugus e corretivos devem ser EVITADOS. A Redao
deve sermpre ser impessoal.
NUNCA deixe pginas em branco ou com poucas frases escritas no corpo do trabalho
ele um todo e portanto cada sub-ttulo deve ser seguido do prximo. Ttulos no podem
ser colocados no fim de uma pgina (rfo) sem pelo menos uma frase.
Em NENHUM caso ser aceito trabalho manuscrito.
4. Relao das principais vidrarias e materiais utilizados em laboratrio

A seguir so apresentadas as principais vidrarias e materiais utilizados no Laboratrio de
Bioqumica para realizao de aulas prticas.
Balo volumtrico com fundo chato e

com fundo redondo
12
Balo volumtrico com tampa
Becker
Bureta
Cadinho
Dissecador
Erlenmeyer
13
Frasco kjeldahl
Frasco de vidro
Funil de separao (coluna

cromatogrfica)
Funil
Kitassato
Piceta
14
Pipeta volumtrica
Pipeta graduada
Placa de Petri
Proveta
Tubo de ensaio
15
Trip com tela de amianto e

de Bunsen
bico
Vidro de relgio
5. Roteiro de Prticas
5.1. Experimento 1 - Medidas de pH

Assunto: pH e tampes
Objetivos:
Caracterizar as substncias por faixas de pH.
Entender o pH como medida de concentrao.
Familiarizao com o uso de fitas de indicador de pH.
Materiais:
Trs tubos de ensaio;
Fitas de indicador de pH (dois tipos de fita: uma de 0 a 6 e outra de 7 a 14 );
Substncias coletadas no permetro da UESC;
gua.
Cadinho com basto
Procedimentos:
Cada grupo ir apreender trs substncias para determinao do pH e diluir, em gua,
estas substncias, uma em cada tubo de ensaio; as amostras de materiais slidos, se
16
necessrio, devero ser maceradas no cadinho com o auxlio do basto, antes de serem
diludas.
Amostras
slidas
OBS: Procurar materiais que possam ser dissolvidos ou macerados para soluo em
gua. Evitar substncias com cores intensas, pois podem alterar a leitura.
Mergulhar as fitas de indicador de pH no tubo de ensaio e esperar o resultado por 5
minutos. Anotar o resultado de cada substncia e pH.
Selecionar uma substncia, dilu-la ainda mais (dobro da diluio utilizada) e medir
novamente o pH.
Sugestes para o relatrio:
Agrupar as substncias por faixa de pH
Correlacionar tipos de substncias e faixas de pH
Avaliar a variao de pH em materiais presentes no dia a dia
Relacionar o pH esperado com o pH encontrado (explicando os provveis motivos da
discordncia).
Entender e explicar como feita a leitura das fitas de medio de pH e quais os
princpios qumicos usados nessas fitas.
Explicar o efeito da diluio na medida de pH.
Experimento 2 Utilizao de pH-metro

Objetivos:
Entender e ambientar-se com a utilizao do ph-metro
Caracterizar tamponamento e sua formao em solues de cidos fracos
Praticar a titulao.
Materiais:
17
pHmetro;
30 mL de soluo de NaOH 0,1mol/L;
30 mL de soluo de cido actico 0,1mol/L;
Um bquer;
Um basto de vidro;
Uma pipeta.
Procedimentos:
Transferir para um bquer com 30 mL de soluo de cido actico 0,1 M

Medir o pH desta soluo com a utilizao de um pHmetro anotar o resultado
verifique se o pHmetro j foi calibrado
levantar a alavanca com o eletrodo do pHmetro CUIDADO FRGIL
colocar em um bquer com gua destilada sob o eletrodo
lavar o eletrodo com gua destilada Cuidado para no bater no bquer.
colocar o bquer com a soluo a ser medida sob o eletrodo
abaixar a alavanca com o eletrodo do pHmetro at mergulhar a ponta do eletrodo
na soluo. Cuidado para no tocar no fundo do bquer.
ativar o boto para leitura e anotar o valor medido.
Acrescentar, com o auxlio de um pipeta, gradativamente 3,0 mL de uma soluo de
NaOH 0,1M.
3 mL de NaOH
Fazer a medio do pH. Repetir o procedimento (acrscimo de 3mL de NaOH) por 3

vezes e aps cada acrscimo fazer nova medio do pH.
Antes de cada medida necessrio lavar o eletrodo (troque a gua destilada do
bquer aps muitas medies para evitar que esta fique excessivamente
contaminada pelos reagentes)
18
+
Construir uma curva com os dados obtidos (equivalentes de H adicionados x pH) .

Observar a variao de pH de uma soluo tampo devido ao acrscimo de uma base
forte;
Montar uma curva de titulao, mostrando a variao de pH identificando a faixa
tamponante, o porqu de sua ocorrncia e sua importncia nos sistemas biolgicos;
Entender a utilizao do pHmetro;
Fazer o grfico da curva de titulao terica (com valores calculados) e comparar com a
obtida na prtica.
visitar os sites
http://yip5.chem.wfu.edu/yip/java/titrate.html
http://yip5.chem.wfu.edu/yip/java/j01/titrate3.html
http://yip5.chem.wfu.edu/yip/java/titrate5.html
http://www.calpoly.edu/~cbailey/125LabExperiments/Titration/Titration.html
Experimento 3 - cido carbnico

Objetivos:
Caracterizar indicadores de pH por colorao.
Acompanhar a variao de cor de um indicador com a variao de pH.
Materiais:
Um tubo de ensaio;
Pipeta;
O indicador Azul de Bromotimol 20% diludo em gua.
19
Procedimentos:
Em um tubo de ensaio contendo uma soluo de Azul de Bromotimol inserir uma pipeta
vazia e soprar suavemente, fazendo com que as bolhas produzidas sejam expelidas
dentro da soluo
Observar e anotar.

