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FACULDADE DE VETERINRIA
2008
P312
Prefcio
O presente texto apresentado comunidade mdico-veterinria como contribuio para
aqueles profissionais que atuam na rea de Patologia Clnica. Ele nasceu como um texto de
apoio para os alunos da Especializao em Anlises Clnicas Veterinrias, curso de psgraduao lato sensu organizado pela Faculdade de Veterinria da Universidade Federal do Rio
Grande do Sul, desde 2006. Nele contribuem professores desta instituio, bem como docentes
e pesquisadores de outras Instituies de Ensino Superior ou de pesquisa do Brasil. A eles nosso
sincero agradecimento.
As reas que envolvem o presente texto introdutrio incluem hematologia, bioqumica
clnica, urinlise, mielograma, toxicologia, anlises micolgicas e helmintologia. Sendo um
material de apoio na especializao includo um captulo de metodologia de pesquisa que
orienta os alunos na elaborao de um projeto de pesquisa e de um documento de monografia ou
dissertao.
Agradecemos tambm aos alunos que tm participado nas diferentes edies desse curso
de especializao, aos bolsistas, estagirios, ps-graduandos e residentes do Laboratrio de
Anlises Clnicas Veterinrias por seu apoio nas aulas prticas e ao pessoal da Grfica da
UFRGS por sua dedicao na editorao e publicao desta obra.
Os editores
Autores colaboradores
Alexander Welker Biondo - MV, MSc, PhD
Departamento de Medicina Veterinria, Universidade Federal do Paran, Curitiba PR
Ana Vera Finardi Rodrigues - Mestre em Biblioteconomia
Faculdade de Veterinria, Universidade Federal do Rio Grande do Sul, Porto Alegre
Andrea Pires dos Santos - MV, MSc
Programa de Ps-Graduao em Cincias Veterinrias da Universidade Federal do Rio Grande
do Sul, Porto Alegre
Angela Patricia Medeiros Veiga - MV, MSc, DrSc
Pesquisadora visitante da Universidade de Quebec (Canad)
Csar Augusto M. Avancini - MV, MSc, DrSc
Faculdade de Veterinria, Universidade Federal do Rio Grande do Sul, Porto Alegre
Eliane Dallegrave - MV, MSc, DrSc
Centro de Informao Toxicolgica do Rio Grande do Sul CIT/RS
Flix H. Diaz Gonzlez - MV, MSc, DrSc
Faculdade de Veterinria, Universidade Federal do Rio Grande do Sul, Porto Alegre
Jos Maria Wiest - MV, Doutor em Higiene Veterinria
Instituto de Cincia e Tecnologia de Alimentos, Universidade Federal do Rio Grande do Sul,
Porto Alegre
Laerte Ferreiro - MV, MSc, DrSc
Faculdade de Veterinria, Universidade Federal do Rio Grande do Sul, Porto Alegre
Luciana de Almeida Lacerda - MV, MSc
Laboratrio de Anlises Clnicas Veterinrias, Universidade Federal do Rio Grande do Sul,
Porto Alegre
Mary Jane Tweedie de Mattos - MV, MSc, DrSc
Faculdade de Veterinria, Universidade Federal do Rio Grande do Sul, Porto Alegre
Ndia Almosny - MV, MSc, DrSc
Faculdade de Medicina Veterinria, Universidade Federal Fluminense, Niteri - RJ
Nayro Xavier de Alencar - MV, MSc, DrSc
Faculdade de Medicina Veterinria, Universidade Federal Fluminense, Niteri - RJ
Rita Pato Hoffmann - MV, MSc, DrSc
Universidade Federal do Rio Grande do Sul, Porto Alegre - RS
Snia Terezinha dos Anjos Lopes - MV, MSc, DrSc
Departamento de Clnica de Pequenos Animais, Universidade Federal de Santa Maria
Viviane Cristina Sebben Biloga, MSc
Centro de Informao Toxicolgica do Rio Grande do Sul CIT/RS
ndice
1. Hematologia clnica ......................................................................................................... 1
2. Avaliao da hemostasia e distrbios da coagulao .................................................... 58
3. Transfuso sangnea em veterinria ............................................................................ 73
4. Mielograma ................................................................................................................... 95
5. Urinlise ...................................................................................................................... 107
6. Bioqumica clnica ....................................................................................................... 140
7. Equilbrio cido-bsico em medicina veterinria ........................................................ 197
8. Toxicologia clnica: aspectos terico-prticos ............................................................ 206
9. Anlises clnicas micolgicas ...................................................................................... 290
10. Helmintologia: diagnstico e interpretao de resultados parasitolgicos ................. 318
11. Metodologia de pesquisa ............................................................................................. 325
1. HEMATOLOGIA CLNICA
Snia Terezinha dos Anjos Lopes
Alexander Welker Biondo
Andrea Pires dos Santos
Introduo
O sangue composto de uma parte lquida e outra celular. A parte lquida, denominada
plasma quando com anticoagulante, contm o fibrinognio e o soro quando sem anticoagulante,
contm os mais variados solutos orgnicos, como minerais, enzimas, hormnios, etc. A parte
celular composta pelos eritrcitos, leuccitos e trombcitos (plaquetas, nos mamferos, que
no so clulas).
A principal funo do sangue o transporte, quer de substncias essenciais para a vida das
clulas do corpo, tais como oxignio, dixido de carbono, nutrientes e hormnios, quer de
produtos oriundos do metabolismo, indesejveis ao organismo, os quais so levados aos rgos
de excreo.
O exame de sangue mais solicitado na rotina laboratorial o hemograma, devido sua
praticidade, economia e utilidade na prtica clnica. Est dividido em duas partes: o eritrograma
que compreende a contagem total de eritrcitos, dosagem de hemoglobina e hematcrito e o
leucograma.
O hemograma solicitado por vrias razes: como um procedimento de screening para
avaliar a sade do animal, como auxlio na avaliao do paciente ou do diagnstico, para
verificar a habilidade corporal s infeces e para avaliar o progresso de certas doenas. No
entanto, a histria e o exame fsico so essenciais para a interpretao dos dados hematolgicos
e outros testes laboratoriais que so objetos de investigao.
Resultados anormais em um hemograma so inespecficos, podendo estar associados com
vrias doenas ou condies que provoquem uma resposta similar. Infreqentemente, no
entanto, podem ser diagnsticos, como nas leucemias ou hemoparasitismos.
O volume sangneo normal nas espcies domsticas em torno de 6-10% do peso corpreo,
com grande variedade intra e interespcies. Entre os pequenos animais, o co possui
aproximadamente 10% e o gato 7% de volume sangneo em relao ao peso corpreo, portanto
a anemia no gato mais severa.
Hematopoiese
A hematopoiese ocorre extravascularmente na medula ssea dos mamferos, entretanto nas
aves a granulopoiese ocorre em locais extravasculares, mas a eritropoiese e os trombcitos so
produzidos intravascularmente.
Na vida embrionria a hematopoiese inicia-se no saco vitelino, estgio em que h o incio da
formao vascular. Com o desenvolvimento fetal o fgado, o bao e a medula ssea so os
maiores rgos hematopoiticos (Figura 1). Durante a segunda metade do desenvolvimento do
feto a medula ssea e os rgos linfides perifricos so os maiores locais de produo de
clulas sangneas.
120
100
80
60
40
20
0
0
10
20
30
40
50
60
70
dias ps concepo
saco vitelnico
fgado
bao
medula ssea
demais locais a medula vermelha hematopoieticamente ativa substituida pela medula amarela.
A atividade hematopoitica continua atravs da vida nos ossos chatos, como esterno, costelas,
vrtebras e crnio, e nas epfises de ossos longos como mero e fmur. A medula amarela,
quando h demanda eritrocitria, pode ser ativada novamente; no entanto na fase senil a medula
ssea amarela fibrosada e de difcil e vagarosa expanso.
Eritropoiese
A eritropoiese formada na medula ssea a partir de uma clula pluripotencial de origem
mesenquimal chamada clula tronco ou clula me que estimulada a proliferar e diferenciar-se
em burst de unidade formadora eritride (BUF-E) pela IL-3 e fator estimulante de colnia
granuloctica-monoctica na presena da eritropoietina (EPO). Esta diferenciao ocorre sob
influncia do microambiente medular local e por citocinas produzidas por macrfagos e
linfcitos T ativados. A proliferao e diferenciao da BUF-E para unidade formadora de
colnia eritride (UFC-E) resulta da presena destes mesmos fatores e pode ser potencializado
por fatores de crescimento adicional. A EPO o fator de crescimento primrio envolvido na
proliferao e diferenciao de UFC-E para rubriblasto, a primeira clula morfologicamente
reconhecvel das clulas eritrides. A seguir seguem as divises/maturaes em que sero
formados: pr-rubrcito, rubrcito, metarrubrcito, reticulcito e eritrcito.
A eritropoiese normal envolve um mnimo de quatro mitoses: uma na fase de rubriblasto,
outra no estgio de pr-rubrcito e duas no estgio de rubrcito basoflico. O rubrcito basoflico
matura-se em rubrcito policromtico, que se transformar em metarrubrcito. Ocasionalmente o
rubrcito policromtico pode se dividir. A denucleao do metarrubrcito leva formao de
reticulcito, o qual finalmente matura-se, dando origem ao eritrcito.
O processo de eritrognese que resulta na formao de eritrcitos maduros conhecido como
eritropoiese, levando em torno de sete a oito dias para se completar. O ncleo expulso
fagocitado por macrfagos locais. At a fase de metarrubrcito, as clulas estaro na medula
ssea, j o reticulcito pode ser encontrado no sangue perifrico em at 2%. Nas espcies
eqina, bovina, suna e caprina os reticulcitos no so encontrados no sangue em condies de
normalidade. A fase de proliferao, compreendida entre a clula pluripotencial at o
metarrubrcito leva de dois a trs dias, enquanto o restante consiste na fase de maturao,
levando em torno de cinco dias.
A nomenclatura mais aconselhvel para as clulas eritrides morfologicamente identificvel
: rubriblasto > pr-rubrcito > rubrcito basoflico > rubrcito policromtico >
metarrubrcito > reticulcito > eritrcito (Figura 2). Os eritrcitos so clulas encarregadas de
transportar oxignio dos pulmes aos tecidos e dixido de carbono no sentido inverso.
Reticulcitos
Os reticulcitos apresentam um grau varivel de dobras membranosas e invaginaes de
superfcie. Eles contm ribossomos, polirribossomos e mitocndrias, que os capacitam a
sintetizar mais de 20% do contedo final de hemoglobina. Estas estruturas contribuem para a
policromasia dos reticulcitos.
Aps colorao com corantes supravitais, como o novo azul de metileno ou azul cresil
brilhante, utilizado na contagem de reticulcitos, um arroxeado de ribossomos, mitocndrias e
outras organelas citoplasmticas aparecem nos reticulcitos como precipitados em forma de
cordes (reticulcitos agregados) ou esparsos (pontilhados).
Os reticulcitos podem permanecer na medula ssea por dois a trs dias antes de entrar no
sangue por diapedese atravs de clulas endoteliais que contornam os sinusides medulares. A
sua liberao para o sangue controlada por um nmero de fatores que agem em conjunto,
incluindo a concentrao de eritropoietina e deformabilidade capilar e carga de superfcie.
Variaes interespcies podem ocorrer em considerao ao nmero de reticulcitos liberado
no sangue sob condies fisiolgicas e patolgicas. Por exemplo, o eqino no libera
reticulcitos para o sangue perifrico, mesmo em anemia severa. Ces e gatos respondem
vigorosamente com reticulocitose no sangue durante anemia regenerativa, porm os ruminantes
geralmente tm uma leve resposta (Tabela 1).
Os reticulcitos maturam-se em eritrcitos 24-48 horas na circulao ou no bao, onde
podem ser seqestrados temporariamente. O processo de maturao envolve a perda de algumas
superfcies de membranas, receptores para transferrina e fibronectina, ribossomos e outras
organelas, obteno da concentrao normal de hemoglobina, organizao final do esqueleto
submembranoso, reduo do tamanho celular e mudana de forma para o aspecto bicncavo.
SANGUE
MEDULA SSEA
Multiplicao (2 a 3 dias)
Maturao (5 dias)
Fase de
Clula
24 a 48 horas
Metarrubrcitos
hemoglobinizao
pluripotencial
Metarrubrcito
Reticulcito
s
Rubrcito
Rubriblasto
policromtico
Metarrubrcito
Rubrcito
basoflico
Rubrcito
policromtico
Pr-rubrcito
Rubrcito
basoflico
Eritrcito
% de reticulcitos
(canino)
% de reticulcitos
(felino)
% de reticulcitos
(ruminantes e eqinos)
Normal
Leve
0-1,5
1-4
0-0,4
0,5-2,0
ausentes
1 sinal regenerativo
Moderada
Intensa
5-20
21-50
3,0-4,0
>50
Controle da eritropoiese
Eritropoietina
O estmulo fundamental para a eritropoiese a tenso tecidual de oxignio (PO2). A hipxia
tecidual desencadeia a produo de eritropoietina, um fator humoral especificamente
responsvel pela produo de eritrcitos. produzida pelos rins (clulas corticais endoteliais,
glomerulares e intersticiais) e em menor proporo pelo fgado (clulas de Kupffer, hepatcitos
e clulas endoteliais). O rim considerado a nica fonte de eritropoietina no co e o fgado o
stio predominante no feto.
A eritropoietina gerada pela ativao do eritropoietinognio, uma alfa-globulina, pelo fator
eritropoitico renal ou eritrogenina, ou pela ativao da proeritropoietina produzida no rim por
um fator plasmtico (Figura 3). A eritropoietina estimula a eritropoiese em vrias etapas, pela
induo da diferenciao de progenitores eritrides (UFC-E) at rubriblastos, estimulando a
mitose de clulas eritrides e reduzindo seu tempo de maturao e aumentando a liberao de
reticulcitos e eritrcitos jovens ao sangue perifrico.
Doses farmacolgicas
Tabela 2. Nmero, tamanho e meia-vida das hemcias nas diferentes espcies animais*.
Nmero
Dimetro
Meia-vida
Espcie
(milhes/l)
(m)
(dias)
Canino
6-8
7
120
Felino
5-10
5,8
70
Eqino
9-12
5,7
150
Bovino
5-10
5,5
160
Ovino
9-15
4,5
100
Caprino
8-18
4,0
100
Suno
5-8
6,0
65
* Duncan & Prasse (1982)
No estado de sade normal, o eritrcito deixa a circulao por duas vias, quais sejam:
fagocitose por macrfagos, que a principal e a lise intravascular, com liberao de
hemoglobina.
A deformabilidade importante na sobrevida da hemcia e depende da manuteno da sua
forma, fluidez normal interna da hemoglobina e propriedades visco-elsticas intrnsecas da
membrana. Qualquer mudana nestas caractersticas pode ativar a destruio fagocitria por
macrfagos, o que ocorre primariamente no bao e fgado, podendo tambm ocorrer na medula
ssea. Os macrfagos iniciam a fagocitose aps reconhecerem anticorpos IgG aderidos a
antgenos de membrana em eritrcitos danificados e/ou envelhecidos. A perda de eritrcitos
continuamente balanceada por uma liberao de reticulcitos ou clulas jovens da medula ssea
para o sangue perifrico. Neste caso, os reticulcitos so importantes em casos de anemia, para
que se classifiquem as anemias em regenerativa ou arregenerativa. Em casos de babesiose, no
quarto ou quinto dia estas clulas comeam a aparecer no sangue perifrico.
Morfologia dos eritrcitos
Tamanho
Normal: clula grande em caninos, sendo que os caprinos apresentam a menor hemcia das
espcies domsticas.
Anisocitose: a diferena de tamanho entre as hemcias. Quanto mais grave a anemia,
maior a ocorrn
Macrocitose: predominncia de hemcias grandes, geralmente jovens, recm-produzidas.
Presente em reticulocitose, metarrubrcitos, hipertireoidismo, deficincia de fatores de
multiplicao, determinadas raas, animais jovens.
Microcitose: predominncia de hemcias pequenas. Ocorre em anemias crnicas,
principalmente ferropriva. Quanto maior a quantidade, mais grave. fisiolgica em animais
idosos e algumas raas.
Forma
Normal: bicncava
Esfercitos: hemcias com formas esfricas, com intensa colorao pela perda de contedo
de membrana sem perda de hemoglobina devido a eritrofagocitose parcial dos anticorpos e/ ou
complemento dos eritrcitos pelos macrfagos do sistema fagocitrio mononuclear. Presente em
anemia hemoltica auto-imune primria ou induzida por drogas ou transfuso incompatvel.
Poiquilcitos: so alteraes na forma das hemcias. No bao, devido a microcirculao
esplnica, a hemcia muda de forma o que ocorre pela existncia de glicoprotenas na
membrana do eritrcito. Podem ser removidos prematuramente da circulao, levando a uma
anemia hemoltica. Existem vrios tipos de poiquilcitos:
Equincitos: so hemcias espiculadas, com vrias projees regulares. Ocorrem em
amostras velhas, uremia, excesso de EDTA, coagulao intravascular disseminada (CID).
Acantcitos: projees irregulares e variadas. Ocorrem em ces com hiperbilirrubinemia,
associados a hemangiossarcoma ou hemangioma esplnico e doena heptica difusa, shunts
porto-cava e dietas altas em colesterol.
Esquiscitos: fragmentos irregulares das hemcias. Ocorrem em falha renal, mielofibrose,
glomerulonefrite, deficincia crnica de ferro, fluxo sangneo turbulento.
Leptcitos: aumento do dimetro e reduo na espessura. Quando hipocrmicos ocorre por
produo reduzida de hemoglobina (anemia ferropriva); quando h policromasia, consistem em
reticulcitos (indica regenerao); quando h ortocromia, indicam anemia arregenerativa. O
mais comum a aparncia em alvo.
Dacricitos: hemcias em forma de gota. Aparecem em mielofibrose ou desordens
mieloproliferativas.
Crenao: hemcias em forma de engrenagem. Comum em bovinos, artefato de tcnica ou
desidratao em outras espcies.
Colorao
Normal: vermelho-claro ao microscpio.
Policromasia: algumas hemcias apresentam-se mais coradas que outras (RNA residual),
representando os reticulcitos. O aumento est associado a atividade eritropoitica aumentada e
resposta anemia regenerativa. A ocorrncia de algumas clulas policromticas comum no
co e no gato.
Hipocromia: hemcias com intensidade de colorao reduzida e rea central plida
aumentada, causada por insuficiente hemoglobina na clula, sendo a etiologia mais comum
deficincia de ferro.
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Hemoglobina
Trata-se de uma protena conjugada formada de 96% de protenas (globinas) e por um grupo
prosttico de colorao vermelha chamado heme (4%), o qual formado por ferro e
grupamentos porfirnicos.
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Policromasia
Reticulcito
Metarrubrcitos
Esfercito
Hipocromia
Rouleaux
Babesia canis
Crenao
Corpsculo de Heinz
Corp. Howell-Jolly
Anaplasma marginale
Haemobartonella canis
Corpsculo de Lentz
Microfilria
12
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Sistema Fagoctico
Mononuclear
SRE
Clulas
Tubulares
Renais
HEMOGLOBINA
Complexo
Hemoglobina
Haptoglobina
Metahemoglobina
Globina
SER
Fgado 70%
Medula 20%
Bao 8%
Ferro
hemossiderinria
Hematina
Bilirrubina
Complexo
Hematina-Hemopexina
Meta-Hemalbumina
FGADO
Ferro
Bilirrubina
Excretada
na bile
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ANEMIAS
A anemia definida como a presena de eritrcitos, concentrao de hemoglobina e/ou
hematcrito abaixo dos valores normais de referncia. Constitui-se raramente em uma doena
primria; geralmente o resultado de um processo (doena) generalizado. Portanto, necessrio
que se saiba a causa da anemia para que o tratamento racional seja empregado, pois ele no
direcionado, por si s, para a anemia, exceto como uma medida de emergncia.
Sinais clnicos
Os sinais clnicos da anemia resultam da reduzida capacidade de o sangue carrear oxignio e
de certos ajustes fisiolgicos para aumentar a eficincia da reduzida massa de eritrcitos
circulantes e reduzido trabalho do corao. Assim, o desenvolvimento de vrios sinais clnicos
depende do grau e da causa da anemia. Os mais comuns so dispnia, intolerncia ao exerccio,
palidez das mucosas, aumento da freqncia cardaca, algumas vezes acompanhada de
murmrios (sopro sistlico), aumento da freqncia respiratria e depresso. Na anemia
hemoltica aguda incluem-se ainda ictercia, hemoglobinemia, hemoglobinria e febre. Na perda
crnica de sangue, o organismo consegue manter a homeostase circulatria e em alguns casos,
mesmo com menos de 50% da hemoglobina normal, o animal pode no apresentar sinais
clnicos.
15
16
sp; imunomediada, como AHAI (anemia hemoltica auto-imune), lupus eritematoso, anemia
infecciosa eqina; defeitos eritrocticos intrnsecos, como deficincia da enzima piruvato
quinase.
Os achados laboratoriais presuntivos de anemia hemoltica so: resposta regenerativa, se o
tempo for suficiente para apresentar esta resposta da medula ssea; concentrao normal de
protena; leucocitose neutroflica com desvio esquerda, devido ao estmulo da medula ssea;
hiperbilirrubinemia, hemoglobinria e hemoglobinemia (na hemlise intravascular); colorao
vermelha do plasma; hiperbilirrubinemia (cor amarela do plasma) associada com uma
diminuio do VG sugere uma fagocitose aumentada dos eritrcitos. Observa-se a lmina,
buscando-se evidncias de parasitas eritrocitrios, eritrcitos fragmentados, esfercitos e
corpsculos de Heinz.
Classificao patofisiolgica das anemias
Perda sangunea ou anemias hemorrgicas
- Aguda
Procedimento cirrgico ou traumas;
Leses hemostticas, desordens da coagulao, deficincia de vitamina K (dicumarol,
warfarin), CID.
- Crnica
Leses gastrointestinais (neoplasias, lceras, parasitismo);
Neoplasias com sangramento cavitrio (hemangiossarcoma no co);
Trombocitopenias;
Parasitas (carrapatos, pulgas, parasitas gastrointestinais).
Destruio acelerada dos eritrcitos
1. Parasitas sanguneos, agentes virais, bacterianos e riqutsias - podem ter um
componente imuno-mediado - Anasplasma, Babesia, Haemobartonella ,Ehrlichia,
Clostridium spp, Cytauxzoon felis, Leptospira, mastite estafiloccica, Anemia
Infecciosa Eqina.
2. Drogas e qumicos - muitos so oxidantes fenotiazina; acetominofen, em gatos e ces;
azul de metileno, em gatos e ces; vitamina K, em ces; cobre, chumbo, zinco
3. Plantas txicas (muitas so oxidantes) e acidentes ofdicos
4. Doenas metablicas - falha heptica, no cavalo, hiperesplenismo, toro esplnica, no
co.
5. Defeitos intraeritrocitrios - deficincia da piruvato quinase em ces e gatos, deficincia
da fosfofruto quinase, em ces, deficincia da glicose-6-fosfatase dehidrogenase, no
cavalo.
6. Destruio imunomediada do eritrcito - AHAI, primariamente em ces, isoeritrlise
neonatal, primariamente em cavalos e gatos, lupus eritematoso, primariamente em ces,
reao transfusional, penicilina e cefalosporina.
7. Outras causas - intoxicao por gua em bovinos, administrao de fludo hipotnico
em grandes animais.
Diminuio da produo dos eritrcitos
Eritropoiese reduzida
Doena renal crnica (falta de eritropoietina)
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Deficincia de protenas, minerais (Fe, Cu, Co, Se), vitaminas (A, E, B12, cido flico,
niacina, piridoxina, tiamina, cido ascrbico).
Anemia por doena inflamatria
Inflamao e neoplasia
Deficincias endcrinas
Hipotireoidismo, hipoadrenocorticismo, hipoandrogenismo.
Dano citotxico da medula
Drogas anticncer citotxica, toxicidade por estrgeno, cloranfenicol, em gatos,
usualmente no anmicos, fenilbutazona, trimetroprim-sulfadiazina, radiao em ces.
Agentes infecciosos
Ehrlichia spp, em ces, cavalos e gatos, FeLV, tricostrongiloides, parasitas no
sugadores de sangue nos ruminantes
Mielopatias
Leucemias mielgenas, leucemias linfides, mieloma mltiplo, linfoma metasttico e
mastocitoma
Imunomediada
Aplasia seletiva eritride em ces.
Eritropoiese ineficaz
Desordem da sntese do heme
Deficincia do ferro, cobre e piridoxina.
Desordem da sntese do cido nuclico
Deficincia de folato e vitamina B12
Classificao morfolgica das anemias
As anemias podem ser classificadas com base nos ndices eritrocitrios, levando-se em
considerao o tamanho e a morfologia das hemcias. Os termos usados para o tamanho so:
normoctica (normal), macroctica (maior) ou microctica (pequena) e para as propriedades
tintoriais da hemoglobina normocrmica (normal) e hipocrmica (diminuda). Os ndices
eritrocitrios so: volume corpuscular mdio (VCM) e a concentrao de hemoglobina
corpuscular mdia (CHCM). Esta classificao pode ser confirmada pelo exame microscpico
da populao eritrocitria. Esta classificao no especfica para a causa da anemia, mas til
quanto ao mecanismo patofisiolgico o que ajuda na seleo do protocolo de tratamento.
A anemia macroctica normocrmica em humanos caracterstica de deficincia de
vitamina B12 e cido flico e em bovinos, na deficincia de cobalto ou pastagem rica em
molibdnio. A anemia resulta de uma assincronia da eritropoiese causada por alteraes na
maturao no estgio de pr-rubrcito a rubrcito basoflico, produzindo eritrcitos
megaloblsticos na medula ssea. Em ces poodle os eritrcitos macrocticos normocrmicos
no so acompanhados por anemia.
A anemia macroctica hipocrmica tipicamente observada durante remisso em
perda aguda de sangue ou hemlise aguda. O grau de macrocitose e hipocromia depende da
severidade da anemia, associada intensidade da resposta eritropoitica medular, o que leva a
reticulocitose sangnea. A reticulocitose em resposta anemia aumenta o VCM e reduz o
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CHCM. Entretanto, muitos dias devem passar desde a manifestao da anemia antes da
alterao da morfologia eritroctica se mostrar aparente.
A anemia normoctica normocrmica ocorre pela depresso seletiva da eritropoiese
em doenas crnicas como infeces, doena renal crnica, malignidades e certas desordens
endcrinas. Nestes casos, a resposta de reticulcitos est ausente ou insignificante. Os esforos
devem ser direcionados mais para o diagnstico da doena primria do que para o tratamento da
anemia, uma vez que o uso de hematnicos est contra-indicado, pois o tecido eritropoitico no
pode fazer uso destas substncias.
A anemia microctica hipocrmica resulta de deficincia de ferro ou incapacidade de
utilizao do ferro para a sntese da hemoglobina. Alteraes na morfologia dos eritrcitos
dependem da durao e severidade da anemia. Na anemia microctica a diviso celular normal,
mas a sntese da hemoglobina demorada com anormalidades na sntese do heme e da globina,
ocorrendo uma ou mais divises extras, durante o desenvolvimento das clulas eritrides,
resultando na formao de micrcitos. Outras causas de anemia microctica so: doenas
inflamatrias, devido aos mediadores inflamatrios que, direta ou indiretamente, inibem a
eritropoiese, reduzem o ferro no soro e encurtam a expanso de vida dos eritrcitos; deficincia
de piridoxina; deficincia de cobre, o que resulta em uma deficincia funcional de ferro devido
mobilizao inadequada dos estoques de ferro, causada pela diminuio na concentrao de
ceruloplasmina circulante, a maior protena que contm ferro no plasma; toxicidade por drogas
(cloranfenicol) ou qumicos (chumbo), pois estes agentes bloqueiam a sntese do heme,
formando eritrcitos microcticos. Nas Tabelas 3 e 4 esto representadas as classificaes
morfolgicas dos eritrcitos e nas Tabelas 5 e 6 a frmula e exemplos.
Cor (CHCM)
Normocrmica
Hipocrmica
(Hipercrmica)
VCM
Es (fl)
60 - 77
39 - 55
40 - 60
34 - 58
19
CHCM (g%)
32 - 36
30 - 36
30 - 36
31 - 37
VG (%) x 10
hemcias (milhes/mm3)
CHCM
Caractersticas
Hipocrmica
Sempre regenerativas
Perda aguda de sangue/anemia hemoltica aguda
Normocrmica
Microctica
Hipocrmica
Microctica
Normocrmica
Doena crnica
Normocrmica
Macroctica
Normoctica
20
Arregenerativa
Doena renal crnica
Neoplasias crnicas e/ou metastticas
Leucemias
Erlichiose:destroem cel. pluripotencial
Panleucopenia felina
Hiperestrogenismo
Hipoadrenocorticismo
Hipoandrogenismo
Linfossarcoma
- Hemlise
Hemoparasitas:tristeza parasitria
Anemia auto-imune
Reao transfusional
Policitemia
o aumento do nmero de eritrcitos circulantes acima dos valores normais. Est
classificada em policitemia absoluta (primria ou secundria) e relativa (Figura 7). Quando o
hematcrito alcana 60%, suspeita-se de policitemia absoluta ou relativa. Quando alcana 70%,
suspeita-se de policitemia primria.
21
Policitemia absoluta
Ocorre uma elevao do nmero de eritrcitos circulantes, causado pelo aumento da massa
total de eritrcitos, mas a concentrao de protena plasmtica est normal. A cianose e a
congesto caractersticas das membranas mucosas so causadas pelo fluxo lento de sangue
desoxigenado que exorbitantemente rico em clulas vermelhas. O excesso de massa de
eritrcitos aumenta a viscosidade sangnea e a resistncia vascular pulmonar e diminui o dbito
cardaco. Estas anormalidades levam a um fluxo sangneo reduzido, oxigenao tecidual
reduzida, distrbios neurolgicos e aumento do risco de trombose. A viscosidade sangnea e o
grau de transporte de oxignio alteram-se desproporcionalmente com aumentos do hematcrito
acima de 50%. A policitemia absoluta est classificada em primria e secundria.
A policitemia primria, verdadeira ou Vera consiste em uma desordem mieloproliferativa,
caracterizada por uma proliferao anormal das clulas eritrides, dos granulcitos e dos
megacaricitos, levando a um aumento absoluto da massa de eritrcitos, contagem de leuccitos
e de plaquetas.
A policitemia secundria ocorre pelo aumento da taxa de eritropoietina, no
acompanhada de aumento nas contagens de leuccitos e plaquetas nem de reduo significante
no volume plasmtico. Os nveis de eritropoietina aumentam como uma resposta fisiolgica
compensatria pelos rins hipxia tecidual, ou como resultado de produo autnoma
independente de suprimento de oxignio tecidual. vista em animais levados a grandes
altitudes, doena cardaca e pulmonar crnica, tetralogia de Fallot (provoca mistura dos sangues
arterial e venoso, diminuindo a oxigenao dos tecidos). Pode ocorrer tambm devido
elaborao inadequada de eritropoietina, encontrada em alguns casos de hidronefrose, cistos
renais, tumores secretantes de eritropoietina (nefroma embrionrio) e certas doenas endcrinas
como o hiperadrenocorticismo.
Policitemia relativa
comumente encontrada nos animais como resultado da reduo do volume plasmtico
causado pela desidratao. O consumo hdrico, por animais enfermos, geralmente inadequado
para manter o contedo de gua corporal normal. Doenas acompanhadas por excessiva perda
de gua (diarria, vmito, poliria) podem rapidamente produzir desidratao. A
hemoconcentrao aumenta o hematcrito e a protena plasmtica devido diminuio do
volume de plasma.
A policitemia relativa ocorre em animais facilmente excitveis, como certas raas de ces e
cavalos, tendo como resultado o aumento da massa de eritrcitos na circulao devido
22
contrao esplnica. A contrao esplnica tambm pode ocorrer em condies de severa dor,
como por exemplo, na sndrome clica.
Volume de Plasma
NORMAL
VG (%)
NORMAL
ANEMIA
Relativa
DIMINUDO
Absoluta
DIMINUDO
POLICITEMIA
Relativa
AUMENTADO
Absoluta
AUMENTADO
Figura 7. Mudanas relativas ocasionadas na massa do eritrcito e volume de plasma nas anemias e
policitemias (JAIN, 1993).
Tabela 8. Interpretao clnica associada ao volume globular (VG) e as protenas plasmticas totais (PT).
VG
PT
Interpretao
N
aumento; = diminulo
=Hipoproteinemia
N N= normal;
Desidratao
23
Introduo
O hemograma o exame realizado com o sangue perifrico colhido com anticoagulante, com
o objetivo de obter-se informaes a cerca do que est se passando no organismo do animal no
momento da colheita. Ele composto de duas partes: o Eritrograma e o Leucograma. Na
solicitao do exame necessitamos observar os seguintes aspectos:
Identificao: rtulo no frasco de colheita, ficha contendo nome do proprietrio, data, espcie
animal, raa, sexo, idade, hora da colheita, diagnstico provisrio, tratamento, histria clnica
resumida, nome, assinatura e CRMV do requisitante e do examinador.
Eritrograma
O eritrograma compreende:
O nmero total de hemcias/ l, concentrao de hemoglobina (g/dl), volume globular (%),
VCM (fl), CHCM (%), protenas plasmticas (g/dl), reticulcitos (%), metarrubrcitos/100
leuccitos. Observaes no esfregao sangneo: anisocitose, policromasia, hemoparasitas, etc.
Valores normais
H que se entender que os valores de tabela ou de referncia so frutos da mdia de exames
realizados numa populao clinicamente sadia e, portanto obedecem a uma curva normal de
distribuio. Deste modo pode existir um pequeno percentual de animais da populao sadia
com resultados laboratoriais prximos aos extremos (border line), ou fora deles; e o inverso
tambm, ou seja, animais doentes com valores dentro da faixa de referncia. Por isso estes
exames devem ser interpretados clinicamente (Figura 8).
cu
rvan
o
rm
al d
ed
istrib
u
io
9
8
7
6
5
%
4
3
2
1
0
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 0 10 20 30 40 50 50
valo
res
24
Plasma
cor anormal
Leuccitos
Hemcias
Modificaes eritrocitrias
Tamanho
Anisocitose: diferena patolgica de tamanho das hemcias. Quanto mais grave a anemia,
maior a ocorrncia de anisocitose.
Macrocitose: predominncia de hemcias grandes. Geralmente hemcias jovens, recm
produzidas. Ocorrem nas reticulocitose, hipertireoidismo, deficincia de fatores de
25
multiplicao (vit. B12, cido flico e cobalto), em ces da raa poodle, mas sem anemia e ces
jovens.
Microcitose: predominncia de hemcias pequenas. Ocorre em anemia crnica,
principalmente ferropriva. fisiolgica em animais idosos e ces da raa Akita.
Forma
Normal: bicncava
Poiquilcitos: so alteraes morfolgicas indistintas da forma das hemcias.
Concentrao de hemoglobina
O mtodo mais usado para determinar a concentrao de hemoglobina o cianometahemoglobina, onde a margem de erro est prxima dos 5%. Para que esta tcnica seja realizada,
necessrio um fotocolormetro ou espectrofotmetro. Aparelhos automticos medem
diretamente a densidade tica da oxi-hemoglobina, sendo bastante utilizados. Outro mtodo
existente o da hematina cida, bastante simples e barato, porm a margem de erro est dentro
dos 12%. Para a sua realizao utiliza-se o hemoglobinmetro de Sahli. A hemoglobina
corresponde, em mdia a 1/3 do hematcrito.
Contagem de eritrcitos
A contagem de eritrcitos pode ser feita por hemocitmetro, mas tem valor limitado em
virtude da grande possibilidade de erros. A contagem por contadores automticos permite
valores mais exatos.
Fatores que afetam o hematcrito, hemoglobina e contagem de eritrcitos.
Alteraes na massa do eritrcito afetam os trs parmetros.
A anemia produz valores baixos que podem ser desproporcionais se o tamanho celular
e/ou o contedo de hemoglobina tambm estiverem alterados;
A policitemia absoluta produz valores altos;
A contrao esplnica produz valores altos e especialmente comum em cavalos
excitados.
26
Anticoagulantes
EDTA (Etileno diamino tetra acetato de sdio ou de potssio)
Modo de ao: reage atravs de seus dois radicais cidos com clcio plasmtico, formando
um quelato com os elementos alcalino-terrosos, tornando-se insolvel.
Uso: Recomendado para a rotina hematolgica porque no interfere na morfologia celular,
preservando-a por at 24 horas quando refrigerado adequadamente. pouco solvel, e o sal de
potssio o mais solvel e mais caro. A diluio realizada a 10%, e toma-se 0,1ml de EDTA
para 5ml de sangue.
Fluoreto de sdio
Modo de ao: quelante de clcio, com a formao de sais insolveis.
27
Uso: Como impede a gliclise sangunea, realizada in vitro principalmente pelos eritrcitos,
indicado para determinao da glicose. H produto comercial pronto para uso, na medida de 1
gota para cada 3ml de sangue.
Heparina
Modo de ao: atividade como inibidor da trombina e tromboplastina
Uso: Alguns bioqumicos. Como interfere na colorao do esfregao sanguneo, no
recomendado para hemograma. A diluio de 0,1ml de soluo a 1% para no coagular 5,0ml
de sangue. A heparina retarda a coagulao do sangue por apenas 8 horas.
Citrato de sdio
Modo de ao: quelante de clcio, com a formao de sais insolveis.
Uso: Provas de coagulao (tempo de protrombina, tempo de tromboplastina parcial
ativada). Seu emprego se faz em solues 1,34 g%, na proporo de 10%, ou seja, 0,5ml para
4,5ml de sangue.
Preparo do esfregao e colorao
Esfregao
Preparar duas lminas novas e desengorduradas, sendo uma com os cantos arredondados.
Homogeneizar o sangue no frasco de colheita fechado, por inverso, e colocar com o capilar do microhematcrito, antes de fech-lo, uma gota de sangue na lmina.
Colocar a outra lmina (recortada) a frente da gota de sangue, num ngulo de 45. Fazer um ligeiro
movimento para trs at o sangue espalhar -se pela lmina.
Com um movimento uniforme, para frente, fazer esta lmina deslizar sobre a outra. O sangue se
estender por sobre a lmina, formando o esfregao (Figura 9).
Agitar a lmina at secar o esfregao completamente e identific-lo com lpis na borda mais espessa
do esfregao.
Gota
de sangue
Aproximar
30 - 40
Adeso
Avanar
28
Corantes
Leishman
Colocar 20 gotas do corante e deixar agir por 3 minutos.
Acrescentar 20 a 25 gotas de gua destilada tamponada (pH 7,2).
Deixar agir por 15 minutos.
Lavar em gua corrente e secar.
Preparo
Diluir 1,5 g de Eosina-Azul de Metileno segundo Leishmann em 1 litro de metanol.
Colocar em banho-maria a 37 C por 24 horas.Acondicionar em frasco mbar.
Maturar o corante deixando-o em repouso por 1 semana, ao abrigo da luz.
Corrigir o pH, se necessrio, para 7,6
Filtrar e usar.
Pantico
Soluo comercial pronta para uso com trs corantes em srie
L
H
H
H
29
Clculo
rea central: 1mm2
Volume da rea central: 1/10mm2
Profundidade: 1/10mm
Volume de cada quadrado mdio central: 1/250mm 2
Nmeros de quadrados mdios centrais contados: 5
Diluio da pipeta: 1/200
Portanto:___5___ x ___1___ = ___5___ = ___1____
250
200
50.000
10.000
Ou seja, o fator 10.000.
