Lipossomas em formulaes dermocosmticas

M. CHORILLI1 G.R. LEONARDI2 A.G. OLIVEIRA1 M.V. SCARPA1 1. Programa de Ps-graduao em Cincias Farmacuticas, Faculdade de Ciencias Farmacuticas (UNESP), Araraquara (SP). 2. Farmacutica, docente do Curso de Farmcia da Universidade Metodista de Piracicaba (Unimep), Piracicaba (SP). Autor responsvel M.V. Scarpa. E-mail: scarpamv@fcfar.unesp.br

INTRODUO Os lipossomas tm sido amplamente utilizados como veculo em frmulas dermocosmticas, em razo de que sua estrutura proporciona a encapsulao de substncias ativas hidroflicas e lipoflicas, visto serem constitudos por compostos anfiflicos (FENDLER, 1982; OLIVEIRA & SCARPA, 1992; OLIVEIRA, 1993; OLIVEIRA, SCARPA & LEITE, 1997). Compostos anfiflicos caracterizam-se por possuir em sua estrutura uma regio polar (inica ou no) e uma regio apolar, a qual pode ser representada por uma ou mais cadeias hidrocarbnicas com mais de oito grupos metilnicos (Figura 1).

Em concentrao acima da concentrao micelar crtica (CMC) e em presena de excesso de gua, tais compostos podem formar diferentes tipos de agregados supramoleculares, como micelas, monocamadas, multicamadas, microemulses e lipossomas (FENDLER, 1982; ISRAELACHVILI, 1991). Vrias molculas com caractersticas anfiflicas, contendo duas cadeias carbnicas, incluindo desde fosfolipdios naturais at compostos totalmente sintticos, podem ser utilizados como elementos estruturais de lipossomas (Figura 2) e, por sua vez, o mtodo de preparao pode ser desenhado de modo a controlar o tamanho e a morfologia dos agregados (LASIC & MARTIN, 1989).

Figura 1 - Estrutura qumica de um composto anfiflico.

Figura 2 - Estrutura qumica da Dimiristoilfosfatidilcolina (DMPC), anfiflico estrutural de lipossomas.

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Os lipossomas so constitudos de uma ou mais bicamadas concntricas, separadas por fases aquosas e englobando um compartimento aquoso interno (Figura 3). Esses sistemas organizam-se na presena de gua, sendo que, em parte, a orientao de bicamada determinada pela natureza dos grupos polares e das cadeias carbnicas (ISRAELACHVILI, 1991).

Dessa forma, a concentrao total de lipdios, o volume interno e as dimenses do lipossoma influenciam diretamente a encapsulao das substncias, independentemente de seu grau de polaridade. O ideal a utilizao de princpios ativos em concentraes que no excedam o limite de saturao dos mesmos no compartimento aquoso (para substncias polares) ou nas bicamadas lipdicas (para substncias apolares) (LIMA, 1995). LIPOSSOMAS EM DERMOCOMTICA Na rea dermocosmtica, os lipossomas vm sendo utilizados, tanto para aumentar a incorporao de substncias ativas s clulas, quanto como veculo para liberao controlada de princpios ativos (MAGDASSI, 1997; HAYWARD & SMITH, 1990; SUZUKI & SAKON, 1990). Eles tm sido empregados na preveno da queda de cabelos, promoo do crescimento capilar, desacelerao do processo de envelhecimento da pele, clareamento da pigmentao cutnea e preveno e tratamento da lipodistrofia ginide (DI SALVO, 1996; SUZUKI & SAKON, 1990). As principais vantagens do emprego de lipossomas para a administrao de agentes dermocosmticos so o fato de que podem transportar substncias hidro e lipossolvis; apresentam alta afinidade pelas membranas biolgicas, so constitudos de anfiflicos naturais biocompatveis e biodegradveis, alm de acentuarem a hidratao natural da pele e cabelo (CITERNESI & SCIACCHITANO, 1995). Devido sua estrutura de bicamada, semelhante estrutura das membranas celulares, eles so capazes de interagir profundamente com as clulas do organismo. Vrios tipos de interaes de lipossomas com clulas da corrente circulatria foram descritos, tais como transferncia ou troca de lipdios, endocitose, fuso, etc. (Figura 5).