Identificar o azul de Bromotimol como um indicador de pH.
Explicar como e porque se deu a mudana de colorao da soluo.
Explicar a importncia deste sistema tampo em animais e no homem.
Experimento 4 - Titulao
Objetivos :
Entender como a fenolftalena pode agir como um indicador de pH
Caracterizar o vinagre como uma soluo constituda por cido actico
Entender por que houve mudana da colorao relacionando este fato com a natureza
dos reagentes utilizados .
Compreender por que foi necessrio atingir a mudana de colorao para que se
realizasse a concluso do experimento e a obteno da quantidade de cido actico.
Materiais:
2,5 mL de vinagre
Bquer
Erlenmeryer
Basto de vidro
gua destilada
20
soluo de NaOH 0.08M

indicador de fenolftalena
pipeta
Bureta
Procedimentos:
Colocar 2.5 mL de vinagre no Bquer 1.
Ferver 30mL de gua destilada no Bquer 2.
Aps a fervura, resfri-la at a temperatura ambiente e adicionar 25 mL ao Bquer com
vinagre.
30 mL de gua
ferver e resfriar a
temp. ambiente
5 gotas de
fenolftalena
NaOH
1
Becker com vinagre
Adicionar 5 gotas de fenolftalena.

Adicionar NaOH gota a gota, agitando at a mudana de colorao.
Anotar a quantidade de NaOH utilizada.
Utilizando os dados obtidos (as quantidades de reagentes utilizados juntamente com os
dados fornecidos abaixo), calcular a porcentagem de cido actico presente no vinagre.
Determinar a acidez total do vinagre, ou seja a quantidade de cido actico (em termos
percentuais ) presente em um amostra de vinagre .
Dados fornecidos:
PM cido actico : 60,0
Densidade do cido actico : 1,049 g/cm3
Explique porque a gua foi fervida, e porque foi novamente esfriada para utilizao.
21
Experimento 5 Separao e identificao de aminocidos em uma mistura

utilizando a tcnica de eletroforese em papel
Assunto: Eletroforese
Objetivo:
Manipular a tcnica de eletroforese para separar e identificar aminocidos em uma

mistura.
Materiais e Reagentes:
Equipamento de eletroforese (cuba, fonte, cabos)

Estufa regulada em 80 - 90C;
Papel de filtro Watmann (n 4 ou 1);
Tubos capilares (prximo aos reagentes);
Nebulizador;
1 Par de luvas cirrgicas;
Lpis, rgua, tesoura.
Soluo problema: gua de melancia;
Soluo Tampo cido actico/acetato pH 4,6;
Soluo padro de aminocidos (glicina, aspartato) 0,1M; (ver ANEXO I, pg. 14)
Soluo reveladora - Ninidrina 0,1% em acetona.
Procedimento:
1. Cortar duas tiras de papel de filtro com 1,5 x 25 cm, utilizar luvas para evitar tocar o
papel diretamente com as mos.
2. Marcar com lpis o meio da tira de papel com uma linha tracejada e, nas extremidades
marcar positivo (+) e negativo (-).
3. Aplicar a soluo de aminocido (padro) com tubo capilar, ao longo da linha central,
sem espalhar muito. Repetir a aplicao por mais duas vezes. Deixar secar; Na outra
tira fazer o mesmo com a amostra.
4. Embeber as tiras de papel na soluo tampo, retirando o excesso com papel
absorvente.
5. Colocar as tiras no aparelho de eletroforese de maneira que as extremidades fiquem
mergulhadas no tampo da cuba e a sinalizao (+) e (-) fiquem nos plos respectivos.
6. Fechar o aparelho, ligar regulando a voltagem em 250V e aguardar 60 minutos.
7. Retirar o papel do aparelho, secar em estufa, pulverizar a ninidrina com a ajuda do
nebulizador e secar novamente para a revelao.
8. Interpretar os resultados.
22
Cuba eletrofortica
Papel com amostra

Papel com aminocido

Explicar quais os fatores que influenciam a separao eletrofortica.
Explicar como cada um deles pode influir na separao.
Explicar qual a necessidade do uso do tampo nesta tcnica.
Esquematizar um sistema eletrofortico explicando em detalhes o funcionamento do
mesmo.
Experimento 6 Separao de aminocidos em uma mistura utilizando a

cromatografia em papel
Assunto: Cromatografia em papel
Objetivos
Separar e identificar aminocidos utilizando a tcnica da cromatografia em papel;

Calcular os fatores de fronteira (Rf);
Conhecer os diversos tipos de tcnicas cromatogrficas.
Materiais e Reagentes
Papel de filtro Whatman em folha (CUIDADO: evite tocar diretamente no papel para
evitar contaminao);
1 Beker de 1000 ml;
1 placa de petri que sirva para suporte para os bkeres de 1000 ml;
2 Clips (prendedores de papel);
Estufa regulada a 80 - 90C para revelao;
Nebulizador;
Tubos capilares de vidro (prximos aos reagentes);
1 par de luvas cirrgicas;
23
Lpis, rgua e tesoura.

