INTRODUO Durante o sculo XVI, os exploradores europeus constataram que os nativos da bacia amaznica, na Amrica do Sul, utilizavam um veneno

em suas flechas, que provocava morte por paralisia dos msculos esquelticos. Esse veneno tornou-se posteriormente objeto de intensas investigaes. O curare, material ativo bruto, constituiu a base de alguns dos primeiros estudos cientficos em farmacologia. O princpio ativo do curare, a d-tubocurarina, e seus derivados sintticos tiveram enorme influncia na prtica da anestesia e da cirurgia e mostraram-se de grande utilidade para definir os mecanismos fisiolgicos neuromusculares normais. O mecanismo de transmisso neuromuscular inicia com a chegada de um impulso na terminao nervosa motora, influxo de clcio e liberao de acetilcolina, que difunde-se atravs da fenda sinptica at o receptor nicotnico localizado na placa motora terminal. O bloqueio da acetilcolina por antagonistas bloqueadores competitivos impede seu acesso ao receptor e impede que haja despolarizao. O bloqueio tambm pode ser produzido atravs de um excesso de agonistas despolarizantes, causando contrao desorganizada e generalizada de unidades motoras musculares (KATZUNG, 2003). O objetivo deste trabalho experimental foi demonstrar o bloqueio por competio e por despolarizao atravs da aplicao dos frmacos bloqueadores neuromusculares galamina e succinilcolina em Gallus gallus, bem como verificar a interao desses frmacos com o anticolinestersico neostigmina.

MATERIAL E MTODO A princpio, tomou-se quatro animais da espcie Gallus gallus, que tiveram seus pesos verificados e registrados. Em seguida, administrou-se no primeiro animal por via subcutnea uma dose de 5 mg/Kg de galamina. No segundo, administrou-se, novamente por via subcutnea, 0,5 mg/Kg de succinilcolina. No terceiro animal, foi administrada a mesma dose de galamina aplicada anteriormente, e em seguida administrou-se 0,2 mg/Kg do anticolinestersico neostigmina, via subcutnea. No quarto animal, foi repetida a mesma dose de succinilcolina aplicada anteriormente, e logo aps, a mesma dose anterior de neostigmina por via subcutnea. Os parmetros avaliados na experincia, aps a administrao dos frmacos foram o tipo de paralisia (flcida ou espstica), o tempo decorrido at a perda do equilbrio, ocorrncia ou no de bito e as modificaes dos resultados das duas ltimas cobaias, que receberam neostigmina, em relao s duas primeiras, que receberam apenas os bloqueadores. Ao final da experincia, os animais em que no houve bito foram sacrificados por sobredose de tiopental sdico por via intraperitoneal.

RESULTADOS QUADRO 1: REGISTRO DOS EFEITOS DA ADMINISTRAO SUBCUTNEA DE BLOQUEADORES NEUROMUSCULARES NO DESPOLARIZANTES (GALAMINA 5mg/kg) E DESPOLARIZANTES (SUCCINILCOLINA 0,5 mg/kg) E DA INTERAO COM O ANTICOLINESTERSICO NEOSTIGMINA 0,2 mg/kg EM Gallus gallus. TERESINA (PI), 2013 Parmetro Procedimento Galamina 5 mg/kg Succinilcolina 0,5 mg/kg Galamina 5mg/kg + Neostigmina 0,2 mg/kg Succinilcolina 0,5 mg/kg + Neostigmina 0,2 mg/kg + Contrao muscular + Tipo de paralisia Flcida Espstica Flcida diminuda Espstica aumentada Reverso do bloqueio __________ __________ Sim bito Sim Sim No

No

Sim

Fonte: Laboratrio de Farmacologia da UFPI. Alunos de Medicina, 2013.

TABELA 1: REGISTRO DO TEMPO DECORRIDO AT A PERDA DO EQUILBRIO DECORRENTE DA ADMINISTRAO DE GALAMINA 5 mg/kg, SUCCINILCOLINA 0,5 mg/kg E ASSOCIAO DESSES FRMACOS COM O ANTICOLINESTERSICO NEOSTIGMINA 0,2 mg/kg EM Gallus gallus. TERESINA (PI), 2013. Procedimento Galamina 5 mg/kg Succinilcolina 0,5 mg/kg Galamina 5mg/kg + Neostigmina 0,2 mg/kg Succinilcolina 0,5 mg/kg + Neostigmina 0,2 mg/kg 7
Fonte: Laboratrio de Farmacologia da UFPI. Alunos de Medicina, 2013.