Figura 3 - Estrutura de lipossomas unilamelar e multilamelar.

Segundo LASIC (1988), os lipossomas variam de tamanho e homogeneidade, conforme o mtodo de preparao, podendo ser preparados por simples disperso de um filme de anfiflico com agitao mecnica; sonicao, evaporao em fase reversa; extruso, etc. A maioria dos fosfolipdios no formam espontaneamente SUVs, sendo necessrio o fornecimento de energia ultra-snica (sonicao). Durante a sonicao, h formao de fragmentos de membranas, os quais apresentam uma parte hidrofbica que fica exposta ao meio aquoso polar. Quando h transferncia de um meio apolar para um meio aquoso, a entropia desfavorvel. Para venc-la, fragmentos hidrofbicos juntam-se a outros fragmentos hidrofbicos. A entropia desfavorvel da interao da parte hidrofbica dos fragmentos equivalente energia desfavorvel do empacotamento. Em virtude disso, os lipossomas apresentam uma superfcie de pequeno raio de curvatura. Quando a energia equilibrada, h formao de lipossomas de menor tamanho possvel (YEAGLE, 1987). De forma geral, a encapsulao e a reteno de substncias ativas incorporadas em lipossomas dependem essencialmente da natureza e da concentrao do fosfolipdio, concentrao da substncia, carga eltrica dos lipdios, fora inica do meio, concentrao de colesterol, tamanho da estrutura e condies de obteno dos lipossomas (PUISIEUX & BENITA, 1984). A localizao da substncia ativa na estrutura do lipossoma depende de seu coeficiente de partio entre as fases aquosa e lipdica, sendo que a quantidade mxima da substncia a ser incorporada dependente da solubilidade total em ambas as fases e do tipo de estrutura do lipossoma (Figura 4).

Figura 5 - Possveis mecanismos de interao dos lipossomas com clulas.

Figura 4 - (A) Lipossoma unilamelar contendo substncias ativas solubilizadas na fase aquosa e na bicamada lipdica. (B) Corte transversal de lipossoma unilamelar

A transferncia ou troca de fosfolipdios tem um efeito especial em aplicaes cosmticas, visto que os lipossomas podem alterar as propriedades da pele (rigidez, elasticidade) por fornecimento de fosfolipdios requeridos e outros componentes de membranas da pele (REDZINIAC & PERRIER, 1996). Alm disso, IMBERT et al. (1994) citam que os lipossomas aumentam as concentraes do princpio ativo nas camadas da pele (epiderme e derme), enquanto reduz a absoro sistmica. Para REDZINIAC & PERRIER (1996) provvel que o uso de produtos dermocosmticos que contm lipossomas tenha efeitos positivos na aparncia da pele, como aumento da hidratao cutnea. JI & JEON (1997), ao estudarem a estabilidade, eficcia e

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efeito de um creme contendo 5% de palmitato de retinil, observaram que quando o princpio ativo foi encapsulado em lipossomas, ele foi mais estvel e promoveu hidratao do estrato crneo por diminuio da perda de gua transepidermal. J SICILIANO (1985) observou em estudos da encapsulao de glicerol, uria e PCA-Na que a ligao de gua ao estrato crneo desidratado foi de 110% a 240% maior com os lipossomas do que com um produto controle no encapsulado. EGBARIA & WEINER (1991) citam como principais vantagens de formulaes tpicas de lipossomas: De forma semelhante s clulas, lipossomas podem armazenar substncias hidrossolveis em seu interior e substncias lipoflicas e anfiflicas em suas membranas, onde as substncias ativas ficam retidas para serem transferidas a outras membranas, como a pele; A maioria dos veculos convencionais no so eficazes para a administrao de substncias ativas atravs da pele devido a dificuldade de penetrao pela camada crnea. Todavia, os lipossomas proporcionam uma penetrao eficiente;