Mistura problema;
Solues padres de L-aminocidos puros (glutamato, lisina, prolina e leucina) 0,1M ;
Solvente misto (n-butanol:c. frmico:gua (100:30:25));
Revelador (soluo de ninidrina 0,1% em acetona).
Procedimento
1. Cortar um pedao de papel de filtro com as dimenses aproximadas de 15x15 cm
(utilize luvas para evitar tocar o papel diretamente com as mos);
2. Marcar, com lpis, um trao horizontal a 2,5 cm da borda inferior;
3. partir da borda lateral, marcar sobre o trao um ponto a cada 3 cm um do outro (5
pontos no total);
4. Aplicar sobre os pontos as solues dos aminocidos e da mistura problema em
pequenas quantidades, com o auxlio dos tubos capilares, atentando para identificar
cada ponto;
15 cm
15 cm
5. Dar forma cilndrica ao papel, evitando manuseio direto e prendendo com clips;
6. Adicionar uma pequena quantidade do solvente na placa de petri, formando uma
pequena camada;
7. Introduzir o cilindro formado na cuba cromatogrfica contendo o solvente, evitando que
este alcance os pontos de aplicao das amostras;
8. Vedar a cuba com o becker e deixar que o solvente suba por capilaridade at atingir a
distncia de aproximadamente 1cm da borda superior (+/- 1 hora);
9. Atingido este ponto, retirar o papel, marcar com lpis a altura atingida pelo solvente;
24
10. Secar em estufa 70 C. Pulverizar a soluo de ninidrina, colocar em estufa para a

revelao (secar aproximadamente 3 min.);
estufa
estufa
ninidrina
11. Interpretar os resultados.

Explicar o princpio bsico da cromatografia.
Descrever resumidamente os tipos de cromatografia existentes (na introduo).
Explicar o que vem a ser o coeficiente de partio de uma substncia.
Calcular os Rfs e comparar os padres com a amostra.
Discutir os resultados encontrados.
Indicar qual seria o procedimento prtico utilizado para melhor separar os aminocidos
com Rf muito prximos (introduo).
Identificar a fase mvel, a estacionria e o suporte fsico utilizado no experimento.
Experimento 7 Caracterizao de Protenas

Assunto: Protenas
Objetivos :
Entender as propriedades das protenas e como essas influenciam na sua solubilizao.
Entender alguns mtodos para identificao e quantificao de protenas
Verificar o comportamento de diferentes grupos de biomolculas em diferentes
solues.
Materiais:
ovo (1 p/ cada grupo)
1 Tubo de ensaio com 5 mL de tampo fosfato 0,1mol/L em pH7.8 Tubo 1;
1 Tubo de ensaio com 3 mL de soluo de ninhidrina 0,1% em tampo fosfato Tubo 2;
25
1 Tubo de ensaio com 3 mL de biureto Tubo 3;

1 Tubo de ensaio com 4 mL de gua destilada Tubo 4;
1 Tubo de ensaio com 6 mL de cloreto de sdio 1M Tubo 5;
1 Tubo de ensaio com 5 mL de sulfato de amnio 70% (p/v) - Tubo 6;
1 Tubo vazio 7;
1 Tubo de ensaio com 1 mL de tampo fosfato 0,1mol/L em pH7.8 Tubo 8;
1 Tubo de ensaio com 1 mL de gua destilada Tubo 9;
10 mg de Casena (eppendorf plstico)
1 Basto de vidro;
2 bqueres;
3 Pipetas graduadas de 5 mL;
HNO3 1:1 (na bancada do professor);
NaOH 5M (na bancada do professor);
Banho-maria.
Procedimentos:
Reao da Ninidrina:
1. Abrir o ovo separando o seu contedo em dois bqueres (clara em um, gema em outro)
sem romper a membrana que envolve a gema;
2. Transferir c/ pipeta aprox. 1 ml de clara para o Tubo 1 (tp. fosfato);
3. Transferir para o Tubo 2 (ninhidrina) 2 ml, com o auxlio de uma pipita, da soluo
obtida no passo anterior (Tubo 1).
4. Colocar o Tubo 2 no banho-maria, deixando-o ferver por 5 minutos;
5. Registrar os dados obtidos.
26
Reao do Biureto:
1. Pipetar 1 ml da soluo do Tubo 1 (sol. clara/ tp. fosfato) para o Tubo 3 (biureto);
2. Registrar os dados obtidos.
Solubilizao (salting in):

1. Diluir 2mL de clara no Tubo 4 (H2O dest.), misturar suavemente;
2. Adicionar a soluo de cloreto de sdio do Tubo 5 ao Tubo 4 gota a gota at a
solubilizao do material;
3. Registrar os dados.
Precipitao sem desnaturao (salting out):

1. adicione soluo saturada de sulfato de amnio (Tubo 6) ao Tubo 4 gota a gota;
Reao xantoprotica:
1. Colocar 1 ml da clara do ovo do Tubo 1 no Tubo 7;
27
2. Adicionar os 10mg de casena ao tubo 8 e agitar suavemente para solubilizar;

3. Adicionar aos tubos 7,8 e 9 0,5 ml de cido ntrico (CUIDADO! Usar pipeta de 5 ou de
10 ml; aspirar c/ pra, no com a boca, usar luvas);
4. Ferver todos os tubos no banho-maria;
5. Anotar os resultados observados e adicionar gota a gota e agitando aps cada gota,
1mL de NaOH;
6. Anotar e analisar os resultados obtidos.