N total de hemcias contadas x 10.000 = n total de hemcias/ l
Determinao de hemoglobina
Mtodo da cianometahemoglobina
Princpio
Diluio do sangue em soluo contendo cianeto de potssio e ferrocianeto de potssio (Reativo de
Drabkin), que convertem a hemoglobina em cianometahemoglobina.
Soluo de Drabkin
Ferrocianeto de Potssio
Cianeto de Potssio
20 mg
50 mg
30
LEUCCITOS
Os leuccitos ou glbulos brancos so clulas produzidas na medula ssea que fazem
parte do sangue juntamente com os eritrcitos e as plaquetas.
Origem
Os leuccitos so produzidos na medula ssea a partir de uma clula pluripotencial, tambm
chamada clula tronco ou stem cell que vai repopular a medula ssea. A capacidade
proliferativa da clula tronco depende de estmulos apropriados de hormnios estimuladores da
leucopoiese.
Classificao dos leuccitos
Os leuccitos ou glbulos brancos so classificados como polimorfonucleares e
mononucleares. Os leuccitos polimorfonucleares tm ncleo condensado e segmentado. So
clulas comumente referidas como granulcitos porque elas contm grande nmero de grnulos
citoplasmticos que so lisossomas, contendo enzimas hidrolticas, agentes antibacterianos e
outros compostos. Os grnulos presentes no citoplasma dos neutrfilos so grnulos primrios e
secundrios. Os grnulos primrios so sintetizados no citoplasma do mieloblasto ou no prmielcito precoce. Os grnulos secundrios aparecem no estgio de mielcitos.Trs tipos de
granulcitos (neutrfilos, eosinfilos e basfilos) so identificados pelas caractersticas de
colorao de seus grnulos secundrios.
Os leuccitos mononucleares no sangue so classificados como linfcitos e moncitos. Estas
clulas no so destitudas de grnulos, mas certamente tm menor nmero de grnulos
citoplasmticos que os granulcitos.
Granulopoiese e granulocintica
Granulopoiese
A granulopoiese ou granulocitopoiese envolve a produo de neutrfilos, eosinfilos e
basfilos, atravs de um processo ordenado. O tradicional conceito de granulopoiese determina
a formao de neutrfilos, eosinfilos e basfilos com origem em um precursor celular, o prmielcito. Recentes estudos, no entanto, tm demonstrado que cada um destes trs tipos de
granulcitos possui um pr-mielcito jovem especfico e com caractersticas ultra-estruturais e
citoqumicas prprias.
Na medula ssea, sob estmulos apropriados, a clula pluripotencial origina clulas
progenitoras confinadas que produzem os vrios granulcitos. Esta clula com potencial de
produo de neutrfilos e moncitos conhecida como Unidade Formadora de Colnia
31
CLULA PLURIPOTENCIAL
UFC-GM
UFC-Eos
UFC-G
Mieloblasto
Mieloblasto
Pr-mielcito
Pr-mielcito
Mielcito Eosinfilo
Mielcito Neutrfilo
Metamielcito Eosinfilo
Metamielcito Neutrfilo
Bastonete Eosinfilo
Bastonete Neutrfilo
EOSINFILO
NEUTRFILO
Figura 10. Esquema da granulopoiese.
UFC-Bas
Mieloblasto
Pr-mielcito
Mielcito Basfilo
Metamielcito Basfilo
Bastonete Basfilo
BASFILO
Regulao da granulopoiese
O nmero de leuccitos especficos que adentram e deixam o sangue mantido constante
mediante diversos mecanismos e condies (Tabela 11).
Granulocintica
a informao quantitativa sobre a produo de granulcitos na medula ssea e suas fases
intravascular e tecidual. Em estudos dos granulcitos, no sangue e medula ssea, marcados com
radioistopos, foi possvel determinar os compartimentos dos neutrfilos em humanos. Tambm
alguns estudos foram realizados em animais.
32
Estimuladores
UFC-GM, UFC-G
Granulopoietina
Linfocinas (IL-3)
Eosinofilopoietina
Basofilopoietina
Linfopoiese
Interleucina - Interferon
Inibidores
Fator Inibidor de Colnia
Lactoferrina, Transferrinas
Linfocinas PGE1 e PGE2
Fator esplnico
Ferro em diferentes quantias
Corticide
Tecido
Reserva
Multiplicao
Maturao
Mieloblasto
Metamielcito
Pr-mielcito
Armazenamento
Marginal
Bastonete
Tecidual
(5 a 6 horas)
Bastonete
Segmentado
Circulante
Mielcito
Neutrfilos
Liberao de neutrfilos da medula ssea para o sangue
Neutrfilos maturos normalmente emergem corrente sangunea em torno de 3 a 5 dias no
co, 4 a 6 dias no bovino e 7-11 dias no homem. O compartimento de reserva geralmente
33
34
35
Anormalidades morfolgica
As anormalidades morfolgicas nos neutrfilos geralmente incluem aberraes de
maturao, tamanho da clula, forma nuclear, caractersticas dos grnulos e citoplasma. Estas
anormalidades so chamadas como mudanas txicas. So vistas em pacientes com severa
infeco bacteriana, septicemia, condio inflamatria aguda e extensiva destruio tecidual. Os
efeitos txicos durante a granulopoiese so refletidos como basofilia citoplasmtica, presena de
grnulos txicos e corpsculo de Dhle, ncleo hipersegmentado e a produo de neutrfilos
gigantes e bizarros. A basofilia o resultado da reteno de ribossomos e RER. Os grnulos
36
txicos tornam-se visveis nos neutrfilos mielcitos txicos e entre os neutrfilos maduros pela
reteno do cido mucopolissacardeo.
Corpsculo de Dhle so incluses citoplasmticas que resultam da agregao lamelar do
RER. So mais comuns em gatos do que em outras espcies animais.
Eosinfilos
Local de produo
O maior stio de produo de eosinfilos a medula ssea, embora tambm ocorra em menor
grau em outros tecidos como bao, timo e linfonodos cervicais. Em geral, os eosinfilos so
produzidos em torno de 2 a 6 dias e adentram no sangue perifrico aproximadamente 2 dias
aps. Sua meia vida intravascular de 4 a 6 horas em humanos e menos de 1 hora nos ces; a
seguir entram tecidualmente e normalmente no retornam para a circulao sangunea.
A entrada de eosinfilos para os tecidos influenciada por quimiotticos locais e especficos.
Vrias substncias so quimiotticas para eosinfilos, incluindo complexos antgeno-anticorpo
envolvendo primariamente IgE, produtos de mastcitos como histamina e fator quimiottico a
eosinfilos (FQE), componentes da ativao do complemento (C5a, C567), metablitos do
cido aracdnico, linfocinas, fibrinognio e fibrina, e alguns produtos resultantes do dano
tecidual.
Os eosinfilos tm participao na regulao alrgica e resposta aguda inflamatria e pode
induzir dano tecidual. Podem ainda participar na coagulao e fibrinlise atravs da ativao do
fator XII e plasminognio.
Principais funes dos eosinfilos
37
Funo
Protenas catinicas
(PBM e PCE)
Fator de Hageman
Histaminase
Quininase
Enzimas lisossomais
Peroxidase
Fagocitose
Fosfolipase C
Ativador de plasminognio
Prostaglandinas PGE1 e 2
Zinco
38
Moncitos
Cintica dos moncitos
O moncito um descendente da clula progenitora bipotencial, a UFC - GM, que pode
produzir tanto neutrfilos como moncitos. A diferenciao de UFC - GM em UFC - M e a
proliferao dos precursores monocticos (monoblastos e pr-moncitos) em moncitos so
influenciados por um fator especfico chamado fator estimulador de colnia monoctica (FEC M) (Figura 12).
IgG
Cel. B
Mastcito
Parasito
Estimulao
antignica
Interao
Antignica
IgE
Cel.T
Eosinfilo
FEG-Eos
FEC-Eos
Liberao de
substncias bioativas
como histaminas
Eosinofilia tecidual
Linfocinas
FEC-N
Eosinofilia sangunea
Eosinofilopoiese
Medula ssea
Figura 11. Esquema da ao parasiticida dos eosinfilos (Jain, 1993).
39
CLULA
PLURIPOTENCIAL
UFC - GM
UFC - M
Fagocitose
Endotoxinas
Imuno-complexos
Macrfagos
Monoblasto
Pr - moncito
Fator Estim. colnia-GM
Fator Estim. colnia-M
Moncito
Macrfagos Teciduais
Figura 12. Esquema da formao de moncitos.
Interleucina 1
Fator de Necrose
Tumoral
(TNF)
Clulas endoteliais
Fibroblastos
40
Linfcitos
Linfopoiese e cintica linfocitria
Os linfcitos representam um grupo heterogneo de clulas tanto morfolgica como
funcionalmente. Eles so a base no desencadeamento e execuo da resposta imune. Os
linfcitos so produzidos na medula ssea, nos rgos linfides como o timo, linfonodos e bao,
alm dos tecidos linfides viscerais, que incluem as placas de Peyer, tonsilas e apndices. A
medula ssea nos mamferos o maior rgo linfopoitico; no entanto exceto no suprimento de
precursores linfides para colonizao dos rgos linfides perifricos, a linfopoiese na medula
ssea e timo ineficaz.
Durante a vida intra-uterina clula tronco pluripotencial indiferenciada origina-se primeiro
do saco vitelno e depois do fgado, bao e medula ssea fetais. Sob influncia de apropriado
micro-ambiente e outros estmulos, estes progenitores linfides originados na medula ssea
continuamente colonizam os rgos linfides primrios - Bursa de Fabrcius nas aves ou medula
ssea nos mamferos, e o timo. Nestes stios duas populaes funcionais e fenotipicamente
distintas de precursores linfocticos desenvolvem-se. Estas clulas ento migram para os rgos
linfides secundrios ou perifricos (como linfonodos e bao), onde se tornam
preferencialmente localizadas em pores tpicas e do incio, em resposta a estmulo antignico
apropriado, proliferao de subsries imunocompetentes de linfcitos T ou B.
Os linfcitos que suprem o sangue so produzidos de maneira passo a passo, primariamente
nos linfonodos e, em extenso limitada, em outros tecidos linfides. Linfoblastos, pr-linfcitos
e linfcitos podem ser identificados morfologicamente, mas sua linhagem T e B no. O tempo
de produo dos linfcitos estimada entre 6 e 8 horas, e em alguns casos podem levar menos
de 2 horas. O nmero de mitoses envolvido varia com o tipo celular (6 a 8 h para clulas T e 2 a
3 h para B). A linfopoiese (Figura 13) estimulada por exposio antignica e deprimida por
corticides, hormnios sexuais e m nutrio.
Subpopulaes de linfcitos
A populao total de clulas B e T no sangue da maioria das espcies animais est em torno
de 70% de clulas T, 20% de clulas B e o restante provavelmente composto por clulas
nulas, de funo e origem desconhecidas. Dentre os tecidos linfides, as clulas T
predominam no timo, linfonodos e ducto linftico torcico; as clulas B predominam na medula
ssea e bao. No sangue e vrios tecidos a maior parte das clulas T so de vida longa, e a
maioria dos linfcitos B so de vida curta; as clulas T e B de memria so de vida longa. A
mdia de meia vida dos linfcitos humanos de vida longa estimada em 4,3 anos e em torno de
41
1% sobrevivem at 20 anos. A sobrevida de linfcitos de vida curta se situa entre poucas horas a
5 dias.
Recirculao de linfcitos
Em contraste com os granulcitos, em torno de 70% dos linfcitos do sangue perifrico que
saem atravs do tecido retornam ao sistema vascular para recirculao. Esta propriedade dos
linfcitos torna difcil e imprecisa a estimativa da meia vida dos linfcitos. A populao
recirculante demora em torno de 15 a 48 horas para recircular e consiste primariamente de
linfcitos T e linfcitos B, exceto os de memria que so considerados no circulantes.
O fenmeno de recirculao de suma importncia biolgica porque proporciona um
mecanismo de distribuio generalizada de clulas linfides ocupadas com a resposta imune
sistmica. Como resultado, um grande nmero de linfcitos podem ser expostos a um antgeno
depositado localmente no tecido. Estas clulas antigenicamente expostas podem ser
transportadas por vrios lugares no corpo para propagar e montar uma vigorosa resposta imune.
Os linfcitos recirculam do bao, timo e medula ssea para o sangue perifrico da vo aos
tecidos, dos tecidos linfa, linfonodos e assim sucessivamente.
Funes
Os linfcitos T e B exercem diferentes funes e possuem receptores de membrana para o
reconhecimento de antgeno. Existe uma terceira populao de linfcitos que no expressam
receptores de antgenos em suas membranas, as clulas exterminadoras naturais (Natural Killer),
so derivadas da medula ssea e so funcionalmente distintas das clulas T e B pela sua
habilidade de lisar certas linhagens de clulas tumorais sem prvia sensibilizao. Do ponto de
vista morfolgico estas clulas so linfcitos grandes granulares. Estes linfcitos apresentam
grnulos no seu citoplasma que constituem os lisossomas primrios e aparelho de Golgi bem
desenvolvidos.
Imunidade humoral
Imunidade celular
Regulao imune
Atividade citotxica
Vigilncia imune e Secreo de linfocinas
42
Clula Pr - B
Clula B Imatura
Clula B Matura
Plasmcito
Clula Pr - T
Clula T Matura
Figura 13. Esquema da linfopoiese.
Basfilos
So clulas pouco estudadas porque so raras no sangue e medula ssea. Os basfilos so
freqentemente comparados com os mastcitos por causa de algumas similaridades
morfolgicas e funcionais. A produo dos basfilos na medula ssea semelhante aos demais
granulcitos, no entanto os mastcitos so produzidos de clulas mesenquimais indiferenciadas
no tecido conectivo da medula ssea.
Os basfilos e os mastcitos contm vrias substncias de importncias biolgicas, e podem
sintetizar inmeras substncias imunolgicas e no imunolgicas. A composio dos grnulos
varia entre espcies. Seus grnulos so particularmente ricos em histamina, heparina e em
algumas espcies serotonina. Quando estimulado antigenicamente sintetiza importantes fatores
como Fator ativador plaquetrio (FAP), 0substncias de reao anafilaxia (SRA) e
tromboxano
A2
43
Fibrinognio
O fibrinognio uma protena de fase aguda produzida no fgado. Nos processos
inflamatrios de vrias causas , a concentrao do fibrognio pode elevar-se entre 3-4 dias e
permanecer alto por vrios dias ou semanas como nas doenas crnicas. Geralmente a resposta
do fibrinognio inicia-se com a resposta dos leuccitos, persistindo por mais tempo que os
leuccitos.
Em bovinos o fibrinognio um importante parmetro a ser avaliado, porque pode ser a
nica indicao de uma resposta inflamatria ativa. Nas doenas que ocorrem excessivo
depsito de fibrinognio tecidual sua concentrao no sangue pode no estar elevada, ficando
entre os valores de referncia ou at mesmo abaixo destes valores.
Contagem total de leuccitos
A contagem total de leuccitos varia com a espcie animal e tambm influenciada pela
idade. Esta alta ao nascimento e diminui gradualmente para atingir valores de adulto entre 2 a
12 meses de idade. A contagem total de leuccitos avaliada pelo aumento, acima dos valores
de referncia, como leucocitose ou diminuio leucopenia. Os sufixos citose e filia denotam um
aumento na contagem de leuccitos, entretanto, penia indica uma diminuio comparada com os
valores de referncia. As leucocitoses so muito mais comuns que as leucopenias e no so um
sinal de mau prognsticos como a leucopenia.
Tipos de leucocitose
Fisiolgica
Reativa
Proliferativa (autnoma)
As mudanas na contagem total de leuccitos podem envolver anormalidades de produo,
liberao, distribuio intravascular, vida mdia e ingresso tecidual de vrios leuccitos. Por
exemplo: os neutrfilos circulantes esto num equilbrio dinmico com os neutrfilos no
compartimento marginal e reserva da medula ssea. Uma demanda funcional imediata de
neutrfilos feita primeiro pela mobilizao das clulas do pool marginal e circulante, seguida
pela reserva da medula ssea e finalmente pelo aumento da granulopoiese e liberao acelerada.
O aumento de liberao de clulas observado no sangue perifrico como um desvio
44
Leucocitose fisiolgica
A leucocitose fisiolgica ocorre como uma resposta a adrenalina, no qual o compartimento
marginal de neutrfilos e/ou linfcitos so mobilizados para a circulao geral, aumentando a
contagem total de leuccitos e o nmero de neutrfilo absoluto e/ou linfcitos. Assim uma
neutrofilia ou linfocitose transitria, ou ambas, podem se manifestar. Esta condio comum
em animais jovens e geralmente desencadeada por distrbios emocional e fsico. Raramente o
nmero de moncitos e eosinfilos aumentam.
Leucocitose induzida por corticosteride ou estresse a leucocitose pode ocorrer em
condio de sade ou nas doenas, sendo assim ela pode ser: fisiolgica ou patolgica. A
liberao de glicocorticide endgeno ou administrado terapeuticamente causa considerveis
mudanas hematolgicas. Tipicamente produz leucocitose causada por neutrofilia, usualmente
sem desvio esquerda, linfopenia e eosinopenia. Monocitose ocorre no co. A neutrofilia ocorre
pela mobilizao dos neutrfilos segmentados do compartimento de reserva da medula ssea e
pela diminuio da diapedese das clulas para os tecidos. A linfopenia ocorre principalmente
pela linflise dos linfcitos T sensveis a esterides no sangue e tecido linfide, ou pela
marginao e seqestro dos linfcitos nos locais extravasculares. Eosinopenia ocorre
principalmente pela diminuio da sada destas clulas da medula ssea, devido interferncia
com o efeito quimiottico da histamina nos eosinfilos. A causa de monocitose permanece
desconhecida. A resposta dos basfilos, ao corticide, similar a dos eosinfilos, mas no
reconhecida usualmente, porque os basfilos so raros no sangue.
Leucocitose reativa
A leucocitose reativa ocorre em resposta s doenas. Certas doenas podem induzir uma
resposta especfica, mas usualmente um padro geral de resposta dos leuccitos evidente,
indiferente da doena. A leucocitose reativa pode ocorrer com ou sem desvio esquerda. O grau
de leucocitose varia com as espcies e usualmente relativa para a relao neutrfilos:
linfcitos (N:L). Animais com alta relao N:L, como o co e o gato, apresentam uma maior
resposta que animais com baixa relao N:L como eqinos e bovinos.
Uma resposta induzida por corticosteride ou, menos comumente, por adrenalina pode
ocorrer simultaneamente com uma leucocitose reativa. Diferenciao da leucocitose reativa da
leucocitose por corticosteride ou epinefrina. A leucocitose considerada reativa quando um ou
mais dos seguintes itens so encontrados:
45
Leucocitose proliferativa
A leucocitose proliferativa ou autnoma resulta de uma mudana neoplstica da clula
pluripotencial. As formas mais comuns de leucemias so: linfocticas, mielgenas,
mielomonoctica e monoctica. As leucemias eosinoflicas e basoflicas so raras. importante
observar que muitas vezes o cncer das clulas sangneas no manifesta uma leucocitose,
portanto, a contagem de leuccitos pode estar normal ou mesmo diminuda e a populao de
clulas na medula ssea pode estar alterada com pequena ou nenhuma evidncia no sangue
perifrico.
Leucopenia
A leucopenia, em muitos animais, ocorre por neutropenia e linfopenia. A neutropenia causa
primria de leucopenia em animais com uma relao N:L maior que 1, e linfopenia em animais
que a relao N:L menor que 1. A neutropenia mais comum em infeces bacterianas e
linfopenia em infeces virais. Severas infeces bacterianas e virais podem causar leucopenia
associada com neutropenia e linfopenia, ou ambas e tambm podem reduzir o nmero de outros
leuccitos. Salmonelose no cavalo e mastitis coliformes so exemplos clssicos de infeco
bacteriana que leva a neutropenia e linfopenia e a infeco do vrus da panleucopenia felina
um exemplo de infeco viral. O retorno dos linfcitos e dos eosinfilos no sangue,
determinado por hemograma sequenciais, indica convalescncia e geralmente um sinal de bom
prognstico.
A leucopenia ocorre freqentemente durante o estgio precoce da cinomose e seguida de
leucocitose por uma infeco bacteriana secundria. Uma marcada linfopenia um quadro
consistente na cinomose, devido a atrofia e necrose do tecido linfide, produzido pelo vrus.
Ambos os linfcitos T e B esto reduzidos e a imunidade humoral e celular esto suprimidas em
animais sobreviventes. Em ces sobreviventes, o nmero de linfcitos no sangue permanecem
baixos por um perodo prolongado.
As neutropenias podem ser agrupadas:
46
Produo ineficaz
Neutropenia imuno-mediada, resultando em sobrevivncia reduzida. Ocorre em animais, mas
no tem sido bem documentada. No h desvio para a esquerda e o compartimento de estoque
na medula ssea aparece normal no exame.
Leucograma
Introduo
O leucograma a parte do hemograma que pesquisa alteraes quantitativas e/ou
morfolgicas das sries leucocitrias. Ele composto da contagem global de leuccitos e suas
contagens diferenciais, consideradas em seu nmero relativo e absoluto. Alm disso, devem ser
registradas as observaes sobre as alteraes morfolgicas encontradas no esfregao
sanguneo; defeitos funcionais somente sero notados quando acompanhados de morfologia
alterada.
47
Gato: 1,8:1
Cavalo: 1,5:1
Bovino: 0,5: 1
Suino: 0,7:1
Contagem corrigida =
Causas de Leucopenia
Infeco bacteriana
Efeito de esterides
Desordens linfoproliferativas
Peritonite Infecciosa Felina
Necrose tecidual
Severa inflamao
Prenhez e pario em cadelas
Desordens mieloproliferativas
Hipertireoidismo em gatos
48
Doenas virais
Severa infeco bacteriana
Anafilaxia
Drogas e qumicos txicos
Neoplasias de Medula ssea
Toxemias endgenas: uremia
Toxoplasmose / Ehrlichiose /
Leishmaniose
Diferencial de Leuccitos
O diferencial leucocitrio realizado no exame do esfregao sanguneo, em contagem
percentual de 100 leuccitos. H uma tcnica padro para a confeco do esfregao sanguneo e
leitura diferencial leucocitria, para que se tenha homogeneidade dos resultados. Um esfregao
com sangue mal homogeneizado, principalmente em cavalos, poder trazer diferenas
diagnsticas pela desuniformidade na distribuio dos leuccitos na lmina.
Desvio esquerda
Normalmente o sangue perifrico contm pequeno nmero de neutrfilos imaturos. Em
muitas espcies este consiste de menos de 300 bastonetes/l de sangue. O aumento da liberao
da medula ssea de neutrfilos imaturos para o sangue ocorre quando aumenta a demanda
funcional de neutrfilos para os tecidos ou em casos de leucemias mielgenas ou
mielomonocticas agudas ou crnicas. A presena de neutrfilos imaturos no sangue, acima do
nmero normal para a espcie, constitui um desvio esquerda. A extenso do desvio esquerda
indica a severidade da doena, entretanto a magnitude da contagem de clulas reflete a
habilidade da medula ssea para suprir a demanda.
Classificao do desvio esquerda
Desvio esquerda regenerativo: A contagem total de leuccitos moderadamente ou
marcadamente elevada por causa da neutrofilia e o nmero de neutrfilos imaturos (bastonetes)
encontra-se abaixo do nmero de neutrfilos maturos (segmentados). Isto indica uma boa
resposta do hospedeiro, e ocorre quando a medula ssea tem tempo suficiente (usualmente 3-5
dias) para responder demanda tecidual aumentada de neutrfilos.
Desvio esquerda degenerativo: A contagem total de leuccitos varia, podendo ser normal,
abaixo do normal ou moderadamente elevada. A resposta principal a presena de neutrfilos
imaturos acima dos neutrfilos maturos. O desvio degenerativo esquerda indica que a medula
ssea, para o momento, tem um esgotamento no compartimento de reserva de neutrfilos
segmentados e conseqentemente ocorre a liberao de clulas imaturas, ultrapassando os
neutrfilos maturos. Em muitas espcies isso um sinal de prognstico desfavorvel que requer
um rigoroso protocolo teraputico. No entanto, em bovinos o desvio esquerda degenerativo
comum durante o estgio inicial de doenas infecciosas ou inflamatrias hiperagudas a agudas.
Isso ocorre, provavelmente, devido ao compartimento de reserva da medula ssea de bovinos ter
um suprimento limitado de neutrfilos maturos. Sendo assim, o desvio esquerda degenerativo
49
em bovinos no deve ser considerado como um sinal srio no prognstico, a no ser que este
tenha persistido por vrios dias.
Desvio direita
a presena no sangue circulante de vrios neutrfilos hipersegmentados, isto ; neutrfilos
com mais de 5 lbulos. A hipersegmentao nuclear ocorre devido a presena circulante de
corticosterides, tanto endgenos como exgenos. A deficincia da Vitamina B12 tambm pode
levar a hipersegmentao, mas uma condio muito rara.
Reao leucemide
A reao leucemide geralmente uma leucocitose reativa, consistindo de uma alta
contagem de leuccitos com uma contagem absoluta de um tipo de leuccito, ou tambm um
marcado a extremo desvio esquerda sugestivo de leucemia. Portanto, um processo
patolgico benigno, embora se assemelhe a leucemia granuloctica. Geralmente a reao
leucemide envolvendo os neutrfilos similar ao desvio esquerda regenerativo e,
infreqentemente, um severo desvio esquerda degenerativo pode dar esta indicao.
Ocasionalmente, o quadro sangneo leucemide pode envolver outros tipos de leuccitos,
como os linfcitos ou eosinfilos. Os resultados laboratoriais e a avaliao do paciente revelam
que a doena no uma leucemia. Exemplos de reaes leucemides:
Neutrfilos
Normal do co: ausncia de mielcitos e metamielcitos, bastonetes: 0-3% (0-300/ l),
neutrfilos: 60-77% (3 a 11.500/ l).
50
Causas de Neutrofilia
a) Fisiolgica
Adrenalina
Medo, excitao
Glicocorticides endgenos e exgenos
Trauma, dor
Hiperadrenocorticismo
Stress crnico severo
b) Reativa
Infeces estabelecida local ou sistmica
Bacteriana
Viral
Fungos
Parasitas
Necrose tecidual
Doenas imuno-mediadas
Inflamatrias: artrite reumatide
No inflamatria: anemia hemoltica
autoimune
Tumores
Toxicidade por estrgeno (estgio inicial)
c) Proliferativas
Leucemias mielide aguda ou crnica
Causas de Neutropenia
a) Sobrevivncia diminuda
Infeco bacteriana aguda
Septicemia
Toxemia
Anafilaxia
Hiperesplenismo
b) Produo diminuda
Infeces agudas: Bacteriana, viral e
riqutsias (Ehrlichia)
Drogas e qumicos txicos: ex. estrgeno
Radiao
Leucemia mielide ou linfide
Hematopoiese cclica canina
Eosinfilos
Normal do co: 2 - 10 % (100 a 1.250/ l)
51
Linfcitos
Normal do co: 12 - 30 % (1.000 a 4.800/ l)
Os corticides (endgenos e exgenos) atuam de vrias formas na linfopenia e conseqente
imunodepresso, tais como :
Causas de Linfocitose
Idade : animais jovens
Fisiolgico : medo / excitao / esforo
Leucemia linfoctica ou linfossarcoma
Vrus da imunodeficincia felina
Estimulao antignica prolongada
Infeco crnica
Hipersensibilidade
Doenas auto-imunes
Ps-vacinao
Hipoadrenocorticismo
Terapia com drogas
Causas de Linfopenia
Efeitos esterides
Hiperadenocorticismo
Administrao de corticides / ACTH
Estresse severo
Infeco Sistmica Aguda
Viral recente - cinomose
Bacteriana severa ou incomum
Toxoplasmose / Ehrlichiose / Leishmaniose
Perda de linfcitos
Leso de linfonodos
Neoplasias
Inflamao crnica
Deficincia adquirida de linfcitos T (raro)
Quimioterapia imunossupressiva
Radiao
Imunodeficincia hereditria (raro)
Atrofia linfide
Demodicose generalizada
52
Basfilos
Causas de basofilia
-
Dermatites alrgicas
Eczemas
Reaes de hipersensibilidade
Moncitos
Normal: co: 3 - 10 (150 a 1.350/ l)
gato: 1 - 4 (0 a 850/ l)
Causas de monocitose
Efeitos esterides
Hiperadrenocorticismo
Administrao de esterides/ACTH
Estresse severo piometra
Inflamao/ infeco aguda ou crnica
Doenas imunomediadas
Outras doenas causando dano e necrose tecidual
Produo reduzida de granulcitos
Animais idosos. Leucemia monoctica ou mielomonoctica
Alteraes morfolgicas e Incluses leucocitrias
Muito embora haja os contadores automticos para facilitar a confeco do leucograma, a
tecnologia eletrnica falha na identificao de anomalias, clulas imaturas da linhagem
mielide e hemoparasitas; isto significa menos de 50% dos casos, mas tende a se agravar
quando so utilizados laboratrios de anlises humanas. Deste modo torna-se indispensvel a
experincia citolgica leitura do esfregao sanguneo. O
Corpsculo
de
Baar
um
53
Corpsculos de Dhle
So reas, na periferia dos neutrfilos, nas quais houve liquefao do retculo
endoplasmtico. So de rara ocorrncia, mas possuem interesse diagnstico por refletirem
infeces graves e/ou sistmicas.
Outras alteraes morfolgicas de neutrfilos
Um defeito na granulocitopoiese pode levar formao de neutrfilos com morfologias
anormais, como neutrfilos gigantes, bizarros, degenerados, com o ncleo em forma de rosca ou
bilobado.
Alteraes leucocitrias
Neutrfilos multisegmentados
No sangue normalmente predominam os neutrfilos com 2 a 4 lbulos nucleares, havendo
poucos com cinco ou mais. O aumento ou predomnio de neutrfilos com mais de cinco lbulos
-multisegmentados- visto quando h uma maior permanncia destes na circulao. Esta
sobrevida intravascular prolongada caracteriza o desvio direita. Isto acontece em:
Plasmcitos
A ocorrncia de plasmcitos rara na circulao. A ativao de linfcitos na circulao
deve-se principalmente a uma exacerbada resposta humoral ou a uma leucemia de clulas
plasmocitrias (Mieloma Mltiplo).
Corpsculo de Lentz: Corpsculo eosinoflico no citoplasma de leuccitos patognomnico da
Cinomose canina.
Ehrlichia canis: Mrula basoflica no interior de leuccitos caracteristica da erliquiose.
Fungos e protozorios:
Tabela 20. Fungos e protozorios no interor dos macrfagos.
Leuccitos
Trypanossoma
Toxoplasma
Hepatozoon
Leishmania (raro)
Histoplasma: fungo
Microfilrias
Dirofilria imitis
Diptalonema
54
Corpsculo de Baar
Linfcito
Hipersegmentado
Bastonete e neutrfilo
Eosinfilo
Basfilo
Ehrlichia canis
Leishmania
Hepatozoon
Trypanossoma
Moncito
Granulao txica
Corpsculo de Lentz
Histoplasma
55
Diferencial leucocitrio
Esfregao
Preparar duas lminas novas e desengorduradas, sendo uma com os cantos arredondados.
Homogeneizar o sangue no frasco de colheita fechado, por inverso, e colocar com o
capilar do micro-hematcrito, antes de fech-lo, uma gota de sangue na lmina.
Colocar a outra lmina (recortada) frente da gota de sangue, num ngulo de 45. Fazer
um ligeiro movimento para trs at o sangue espalhar -se pela lmina.
Com um movimento uniforme, para frente, fazer esta lmina deslizar sobre a outra. O
sangue se estender por sobre a lmina, formando o esfregao.
Agitar o esfregao at sec-lo completamente e identific-lo com lpis na borda mais
espessa do esfregao.
Corantes
Leishman
Corante:
Filtrar e usar.
Contagem
56
Transformar os dados relativos obtidos nesta contagem em dados absolutos, atravs da
multiplicao dos percentuais parciais pelo nmero total de leuccitos.
BIBLIOGRAFIA
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WILLARD, M.D., TVEDTEN, H.,TURNWALD, G.H. Small animal clinical diagnosis by laboratory
methods. Philadelphia: W.B. Saunders, 1989. 380p.
57
Introduo
A hemostasia o mecanismo que mantm a fluidez do sangue pelos vasos. Inclui o controle
da hemorragia e a dissoluo do cogulo, por meio de eventos mecnicos e bioqumicos.
Didaticamente pode-se dividir a hemostasia em primria, secundria e terciria, embora os trs
processos estejam inter-relacionados. Na hemostasia primria, tem-se vasoconstrio local,
adeso e agregao plaquetria com conseqente formao de um tampo plaquetrio inicial. A
hemostasia secundria compreende uma srie de reaes em cascata cujo resultado final a
formao de fibrina a partir do fibrinognio que confere estabilidade ao cogulo. A hemostasia
terciria ou fibrinlise ativada na mesma ocasio da coagulao, existindo um equilbrio
fisiolgico entre as mesmas, onde a plasmina atua degradando a fibrina e desfazendo o cogulo
formado. Os vasos sanguneos tambm participam ativamente no processo de coagulao.
Hemostasia primria
Na hemostasia primria, tem-se vasoconstrio local, adeso e agregao plaquetria com
conseqente formao de um tampo plaquetrio inicial. Por agregao plaquetria entende-se a
fixao de uma plaqueta em outra e por adeso entende-se a fixao de uma plaqueta no vaso
sanguneo. Para que ocorra a agregao e a adeso necessrio que esteja presente o fator de
von Willebrand, uma glicoprotena que facilita estas aes.
Cintica plaquetria
As plaquetas so formadas na medula ssea, a partir da clula pluripotencial (steam cell),
que vai dar origem a linha megacarioctica. A primeira clula da linha dos megacaricitos o
megacarioblasto que vai formar o pr-megacaricito e megacaricito. A diviso celular
cessa, mas a diviso nuclear continua. Pode-se encontrar clulas de 4 a 64 ncleos. Este
processo chamado endomitose. As plaquetas so simplesmente pequenos fragmentos do
citoplasma do megacaricito liberados na corrente sangnea. O citoplasma do megacaricito
formado por longos pseudopodes que penetram nos sinusides das clulas endoteliais, liberando
as plaquetas que so observadas como pequenos discos com grnulos vermelhos com 2 a 5 m
de dimetro (em gatos o tamanho varivel) na circulao sangunea.
58
59
trombticos. A manuteno do sangue dentro dos vasos e a sua fluidez por dentro dos mesmos
mantida pelo equilbrio entre a coagulao e a fibrinlise.
Hemostasia secundria
A hemostasia secundria compreende uma srie de reaes em cascata cujo resultado final
a formao de fibrina a partir do fibrinognio que consolida desse agregado e d estabilidade ao
cogulo.
Cascata de coagulao
A cascata de coagulao um mecanismo complexo de reaes seqenciais que culmina na
formao de fibrina a partir do fibrinognio. O conjunto de protenas que atuam na coagulao
(fatores de coagulao) esto representados na Tabela 1. Os fatores de coagulao so ativados
predominantemente por exposio a tromboplastina tecidual, expressada na superfcie das
clulas edoteliais ou fibroblastos extravasculares. Logo aps a ativao inicial, os fatores vo se
ativando seqencialmente e amplificando o estmulo inicial por feedback. A cascata de
coagulao tradicionalmente de divide em sistema intrnseco, extrnseco e comum (Figura 1).
Tabela 1. Fatores de coagulao.
Fator
Nome
Local de sntese
I
II
Fibrinognio
Protrombina
III
Tromboplastina tecidual
Fgado
Fgado, macrfagos
Constituinte de fibroblastos e
membrana plasmtica de clulas
musculares lisas
IV
V
VII
VIII:C
IX
X
Clcio
Proacelerina
Proconvertina
Fator anti-hemoflico
Fator de Christmas
Fator de Stuard - Prower
Antecedente da tromboplastina
do plasma
Fator de Hageman
Estabilizador da fibrina
Fator de Fletcher
XI
XII
XIII
Precalicreina
Cininognio de alto
Fator de Fitzgerald
peso molecular
Fonte: Thrall et al. (2004)
Meia vida
plasmtica
1,5 6,3 dias
2,1 4,4 dias
Fgado, macrfagos
Fgado, macrfagos
Fgado
Fgado
Fgado, macrfagos
15 24 horas
1 6 horas
2,9 dias
24 horas
32 48 horas
Fgado (provavelmente)
30 horas
Fgado (provavelmente)
Fgado (provavelmente)
Fgado (provavelmente)
18 52 horas
4,5 7,0 dias
35 horas
Fgado (provavelmente)
6,5 dias
O sistema intrnseco est via de ativao se inicia com a parede vascular traumatizada, com
o contado do sangue com o colgeno do sub-endotlio ou corpo estranho. Neste momento
ocorre a ativao plaquetria e do fator XII que se ativa e subseqentemente ativa o fator XI
60
(para essa reao necessria presena de cininognio de alto peso molecular e precalicreina)
este ativa o fator IX que ativa o fator VIII.
O sistema extrnseco se inicia por leso vascular ou tecido extravascular, que contm uma
protena de membrana denominada fator tecidual. O tecido danificado tambm libera
tromboplastina o que ativa o fator VII (sistema extrnseco da coagulao).
A ativao destes fatores, mais a presena de fosfolipdios plaquetrios e clcio do incio ao
sistema comum, pela ativao do fator X que em conjunto com esses fatores ativam a
protrombina (fator II) que se converte em trombina (fator II ativado) que converte o
fibrinognio em fibrina. Aps esta converso, o fator XIII confere estabilidade a esta fibrina. A
trombina um potente pr-coagulante capaz de acelerar as reaes da cascata formando grandes
quantidades de fibrina.
SISTEMA INTRNSECO
SISTEMA EXTRNSECO
Colgeno do subendotlio
XII Hangeman
III Tromboplastina tecidual
XI Tromboplastina plasmtica
IX Christmas
VIII Anti-hemoltico
PF-3
IV - Clcio
VII - Proconvertina
SISTEMA COMUM
X Stuard
V Fator Lbil
Clcio
II Protrombina
Trombina
I Fibrinognio
FIBRINA
XIII
FIBRINA
ESTVEL
Recentemente tem se sugerido um novo esquema onde a ativao inicial pela tromboplastina
tecidual forma uma quantidade de trombina e est daria incio a amplificao e ativao dos
sistemas intrnseco, extrnseco e comum.
A vitamina K essencial na formao de vrias protenas da coagulao. Os fatores
chamados vitamina K dependentes so: II, VII, IX e X que esto distribuidos nos trs sistemas
61
62
Contagem de plaquetas
a avaliao quantitativa das plaquetas. Valor acima da referncia da espcie confere uma
trombocitose e valores abaixo, uma trombocitopenia. A contagem pode ser automtica ou em
um hemocitmetro. A amostra deve ser coletada de forma no traumtica, pois o trauma pode
causar a ativao plaquetria com formao de agregados que podem falsamente diminuir o
nmero de plaquetas. Requer amostra com EDTA (etileno diamino tetraacetato de sdio ou
potssio). A contagem em hemocitmetro possui alto coeficiente de erro (20 a 25%).
A contagem em gatos difcil devido ao grande tamanho das plaquetas.
As plaquetas podem ser estimadas pela observao no esfregao sanguneo com objetiva de
100x. Deve-se contar no mnimo 10 campos e fazer uma mdia:
10 a 20 plaquetas/campo = normal
4 a 10 plaquetas/campo = trombocitopenia
< que 4 plaquetas/campo = severa trombocitopenia
1 plaqueta/campo = 15.000 a 20.000 plaquetas/ L
A avaliao da morfologia das plaquetas tambm deve ser feita, a presena de
macroplaquetas ou agregados plaquetrios exerce influncia sobre a contagem e funo
plaquetria e por isso devem ser descritos no laudo.