A incorporao em lipossomas de substncias ativas que penetram prontamente na pele resulta em uma diminuio de sua absoro sistmica comparada quela resultante da administrao tpica em veculos convencionais; A deposio dos lipossomas no estrato crneo resulta em efeito reservatrio substancial; Lipossomas so atxicos, biodegradveis e podem ser preparados em larga escala. A interao dos lipossomas com a pele ainda no est totalmente elucidada. LAUTENSCHLAGER (1990a) cita duas principais fases nesta interao. Inicialmente, os fosfolipdios ligam-se superficialmente queratina da camada crnea, recobrindo a pele com um filme lipdico, o qual reduz a perda de gua transepidermal e aumenta a funo barreira da pele. Todavia, a forte afinidade da queratina pelos lipossomas leva ruptura de algumas estruturas. Numa segunda fase, os fosfolipdios monomricos no ligados bicamada lipdica podem ser introduzidos nas camadas mais profundas da pele, podendo ser capturados pelas membranas celulares (Esquema I).

LIPOSSOMAS Superfcie da pele 4 Camada crnea 4 bicamadas lipdicas, depsito queratina

Epiderme

6 degradao

adf 4 4 membranas celulares glndulas sebceas

Derme

membranas celulares

6 fosfolipdios

6 metablitos

ESQUEMA I. Efeito dos lipossomas sobre a pele (LAUTENSCHLAGER, 1990a).

Em dermatologia, os lipossomas tm sido empregados principalmente para a aplicao de antimicticos, antiinflamatrios e retinides, aumentando a concentrao do frmaco na derme e epiderme (LAUTENSCHLAGER, 1990a). ARTMAN et al. (1990) propuseram o uso de lipossomas para promover a penetrao cutnea de anticorpos monoclonais em pele de porco in vivo, os quais apresentavam peso molecular de 20 a 60 kD. Depois de 40 minutos, foi possvel verificar a presena do complexo de anticorpos tanto na derme quanto na epiderme atravs de colorao especfica (mtodo APAAP). Todavia, o anticorpo isoladamente no penetrou a pele. Alm disso, AGARWAL & KATARO (2002) observaram aumento na reten-

o cutnea de nitrato de miconazol, antifngico que apresenta srio problema de penetrao na pele, aps incorporao do mesmo em lipossomas. A utilizao de lipossomas na preveno e tratamento da lipodistrofia ginide, conhecida popularmente como celulite, baseia-se no fato de que a diminuio seletiva e bem sucedida dos depsitos de clulas de gordura, via liberao tpica, exige o carreamento do princpio ativo, para que seja obtida concentrao mais elevada na rea de depsito adiposo onde se procura obter a liplise. Essa liberao pode, teoricamente, ser auxiliada pelo uso de lipossomas, visando ao na camada da hipoderme (DI SALVO, 1996). LESSER et al. (1999) testaram a eficincia de creme com