Explicar o que so os reagentes Biureto e Ninhidrina e como eles interagem com
protenas.
Explicar as principais diferenas entre os mtodos utilizados para identificao de
protenas e em que situaes deve ser usado cada um.
Explicar os mecanismos de solubilizao e precipitao de protenas.
Experimento 8 Solubilidade de Protenas - Desnaturao

Assunto: Protenas
Objetivos:
Estudar a solubilidade das protenas frente a agentes desnaturantes (calor) e fora

inica.
1 Beker de 100ml;
3 Tubos de ensaio;
1 Estante p/ tubos de ensaio;
28
Basto de vidro;
1 Bico de gs;
1 Tela de amianto;
Conta - gotas (prximo aos reagentes);
1 Pipeta de 5 ml;
Pipetas de 1, 2 e 5 ml (prximas aos reagentes).
Soluo de casena 1%;
Soluo de ovoalbumina 1%;
Ovo de galinha;
lcool etlico absoluto;
Cloreto de sdio 0,1 N;
Soluo saturada de sulfato de amnia.
Procedimento:
1. Colocar uma clara de ovo em um beker. Adicionar aproximadamente 200 ml de gua
destilada. Agitar com basto. Deixar em repouso por alguns minutos. Observar e
anotar os resultados.
200 mL
H2O
2. Transferir com uma pipeta 2ml da soluo de casena 1% para o tubo de ensaio 1;
3. Transferir com uma pipeta 2ml da soluo de ovoalbumina 1% no tubo de ensaio 2;
4. Ao final de cada um dos passos a seguir, observar e anotar os resultados;
5. Aquecer os tubos 1 e 2 em banho-maria fervente;
Alccol
etilico
6. Adicionar lcool etlico (1 a 3 ml) a cada um dos tubos;

7. No beker da clara de ovo, adicionar soluo de cloreto de sdio gota a gota;
8. Pipetar do beker 2ml da soluo de clara de ovo diluda em um tubo de ensaio;
9. Adicionar 2 ml da soluo saturada de sulfato de amnia;
10. Adicionar 4 a 5 ml de gua destilada.
29

Explique detalhadamente as suas observaes, de acordo com o procedimento
executado;
Explique como se pode precipitar as protenas.
Cite trs agentes desnaturantes.
D um exemplo de processo de desnaturao que ocorre no nosso dia a dia.
Experimento 9 Calibrao e sensibilidade do mtodo fotocolorimtrico

Assunto: Fotocolorimetria e Espectrofotometria
Objetivos:
Elaborar curvas de calibrao e trabalhar o conceito de sensibilidade de um mtodo

fotocolorimtrico;
Relacionar os mtodos vistos s aplicaes prticas;
Resolver problemas de clculo de diluies e de concentraes.
Materiais, Equipamentos e Reagentes:

7 Tubos de ensaio;
6 Bekeres de 100
Pipetas de 1, 2 e 5 ml (prximas aos reagentes);
7 Pipetas de 2 e 5 ml;
1 Proveta de 100 ml;
Fotocolormetro (com cubetas).
Reativo do biureto :
Sulfato de cobre cristalizado (pentahidratado) - 1,5g;
Tartarato duplo de sdio e potssio - 6,0g;
gua destilada - 500 ml;
Adicionar 300 ml de soluo de NaOH a 10% (p/v) (114,9 g/litro de NaOH) sob
constante agitao e completar para 1 litro com gua destilada.
Soluo de casena a 5 % em gua;
gua destilada.
30
Procedimento:
1. Numerar 6 bekers e colocar, em cada um deles, 1 ml da soluo de casena, seguindo
a Tabela 1:
Tabela 1 Distribuio de reagentes em diferentes propores
Soluo
Casena
5%
H2O
destilada
B1
1 ml
B2
1 ml
B3
1 ml
B4
1 ml
B5
1 ml
B6
1 ml
4 ml
9 ml
19 ml
24 ml
49 ml
99 ml
2. Preparar 6 tubos de ensaio colocando, em cada um, 1 ml da soluo preparada

anteriormente (beker 1 no tubo 1, beker 2 no tubo 2 e assim por diante);
3. Preparar tambm um tubo testemunha (zero) contendo 1 ml de gua destilada;
1 mL
4 mL
Reat. de
biureto
4. Em cada tubo de ensaio colocar 4 mL do reativo do biureto;

5. Misturar o contedo dos tubos por inverso e deixar em repouso por 15 minutos para
que ocorra a reao de complexao;
6. Fazer a leitura de absorbncia das solues no fotocolormetro a 540 nm, usando o
contedo do tubo 0 para zerar o aparelho;
7. Traar em papel milimetrado (com escala) a curva de calibrao e determinar o limite

de sensibilidade deste mtodo para essas condies.
31

Esquematize um fotocolormetro explicando as funes de todos os componentes
(introduo).
Explique como poder ser utilizada esta tcnica para determinao de substncias que
no apresentam colorao.
Experimento 10 Estudo da POLIFENOLOXIDASE (PPO) extrada da batatinha

Assunto: Enzimas
Objetivos:
Estudar a atividade in vitro da polifenoloxidase da batatinha, bem como o efeito da

temperatura.
Batata inglesa
gua destilada;
Tampo fosfato 0,1M pH 6,5.
Solues a 1% dos seguintes compostos (500 ml de cada):
Floroglucina
Resorcina
Fenol
Tirosina
8 Tubos de ensaio;
Banho-maria, regulado em 37C;
5 Pipetas de 2 e 5 ml;
Pipetas de 2 e 5 ml (prximas aos reagentes);
Liquidificador;
1 Gaze para filtrao;
Termmetro;
1 Erlenmeyer;
1 bico de gs e 1 tela de amianto;
1 bker de 1000 ml;
Banho de gelo.
32
Procedimento:
Especificidade:
Liquidificar uma poro de batata com 150 mL de tampo fosfato em pH 6,5;
Filtrar em gaze, deixar decantar (5 minutos) e retirar o sobrenadante que a fonte de
PPO;
Batata + 150 mL
de tampo pH 6,5
Numerar os tubos de ensaio de acordo com o nmero de substratos que sero

testados. Em seguida adicionar, em cada tubo, 1 ml do substrato e 1 ml do extrato de
PPO. Imediatamente colocar em banho-maria a 37C durante 5 minutos.
1 mL do substrato +
1 mL de extrato de PPO
37 C 5 min
Observar e anotar os resultados. O tubo 1 ser o branco e conter apenas 1 ml de gua

e 1 ml do extrato de PPO.
Efeito da temperatura:
Pipetar 3 ml do extrato de PPO em um tubo de ensaio;
Deixar em banho-maria fervente por 5 minutos;
Colocar 1 ml do substrato que mais escureceu no teste anterior em um tubo de ensaio e
1 ml do extrato fervido (TUBO 1);
Deixar por 5 minutos em banho-maria a 37C;
Colocar 1 ml do extrato de PPO em um tubo e 1 ml do melhor substrato em outro.
Colocar esses dois tubos em banho de gelo por 5 minutos para homogeneizar a
temperatura;
33
Em seguida verter o tubo contendo o substrato no tubo contento o extrato de PPO