Valores normais de plaquetas/L:
63
64
O TTPa o tempo que o plasma leva para formar cogulo de fibrina aps a mistura com
cefalina (tromboplastina parcial), caulim (ativa fator XII) e clcio. A cefalina um substituto do
fator plaquetrio. Avalia o sistema intrnseco e comum. Requer amostra em citrato de sdio a
3,8% na relao de 1:9 (anticoagulante:sangue) e plasma separado por centrifugao. Este teste
mede a deficincia de fatores abaixo de 30%.
Valores normais de TTPa (segundos):
Co: 6 - 16
Gato: 9 - 20
Eqino: 27 45
Bovino: 20 35
Muitos tipos de ativadores de contato so usados comercialmente para o TTPa, deve-se,
portanto, proceder este teste em duplicata e de preferncia concomitantemente com um animal
normal. Alm de se estabelecer valores de referncia locais. A coleta no traumtica
extremamente importante, pois a contaminao com tromboplastina tecidual pode prolongar o
resultado do teste pela ativao do sistema extrnseco. A atividade do fator XIII da coagulao
no avaliada neste teste.
Esperam-se valores de TTPa prolongados em hemoflicos, deficincia de fatores XII,
coagulao intravascular disseminada (CID), venenos cumarnicos e doena de Von Willebrand
(dependendo da severidade).
Tempo de protrombina (TP)
O TP avalia o sistema extrnseco e comum pela adio de um fator tecidual, estimulando a
coagulao pela via extrnseca. Os procedimentos com a amostra so semelhantes aos do TTPa.
Mtodo: Faz-se a adio de tromboplastina tecidual (fator extrnseco) conseqente
recalcificao da amostra, cronometrando o tempo at a formao do cogulo de fibrina.
Os valores
65
Mtodo: aglutinao em ltex por kits comercias. Usado par diagnstico de coagulao
intravascular disseminada. Tambm aumentado aps cirurgia.
Co: < 40
Gato: < 8
Eqino: < 16.
Fibrinognio
O fibrinognio uma protena de coagulao (fator I da coagulao) produzida pelo fgado.
Tambm chamado de protena de fase aguda porque sua concentrao no sangue aumenta
rapidamente em resposta a processos inflamatrios. A amostra de sangue deve ser coletada com
EDTA 10%. O mtodo consiste no aquecimento do plasma a 56-58C por 3 minutos e posterior
centrifugao. O aquecimento do plasma precipita o fibrinognio e a centrifugao o separa dos
demais constituintes plasmticos. Faz-se ento a leitura das protenas plasmticas totais por
refratometria e posteriormente a leitura do plasma com o fibrinognio precipitado. A diferena
dos valores obtidos refere-se a concentrao de fibrinognio plasmtico. Est diminudo na CID.
Valores normais de fibrinognio (g/L):
Co: 1 5
Gato: 0,5 3
Cavalo: 1 4
Bovinos: 2 7
Distrbios da coagulao
Desordens plaquetrias
A avaliao das plaquetas realizada em dois nveis: quantitativos e qualitativos. Para
avaliao quantitativa faz-se a contagem de plaquetas. A trombocitopenia (nmero reduzido de
plaquetas) a anormalidade mais comum das plaquetas.
Desordens plaquetrias quantitativas
Trombocitose
o aumento do nmero de plaquetas acima do valor de referncia para a espcie. A
trombocitose pode ser reativa ou primria e ocorre com menos freqncia.
Trombocitopenia
a diminuio do nmero de plaquetas abaixo do valor de referncia para a espcie A
trombocitopenia a anormalidade mais comum encontrada nas plaquetas e provavelmente a
66
causa mais comum de ditese hemorrgica. So cinco os mecanismos que podem levar a uma
trombocitopenia:
1. Produo diminuda de plaquetas: Os megacaricitos se encontram reduzidos. indicado
fazer uma avaliao de medula ssea para diagnstico diferencial. Dentre as causas mais
comuns, esto as seguintes:
- Mieloptise (geralmente pancitopenia)
Clulas neoplsicas
Mielofibrose
- Drogas (geralmente pancitopenia).
a. Quimioterapia antagonistas do cido flico (vitamina B12).
b. Excesso de estrgeno megacariocitopoiese reduzida.
c. Antibiticos e agentes anti-fngicos.
- Estgios crnicos de doenas ricketsiais tais como erlichiose canina (geralmente leva a
pancitopenia).
Destruio imunomediada de precursores megacariocticos.
- Reduo seletiva de plaquetas pancitopenia pode no estar presente.
Produo defeituosa de trombopoetina.
Hereditariedade ou congenicidade.
2. Destruio de plaquetas: Os megacaricitos se encontram aumentados. indicado fazer
uma avaliao de medula ssea para diagnstico diferencial de problema de produo. Dentre as
causas mais comuns, esto:
- Infeco: Produtos de endotoxinas cuja causa aparente agregao e renovao, erlichiose,
bactria, vrus.
- Tumores Hemangioma / hemangiossarcoma
- Imuno-mediada ou auto-imune.
- Drogas podem servir como carreadoras de protenas as quais revestem as plaquetas e so
reconhecidas por anticorpos. Removidas pelo sistema RE.
3. Consumo de plaquetas: como na coagulao intravascular disseminada (CID). No
condio primria e ocorre secundariamente a uma ampla variedade doenas. Atividade
fibrinoltica produz quebra da fibrina aumentando os produtos de degradao (PDF) que tm
potente atividade anticoagulante, aumentando a ditese. Os megacaricitos se encontram
aumentados.
4. Seqestro ou distribuio anormal de plaquetas: Megacaricitos aumentados na medula
ssea.
Esplenomegalia.
Hepatomegalia.
Hipotermia
Endotoxemia
Neoplasia
5. Perda de plaquetas
Megacaricitos aumentados na medula ssea:
Perda massiva de sangue.
Transfuso incompatvel.
67
68
1.1.
Hemofilia A
Sangramento severo em ces, cavalos, gatos e bovinos Hereford.
Somente machos desenvolvem a doena, mas as fmeas so portadoras.
Sinais clnicos: hemartrose, hematomas e sangramento pelo trato gastrintestinal e
urogenital.
Ocorre pela perda do fator VIII na via transplacentria.
Afeta animais jovens.
Tratamento: Transfuso de sangue fresco, plasma ou crioprecipitado. A argeninavasopressina sinttica (DDAVP) pode promover a liberao do fator VIII dos
hepatcitos para a circulao.
Diagnstico:
Tempo de sangramento: normal (diferente da doena de von Willebrand).
TP: normal.
TTPa: prolongado.
1.2.
Doena de von Willebrand
No deficincia de Fator VIII, esse apenas no se estabiliza.
a mais comum das coagulopatias hereditrias (54 raas).
Diagnstico:
Tempo de sangramento: prolongado.
TP: normal.
TTPa: pode estar prolongado.
1.3. Hemofilia B
Fator IX
Ocorre em ces e gatos (raro).
69
2. Coagulopatias adquiridas
2.1. Deficincia de vitamina K
Os fatores II, VII, IX e X so vitamina K dependentes, ou seja, exigem vitamina K para
sua formao.
Maior causa: Antagonistas da vitamina K Rodenticidas (ex: Warfarina e cumarnicos)
Outras causas: Deficincia de sais biliares no intestino impede a absoro da vitamina K
que lipossolvel.
Doena heptica pode resultar na falta de utilizao da vitamina.
Diagnstico:
TP: prolongado
TTPa: prolongado
70
somente em problemas severos. 50% dos gatos com lipidose heptica apresentam alteraes nos
fatores de coagulao. Para o diagnstico da doena heptica podem ser utilizados os testes de
funo heptica, bipsia ou puno aspirativa com agulha fina.
Diagnstico: TP e TTPa: prolongados.
2.3. Coagulao intravascular disseminada (CID)
um distrbio na qual ocorre trombose intravascular difusa na microvasculatura. uma
doena secundria de consumo, deve-se sempre buscar sua causa. Esta se manifesta como um
defeito hemosttico causado pela reduo dos fatores da coagulao e plaquetas, resultando da
sua utilizao no processo trombtico. As propriedades anticoagulantes dos PDFs gerados pela
ativao do sistema fibrinoltico tambm contribuem para o defeito hemosttico.
Vrias doenas ativam a cascata de coagulao, consumindo fatores e plaquetas.
Principais fatores V, VII, e I (fibrinognio).
Causas:
Aumento do contato ativao do sistema intrnseco
Viremia.
Endotoxemia.
Aumento da Tromboplastina tecidual - ativa sistema extrnseco.
Trauma / necrose tecidual.
Hemlise intravascular.
Conseqncias da coagulao intravascular disseminada:
Sangramento.
Disfuno de rgos pela deposio de fibrina.
Anemia hemoltica.
Diagnstico:
TP: prolongado
TTPa / TCa: prolongado
PDF: aumentado
Contagem de Plaquetas: diminuda
Tempo de sangramento: prolongado
Fibrinognio: diminudo
Fragmentos de eritrcitos podem ser vistos no esfregao sanguneo.
A hemostasia o resultado do bom funcionamento das plaquetas, fatores de coagulao e
vasos sanguneos trabalhando em conjunto para manter a fluidez do sangue e reparar leses
vasculares. Problemas em qualquer ponto deste balano podem resultar em coagulao
excessiva (trombose) ou hemostasia inadequada (sangramento). O uso dos testes de coagulao
tem por objetivo a procura da causa do problema hemosttico adicionalmente a uma boa
avaliao clnica.
BIBLIOGRAFIA
DUCAN, R. J., PRASSE, K. W., & MAHAFFEY, E. A. Veterinary Laboratory Medicine: Clinical
Patholog.y 3rd ed., Ames; Iowa State University Press, 1994.
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HARVEY, J. W. Atlas of Veterinary Hematology Blood and Bone Marrow of Domestic Animals. WB
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JAIN, N. C. Essentials of veterinary hematology. Philadelphia: Lea & Febiger, 1993.
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WILLARD, M. D., TVEDTEN, H., & TURNWALD, G. H. Small Animal Clinical Diagnosis by
Laboratory Methods . 2nd ed. Philadelphia; WB Saunders Co., 1994.
72
A prtica da transfuso sangnea teve incio no sculo passado na medicina humana, e vem
evoluindo desde ento. A primeira transfuso sangnea entre seres humanos de que se tem registro
ocorreu no sculo XVII. Entretanto, foi somente no incio do sculo XX que as conquistas
tecnolgicas permitiram o uso mais difundido deste recurso. O reconhecimento das diferenas entre
os indivduos para a escolha do doador, o uso dos anticoagulantes durante a coleta e o domnio das
tcnicas de esterilizao foram fundamentais para esta evoluo. O fracionamento do sangue, que
permite o uso isolado de cada um de seus elementos, e a identificao das doenas transmissveis
representam os avanos mais recentes desta forma de tratamento.
Na medicina veterinria, o processo foi um pouco mais lento, mas o interesse pela medicina
transfusional tem crescido nestes ltimos anos na medicina veterinria e atualmente existem
grandes bancos de sangue veterinrios em vrios pases do mundo que tornaram possveis a prtica
da medicina transfusional veterinria de alta qualidade. Entretanto, sabe-se que isto no depende
somente da disponibilidade de componentes sangneos e do uso adequado de cada um deles, mas
tambm da qualidade destes componentes. Respeitar normas adequadas para coleta, processamento
e armazenamento a melhor maneira de alcanar os melhores resultados.
No Brasil, existem servios de hemoterapia veterinria pouco especializados e recentemente um
banco de sangue veterinrio est se desenvolvendo na Faculdade de Medicina Veterinria e
Zootecnia da Universidade de So Paulo (FMVZ USP). Modificaes na prtica da hemoterapia
atualmente realizada nos hospitais veterinrios brasileiros so necessrias, como o estabelecimento
de programas de doadores para melhor atender a demanda de cada hospital ou clnica veterinria, a
separao de hemocomponentes para melhor atender cada caso em que exista a necessidade de
transfuso sangnea e o controle de qualidade de seus produtos. A pesquisa nesta rea precisa ser
motivada para possibilitar uma melhor capacitao de mdicos veterinrios nesta rea e melhorias
na qualidade e rapidez do atendimento dos animais que necessitam do servio de hemoterapia.
73
Caninos
No de ces
1.1
1.2
332
40
20
98
22
45
217
36
51
10
nd
nd
nd
Vriesendorp (1976)
31
37
56
31
545
44
22
24
nd
nd
nd
224
33
nd
97
nd
Novais (1996)
150
51
40
nd
nd
nd
nd
Os grupos DEA 3 e DEA 5 apresentam baixa incidncia na populao canina dos Estados Unidos
(6% e 10%, respectivamente). Contudo, os ces da raa Greyhound apresentaram uma prevalncia
de 23% para o grupo DEA 3. O fator DEA 7 no um antgeno integral de membrana eritrocitria.
Acredita-se que seja secretado no plasma e adsorvido sobre a superfcie das hemcias. Estudos
indicam que estes grupos podem provocar reaes transfusionais tardias, caracterizadas pelo
seqestro e destruio das hemcias no bao em um perodo de 72 horas. Sendo assim, os ces
positivos para estes grupos no devem ser usados como doadores de sangue, exceto para ces do
mesmo tipo sangneo.
A prevalncia do grupo DEA 4 bastante alta na populao canina, atingindo ndices de 98%. A
75
importncia deste grupo esta no fato de que anticorpos naturais anti-DEA 4 raramente ocorrem e,
alm disso, os ces DEA 4 negativos sensibilizados no apresentam hemlise intra ou extravascular,
aps terem sido transfundidos com sangue DEA 4 positivo, ou seja, os ces negativos para todos os
outros grupos e positivos somente para o DEA 4 so considerados doadores universais. Sendo
assim, os ces que s apresentam reaes positivas para o grupo DEA 4 so os melhores doadores
de sangue. Apenas uma ocorrncia de reao transfusional hemoltica foi recentemente descrito na
literatura.
Tabela 2. Freqncia de combinaes entre os grupos sangneos em ces domsticos mestios no Estado de So Paulo
(n = 150).
No de animais
Porcentagem (%)
52
35
46
32,5
10
DEA 1.1
DEA 1.2/1.3
DEA 4 e DEA 7
1,5
1,5
1,5
1,5
1,5
0,6
0,6
Felinos
Os tipos sangneos dos felinos e as incompatibilidades entre eles, incluindo modo de herana
gentica, severidade das reaes transfusionais, e a incidncia de isoeritrlise tm sido estudados
durante as ltimas duas dcadas.
O sistema de grupos sangneos em felinos possui trs tipos: A, B e AB, sendo que este ltimo
muito raro. O tipo A dominante sobre B (na maior parte dos casos), gatos tipo A podem ser
homozigotos AA ou heterozigotos AB. Os animais tipo B so sempre homozigotos BB. A exceo
regra o grupo AB que muito raro, mas no qual parece que A e B expressam codominncia.
Entretanto, os antgenos de superfcie eritrocitria deste sistema so diferentes daqueles do sistema
76
ABO humano.
Os felinos apresentam anticorpos de ocorrncia natural (tambm conhecidos como aloanticorpos)
contra o antgeno do tipo sangneo que no possuem e o teste de compatibilidade e a tipagem
sangnea se tornam muito importantes na preveno de reaes transfusionais na prtica da clnica
veterinria. Apenas o felino tipo AB no possui anticorpos de ocorrncia natural, portanto pode
receber sangue de todos os tipos do sistema e conhecido como receptor universal entre os felinos.
A incompatibilidade sangnea pode causar reaes potencialmente fatais sob duas circunstncias. A
primeira a reao hemoltica transfusional, especialmente quando um gato tipo B recebe sangue
tipo A. A meia-vida dos eritrcitos transfundidos entre gatos compatveis (isto , tipo A para tipo A
ou tipo B para tipo B) de 29 a 39 dias. A transfuso de sangue tipo A em um gato tipo B resulta em
uma rpida destruio do sangue do doador (meia-vida de 1,3 horas) com severos sinais clnicos
(hipotenso, defeco, vmitos, hemoglobinemia, depresso neurolgica) e at a morte. A
transfuso de sangue tipo B em um gato tipo A produz sinais clnicos leves, a meia-vida dos
eritrcitos transfundidos de 2,1 dias. Devido presena destes anticorpos de ocorrncia natural, a
prova de compatibilidade sangnea deve ser realizada antes da primeira transfuso (especialmente
naquelas raas de alta incidncia do tipo B e AB). A segunda reao de incompatibilidade a
isoeritrlise neonatal felina, que ocorre durante a fase de amamentao de filhotes tipo A ou AB,
nascidos de uma fmea tipo B. A reao de incompatibilidade causada pelos aloanticorpos anti-A
da fmea que so transferidos aos filhotes pelo colostro ou pelo leite durante o primeiro dia de vida
e que destroem os eritrcitos tipo A ou AB. Os filhotes podem morrer dentro de poucos dias.
Estudos realizados no mundo todo revelam que o tipo A o tipo sangneo mais comum.
Entretanto, observou-se que a proporo dos gatos tipo B varia consideravelmente de acordo com a
regio geogrfica (Tabela 3). A freqncia de gatos tipo B tambm varia muito entre raas (Tabela
4), enquanto que gatos tipo AB so raros. Estudos recentes demonstraram que os felinos selvagens
possuem os mesmo tipos sangneos dos gatos domsticos.
O tipo A de longe o tipo mais prevalente em felinos, mas entre certas raas puras, a freqncia do
tipo B bem mais alta (Devon Rex, British Shorthair, Exotic Shorthair, Turkish Van and Turkish
Angora), apesar das percentagens variarem de zero a 60% dependendo da raa. Entre os SRDs a
porcentagem alta do tipo B foi visto em algumas regies geogrficas dos EUA.
O conhecimento da distribuio dos grupos sangneos na populao local de felinos pode auxiliar
na determinao do risco da ocorrncia de reaes transfusionais, enquanto que o conhecimento dos
ttulos de aloanticorpos pode auxiliar na determinao da severidade destas reaes. Entretanto,
parece que a incidncia de reaes transfusionais de significado clnico baixa, e isto
provavelmente reflete uma falha no reconhecimento das complicaes resultantes de uma
77
transfuso. essencial que se faa um teste de compatibilidade entre doador e receptor antes da
primeira transfuso em felinos. Os mtodos mais indicados para se assegurar da compatibilidade
entre doador e receptor so ambos: prova cruzada (teste de compatibilidade sangnea) e a tipagem
sangnea.
Tipo A
Tipo B
Tipo AB
(%)
(%)
(%)
Referncias
Austrlia
1895
73,3
26,3
0,4
Austria
101
97
Giger et al (1992)
Inglatera
477
97,1
2,9
Holmes (1950)
Finlndia
61
100
Giger et al (1992)
Frana
350
85,1
14,9
Eyquem et al (1962)
Alemanha
600
94,0
6,0
Giger et al (1992)
Holanda
95
95,8
3,1
1,1
Giger et al (1992)
Itlia
401
88,8
11,2
Giger et al (1992)
Japo
265
89,3
1,0
9,7
Ejima et al (1986)
70
97,1
2,9
Giger et al (1992)
137
87,6
8,0
4,4
1018
99,6
0,4
Giger et al (1992)
1072
99,7
0,3
Giger et al (1989)
3785
98,1
1,7
0,1
Giger et al (1991b)
Esccia
Sua
Knottenbelt et al (1999)
Estados Unidos
Fonte: Knottenbelt (2002).
78
Raa
Pas
Tipo A
Tipo B
Tipo AB
(%)
(%)
(%)
15
100
Estados Unidos
85
41,2
58,8
Reino Unido
105
41,0
57,1
Estados Unidos
170
75,9
24,1
Reino Unido
16
87,5
12,5
Itlia
38
97,4
2,6
Alemanha
25
84,0
16,0
Estados Unidos
99
100
Reino Unido
100
Persa
Siams
Fonte: Knottenbelt (2002).
A prova cruzada completa realizada em duas etapas. A 1a etapa ou Major Crossmatching consiste
em misturar uma pequena quantidade do sangue total ou suspenso de hemcias do sangue doador
com uma pequena quantidade de soro do receptor. O resultado positivo dado a partir da
observao de grumos (macroscopicamente) e a aglutinao dos eritrcitos (microscopicamente).
Esta a etapa considerada a mais importante. Na 2a etapa ou Minor Crossmatching, uma pequena
quantidade de sangue total ou uma suspenso de hemcias do sangue do receptor misturada com o
soro do doador e, do mesmo modo, pesquisa-se a formao de grumos de hemcias. A ausncia de
grumos nas duas etapas da prova cruzada significa que a transfuso pode ser realizada.
Ao realizar a prova, deve-se evitar hemlise durante a coleta e o anticoagulante (EDTA) deve estar
em volume adequado para no diluir a amostra. Laboratrios de referncia, em geral, realizam o
teste completo em tubos a temperatura ambiente, a 37oC e a 4oC (opcional), incluindo o teste de
antiglobulina canina polivalente (Teste de Coombs indireto). O sangue deve ser compatvel a 37oC
(mxima atividade dos anticorpos anti-DEA 1.1. e anti-DEA 1.2). Alguns autores alegam que
incompatibilidades a 4oC no causam reaes transfusionais.
A prova cruzada pode ser realizada atravs de uma tcnica rpida em lmina de microscopia ou
atravs de uma tcnica mais demorada em tubos de ensaio. A tcnica rpida em lmina de
microscopia consiste nos seguintes passos:
1) Coletar 0,5 a 1mL de sangue do doador em dois frascos (um com EDTA e outro sem anticoagulantes),
identificar os tubos.
2) Coletar 0,5 a 1mL de sangue do receptor em dois frascos (um com EDTA e outro sem anticoagulantes),
identificar os tubos.
79
3) Centrifugar o sangue do doador e do receptor a 1000-1500g por 5-10 min para separar os eritrcitos do
plasma e do soro.
4) Separar o plasma e as clulas do doador e do receptor sempre utilizando pipetas diferentes.
5) Preparar uma soluo a 4% do receptor e uma do doador (0,2 mL do concentrado eritrcitos e 4,8 mL de
soluo salina). Esta diluio em soluo salina retarda a formao de rouleaux e facilita a observao
microscpica, mas resulta em uma aglutinao menos intensa. Uma diluio maior pode provocar a no
reatividade dos aloanticorpos e pode ainda no eliminar a formao de rouleaux totalmente.
6) Identificar 4 lminas de microscopia: Controle Doador (eritrcitos do doador + soro/ plasma do doador,
Major Crossmatch Doador x Receptor (eritrcitos do doador + soro/ plasma do receptor), Minor
Crossmatch Receptor x Doador (eritrcitos do receptor + soro/ plasma doador), Controle Receptor
(eritrcitos do receptor + soro/ plasma do receptor).
7) Em cada uma das lminas, mistura uma gota do soro/ plasma e uma gota da suspenso de eritrcitos ou
duas gotas do soro/ plasma e uma gota do concentrado de eritrcitos.
8) Misturar com uma esptula/pipeta ou outro material disponvel.
9) Misturar por inclinao da lmina e observar se ocorre aglutinao macroscpica dentro de 2 minutos.
10) Colocar uma lmina sobre a mistura e observar se ocorre aglutinao microscpica (objetivas 40x a
100x) dentro de 5 minutos.
11) Verificar se h aglutinao, se ocorrer positivo (incompatvel).
A seguir, a tcnica em tubos de ensaio:
1) Coletar 0,5 a 1 mL de sangue do doador em dois frascos (um com EDTA e outro sem anticoagulantes),
identificar os tubos.
2) Coletar 0,5 a 1 mL de sangue do receptor em dois frascos (um com EDTA e outro sem anticoagulantes),
identificar os tubos.
3) Centrifugar o sangue dos tubos sem anticoagulante do doador e do receptor a 1000-1500g por 5-10 min
para separar os eritrcitos do soro.
4) Separar o plasma e as clulas do doador e do receptor sempre utilizando pipetas diferentes.
5) Lavar os eritrcitos trs vezes em soluo salina antes de preparar a soluo a 4%: colocar 0,5 a 1 mL de
sangue em um tubo e completar com soluo salina, homogeneizar por inverso do tubo e centrifugar em alta
velocidade por 1 minuto (ou mais se necessrio), remover o sobrenadante e repetir este procedimento mais
duas vezes.
6) Preparar uma soluo a 4% do receptor e uma do doador (0,2 mL do concentrado eritrcitos e 4,8 mL de
soluo salina).
7) Identificar 4 tubos de ensaio: Controle Doador (eritrcitos do doador + soro/ plasma do doador), Major
Crossmatch Doador x Receptor (eritrcitos do doador + soro/ plasma do receptor), Minor Crossmatch
Receptor x Doador (eritrcitos do receptor + soro/ plasma doador), Controle Receptor (eritrcitos do receptor
+ soro/ plasma do receptor).
8) Adicionar a cada um dos tubos, duas gotas do soro/ plasma e duas gotas da suspenso de eritrcitos,
homogeneizar por agitao da parte inferior do tubo.
80
9) Centrifugar em baixa velocidade por 15-30 segundos, o suficiente para concentrar as clulas, mas no
sediment-las totalmente.
10) Homogeneizar os tubos mais uma vez para ressuspender as clulas e observa-los contra a luz (avaliar
aglutinao e/ou hemlise). Confirmar a aglutinao microscopicamente.
11) Se no foi observada aglutinao, deve-se incubar os tubos a 37oC por 30 minutos antes de centrifug-los
e reavali-los.
Programa de doadores
Todo banco de sangue veterinrio deve ter um programa de doadores. O sangue pode ser obtido
atravs de ces e gatos residentes ou voluntrios (da equipe ou de proprietrios). Em alguns pases,
com os avanos dos conceitos de biotica, a utilizao de animais residentes no permitida.
O doador canino ideal deve ter idade entre 2 a 8 anos, aproximadamente, pesar acima de 28 kg (ces
menores podem doar um volume menor), ter temperamento dcil e ser vacinado anualmente contra
doenas infecciosas importantes na regio, como raiva, cinomose, hepatite infecciosa, leptospirose,
parvovirose e coronavirose. A maior parte dos ces no requer sedao ou anestesia, em alguns
pases, a utilizao destas drogas no permitida durante este procedimento (Abrams-Ogg, 2000,
Schneider, 2000). Em ces, 15 a 20% do volume sangneo pode ser doado e calcula-se o volume
sangneo estimado com a seguinte frmula:
Volume sangneo estimado (Litros) = 0,08 0,09 x peso (kg)
ou seja, o mximo a ser doado 16 a 18 mL/kg. Os ces podem doar a cada 3 a 4 semanas, desde
que recebam nutrio balanceada em quantidade adequada.
O doador felino ideal deve ter idade entre 2 a 8 anos, aproximadamente, pesar acima de 4,5 kg
(tamanho proporcional). Machos so mais procurados por serem maiores. O animal deve ser
vacinado anualmente contra doenas infecciosas importantes na regio, como FIV e FeLV, e devem
ser negativos para PIF. A maior parte dos gatos geralmente sedada ou anestesiada para a doao de
sangue, portanto o comportamento do doador no to importante neste caso, mas ainda assim um
temperamento dcil facilita o trabalho. Na Escola de Veterinria de Ontrio (Canad), utiliza-se
uma combinao de drogas (butorfanol e acepromazina intramuscular associada a quetamina e
diazepam intravenoso). Em felinos, 15 a 20% do volume sangneo pode ser doado e calcula-se o
volume sangneo estimado com a seguinte frmula:
81
Antes de cada doao, o histrico do doador deve ser averiguado, o animal deve ser submetido a um
exame fsico e a testes de controle laboratoriais. O animal no deve estar sob qualquer tratamento,
no deve ter histrico de doena grave ou contato com carrapatos ou outros hospedeiros ou vetores
de doenas, no deve ter recebido transfuso sangnea e, no caso de fmeas, no deve estar prenhe.
Alguns cuidados devem ser tomados durante o procedimento, como procurar fazer a coleta quando
o animal estiver em jejum de 12h (a lipemia pode aumentar a formao de rouleaux complicando o
teste de compatibilidade e tambm pode causar ativao plaquetria), realizar assepsia adequada
antes do procedimento e presso no local da venipuno aps a doao durante 2 a 5 min para
acelerar o processo de coagulao, observar o animal aps a doao por 15 a 30 minutos (fraqueza,
mucosas plidas, pulso fraco e outros sinais de hipotenso), realizar soroterapia, se necessria, com
soluo salina ou solues cristalides similares para reposio do volume doado, dividindo as
doses para no causar hemodiluio imediata. Procurar fazer com que o animal receba rao
industrializada e gua aps a doao e recomendar ao proprietrio que evite exerccios fsicos
intensos com o animal por alguns dias.
Quanto doao
A veia jugular o vaso sangneo de eleio para a coleta do sangue e o animal geralmente
colocado em decbito lateral. Antes da doao aconselha-se palpar a veia e em seguida realizar a
assepsia do local. Durante a doao, o bem-estar do doador deve ser constantemente monitorado
(colorao das mucosas, pulso, freqncia respiratria). O comportamento tambm um importante
indicador de potenciais problemas que possam ocorrer durante o procedimento. A bolsa de sangue
deve ser freqentemente e cuidadosamente homogeneizada durante a doao para evitar a formao
de cogulos e possibilitar a continuidade do procedimento. A doao dura em torno de 3 a 10
minutos com vcuo e 5 a 15 sem vcuo em ces, e aproximadamente de 3 a 5 minutos sem a
utilizao de vcuo em felinos. A hipotenso um problema freqentemente observado em gatos,
portanto deve-se ter mais cuidado durante a coleta de sangue nesta espcie.
82
Transfuso a palavra que define a terapia intravenosa com sangue total ou seus subprodutos. H
anos, a hemoterapia tem se baseado no uso de sangue total, e este ainda o principal uso em
medicina veterinria. Os subprodutos do sangue incluem seus componentes e derivados. Os
componentes sangneos so seus subprodutos obtidos atravs de centrifugao, ou, menos
comumente, atravs de afrese (equipamentos especializados que permitem a separao de apenas
um componente do sangue do doador, devolvendo-lhe o restante). O uso dos componentes
sangneos permite que mais de um paciente possa se beneficiar de apenas um doador e reduz os
riscos de uma reao transfusional contra os outros componentes desnecessrios, pois muitas vezes
o paciente que requer uma transfuso precisa de apenas um componente sangneo especfico.
Durante a ltima dcada houve um aumento do interesse pela medicina veterinria transfusional,
acompanhado pelos avanos na oncologia veterinria e pela terapia intensiva, o aumento foi tanto
que atualmente os componentes sangneos so rotineiramente preparados por certas instituies e
empresas comerciais em alguns pases da Europa e nos Estados Unidos. Os principais componentes
sangneos so: concentrado de eritrcitos, plasma (e seus subtipos), concentrado de plaquetas e
crioprecipitado.
Ambos, sangue total e seus componentes podem ser utilizados logo aps a coleta (produtos frescos)
ou aps o armazenamento (produtos armazenados/estocados). Antes da II Guerra Mundial, o
armazenamento de sangue no era muito utilizado na medicina humana. O doador era chamado
conforme a necessidade, seu sangue era coletado e imediatamente transfundido, e isto ainda muito
comum na medicina veterinria. Entretanto, com a preparao de componentes sangneos, o
interesse por bancos de sangue aumentou muito no passado recente. O armazenamento permite
acesso imediato a sangue total e seus subprodutos, mas a coleta sangnea e a preparao destes
podem ser intensivamente trabalhosas e consomem bastante tempo, por isso a existncia de um
banco de sangue para clnicas/hospitais que realizam transfuses rotineiramente essencial.
Os derivados sangneos so subprodutos proticos preparados atravs de mtodos bioqumicos (ex.
extrao por etanol) para processar grandes quantidades de plasma. Os derivados, que incluem
solues de albumina, imunoglobulinas intravenosa e concentrados de fatores especficos, tm tido
um uso relativamente limitado na medicina veterinria comparado aos componentes sangneos.
Os substitutos sangneos, que so produzidos atravs de mtodos biotecnolgicos, incluem
colides artificiais, transportadores de oxignio, substitutos de plaquetas e protenas de coagulao
humana produzidas atravs da tecnologia de DNA recombinante. Os dois primeiros substitutos tm
sido utilizados na medicina veterinria. Atualmente existem diversas formas de preservar as clulas
sangneas por um perodo determinado at o momento da transfuso, alguns exemplos so os
83
O sangue total pode ser fresco (quando utilizado logo aps a transfuso) ou armazenado sob
refrigerao (1-6 oC). A principal indicao hemorragia aguda (anemia com hipovolemia). O
volume a ser transfundido depende do volume de sangue perdido e na estimativa de perdas futuras.
Em geral, entre 10 e 22 mL/kg, e o volume dirio no deve exceder este valor, a menos que a perda
seja muito severa. Soluo salina hipertnica (7,5%), 4-5 mL/kg i.v. por 10 minutos deve ser
considerada em casos de choque hemorrgico. A transfuso de sangue total pode ser feita para
corrigir anemias conseqentes de outras causas, mas o concentrado de eritrcitos prefervel nestes
casos.
Concentrado de eritrcito
A centrifugao do sangue total o mtodo indicado para obteno deste produto e sua
armazenagem deve ser feita sob refrigerao (1-6oC). As principais indicaes so anemia sem
hipovolemia e anemia hemorrgica aguda com administrao conjunta de plasma.
Observaes importantes
Este produto deve ser separado por centrifugao em at de 6 a 8 horas aps a doao. Se o
84
Observaes importantes
Todo plasma deve ser reaquecido somente antes da tranfuso, utilizando um banho-maria entre 30 e
37oC por 20 a 30 minutos.
Este produto pode ser definido como um precipitado do plasma fresco congelado, e tambm
conhecido como fator antihemoflico crioprecipitado ou CRYO. Este produto contm 50% de fator
VIII, 20% de fibrinognio e porcentagens variadas dos fatores XIII, von Willebrand e VIIIc
(procoagulante). Este produto deve ser congelado (-30 a -18 oC) e vlido por at um ano aps a
data da doao. As principais indicaes so: hemofilia A (incomum) e doena de von Willebrand
(mais comum).
Este produto pode ser definido como o sobrenadante da preparao do crioprecipitado. Este produto
deve ser congelado (-30 a -18 oC) e vlido por at 5 anos aps a data da doao. Este produto
contm albumina, fatores da coagulao exceto o fator de von Willebrand e o fator VIII, assim
como, as imunoglobulinas. As principais indicaes so: intoxicao por antagonistas da vitamina
K, hemofilia B e hipoalbuminemia.
85
O crioprecipitado tambm pode ser utilizado como fonte de fibrinognio que pode ser adicionado
trombina para a produo de cola ou selante fibrina. Nos Estados Unidos, este produto j foi
aprovado pelo FDA e utilizado como agente hemosttico e adesivo em diversos tipos de cirurgias.
Observaes importantes
Estes compostos fazem parte dos chamados produtos plaquetrios. O seu armazenamento
diferenciado dos produtos anteriormente descritos, pois deve passar por repouso por 1 hora seguido
de agitao constante a temperatura ambiente (20 a 24oC) por 3 a 5 dias (j existem bolsas que
permitem o armazenamento por at 7 dias em humanos). As principais indicaes so: hemorragia
por trombocitopenia e trombocitopatia. So eficazes em trombocitopenias causadas por reduo da
produo (leucemias, anemia aplsica). Menos eficazes nas causadas por aumento do consumo
(coagulao intravascular disseminada), seqestro (esplenomegalia) e destruio (trombocitopenia
imunomediada).
Nos Estados Unidos, o concentrado de plaquetas canino j pode ser obtido atravs de afrese
(plaquetafrese) o que aumenta a concentrao de plaquetas por unidade. Alm disso, devido aos
avanos na criopreservao (como a utilizao de dimetil-sulfxido e outras substncias como
crioprotetores), estes concentrados podem ser congelados a -20oC por at 6 meses.
ons hidrognio e o transporte de oxignio e de dixido de carbono, mas para a manuteno destas
atividades necessrio energia sob a forma de ATP (adenosina trifosfato). A funo do 2,3-DPG
eritrocitrio se ligar a deoxihemoglobina e facilitar o transporte de oxignio. Quando ocorre esta
ligao, a molcula de deoxihemoglobina estabilizada e esta interao a afinidade da hemoglobina
pelo oxignio e permite sua liberao para os tecidos. Portanto, uma diminuio de 2,3-DPG, que
ocorre durante o armazenamento do sangue, interfere neste mecanismo, reduzindo a liberao de
oxignio.
O tempo de armazenamento depende da soluo anticoagulante utilizada. O tempo de
armazenamento para eritrcitos humanos em CPDA1 de 35 dias, entretanto, o tempo mximo de
armazenamento sugerido de 20 dias utilizando-se a mesma soluo para preservao de eritrcitos
caninos. Este curto tempo de armazenagem dificulta e limita a quantidade de sangue canino que
pode ser efetivamente armazenada e uma desvantagem em particular para hospitais de pequenos
animais onde o acesso a ces doadores pode ser difcil.
Novas solues, a princpio, podem ser utilizadas efetivamente em outras espcies como a canina.
Entretanto, o tempo de armazenamento deve ser determinado para cada espcie ao invs de utilizar
os tempos preconizados para a espcie humana. Em bancos de sangue humanos, solues salinas,
glicosadas e com adenina, tambm conhecidas como solues aditivas (exemplo: SAGM), so
adicionadas diretamente ao concentrado de eritrcitos, aps a centrifugao e remoo do plasma, e
o objetivo de seu uso prolongar o tempo de estocagem destas clulas por at 42 dias.
As solues aditivas conhecidas por Adsol (Fenwall Laboratories) e Nutricel (Miles, Inc,
Pharmaceutical Division, West Haven, CT) tm capacidade de prolongar o tempo de estocagem dos
eritrcitos caninos, mantendo a viabilidade celular aceitvel por at 37 e 35 dias respectivamente.
Em casos crticos, nos quais a liberao de oxignio aos tecidos seja necessria, pode-se utilizar
concentrado de eritrcitos ou sangue total desde que armazenados por um perodo menor do que
duas e quatro semanas, respectivamente (assumindo que a estocagem seja realizada com as
seguintes solues: CPD, CPDA1, Adsol, Nutricel ou Optisol). Este fato no to importante em
gatos, visto que esta espcie possui normalmente baixos nveis de 2,3-DPG. As solues mais
freqentemente utilizadas atualmente para o armazenamento de sangue canino e felino so o CPD,
CPD2 e o CPDA1.
Heparina
Componente: Heparina 1000UI/mL.
Uso: 5 a 12,5 UI/mL de sangue.
Para emergncias em gatos: colocar 300 a 750 UI (0,3 a 0,75 mL) em seringa de 60 mL.
Tempo mximo (T. mx.) de estocagem de sangue total: 2 dias (ces e gatos).
Comentrios: Mais utilizada em gatos, no preserva eritrcitos, a soluo mais disponvel em clnicas.
Cuidar para no confundir com soluo de 10.000 UI/mL (heparinizao de receptores menores).
Citrato de sdio
Uso: soluo de 3,8% para bolsa de 500 mL ou manipulado (1 mL de soluo 3,8% para 9 mL de sangue ou
0,5 g para 100 mL de sangue.
Para emergncias em gatos: 6 mL em uma seringa de 60 mL.
T. mx. de estocagem de sangue total: 5 dias (ces).
Comentrios: No preserva eritrcitos, obsoleto em pequenos animais, mas ainda muito usado para coleta de
plasma em grandes.
CPD (Citrato fosfato dextrose) cido ctrico, citrato de sdio, fosfato e dextrose.
Uso: 0,14 mL para 1 mL de sangue.
Para emergncias em gatos: 7,5 mL em uma seringa de 60 mL.
T. mx. de estocagem de sangue total: 4 semanas (ces, gatos).
Comentrios: No recomendado para estoque de concentrado de hemcias, bolsas com 63 mL para 450 mL
de sangue e de 70 mL para 500 mL de sangue.