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cafena lipossomada na modificao de tecido adiposo subcutneo em 14 pacientes, atravs de medidas de fita e fotografias aps um perodo de 2 meses. Os autores observaram que o creme com cafena lipossomada reduziu significativamente a espessura da gordura subcutnea depois de 2 meses de utilizao do produto. Para o melhor entendimento das razes palas quais ocorre maior permeao e menor absoro de substncias encapsuladas em lipossomas, deve-se atentar para as propriedades da camada crnea, que apresenta clulas ricas em queratina, dispostas em uma matriz intercelular lipdica. Sendo assim, os lipossomas conseguem interagir com as interfaces lipdio-gua, penetrando a camada crnea. Os lipossomas distribuem-se entre as duas fases atravs do contato com uma interface. A frao que se associa fase lipdica sofre um rearranjo estrutural, formando uma monocamada lipdica orientada na interface (cabeas polares voltadas para a fase aquosa, cadeias hidrocarbnicas para a fase lipdica). A frao restante dos lipossomas permanece suspensa na fase aquosa (STRAUSS, 1989). Vrios estudos tm procurado mostrar os mecanismos para aumento da penetrao de substncias ativas aps aplicao tpica de princpios ativos em lipossomas. MEZEI & GULASEKHARAM (1982), aps aplicao de lipossomas contendo acetonido de triancinolona em coelhos, sugeriram que os lipossomas passariam intactos pelas camadas superiores da epiderme at a derme, onde ficariam retidos. Todavia, tal hiptese foi muito criticada por GANESAN et al. (1984), visto ser muito difcil vesculas lipdicas e grandes chegarem intactas s camadas mais profundas da pele. J NISHIHATA (1973) apud EGBARIA & WEINER (1991) sugere que o aumento na permeabilidade da camada crnea a diclofenaco encapsulado em lipossomas pode ser devido ao efeito tensoativo dos fosfolipdios, visto que a extrao dos lipdios da camada crnea poderia aumentar a permeabilidade. Ao estudar a estabilidade das substncias ativas encapsuladas em lipossomas interessante analisar detalhadamente a base dermocosmtica, visto que os fosfolipdios podem interagir com os componentes do veculo, prejudicando a estabilidade dos lipossomas. Lipossomas tem pequena utilidade em bases que contm altas concentraes de etanol, como os cosmticos que promovem crescimento capilar, porque as estruturas podem ser dissolvidas pelo lcool. Alm disso, a solubilizao ocorre quando lipossomas so adicionados a bases com altas concentraes de tensoativos (SUZUKI & SAKON, 1990). LAUTENSCHLAGER (1990b) e BURMEISTER et al. (1996) citam, entretanto, que surpreendentemente possvel adicionar de 10 a 20% de etanol e 5 a 10% de propilenoglicol sem alterao da estabilidade dos lipossomas. A presena de tensoativos em determinadas concentraes nos veculos comumente empregados nas formulaes tpicas, por sua vez, leva desorganizao da bicamada dos lipossomas, causando sua ruptura e a formao de micelas mistas (FADDA et al., 1998). FADDA et al. (1998) cita quatro principais passos na interao tensoativo lipossomas, conforme aumenta a concentrao do tensoativo. Inicialmente monmeros do tensoativo so incorporados na bicamada lipdica, aumentando as dimenses da vescula; os fosfolipdios so gradualmente solubilizados levando coexistncia de lipossomas e micelas mistas; posteriormente ocorre completa solubilizao dos fosfolipdios e, por fim, a presena de micelas mistas somente. BURMEISTER et al. (1996), por sua vez, aponta que a adio de 5% de lauril sulfato de sdio (LSS) em lipossomas unilamelares pode ser tolerada, sem desestabilizar os mesmos. Todavia, ao adicionar 20% de LSS em formulao ocorre desestabilizao dos lipossomas. RIBOSA et al. (1992) estudaram as modificaes fsicoqumicas de estruturas de lipossomas por interao com tensoativos anfotricos, catinicos e aninicos pela tcnica de espectrofo-

tometria de absoro, monitorando a solubilizao de lipossomas atravs da tcnica de espectroscopia de ressonncia magntica nuclear (RMN) de 31P. Os autores concluram que a espectrofotometria de absoro uma boa tcnica para estudo de estabilidade de preparaes de lipossomas, e a espectroscopia de RMN 31P uma excelente tcnica para monitorar o processo de solubilizao de lipossomas por tensoativos. Em relao capacidade solubilizante dos tensoativos estudados, chegou-se seguinte relao: anfotricos > catinicos > aninicos, sendo que a capacidade solubilizante dos tensoativos no inicos depende do valor do equilbrio hidrfilo-lipfilo (EHL). Assim, lipossomas no so estveis em veculos que contenham emulsificantes O/A ou A/O (LAUTENSCHLAGER, 1990b). Contudo, mesmo na ausncia de tensoativos, a incorporao de lipossomas a determinados veculos s pode ser efetuada sob determinadas condies, especialmente empregando anfiflicos estruturais sintticos, padronizando pH, osmolaridade e temperatura (CHARAF & HART, 1991). Segundo MAGDASSI (1997) os lipossomas em um sistema gel so estveis por aproximadamente 2 anos, mas quando misturados com componentes de emulses, como os leos e tensoativos, eles so estveis somente por meses ou semanas. Desse modo, conclui-se que a incorporao de substncias ativas em lipossomas no tarefa fcil, mas se respeitadas as condies ideais principalmente relacionadas composio do veculo, tem-se sistemas estveis que possibilitam veiculao de frmacos tanto hidro quanto lipoflicos, alm de permitirem maior permeao cutnea. REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS
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