(formando o TUBO 2). Homogeneizar e colocar imediatamente de volta no banho de
gelo;
Observar a colorao formada no tubo e comparar com o observado no teste a 37C.
Cite trs procedimentos que podem impedir a ao da PPO sobre seus substratos na
presena de oxignio. Justifique cada um deles.
Experimento 11 Hidrlise cida e enzimtica do amido

Assunto: Enzimas
Objetivos:
Demonstrar que um polissacardio (amido) pode ser hidrolisado com a produo de
acares redutores;
Verificar os dois tipos de catlise: cida e enzimtica (amilase salivar).
Soluo de amido a 1%;
Soluo de lugol;
Reativo de Benedict;
HCl concentrado
Soluo de NaCl 5 mM
1 Beker 1000 ml;
20 Tubos de ensaio;
1 Bico de gs;
1 Tela de amianto;
1 Trip;
3 Pipetas de 2 ml;
Pipetas de 2 ml (prximas aos reagentes);
2 Proveta de 25 ml;
2 Erlenmeyer de 100;
1 Grade para tubos de ensaio;
Banho-maria;
Conta-gotas (prximo aos reagentes);
2 Pras.
34
Procedimento:
Hidrlise cida (Grupos 1 e 3)
Colocar em 5 tubos de ensaio (de 1A a 5A) 3 gotas de lugol e, em outros 5 tubos (1B a
5B), 2 ml do reativo de Benedict;
2 mL de Reativo de Benedict
3 gotas de Lugol
Tubos A
Tubos B
Colocar 25 ml de soluo de amido em um erlenmeyer de 100 ml. Deixar em banhomaria fervente por 10 minutos para homogeneizar a temperatura;
Adicionar soluo de amido em ebulio, 1 ml de cido clordrico concentrado
(CUIDADO: utilizar a pra para pipetar o cido);
25 mL de sol. de amido banhomaria por 10 min
0,5 mL p/ 1A e 1B
Tubos 1A a 5A
em banho-maria
por 3 min
1 mL de HCl
Misturar e retirar imediatamente 1 ml da mistura, transferindo 0,5 ml para o tubo 1A e

0,5 ml para o tubo 1B. Manter o erlenmeyer sempre em banho-maria fervente;
Aos 5 minutos repetir o passo anterior com os tubos 2A e 2B e assim por diante, aos 10,
20 e 40 minutos de reao, com os tubos 3A/3B, 4A/4B e 5A/5B, respectivamente;
Colocar ento, os tubos de 1A a 5A em banho-maria fervente por 3 minutos e observar
o aparecimento da colorao vermelho-tijolo.
35
Hidrlise enzimtica (Grupos 2 e 4)

Preparar os tubos de ensaio conforme item 1 do procedimento anterior;
Coletar saliva (mistura de 2 ou 3 doadores) diluda em 1:20 vezes com NaCl 5mM;
Colocar 25 ml da soluo de amido a 1% em um erlenmeyer de 100 ml. Deixar em
banho-maria a 37C por 10 minutos;
Adicionar soluo de amido do erlenmeyer 1 ml de saliva diluda;
2 mL de Reativo de Benedict
3 gotas de Lugol
Tubos A
Tubos B
25 mL de sol. de amido
Banho-maria
37C
2
Saliva 1:20 NaCl

1
Agitar e retirar imediatamente 1 ml da mistura, distribuindo 0,5 ml para um dos tubos

contendo lugol e 0,5 ml para um dos tubos contendo o Reagente de Benedict;
A partir daqui repetir o procedimento anterior do item 5 em diante.
Resultados
A - Hidrlise cida do amido: Interpretar os resultados de cada teste em funo da
evoluo das cores obtidas com o tempo;
36
B - Hidrlise enzimtica do amido: interpretar os resultados de cada teste em funo da

evoluo das cores com o tempo.
Se uma amostra de amido for tratada com -amilase por um longo perodo de tempo, o
teste de Benedict dar resultado positivo? Justifique sua resposta.
Quais a principal diferena entre as hidrlises cida e enzimtica?
Experimento 12 Caracterizao de carboidratos

Assunto: Carboidratos
Objetivos:
Entender o mecanismo de solubilizao do amido
Caracterizar o amido como um polissacardio
Caracterizar os monmeros do amido.
Entender a interao do amido com o iodo.
Materiais:
filtros de papel
soluo de amido preparada no Experimento 5
4 tubos de ensaio
3 pipetas graduadas
soluo de amido
cido sulfrico concentrado CUIDADO corrosivo
bquer pequeno
basto de vidro
Reativo de Molisch (-naftol)
Soluo de lugol
Soluo saturada de Sulfato de Amnio
lcool etlico absoluto
37
Procedimentos:
Reao de Molisch:
1. transferir 2 mL de soluo de amido para o tubo 1 (sem agitar; evitar transferir o

precipitado)
2. adicionar 3 gotas do reativo de Molisch e misturar bem
3. adicionar ao tubo 1, 2mL de cido sulfrico concentrado, fazendo-o escorrer pela
parede do tubo (CUIDADO: material corrosivo)
4. registrar o ocorrido.
Reao com o Iodo:
1. transferir 2 mL da soluo de amido para o tubo 2

2. Adicionar 5mL de gua destilada
3. adicionar uma gota de lugol
4. aquecer o tubo 2 a 90oC por 5min e observar alteraes
Reao de Precipitao (I)
1. transferir para o bquer pequeno 5 mL da soluo de amido (sem agitar).