CPDA1 (Citrato fosfato dextrose adenina1) cido ctrico, citrato de sdio, fosfato e dextrose.
Uso: 0,14 mL para 1 mL de sangue.
Para emergncias em gatos: 7,5 mL em uma seringa de 60 mL.
T. mx. de estocagem de sangue total: 5 semanas (ces, gatos).
T. mx. de estocagem de concenentrado de eritrcitos: 3 semanas (ces, gatos).
Comentrios: bolsas com 63 mL para 450 mL de sangue e de 70 mL para 500 mL de sangue.
Solues Aditivas: AS-1 (ADSOL), AS-3 (NUTRICEL) e AS-5 (OPTISOL) dextrose, adenina, manitol e
cloreto de sdio.
Uso: bolsas pr-fabricadas para 450 mL de sangue (bolsa primria com 63 mL de CPD/ CPD2/ CPDA1 e
bolsa satlite com 100 mL da soluo aditiva).
Para emergncias em gatos: 10 mL em uma seringa de 60 mL.
T. mx. de estocagem de sangue total: no aplicvel
T. mx. de estocagem de concentrado de eritrcitos: 5-6 semanas (ces), 6 semanas (gatos).
Comentrios: devem ser adicionadas aos eritrcitos dentro de 72 horas aps a coleta.
Reaes transfusionais
agudas e tardias. As principais reaes imunolgicas e no-imunolgicas esto listadas nas Tabelas
6 e 7. A ocorrncia das reaes transfusionais varia de 3 a 8% em ces e gatos, mas este ndice tende
a diminuir com o aumento do conhecimento e conseqentes melhorias na medicina transfusional
veterinria.
Tabela 5. Sinais no especficos que podem ocorrer durante uma reao transfusional imunolgica
aguda.
Fraqueza, depresso, decbito
Tremores musculares, agitao, vocalizao
Polipnia, dispnia
Taquicardia, bradicardia (felinos), arritmias, mucosas plidas, pulso fraco (hipotenso)
Parada cardiopulmonar (pode ser o nico sinal presente durante a anestesia)
Salivao (e outros sinais de nusea), vmitos, diarria
Mico
Convulses, coma
Angioedema e urticria
Fonte: Abram-Ogg (2000).
Tardia
Hemlise
Hemlise
Hipersensibilidade aguda
Prpura ps-transfusional
Sensibilidade a plaquetas
Isoeritrlise neonatal
Sensibilidade a leuccitos
Imunossupresso
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Tardia
Hipervolemia
Hemosiderose
Contaminao bacteriana
Toxicidade por citrato (hipocalcemia)
Coagulopatia e trombose
Hiperamonemia
Hipotermia
Hipofosfatemia
Hipercalemia
Embolismo por ar
Microembolismo pulmonar
Acidose
Fonte: Harrell e Kristensen (1995), Abrams-Ogg (2000).
Reaes imunolgicas
A seguir esto descritas, de forma resumida, as principais reaes imunolgicas e seus sinais
clnicos.
Incompatibilidade sangnea (eritrocitria)
A patognese das reaes hemolticas no ser discutida aqui. Os sinais clnicos de uma crise
hemoltica aguda incluem um ou mais sinais no especficos que esto relacionados na Tabela 5,
juntamente com sinais especficos como hemoglobinria e hemoglobinemia. Neste caso,
hipertermia comum, mas a urticria e o angioedema no. Insuficincia renal aguda e coagulao
intravascular disseminada (CID) so seqelas incomuns. A severidade da reao est diretamente
relacionada com o nmero de eritrcitos destrudos. A reao hemoltica severa aguda em gatos
mediada por IgM e lembra uma reao anafiltica, em ces mediada por IgG. Na reao
hemoltica tardia no h sinais clnicos agudos, mas o hematcrito reduz rapidamente em 3-5 dias
aps a transfuso (deveria durar 4 a 6 semanas). O tratamento pr-transfusional com
antihistamnicos e corticosterides no iro prevenir este tipo de reao.
Reaes a protenas plasmticas
Reaes febris no-hemolticas que ocorrem em ces e gatos aps transfuses de sangue total ou de
produtos plaquetrios so presumivelmente devido resposta imune do receptor a antgenos
leucocitrios do doador ou a substncias bioativas. Hipertermia (algumas vezes acompanhada de
tremores e vmitos) pode ocorrer durante a transfuso ou dentro de algumas horas aps e pode levar
at 12 horas se resolver. O tratamento pr-transfusional com antihistamnicos no previnem este
tipo de reao. O pr-tratamento com corticosterides (como a dexametasona) ou antiinflamatrios
no-esteroidais (paracetamol somente em ces) 1 hora antes da transfuso pode auxiliar na
preveno de reaes febris. A rotao de doadores tambm pode reduzir o risco destas reaes. O
uso de filtros leucocitrios uma opo, mas em vista do seu alto preo torna-se invivel na rotina
veterinria, alm disso, todos os mtodos de remoo de leuccitos resultam em alguma perda de
eritrcitos e plaquetas.
Trombocitopenia ps-transfusional pode ocorrer raramente em humanos e ces dentro de 1 a 2
semanas e dura at 2 meses. Nestes casos, a resposta imune generalizada e os anticorpos do
receptor atacam as prprias plaquetas, uma terapia imunossupressiva com prednisolona pode
acelerar a recuperao.
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94
4. Mielograma
Nayro Xavier de Alencar
Introduo
cada vez mais comum a utilizao do exame da medula ssea (mielograma) para a avaliao
das doenas do sistema hematopoitico. A tcnica para a obteno do material medular tem se
mostrado segura e de fcil execuo na clnica veterinria. O objetivo deste material fornecer aos
mdicos veterinrios informaes sobre as indicaes deste exame bem como diversas as tcnicas de
coleta e preparao de lminas de medula ssea.
Importncia
O exame da medula ssea (mielograma) tem sido amplamente utilizado no apenas no
diagnstico das doenas do sistema hematopoitico, como as citopenias (anemia, leucopenia e
trombocitopenia), mas tambm no estadiamento das neoplasias, como o linfoma e as leucemias de
origens diversas e na pesquisa de parasitas (Leishmania sp). Alm disso, tem sido cada vez mais
comum a utilizao desta tcnica como via para procedimentos teraputicos (coleta de material e
infuso de substncias).
95
96
de
policromasia,
metarrubrcitos
anormalmente
grandes,
neutrfilos
hiper-segmentados,
Colheita do material
Aspirados e fragmentos de medula ssea para biopsia podem ser facilmente obtidos de todos
os animais domsticos e tambm de animais de laboratrio. A preparao de lminas deste material
para posterior fixao e colorao fornece um excelente material para avaliao citolgica.
97
98
Figura 1. Agulhas especiais para colheita de medula ssea: (1) Komiyashiki, (2)
Illinois e (3) Bierman (BD).
A seleo do local para a puno varia de acordo com o animal em questo (Figura 2). O local
mais utilizado em pequenos animais a crista dorsal da asa do lio. Em animais muito pequenos, como
gatos e filhotes de ces, ou ainda em animais excessivamente obesos pode-se usar a fossa trocantrica
do fmur ou o aspecto crnio-lateral do tubrculo maior do mero (Figura 2). A colheita no mero
talvez seja aquela que oferea mais facilidade na obteno do material, porm, a proximidade com a
cabea do animal deve alertar o profissional para o risco de acidentes. Nos grandes animais o local
mais utilizado o esterno (Figura 3) podendo o animal ser mantido em estao (eqinos e bovinos) ou
em decbito lateral (pequenos ruminantes). A costela outro local de colheita, entretanto, este no tem
sido usado com muita freqncia em nossa rotina clnica.
2
3
1
99
Colheita da amostra
Aps a escolha do local, a rea selecionada poder ser depilada ou no, porm, uma anti-sepsia
criteriosa da rea deve ser realizada para evitar contaminao do local de colheita. Devem-se evitar
tambm locais onde j existam ferimentos. A seringa deve ser preenchida com aproximadamente 0,5
mL de EDTA 2 3% para prevenir a coagulao, embora amostras tambm possam ser obtidas sem o
uso de anticoagulantes se lminas forem preparadas imediatamente aps a colheita. Seringa e agulha
devem ser colocadas sobre uma superfcie estril prxima ao animal.
Quando se fizer uso do anestsico local, uma pequena inciso na pele, suficiente para entrar
com a agulha, pode ser feita para facilitar a penetrao no osso. O osso ou a rea a ser penetrada
estabilizada com uma mo e ento exercida uma presso firme com movimentos de rotao para
penetrar com a agulha a regio cortical do osso. Uma vez que a agulha esteja firmemente fixada no
osso, o madril removido e a seringa, contendo anticoagulante, acoplada nesta para aspirao. Uma
forte presso negativa aplicada puxando-se o embolo da seringa vrias vezes, porm, para evitar
hemodiluio esta presso deve ser liberada assim que aproximadamente 0,5 mL de medula tenha
entrado na seringa. Se aps a aspirao no se observar material medular na seringa, esta deve ser
removida e o mandril recolocado para possibilitar o reposicionamento da agulha com ligeiro avano
por meio de rotao da mesma. Se mesmo com o reposicionamento o material no for obtido, deve-se
retirar a agulha e tentar colher em outro local.
100
Uma vez a medula tenha sido obtida, agulha e seringa so removidas do animal e esta
homogeneizada para evitar a coagulao do material. A seringa deve ser desconectada da agulha e o
material transferido para uma placa de petri. Com este procedimento fica mais fcil avaliar o sucesso
da colheita pela observao de espculas medulares (estroma e clulas associadas), que so
imprescindveis para uma adequada avaliao da medula ssea.
A colheita de fragmentos de medula ssea para histopatologia pode ser obtida com agulhas
especiais (Jamshidi e Rosenthal) utilizando-se basicamente o mesmo procedimento usado para puno
aspirativa. Uma vez que a agulha esteja fixada no osso o mandril removido e esta rotacionada em
um nico sentido preenchendo-a com material medular. Em seguida, remove-se a agulha do animal e
com o auxlio do mandril retira-se o fragmento de dentro da agulha empurrando-o em sentido
contrrio, sempre da ponta da agulha em direo do corpo da mesma, para evitar o esmagamento do
fragmento. Algumas lminas podem ser confeccionadas pelo rolamento do fragmento sobre lminas
histolgicas antes de se transferir o material para um frasco contendo formol neutro tamponado a 10%
para fixao e posterior processamento.
No tocante s vantagens de ambos os mtodos podemos dizer que o aspirado da medula ssea
propicia excelente detalhe celular do material obtido alm de fornecer resultados rpidos e a um custo
relativamente baixo. A biopsia (histopatologia) melhor para determinar alteraes do estroma
medular, como mielofibrose, alm de avaliar mais adequadamente celularidade, estoque de ferro e
acumulao focal de clulas neoplsicas na medula ssea. A biopsia especialmente til quando as
colheitas aspirativas so improdutivas e na avaliao do envolvimento neoplsico medular tal como no
estadiamento do linfoma.
Preparao da lmina
A preparao de lminas requer cuidadosa ateno do profissional uma vez que mesmo a mais
adequada puno ter sido intil se no forem preparadas lminas de boa qualidade. As lminas devem
ser preparadas imediatamente aps a colheita se o anticoagulante no tiver sido utilizado ou dentro de
uma hora aps a colheita quando o EDTA for usado. Sempre que possvel a preparao das lminas
deve ser realizada to logo se obtenha o material. Nos casos em que o envio da amostra para o
laboratrio no for possvel em tempo hbil, as lminas devem ser preparadas na clnica ou, quando
possvel, o animal deve ser encaminhado ao laboratrio para a colheita.
A tcnica de preparao das lminas muito simples e pode ser efetuada mesmo por indivduos
com pouca prtica. Aps a colheita da medula ssea o material transferido para uma placa de Petri
para se observar melhor a presena de espculas medulares (pequenos fragmentos semelhantes
gelatina) com movimentos de inverso da placa. Uma vez visualizadas, coloca-se perpendicular a estas
espculas um tubo capilar (microhematcrito) com o objetivo de capturar algumas destas estruturas
101
(Figura 4). Em seguida transfere-se o contedo do tubo capilar para uma lmina e coloca-se sobre esta
outra lmina no mesmo sentido da primeira. O objetivo deste procedimento concentrar um maior
nmero de espculas no centro da lmina, diminuindo, por ao da capilaridade, a quantidade de
sangue nesta. Aps o sangue se espalhar entre as duas lminas estas so separadas deslizando-se uma
sobre a outra sem empregar qualquer presso sobre elas (Figura 5). A lmina com o material deve ser
rapidamente seca ao ar para melhor qualidade do material.
As lminas so ento fixadas em metanol por cinco minutos e coradas por corantes tipo
Romanowsky (Giemsa, May-Grmwald Giemsa, Leishman). Na nossa rotina o MGG tem se mostrado
excelente para a avaliao citolgica da medula ssea devido suas qualidades tintoriais e rapidez na
colorao das lminas. Em algumas situaes, outras coloraes podem ser necessrias como o caso
do Azul-da-Prssia par avaliao do ferro medular e coloraes citoqumicas especiais (Sudan Black,
peroxidase, etc.) para os casos de leucemia.
102
Nem sempre necessria a avaliao citolgica quantitativa da medula ssea para uma
avaliao clnica do animal. Uma viso geral da resposta medular pode ser obtida por meio da
avaliao qualitativa da relao mielide-eritride (M:E), que expressa a proporo do nmero total de
clulas da srie granuloctica (mielide) e o total de eritrcitos nucleados da srie eritroctica
(eritride).
A relao mielide/eritride (M:E) calculada pela contagem de 500 clulas determinando a
relao entre clulas granulocticas (incluindo granulcitos maduros) e clulas eritrides nucleadas. A
relao M:E est geralmente entre 0,75 e 2,5 em ces, entre 1 e 3 em gatos, entre 0,5 e 1,5 em eqinos
e 0,77 e 1,68 em ovinos.
O aumento da celularidade observado em medulas que esto respondendo a citopenias
perifricas, como por exemplo, as anemias regenerativas, leucopenias e trombocitopenias. Medulas
hiperplsicas tambm so observadas em animais com um aumento na demanda para produo de
leuccitos (leucocitose) e ainda quando a medula esta invadida por clulas neoplsicas (mielofitise).
Megacaricitos so as maiores clulas hematopoiticas na medula ssea podendo medir at
150 m, sendo facilmente reconhecidas em lentes de baixo aumento. Em uma medula ssea normal a
maioria dos megacaricitos devem ser maduros. Um nmero aumentado de clulas imaturas pode ser
observado em respostas regenerativas as trombocitopenias perifricas.
Em uma medula adequadamente celular, uma relao M:E menor que 0,5 seria sugestivo de
uma hiperplasia eritride ou de uma hipoplasia granuloctica. O grau de celularidade da medula
associado com o hemograma deve indicar a interpretao apropriada para o caso. Por outro lado, uma
relao M:E maior que 2,0 sugere uma hipoplasia eritride ou uma hiperplasia granuloctica.
103
Uma medula ssea normal pode conter at 15% de linfcitos pequenos e 2% de plasmcitos.
Moncitos, macrfagos e clulas em mitose normalmente no excedem 1 a 2% do total de clulas
nucleadas. Osteoclastos e osteoblastos so raramente vistos na medula ssea, exceto em animais em
crescimento. Qualquer aumento numrico destas clulas, ou ainda, alterao da sua morfologia normal
deve ser referenciada no exame da medula ssea.
Plasmcitos so clulas derivadas dos linfcitos B em resposta a estimulao antignica,
proliferao e maturao. Estas clulas podem ser encontradas em qualquer tecido, porm so mais
numerosos em tecidos envolvidos na produo de anticorpos. So comumente encontradas em
linfonodos antigenicamente estimulados e outros tecidos linfides ativos, tais como, o bao e a medula
ssea. Plasmcitos em atividade secretria geralmente contm vrias vesculas hipertrofiadas
derivadas do reticulo endoplasmtico. Estas vesculas, denominadas de corpsculos de Russel,
contm um material granular a floculento que representa molculas de imunoglobulinas recentemente
sintetizadas. Mott cell o termo usado para denominar plasmcitos que apresentam mltiplos
corpsculos de Russel no seu citoplasma.
Exames citolgicos da medula ssea so teis para avaliao de distrbios do metabolismo do
ferro. A reao do Azul-da-Prssia, em que o ferro inico reage com uma soluo cida de
ferrocianeto produzindo uma cor azul, comumente utilizada para esse fim.
possvel avaliar as reservas de ferro corando-se os tecidos com o Azul-da-Prssia. Isto se
aplica especialmente em preparados da medula ssea e nas biopsias hepticas. Pode-se dizer que a
presena de ferro corvel nas clulas reticuloendoteliais da medula ssea elimina a deficincia de ferro
como causa da anemia.
Exceto para gatos, a medula ssea de animais domsticos adultos exibe ferro corvel
(hemossiderina) dentro de macrfagos. Na deficincia de ferro, macrfagos e eritrcitos em
desenvolvimento no contm grnulos de ferro corveis. Por outro lado, quando a sntese do heme est
prejudicada, a mitocndria acumula excesso de agregados amorfos de ferro e um grande anel de
grnulos siderticos azuis rodeiam o ncleo do eritroblasto.
A grande vantagem da avaliao do ferro medular em relao s determinaes sricas de
ferro, capacidade total de ligao do ferro (CTLF) e ndice de saturao de transferrina (IST) que
estes podem no diferenciar a depleo dos estoques de ferro das condies associadas aos defeitos da
liberao do ferro pelo sistema mononuclear fagocitrio, como ocorre na anemia da doena
inflamatria (ADI).
104
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106
5. URINLISE
Snia Terezinha dos Anjos Lopes
Angela Veiga
107
Funo
Filtrao do sangue
Tbulo proximal
Segmento delgado da ala de Henle
108
Filtrao glomerular
O glomrulo constitui uma rede de capilares especificamente designado para reter
componentes celulares e protenas de alto e mdio peso molecular no sistema vascular enquanto
provem um fluido tubular que inicialmente possui uma composio eletroltica e aquosa
idntica a do plasma. O fluido tubular inicial chamado de filtrado glomerular e o seu
processo de formao conhecido como filtrao glomerular. A taxa de filtrao glomerular
(TFG) um parmetro para avaliao da funo renal.
O tufo glomerular coberto por uma camada de clulas epiteliais denominada Cpsula de
Bowman. A rea entre o glomrulo e a cpsula de Bowman denominada espao de Bowman
onde o stio da coleo de filtrado glomerular que vai desembocar no primeiro segmento
tubular, o tbulo proximal.
A estrutura dos capilares glomerulares importante para determinar a taxa e seletividade da
filtrao glomerular. A permeabilidade desses capilares de 100 a 500x maior comparado a um
capilar normal. A presena de numerosas fenestras nas clulas endoteliais dos capilares
glomerulares permite esta permeabilidade. Devido a isso, o volume filtrado produzido muito
grande porm com uma grande seletividade para tamanho molecular. A membrana glomerular
praticamente impermevel a todas as protenas plasmticas, porm altamente permevel a
outras substncias dissolvidas no plasma normal. Essa permeabilidade seletiva responsvel
109
monossacardeo) e sacarose nula, o que significa que uma vez que essas substncias foram
filtradas para dentro do filtrado glomerular so na totalidade eliminadas pela urina.
O controle da permeabilidade do canal coletor gua feito pelo ADH. Em situaes onde
h secreo excessiva desse hormnio, a gua reabsorvida para o interstcio medular em
grandes quantidades, reduzindo assim o volume de urina e concentrando a maioria dos solutos.
A segunda caracterstica importante do epitlio do canal coletor sua capacidade de
secretar H+, contra um gradiente muito alto desses ons; desempenhando um papel
extremamente importante no controle do equilbrio cido-bsico dos lquidos corporais.
Fatores que afetam a filtrao glomerular
Os rins possuem habilidade para manter a taxa de filtrao glomerular (TFG) dentro dos
padres fisiolgicos em um nvel relativamente constante a despeito das mudanas de presso
sangnea e do fluido sangneo renal. A TFG controlada pela modulao da presso
sangnea sistmica e volume intravascular, pelo controle intrnseco do fluxo sangneo renal,
presso capilar glomerular e o coeficiente de ultrafiltrao (Cf). Esses efeitos so mediados
primariamente por fatores humorais, sendo o mais importante o sistema renina-angiotensinaaldosterona (RAA). O controle intrnseco da perfuso capilar glomerular mediado tambm por
sistemas de controle da resistncia do fluxo nas arterolas aferentes e eferentes. Estes dois
sistemas autoreguladores so, o reflexo miognico e o feedback tubuloglomerular.
O sistema renina-angiotensina-aldosterona um mecanismo importante no controle da TFG
e fluxo sangneo renal (FSR). A renina um hormnio produzido por clulas especializadas da
parede da arterola eferente, as clulas mesangiais granulares extraglomerulares. A liberao da
renina estimulada por uma diminuio da presso de perfuso renal (Figura 2).
Nveis elevados de angiotensina II tambm estimulam a produo e liberao de
prostaglandinas vasodilatadoras renais (PGE2 e PGI2) que so fatores moderadores do sistema
renina-angiotensina-aldosterona. A funo deles contrapor ao efeito vasoconstrictor da
angiotensina II na vascularizao intrarenal e auxiliar na manuteno da resistncia renal
vascular em nveis normais ou prximos do normal. Sem este efeito, a vasoconstrio
generalizada resultaria numa reduo da TFG e FSR, a despeito da elevao da presso
sangnea.
111
A aferncia aos rins provm da artria aorta que se divide em artria renal e esta em arterola
aferente, capilares glomerulares e peritubulares. Por sua vez a eferncia dos rins executada
pela arterola eferente que drena para a veia renal. A unidade morfo-funcional renal o nfron,
estrutura tubular microscpica que realiza todas as funes dos rins, estando presente em grande
nmero, que varia de 300 mil a 1 milho, dependendo da espcie animal. O nfron est divido
em duas pores, sejam o glomrulo de Malpighi e os tbulos (contorcido proximal, ala de
Henle, contorcido distal e tbulo coletor), continuando em ducto coletor, que desemboca na
pelve.
As funes dos nfrons resumem-se em 3 aes: filtrao glomerular, reabsoro e
secreo tubulares. A partir disso, o plasma equivalente a 20% do dbito cardaco filtrado,
dando origem ao filtrado glomerular e, consequentemente, ao lquido tubular, que aps
mecanismos de reabsoro de alguns nutrientes e secreo de metablitos dar origem a urina, o
principal lquido de excreo do organismo. A urina coletada na pelve renal, que se continua
em 2 ureteres, os quais penetram na bexiga onde se armazena a urina, a qual excretada atravs
da uretra.
Coleta de urina
A melhor urina a primeira da manh, uma vez que est concentrada, devido s horas sem
ingesto hdrica durante a noite. Assim apresenta elementos que expressam a real situao do
trato urinrio. A urina pode ser colhida por mico espontnea, cateterismo ou cistocentese,
sendo que cada uma das tcnicas produz algumas alteraes que devem ser consideradas quando
da interpretao dos resultados da urinlise.
112
Mico espontnea: sendo a tcnica mais fisiolgica, a que causa menos agresso ao
animal. Deve-se tomar o cuidado com contaminao ambiental neste tipo de coleta. Uma vez
que a poro final do trato urinrio contm bactrias saprfitas, preconiza-se a limpeza vaginal
ou prepucial previamente coleta e que se despreze o primeiro jato. Podem ser encontrados
proteinria e bacteriria branda sem significado clnico quando se emprega este mtodo de
coleta urinria. Este tipo de coleta no deve ser empregado em cadelas ou gatas na presena de
cio devido contaminao da urina com sangue proveniente do trato reprodutivo.
Cateterismo: Existem catteres urinrios (sondas) especficas para cada espcie e sexo.
Podem ser usadas sondas humanas para a cateterizao de ces machos, sendo o calibre varivel
com o tamanho do animal. Emprega-se esta metodologia quando no se obteve resultados com a
tentativa de coleta por mico espontnea. o mtodo mais traumtico ao animal, podendo ser
utilizado em ces e gatos machos obstrudos, na tentativa de desobstruo. Nos machos deve ser
realizada uma limpeza prepucial com gaze umedecida. Aps o pnis exteriorizado e a sonda
inserida cuidadosamente, atentando-se para que ela no seja contaminada no ambiente e assim,
carreie microorganismos para o interior do trato urinrio do paciente. Ao introduzir a sonda
haver trs pontos de resistncia em ces machos: o osso peniano, a entrada da pelve e a entrada
da bexiga. Assim que a sonda atingir a bexiga, a urina drenada por capilaridade, no caso de a
bexiga estar cheia, ou pode ser aspirada com seringa, cuidando-se para no lesionar a parede
vesical com a ponta da sonda.
Como a uretra de cadelas e gatas mais curta, as sondas so metlicas, podendo causar ainda
mais traumatismos. O animal poder permanecer em estao ou decbito lateral durante a
sondagem. Deve-se realizar uma limpeza vulvar antes de se iniciar a tcnica. A partir da, um
especulo introduzido na vagina, no sentido cranio-dorsal, tentando-se desviar do fundo de saco
vaginal. Em seguida o meato urinrio visualizado com o auxlio de uma fonte de luz e a sonda
esterilizada inserida cuidadosamente at atingir a bexiga, momento em que a urina drenada
por capilaridade. Neste tipo de coleta espera-se encontrar na urinlise proteinria, hematria e
presena de nmero moderado de clulas.
Cistocentese: Consiste na coleta de urina atravs da puno vesical com agulha 12x8
acoplada a seringa. Para a realizao deste tipo de coleta, necessariamente a bexiga deve estar
repleta e ser palpvel. Esta tcnica utilizada em casos em que a tentativa de coleta por mico
espontnea no surtiu resultados ou quando requerido exame bacteriolgico da urina, j que a
bexiga normalmente livre de patgenos. Apesar da puno abdominal e vesical, este mtodo
leva a menos traumatismos do que o anterior, podendo ser guiado por ultrassom. O animal pode
ser contido em decbito lateral ou dorsal. A regio ventral deve ser tricitomizada e submetida a
antissepsia. A bexiga deve ser palpada e firmada em uma das mos, enquanto que com a outra a
agulha acoplada a seringa introduzida crnio caudalmente, na regio mdia da bexiga, em um
ngulo de 45, com o objetivo de se evitar a regio cranial da bexiga, a qual apresenta um
113
espessamento fisiolgico da parede. medida que a agulha penetra na bexiga, a urina drena
para a seringa mediante presso negativa.
Cada espcie animal apresenta particularidades, as quais podem influenciar no mtodo de
coleta urinria.
Ruminantes: O estmulo pra mico em vacas pode ser alcanado massagendo-se o clitris.
Em touros e carneiros, amarra-se um frasco de coleta e solta-se o animal a campo, sendo que
quando o animal urinar, a urina ficar no frasco. No se realiza sondagem em ruminantes
machos devido a presena do S peniano e/ou apndice vermiforme.
Eqinos: Estimula-se a mico do garanho ao lev-lo para perto da gua em cio. guas so
facilmente cateterizadas, tendo-se apenas o cuidado de detectar o meato urinrio por palpao
transvaginal e introduzir o cateter guiado pela mo que palpa o meato.
Em pequenos animais podem ser realizados os trs tipos de coleta, cada uma com seus
aspectos positivos e negativos, sendo indicada de acordo com cada caso. Um bom estmulo para
a mico de caninos passear com o animal.
Acondicionamento da amostra
A amostra de urina apresenta alta sensibilidade temperatura ambiente. A urina deve ser
analisada at no mximo 2 h aps sua coleta se mantida fora de refrigerao. Aps 30 minutos a
esta temperatura inicia a multiplicao bacteriana, portanto dever ser acondicionada a 4C no
mximo por 12 h se no for analisada at 2 h. Nesse caso, as bactrias, quando presentes,
proliferam rapidamente e se forem redutoras de uria iro alcalinizar a amostra. A urina
alcalina, por sua vez, tende a dissolver os cilindros e ocasionar a cristalizao dos solutos
alterando o aspecto macro e microscpico da urina. Com a manuteno da urina no ambiente,
vrias outras alteraes ocorrem, interferindo nos resultados do exame e, consequentemente,
com a sua interpretao, tais como consumo de glicose, caso esteja presente e destruio de
elementos figurados, como clulas e cilindros. Temperaturas inferiores de refrigerao podem
elevar a densidade especfica da amostra e podem degradar os constituintes celulares.
Antes da anlise da urina refrigerada, esta deve retornar temperatura ambiente
previamente, uma vez que a refrigerao torna susceptvel a cristalizao de determinadas
substncias ora presentes na amostra.
Existem conservantes que, ao serem adicionados urina, atuam como estabilizantes. So eles
o tolueno, o timol e a formalina. Indica-se o uso de 1 gota de formalina a 40% para cada 30 mL
de urina. Deve-se ter em mente que os conservantes causam alteraes qumicas na urina,
inviabilizando o exame qumico.
A urina deve ser colhida em recipiente limpo, podendo ser de vidro ou plstico e
obrigatoriamente estril se a amostra for submetida a isolamento bacteriano e antibiograma. Se a
amostra de urina no for analisada imediatamente aps a coleta, os frascos escuros so
114
preferveis pois a luz ambiental pode ocasionar a degradao de certos constituintes da urina,
tais como bilirrubina e urobilinognio, em menos de uma hora.
A primeira urina da manh prefervel, pois provavelmente contm os elementos de
significado diagnstico, enquanto a ingesto de lquidos durante o dia dilui a urina. O frasco
contendo a urina deve ser identificado, e enviado junto com a requisio devidamente
preenchida. A seguir um exemplo de requisio:
Exame n : _________
Proprietrio :
RG :
Data: /
Espcie :
Raa :
Sexo :
Idade :
Horrio coleta :
Diagnstico provisrio:
Sob Tratamento? Qual?
Histria Clnica resumida :
Coleta: ( ) Cistocentese ( ) Cateterismo ( ) Mico natural
A URINLISE
A urinlise, ou exame comum de urina (ECU), tambm chamado exame qumico de urina
(EQU), consiste em um exame de primeira linha. Isso implica na sua utilizao como um dos
primeiros exames complementares a serem solicitados pelo clnico veterinrio, juntamente com
o hemograma e o exame parasitolgico de fezes. Este exame presta grande auxlio, uma vez que
traz informaes no somente sobre o trato urinrio (inferior e superior), mas tambm sobre
outros rgos e sistemas, tambm servindo como exame de triagem e de check-up. O EQU est
dividido em 3 partes: exame fsico, exame qumico e exame do sedimento.
Volume
O volume de urina produzido diariamente pode ser bastante varivel, dependendo da espcie
e raa do animal, estado de hidratao, temperatura ambiente e umidade relativa do ar,
atividade, dieta, fluidoterapia, tamanho e peso do animal, ingesto de medicamentos e doenas
que interfiram na manuteno hdrica do organismo. Como em animais a obteno de urina
padro de 24 horas muito difcil, o volume na verdade a quantidade de urina recebida pelo
laboratrio. O volume mnimo para a realizao adequada do exame de 10 mL. Em condies
de sade, o volume urinrio inversamente proporcional densidade urinria especfica;
portanto, o aumento da quantidade de urina excretada, ou poliria, est associada densidade
especfica baixa; e a oligria, diminuio do volume urinrio est associada densidade
especfica elevada (Tabela 2). Se a funo renal estiver em perfeitas condies, em um animal
desidratado tem-se uma oligria fisiolgica, acompanhada de urina concentrada. J um animal
desidratado com poliria, suspeita-se de alguma patologia (renal ou extra-renal).
115
Cor
A cor fisiolgica da urina amarela, a qual pode variar de mais claro a mais escuro. A
excreo de alguns compostos, tanto exgenos como exgenos, na urina pode levar a alterao
de sua colorao. A cor da urina deve sempre ser considerada associada densidade especfica e
volume urinrio. A intensidade da colorao urinria depende da concentrao de urocromos, e
varia inversamente com o volume urinrio. A colorao normal da urina pode variar do
amarelo-palha ao mbar claro, e em eqinos at a tonalidade amarronzada. Entre as cores mais
importantes:
- Plida ou amarelo-clara: geralmente uma urina diluida com densidade baixa e associada
poliria. Pode ser observada na doena renal terminal, ingesto excessiva de lquidos, Diabetes
insipidus, hiperadrenocorticismo, piometra, fase polirica da nefrose txica.
- Amarelo-escura ao mbar: urina concentrada com densidade elevada e associada oligria.
Pode ser associada febre, desidratao, diminuio de ingesto hdrica, nefrite aguda (fase
oligrica), nefrose txica.
- Alaranjado-mbar a amarelo-esverdeada: forma uma espuma alaranjada ou esverdeada
quando agitada e se relaciona com a presena de bilirrubina.
- Avermelhada: pode indicar presena de hemoglobina e/ou hemcias. Aps a centrifugao
ou sedimentao a hematria simples apresenta-se com sobrenadante lmpido.
- Marron: pode indicar presena de hemoglobina, mioglobina, ou urina normal de eqinos
aps certo tempo (oxidao por pirocatequina).
- Azul-esverdeada: pode ser devido ao azul de metileno, que comumente encontrada na
composio de antisspticos urinrios.
A urina normal quando agitada forma uma certa quantidade de espuma branca, tpica.
Na proteinria, a quantidade de espuma abundante e demora a desaparecer. Na bilirrubinria a
espuma frequentemente apresenta-se esverdeada ou acastanhada; na hemoglobinria, a espuma
apresenta-se avermelhada.
Odor
O odor fisiolgico da urina caracterizado como sui generis, o qual varia entre as espcies.
A urina normal dos herbvoros tem um odor aromtico, mais intenso nos ruminantes, enquanto
que nos carnvoros picante e aliceo. O odor da urina dos machos de certas espcies
pronunciado, e s vezes at repugnante (suno, felino e caprino). O odor normal da urina
conferido pela presena de cidos orgnicos volteis. Entre os odores mais importantes:
- Ptrido: indica necrose tecidual de vias urinrias
- Adocicado: presena de corpos cetnicos; associado a Diabetes melito e acetonemia da
vaca leiteira
- Amoniacal: observado na urina de animais com infeco bacteriana.
116
Aspecto
O aspecto fisiolgico da urina lmpido, a exceo do eqino, cuja urina turva devido
presena de cristais de carbonato de clcio e muco. A presena na urina de elementos figurados
podem torn-la levemente turva a turva. Para se detectar esta caracterstica transfere-se a
amostra para um tubo transparente de vidro. A capacidade de se realizar a leitura de algo atravs
do vidro caracteriza a urina como lmpida. A observao das letras com impossibilidade de
leitura a caracteriza como levemente turva e a no observao de letras, como turva.
Os elementos que levam turbidez da urina so aqueles que no se dissolvem na poro
aquosa, como bactrias, muco, cristais, cilindros, leuccitos, eritrcitos e clulas epiteliais de
descamao. Estes elementos faro parte do sedimento aps o ato da centrifugao e no
alteram a densidade especfica. A contaminao da urina por exsudato de trato genital tambm
pode ser a causa da turvao da urina colhida sem cateterizao. O nico meio de se saber a
causa da turbidez o exame microscpico.
Consistncia
A consistncia fisiolgica da urina de todas as espcies, excetuando-se a eqina, lquida.
Os eqinos apresentam a urina viscosa devido presena de glndulas produtoras de muco no
trato urinrio inferior. O fato de esta espcie formar cristais de carbonato de clcio com mais
facilidade tambm pode colaborar com a viscosidade e tornar a urina levemente turva. Nas
demais espcies, a viscosidade pode ocorrer em infeces severas do trato urinrio, com
presena macia de muco.
Densidade
Tambm chamada de gravidade especfica, consiste na relao entre a massa de uma soluo
e igual volume de gua e avaliado por refratometria, comparando-se com o ndice de refrao
da gua na presena de luminosidade. Representa a concentrao dos slidos em soluo
urinria e retrata o grau de reabsoro tubular ou da concentrao renal. Preferencialmente
obtida por refratometria uma vez que as tiras urinrias no so eficazes para determinar a
densidade em caninos. Para determinao, prefere-se o uso do sobrenadante aps a
centrifugao. A densidade urinria influenciada por fatores como peso corporal, dieta,
exerccio, idade, condies climticas e metabolismo.
Caracteriza-se como uma das caractersticas mais importantes da urina. Com esta informao
temos a possibilidade de avaliar a funo concentradora dos nfrons. Porm a densidade deve
sempre ser analisada luz do estado de hidratao do paciente. Caso no se tenha esta
informao, o teste de privao hdrica e uma nova avaliao da densidade pode auxiliar nesta
investigao. De um modo geral, pode-se considerar uma variao entre 1.015 e 1.045, sendo
117
que uma nica determinao fora destes limites no significa, obrigatoriamente, alterao renal.
Portanto, deve ser interpretada junto ao grau de hidratao e ingesto hdrica recente do animal.
A densidade fisiolgica em um animal desidratado deve ser maior que 1.030-1.035. Caso
seja inferior isto significa que os rins no esto com sua capacidade de concentrar urina
totalmente funcionais ou que esto refratrios ao ADH, como ocorre em algumas patologias
renais, ou ainda, que o ADH no est sendo produzido eficientemente, como ocorre na diabetes
insipidus. Indica-se neste caso uma avaliao mais detalhada.
A capacidade concentradora renal a primeira funo afetada, quando 2/3 de ambos os rins
esto afuncionais, o que caracteriza uma doena renal. A azotemia renal s comea a se
desenvolver quando nos nfrons esto comprometidos, caracterizando uma insuficincia
renal. Seja qual for o tipo de patologia renal, seja aguda ou crnica, a densidade sempre estar
baixa.
Quanto classificao, a urina pode ser denominada de hipostenrica (menor ou igual a
1.007), isostenrica (entre 1.008 a 1.012) e de elevada densidade urinria (acima de 1.030 para
ces e 1.035 para gatos). Em algumas doenas renais, observa-se h perda da capacidade renal
de concentrar a urina, reduzindo a densidade. As causas mais freqentes de alteraes na
densidade especfica urinria esto representadas na Tabela 2.
Poliria
( densidade)
Oligria
( densidade)
Patolgico
diabetes mellitus
diabetes inspida
insuficincia renal
hipoplasia renal
pielonefrite
piometra
hepatopatias
hiperadrenocorticismo
desidratao por perda
febre
pH
Os rins so um dos componentes do sistema responsvel pela manuteno do pH sangneo,
seja pela excreo ou manuteno de cidos ou bases do organismo. Para manter o pH
sangneo constante, entre 7,35 7,45, haver alterao do pH urinrio, o que corresponde a
condies alimentares e metablicas. Assim, animais que ingerem alimentos como carne e
cereais apresentam pH urinrio de cido a neutro, como carnvoros (pH urinrio 5,5-7,0) devido
presena de fosfatos cidos de sdio e clcio, enquanto que os herbvoros, com dieta mais
alcalina, apresentam o pH urinrio fisiolgico entre 7,0-8,5 devido presena de bicarbonato de
clcio solvel. Neonatos de qualquer espcie, por ingerirem unicamente leite, apresentam pH
urinrio cido.
As alteraes do pH urinrio geralmente indicam mais uma alterao sistmica do que um
processo localizado em nvel de sistema urinrio. Alteraes metablicas, como a fase cetoacidtica da diabetes mellitus, insuficincia renal, dieta hiperproteica, administrao de
acidificantes (cloreto de amnio, cloreto de clcio, DL-metionina, fosfato cido de sdio),
catabolismo de protenas orgnicas (febre, jejum, diabetes mellitus), acidose metablica ou
respiratria, entre outras, tornam a urina cida.
So causas de urina alcalina atraso no processamento e m conservao da amostra, cistite
associada a bactrias produtoras de urease (Staphylococcus sp. e Proteus sp.), administrao de
alcalinizantes (bicarbonato de sdio, lactato de sdio, citrato de sdio), reteno urinria vesical
e alcalose metablica ou respiratria.
