UNIVERSIDADE DE SO PAULO FACULDADE DE CINCIAS FARMACUTICAS DEPARTAMENTO DE TECNOLOGIA BIOQUMICO-FARMACUTICA DISCIPLINA: ENZIMOLOGIA INDUSTRIAL II (FBT 0507) Prof. Dr.

Michele Vitolo

NOES SOBRE REATORES ENZIMTICOS 1. INTRODUO Define-se biorreator como sendo um reator qumico convencional adaptado para operar com biocatalisadores (clulas, enzimas, organelas). O reator enzimtico, portanto, um biorreator onde a reao catalisada por uma enzima. A primeira questo que surge ao se pensar em empregar um biorreator em um determinado processo avaliar a convenincia de se utilizar a enzima isolada no lugar da clula da qual a enzima foi obtida. Para tanto, devem ser considerados os aspectos: a) formao ou no de subprodutos pelas clulas; b) o produto de interesse ser ou no consumido pela clula; c) os custos relacionados com o isolamento, produo e, eventual imobilizao da enzima; d) a origem da enzima, se extracelular (mais barata e disponvel em grandes quantidades) ou intracelular (mais cara e disponvel em pequenas quantidades); e) exigncia ou no de algum cofator pela enzima. Caso se conclua que o uso da enzima em um biorreator seja adequado, ento devese avaliar a convenincia de se empregar a enzima na forma solvel ou imobilizada. Neste caso, os aspectos a serem considerados so: a) alterao do perfil cataltico da enzima aps a imobilizao; b) o tipo de processo no qual a enzima vai ser utilizada (por exemplo, no processo de amaciamento de carnes somente o uso da enzima na forma solvel tem importncia); c) a estabilidade operacional apresentada por ambas as formas da enzima; d) a origem da enzima, se extracelular (pode ser usada na forma solvel ou imobilizada) ou intracelular ( usada na forma imobilizada). 2. TIPOS DE REATORES ENZIMTICOS Os reatores enzimticos podem ser divididos em dois grandes grupos, a saber, descontnuos (incluindo a variante descontnuo-alimentado) e contnuos. Os contnuos, por sua vez, podem ser do tipo leito agitado ou fixo (Figura 1). Os fatores a serem considerados para escolher o tipo de reator so: a) modo de operao: descontnuo (mais barato e de multiuso) e contnuo ( mais caro e desenhado para um processo especfico); b) custo do catalisador frente ao custo total do processo; c) estabilidade da enzima ao longo do processo; d) requisitos operacionais, a saber, possibilitar pleno controle do pH e da temperatura, permitir operar em concentraes no inibitrias de substrato, ser adequado frente s caractersticas da matria-prima (por exemplo, o reator contnuo de leito fixo seria inadequado se a matria-prima a ser processada contiver slidos insolveis) e permitir a substituio do catalisador desgastado pelo uso sem interrupo do processo (por exemplo, o reator continuamente agitado muito verstil nesta situao).

3. REATOR DESCONTNUO Sejam as equaes fundamentais: v = (Vmax . S)/ (KM + S) (1) (1/v) = (KM/Vmax). (1/S) + (1/Vmax) (3) (2)

(Equao do balano material) : RA RS Rc = RE

Onde RA (vazo mssica de alimentao de substrato; Kg/h), RS (vazo mssica de retirada de substrato; Kg/h), RC (razo de consumo do substrato no reator, devido reao; Kg/h) e RE (razo de variao do substrato no reator; Kg/h). No reator descontnuo tem-se que RA = RS = 0. RA (Kg/h) So VB S M RS (Kg/h)

Sejam: m = massa inicial de substrato (Kg) M = massa total do sistema em reao (Kg) VB = volume da mistura em reao dentro do reator (L) x = (massa de S consumida / M) x = (massa de S consumida / m) Como RA=RS = 0, a Eq. 3 toma a forma: (6) - RC = RE Mas Rc = v.VB e RE = - M. (dx/dt) v.VB = M.dx/dt ou, t = M/VB . dx' / v
0 x'

(4) (5)

Substituindo na Eq. 6, tem-se:

(7)

(Equao de projeto do reator)

Igualando as Equaes (4) e (5) : M.dx= m.dx Substituindo a Eq. (8) na Eq. (7):
2

Logo,

dx= (m/M).dx

(8)

t = S0 . dx / v
0

(9)

Reescrevendo a Eq. 5 como segue: x = (S0 S)/S0 Substituindo as Eqs. (2) e (10) na (9):

S = S0 . ( 1- x )

(10)

t= Finalmente,

x x Km dx So + dx V max 0 (1 x) V max 0

t = (x.S0/Vmax) (KM/Vmax). Ln (1 x)

(11) (Equao de processo)

4. OPERAO COM REATORES ENZIMTICOS 4.1. Problemas operacionais Os principais problemas operacionais so: a) efeitos difusionais; b) retro-mistura; c) gradientes de temperatura e pH no interior do reator; d) variao da presso interna; e) queda do desempenho do reator com o tempo. A queda do desempenho do biorreator com o tempo pode ser devido perda de enzima pelo reator (desintegrao do suporte, solubilizao do suporte e/ou liberao da enzima do suporte), interao enzima/substrato deficiente (padro de fluxo irregular dentro do reator e/ou formao de pelcula sobre as partculas do suporte), perda da atividade enzimtica (envenenamento, desnaturao e/ou degradao microbiana), perda do produto (degradao microbiana) e estabelecimento de gradiente de pH no interior do biorreator. 4.2.Estratgia operacional Quando se opera com um biorreator enzimtico, procura-se sempre minimizar o custo global. Para tanto, usa-se a equao: Pt = F .dt
0 tp

(12)

Onde Pt (produo total), tp (tempo de produo) e F (vazo de alimentao). Para resolver a equao (12) preciso conhecer a relao entre a converso e o decaimento do poder cataltico da enzima existente no reator. Caso seja um decaimento exponencial dado pela equao (13): F = Fi .e(- t.Ln2/t*) (13)

Ento, substituindo a Eq. (13) na (12) e integrando, tem-se: Pt = (Fi.t* / Ln2) . [1 e(- tp.Ln2 / t*)] Onde t* o tempo de meia-vida da enzima imobilizada.
5. Referncias Bibliogrficas
5.1. GODFREY, T. & WEST, S. Industrial enzymology. 2nd Ed., New York, MacMillan Publishers Ltd., 1996. 5.2. LIMA, U.A., AQUARONE, E., BORZANI, W., SCHMIDELL, W. Biotecnologa Industrial: Processos Fermentativos e Enzimticos. So Paulo, SP, Ed. Edgard Blucher LTDA, 2001. vol. 3. 593p. 5.3. AQUARONE, E., BORZANI, W., SCHMIDELL, W., LIMA, U.A. Biotecnologa Industrial: Biotecnologa na Produo de Alimentos. So Paulo, SP, Ed. Edgard Blucher LTDA, 2001. vol. 4. 523p.

(14)

Figura 1. Tipos bsicos de biorreatores.

Tipos de reatores

Batelada

CSTR

Reator de estgios multiplos

Reator de leito fixo

Hollow fiber Reactor

Filtrado

Loop reciclo Cstr c/ ultrafiltro Reator de leito fixo Reator de leito fluidizado