38
2. adicionar 3 mL de soluo de Sulfato de Amnio ao bquer, agitando.

3. deixar o material em repouso por 10 minutos.
4. filtrar a soluo deixando o precipitado no bquer.
5. adicionar 1 gota de lugol ao filtrado e ao precipitado 6. Registrar o ocorrido.
5 mL
3 mL
(NH4)2SO4
lugol
Reao de precipitao (II)
1. transferir 1 mL da soluo de amido para o tubo de ensaio 3.

2. acrescentar 5 mL de lcool Etlico, agitando.
3. filtrar e acrescentar lugol ao filtrado e ao precipitado.
lugol
lugol
1 mL
etanol
5mL

Explicar por que o amido, apesar de sua polaridade, pode ser de difcil solubilizao em
algumas condies.
Explicar como o amido interage com o iodo (a nvel molecular) e como ocorreram as
mudanas de cor observadas.
39
Experimento 13 Extrao de Amido

Assunto: Carboidratos
Objetivos:
Caracterizar a estrutura do amido e sua forma de armazenagem.
Identificar a influncia de ambos na solubilizao deste, bem como o efeito temperatura.
Materiais:
1 batata mdia
1 faca
papel de filtro ou gaze
liquidificador
2 bqueres ( identificados como n 1 e n 2 ) de 200 mL
1 basto de vidro
gua fervente e gua fria
pipeta
Procedimento:
Liquidificar a batata sem casca com 100mL de gua destilada ( temp. ambiente ) e
transferi-la para o bquer 1, sem desprezar o lquido formado.
Batata macerada + 100 mL

de gua (temp. ambiente)
40
Filtrar o material do bquer 1 e transferir o filtrado para o bquer 2.
Deixar o bquer 2 em repouso por 10 minutos e verificar o surgimento de um precipitado

branco no fundo do bquer.
Limpar o bquer 1.
Ferver 150 mL de gua destilada no bquer 1.
Separar cuidadosamente o sobrenadante do precipitado do bquer 2.
Ao precipitado adicionar 50 mL da gua fria e agitar. Misturar gua do bquer 1 at a
formao de uma soluo opalescente. Observar e anotar.
H2O fria
H2O quente
1

Explicar os motivos para a precipitao e solubilizao do amido em gua com a
variao da temperatura.
Correlacionar tal propriedade com a estrutura da molcula de amido
Explicar como seria o comportamento de outros carboidratos em funo de sua
estrutura.
41
Experimento 14 Extrao de cidos nuclicos

Assunto: cidos nuclicos
Objetivos :
Entender como pode ser feita a separao de cidos nuclicos com base nas suas
caractersticas.
Verificar o comportamento de diferentes grupos de biomolculas em diferentes
solues.
Materiais:
Cebola descascada
Papel de filtro ou gaze
basto de vidro;
faca;
funil;
ralador ou picador ou mixer;
proveta graduada;
bquers de 250ml;
Cloreto de sdio, (10g - aprox. 2 colheres peq.);
Detergente (aprox. 120ml)
lcool etlico (gelado aprox. 10C);
gua destilada (aprox. 120ml)
Banho-maria (a 60C);
Cuba com gelo;
Procedimentos:
1. Pique a cebola em pedaos pequenos.
2. Coloque em um bquer o detergente, a gua e o cloreto de sdio, mexendo a mistura
at que os seus elementos se dissolvam completamente.
3. Adicione a esta soluo a cebola picada.
42
4. Coloque o bquer no banho-maria a 60C por 15 minutos, mexendo de vez em quando.

5. Findado esse tempo aplicar um choque trmico na soluo colocando o bquer no gelo
por 5 minutos.
6. Triturar a cebola com a soluo por 45 seg. e colocar no gelo por 15 minutos
7. Filtrar a mistura em gaze, sem deixar passar a espuma e recolhendo o filtrado em um
bquer limpo.
8. Adicione ao filtrado lcool etlico gelado, deixando-o escorrer pela parede do bquer;
9. Verifique a formao de duas fases e o surgimento de fios viscosos de DNA.
10. Mergulhe o basto de vidro e, com movimento circular em um nico sentido, entre as
duas fases e enrole os filamentos obtidos.
11. Registre o ocorrido.
H2O
120 mL
NaCl
10g detergente
120 mL
cebola picada
60C
15 min
etanol
gelado
gelo
5 min
gelo
15 min

Explicar a importncia de cada etapa do procedimento e o comportamento dos diversos
tipos de biomolculas encontradas.
Explicar por que o DNA pode ser visualizado.
Experimento 15 Caracterizao de Lipdios