Protenas
Em condies fisiolgicas, as protenas so 100% mantidas no sangue durante a filtrao
glomeular e reabsoro tubular, no estando presentes na urina. Em condies normais a
quantidade de protena na urina muito pequena e geralmente as tiras urinrias no detectam.
Porm, dependendo da concentrao urinria (urinas concentradas), do tipo de coleta de urina
ou da categoria animal (ces machos), pode-se encontrar proteinria leve, relacionada ao trato
urinrio baixo (bexiga e uretra). Para que no se tenha dvidas deve-se sempre elucidar a
origem da proteinria. A presena de protenas na urina deve ser avaliada luz da densidade
urinria e do sedimento, associado a achados clnicos.
Proteinria pr-renal: ocorre por alteraes no renais decorrentes de febre, convulses ou
exerccio muscular intenso. A hipertenso glomerular pode levar a proteinria branda, como
ocorre no hiperadrenocorticismo canino. Pode tambm estar associada a perda glomerular de
protenas de baixo peso molecular, como as produzidas nos plasmocitomas.
Proteinria renal: quando os rins perdem a capacidade de filtrao por sofrer uma alterao
de permeabilidade capilar, como ocorre em algumas doenas com deposio de
119
Renal
Ps-renal
Patologias
hemoglobinria
mioglobinria
- globulinria
nefrose / cistos renais
glomerulonefite
nefrite / pielonefrite
neoplasias / hipoplasia
pielite / ureterite
cistite / uretrite
vaginite / postite
Glicose
A glicose filtrada nos glomrulos, mas a sua maior parte reabsorvida nos tbulos
proximais, portanto no deve aparecer na urina em condies fisiolgicas. A glicosria ocorre
sempre que a glicemia exceder a capacidade de reabsoro renal (Tabela 4).
120
Glicemia (mg/dl)
> 100
> 180
> 280
> 600
Tambm deve ser verificada a origem desta glicosria como renal ou no-renal. A glicosria
renal (perda da capacidade reabsortiva tubular) ocorre acompanhada de densidade baixa,
sedimento caracterstico de leso renal e azotemia, enquanto que a glicemia permanece dentro
de valores fisiolgicos (70-110 mg/dL). Por outro lado, a glicosria extra renal pode acontecer
se os valores sangneos de glicose extrapolam a capacidade reabsortiva dos rins (limiar renal),
que est em torno de 180-220 mg/dL (plasmtica). Isso pode ocorrer na diabetes mellitus,
associada a hiperglicemia de jejum persistente e densidade normal.
A glicosria pode tambm estar associada ao hiperadrenocorticismo, no tratamento
parenteral com glicose e fructose, na pancreatite necrtica aguda, na ingesto excessiva de
aucares e administrao parenteral de adrenalina. Nos casos em que se observa glicosria no
associada a hiperglicemia pode-se relacionar a nefropatias congnitas ou hereditrias e a
doenas renais com comprometimento da poro tubular proximal. A glicosria falso-positiva
pode ocorrer por reao qumica cruzada aps administrao de certos antibiticos, substncias
redutoras de acar e outros medicamentos.
Corpos cetnicos
A urina fisiolgica livre de corpos cetnicos (aceto-acetato, -hidroxibutirato e acetona). A
cetonria ocorre quando estes compostos aumentam no plasma (cetonemia) em decorrncia de
distrbios no metabolismo de carboidratos e cidos graxos. Exemplos de condies que levam a
cetonria so: cetose das vacas, jejum prolongado, anorexia, lipidose heptica, fase cetoacidtica da diabetes mellitus, toxemia da prenhez dos pequenos ruminantes, hepatopatias e
febre em animais jovens. As tiras usadas na rotina no so capazes de mesurar o
hidroxibutirato.
Bilirrubina
Fisiologicamente, a urina no apresenta bilirrubina. Ces machos com urina concentrada, por
apresentarem baixo limiar para excreo de bilirrubina, podem mostrar bilirrubinria discreta
fisiologicamente.
Patologicamente,
distrbios
hepticos
(hepatite
infecciosa
canina,
Leptospirose e neoplasias) ou hemolticos e a obstruo das vias biliares com colestase intra e
121
Urobilinognio
O urobilinognio um cromgeno formado no intestino por ao bacteriana redutora de
bilirrubina. Uma parte do urobilinognio excretada atravs das fezes, mas outra absorvida
pela circulao portal, retornando ao fgado e sendo eliminada pela bile. Pequena quantidade de
urobilinognio atinge os rins atravs da circulao, sendo excretado pela urina.
A fitas reagente geralmente insensvel ao urobilinognio. Para melhor interpretao devese realizar a prova de Ehrlich. A urina de ces e gatos geralmente possui reao positiva de
urobilinognio at diluio de 1:32. A ausncia ou diminuio do urobilinognio urinrio est
relacionado a distrbios intestinais de reabsoro (diarria) enquanto que o aumento em
quantidades maiores que 1 U/dL reflete dano heptico obstrutivo, hepatite por incapacidade
funcional de remoo do urobilinognio da circulao, cirrose heptica e ictercia hemoltica.
Sangue oculto
A urina fisiolgica no deve conter sangue oculto, que consiste em eritrcitos, hemoglobina
livre ou mioglobina. Para se realizar a diferenciao entre estes trs componentes (Tabela 5),
deve-se avaliar conjuntamente o sedimento. Aps a centrifugao, os eritrcitos sedimentam,
enquanto que a hemoglobina e a mioglobina permanecem no sobrenadante.
Para diferenciar hemoglobinria de mioglobinria pode-se realizar o seguinte teste:
1. Identificar as amostras positivas para mioglobina / hemoglobina pela tira reagente
2. Saturar 5 mL de urina com sulfato de amnio (2,8 g)
3. Agitar fortemente e centrifugar a 2000 rpm por 10 minutos
4. Passar a tira reagente novamente no sobrenadante:
Teste positivo = mioglobina
Teste negativo = hemoglobina
A
mioglobinria
ocorre
em
distrbios
musculares
graves,
sendo
detectado
Outros testes
A enzimria pode ser avaliada realizando-se dosagens bioqumicas das enzimas
presentes na urina, o que pode prestar grande auxlio clnico. As enzimas GGT (gama-glutamil
transferase) e FA (fosfatase alcalina) paresentam alta atividade nas clulas tubulares, sendo que
a mensurao de sua excreo por 24h consiste em um bom marcador da funo tubular. A
razo enzima/creatinina um indicador de dano tubular inicial mesmo anteriormente de o dano
afetar a densidade urinria.
123
Bactrias
Bactrias so comumente encontradas em amostras de urina devido a abundante flora
microbiana fisiolgica da vagina e meato urinrio externo e devido sua habilidade de se
multiplicar rapidamente na urina temperatura ambiente. Portanto, organismos microbianos
encontrados em todas, exceto as coletadas mais assepticamente devem ser interpretadas s vistas
dos sinais clnicos. Deve-se ter cuidado com falsa bacteriria por tempo prolongado de
exposio da amostra de urina previamente ao exame.
Uma grande quantidade de bactrias em amostra de urina fresca sugere infeco bacteriana
em algum ponto do trato urinrio, especialmente quando associada a outros sinais de inflamao
como piria, hematria e proteinria. A presena de bacteriria em caso de suspeita de infeco
do trato urinrio inferior requer cultura. O achado de mltiplos organismos reflete
contaminao. Entretanto, a presena de qualquer organismo em amostras coletadas por
cistocentese deve ser considerada significativa.
Fungos
A presena de leveduras podem ser contaminantes ou representar uma infeco fngica
verdadeira. Elas geralmente so difceis de distinguir de eritrcitos e cristais amorfos, mas so
diferenciados pela sua tendncia ao brotamento.
Eritrcitos
As hemcias so menores que os leuccitos e seu achado normal quando na quantidade de
1 a 2/campo de observao no microscpio. Quando superior a 5/campo pode ser considerado
hematria, que a presena de nmero anormal de eritrcitos na urina, devido a dano
glomerular, tumores no trato urinrio, trauma renal, leso causada por clculos urinrios, infarte
renal, necrose tubular aguda, infeces e inflamaes no trato urinrio inferior ou superior,
(pielonefrite, ureterite, cistite, pielite, prostatite), traumas (cateterizao, cistocentese,
neoplasias renais vesicais ou prostticas), congesto passiva renal, infarto renal, certos parasitas
(Dioctophima renale, Sthefanurus sp, dirofilariose), intoxicao (cobre e mercrio), distrbios
hemostticos, estro, ps-parto, nefrotoxinas e stress fsico.
Os eritrcitos tambm podem contaminar a urina proveniente da vagina (perodo estral) ou
de trauma produzido por cateterizao vesical. Teoricamente, nenhum eritrcito deveria ser
encontrado na urina, mas alguns esto presentes at mesmo em animais saudveis. Entretanto,
124
Leuccitos
Apresentam-se como clulas granulares maiores que as hemcias, porm menores que as
clulas epiteliais. Normal quando 1 a 2/campo e quando maior que 5/campo considerado
leucocitria ou piria. O termo piria refere-se presena de nmero anormal de leuccitos, os
quais podem aparecer com infeco tanto no trato urinrio inferior como superior, ou com
glomerulonefrite aguda. Geralmente, os leuccitos so granulcitos. Leuccitos provenientes da
vagina, especialmente na presena de infeces vaginais ou cervicais, ou do meato urinrio
externo podem contaminar a urina. Se cinco ou mais leuccitos por CGA aparecerem na urina
no contaminada, a amostra provavelmente seja anormal. Leuccitos tm ncleo lobulado e
citoplasma granular. Em pH alcalino, os leuccitos tendem a apresentar-se sob a forma de
grumos.
125
Clulas epiteliais
Normal quando esto ausentes ou tm discreta presena. Quando em quantidade elevada (>5
clulas/campo) podem indicar leso local ou difusa. As clulas podem ser diferenciadas quanto
sua morfologia como do epitlio renal, pelve, vesical, uretral e vaginal (Tabela 6). Em urinas de
reteno ou quando h demora de exame, as clulas podem apresentar-se degeneradas.
Clulas epiteliais tubulares renais, geralmente maiores do que leuccitos, contm ncleo
grande oval e normalmente esfoliam-se na urina em pequenos nmeros. Entretanto, na sndrome
nefrtica e condies que levam a degenerao tubular, a esfoliao maior.
Quando ocorre lipidria, estas clulas contm lipdios endgenos. Quando preenchidos com
numerosas gotculas lipdicas, so chamadas de corpsculos de gordura ovais.
As clulas epiteliais de transio da pelve renal, ureter ou bexiga apresentam bordas mais
irregulares, ncleo maior e tamanho menor que as clulas do epitlio escamoso. As clulas
epiteliais tubulares renais so menores e mais arredondadas que as do epitlio de transio, e o
seu ncleo ocupa mais espao em relao ao volume celular total.
126
Cilindros
So constitudos primariamente de mucoprotena e protena que aderem-se ou no a
outras estruturas, sendo normal quando ausentes. Representam moldes dos tbulos onde so
formados, como nos ductos coletores, tbulos contorcidos e ala de Henle. A formao dos
cilindros d-se na poro renal tubular, onde a urina atinge concentrao mxima e acidez, o
que favorece a precipitao de protenas e mucoprotenas. Qualquer leso tubular presente no
momento da formao dos cilindros pode refletir a sua composio. Deste modo os cilindros so
classificados conforme o material que contm (Tabela 7). Os cilindros no se formam em baixas
densidades ou em pH alcalino.
Cilindros hialinos so compostos primariamente de mucoprotenas (protenas de TammHorsfall) secretadas por clulas tubulares. A secreo de tais protenas (pontos verdes)
ilustrada no diagrama abaixo, formando o cilindro hialino no ducto coletor:
127
Os fatores que favorecem a formao dos cilindros so baixo fluxo urinrio, alta
concentrao de sais e baixo pH, todos os quais favorecem a desnaturao e precipitao
protica, particulamente as de Tamm-Horsfall. Cilindros proteicos com cauda longa e fina
produzidos na juno da ala de Henle com o tbulo contorcido distal so chamados
cilindrides. Cilindros hialinos podem ser encontrados, em pequeno nmero, em animais
saudveis.
128
Quando cilindros celulares permanecem nos nfrons por algum tempo antes de serem
liberados na urina, as clulas podem se degenerar, produzindo o cilindro granular e,
posteriormente, cilindro creo. Acredita-se que estes dois ltimos tipos so derivados de
cilindros epiteliais tubulares renais. Cilindros largos emanam de tbulos danificados e dilatados
e so, portanto, encontrados no estdio final de insuficincias renais crnicas.
No estdio final de doenas renais o sedimento torna-se escasso, pois os poucos nfrons
remanescentes produzem urina diluda.
Composio
mucoprotenas e
protenas
muco + hemcias
muco + leuccitos
muco + restos
celulares
muco + outras
estruturas
cilindros angulares
Interpretao
geralmente associados a proteinria, processos transitrios
como febre e congesto, doena renal
hemorragia glomerular e tubular, glomerulonefrite aguda,
nefropatia crnica em fase evolutiva
associados a inflamao renal, pielonefrites e abscessos renais
semelhante presena de clulas isoladas, inflamaes renais
degenerao tubular, necrose de clulas tubulares
devido grande permanncia tubular, fase final da degenerao
tubular, leso tubular crnica
129
Cristais
So produtos finais da alimentao do animal e dependem para sua formao do pH urinrio.
Grande quantidade de cristais pode indicar urolitase, embora possa haver clculos sem
cristalria e vice-versa. Exemplos de cristalria em pH alcalino e cido na Tabela 8. Cristais
comuns encontrados mesmo em animais saudveis consistem em oxalato de clcio, carbonato
de clcio, fosfato triplo e fosfato amorfo. Cristais incomuns incluem cistina, tirosina ou leucina,
encontrados em alteraes no metabolismo de protenas e doenas hepticas. Cristais de
bilirrubina e biurato de amnio so encontrados em doenas hepticas obstrutivas.
pH cido
urato amorfo
oxalato de clcio
cido hiprico
cistina (raro)
130
Renais
Ps-renais
Creatinina
131
Eletrlitos
Sdio
132
Tabela 10. Comparao das alteraes encontradas na urinlise em algumas doenas renais e no renais
Doena
Doena renal aguda
Insuficincia Renal Aguda
(IRA)
Insuficincia Renal Crnica
(IRC)
Cistite
Neoplasias urinrias
Hemlise
Hepatopatia
Diabetes melito
Diabetes inspido
Exame fsico/qumico
densidade normal
densidade reduzida
proteinria
densidade reduzida*
densidade reduzida*
pH reduzido
proteinria ps-renal
densidade normal
densidade baixa
hemoglobinria
urobilinognio elevado
bilirrubina
urobilinognio alterado
glicosria, cetonria
densidade reduzida, poliria
133
Sedimento
cilindros
leuccitos e hemcias
cilindros
leuccitos e clulas epiteliais
poucos ou sem cilindros
bacteriria, leucocitria
clulas neoplsicas
hematria
hematria
cristais de bilirrubina
bacteriria, leucocitria
Casos clnicos
1) Anamnese: canino, M, 5 anos, Poodle. Abdmen distendido, dor palpao lombar, poliria.
Exames solicitados: anlise do lquido abdominal, bioqumica heptica e renal, urinlise
Anlise do lquido abdominal
Volume: 10 mL
Cor: incolor
Odor: inodoro
D=1015
pH=7,5
Prot:1,0g/dL
Celularidade: 850nucleadas/L
Diferencial: mesoteliais, raras hemcias e linfcitos
Urinlise:
Fsico
Volume: 20 mL
Aspecto: turvo
Odor: s.g
D= 1021
Qumico
pH: 6,0
Protena:+++
Glicose:+
Cetona: neg
Bilirrubina:neg
Sangue oculto:+
Sedimento
Hemcias: 10/CGA
Leuccitos: 8/cga
Clulas renais: 2/cga
Cilindros hialinos: 8/CGA
Cilindros granulosos: 2/CGA
Bioqumica srica
BUN: 20 mg/dL (7-25)
Creatinina: 0,8 mg/dL (0,8-1,5)
Glicose: 90 mg/dL (70-110)
ALT: 30 U/L (15-58)
FA: 55 U/L (10-73)
2) Anamnese: felino, Persa, M, 3 anos apresentando desidratao moderada, anria, bexiga repleta.
Exames solicitados: urinlise, bioqumica
Urinlise (coleta: cistocentese)
Fsico
Volume: 15 mL
Cor: amarronzado
Odor: ptrido
D = 1045
Aspecto: turvo
Qumico
pH: 8,0
Prot: ++
Sangue oculto: ++
Sedimento
Hemcias e leuccitos: 10-15/CGA
134
4) Anamnese: felino, M, srd, 11 anos com oligria, fraturas patolgicas, mucosas hipocoradas,
desidratao, vmitos halitose, lceras orais.
Exames solicitados: hemograma, urinlise, bioqumca
Hemograma
Eritrcitos: 4/mm(5,8-10,7)
Hemoglobina:6,6g/dL(9-15)
Hematcrito:20% (30-47)
135
5) Anamnese: canino, macho, SRD, 10 anos, chegou ao HCV com mucosas hipocoradas, halitose,
lceras orais, vmitos, desidratado e urinando pouco.
Hemograma
Eritrcitos (5,4-7,8 X106/mm3)
Hemoglobina (13-19 g/dl)
Hematcrito (37-54 %)
VCM (62-74 fl)
CHCM (32-36 g/dl)
PPT (6-8 g/dl)
Fibrinognio (100-400 mg/dl)
LEUCOGRAMA
Leuccitos totais (6-17X103/mm3)
Bastonetes (0-0,3X103/mm3)
Neutrfilos segmentados (3-11,5 X103/mm3)
Linfcitos(1-4,8 X103/mm3)
Eosinfilos (0,1-1,25 X103/mm3)
Moncitos (0,13-0,15 X103/mm3)
Basfilos (<0,1 X103/mm3)
Observaes
3,2
7,0
21
65
33
8,5
300
25.000
0
22500
500
0
2000
0
Neutrfilos
hipersegmentados
136
Urinlise
Anlise fsica
Anlise qumica
Anlise do sedimento
DEU = 1007
pH 4,9
Cilindros hialinos: 2/lmina
Cor amarelo palha Sangue oculto: neg.
Cilindros creos: 3/cga
Volume 8 mL
Protena: +
Eritrcitos: 0-2/cga
Odor S.G.
Bilirrubina: neg.
Leuccitos: 0-2/cga
Depsito escasso
Cetonas: neg.
Aspecto lmpido
Bioqumica srica:
BUN (7-25 mg/dl): 260; Creatinina (0,5-1,4 mg/dl): 4,2
FA (10-73 U/l):150; Fsforo srico (2,4-6,1 mg/dl): 18
Nos 5 casos anteriores, de acordo com o resultado dos exames laboratorias, marque a resposta que
mais se adequa ao caso descrito:
a)
b)
c)
d)
e)
6) Anamnese: felino, fmea, Siams, 3 anos de idade foi levado ao HCV por apresentar h 5 dias
inapetncia, dor abdominal e urina sanguinolenta. Ao exame clnico foram constatados leve aumento de
temperatura retal, disria e polaquiria. A parede da bexiga estava espessa e a urina colhida por mico
espontnea apresentava-se avermelhada.
Urinlise
Anlise fsica
DEU (1025-1045)
= 1040
Cor avermelhada
Volume 5 mL
Odor ftido
Depsito abundante
Aspecto turvo
Anlise qumica
pH 8,5
Sangue oculto: +++
Protena: ++
Bilirrubina: neg.
Cetonas: neg.
Anlise do sedimento
Cilindros hialinos: 2/lmina
Clulas vesicais:
++/cga
Eritrcitos: incontveis/cga
Leuccitos: >20/cga
Clulas uretrais +/cga
Bacteriria intensa
Bioqumica srica
BUN (18-33 mg/dl): 18 mg/dl; Creatinina (0,7-1,8 mg/dl): 0,9 mg/dl.
De acordo com o resultado dos exames laboratorias, marque a resposta que mais se adequa ao caso
anterior descrito:
a)
b)
c)
d)
e)
NRC
137
7) Uma cadela Poodle de 6 anos de idade chegou ao HCV apresentando hipertermia, poliria,
polidipsia e distenso abdominal. Ao exame clnico, quando era realizada a palpao abdominal, uma
descarga do tipo leite condensado drenava de sua vagina.
Hemograma
Eritrcitos (5,4-7,8 X106/mm3)
Hemoglobina (13-19 g/dl)
Hematcrito (37-54 %)
VCM (62-74 fl)
CHCM (32-36 g/dl)
PPT (6-8 g/dl)
Fibrinognio (100-400 mg/dl)
LEUCOGRAMA
Leuccitos totais (6-17X103/mm3)
Bastonetes (0-0,3X103/mm3)
Neutrfilos segmentados (3-11,5 X103/mm3)
Linfcitos(1-4,8 X103/mm3)
Eosinfilos (0,1-1,25 X103/mm3)
Moncitos (0,13-0,15 X103/mm3)
Basfilos (<0,1 X103/mm3)
6,8
15
49
72
30
6,0
700
45.000
2650
42930
4240
1060
2120
0
Bioqumica srica:
BUN: 23 mg/dl; Creatinina: 1,0 mg/dl.
Albumina (2,5-3,6 mg/dl): 0,5; Globulinas (2,4-4 mg/dl): 4,7.
Urinlise
Anlise fsica
DEU (1025-1045)= 1013
Cor amarelo claro
Volume 20 mL
Odor s.g.
Depsito moderado
Aspecto pouco turvo
Anlise qumica
pH 6,5
Sangue oculto: +
Protena: ++++
Bilirrubina: neg.
Cetonas: neg.
Anlise do sedimento
Cilindros hialinos: 4/cga
Clulas renais:
++/cga
Eritrcitos: +/cga
Clulas da pelve +/cga
Bacteriria intensa
De acordo com o resultado dos exames laboratorias, marque a resposta que mais se adequa ao caso
anterior descrito:
a) Doena renal caracterizada por uma glomerulonefrite e leucograma inflamatrio
b) Insuficincia renal crnica com leucograma de stress associado
c) Insuficincia renal aguda com leucograma de stress associado
d) Insuficincia renal causada por uma inflamao renal, o que determinou o leucograma inflamatrio
e) NRC
138
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139
6. BIOQUMICA CLNICA
Flix H. Diaz Gonzlez
Introduo
A determinao e interpretao de compostos qumicos no sangue uma das principais
aplicaes prticas da Bioqumica Clnica. Os perfis bioqumicos do plasma podem ser
utilizados em veterinria no somente para avaliao clnica individual, mas tambm para
avaliar e monitorar a condio nutricional e metablica em grupos de animais. Quando
interpretado adequadamente, o perfil bioqumico do plasma fornece importante informao com
relao ao estado clnico, metablico e produtivo de um animal. Entretanto, deve-se ressaltar
que os perfis laboratoriais so considerados uma ajuda no diagnstico e que o veterinrio deve
fazer uso de toda a informao disponvel, como o exame fsico e a histria clnica, antes de
chegar a qualquer diagnstico final.
O perfil bioqumico serve tambm como indicador dos processos adaptativos do
organismo, no metabolismo energtico, protico e mineral, alm de oferecer subsdios na
interpretao do funcionamento heptico, renal, pancretico, sseo e muscular. Alguns
metablitos podem funcionar como indicadores do potencial produtivo e reprodutivo dos
animais, sendo que alguns desses indicadores podem estar geneticamente controlados, o que
motiva o aprofundamento no estudo desses aspectos na rea de melhoramento animal.
O nmero de metablitos a serem analisados no perfil sangneo pode ser ilimitado, mas
s se justifica estudar aqueles em que se conhece a sua fisiologia e metabolismo de forma a
poder fazer uma interpretao til.
As anlises fotomtricas
A espectroscopia um ramo da fsica que se ocupa do estudo qualitativo e quantitativo da
composio das radiaes eletromagnticas absorvidas, emitidas, dispersas e refletidas pelas
substncias qumicas. A radiao eletromagntica, dividida em seus diversos comprimentos de
onda ( ) e nveis energticos, forma o espectro eletromagntico. A fotometria estuda uma parte
muito pequena do espectro eletromagntico, qual seja a radiao visvel, isto , o intervalo de
comprimento de onda correspondente viso humana (400 a 700 nm).
A matria, na forma de molculas, tomos ou ons, seja slida, lquida, gasosa ou
dissolvida em solues aquosas, deve suas propriedades qumicas e sua capacidade de absoro
de ftons a sua estrutura eletrnica. Conforme a teoria quntica, os eltrons s podem existir na
matria em certos estados energticos discretos. Considere-se uma molcula individual:
140
emisso
energia
O estado energtico basal nesta molcula corresponde ao menor nvel energtico possvel.
Sua energia eletrnica pode variar na medida em que um ou mais dos seus eltrons sejam
excitados a estados energticos superiores. Essa excitao eletrnica pode ser causada pela
absoro de um fton, sempre que a energia dele seja exatamente igual mudana de energia da
molcula.
As molculas com ligaes duplas absorvem luz com certa intensidade na regio do
ultravioleta longnquo (150-200 nm). Quando essas ligaes so conjugadas, a mxima
absoro desloca-se para a regio visvel com incremento da intensidade da absoro, desta
forma indicando se h sistemas insaturados conjugados na molcula. Em outros casos, a
molcula absorve luz no ultravioleta prximo (340-365 nm), como na coenzima NADH,
propriedade bastante utilizada nos testes utilizados em bioqumica clnica.
A fotometria trata das medidas de intensidade lumnica e tem sido utilizada para
expressar a medida de absoro de luz por um meio, o que contitui uma medida de concentrao
de solues. Quando a luz passa atravs de um meio lquido, slido ou gasoso, sofre
modificaes, pois a luz emitida tem uma intensidade menor que a luz incidida, o que se explica
pela absoro de luz pelo meio. A luz utilizada na absoro deve ser luz monocromtica, no
espectro visvel, infravermelho ou ultravioleta, A maioria dos fotmetros utilizados nos
laboratrios de bioqumica clnica so adequados para leituras no espectro visvel e ultravioleta
prximo (340-700 nm).
Os mtodos de anlises fotomtricas compreendem:
-
It Io. a
onde a= fator de proporcionalidade (menor que a unidade).
Esta relao constante em cada caso e se expressa como Transmitncia (T), conforme a
seguinte relao:
T
2)
It
Io
It
Io
Aplicando logaritmo nos dois termos da equao:
It
log
T log K
.
C
.
b
Io
Para que a Lei de Lambert-Beer seja cumprida, devem ser preenchidas as seguintes
condies:
-
Definio de Absorbncia
A Absorbncia, tambm conhecida como Densidade ptica ou Coeficiente de Extino,
o logaritmo decimal da relao entre a luz incidente (Io) e a luz transmitida (It), ou seja, o log
decimal do inverso da Transmitncia:
Io
A log ou A
It
log
T
1 100
A
log
log
2
log
T
(%)
TT
(%)
142
A b. .C
onde: b= passo ptico (distncia em cm da cubeta)
= absortividade (absorbncia especfica do composto)
C= concentrao do composto
dos valores normais de referncia. Contudo, o verdadeiro significado de um valor alterado deve
ser analisado juntamente com fatores como a histria clnica, o exame clnico, o manejo, a
alimentao e a produo.
143
Eqinos
2,9-11,8
26-37
0-10
0-0,4
1-2
75-150
Ovinos
2,9-14,7
24-30
6-10
0-0,27
0,1-0,5
52-76
1,2-1,9
75-115
26-40
10-16
52-79
4-44
21,4-51,3
11,2-13,6
1,2-1,9
50-80
35-57
9-12
60-79
13,1-25,1
3,1-5,6
2,2-2,8
2,4-4,7
132-146
17-43
11,5-12,8
9,13-25,2
29,7-39,7
5-7,3
2,2-2,8
3,9-5,4
139-152
Coleta de amostras
Existem diferentes mtodos para obter uma amostra de sangue:
(a) agulha direta: til e rpido para obter grandes volumes; sua contra-indicao mais
importante que causa contaminao da amostra e, especialmente, do meio-ambiente;
(b) seringa: no deve ser feito vcuo violento; quando sejam usadas seringas com
anticoagulante; recomenda-se que esteja na forma lquida; quando o sangue vai ser transferido a
outro recipiente, deve ser retirada a agulha da seringa para evitar hemlise na amostra;
(c) sistema de tubos com vcuo (vacutainer): siga as instrues do fabricante; necessria certa
144
prtica para um manejo eficiente; importante que, se utilizado algum tipo de anticoagulante, o
tubo deve ser enchido at terminar o vcuo para manter as propores sangue/anticoagulante.
(d) sistema de vcuo com tubos de plstico: so de recente introduo no mercado; sua
principal vantagem que o vcuo regulvel; sua utilizao est mais orientada para
determinaes sorolgicas, tais como deteco de anticorpos para diferentes patologias.
O principal fator de alterao de resultados a hemlise, a qual tem como causas mais
comuns as seguintes:
provocar vcuo violento na coleta da amostra com agulha de calibre de muito fino;
causar impacto do jato de sangue no fundo do recipiente;
utilizar material mido com gua ou lcool;
usar material sujo ou contaminado;
usar material de m qualidade, com bordas ou paredes rugosas.
agitar a amostra ao incorpor-la com o anticoagulante;
provocar choques trmicos tanto quentes quanto frios;
permitir temperaturas extremas;
manipular bruscamente as amostras para obter o soro antes que o cogulo tenha sido
formado.
Determinaes de bioqumica clnica
Para este fim utilizado soro ou plasma. O soro obtido a partir de uma amostra de
sangue extrada sem anticoagulante, esperando o tempo necessrio para a formao de cogulo.
O tempo que dura a sua formao muito varivel, entre 30 a 180 minutos. Por esta razo,
mais prtico enviar ao laboratrio amostras de plasma utilizando heparina de sdio como
anticoagulante (tubos de tampa verde). Os anticoagulantes EDTA, oxalato e citrato no deve ser
utilizados para determinaes bioqumicas. Em recipientes de plstico, o tempo de formao do
cogulo aproximadamente o dobro daquele do vidro.
Assim que se forma o cogulo, este deve ser separado das paredes do tubo ou seringa
onde foi obtida a amostra utilizando-se de um palito longo de madeira ou de uma pipeta Pasteur.
Posteriormente, deve ser centrifugado a 1.500 g (2.500 a 3.500 rpm) durante 10 minutos e
transferir o soro para outro recipiente livre do cogulo. A amostra no deve ser centrifugada e
nem colocada em refrigerao antes que o cogulo esteja bem formado, pois se prolonga o
tempo de coagulao e existe predisposio hemlise.
necessrio separar o soro do cogulo ou o plasma das clulas sangneas dentro de um
perodo mximo de 2 horas depois de tirada a amostra. Se o tempo for maior, as fraes dos
parmetros a serem medidos variam devido troca de elementos entre as fases celular e lquida
do sangue.
145
Mecanismo de ao da heparina
A heparina foi descoberta acidentalmente em 1916 por Jay McLean, na poca um
estudante de medicina. Ele investigava com extratos de fgado e encontrou que esse tecido era
capaz de retardar a coagulao do plasma. Como foi encontrada no fgado foi batizada de
heparina.
O efeito anticoagulante da heparina est relacionado com sua forte carga eletronegativa.
146
147
20,4 Eq/l.
O nvel de AGL plasmticos indicador da mobilizao dos depsitos graxos e, portanto,
cido rico
O cido rico produto do metabolismo das purinas nos primatas e no co da raa
Dlmata, representando o fim do metabolismo de compostos nitrogenados do organismo. Na
maioria dos mamferos, este metabolismo ocorre convertendo o cido rico em alantona. A
maioria do cido rico sintetizado provm da dieta e, em larga extenso, da quebra de cidos
nuclicos endgenos.
Valores de cido rico acima dos normais podem ser observados em neoplasias de clulas
sangneas, em doena heptica por incompleta converso do cido rico a alantona, na
insuficincia renal, em endocrinopatias, em aumentos da reciclagem de cidos nuclicos, na
ingesto de substncias txicas ou drogas (salicilatos, thiazida), no hipotireoidismo e finalmente
em falhas genticas das enzimas necessrias para o metabolismo do cido rico. Nas aves, o
cido rico um bom indicador da funo renal.
148
cidos biliares
Os cidos biliares (tauroclico e glicoclico) so sintetizados pelo fgado a partir de
colesterol e mediante conjugao (cido clico com taurina e glicina), sendo excretados junto
com a bile na forma de sais de sdio. Durante a digesto, eles atuam como agentes
emulsificantes favorecendo a absoro da gordura. Por efeito das bactrias intestinais, os cidos
biliares so desconjugados, ficando livres para serem reabsorvidos pelo intestino, direcionandose via circulao portal para o fgado para serem reciclados. Uma pequena parte desses cidos
alcana a circulao perifrica, sendo eles os que so medidos. Normalmente ocorre um leve
aumento dos cidos biliares aps uma refeio.
A medio de cidos biliares no soro pode servir como teste sensvel de avaliao de
disfuno heptica, pois o fgado com disfuno no consegue captar os cidos reabsorvidos e a
sua concentrao aumenta no plasma. Uma obstruo heptica ou biliar tambm causa de
aumento dos cidos biliares. Um baixo valor de cidos biliares pode indicar uma obstruo
intestinal.
Considera-se disfuno heptica quando a concentrao de cidos biliares em jejum ou
ps-prandial >25 mol/L (co) e >20 mol/L (gato). Uma leve diminuio na concentrao de
cidos biliares pode no ser conclusiva para dizer se ocorreu uma melhora na funo heptica. A
principal desvantagem de uso de cidos biliares o alto custo de sua determinao.
Albumina
A albumina a protena mais abundante no plasma, perfazendo cerca de 50% do total de
protenas. Tem um peso molecular aproximado de 66 kD. sintetizada no fgado e contribui em
80% da osmolaridade do plasma sangneo, constituindo tambm uma importante reserva
protica, bem como um transportador de cidos graxos livres, aminocidos, metais, clcio,
hormnios e bilirrubina. A albumina tambm tem funo importante na regulao do pH
sangneo, atuando como nion.
A concentrao de albumina afetada pelo funcionamento heptico, a disponibilidade de
protenas na dieta, o equilbrio hidro-eletroltico e por perdas da protena em algumas doenas.
A nica causa de aumento da albumina plasmtica (hiperalbuminemia) a desidratao.
A concentrao da albumina plasmtica pode diminuir (hipoalbuminemia) em vrias
situaes:
(a) Sntese de albumina diminuda devido a dano heptico crnico ou dficit alimentar de
fontes proticas. O nvel de albumina pode ser indicador do contedo de protena na dieta,
muito embora as mudanas ocorram lentamente. Para a deteco de mudanas significativas na
concentrao de albumina srica necessrio um perodo de pelo menos um ms, devido
149
Amnia
A amnia produzida por praticamente todas as clulas do organismo, mas
principalmente pelas bactrias do trato gastrointestinal, como resultado da degradao de
compostos nitrogenados. A amnia uma substncia txica que afeta principalmente o sistema
nervoso central.
A amnia que se encontra no plasma proveniente principalmente da absoro no
intestino, sobretudo no clon, e, em animais ruminantes, a principal fonte o rmen. Uma
pequena parte deriva do metabolismo perifrico, em especial do msculo esqueltico.
A amnia intestinal derivada da degradao bacteriana dos aminocidos da dieta no
intestino e da uria endgena que se excreta no intestino e no rmen. Tambm pode ser
150
produzida pelo fgado a partir do catabolismo dos aminocidos tissulares e da dieta, mas neste
caso imediatamente entra no ciclo da uria para ser convertida em uria.
Normalmente, a amnia transportada do trato gastrointestinal convertida em uria
quando alcana o fgado e, portanto, seu nvel no sangue tende a ser baixo. Entretanto, altos
nveis de amnia podem ser encontrados quando h uma inadequada funo heptica ou quando
o sangue portal desviado sem passar antes pelo fgado (desvio ou shunt portosistmico).
Nveis altos de amnia circulante, especialmente em situao ps-prandial, podem afetar o
encfalo, podendo provocar apatia ou uma srie de sinais neurolgicos (confuso, convulso,
andar em crculo). Esta condio conhecida como encefalopatia heptica.
Os nveis de amnia tambm podem estar aumentados na ocorrncia de uma infeco, de
uma dieta com altos teores de protena, em desequilbrio cido-bsico (insuficincia renal
principalmente) e em obstruo do trato gastrointestinal.
Bilirrubina
A maior parte da bilirrubina no plasma deriva da degradao dos eritrcitos velhos pelo
sistema retculo-endotelial, especialmente no bao. A bilirrubina restante provm da degradao
da mioglobina, dos citocromos e de eritrcitos imaturos na medula ssea. A hemoglobina
liberada dos eritrcitos se divide em poro globina e grupo heme. Aps a extrao da molcula
de ferro, que fica armazenado ou reutilizado, o grupo heme convertido em bilirrubina. A
bilirrubina assim formada chamada de bilirrubina no-conjugada, que transportada at o
fgado ligado albumina plasmtica. Esta forma tambm conhecida como bilirrubina livre ou
indireta. Esta bilirrubina no solvel em gua. Sendo lipossolvel, no filtrada pelos
glomrulos renais, e no excretada pela urina.
A bilirrubina livre pode no estar ligada albumina em trs situaes distintas: (a)
quando os nveis de albumina so extremamente baixos , (b) quando existe uma alta
concorrncia pelos lugares de unio da albumina, por exemplo com tiroxina, salicilatos,
sulfonamidas, digoxina, cortisol e diazepam; ou (c) quando o nvel de bilirrubina livre
extremamente alto (> 20 mg/dl).
No fgado, a bilirrubina desligada da albumina e conjugada com o cido glicurnico
para formar bilirrubina conjugada. Esta solvel em gua e secretada ativamente pelos
canalculos biliares menores e posteriormente excretada pela bile. No plasma, se observam
pequenas quantidades de bilirrubina conjugada, sendo que a maior parte da bilirrubina
plasmtica livre.
A bilirrubina conjugada no pode ser reabsorvida no intestino, mas as enzimas
bacterianas presentes no leo e clon convertem a bilirrubina em urobilinognio fecal
(estercobilinognio), que reabsorvido em torno de 10 a 15% pela circulao portal at o
151
fgado. A maioria deste urobilinognio re-excretada pela bile e uma parte pode ser excretada
pela urina. O urobilinognio no reabsorvido no intestino oxidado a estercobilina, pigmento
responsvel pela cor marrom das fezes.
O aumento dos nveis plasmticos de bilirrubina pode ser devido ao aumento da
bilirrubina livre na hemlise aguda grave, em absoro de um grande hematoma, em hemorragia
interna massiva ou na transfuso de eritrcitos armazenados inadequadamente. Aumento da
bilirrubina conjugada ocorre na perda da funcionalidade hepato-celular devido a doena
infecciosa, dano txico ou obstruo do trato biliar. Aumento de ambas bilirrubinas ocorre na
perda da funcionalidade hepato-celular, obstruo do fluxo biliar ou aps uma hemlise
intravascular aguda grave.
Diminuio dos nveis plasmticos de bilirrubina so observados em doenas crnicas,
principalmente as que cursam com diminuio da formao dos eritrcitos, causando anemia.
Neste caso, devido ao nmero reduzido de eritrcitos, o sistema retculo-endotelial reduz a
fagocitose dos eritrcitos, o que diminui os nveis de bilirrubina no plasma. Portanto, a
hipobilirrubinemia devido a anemias hipoproliferativas atribudas a uma infeco ou
inflamao crnica, neoplasia maligna ou na ltima fase da enfermidade renal.
