Antígenos Recombinantes

Produzidos através da tecnologia do DNA RECOMBINANTE utilizando-se da

combinação
de genes que são expressos em diferentes hospedeiros

CLONAGEM DE GENES:
Ocorre através da INSERÇÃO de fragmentos de DNA em VETORES (com capacidade
de
replicação em células hospedeiras)

Antígenos Recombinantes
Modelos de expressão da proteína recombinante:
BACTÉRIAS: E. coli (proteínas sem glicosilação). Usadas em ensaios sem a
necessidade de atividade biológica. Ideal para a produção de fragmentos proteícos

FUNGOS: P. pastoris (proteínas com glicosilação). Possuem alto teor de manose,

comprometendo a função efetora da proteína produzida

INSETOS: células de insetos (Sistema Baculovírus): gene é inserido em gene viral, que
por sua vez infectará a célula do inseto. Filogeneticamente diferentes dos mamíferos

MAMÍFEROS: rim de macaco, ovários de cobaio, mieloma de camundongos. As

células são mantidos em cultura. Ideal para a produção de proteínas mais
complexas

PLANTAS: ideais para proteínas industriais e farmacêuticas. Filogeneticamente

difererentes do mamíferos

Antígenos Recombinantes
Para utilização em Diagnóstico: aumenta a SENSIBILIDADE E
ESPECIFICIDADE dos testes, comparados aos antígenos naturais
EXEMPLOS:
• Produção de alérgenos
• Produção de marcadores tumorais
• Produção de anticorpos recombinantes
• Linhagens de células de Mieloma: excelentes para a produção
de anticorpos humanos e de camundongos. Possibilita a
produção de anticorpos QUIMÉRICOS (Ex.: região V do
camundongo e região C humana)
• Produção de hormônios (Ex.: insulina, EPO, GH)
• Produção de fatores de coagulação
• Produção de citocinas (Ex.: Interferon, CSF)
• Produção de vacinas

Ensaios Imunes Marcados

Introducao
• Possibilita a visualizacao de interacoes antigeno-anticorpo atraves de
testes altamente sensiveis
• Emprega-se moleculas marcadas com compostos quimicos
detectaveis e mensuraveis

CONJUGADOS:
duas substancias ligadas fortemente que mantem suas
propriedades funcionais

FORMAS DE REVELACAO:
_ Radiacao → radioisotopos
_ Fluorescencia→ fluorocromos
_ Luminescencia→substancias luminescentes (quimicas ou
biologicas)
_ Imunoenzimatico→enzimas com substratos cromogenicos
_ Quimioluminescencia→enzimas com substratos
Luminescentes

FORMAS DE REALIZACAO
• Fase solida: sistema heterogeneo
• Fase liquida: sistema homogeneo
• Totalmente automatizados
• Semi-automatizados

JEJUM
_ Nao tem muita importancia para Imunoensaios.
_ No entanto, concentracao excessiva de lipidios pode
interferir em teste de imunoprecipitacao e aglutinacao.
_ Evitar coletar amostras ate 2h apos refeicao (almoco, jantar)
– pos-prandial.
_ Recomendavel jejum padrao de 8h se for realizar tambem
outros exames.
_ Jejum de 4h, se somente for realizar exames de
imunoensaios.
_ Beber agua nao invalida o jejum.