Assunto: Lipdios
Objetivos :
Compreender as propriedades dos triacilgliceris e como elas influenciam sua
solubilizao.
43
Analisar a composio desses lipdios atravs de reaes de saponificao e

precipitao.
ovo (1 p/ cada grupo);
leo de cozinha (1 mL para cada grupo 10mL para a turma toda)
Filtro de papel.
3 bquers de 50 ml cada;
1 Placa de petri;
1 funil;
1 Basto de vidro;
Banho-maria;
c. Actico concentrado 5 mol/L (bancada do professor);
1 Tubo de ensaio com 12 mL de acetona - Tubo A;
1 Tubo de ensaio com 3mL de Hidrxido de potssio alcolico Tubo B;
1 Tubo de ensaio vazio
1 proveta (p/ medir 10 ml)
Procedimentos:
Extrao de lipdios:
1. Abrir o ovo separando o seu contedo em dois bqueres (clara em um, gema em outro)
sem romper a membrana que envolve a gema;
2. Retirar 10 ml da gema do ovo colocando-a em outro bquer (3) (no caso da gema,
evitar usar pipeta, utilizar a proveta)
3. A este recipiente adicionar 08 ml de acetona;
4. Com o basto de vidro homogenizar a soluo at a aglutinao do material;
5. Lavar o bquer 2 (que continha a gema)
6. Acomodar o filtro de papel no bquer 2 (funil) de modo a permitir a filtragem do material
do bquer 3;
7. Passar mais 4mL de acetona pelo filtro;
8. Transferir todo o material filtrado para a placa de petri;
44
9. Colocar a placa, j com o material no banho-maria at a evaporao da acetona;

10. Registrar o ocorrido ao material em cada uma das etapas do processo.
10 mL
acetona
8 mL
Saponificao:
1. Despejar o contedo do tubo B (KOH alc.) na placa de Petri
2. Retornar ao tubo B os lipdios extrados na etapa anterior (para melhor resultado,
utilizar 1mL de leo de cozinha). Utilizar um funil para tal transferncia;
3. Aquecer o tubo a aprox. 90oC por 30 minutos;
+ 1 mL
de leo
Anlise de caractersticas de sabes:

1. Adicionar 2mL de gua ao Tubo B (3 ml de hidrxido de potssio);
2. Transferir 3mL da soluo do Tubo B para o Tubo C;
3. Agitar o Tubo C ;
4. Registrar o ocorrido;
5. Adicionar 2mL de c. Actico concentrado ao Tubo C, gota a gota;
6. Registrar o ocorrido.
2 mL
H 2O
1 mL
c. actico
45

Explicar o processo de solubilizao dos lipdios.
Explicar o mecanismo da reao de saponificao.
Discutir como poderiam ser analisados os cidos graxos.
6. LITERATURA CONSULTADA
ALFENAS, A. C. Eletroforese de isoenzimas e protenas afins: fundamentos e
aplicaes em plantas e microorganismos. Viosa: U.F.V., 1998, 574p.
ALFENAS, A. C., PETERS, I., BRUNE, W., PASSADOR, G. C.
Eletroforese de
protenas e isozimas de fungos e essncias florestais. Viosa: U.F.V., 1991. 242p.

LAEMMILI, U. K. Cleavage of strutural proteins during assembly of the head of
bacteriophag T4. Nature, London, v.227, p.680-685, 1970.
LEHNINGER, A.L.; NELSON, D.L. e COX, M.M. Principles of Biochemistry. New York,
Worth Publishers, 1993. 1136p.
SAMBROOK, J.; FRITSCH & MANIATIS, E. F. T. Molecular Cloning. Cold Spring Harbor
Laboratory Press, 1989.
UNIVERSIDADE FEDERAL DE MINAS GERAIS, Apostila da Disciplina Bioqumica Celular
(s.n.t).
UNIVERSIDADE FEDERAL DE VIOSA (MG). Roteiros de Aulas Prticas de Bioqumica.
Departamento de qumica, (s.n.t).
UNIVERSIDADE FEDERAL DO PARAN. Bioqumica: aulas prticas, 2 Ed. Scientia et
Labor, Curitiba, 1988. 116p.
VILLELA, G.G.; BACILA, M. e TASTALDI, H. Tcnicas e Experimentos de Bioqumica.
Rio de janeiro, Guanabara Koogan, 1973. 503p.
Web sites recomendados
Sociedade brasileira de bioqumica e biologia molecular - http://www.sbbq.org.br/
46
Boa sade artigos sobre diabetes e outros assuntos relacionados a sade http://www.boasaude.com/lib/ShowDoc.cfm?LibDocID=3647&ReturnCatID=1764
Livro da FAO sobre leos e gorduras na nutrio humana http://www.fao.org/docrep/v4700e/V4700E00.htm#Contents
Tabela peridica dos elementos interativa - http://tech-two.mit.edu/Chemicool/
Artigos sobre qumica biolgica - http://www.jbc.org/
Base de dados sobre segurana de produtos qumicos orgnicos e inorgnicos http://www.inchem.org/
Unio internacional de bioqumica e biologia molecular, contendo informaes sobre grupos de
pesquisa, nomenclaturas em bioqumica, ps graduao, peridicos, etc. http://www.iubmb.unibe.ch/
Home page do Professor Ricardo Vieira, Farmacutico-Bioqumico, mestre em Cincias
Biolgicas: Gentica e Biologia Molecular, professor de Bioqumica na Universidade Federal do
Par UFPA. Apresenta itens sobre os principais tpicos do aprendizado em bioqumica
bsica http://www.geocities.com/CapeCanaveral/Launchpad/9071/
Home page do Professor Marcelo Tvora Mira da PUC Paran contendo o material utilizado
em aulas tericas e prticas de Bioqumica Bsica - segundo ano - e Bioqumica Clnica quinto ano - http://www.pucpr.br/disciplinas/bioquimica/Webio1.html
Rotas metablicas interativas, com mapas, descrio das enzimas, substratos coenzimas, etc http://wit.mcs.anl.gov/WIT2/
Rotas metablicas em bioqumica - http://www.gwu.edu/~mpb/index.html
Tpicos em bioqumica mdica e metablica com animaes http://www.auhs.edu/netbiochem/NetWelco.htm
Sociedade americana de bioqumica e biologia molecular - http://www.faseb.org/asbmb/
Unio internacional de qumica pura e aplicada IUPAC http://www.chem.qmw.ac.uk/iupac/index.html
Site diversificado sobre o ensino da bioqumica alimentado pela Unicamp e pela USP http://www.unicamp.br/ib/bioquimica/ensino/index.html
Site sobre fotossntese - http://www.alga.cz/links-t.htm

Roteiro Aulas Praticas - Bioquímica Básica

Enviado por

Dados do documento

Direitos autorais

Formatos disponíveis

Compartilhar este documento

Compartilhar ou incorporar documento

Opções de compartilhamento

Você considera este documento útil?