Clcio
No plasma, o clcio (Ca) existe em duas formas, livre ionizada (cerca de 45%) ou
associado a molculas orgnicas, tais como protenas, principalmente albumina (cerca de 45%)
ou a cidos orgnicos (cerca de 10%). O clcio total, forma como medido no sangue, contm a
forma ionizada que biologicamente ativa, e a forma no ionizada. Estas duas formas esto em
equilbrio e sua distribuio final depende do pH, da concentrao de albumina e da relao
cido-base. Quando existe acidose, h uma tendncia para aumentar a forma ionizada de Ca.
Uma queda no nvel de albumina causa diminuio do valor de clcio sangneo.
O nvel de clcio no plasma sangneo da maioria das espcies animais, excetuando as
galinhas poedeiras, bastante constante, entre 8 a 12 mg/dl.
O sistema endcrino envolvendo a vitamina D3, o paratormnio (PTH) e a calcitonina,
responsveis pela manuteno dos nveis sangneos de clcio, atua de forma bastante eficiente
para ajustar-se quantidade de clcio disponvel no alimento e s perdas que acontecem,
principalmente na gestao e na lactao. O firme controle endcrino do Ca faz com que seus
nveis variem muito pouco (17%) comparado com o fsforo (variao de 40%) e o magnsio
(variao de 57%). Portanto, o nvel sangneo de clcio no um bom indicador do estado
nutricional, enquanto que os nveis de fsforo e magnsio refletem diretamente o estado
nutricional com relao a estes minerais.
A hipocalcemia freqente nas vacas leiteiras de alta produo, podendo causar febre do
152
leite ou paresia do parto. A quantidade total de clcio em uma vaca adulta est em torno de
6.000 g, 90% dos quais armazenados nos ossos. Cerca de 1% (60 g) est no sangue e nos tecidos
moles, sendo que na corrente circulatria h cerca de 8 g. Uma vaca que produza 30 kg de leite,
com contedo de 0,12% de Ca, perde diariamente cerca de 36 g de clcio, isto , mais de 4
vezes a quantidade de clcio sangneo. Estima-se que durante o perodo de uma lactao, cerca
de 18% do mineral do esqueleto perdido. Portanto, a taxa de reposio deve ser rpida o
suficiente para cobrir a demanda e evitar a hipocalcemia. Qualquer interferncia com a absoro
intestinal e a mobilizao ssea do Ca pode ser fatal.
A absoro de clcio no intestino diminui com a idade. Animais mais velhos sofrem
reduo na capacidade de mobilizar reservas de Ca quando ocorrem desequilbrios, sendo,
portanto, mais suscetveis de sofrer hipocalcemia.
A absoro de clcio no intestino tambm afetada por outros fatores, tais como: (a) a
relao Ca:P nos alimentos (a relao tima de 2:1); (b) a quantidade de protena na dieta, uma
vez que a deficincia de protena causa diminuio da absoro de clcio; (c) ingesto excessiva
de magnsio, que interfere com a absoro de clcio, por competio nas clulas intestinais (d)
dietas deficientes em magnsio, que reduzem a disponibilidade de clcio; (e) suplementao
excessiva de vitamina D3 que aumenta a absoro de clcio e pode causar calcificao dos
tecidos moles.
A hipercalcemia rara. Pode ocorrer por intoxicao com vitamina D, neoplasias,
hiperparatireoidismo primrio e dietas ricas em Ca. Em touros, o excesso de clcio pode causar
osteopetrose (excessiva calcificao dos ossos).
Cloro
O Cl- um dos 4 ons, juntamente com K+, Na+ e HCO3-, que so medidos no plasma para
determinar o equilbrio cido-bsico. Sendo um on principalmente extracelular, a sua
concentrao pode mudar em resposta as variaes de outros eletrlitos para manter o equilbrio
eltrico dos fluidos corporais. Em geral, a sua concentrao est inversamente relacionada com
a de HCO3- e diretamente relacionada com a de Na+. As mudanas de Cl- esto reguladas
principalmente pela sua excreo no rim. No momento em que o Cl - seja substitudo por outros
nions, como cidos orgnicos, sem compensao de HCO3- ou Na+, est conformada uma
diferena aninica anormal.
Uma hipocloremia pode ser observada na acidose metablica por acmulo de cidos
orgnicos (cetose, diabetes, acidose lctica), na acidose respiratria por acmulo de CO2, que
leva a um aumento de HCO3- e, conseqentemente, queda de Cl-, no vmito contnuo, por perda
de HCl, na diarria, por perda de fluidos intestinais ricos em Cl-, e em casos de doena renal,
por acmulo de grupos fosfato (H2PO4-) e sulfatos (HSO4-) que no se excretam e substituem o
153
Cl-. Uma hipercloremia pode ser observada na desidratao, e na alcalose respiratria, por perda
de CO2 e conseqentemente de HCO3- com aumento de Cl- compensatrio.
Em transtornos do crtex adrenal, a produo alterada de aldosterona pode levar a
quadros de hiper- ou hipocloremia.
Colesterol
O colesterol nos animais pode ser tanto de origem exgena, proveniente dos alimentos,
como endgena, sendo sintetizado, a partir do acetil-CoA, no fgado, nas gnadas, no intestino,
na glndula adrenal e na pele. A biossntese de colesterol no organismo inibida com a ingesto
de colesterol exgeno. O colesterol circula no plasma ligado s lipoprotenas (HDL, LDL e
VLDL), sendo que cerca de 2/3 dele est esterificado com cidos graxos. Os nveis de colesterol
plasmtico so indicadores adequados do total de lipdios no plasma, pois corresponde a
aproximadamente 30% do total.
O colesterol necessrio como precursor dos cidos biliares, os quais fazem parte da bile,
e dos hormnios esterides (adrenais e gonadais). Os estrgenos, sintetizados a partir de
colesterol, afetam a complexa inter-relao das funes hipofisiria, tireoidiana e adrenal.
Portanto, os nveis de colesterol podem dar uma indicao indireta da atividade tireoidiana.
O colesterol excretado pela bile, na forma de cidos biliares, ou na urina, na forma de
hormnios esterides.
Os nveis sangneos de colesterol podem estar aumentados no hipotireoidismo, em
obstrues biliares, na diabetes mellitus, na pancreatite ou quando so utilizadas dietas ricas em
carboidratos ou gorduras. O nvel normal de colesterol maior em animais mais velhos.
Os nveis de colesterol tm valores mximos durante a gestao em funo do aumento
da sntese de esterides gonadais nessa fase. Por outro lado, as vacas lactantes podem apresentar
hipercolesterolemia fisiolgica. O aumento de colesterol durante a lactao tem sido atribudo
ao aumento na sntese de lipoprotenas plasmticas.
Nveis baixos de colesterol ocorrem quando h deficincia de alimentos energticos. Seu
nvel tambm pode diminuir em uma leso hepato-celular, no hipertireoidismo, em alimentao
deficiente em energia e em doenas genticas relacionadas com sntese diminuda de
apolipoprotenas do plasma.
Os valores de colesterol no momento do parto so significativamente menores que
durante o estados pr- e ps-parto. No incio da lactao os valores de colesterol so baixos,
aumentando progressivamente at a 10 semana para voltar a cair no fim do perodo.
Em animais monogstricos recomendvel que as coletas para dosar colesterol sejam
feitas aps jejum de 12 horas.
154
Corpos cetnicos
Os corpos cetnicos, produto do metabolismo dos cidos graxos, so o -hidroxibutirato,
o acetoacetato e a acetona. Em situaes onde h deficincia de energia, o acetoacetato,
produzido normalmente no metabolismo dos cidos graxos, no pode ser metabolizado e sofre
reduo a -hidroxibutirato ou descarboxilao at acetona.
A cetose ou cetonemia uma condio caracterizada por um aumento anormal na
concentrao de corpos cetnicos nos fludos corporais (sangue, urina, leite e saliva). Esta
condio comumente encontrada em situaes como diabetes mellitus, jejum prolongado, m
nutrio e m absoro. A cetose est geralmente associada com hipoglicemia. Esta sndrome
denominada cetonemia bastante freqente em bovinos, principalmente em vacas leiteiras de
alta produo, devido a um balano nutricional negativo, pois o animal precisa de muita energia
para a produo de leite e no consegue manter equilibrada a sua glicemia, ocorrendo assim
uma mobilizao lipdica que dar origem ao aumento dos corpos cetnicos no plasma.
Aumentar somente a quantidade de alimento pode no resolver o problema, visto que estes
animais tm uma capacidade mxima admissvel no trato gastrointestinal.
Creatinina
A creatinina plasmtica derivada, praticamente em sua totalidade, do catabolismo da
creatina presente no tecido muscular. A creatina um metablito utilizado para armazenar
energia no msculo, na forma de fosfocreatina, e sua degradao para creatinina ocorre de
maneira constante, ao redor de 2% do total de creatina diariamente (Figura 1). A converso de
fosfocreatina em creatinina uma reao no enzimtica e irreversvel, dependente de fatores
estequiomtricos.
A concentrao sangnea de creatinina proporcional massa muscular. Por este motivo
em situaes de atrofia muscular e outras enfermidades relacionadas, ocorre diminuio do teor
de creatinina plasmtica. Ao mesmo tempo, em situaes de exerccio prolongando ou intenso,
pode ser observado um aumento nos nveis plasmticos de creatinina. Na prtica, a produo de
creatinina constante e muito pouco afetada pelo aumento do catabolismo das protenas
tissulares e da dieta.
A excreo de creatinina s se realiza por via renal, uma vez que ela no reabsorvida
nem reaproveitada pelo organismo. Por isso, os nveis de creatinina plasmtica refletem a taxa
de filtrao renal, de forma que nveis altos de creatinina indicam uma deficincia na
funcionalidade renal.
Entre as causas de aumento plasmtico da creatinina, devem ser consideradas uma
azotemia pr-renal por diminuio da perfuso renal, como por exemplo na desidratao, uma
azotemia renal devido insuficincia renal, uma azotemia ps-renal por obstruo do fluxo
155
H3N
C H2
C
H2N
H2N
N H3
HN
C C C C
H2 H2 H2 H
g lic in a
C
O
a r g in in a
H3N
H2N
N H3
C C C C
H2 H2 H2 H
C
O
o r n itin a
NH
H2N
C H2
O
g u a n id in o a c e ta to
S -a d e n o s il-m e tio n in a
S -a d e n o s il-h o m o c is te n a
H2N
C H3
H2N
C H2
O
O
2 H+
c r e a tin a
H2 O
H2N
C H3
HN
C H2
c r e a tin in a
Dixido de carbono
O dixido de carbono (CO2) o produto final do metabolismo. Na presena da enzima
anidrase carbnica, o CO2 e gua formam o cido carbnico, que posteriormente dissociado
em bicarbonato e hidrognio. Estes compostos so responsveis pelo equilbrio cido-bsico e o
controle do pH plasmtico, agindo como um sistema tampo.
A determinao do dixido de carbono no plasma feita para avaliar o balano cidobsico e a capacidade tamponante do plasma. A concentrao do dixido de carbono no plasma,
pode ser regulada atravs da sua excreo via respirao. Nveis aumentados de dixido de
carbono esto relacionados com alcalose metablica, hipocalemia e acidose respiratria. Nveis
abaixo do normal so encontrados quando ocorre uma acidose metablica (devido a uma
156
Ferro
O ferro um constituinte essencial da poro heme da hemoglobina. Esta protena
continuamente degradada e sintetizada em funo da meia-vida dos eritrcitos, de forma que o
ferro reciclado continuamente. Uma protena -globulina, denominada transferrina, transporta
o ferro via sangnea para todo o organismo. O ferro derivado da degradao da hemoglobina
captado pelo sistema mononuclear fagocitrio e pode ser armazenado no sistema retculoendotelial (bao, fgado e medula ssea) sob a forma de ferritina e hemossiderina, protenas
armazenadoras do mineral.
Perdas de ferro ocorrem inevitavelmente, principalmente pelas clulas epiteliais do trato
gastrintestinal. A principal fonte de ferro da dieta a carne. A taxa de absoro determinada
pela quantidade de ferro armazenado e pela taxa de produo de eritrcitos.
O valores do ferro podem estar aumentados no plasma em decorrncia de diversos
fatores, tais como: anemia hemoltica (ocorre liberao de ferro dos eritrcitos), doenas
hepticas (local de estocagem do ferro na forma de hemossiderina e ferritina), leucemia aguda,
nveis altos de substncias estrognicas, transfuso sangnea, nefrite, administrao parenteral
excessiva de ferro ou excesso de ferro na dieta.
Nveis de ferro abaixo do normal indicam uma deficincia de ferro na dieta, problemas de
m absoro, anemia, infeco crnica, uremia, sndrome nefrtica ou -transferrinemia
congnita.
Fsforo
O fsforo (P) existe em combinaes orgnicas dentro das clulas, mas o interesse
principal no perfil metablico reside no fsforo inorgnico presente no plasma. A manuteno
do nvel de P do sangue governada pelos mesmos fatores que promovem a assimilao do Ca.
Porm, na interpretao do perfil os dois minerais indicam diferentes problemas. Por outro lado,
o controle da concentrao de clcio via endcrina mais rigoroso e o nvel de fsforo
inorgnico no plasma sangneo dos bovinos geralmente oscila bem mais que o nvel de clcio.
Os nveis de P so particularmente variveis no ruminante em funo da grande
quantidade que se recicla via saliva e sua absoro no rmen e intestino. A interrupo do ciclo
leva a hipofosfatemia. Normalmente a perda de P nas secrees digestivas no bovino chega a 10
g/dia. Por outro lado, o P no rmen necessrio para a normal atividade da microflora e
portanto para a normal digesto.
A disponibilidade de P alimentar diminui com a idade (90% em bezerros, 55% em vacas
adultas). Da que os nveis sangneos de P sejam menores em animais mais velhos.
157
Deficincias no fsforo no tem efeitos imediatos, como o caso do clcio, porm no longo
prazo podem causar crescimento retardado, osteoporose progressiva, infertilidade e baixa
produo. A deficincia severa de fsforo manifestada por nveis sangneos de <3,0 mg/dl
leva a depravao do apetite. As hipofosfatemias so observadas em dietas deficientes em P,
mais comumente em solos deficientes em fsforo, principalmente durante o outono/inverno e
em vacas de alta produo. Existem muitas reas deficientes em P (McDowell, 1999). Vrios
trabalhos mostram deficincias na frica (Senegal, Qunia), na Europa (Irlanda, Esccia), na
Austrlia e na Amrica Latina (Brasil, Costa Rica, entre outros).
No leite a relao Ca:P de quase 1:1. Entretanto, a relao Ca:P tima nos alimentos
para absoro de 2:1, a mesma que existe nos ossos. Assim, a excreo de P pelo leite maior,
especialmente em vacas em produo. Nesses animais, uma alimentao com concentrados (rica
em P) pode evitar problemas de deficincia.
Geralmente, as pastagens so abundantes em Ca e deficientes em P, acontecendo uma
relativa deficincia de P e um excesso de Ca. Porm, os ruminantes esto bem adaptados para
compensar altas relaes Ca:P (at mais de 3:1). Por outro lado, o excesso de suplementao
com Ca e P podem causar diminuio da absoro intestinal de outros minerais, tais como Mg,
Zn, Mn e Cu.
Dietas com excesso de cereais, especialmente trigo, que contm alto teor de P, podem
causar hiperfosfatemia em ovelhas e cabras, em decorrncia da qual pode ocorrer urolitase. O
mesmo pode acontecer em gado sobrealimentado com concentrados e em ces e gatos com
dietas nicas de carne.
Glicose
Entre vrios metablitos usados como combustvel para a oxidao respiratria, a glicose
considerada o mais importante, sendo vital para funes tais como o metabolismo do crebro e
na lactao. O nvel de glicose sangunea pode indicar falhas na homeostase, como ocorre em
doenas tais como as cetoses.
Na digesto dos ruminantes, pouca glicose proveniente do trato alimentar entra na
corrente sangunea. O fgado o rgo responsvel pela sua sntese a partir de molculas
precursoras na via da gliconeognese. Assim, o cido propinico produz 50% dos
requerimentos de glicose, os aminocidos gliconeognicos contribuem com 25% e o cido
lctico com 15%. Outro precursor importante o glicerol.
O nvel de glicose tem poucas variaes, em funo dos mecanismos homeostticos
bastante eficientes do organismo, os quais envolvem o controle endcrino por parte da insulina
e do glucagon sobre o glicognio e dos glicocorticides sobre a gliconeognese. Quando o
fornecimento energtico inadequado, esses hormnios estimulam a degradao de glicognio
158
heptico e a sntese de nova glicose no fgado e quando o balano energtico se torna negativo,
estimulam a mobilizao de triglicerdeos para fornecer cidos graxos como fonte de energia e
glicerol como precursor de glicose heptica.
A dieta tem pouco efeito sobre a glicemia, em funo dos mecanismos homeostticos,
exceto em animais com severa desnutrio. Sob alimentao sem deficincia ou excesso
drsticos de energia, o nvel de glicose no bom indicador do nvel energtico da dieta. Porm,
o fato de ser um metablito vital para as necessidades energticas do organismo justifica sua
incluso no perfil metablico.
A concentrao de glicose pode aumentar no estresse crnico. A diabetes mellitus, mais
freqente em monogstricos do que em ruminantes, caracterizada por quadro de hiperglicemia
e glicosria.
A glicemia pode diminuir com a idade. Estados hipoglicmicos em vacas leiteiras esto
associados a cetose e deficincias severas de energia ou, em menor grau, a produes elevadas
de leite. O nvel de glicose tende a diminuir com produes acima de 30 kg de leite/dia. Na
lactao, o suprimento de glicose na vaca importante, especialmente quando alcana o
mximo de produo, pois a glndula mamria necessita de glicose para sntese de lactose.
Quando ocorre hipoglicemia na lactao (glicemia menor que 35 mg/dl), diminui a produo de
leite como forma de compensao. Em casos extremos pode sobrevir cetose.
Nas vacas de alta produo, os requerimentos energticos so cobertos pela alimentao
adequada e gliconeognese normal. A primeira deve adaptar-se s necessidades particulares dos
ruminantes (a fibra importante no peri-parto) e a segunda s realizada se o fgado estiver
funcionando normalmente. Diante de uma falha na alimentao ou na gliconeognese, ocorre
mobilizao de triglicerdeos que servem como fonte de energia. A falta de oxalacetato leva ao
aumento dos corpos cetnicos e, eventualmente, a cetose. Por outra parte, a excessiva
mobilizao de lipdeos pode levar a uma infiltrao gordurosa no fgado, aumentando a falha
heptica e, eventualmente, causando cirrose.
Sob condies de campo, diferentemente das condies experimentais, em ocasies
ocorre hipoglicemia, e seja qual for a causa ela indica um estado patolgico com importantes
implicaes na sade e na produo. Em cavalos subalimentados apresenta-se com freqncia
hipoglicemia e hiperlipemia. A mobilizao de lipdeos nesta espcie pode ser excessiva
podendo causar dano heptico, s vezes fatal.
O nvel de glicose nos ruminantes tende a ser menor no tero final da gestao do que nos
perodos anteriores, isto , os nveis tendem a diminuir medida que a gestao avana. Sabe-se
que o feto in utero demanda glicose como maior fonte de energia. Entretanto, no momento do
parto, a glicemia tem um aumento agudo, talvez devido ao estresse. No perodo posterior ao
parto os nveis caem de novo, especialmente na primeira semana e em vacas de alta produo.
159
Globulinas
A concentrao de globulinas obtida pela diferena de concentrao entre as protenas
totais e a albumina. As globulinas podem ser divididas em trs tipos,
e , identificadas
Hemoglobina
A funo da hemoglobina (Hb) transportar oxignio no sangue. Est composta por 4
subunidades que contm a frao heme, em complexo com a protena globina. O heme est
encarregado de transportar o oxignio. A Hb produzida pelos eritrcitos imaturos
(reticulcitos) e sua degradao leva a formao de bilirrubina. Quase toda a Hb est localizada
no eritrcito, porm uma mnima frao pode ser encontrada no plasma, como resultado da
degradao eritroctica.
A concentrao de Hb aumenta com a idade e na desidratao.
A Hb diminui no perodo final do parto e durante o ps-parto. A queda de Hb no final do
parto pode estar relacionada com a transferncia indireta de Hb materna para o sangue fetal, o
que possvel mediante a degradao dos eritrcitos nos cotildones e a transferncia do ferro
do heme da Hb, aumentando, portanto, o nvel de bilirrubina no sangue materno.
A reduo do nvel de hemoglobina e do hematcrito indicam anemia, a qual pode ser
causada por vrios fatores: (a) deficincia de protenas ou de alguns minerais, principalmente
160
ferro, cobre e cobalto; (b) hemlise por intoxicaes, defeitos congnitos, porfirias;
(c) hematozorios e infestao por nematides; (d) infeces virais especficas. Em geral, a
anemia representa um sinal de alerta para que sejam tratados os problemas causadores. A
anemia fica configurada quando a concentrao de Hb menor que 8 g/dl ou o hematcrito
menor que 25%.
Logo aps o parto normal acontecer anemia subclnica por hemodiluio, devido ao
ajuste circulatrio s necessidades hdricas e metablicas como resultado do funcionamento da
glndula mamria. Entretanto, se a anemia se prolongar por mais de 4 semanas ps-parto, isto
pode ser indicao de algum problema, geralmente deficincia de nutrientes ou falha heptica.
As anemias subclnicas esto associadas a baixa fertilidade. Em bezerros, a anemia causa
crescimento retardado. Em leites indispensvel a suplementao com ferro porque o leite da
porca deficitrio nesse mineral. A anemia pode levar a diminuio da tolerncia ao exerccio
em cavalos e ces. A deficincia de cobre, que causa de anemia, pode ser exacerbada por
excesso de Mo ou de sulfatos.
Lactato
O lactato um produto intermedirio do metabolismo dos glicdeos, sendo o produto final
da glicose anaerbica. Na presena suficiente de oxignio e uma moderada taxa de gliclise, o
cido pirvico entra no ciclo de Krebs, gerando CO2 e H2O. Em condies em que o cido
pirvico produzido em uma quantidade maior da que consiga utilizar, ou quando ocorre
condio de anaerobiose, o cido pirvico convertido em cido lctico. Em condies
normais, a maioria do lactato produzida pelos eritrcitos, mas durante exerccio ou atividade
fsica intensa, o msculo produz grandes quantidades de lactato, devido condio de
insuficiente oxigenao do msculo nestas situaes.
As condies patolgicas que resultam no aumento do lactato plasmtico so agrupadas
em: transtornos do msculo esqueltico, cardiomiopatias, diabetes mellitus (onde o lactato e o
piruvato esto aumentados), deficincia de tiamina, transtornos hepticos, doena gentica na
qual ocorre falha nas enzimas responsveis pela estocagem do glicognio, toxemia da gestao,
hipoxia, choque e reduo da presso sangnea e anemia causando reduo na capacidade de
oxigenao.
Em ruminantes pode ocorrer tambm aumento do lactato sangneo na chamada acidose
lctica ou indigesto lctica. Este transtorno observado em animais que tm mudanas sbitas
de dieta de forragem para concentrado, onde h uma rpida fermentao de carboidratos
solveis com alta produo de lactato.
161
Lipdeos totais
Os lipdeos encontrados no plasma so divididos em trs grandes grupos: colesterol,
fosfolipdeos e gorduras neutras (TG). Mudanas na composio e na concentrao plasmtica
dos lipdeos, podem ser observadas em vrias condies fisiolgicas, como por exemplo, em
animais jovens, nos quais h baixas concentraes de lipdeos totais, ou durante a gestao,
quando ocorre um aumento considervel de lipdeos totais no plasma.
Condies patolgicas que cursam com o aumento dos lipdeos totais plasmticos so
nefrose, cirrose, hepatite aguda, hipotireoidismo e caquexia. Diminuio nos nveis plasmticos
de lipdeos totais pode ser devida a anemia, infeco aguda ou hipertireoidismo. normal
encontrar aumento nos nveis de lipdeos totais em vacas leiteiras de alta produo durante o
ps-parto.
Magnsio
No existe um controle homeosttico rigoroso do Mg e, portanto, sua concentrao
sangunea reflete diretamente o nvel da dieta. O controle renal de Mg est mais direcionado
para prevenir a hipermagnesemia, mediante a excreo do excesso de Mg pela urina. Diante de
uma deficincia de Mg, seus nveis na urina caem a praticamente zero. Assim, os nveis de Mg
na urina so indicadores da ingesto do mineral nos alimentos.
A hipomagnesemia tem srias conseqncias para os ruminantes podendo levar at a
morte, enquanto que a hipermagnesemia no causa maior transtorno. A hipomagnesemia ou a
tetania hipomagnesmica constitui uma doena da produo, geralmente causada pela baixa
ingesto de magnsio (Mg) na dieta. A hipomagnesemia pode causar, alm da tetania,
hiperexcitabilidade, reteno de placenta, bem como anormalidade da digesto ruminal e
diminuio da produo de leite. Tambm predispe apresentao de febre do leite em vacas
aps o parto, devido a que nveis baixos de Mg (< 2 mg/dl) reduzem drasticamente a capacidade
de mobilizao das reservas de Ca dos ossos. O Mg est mais disponvel em forragens secas e
em concentrados (10-40%) do que em pastos frescos (5-33%). Pastagens jovens com altos
nveis de protena e K inibem a absoro de Mg.O Mg absorvido no intestino mediante um
sistema de transporte ativo que pode ser interferido pela relao Na:K e ainda pela quantidade
de energia, de Ca e de P presentes no alimento. A hipomagnesemia tambm pode ser
conseqncia de uma excessiva liplise em decorrncia de uma deficincia de energia.
O Mg um mineral no essencial para o crescimento das pastagens. O K, que essencial,
muitas vezes fica em excesso especialmente por causa dos fertilizantes. Esse K em excesso
inibe a absoro intestinal de Mg e, associado deficincia de Mg, pode levar facilmente
hipomagnesemia. O nvel de Mg no perfil metablico pode indicar estados subclnicos antes de
surgir o problema (nvel normal 2,0-3,0 mg/dl), sendo especialmente til antes do parto para
162
Potssio
O potssio o ction intracelular mais abundante do organismo. Na maioria dos animais,
a concentrao de potssio dentro da clula similar a concentrao de sdio fora da clula.
Este ction, quando presente no fluido extracelular, est relacionado com o processo de
excitao nervosa e muscular. A concentrao srica deste elemento controlada atravs de sua
contnua filtrao pelo rim. O potssio encontrado na saliva, no suco gstrico, na bile, no suco
pancretico e nos lquidos intestinais. Qualquer situao patolgica que interfira com a absoro
ou reabsoro deste eletrlito no rim ou qualquer situao que implique em perda de lquidos
corporais ricos em potssio alteram sua concentrao srica.
Situaes em que pode ser encontrado aumento nos nveis sricos de K (hipercalemia)
so devidas excreo reduzida, como no hipoadrenocorticismo, no tratamento com
espirinolactona, em ingesta baixa de sdio, na fase oligrica da insuficincia renal
(principalmente insuficincia renal aguda), em ruptura vesical ou quando ocorre redistribuio
do potssio do espao intracelular para o lquido extracelular, como por exemplo, em casos de
acidose (especialmente metablica), hiperosmolaridade do plasma, dano tecidual extenso
(queimadura) e trombocitose.
Situaes em que encontrado um nvel baixo de K sangneo (hipocalemia) incluem
diminuio da ingesto de potssio ou aumento da perda deste elemento como, por exemplo em
vmito e diarria persistente, em terapias de diurticos, mineralocorticides em excesso, em
enfermidade heptica crnica, na fase polirica da insuficincia renal crnica ou por
redistribuio do potssio do lquido extracelular para o espao intracelular, como por exemplo,
em alcalose, hiperinsulinemia e em recuperao de traumatismo grave.
Protenas totais
As principais protenas plasmticas so a albumina, as globulinas e o fibrinognio. Elas
esto envolvidas em mltiplas funes: (a) manuteno da presso osmtica e da viscosidade do
sangue; (b) transporte de nutrientes, metablitos, hormnios e produtos de excreo,
(c) regulao do pH sangneo; e (d) participao na coagulao sangunea.
163
164
Triglicerdeos
Os triglicerdeos (TG) formados nas clulas da mucosa intestinal a partir dos
monoglicerdeos e cidos graxos de cadeia longa absorvidos, so transportados pelos vasos
linfticos como quilomcrons e posteriormente entram na circulao sangnea. Os quilomcrons
so formados praticamente em sua totalidade por triglicerdeos (80-95%) e por pequenas
quantidades de colesterol, fosfolipdeos e uma protena plasmtica que confere solubilidade a
este lipdeo. Os TG ligados aos quilomcrons so considerados TG exgenos.
Os TG formados no fgado so transportados no sangue sob a forma de lipoprotenas de
baixa densidade (VLDL). Estes compostos consistem principalmente de triglicerdeos (em torno
de 60%), contendo tambm colesterol, fosfolipdeos e protenas plasmticas. Os TG ligados
VLDL so considerados TG endgenos.
Os nveis de triglicerdeos plasmticos esto aumentados depois de ingerir alimentos ricos
em gordura, em casos de deficincia da atividade da enzima lipase lipoprotica, o que ocorre
secundariamente a processos como diabetes mellitus ou por falha gentica da atividade desta
enzima.
Uria
A uria sintetizada no fgado a partir da amnia proveniente do catabolismo dos
aminocidos e da reciclagem de amnia do rmen. Os nveis de uria so analisados em relao
ao nvel de protena na dieta e ao funcionamento renal.
A uria excretada principalmente pela urina e, em menor grau, pelo intestino e o leite.
Na maioria dos animais (exceto em aves, que secretam cido rico), o nvel de uria indicador
de funcionamento renal. Na insuficincia renal pode ser observada azotemia (aumento nos
nveis sangneos de uria e creatinina). Tambm pode ocorrer azotemia por causas pr-renais,
que incluem desidratao, choque hipovolmico e hipotenso, bem como por causas ps-renais,
principalmente obstruo do trato urinrio.
Os nveis de uria sangnea tambm esto afetados pelo nvel nutricional,
particularmente em ruminantes. De modo geral, a uria um indicador sensvel e imediato da
ingesto de protena, enquanto que a albumina indicador a longo prazo do estado protico. Por
outra parte, uma dieta baixa em protenas afeta pouco a concentrao de globulinas.
A concentrao de uria pode esta aumentada em alimentao com excesso de protena
ou de fontes de nitrognio no protico, como a prpria uria, que usada em ruminantes em
at 3% da dieta. No entanto, tambm so encontrados nveis aumentados de uria quando ocorre
deficincia de energia, devido a diminuio da capacidade da microflora ruminal em utilizar os
compostos nitrogenados para a sntese de protenas, aumentando a quantidade de amnia
absorvida no rmen. O adequado fornecimento de glicdeos na dieta, quando h suplementao
de compostos nitrogenados, evita o aumento excessivo dos nveis de uria sangunea, devido
165
utilizao pelas bactrias do rmen da uria e dos glicdeos para sintetizar aminocidos e
protena.
O jejum prolongado pode causar aumento da protelise endgena para utilizar
aminocidos como fonte energtica o que causa aumento na concentrao de uria. Isto
freqente em bezerros com diarria, quando o consumo de alimento chega a ser nulo. Nesses
casos, o quadro exacerbado pela desidratao, pois o fluxo de urina diminui e inibe a excreo
renal de uria, podendo causar uremia.
Em ruminantes ocorre diminuio dos nveis de uria sangunea por dietas deficientes em
compostos nitrogenados. O balano nitrogenado nestas espcies pode ser estudado com base nos
nveis de uria tanto no sangue quanto no leite. Os valores de uria sangunea diminuem pouco
antes e aps o parto, inclusive em vacas com adequados nveis de protena na dieta.
importante considerar quando se expressa um resultado, se o dosado uria ou N
urico, uma vez que o valor de uria 2,14 vezes maior que o valor de N urico. Tambm deve
ser observada a unidade com que expressado o resultado, pois o Sistema Internacional de
Unidades utiliza mmol/l, enquanto que alguns laboratrios entregam o resultado no sistema
convencional de medida, isto , mg/dl. Facilmente possvel converter as unidades de um
sistema para outro usando o fator 0,167 (1 mg/dl = 0,167 mmol/l).
ENZIMAS CLNICAS
A enzimologia clnica de grande ajuda diagnstica, principalmente em relao as
enzimas presentes na corrente sangnea, vrias das quais so includas no estudo do perfil
metablito sangneo (Tabela 2).
Equinos
143-395
3-23
226-366
450-790
75-150
0-14
< 140
0-11,8
4,3-13,4
162-412
1,9-5,8
Caninos
20-156
21-102
23-66
270
185-700
0-14
< 125
3
1,2-6,4
45-233
2,9-8,2
Ovinos
68-387
30
307
640
0-14
< 40
20
20-52
238-440
5,8-27,9
exercidas em nvel intracelular, mas que podem sair para a corrente circulatria, aps a morte
celular. Sob condies normais, estas enzimas tm baixa atividade no plasma. Outras enzimas,
que tambm so produzidas no espao intracelular podem ser secretadas para atuar fora das
clulas, como o caso das enzimas da coagulao sangnea (trombina).
(b) Como a concentrao intracelular das enzimas bem maior que no plasma, danos
celulares relativamente pequenos podem levar a aumentos significativos da atividade das
enzimas no plasma.
(c) Aumentos da atividade enzimtica no plasma permite fazer inferncia sobre o lugar e
o grau do dano celular, uma vez que muitas enzimas so especficas de rgos. O grau de
alterao pode ser determinado pela atividade de enzimas associadas a diferentes
compartimentos celulares. Assim, em danos tissulares severos, aparece maior atividade de
enzimas mitocndrias (e.g. GLDH) e em danos menores aparece atividade de enzimas
citoplasmticas (e.g. ALT) ou de membrana (e.g. FA).
(d) Os nveis enzimticos no plasma esto influenciados pela velocidade com que entram
na corrente circulatria, o que por sua vez depende do dano celular e pela taxa de inativao
enzimtica (meia-vida da enzima).
(e) O evento que interessa na determinao enzimtica o aumento da atividade, no
tendo geralmente importncia a diminuio.
O sistema de medida da concentrao das enzimas mais usado o de Unidades
Internacionais (U), equivalente quantidade de enzima que catalisa a converso de 1 mol de
substrato por minuto. Devem ser expressadas as condies de pH, temperatura e concentrao
de substrato usadas na determinao. A Unio Internacional de Bioqumica (IUB) recomenda,
para expressar a atividade enzimtica, o uso do katal (1 kat= 1 mol/s) unidade que tem
equivalncia no sistema internacional (1 U/l= 16,67 nkat/l).
A amostra utilizada para a anlise de enzimas deve ser preferivelmente soro e, se usar
plasma, deve evitar-se o uso de anticoagulantes com agentes quelantes de metais, tais como
EDTA, citrato ou oxalato, para evitar a inativao das metaloenzimas. A heparina uma boa
alternativa. A estabilidade das enzimas diferente para cada uma sendo conveniente separar o
soro ou o plasma o mais rapidamente possvel. Deve evitar-se congelar e descongelar muitas
vezes a mesma amostra, pois este processo pode causar a desnaturao de algumas enzimas.
Quando for necessrio analisar uma amostra em dias diferentes, recomenda-se dividir em
pequenas alquotas, descongelando s o que for analisado logo em seguida.
Alm dos cuidados, j citados, com a coleta e armazenamento da amostra, o clnico deve
ter cuidado especial com a anamnese do paciente. Alguns fatos podem passar desapercebidos e
levar a uma interpretao equivocada dos resultados, como por exemplo:
- a aplicao de uma injeo por via intramuscular pode causar uma irritao tecidual no
msculo, suficiente para elevar a concentrao de CK, AST ou LDH no sangue;
167
- a hemlise pode interferir no somente pela variao na absorbncia da amostra como tambm
pela liberao de enzimas presentes nos eritrcitos;
- a CK pode elevar-se devido uma crise convulsiva em que o animal se debata e traumatize os
msculos esquelticos;
- o animal pode ter sofrido algum acidente que no foi percebido ou relatado pelos proprietrios,
caso em que se deve procurar por outras evidncias, pois alm do traumatismo muscular, pode
ter ocorrido alguma leso visceral;
- verificar a possibilidade de induo enzimtica por uso de drogas;
- levar em conta fatores como caquexia, prenhez, idade, dieta e outros que possam interferir nos
resultados;
- animais e raas com taxas de crescimento maiores apresentam maior atividade enzimtica de
AST, ALT e FA.
hidrlise
da
frutose-1,6-difosfato
em
gliceraldedo-3-fosfato
168
-1,4,
especfica para leso muscular, e a glutation peroxidase, para avaliar a carncia de selnio.
AST pode ser usada para avaliar leso heptica em pequenos animais da mesma forma
que a ALT, porm com uma especificidade muito menor. Na avaliao de leso muscular, ela
produz aumentos menores do que a creatina quinase, mas que se estendem por um perodo de
tempo maior.
AST por ser uma enzima mitocondrial e citosslica, necessita uma leso maior para ser
liberada na corrente sangnea. Por outro lado CK e LDH, por serem citosslicas e de tamanho
pequeno, conseguem ultrapassar a membrana celular mesmo que no exista um dano tecidual
muito grande. Na realidade, um simples aumento de permeabilidade de membrana suficiente
para que ocorra o extravasamento da enzima.
Leses no msculo cardaco tambm so demonstradas pelo aumento da AST.
Cardiomiopatias diversas podem causar este efeito, assim como endocardites bacterianas,
dirofilariose, trombose artica e infarto do miocrdio. Quando estiver presente congesto
heptica por problema cardaco, a enzima provavelmente estar elevada devido ao fgado
congesto. O aumento da AST srica pode ocorrer em patologias de localizao no sistema
nervoso central. Quando isto ocorrer, sugere uma grande leso do parnquima e um prognstico
ruim.
Colinesterase (ChE)
Existem duas enzimas conhecidas por este nome, a acetilcolinesterase (AChE) ou
colinesterase verdadeira, e a butirilcolinesterase (ButChE), ou pseudocolinesterase. No plasma
encontram-se maiores nveis da pseudo-colinesterase (butiril-colinesterase) do que da ChE
verdadeira (acetil-colinesterase), mas os nveis de ambas so paralelos e indicativos um do
outro, tendo os mesmos inibidores e ativadores.
A ChE uma enzima integrante da juno mioneural, da substncia cinzenta do crebro
que catalisa a hidrlise do neurotransmissor acetilcolina em colina e acetato. Entre os mais
importantes inibidores desta enzima esto os organofosforados, cujo grupo fosforil se une
irreversivelmente ChE, permitindo a ao contnua da acetilcolina e causando tremores e
convulses.
O significado clnico da ChE quando se observam nveis menores que o normal, por
exemplo na intoxicao com organo-fosforados ou em leso heptica. Nveis baixos de ChE
tambm so observados em animais anmicos ou mal alimentados. Aumentos da ChE so vistos
em leses cerebrais (abscessos) ou em hiperlipoproteinemia.
A intoxicao por organofosforados causa uma inibio relativamente estvel da enzima,
enquanto que aquela causada por carbamatos muito lbil. A acetilcolinesterase serve para
fazer o diagnstico diferencial entre as substncias txicas, uma vez que no tem uma relao
muito grande com a gravidade dos sinais clnicos. A avaliao da atividade da
171
acetilcolinesterase varia muito com o tempo e quantidade do produto ingerido. Como a AChE
encontrada em quantidades muito pequenas no plasma, normalmente avalia-se a atividade
enzimtica da ButChE como indicador da atividade enzimtica da AChE na juno mioneural.
Creatina quinase (CK)
A CK, tambm conhecida como creatina fosfoquinase (CPK), existe na forma dmeros,
cujas subunidades pesam 40 kD. As subunidades correspondem a formas M (muscular) ou B
(cerebral), havendo 3 isoenzimas (MM, MB e BB). Em medicina veterinria, a determinao
das isoenzimas de CK ainda no tem utilidade prtica, embora seja comum na medicina
humana.