Tempo at perda do equilbrio (segundos) 13 31 No perdeu equilbrio

DISCUSSO Em resposta a um potencial de ao do neurnio motor, a acetilcolina liberada da regio terminal da fibra nervosa. O neurotransmissor ento se difunde atravs da fenda sinptica e se liga ao receptor nicotnico na membrana ps-juncional (placa terminal) da fibra muscular. A ligao da ACh ao receptor nicotnico inicia o potencial da placa terminal nos msculos. A ligao da acetilcolina ao receptor produz aumento inespecfico na permeabilidade inica da membrana da placa terminal e consequente despolarizao da regio juncional da fibra muscular. Em condies normais, o potencial da placa terminal suficiente para deflagrar um potencial de ao na membrana da fibra muscular eletricamente excitvel, seguindo-se a contrao muscular. As drogas bloqueadoras neuromusculares interferem com a capacidade da acetilcolina de produzir despolarizao da placa terminal (BRUNTON, 2012). Aps administrao de galamina (5 mg/Kg) por via sub-cutnea em Gallus gallus, observou-se ausncia de contrao e presena de relaxamento muscular, respirao diminuda e paralisia flcida (QUADRO 1). Os agentes bloqueadores no-despolarizantes da juno neuromuscular, como a galamina, atuam ao antagonizar diretamente os receptores nicotnicos de ACh, impedindo, assim, a ligao da ACh endgena e a despolarizao subseqente das clulas musculares. Isso resulta em paralisia flcida, com caractersticas semelhantes quela da miastenia grave (GOLAN, 2009). Essas drogas no causam despolarizao da placa terminal. A inibio da transmisso neuromuscular por essas drogas essencialmente competitiva, com o frmaco bloqueador e a acetilcolina competindo por receptores na fibra muscular. Atravs da interferncia com a excitao nervosa do msculo sem produzirem por si prprio qualquer excitao, esses frmacos bloqueadores no-despolarizantes causam paralisia flcida, observada pela ausncia de contrao muscular e aumento do relaxamento muscular (BRUNTON, 2012). Sobre a diminuio da respirao, levando morte do animal, a musculatura respiratria, ou parte dela, em geral menos sensvel que outros msculos esquelticos, mas o princpio de atividade da musculatura respiratria pode ser inibido igualmente como a de outros grupos musculares. Conta-se, portanto, com a possibilidade de paralisia da musculatura respiratria, ocorrendo dficit de oxignio, ou seja, asfixia (KUSCHINSKY, 1969) Aps administrao de succinilcolina (0,5 mg/Kg) por via sub-cutnea em Gallus gallus, observou-se presena de contrao e ausncia do relaxamento muscular, aumento da respirao e paralisia esptica (QUADRO 1). A succinilcolina reage com o receptor

nicotnico, abrindo o canal e despolarizando a placa motora, a qual, por sua vez, se dissemina para membranas adjacentes e as despolariza, causando contrao desorganizada e generalizada de unidades motoras neuromusculares (bloqueio de fase I). Com a exposio contnua succinilcolina, a despolarizao da placa motora diminui, e a membrana se repolariza. Apesar dessa repolarizao, a membrana no pode ser novamente despolarizada com facilidade, isto , est dessensibilizada (bloqueio de fase II). As caractersticas do bloqueio de fase II tornam-se quase idnticas quelas de um bloqueio no-despolarizante (KATZUNG, 2003) Aps administrao de galamina (5 mg/Kg) por via sub-cutnea, seguida de administrao de neostigmina (0,2 mg/Kg) em Gallus gallus, foram observados diminuio da contrao e presena do relaxamento muscular, e presena de respirao. Observou-se paralisia flcida, contudo, em uma intensidade bem menor que na administrao apenas de galamina (QUADRO 1). Os inibidores da acetilcolinesterase, como a neostigmina, antagonizam os bloqueadores neuromusculares competitivos pois, como o mecanismo de ao destes consiste em bloquear a ligao da ACh ao seu receptor, a maior oferta de acetilcolina na fenda sinptica decorrente da inativao da acetilcolinesterase pela neostigmina permite a religao da acetilcolina a seu receptor (KATZUNG, 2003). Isso permite a sobrevivncia do animal. Aps administrao de succinilcolina (0,5 mg/Kg) por via sub-cutnea, seguida de administrao de neostigmina (0,2 mg/Kg) em Gallus gallus, foram observados aumento da contrao e ausncia de relaxamento muscular, e paralisia esptica (QUADRO 1), caractersticas de bloqueio de fase I. O bloqueio de fase I aumentado, e no revertido, por inibidores da colinesterase, pois o mecanismo de ao dos bloqueadores despolarizantes consiste em exatamente prolongar a despolarizao da membrana abrindo os canais da mesma forma que acontece com a ACh. Assim, a maior oferta de ACh decorrente da administrao de um anticolinestersico potencializa os efeitos do bloqueador despolarizante. (KATZUNG, 2003).

CONCLUSO Os bloqueadores neuromusculares so utilizados como adjuvantes na anestesia cirrgica para produzir relaxamento da musculatura esqueltica, principalmente da parede abdominal e facilitar a manipulao cirrgica. O conhecimento acerca das propriedades desses bloqueadores e as diferenas em seus efeitos permite a obteno de um perfil farmacocintico adequado, minimizando efeitos adversos. Essas propriedades ficaram claras na administrao de um bloqueador de cada tipo (competitivo e despolarizante) em Gallus gallus, bem como o uso do anticolinestersico neostigmina na reverso do efeito do bloqueador competitivo, mas no do despolarizante.

REFERNCIAS KATZUNG, B. G. Farmacologia Bsica e Clnica. 8 ed. Guanabara Koogan, 2003. BRUNTON LL; CHABNER BA; KNOLLMANN BC. As bases farmacolgicas da teraputica de Goodman & Gilman. 12. ed. So Paulo: McGraw-Hill, 2012 GOLAN, DE; TASHIJIAN AH; ARMSTRONG EJ, ARMSTRONG AW. Princpios de Farmacologia - A Base Fisiopatolgica da Farmacoterapia. 2 ed. Rio de Janeiro: Guanabara-Koogan, 2009 KUSCHINSKY, G.; LLLMANN. Manual de Farmacologa. 3 ed. Editorial Marin S/A, 1969.

UNIVERSIDADE FEDERAL DO PIAU CENTRO DE CINCIAS DA SADE DEPARTAMENTO DE BIOQUMICA E FARMACOLOGIA DISCIPLINA: FARMACOLOGIA PARA MEDICINA PROFESSOR: PAULO MARQUES DA SILVA CAVALCANTI

EFEITO DA ADMINISTRAO DOS BLOQUEADORES NEUROMUSCULARES GALAMINA E SUCCINILCOLINA E SUA INTERAO COM ANTICOLINESTERSICO NEOSTIGMINA EM Gallus gallus.

HUDSON VALENTE DE BARROS ALEXANDRE PEREIRA (201168764)

Teresina, janeiro de 2013