Este conteúdo é inapropriado?

Direitos autorais:

Formatos disponíveis

Roteiro Aulas Praticas - Bioquímica Básica

Enviado por

Direitos autorais:

Formatos disponíveis

UNIVERSIDADE ESTADUAL DE SANTA CRUZ - UESC

Departamento de Cincias Biolgicas - DCB

Profa. Dra. Ktia Regina Pimentel de Arajo Sgrillo

A presente apostila foi elaborada a partir de uma coletnea de roteiros de aulas

Este trabalho tem o objetivo de facilitar o acompanhamento da parte prtica da

Roteiro de Aulas Prticas de Bioqumica Bsica e Metablica Sgrillo, KRPA (2006)

Roteiro de Aulas Prticas de Bioqumica Bsica e Metablica Sgrillo, KRPA (2006)

1. INTRODUO AO TRABALHO EM LABORATRIO

Ser rigoroso na ateno, tcnica e disciplina, evitando desta forma, a ocorrncia de

No realizar experincias extras a ttulo de curiosidade, pois podem levar a reaes

Afim de alcanar a eficincia desejada, necessrio ler as prticas com antecedncia;

Colocar sobre a bancada apenas o material estritamente necessrio como lpis,

Conservar a bancada de trabalho sempre limpa, durante e ao trmino das aulas. Ao

Reagentes e respectivas pipetas estaro dispostas junto aos mesmos, em uma

Roteiro de Aulas Prticas de Bioqumica Bsica e Metablica Sgrillo, KRPA (2006)

Ao acender o bico de Bunsen, ter o cuidado de no abrir a torneira do gs antes que

obrigatrio o uso de jaleco, sapato fechado e calas compridas, portanto no

A pontualidade importante para a boa conduo dos trabalhos. Ser tolerado um

S deixar a aula quando terminado o trabalho ou, em qualquer caso, com a

2. Programa da Disciplina Bioqumica Bsica

Profa. Dra. Ktia Regina Pimentel de Arajo Sgrillo

Cursos: Cincias Biolgicas Bacharelado, Licenciatura, Ecologia e Biomedicina

Conhecer as principais formas de energia evolvidas no metabolismo celular, bem

Roteiro de Aulas Prticas de Bioqumica Bsica e Metablica Sgrillo, KRPA (2006)

Estudar e reconhecer as principais vias metablicas, incluindo metabolismo de

auxlio no processo de correo dos relatrios .

Roteiro de Aulas Prticas de Bioqumica Bsica e Metablica Sgrillo, KRPA (2006)

Hidrlise cida do amido

3. Como elaborar um RELATRIO

Professora: Dra. Katia Sgrillo

Roteiro de Aulas Prticas de Bioqumica Bsica e Metablica Sgrillo, KRPA (2006)

Modelo de uma Capa

topo e centrado deve-se apresentar o

Titulo do Relatrio - centrado com letras

Autores: nome componentes do Grupo

Relao de ttulos e indicao do nmero da pgina onde aparece.

Texto com o referencial terico sobre o tema desenvolvido no relatrio. Utilizar

Deve-se apresentar de forma clara e concisa o

Roteiro de Aulas Prticas de Bioqumica Bsica e Metablica Sgrillo, KRPA (2006)

Descrio completa de todos os materiais

Deve-se tambm apresentar de forma clara e objetiva

Neste item so apresentados todos os resultados encontrados no

Este item deve responder a cada um dos objetivos propostos.

Roteiro de Aulas Prticas de Bioqumica Bsica e Metablica Sgrillo, KRPA (2006)

Toda citao deve obedecer as Normas da ABNT

(um) Xxxxx (1999)

Apresentao MUITO IMPORTNTE. Voc sempre ser avaliado pelo que

4. Relao das principais vidrarias e materiais utilizados em laboratrio

Balo volumtrico com fundo chato e

Roteiro de Aulas Prticas de Bioqumica Bsica e Metablica Sgrillo, KRPA (2006)

Balo volumtrico com tampa

Roteiro de Aulas Prticas de Bioqumica Bsica e Metablica Sgrillo, KRPA (2006)

Funil de separao (coluna

Roteiro de Aulas Prticas de Bioqumica Bsica e Metablica Sgrillo, KRPA (2006)

Roteiro de Aulas Prticas de Bioqumica Bsica e Metablica Sgrillo, KRPA (2006)

Trip com tela de amianto e

5.1. Experimento 1 - Medidas de pH

Experimento 2 Utilizao de pH-metro

Roteiro de Aulas Prticas de Bioqumica Bsica e Metablica Sgrillo, KRPA (2006)

Transferir para um bquer com 30 mL de soluo de cido actico 0,1 M

Fazer a medio do pH. Repetir o procedimento (acrscimo de 3mL de NaOH) por 3

Construir uma curva com os dados obtidos (equivalentes de H adicionados x pH) .

Experimento 3 - cido carbnico

Roteiro de Aulas Prticas de Bioqumica Bsica e Metablica Sgrillo, KRPA (2006)