A principal atividade da CK est no tecido muscular (esqueltico e cardaco), tendo como
funo fosforilar de forma reversvel a creatina a expensas do ATP, como uma forma adicional
de conservao de energia em ligaes fosfatadas (Figura VIII-1). Alm do tecido muscular, a
CK pode estar localizada, em menor quantidade, no rim, crebro, diafragma, trato
gastrointestinal, tero e bexiga.
A CK amplamente usada para diagnosticar transtornos musculares. A enzima
citoslica ou associada s estruturas das miofibrilas. Requer Mg2+ como cofator e, portanto, sua
atividade pode estar inibida na presena de compostos quelantes (EDTA, citrato, oxalato). Seu
nvel est aumentado no infarto cardaco e em danos musculares, como isquemia muscular por
decbito prolongado, convulses, tremores, traumas, excesso de exerccio, necrose, cirurgias,
injees intramusculares, choque e miopatias nutricionais que envolvam deficincia de vitamina
E e selnio.
Em problemas musculares, conveniente dosar tambm AST. A CK aparece elevada
antes da AST e tambm desaparece primeiro. Assim, o padro enzimtico dessas enzimas pode
indicar o estgio do problema. CK aumentada com baixa AST indica leso recente, nveis
persistentemente altos das duas indicam leso continuada, enquanto que nveis baixos de CK e
altos de AST indicam processo de recuperao.
Ces com leptospirose apresentam a atividade srica da CK aumentada, o que sugere uma
extensa degenerao muscular, o que explica as dores observados na clnica veterinria.
Incremento de CK ocorre em bovinos transportados por longos perodos. Este aumento
ocorre pelo esforo fsico que so submetidos os animais. O esforo do parto tambm um fator
de aumento da CK, assim como o exerccio de cavalos de pentatlon.
O uso da isoenzima CK-MB no um indicador confivel de leso cardaca em ces,
diferente do que ocorre com humanos. Isto devido a que a meia vida da CK-MB canina
muito curta e, desta forma, raramente a isoenzima pode ser avaliada a tempo.
172
173
est presente no leite cru, serve como marcador da pasteurizao e da inativao por calor.
A isoenzima de FA induzida por corticosteride pode estar presente nos ces com
hiperadrenocorticismo, ces em tratamento, ou secundrio a doenas prolongadas pelo efeito do
stress. Alm dos corticosterides, outras drogas induzem ao aumento da fosfatase alcalina, entre
as quais se citam barbitricos, cefalosporinas, fenobarbital, fenotiazinas, fenilbutazona,
tetraciclinas, tiabendazol e halotano.
FA de origem ssea pode estar aumentada em animais jovens, em consolidao de
fraturas, hiperparatireoidismo, osteossarcoma, osteomalcia ou na deficincia de vitamina D. Os
animais castrados apresentam uma maior atividade da enzima que os inteiros.
Gama-glutamil transferase (GGT)
A GGT catalisa a transferncia de grupos gama-carboxila do glutamato a um peptdeo,
geralmente o dipeptdeo Gly-Gly. Esta enzima tambm conhecida como gama-glutamil
transpeptidase. Encontra-se como enzima associada s membranas, mas tambm est no citosol,
especialmente nos epitlios dos dutos biliares e renais, embora possa ser encontrada no pncreas
e no intestino delgado, mas somente aquela de origem heptica normalmente encontrada no
plasma, pois a de origem renal excretada na urina.
Seu peso molecular varia de 90 a 350 kD, dependendo da espcie. A funo da GGT no
est muito bem esclarecida, mas acredita-se que est relacionada com o metabolismo do
glutation. A GGT do plasma de origem heptica, sendo indicativa de colestases e proliferao
de dutos biliares em todas as espcies, aumentando tambm na cirrose e no colangiocarcinoma.
Em felinos, mas no em ces, pode ser utilizada no lugar da fosfatase alcalina, com maior
sensibilidade e especificidade para o fgado. Por isso mais utilizada em gatos do que em ces.
Em ces pode ser induzida pelo tratamento com prednisolona, sem causar colestase. Em
filhotes de co, a GGT pode atingir valores de at 25 vezes o valor normal para ces adultos.
A GGT urinria provem da GGT renal e indicativa de dano renal.
O nvel de GGT muito baixo em ces e gatos, comparado com os nveis nos ruminantes.
Os nveis desta enzima podem estar aumentados tambm em neonatos aps o consumo de
colostro, fato que pode servir de marcador da ingesto de colostro, principalmente em bezerros
recm-nascidos, embora com menor eficincia que a imunoglobulina G. Os nveis de GGT
comeam a diminuir no soro, e aos 21 dias estabilizam.
Em bovinos, se relata elevao da atividade da GGT em vacas leiteiras com lipidose
heptica e em animais infestados com Fasciola hepatica , nos quais os nveis de GGT esto
aumentados cerca de 6 semanas aps a infeco.
174
cavalos de salto, a LDH aumentou imediatamente aps o exerccio e se manteve elevada aps
24 horas, diferente da CK que teve um pico aps o exerccio, mas voltou aos valores basais aps
um dia.
Por se apresentar como um bom indicador de leso muscular, LDH se usa em conjunto
com CK e AST para monitorar a intensidade de exerccio em cavalos.
A LDH pode ser utilizada para avaliar cardiomiopatias diversas (isquemia, endocardite
bacteriana, dirofilariose, trombose artica e infarto do miocrdio). Normalmente a LDH
aumenta menos rapidamente que a CK, mas tambm mantm os valores elevados por mais
tempo. Aps o infarto agudo do miocrdio, em humanos, a LDH atinge valores acima da
referncia aps 16 horas, atingindo valores mximos em 40 horas e mantendo a atividade
elevada por at 8 dias.
Em medicina humana comum analisar a isoenzima LDH1, e comparar com os valores
de outras isoenzimas para avaliar o infarto do miocrdio. LDH1, que normalmente no
ultrapassa 40% da atividade total, aps o infarto pode atingir a proporo de 50 a 60% da
atividade total. Alm disso, ela costuma estar em menor quantidade que a LDH2, situao que
se inverte aps o infarto.
A LDH tambm pode ser utilizada em casos de meningite bacteriana. Nestes casos,
ocorre um incremento da isoenzima LDH5 e um pequeno aumento da LDH4.
Lipase (LIP)
A lipase catalisa a hidrlise de triglicerdeos liberando 2 cidos graxos e um 2monoglicerdeo. A lipase pancretica a mais abundante de todas as lipases no plasma. Sua
presena elevada no soro indicativo de pancreatite, especialmente em ces, mas seu uso tem
sido substitudo pela amilase, devido aos custos de anlise. Os nveis de colipase (cofator da
lipase pancretica) so importantes na anlise. Como a colipase excretada no rim e a lipase
no, um dano renal pode produzir um aumento na atividade da lipase srica.
Sorbitol desidrogenase (SDH)
A SDH catalisa a oxidao reversvel de sorbitol para frutose, tendo como cofator o
+
NAD . Seu peso molecular de 95 kD e aparece exclusivamente no citosol dos hepatcitos. Seu
incremento no plasma revela dano heptico. especialmente instvel no soro eqino, onde sua
atividade s dura 1-2 dias depois de ser obtida a amostra. mais usada em ruminantes e em
cavalos do que em ces e gatos.
Tripsina
A tripsina sintetizada pelas clulas acinares do pncreas, sob a forma de uma pr-
176
Outras enzimas
Algumas outras enzimas podem ser utilizadas na medicina veterinria. No entanto, devido
aos custos elevados, dificuldade de realizar os testes ou baixa especificidade que oferecem,
acabam substitudas por outras enzimas. o caso da aldolase, enzima que tem uma boa
especificidade por leses no fgado e nos msculos esqueltico e cardaco. A sua atividade
srica pode estar aumentada em hepatites virais, tumores hepticos, infarto do miocrdio e
leses dos msculos esquelticos. A dificuldade de realizar o ensaio de determinao da
atividade da aldolase, faz com que seja substituda por outros testes mais fceis e rpidos, como
a AST, ALT, CK e LDH.
A piruvato quinase (PK) pode ser utilizada para avaliar leses musculares. A enzima pode
auxiliar na identificao de sunos homozigotos para hipertermia maligna.
A transcetolase uma enzima intra-eritrocitria que pode estar aumentada em casos de
necrose cerebrocortical ou na acidose ltica nos bovinos.
177
Comentrio
Enzima especfica para diagnstico de insuficincia heptica em pequenos animais.
178
enquanto que em casos de pouco fluxo de urina (desidratao e outros problemas pr-renais ou
ps-renais) pode reabsorver at 70% de uria.
Em ruminantes e eqideos, a uria pode ser excretada por via gastrointestinal, de forma
que nestas espcies, valores normais ou no muito elevados de uria podem ser achados em
casos de insuficincia renal. Nos ruminantes cobra especial importncia no metabolismo
nitrogenado, a reciclagem de uria que pode acontece por via salival, para servir de fonte de
nitrognio s bactrias ruminais.
Comentrio
a principal frao protica que se perde nos rins em casos de glomerulonefrites e
doenas glomerulares primrias, levando a hipoalbuminemia.
Este metablito excretado quase que totalmente pelo rim; altos nveis no plasma
podem estar relacionados com filtrao renal insuficiente.
Metablito mais especfico de diagnstico de funo renal alterada. excretado pelos
rins e, por isso, altos nveis plasmticos indicam deficiente funo renal.
Em doenas glomerulares ocorre diminuio da relao A/G por perda de albumina nos
rins.
No hiperparatireoidismo secundrio de origem renal pode ocorrer hipocalcemia.
Altos nveis no plasma so encontrados em problemas da funo glomerular; nveis
baixos no plasma esto associados com problemas nos tbulos renais ou na nefrite
intersticial crnica.
Seus nveis sricos esto aumentados quando h insuficiente filtrao renal, o que pode
levar a um hiperparatireoidismo secundrio de origem renal.
Seu aumento est relacionado com amiloidose renal.
Fibrinognio
Fosfatase alcalina (FA)
A isoforma renal da FA no est presente no plasma; quando h dano renal, a FA
e gama glutamil
aparece na urina junto com a GGT.
transferase (GGT)
BUN
(nitrognio urico sangneo). Para converter BUN a uria, em mg/dL, o fator de multiplicao
2,14. A creatinina se forma endogenamente a partir da converso da creatina, composto que
armazena energia no msculo (fosfocreatina). A sntese de creatinina ocorre de forma constante,
influenciada sobretudo pela massa muscular. Treinamentos prolongados, doenas musculares ou
emagrecimento pronunciado podem afetar os valores de creatinina. Diferentemente da uria, o
teor de creatinina no afetado pelo aumento do catabolismo das protenas tisulares ou pela
dieta. A creatinina filtrada pelo glomrulo e no se reabsorve no tbulo, pelo qual se considera
como melhor marcador da filtrao glomerular que a uria.
Aumentos por causas pr-renais
O aumento de compostos nitrogenados (uria e creatinina) no sangue chamado de
azotemia, e pode ser pr-renal, renal e ps-renal.
Azotemia pr-renal pode ser ocasionada pelas causas seguintes:
(a) Aumento do catabolismo protico devido a:
179
infeco e febre;
exerccio prolongado;
uso de glicocorticides;
hipertireoidismo
da
hipovolemia por desidratao: vmito, diarria, processos que cursam com poliria
como diabetes mellitus ou hipoadrenocorticismo;
doena cardiovascular.
Em geral, nas causas de azotemia pr-renal, aumenta menos a creatinina e mais a uria.
Uria
Levemente elevada
(<100 mg/dL)
Pode chegar a
>100 mg/dL
Muito elevada
(>180-200 mg/dL)
Creatinina
Densidade
No aumenta
Normal
Aumentada
(desidratao)
Diminuda
(isostenria)
Em bovinos, pode apresentar-se baixa concentrao de clcio nesses casos, porm sem
hiperfosfatemia, uma vez que o rim no o rgo principal de excreo de fsforo. Em cavalos,
pode haver hipercalcemia, sobretudo em animais alimentados com dietas ricas em clcio,
porque o rim o rgo fundamental na excreo de clcio nesta espcie, estando o fsforo
normal ou baixo.
Potssio
O rim, de forma normal, excreta cidos (H+) e reabsorve bicarbonato (HCO3-). Em caso
de insuficincia renal, o rim no capaz de cumprir esta funo e, portanto, h um acmulo de
cidos no sangue provocando acidose metablica.
O potssio sofre troca com o hidrognio em nvel celular na tentativa de compensar a
acidose, de forma que aparecem nveis elevados de potssio no sangue (hipercalemia) na
insuficincia renal. A dosagem srica de K nesses casos indicadora da severidade da acidose.
Entretanto, os bovinos podem apresentar um equilbrio cido-bsico normal ou inclusive uma
alcalose metablica devido atonia ruminal secundria que se produz e que causa seqestro de
cidos.
Anemia
Na insuficincia renal crnica caracterstico o aparecimento de anemia no regenerativa
com ausncia de reticulcitos, no muito severa, que se desenvolve pela falta de sntese de
eritropoietina renal. Tanto a anemia como o hiperparatireoidismo secundrio renal so
considerados melhores indicadores para diferenciar insuficincia renal crnica de aguda que os
sintomas clnicos de oligria (na insuficincia renal aguda) e poliria (na insuficincia renal
crnica), uma vez que podem ser observados com freqncia casos de poliria na insuficincia
renal aguda.
INDICADORES DA FUNO PANCRETICA EXCRINA
A funo principal do pncreas excrino produzir e secretar enzimas digestivas que
degradam protenas, lipdeos e polissacardeos, facilitando a absoro de nutrientes, vitaminas e
minerais. As enzimas, com exceo da lipase e da amilase, so armazenadas e secretadas na
forma inativa (zimognios), evitando assim a autodigesto do pncreas. A ativao dos
zimognios ocorre depois que eles so secretados no intestino delgado, onde a enteropeptidase,
enzima sintetizada pela mucosa duodenal, ativa o tripsinognio, que transformado em tripsina
ativar os outros zimognios. O pncreas secreta tambm bicarbonato, que contribui para a
neutralizao do cido gstrico no duodeno. Na Tabela 6 constam os principais indicadores da
funo pancretica excrina.
Distrbios pancreticos excrinos podem ser causados por inflamao da glndula
182
Lipase e amilase
A lipase e a amilase so as duas enzimas que so mensuradas com maior freqncia como
marcadores da pancreatite aguda. A amilase em geral est muito elevada no incio do processo
patolgico, e a lipase aumenta mais vagarosamente, mas permanece elevada por mais tempo. O
enfoque laboratorial da pancreatite se aplica ao co. Em gatos, o exame controverso, podendo
apresentar lipase normal ou aumentada, e amilase normal. A maioria dos autores afirma que em
gatos, nenhuma das enzimas plasmticas utilizadas confivel para avaliar a presena de
pancreatite, indicando-se para esta espcie outros exames diagnsticos, como o ultra-som.
Outras causas do aumento da lipase e da amilase incluem insuficincia renal, doena
gastrintestinal, doena heptica e neoplasia. No entanto, as elevaes no-pancreticas
geralmente no excedem 2 a 3 vezes o limite superior do valor de referncia normal.
Corticosterides causam aumento considervel da lipase (de at 5 vezes), mas no da amilase.
183
184
Lipase
Tripsina
imunoreativa
Clcio
Colesterol
Triglicerdeos
Glicose
Albumina
Comentrio
Nveis extremamente elevados so encontrados no estgio inicial de uma
pancreatite aguda; nveis baixos esto relacionados com insuficincia
pancretica excrina.
considerada a melhor enzima para o diagnstico de pancreatite por ser menos
afetada por outros fatores que a amilase e por se manter elevada por longo
perodo.
Seus nveis aumentam na disfuno do pncreas. Existem limitaes tcnicas
para sua determinao em veterinria
A hipocalcemia freqente achado na pancreatite aguda devido ao aumento de
cidos graxos, por ao da lipase, que se combinam com o Ca tornando-o
insolvel no plasma.
Seus nveis esto aumentados na disfuno pancretica devido elevao das
lipoprotenas de alta e baixa densidade no plasma.
Podem diminuir no plasma na insuficincia pancretica devido pouca
liberao de lipase pelo pncreas.
Pode estar com nveis aumentados na pancreatite por aumento da secreo de
glucagon.
Nveis diminudos no plasma em casos avanados de insuficincia pancretica
por falhas na absoro de aminocidos.
estandardizao de valores referenciais para a raa, o sexo e a idade dos animais. Os melhores
indicadores de adaptao ao exerccio so o cido lctico e as enzimas CK, AST e LDH (Tabela
7). Em geral, animais mais bem adaptados tem menores aumentos de cido lctico e de enzimas
e retorno mais rpido aos valores basais aps corridas ou exerccios fortes.
Em exerccios de longa durao acentua-se o risco de desidratao, a qual mais bem
185
indicada pela concentrao de protenas totais do que pelo hematcrito, o qual pode aumentar
pela contrao esplnica, alm da desidratao. Tambm em corridas longas pode ocorrer
aumento do potssio por dano nas clulas musculares, diminuio do cloro por perda no suor,
aumento de cidos graxos livres e diminuio da glicose por gasto energtico e aumento do
fsforo por defosforilao de compostos energticos. Alm disso, como o exerccio aumenta a
peroxidao das membranas celulares, a demanda de vitamina E/selnio aumenta, tornando-se
metablitos que podem limitar o performance do exerccio. O transporte prolongado causa as
mesmas mudanas metablicas que o exerccio exagerado.
INDICADORES DE TRANSTORNOS SSEOS
Fosfatase alcalina
A isoenzima ssea da fosfatase alcalina est presente em altas concentraes nos
osteoblastos. Infelizmente, no esto disponveis testes na rotina que diferenciem as isoenzimas
(ssea, intestinal, heptica, induzida por esterides), devendo a fosfatase alcalina ser
interpretada em conjunto com outros testes e quadro clnico. O aumento da atividade
osteoblstica, ou seja, deposio de tecido sseo novo produzir um aumento dos nveis
plasmticos da fosfatase alcalina, sendo normal em animais jovens (em crescimento). A
elevao desta enzima ocorre tambm nas fraturas em processo de consolidao, doenas como
osteossarcoma e ostete, e em casos de reabsoro ssea ativa, como por exemplo raquitismo,
osteomalcia e hiperparatireoidismo.
Comentrio
a enzima mais especfica para diagnstico de dano muscular. Nveis
extremamente altos no plasma so observados logo aps uma leso muscular.
Aspartato aminotransferase
Aumenta concomitantemente com a CPK quando ocorrem danos musculares.
(AST)
Lactato desidrogenase
Enzima menos especfica que fica com nveis elevados vrios dias aps a leso
(LDH)
muscular.
Dano muscular pode resultar em mioglobinemia. Quando a concentrao no plasma
Mioglobina
excede a 20 mg/dl, a mioglobina comea a aparecer na urina (mioglobinria).
Pode estar aumentada em transtornos que aumentem o catabolismo muscular
Creatinina
devido liberao de creatina, composto precursor de creatinina.
Piruvato quinase (PK)
Enzima que pode estar moderadamente aumentada quando ocorre dano muscular.
Hipocalcemia pode estar associada com tetania em cadelas, no perodo de gestao
Clcio
ou lactao ou com paralisia muscular aps o parto em vacas leiteiras.
Fsforo
Em perodos prolongados de paralisia muscular, pode ocorrer hipofosfatemia.
Hipomagnesemia est associada a tetanias hipocalcmicas em cadelas,
Magnsio
principalmente.
A deficincia crnica de Se est associada a distrofia muscular. O diagnstico pode
Selnio (GSH-Px)
ser feito mediante dosagem da enzima glutation peroxidase nos eritrcitos.
Pode ocorrer hipercalemia na degenerao ou necrose muscular por liberao do K
Potssio
intracelular. Hipocalemia ocorre associada a perodos prolongados de paralisia
muscular.
186
Clcio
Os nveis de clcio so regulados primariamente por trs hormnios: paratormnio
(PTH), calcitonina e vitamina D3. O PTH, secretado pelas paratireides, mobiliza o clcio das
reservas esquelticas para o fluido extracelular, ou seja, eleva a concentrao srica do clcio e
reduz a do fsforo (por inibio da reabsoro renal). Portanto, a secreo do paratormnio
estimulada por hipocalcemia. O PTH estimula a desmineralizao ssea para aumentar os nveis
de clcio circulante. O 1,25 di-hidroxicolecalciferol (calcitriol), metablito ativo da vitamina D,
tem como funo aumentar a absoro de clcio e fsforo pela mucosa intestinal e facilitar a
ao do PTH nos ossos (efeito permissivo), mantendo desta forma nveis suficientes destes
eletrlitos no fluido extracelular para permitir mineralizao adequada da matriz ssea. A
calcitonina, secretada pelas clulas C da tireide, possui ao oposta ao PTH. Inibe a liberao
de clcio e fsforo dos ossos, ou seja, reduz a concentrao srica do clcio e do fsforo. A
calcitonina aumenta a excreo renal de fsforo e inibe a ao do PTH.
Fsforo
O metabolismo do fsforo regulado atravs da interao com o clcio e pela ao do
PTH, calcitonina e calcitriol. O aumento do fsforo plasmtico pode resultar em uma
diminuio recproca de clcio no plasma. O PTH promove aumento da excreo urinaria de
fsforo assim como inibe sua absoro no tbulo renal proximal, o que auxilia na manuteno
da proporo do clcio para o fsforo no plasma. Animais em crescimento tem um valor de
fsforo plasmtico maior que os adultos.
Como a excreo de fsforo depende de filtrao glomerular e reabsoro tubular, a
reduo do fluxo sanguneo renal e da taxa de filtrao glomerular geralmente resultam em
hiperfosfatemia. A hiperfosfatemia induz a hipocalcemia e hipocalcitriolemia, que por sua vez
estimula a liberao de PTH. A hiperfosfatemia tambm pode ser por aumento da ingesto do
fsforo na dieta. Na Tabela 8 constam os principais indicadores de leses e transtornos sseos.
187
resultar na chamada mandbula de borracha. O clcio srico geralmente est dentro dos
parmetros de referncia normais por causa das alteraes compensatrias. Fosfatase alcalina e
fosfato inorgnico podem estar aumentados (animais em crescimento j apresentam valores
maiores que adultos normalmente).
No hiperparatireoidismo secundrio renal (osteodistrofia renal): ocorre reabsoro
ssea excessiva e mineralizao osteide prejudicada. O hiperparatireoidismo resulta da
excreo renal comprometida de fosfato e conseqente hiperfosfatemia e reduo da
concentrao sangnea de clcio, que aumenta a atividade da paratireide e induz reabsoro
ssea. Embora isso tenda a normalizar as concentraes sangneas de clcio, o estado
hiperparatireideo mantido pela hiperfosfatemia persistente.
O hipoparatireoidismo leva a uma hipocalcemia devido a deficincia de PTH, e
geralmente iatrognico, causado pela retirada cirrgica das paratireides. Secundariamente
ocorre hiperfosfatemia. O principal diagnstico diferencial desta combinao de desequilbrio
eletroltico a insuficincia renal, porm pacientes com insuficincia renal esto azotmicos.
Raquitismo (filhotes) / osteomalcia (adultos): ocorre principalmente quando h
deficincia de vitamina D, mas tambm quando h insuficincia de clcio e/ou fsforo para a
mineralizao do osteide recm formado. As causas mais provveis em ces e gatos so
hipovitaminose D por deficincia diettica, erro inato no metabolismo, ou baixa quantidade de
minerais na dieta. Ces e gatos no sintetizam colecalciferol (pr-vitamina D3) na pele exposta
luz ultravioleta e dependem principalmente do consumo alimentar para obter a vitamina. Em
ruminantes ocorre por deficincia de fosfato na dieta, ou por falta de exposio ao sol. As
anormalidades nos testes sanguneos incluem baixos nveis de clcio e fosfato inorgnico,
aumento de fosfatase alcalina e PTH e baixo 25-hidroxicolecalciferol.
A osteoporose ocorre com maior freqncia em vacas de alta produo leiteira, devido ao
baixo consumo de clcio e gasto excessivo no leite, levando a desmineralizao ssea.
Tumores sseos primrios podem resultar em hipercalcemia devido a destruio ssea
pelas clulas neoplsicas, secreo do fator ativador de osteoclastos ou efeitos de
prostaglandinas.
O pseudohiperparatireoidismo causado por neoplasias malignas, no localizadas na
paratireide, capazes de produzir substncias que causam ostelise e liberao macia de clcio
dos ossos para o plasma. As neoplasias mais comumente envolvidas so o linfossarcoma e o
adenocarcinoma de glndula perianal.
188
Comentrio
alcalina
Clcio
Fsforo
Relao Ca/P
189
Colesterol
Glicose
Betahidroxibutirato
Sdio
Potssio
Clcio
Fsforo
Comentrio
Dieta com altos teores de protena causam aumento da uria plasmtica devido ao aumento
do catabolismo protico. Deficincia energtica na dieta tambm aumenta o catabolismo
protico e aumenta o nvel de uria no plasma. Dieta com baixos teores de protena pode
causar diminuio dos nveis de uria.
Deficincia protica na alimentao tende a causar hipoproteinemia.
Dietas com baixo teor de protenas podem causar hipoalbuminemia devido diminuio da
sntese protica no fgado.
A produo de quilomcrons logo aps uma refeio rica em gordura pode resultar em
aumento temporrio dos triglicerdeos plasmticos. Jejum em animais obesos pode causar
aumento dos triglicerdeos plasmticos devido mobilizao das reservas de gordura.
Seus nveis aumentam aps uma refeio rica em gordura (hiperlipidemia ps-prandial).
Dietas com alto teor de gordura resultam em hipercolesterolemia. Jejum tambm pode
causar aumento de colesterol no plasma devido mobilizao de gorduras de reserva. Dietas
com baixo teor de gordura causam diminuio do colesterol plasmtico.
A glicemia aumenta logo aps as refeies. A hipoglicemia s problema nos animais
recm-nascidos (principalmente em sunos) pois os adultos conseguem manter o nvel de
glicose constante mesmo durante perodos longos de inanio.
Seus nveis podem aumentar em ruminantes como consequncia de severa deficincia
energtica, devido mobilizao de triglicerdeos de reserva e converso dos cidos graxos
em corpos cetnicos. Em situaes crticas, como incio de lactao e altos nveis de
produo, pode ocorrer cetoacidose.
Altos teores de protena na dieta podem causar aumento do sdio plasmtico devido
diurese induzida pelos altos nveis de uria.
Animais cardacos aos quais se prescreve uma dieta com baixos teores de sdio, podem
apresentar hipercalemia devido a um desequilbrio na troca inica nos tbulos renais.
Animais com anorexia que so mantidos com fluidoterapia sem suplementao de potssio,
apresentam hipocalemia pois a excreo de potssio continua normalmente.
O aumento relativo de albumina (desidratao), principal protena transportadora de clcio
no plasma ou a suplementao com excesso de clcio provocam hipercalcemia. A
hipoalbuminemia ou uma dieta deficiente de clcio so responsveis por baixos nveis de
clcio plasmtico. Hipocalcemia pode ocorrer em desbalanos Ca/P na alimentao,
principalmente en animais jovens.
Dietas compostas exclusivamente a base de carne e vsceras podem causar hiperfosfatemia
devido a desbalano na relao Ca/P.
192
resposta aos nveis elevados de Ca, o que pode ser detectado no sangue hipocalcemia e
hipofosfatemia com baixa concentrao de fosfatase alcalina. Maiores aplicaes do perfil
bioqumico sangneo, urinrio e ruminal so revisadas em Gonzlez et al.(2000b).
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196
Introduo
A manuteno da vida animal requer uma srie de reaes qumicas. Estas reaes podem
produzir substncias acidificantes ou alcalinizantes. As reaes enzimticas mantm o
funcionamento do organismo e as enzimas so bastante sensveis a variaes de pH (assim
como de temperatura). O sangue usado como parmetro para a avaliao do estado cido-base
dos animais, portanto, avaliamos o pH sanguneo e extrapolamos este dado para os tecidos.
Assim, se o pH do sangue fisiolgico, cada tecido tambm dever estar em seu pH ideal.
O pH do sangue est prximo da neutralidade com leve tendncia alcalinidade
(aproximadamente 7,4). As reaes metablicas, porm, tendem a desviar continuamente este
pH para cido ou bsico. Para evitar que ocorram grandes variaes sricas de pH, existem
sistemas amortecedores plasmticos, ou sistemas tamponantes. Os sistemas tamponantes so:
protenas plasmticas
hemoglobina
sistema fosfato-cido fosfrico
sistema bicarbonato-cido carbnico
Protenas plasmticas
No meio intracelular o tampo mais eficiente (o que no ocorre no plasma). O
mecanismo de ao ocorre atravs dos aminocidos, os quais podem associar ou dissociar H+ de
acordo com a necessidade do sangue e assim, atuar na manuteno do pH fisiolgico.
Hemoglobina
Como protena, ela mantm um grande nmero de grupos cidos ou bsicos. Podem
existir tambm outros grupos tamponantes (grupo imidazol = histidina). Como transportadora
de gases, ela aumenta ou diminui sua afinidade pelo gs carbnico, permitindo sua maior
liberao (em caso de acidose) ou sua reteno (na alcalose). Grande parte do tamponamento na
faixa fisiolgica de pH ocorre devido s modificaes dos grupos imidazol da histidina.
Os grupos tamponantes da hemoglobina esto associados com os tomos de ferro. Na
oxihemoglobina, o oxignio transportado pelos tomos de ferro. Quando o oxignio
removido, as modificaes que ocorrem na estrutura eletrnica dos tomos de ferro influenciam
o imidazol e os outros grupos tamponantes.
Modificaes na dissociao do grupo imidazol relacionam a capacidade tampo da
hemoglobina com a sua oxigenao e desoxigenao.
O aumento da acidez favorece a liberao de oxignio, enquanto que sua reduo facilita
a fixao de oxignio. Quando a hemoglobina desoxigenada, forma compostos carbamnicos e
197
ons H+ so liberados.
A maior poro do gs carbnico que entra nos eritrcitos hidratada para formar cido
carbnico por ao da anidrase carbnica. Em seguida o cido carbnico ioniza-se, formando
ons H+ e ons bicarbonato. Estas reaes ocorrem porque os produtos de reao so removidos
do eritrcito medida que se formam, por intermdio de dois processos: a hemoglobina
tampona a maioria dos ons H+ e boa parte do on bicarbonato difunde para o plasma.
Quando o cido carbnico ioniza-se, forma um nmero igual de ctions hidrognio e
nions bicarbonato. Os ons H+ se combinam com a hemoglobina e a carga da hemoglobina se
reduz. Os ons sdio e potssio so balanceados eletricamente com os bicarbonatos formados,
mantendo a neutralidade eltrica da soluo.
O dixido de carbono total do plasma existe de trs formas:
dissolvido no plasma,
como cido carbnico, e
como bicarbonato.
198
DISTRBIOS CIDO-BSICOS
Os distrbios cido base, podero estar relacionados a parmetros respiratrios (CO2)
ou metablicos (HCO3). Ento, a acidose e a alcalose podero ser metablicas ou
respiratrias.
Acidose metablica
Causas
cetoacidose diabtica
inibidores da anidrase carbnica
insuficincia renal com perda da capacidade de reabsorver o sdio
acidose lctica choque
hipoxemia
exerccio
toxinas exgenas etileno-glicol
cido saliclico
acidificantes urinrios
diarria.
Na diarria, ocorre aumento do cloro porque os rins corrigem a acidose acompanhando
sdio com cloro.
Tratamento
Segundo Cornellius, deve-se corrigir a patologia de base, pois ela , geralmente, a que
mata o paciente. O animal somente deve ser tratado em condies extremas de pH (menor que
7,2 ou superior a 7,6) e acrescenta-se o tratamento da causa. Existem casos em que o prprio
tratamento pode induzir a complicaes. Devem se usar agentes alcalinizantes , como o
bicarbonato (exemplo Carbicab: Na2CO3 + NaHCO3). No clculo, considera-se o lquido extracelular (LEC: 20% do volume total). Por causa do intercmbio entre LIC e LEC, toma-se como
base um volume maior (30%). No usar frmulas com base na gua corporal total (60%),
porque o intercmbio entre LIC e LEC lento e isto acarretaria uma superdosagem. Lembrar
tambm que os processos mrbidos no so estticos e que os mecanismos de compensao
tambm esto atuando. A quantidade de bicarbonato a medicar segue a seguinte equao:
HCO3 meq/l = 0,3 x peso corporal (kg) x E.B.*
EB= Excesso de Base: condio ocasionada pela adio de base ou remoo de cido (pode ser negativo
ou positivo).
199
4-
5-
Acidose respiratria
Elevao da pCO2
= Hipercapnia
Causas
Depresso do centro respiratrio, causada por:
1. drogas anestsicas gerais
2. opiceos
3. traumas de SNC
4. leso ocupante de espao
5. tumor cerebral
6. abscesso cerebral
Afeces respiratrias, tais como:
1. pneumotrax
2. obstruo de vias areas
3. pneumonia
4. edema pulmonar
5. debilidade de msculos respiratrios
6. polimiopatia
7. polineuropatia
Movimento do torx reduzido devido a:
1 obesidade
2 dor
200
Tratamento
O tratamento depender da causa primria. A acidose respiratria crnica um desafio,
pois muitas etiologias so irreversveis. Em pneumonias ou obstrues, usar bronco-dilatadores
e antibiticos. Convulses e arritmias cardacas so complicaes das modificaes rpidas da
pCO2. Hiperventilar somente em casos extremos (casos agudos), para no inibir o estmulo da
hipxia. Nunca usar bicarbonato em tratamento de acidose metablica. A utilizao do
bicarbonato eleva a pCO2 causando narcose.
Alcalose metablica
Causas
vmito gstrico puro
overdose de bicarbonato de sdio (NaHCO3)
diminuio do LEC
diminuio do potssio (atualmente esta hiptese est sendo contestada)
desidratao
intoxicao pela uria (em bovinos).
Compensao
A reduo da ventilao alveolar uma forma de compensao praticamente impossvel
porque ocorre o estmulo hipxico, o que impede a compensao por esta via (o animal no
fica sem respirar).
A verdadeira compensao renal, mediante excreo de HCO3.
201
Nveis de potssio e cloreto sricos influem na excreo de HCO3 (por causa das trocas) e
os rins se tornam culpados pela manuteno da alcalose.
Sinais clnicos da alcalose metablica podem ser confundidos com os da hipocalcemia.
Quando o volume do LEC est reduzido (assim como os nveis de cloro e potssio) no
pode ocorrer bicarbonatria (papel poupador de sdio e gua) e a alcalose mantm-se.
Tratamento
A etiologia deve ser tratada, caso contrrio a alcalose se manter descompensada. O
cloreto de sdio 0,9% promover a expanso do LEC e reduzir o pH. Em casos de
hipocalemia, acrescentar cloreto de potssio nas solues intravenosas.
Alcalose respiratria
Hiperventilao - causas
calor
ansiedade
medo
dor
leses do SNC
anemia pronunciada (ver acidose metablica paralela)
ventilao mecnica aumentada.
Em ces: grave somente quando a pCO2 est abaixo de 25 mmHg.
Alcalose intensa: hiperexcitabilidade do S.N. Perifrico = tetania ( clcio)
Tratamento
Deve-se tratar a causa do distrbio, conforme a seguir:
calor: reduzir a temperatura corporal
leses do SNC: oxigenioterapia
dor: analgsicos
ansiedade: tranquilizantes.
Em casos de anemia e de hiperventilao em geral, interessante observar o grande
aumento da formao de cido lctico.
Desordens combinadas
Quando duas ou mais patologias causam distrbios diferentes. O distrbio primrio
sempre tem o pH tendendo para si.
Exemplos:
202
Gasometria
Para coletar amostras para gasometria deve se usar seringa heparinizada. Em humanos
usa-se sangue arterial sempre (artria femoral). Em veterinria, preferencialmente deve-se tentar
coletar sangue arterial (tambm artria femoral aps garrotear a coxa do animal por algum
tempo). Levar em conta que anestesiar o animal vai alterar o estado cido-bsico do sangue.
Pode-se utilizar sangue venoso e, neste caso, no devem ser considerados os dados da pO2. A
diferena de pH entre sangue arterial e venoso pequena. Existem pequenas variaes entre
nveis de eletrlitos, porm os valores de pCO2 e O2 variaro .Deve-se lembrar que a pCO2
maior no sangue venoso e a pO 2,maior no arterial. Entretanto, a literatura cita vrios trabalhos
que consideram somente sangue venoso.
A puno dever ser cuidadosa e no poder haver ar na seringa (este dever ser
totalmente retirado). Ao final da puno, aps certificar-se da no existncia de ar na seringa,
vedar totalmente a agulha (por dobramento desta, com tampas apropriadas ou usar uma rolha na
ponta da agulha).
O material dever ser acondicionado em isopor com gelo e enviado imediatamente ao
laboratrio. Existem seringas importadas especiais para gasometria, nas quais o sangue poder
aguardar at duas horas para ser analisado. Quando usamos seringas comuns, o tempo mximo
dever ser de meia hora.
Os aparelhos so computadorizados e a anlise feita aps injetar-se (com a mesma
seringa em que foi coletado) uma pequena quantidade de sangue em orifcio apropriado. O
resultado dado em um minuto com as seguintes informaes:
pH
pO2
pCO2
HCO3
proporo respiratria/metablica
excesso de base (E.B.)
hemoglobina
anion gap (normalmente calculado)
203
potssio, cloreto
outros (de acordo com o equipamento).
Para a avaliao da gasometria, consideramos como dados indispensveis:
pH: varia em torno de 7,4, que o pH fisiolgico do sangue;
pCO2: igual a 40mmHg, aproximadamente, e mantida pelos pulmes. o parmetro
respiratrio;
bicarbonato (HCO3): seu nvel fisiolgico mdio de 24mEq/l . o parmetro metablico;
a proporo entre os parmetros metablicos (HCO3) e respiratrio (pCO2) de 20:1, ou seja,
temos que ter 20 partes de HCO3 para 1 parte de PCO2.
Por que?
Porque, segundo a equao de Henderson-Hasselbalch, o pH a relao entre cidos e
bases, ou seja: pH = pK +log [base/cido]
E como fica a equao no final?
pH = 3,7 + log [20/1]
Ou seja, vinte partes de bicarbonato para uma de cido carbnico. Observamos a, que a pCO 2
foi substituda na frmula pelo cido carbnico (H2CO3), porque j sabemos que:
H
CO2 + HO2
H2CO3
HCO3
Se a pCO2 dada em mmHg e o HCO 3 em mEq/l , como saber se a proporo realmente 20:1?
O aparelho j faz as correes, transformando em mEq/l, multiplicando o valor por 0,03.
Portanto, a pCO2 dada em mmHg (40) e em mEq/l (1,2).
Se a proporo de 20:1, o pH 7,4!!!!
O excesso de base (EB) avalia o parmetro metablico:
E.B. negativo = acidose
E.B. positivo = alcalose
Valores normais de EB: 1 a -3 para ces, 1 a -5 para gatos.
Gasometria (interpretao)
1.
2.
Aps verificarmos o estado cido-base, observamos o parmetro que est alterado (se
metablico ou respiratrio).
3.
4.
5.
6.
7.
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205
1 Introduo
A toxicologia clnica veterinria estuda a identificao do agente txico, a ao deste no
organismo animal e os fatores que influenciam na toxicidade, permitindo estabelecer um diagnstico e
escolher a melhor conduta teraputica.
Aspectos toxicocinticos como absoro, distribuio, biotransformao e excreo dos
toxicantes e toxicodinmicos como mecanismos de ao e/ou produo de leses, so fundamentais
para compreenso dos casos de intoxicao.
Para que se possa estabelecer um diagnstico preciso em toxicologia veterinria importante
considerar aspectos epidemiolgicos, clnicos e laboratoriais. Estando estes, diretamente relacionados
escolha da teraputica mais adequada, que pode ser composta por medidas de descontaminao e
tratamento sintomtico, ou mesmo pela utilizao de antdotos especficos.
Vrios agentes como animais peonhentos e venenosos, plantas ornamentais e de interesse
pecurio, micotoxinas, medicamentos e produtos de uso veterinrio, metais pesados, pesticidas,
produtos qumicos industriais e de uso domstico, drogas de abuso, podem induzir intoxicaes em
animais.
Manifestaes clnicas semelhantes podem ter origens diferentes, sendo assim, para que se
possa diferenciar as causas das intoxicaes, muitas vezes so necessrios exames toxicolgicos ou
bioqumicos para auxlio diagnstico. As anlises laboratoriais utilizadas na toxicologia clnica podem
ser realizadas em diferentes fluidos biolgicos como sangue, urina, leite, lquido ruminal, contedo
estomacal, buscando substncias definidas, seus metablitos ou mesmo alteraes bioqumicas
induzidas pelos agentes txicos.
Os objetivos do estudo da toxicologia clnica veterinria so:
desenvolver uma linha de raciocnio toxicolgico-clnica para auxiliar no
diagnstico dos processos patolgicos ligados a intoxicaes;
capacitar os mdicos veterinrios para a escolha, realizao e interpretao de
anlises toxicolgicas e de bioqumica clnica como ferramenta de suporte no
diagnstico e evoluo das intoxicaes mais freqentes em medicina veterinria.
2 Toxicocintica
Define-se toxicocintica como o movimento dos princpios ativos dentro do organismo.
Esta envolve as fases de absoro, distribuio, biotransformao e excreo (Figura 1).
Os agentes txicos podem ser os prprios princpios ativos, no caso de substncias qumicas,
medicamentos, como tambm, podem ser toxinas liberadas por animais, plantas ou outros organismos.
206
Agente no stio de
exposio
Injetvel: SC, IM
IV
inalatria
oral
drmica
ABSORO
Agente no plasma
Forma livre
Agente nos
tecidos
DISTRIBUIO
Metablitos
nos tecidos
BIOTRANSFORMAO
Forma
conjugada
EXCREO
2.1 Absoro
Corresponde ao transporte da substncia at a circulao.Vrios fatores interferem na
velocidade e na extenso da absoro:
estrutura da pele
caractersticas fsicoqumicas do agente
tipo de exposio
quantidade do agente: dose, concentrao
perodo
curto
prolongado
via de exposio
oral
inalatria
drmica.
207
Aumenta absoro
maior
baixo
lipossolvel
forma no ionizada
lquida
maior
cidos fracos
bases fracas
maior
menor
maior
cio, puerprio
inflamao, lceras,
queimadura
Diminui absoro
menor
alto
hidrossolvel
forma ionizada
slida
menor
bases fracas
cidos fracos
menor
maior
menor
edema, choque
2.2 Distribuio
Define-se distribuio como sendo o processo de transporte entre os diferentes
compartimentos orgnicos (intra e extra celular) aps a chegada na corrente circulatria. Vrios fatores
interferem na distribuio das substncias, como o fluxo sangneo tecidual, as caractersticas das
membranas de transporte e das barreiras biolgicas, as propriedades fsico-qumicas das substncias, o
tipo e a quantidade de protenas plasmticas e, a capacidade de ligao das substncias a tecidos de
depsito.
rgos com alto fluxo sangneo como os pulmes, favorecem a distribuio, j os msculos
em repouso tm sua distribuio reduzida devido ao baixo fluxo sangneo local.
As caractersticas das membranas de transporte so fundamentais na compreenso da
distribuio, pois estas vo determinar o tipo de transporte entre os compartimentos (difuso,
transporte ativo), incluindo as barreiras celulares como a mucosa gastrintestinal e o epitlio tubular
renal, e as barreiras biolgicas.
As barreiras biolgicas que interferem na distribuio dos agentes txicos so:
hematoenceflica: que bloqueia a entrada de substncias no SNC;
placentria: que protege o feto, evitando a transferncia de substncias exgenas
para o feto;
hemato-testicular: que bloqueia a entrada de anticorpos circulantes e/ou de
substncias nos testculos, evitando efeitos sobre os espermatozides.
Estas barreiras de uma forma geral bloqueiam a entrada de substncias hidrossolveis e
de alto peso molecular, alm de contar com sistemas de efluxo mediados pela
glicoprotena P.
Os principais depsitos incluem:
tecido adiposo: onde se depositam as substncias hidrossolveis;
tecido conjuntivo: onde se depositam as substncias lipossolveis.
Estes depsitos apenas fixam o agente e liberam quando o gradiente favorecer. Sendo por esta
razo denominados de silenciosos ou indiferentes.
As protenas plasmticas tm um papel fundamental na distribuio das substncias exgenas
no organismo. As principais so a albumina que se recebe preferencialmente cidos e, a -globulina e
a glicoprotena cida que aceptam bases. Outras protenas incluem as lipoprotenas circulantes e as
protenas de membranas dos eritrcitos, leuccitos e plaquetas. Ligando-se reversivelmente a estas, so
capazes de liberar quantidades na corrente circulatria conforme a reduo de substncia livre (capaz
de ligar-se aos receptores e efetuar sua ao) ou competio por outra substncia que tenha afinidade
pelo mesmo tipo de protena. Hipoproteinemia pode ser uma das causas de aumento de toxicidade de
208
agentes txicos que tem alta taxa de ligao a protenas plasmticas. As substncias podem ligar-se
tambm a protenas teciduais como as de membrana, cidos nuclicos, polipeptdeos ou
polissacardeos, ampliando seus locais de depsito para outros tipos de tecidos. Neste caso, tecidos
como pulmes, ossos, fgado entre outros, podem ser suscetveis as aes das substncias.
Tanto as substncias lipossolveis quanto as hidrossolveis podem distribuir-se no leite,
tornando-se passveis de transferncia para os filhotes e/ou para os consumidores deste produto e de
seus derivados.
2.3 Biotransformao
A biotransformao converte a substncia em composto diferente do administrado.
Os principais tecidos responsveis pela biotransformao de substncias exgenas,
denominados de ativos, so:
fgado;
pulmes;
mucosa intestinal;
pele;
placenta.
O principal objetivo da biotransformao tornar a substncia polar (hidrossolvel) e,
portanto, passvel de excreo renal.
A biotransformao pode gerar:
metablitos inativos;
metablitos ativos:
substncias originalmente ativas prolongando sua ao;
pr-toxicantes tornando-as ativas.
Uma substncia pode necessitar de mais de uma transformao para poder ser eliminada.
Fases da biotransformao:
Fase I gera metablitos ativos ou inativos atravs de reaes de:
oxidao
reduo
hidrlise
O Citocromo P-450 o componente chave dos processos de biotransformao. Especialmente
no fgado, principal rgo de biotransformao, o retculo endoplasmtico liso o local mais
importante de atividade das enzimas oxidases de funo mista (OFM). Freqentemente se observa um
aumento significativo na atividade destas enzimas depois de alguns dias de exposio a toxicantes. O
sistema de OFM atua primariamente em substncias lipoflicas (apolares), acrescentando a estas,
grupos funcionais polares (hidroflicos).
Fase II (sintticas) gera preferencialmente metablitos inativos atravs de conjugaes
com:
cido glicurnico
aminocidos
acetatos
sulfatos
glutationa
Esta fase inclui uma srie de reaes de conjugao, envolvendo substncias exgenas
previamente modificadas na fase I, para torn-las hidrossolveis e passveis de excreo renal.
Vrios fatores reduzem a capacidade de biotransformao das substncias. So estes:
idade: perodo neonatal e senil;
espcie, raa ou linhagem: sistemas enzimticos pouco eficientes;
sexo: machos possuem 40% a mais de Citocromo P-450 do que fmeas;
estado fisiolgico: gestao;
condies clnicas: insuficincia heptica, desnutrio, hipotermia...
209
2.4 Excreo
A excreo a fase da toxicocintica responsvel pela eliminao da substncia do organismo
e os rgos responsveis por este processo so denominados emunctrios.
Os principais tecidos responsveis pela excreo de substncias exgenas so:
rins: via urina;
fgado: via bile;
A excreo pode se dar ainda via:
pulmes: via expirado;
intestinos: via fezes;
glndulas salivares e lacrimais: via saliva e lgrima;
pele: via suor;
glndula mamria: via leite.
Os rins tm um papel depurador crucial, excretando substncias polares e hidrossolveis.
Aps a filtrao, partculas hidrossolveis so excretadas na urina e as lipossolveis so reabsorvidas e
vo circulao sistmica novamente. Os glomrulos filtram substncias at o peso molecular da
albumina (69000), mas somente aquelas no ligadas a protenas plasmticas.
cidos orgnicos fracos, no se dissociam em pH cido, permanecendo lipossolveis e
passveis de reabsoro. Neste caso, a alcalinizao urinria permite ioniz-los, tornando-os
hidrossolveis e passveis de excreo urinria. O oposto, ou seja, acidificar a urina para favorecer a
excreo de bases fracas tambm possvel. Estes processos so denominados de armadilha inica e
de alta relevncia teraputica em toxicologia.
A excreo biliar muito importante na preveno da intoxicao, pois facilita a excreo de
substncias de alto peso molecular e muito polares, englobadas em micelas. Entretanto, algumas
substncias so passveis de reabsoro no intestino, sofrendo o ciclo entero-heptico, possibilitando
assim, o aumento de sua meia vida.
Vrios fatores podem reduzir a excreo, como:
baixa perfuso renal;
baixa taxa de filtrao glomerular;
saturao de carreadores;
idade: neonatos e idosos;
insuficincia renal.
210
3 Toxicodinmica
3.1 Bases celulares da leso txica
A leso celular a base para a maioria das leses txicas, sendo o efeito caracterizado por
disfuno de processos biolgicos. Diferenas quantitativas nas funes celulares, teciduais e de
rgos podem deprimir ou mesmo interromper processos fisiolgicos, como tambm aument-los,
sendo capazes de afetar outros sistemas que no os diretamente envolvidos na leso celular.
A resposta celular a agentes toxicantes ocorre atravs de mecanismos estruturais e
metablicos celulares, tais como:
integridade da membrana: relacionada ao fluxo de lquidos e eletrlitos;
regulao do volume celular: relacionada ao metabolismo energtico responsvel por
fornecer energia para sistemas ativos de transporte transmembrana, sntese de
macromolculas ou manuteno do balano osmtico;
regulao metablica: relacionada ao controle do acmulo de lipdios e pigmentos;
regulao da sntese protica: relacionada ao controle da formao de cidos
nuclicos, enzimas e protenas estruturais;
regulao do crescimento: relacionada a alteraes no DNA (hiperplasia,
carcinognese).
Substncias estranhas ao organismo so biotransformadas a intermedirios eletroflicos pelas
oxidases de funo mista (OFM) microssomais. Provavelmente, estes compostos intermedirios
eletroflicos ligam-se covalentemente a macromolculas celulares que podem ser desnaturadas por esta
ligao. Este tipo de ligao tem uma forte correlao com as leses celulares e/ou carcinognese. Os
compostos eletroflicos podem ligar-se a glutationa reduzida, sendo esta ligao, considerada fator de
proteo celular.
Macromolculas podem ser lesadas por radicais livres, resultantes da adio de eltrons a um
carbono, catalizada por enzima, e com subseqente clivagem.
O oxignito ativo (superxido) formado pela oxidao induzida pelas OFM em substncias
exgenas, reage com lipdios no saturados, iniciando uma reao autocataltica em cadeia que conduz
a formao de radicais livres lipdicos e da, a peroxidao lipdica. Esta peroxidao lesa as organelas
e membranas celulares reduzindo sua integridade estrutural. Isto favorece a perda da homeostasia do
clcio, aumentado no citossol, ativando com isto as fosfolipases, autodigesto das membranas com
perda funcional, turgidez celular e eventual leso celular irreversvel progredindo at a necrose. As
Figuras 2 e 3 descrevem, respectivamente, as vias e a progresso das leses que conduzem a morte
celular.
As clulas podem produzir antioxidantes como a superxido dismutase, a catalase, a
glutationa peroxidase e a Vitamina E, capazes de evitar a formao de radicais livres.
211
Xenobitico
Oxignio
H2O
Metabolismo
pelas enzimas
oxidativas
celulares
X
GRO
GRRx
GRPx
GR
O2
Peroxidao
SOD
Reaes com
antioxidantes
celulares
CAT
H2O2
H2O
H2
Fe
OH
Reaes com
macromolculas
celulares
Peroxidao
lipdica
Desnaturao
protica
Leso de DNA
Leso de
membrana
Perda de
enzimas
Mutao
Cncer
Sntese de
protenas
GR glutationa reduzida
GRPx glutationa peroxidase
GRRx glutationa redutase
GRO glutationa oxidada
CAT - catalase
SOD superxido dismutase
X radical livre
Figura 2. Vias de leso txica induzida por radicais livres produzidos por agentes
toxicantes e superxidos. (Osweiler, 1998).
212
Perda do controle do Ca
Morte celular
Figura 3. Progresso da leso txica conduzindo morte celular. (Osweiler, 1998).
213
214
Raa
Idade
Sexo
Gestao
Lactao
Insuficincia heptica
Insuficincia renal
Irritantes gastrintestinais
Gastroenterite/lceras
Caracterstica
Gatos so maus conjugadores com cido glicurnico, sunos com sulfato,
porquinhos-da-ndia so maus desmetiladores e ces acetiladores, caractersticas
que reduzem a biotransformao de toxicantes que utilizam estes sistemas.
Ruminantes podem ter a absoro retardada pela ampla capacidade de armazenar
grandes volumes de ingesta e a microbiota ruminal pode biotransformar substncias
em toxicantes ou mesmo inativ-las.
Cavalos, ratos e coelhos so incapazes de vomitar, aumentando a toxicidade de
venenos emticos por natureza e dificultando o procedimento de descontaminao
oro-gstrica.
Collies tm a barreira hematoenceflica menos desenvolvida, permitindo a
passagem de substncias como a ivermectina, provocando toxicidade.
Neonatos tm menor capacidade de biotransformao e maior permeabilidade nas
barreiras ainda imaturas (hematoenceflica), permitindo aumento da toxicidade.
Idosos tm sistemas de biotransformao deficientes.
Machos com nveis elevados de testosterona tm maior capacidade de
biotransformao do que as fmeas.
Toxicantes que mimetizam efeitos hormonais afetam mais intensamente animais do
sexo dependente daquele hormnio.
Pode aumentar a capacidade de biotransformao de alguns toxicantes.
Pode aumentar a excreo de toxicantes lipossolveis.
Reduz a biotransformao dos toxicantes, retardando o processo de eliminao.
Reduz a excreo dos toxicantes.
Reduzem o trnsito intestinal e conseqentemente a absoro de toxicantes orais.
Aumenta a absoro de toxicantes.
215
216
217
Alterao
Convulses
Depresso
Respiratrio
Cardiovascular
Tremores musculares
Ataxia e nistagmo
Asfixia
Irritao
Edema pulmonar
Enfisema
Fibrose
Inotropismo
Taquicardia
Bradicardia
Hematopotico
Anemia aplsica
Porfiria
Carboxiemoglobinemia
Metemoglobinemia
Digestrio
Salivao
Irritao, queimadura
Gastrite,
gastroenterite
Emese
Insuficincia heptica
Excretor
Insuficincia renal
Reprodutor
Alterao na
fertilidade do macho
Alterao na
fertilidade da fmea
Aborto
Teratogenicidade
Locomotor
Necrose muscular
Calcificaes de
tecidos moles
Agente txico
Chumbo, organoclorados, metaldedo, piretrinas e piretrides, uria, sdio,
anfetaminas, cafena, chocolate, cocana, estricnina, fluoracetato, ...
Anticolinrgicos, barbitricos, fenotiaznicos, opiides, ivermectina, lcoois,
Datura spp., Cannabis sativa, Micrurus sp., organofosforado, chumbo,
monxido de carbono
Micotoxinas, organofosforados e carbamatos
Aminoglicosdeos, Cannabis sativa,...
Dixido de carbono, monxido de carbono, metano, nitrognio
Cloro, formaldedo, fumaa
Endotoxina, paraquat
Cetonas
Paraquat
Digitalis sp., digoxina, bufotoxina
anfetaminas, cafena, chocolate, cocana, metaldedo, organofosforados,
teofilina
Xilazina, bufotoxina, bloqueadores dos canais de clcio, carbamatos,
organofosforados, Digitalis sp., betabloqueadores
Antineoplsicos, arsenicais, estrgenos, fenilbutazona, cloranfenicol, benzeno,
clorpromazina, tolueno
Chumbo
Monxido de carbono
Nitratos e nitritos, cobre, organoclorados e paracetamol
218
Saber selecionar as melhores evidncias fundamental no diagnstico etiolgico, mas mesmo assim,
o principal tratar o paciente e no o veneno!
Sendo assim, uma investigao toxicolgica baseia-se em critrios indiretos tais como:
anlises biolgicas
determinao dos sistemas envolvidos e/ou das alteraes metablicas
gravidade da intoxicao
perfil bioqumico
agente txico suspeito
anlise toxicolgica
As tabelas 3 e 4 referem os principais sistemas envolvidos e as alteraes metablicas
correlacionadas aos agentes txicos.
Agentes txicos
cido acetil-saliclico, metanol, metaldedo,...
Digitlicos, tetraciclinas, fenotiaznicos e antidepressivos tricclicos,...
cido fluordrico, cido oxlico,...
Cumarnicos, Bothrops sp,...
Paracetamol, organofosforados,...
Sais de cobre, arsnico, mercrio, Crotalus sp., Loxosceles sp.,...
219
Quantidade
5-10 mL
Soro (refrigerado)
5-10 mL
Urina (refrigerada)
50 mL
Fezes (refrigeradas)
250 g
Vmito (refrigerado)
250 g
Plos
Fgado (congelado e formalina tamponada 10%)
Rins (congelado e formalina tamponada 10%)
5-10 g
100 g
100 g
500 g
500 g
Gordura
Crebro (congelado e formalina tamponada
10%)
Alimentos (mltiplas amostras)
Forragens (mltiplas amostras, congeladas)
Iscas
gua (refrigerada)
250 g
inteiro
2 kg
5 kg
todas
0,5-1 L
1 kg
Agentes
Metais, minerais, colinesterase, pesticidas e
hemograma
Eletrlitos, uria, metais, drogas, antibiticos e
vitaminas
Alcalides, metais, eletrlitos, drogas,
antibiticos, sulfonamidas e oxalatos
Exposio oral recente de substncias excretadas
pela bile
Vrios agentes (principalmente aqueles no
detectados em tecidos), organofosforados e
ionforos
Pesticidas e metais (exposio crnica)
Metais, pesticidas, alcalides e micotoxinas
Antibiticos, outros frmacos, alcalides,
herbicidas, metais, compostos fenlicos e
oxalatos
Semelhante ao vmito
Rumen pode degradar nitratos e micotoxins
(melhor congelar)
Organoclorados, dioxinas (lipossolveis)
Organoclorados, piretrinas, sdio e mercrio
(neurotxicos)
Micotoxinas, aditivos alimentares,...
Micotoxinas,...
Rodenticidas, inseticidas,...
Nitratos, sulfatos, slidos totais, metais,
pesticidas
Minerais, pesticidas
6.1 Descontaminao
O primeiro passo inclui a remoo do ambiente txico, principalmente em exposies por via
inalatria e/ou drmica ambiental (banheiro, tanque, cho,...). Instrues aos cuidadores quanto
necessidade de material de proteo como luvas, roupas com pernas e mangas longas para efetuar o
manejo e/ou descontaminao.
Orientaes quanto remoo de resqucios do agente toxicante da boca, ou mesmo induo
de emese com perxido de hidrognio (gua oxigenada) ou detergente lquido de loua, atentando para
a posio do animal de forma a evitar aspirao do vmito.
Informar sobre a necessidade ou no de atendimento clnico de emergncia e os
procedimentos para o transporte alm da necessidade de trazer a embalagem do produto, planta ou
mesmo animal venenoso ou peonhento, quando for seguro e possvel.
Descontaminao drmica:
220
lavar continuamente o animal com gua morna e sabo ou detergente suave, at que o
produto tenha sido removido;
animais de plos longos podem necessitar de corte ou tosa para remover os resduos
txicos.
Descontaminao ocular:
lavar com gua, vrias vezes ou irrigar com soro fisiolgico por cerca de 20 min.
Descontaminao gstrica/enteral:
emese:
contra-indicada: roedores, coelhos, eqinos ou ruminantes; animais inconscientes,
muito deprimidos, convulsivos; em ingesto de corrosivos, custicos, derivados do
petrleo ou outras substncias volteis;
quando indicada: perxido de hidrognio 3% (2-5 mg/kg no excedendo 50 mL);
soluo de detergente lquido de loua no de mquina ou de roupa (3 colheres de
sopa em 250 mL de gua 10 mL/kg); xilazina (1,1 mg/kg);
lavagem gstrica: quando emese foi ineficaz ou contra-indicada; animal entubado
endotraquealmente para evitar aspirao, sonda gstrica calibrosa, administrar gua
ou salina (10 mL/kg) por gravidade e aspirar aps alguns minutos, repetir at que o
lquido esteja claro, evitar presso excessiva pelo risco de dano a mucosa
enfraquecida.
lavagem enterogstrica: concomitante com lavagem gstrica efetuado enema retrgrado
alto (lquido via retal);
adsoro com carvo ativado: administrado para adsorver o toxicante, mais eficaz para
molculas grandes, no polareas, agentes ionizados so menos adsorvidos do que os
neutros; em suspenso aqosa de 1g em 5 mL de gua e administrado na dose de 1-5
g/kg; frmacos administrados na presena de carvo so adsorvidos e tm sua eficcia
reduzida;
gastrotomia ou rumenotomia: necessrias em situaes refratrias emese, lavagem
gstrica ou carvo ativado; indicada para remoo de corpos estranho constitudos por
metais pesados; materiais persistentes como alcatro, leos txicos, podem necessitar
evacuao cirrgica.
6.2 Medidas gerais de suporte
Freqentemente, na interveno de emergncia de casos de intoxicao, as medidas de
suporte so prioritrias, mesmo quando existe o diagnstico etiolgico e antdoto apropriado. Estas
incluem:
Disfunes neurolgicas:
convulses devem ser controladas com benzodiazepnicos e/ou barbitricos, jamais
com tranqilizantes fenotiaznicos (diminuem o limiar convulsivo);
depresso pode ser reduzida por estimulante central como o doxapram.
Choque: hipovolmico controlar com Ringer lactato ou expansores plasmticos;
hemorrgico, considerar transfuso.
Arritmias cardacas: bradicardia sinusal controlar com atropina; bloqueio trioventricular tratar com atropina, dopamina ou isoproterenol; parada atrial utilizar
bicarbonato de sdio em salina e insulina com glicose; taquicardia ventricular em ces
controlar com lidocana, mas no em gatos (neurotxica).
Vmitos e/ou diarria: hiperreatividade gastrintestinal pode reduzir a absoro ou auxiliar
na eliminao de toxicantes, entretanto desequilbrios hidreletrolticos devem ser
controlados; irritao local do estmago pode ser controlada com anti-histamnicos H2.
221
Antdoto
Acetilcistena
Atropina
Pralidoxima* (ou atropina)
Dimercaprol (BAL)*
Nitrito ou tiossulfato de sdio
EDTA clcio-dissdico*
cido ascrbico ou D-penicilamina*
Molibdato de amnio* ou tetratiomolibidato de
amnio* (aguda)
Vitamina K -fitomenandiona
Anticoagulantes cumarnicos ou
indanedinicos
Metemoglobinemia em gatos
cido ascrbico
Nitrato, nitrito ou cloreto em grandes animais Azul de metileno
Peonha de serpentes
Soro antiofdico especfico
Zinco
EDTA clcio-dissdico*
* No aprovado pelo FDA para uso em animais.
222
223
Tabela 8. Casos de intoxicao animal por medicamentos e produtos de uso veterinrio registrados em 2006 no
CIT/RS.
Classe
Medicamentos
Analgsico
Anestsico local
Antiandrognico
Antiasmtico
Antibitico
Anticonvulsivante
Antidepressivo
Antidiarrico
Antiemtico
Antifngico
Antiinfecciosos
Antiinfecciosos do trato
gastrintestinal
Antiinflamatrio no esteride
Antilipmicos
Antiobesidade
Antiprotozorio sistmico
Anti-sptico tpico
Antivertiginoso
Benzodiazepnico
Catrticos
Corticosterides de uso sistmico
Diurticos
Estimulantes do SNC
Frmacos antienxaqueca
Frmacos para hipotireoidismo
Frmacos para resfriado
Frmacos para pele, mucosas e
fneros
Frmacos que afetam a calcificao
Hormnios sexuais e anlogos
Neurolpticos
Sedativo-hipntico
Vasodilatador
Vitaminas
Total medicamentos
Aves
Produtos veterinrios
Medicamentos veterinrios
Pesticida veterinrio
Produtos veterinrios - outros
Total de produtos veterinrios
Total de medic. e produtos veterinrios
Bovinos
Caninos
Felinos
7
1
1
Sem
definio Total
Sunos
1
8
1
1
1
5
4
2
1
6
2
1
1
3
3
2
1
5
2
2
1
1
1
7
3
2
1
1
5
1
12
3
1
1
2
2
1
1
9
2
1
1
1
Bovinos
4
1
1
4
89
16
Caninos
Felinos
Outros
13
2
2
53
5
6
6
4
1
1
72
11
9
2
161
27
11
1
224
14
3
2
3
2
5
1
12
3
1
1
2
2
1
1
11
2
1
4
1
1
4
109
1
Sem
definio Total
18
3
67
11
3
96
4
205
Tabela 9. Casos de intoxicao animal por animais venenosos, peonhentos e outros animais
registrados em 2006 no CIT/RS.
Classe
Insetos/peonhentos/venenosos
Lagarta peonhenta/venenosa
Total de insetos e outros animais
Loxosceles
Phoneutria
Aranha ignorada
Bothriurus sp
Tityus sp
Escorpio outro
Total de aracndeos
Bothrops
Crotalus
Micrurus
Total de ofdios
Animais peonhentos/venenosos
ignorado
Animais peonhentos/venenosos outros
Total de animais venenosos,
peonhentos e outros
Aves
Bovinos
Caninos Felinos
Outros
Total
6
1
7
1
1
6
2
8
1
1
3
1
4
6
6
4
1
5
1
1
1
1
15
1
2
18
1
26
4
31
1
1
1
1
2
1
27
1
5
34
7
9
1
64
8
9
77
Tabela 10. Casos de intoxicao animal por plantas txicas registrados em 2006 no CIT/RS.
Classe
Cogumelos/Fungos txicos
Plantas outras
Plantas medicinais
Plantas txicas
Total de plantas
Aves
Bovinos
Caninos
2
3
1
1
2
2
225
52
57
Felinos
2
1
7
10
Sem
Total
identificao
Outros
2
2
1
1
2
5
1
65
73
Tabela 11. Casos de intoxicao animal por domissanitrios registrados em 2006 no CIT/RS.
Classe
Alvejantes / desinfetantes liberadores de cloro
Desentupidor
Desinfetantes - antimicrobianos / aldeidos
Desinfetantes - antimicrobianos / fenlicos
Desinfetantes - antimicrobianos / quaternrios
Detergentes, limpadores e congneres
leos saneantes domissanitrios
Propelentes - uso domstico
Removedores de mancha / ferrugem
Sapleos / saponceos
Tensoativo aninico
Tensoativo catinico
Total de domissanitrios
Caninos
15
5
4
5
3
1
1
1
1
6
1
43
Felinos
Outros
2
1
Sem
identificao
1
1
Total
19
6
4
12
4
1
2
2
1
2
8
1
62
7
1
2
1
1
1
15
Tabela 12. Casos de intoxicao animal por produtos qumicos industriais registrados em 2006 no
CIT/RS.
Classe
Aves
lcalis
Colas e adesivos
Combustveis
Gases
Hidrocarbonetos
leos
Poeiras
Polmeros
Produtos qumicos - Outros
Tintas/ Vernizes
Total de qumicos
industriais
Caninos
1
1
1
2
12
5
17
1
3
4
2
7
1
Outros
Felinos
3
3
Sem definio
Total
45
17
Tabela 13. Casos de intoxicao animal por outros agentes toxicantes registrados em 2006 no CIT/RS.
Classe
Metais/chumbo
Drogas de abuso
Cosmticos/toalete
Diverso/ recreao
Miscelnea
Outros
Total de outros agentes
Caninos
1
7
2
1
4
5
20
Felinos
Total
1
1
226
1
7
2
1
5
5
21
6
4
2
17
18
1
3
4
3
7
65
227
aranha marrom, Loxosceles sp. (Figura 6): de pequeno porte, no agressiva, mas com
veneno de alta toxicidade, entretanto, s pica quando comprimida, o que limita o nmero
de acidentes com animais; a toxina potente causando uma necrose intensa no local da
picada, que se inicia cerca de 12 horas aps o acidente, podendo evoluir clinicamente
para um quadro de insuficincia renal.
Aranha armadeira, Phoneutria sp. (Figura 7): extremamente agressiva, podendo saltar
cerca de 30cm, veneno bastante txico, podendo causar acidente fatal em pequenos
animais;
Sinais clnicos: dor intensa no local da picada (freqentemente boca ou focinho),
lacrimejamento, midrase, sialorria, tremores musculares, ataxia, prostrao,
vmitos e priapismo (ereo do pnis por vrias horas), ejaculao, dispnia, fezes
sanguinolentas e ocasionalmente, morte;
Tratamento: no h soro especfico disponvel para utilizao em animais no Brasil,
a terapia de suporte inclui: analgesia potente, antiinflamatrio (no esteride ou
corticosteride), suporte respiratrio e hidreletroltico.
228
Escorpies
Dentre as espcies peonhentas de escorpies, pode-se citar:
Bothriurus bonariesis (Figura 8), Tityus costatus (F 9A), Tityus serrulatus (Figura 9B).
Apesar dos acidentes com escorpies em animais serem extremamente raros, relevante conhecer as
espcies e seu potencial de toxicidade. O escorpio preto, Bothriurus sp. caracterizado por apresentar
pinas robustas e unhas curtas, j as espcies de Tityus, apresentam pinas finas e unhas longas, sendo
que no T. costatus o corpo amarelo coberto por manchas marrons. Nos casos de acidentes com os
escorpies nativos do Rio Grande do Sul como Bothriurus sp ou Tityus costatus, devido baixa
toxicidade do veneno, o principal sintoma a dor local; esta pode ser tratada com analgsicos ou
mesmo anestsicos locais. No caso de acidentes com Tityus serrulatus (no nativo do RGS), que pode
ocorrer quando estes animais entram no Rio Grande do Sul atravs de carregamento de frutas, lenha,...
pode ocorrer quadro clnico severo de neurotoxicidade perifrica e morte; no h soro especfico
disponvel para administrao em animais no Brasil, em caso de acidente o tratamento deve ser
sintomtico e incluir: analgsicos potentes para o controle da dor, evitando o choque neurognico.
229
Diagnstico: pela presena dos ferres ou sinais clnicos caractersticos, associados a possvel
presena destes animais no ambiente. As leses persistem por 24 48h.
Tratamento: suporte de emergncia em caso de choque anafiltico com respirao assistida,
epinefrina, corticosterides e analgsicos; em casos leves a moderados, a terapia inclui antihistamnicos, corticosterides, analgsicos e em alguns casos, anestsicos locais.
Sapos
A exposio ocorre principalmente quando ces atacam e mordem os sapos. As substncias
txicas com ao glicosdica cardioativa e ocitcica so as bufotoxinas e bufoteninas. As toxinas
produzidas pelas glndulas de veneno distribudas ao longo da superfcie dorsal do sapo so liberadas
ao serem comprimidas durante a mordida, e o veneno que rapidamente absorvido pela mucosa oral,
provocando alteraes digestivas, cardacas e neurolgicas.
Sinais clnicos: salivao, vmitos, midrase, hipertenso, fibrilao ventricular, agitao da cabea,
incoordenao motora, desorientao e convulses, a fibrilao ventricular precede a morte por
insuficincia cardaca.
Diagnstico: histrico de exposio ao animal e sinais clnicos caractersticos.
Laboratorial: aumento de hematcrito, hiperpotassemia, hipercalcemia, hiperglicemia e
reduo dos leuccitos.
Tratamento: descontaminar enxaguando abundantemente a boca e administrando carvo ativado;
administrar propranolol (2 mg/kg) para controlar a arritmia cardaca e atropina para controlar a
broncoconstrio e sialorria; diazepam no controle das convulses.
230
8.1.3 Ofdios
As principais serpentes peonhentas do Rio Grande do Sul so: Bothrops jararaca, B.
alternatus, B. cotiara, B. neuwied, Crotalus durissus terrificus, Micrurus altirostris e M. frontalis. Na
Figura 12 pode-se observar as caractersticas principais das serpentes peonhentas como a presena de
fosseta loreal (orifcio sensorial trmico), localizada entre as narinas e os olhos e as presas
inoculadoras de veneno anteriores e flexveis (proterglifas). Exceto as serpentes do gnero Micrurus
que no apresentam a fosseta loreal e tm suas presas inoculadores pequenas, fixas e mais laterais
(opistglifas). Estas ltimas so identificadas pelos anis completos brancos, vermelhos e pretos,
alternadamente dispostos ao redor de seu corpo (Figura 13). Na Figura 14, encontram-se as serpentes
do gnero Bothrops, sendo a Figura 14A, representativa da B. alternatus que possui seus desenhos em
forma de gancho de telefone e a B. jararaca (Figura 14B), em forma de V.
A Figura 15 apresenta a serpente Crotalus durissus terrificus com a sua caracterstica
distintiva, o chocalho na ponta da cauda.
A
Figura 12. Caractersticas de ofdio peonhento: presas inoculadoras (A) e fosseta loreal (B).
Figura 13. Caractersticas das serpentes do gnero Micrurus: presas inoculadoras e anis
completos ao redor do corpo.
231
A
B
Figura 14. Serpentes do gnero Bothrops: A B. alternatus e B B. jararaca.
232
local da picada na maioria das espcies, exceto nos gatos. No envenenamento crotlico, o edema foi
mais discreto em eqinos e caninos. A necrose foi observada no envenenamento botrpico em bovinos,
caninos e coelhos. O risco de vida para bovinos foi maior nos acidentes por Crotalus durissus
terrificus, Bothrops cotiara e B. alternatus, pela capacidade de inoculao de grandes volumes de
veneno.
Segundo Bicudo (1994), os fatores mais relevantes destes acidentes incluem: a espcie de
serpente e o tamanho da mesma (quantidade de veneno inoculado), a espcie animal envolvida
(incluindo o porte do animal), o local da picada, a intensidade dos sintomas e o tempo decorrido entre
o acidente e o atendimento.
O mecanismo de ao complexo e nas Bothrops, inclui respostas a fraes proteolticas
(proteases, hialuronidases e fosfolipases), responsveis pelo edema intenso e pela necrose, fraes prcoagulantes (que ativam o fator X e a protrombina, alm de promover a converso do fibrinognio em
fibrina) e fraes hemorrgicas (hemorraginas). Nos acidentes crotlicos, h um importante
componente miotxico (que provoca rabdomilise com liberao de mioglobina para o soro e
posteriormente, para a urina) alm de um neurotxico (crotoxina que inibe a liberao pr-sinptica da
acetilcolina gerando um bloqueio neuromuscular), e um componente coagulante (que promove a
converso do fibrinognio em fibrina e secundariamente, esgota este fator de coagulao, conduzindo a
hemorragias). Nos acidentes elapdicos, os principais componentes so neurotxicos: neurotoxinas de
ao pr-sinpticas (semelhante a crotoxina, que inibe a liberao pr-sinptica da acetilcolina gerando
um bloqueio neuromuscular) e ps-sinpticas (bloqueadores neuromusculares de ao curarisante).
Acidente botrpico
Sinais clnicos: h edema intenso no local da picada, sendo este diretamente proporcional ao tempo
transcorrido desde a inoculao, hemorragia no local da picada, e em casos mais graves, gengivorragia,
epistaxe, hemoptise, hemorragias subcutneas, intracavitrias e intracraniana; nestes casos a anemia
evidente; a dor no local da picada intensa fazendo com que animais picados nos membros fiquem
imveis ou claudiquem; picadas no focinho podem gerar dificuldade respiratria em funo do edema;
as marcas da picada podem no ser observadas em funo da pelagem ou do edema, outras vezes esta
se torna evidente quando a hemorragia se inicia; a necrose um sinal tardio. Acidente por Bothrops
filhote pode cursar com edema leve e sem sinal caracterstico da picada, mas com hemorragia.
Diagnstico: inclui os sinais clnicos caractersticos (edema, hemorragia,...) associados aos detalhes
referentes epidemiologia, habitat e hbitos deste gnero e as alteraes hematolgicas.
Laboratorial: o tempo de coagulao est aumentado e as plaquetas reduzidas;
importante avaliar a creatinina como forma de monitorar a funo renal.
Tratamento: soro antiofdico (Bio-Vet ou Vencofarma) polivalente (antibotrpico e anticrotlico),
administrado por via IV, em doses suficientes para neutralizar a ao da peonha inoculada (em mdia:
Bothrops jararaca: 65mg; B. alternatus: 130mg e Crotalus: 50mg - Bio-Vet/50 mL: poder
neutralizante de 50mg de veneno botrpico e 50mg de crotlico; Vencofarma/10 mL: poder
neutralizante de 20mg de veneno botrpico e 10mg de crotlico) e portanto, no se relacionando com a
massa corporal do animal; as medidas de suporte incluem auxlio respiratrio, anti-histamnicos,
analgsicos, antimicrobianos, terapia hidreletroltica e transfuso sangnea (se necessria, somente
aps soroterapia especfica).
Acidente crotlico
Sinais clnicos: prostrao, parestesias, um sinal caracterstico a oftalmoplegia (paralisia dos
msculos do globo ocular), facilmente evidenciada rotando-se a cabea dos bovinos, circunstncia na
qual se espera que o globo ocular gire em sentido oposto, mas este gira no mesmo sentido, no
revelando nitidamente a esclertica; urina cor de caf devido a mioglobinria em decorrncia da
rabdomilise; os sinais locais so pouco evidentes e a dor de difcil interpretao uma vez que a
resposta muscular encontra-se prejudicada.
Diagnstico: inclui os sinais clnicos caractersticos (prostrao, parestesia, oftalmoplegia,...)
associados aos detalhes referentes epidemiologia, habitat e hbitos deste gnero e as alteraes
hematolgicas e urinrias.
Laboratorial: creatininaquinase aumentada; a creatinina pode aumentadar em
decorrncia de uma possvel insuficincia renal.
233
Tratamento: soroterapia antiofdica como citada para acidente botrpico e medidas de suporte que
incluem: lubrificao ocular e bucal, alternar decbito, terapia hidreletroltica, alcalinizar o pH urinrio
(7 ou mais) para evitar precipitao da mioglobina nos tbulos renais.
Acidente elapdico
Sinais clnicos: prostrao, fraqueza muscular, oftalmoplegia, paralisia flcida do diafragma, com
dispnia seguida de morte por parada respiratria.
Diagnstico: inclui os sinais clnicos caractersticos (prostrao, fraqueza muscular, oftalmoplegia,
dispnia,...) associados aos detalhes referentes epidemiologia, habitat e hbitos deste gnero.
Tratamento: no h soroterapia especfica disponvel; especial ateno deve ser dada ao sistema
respiratrio.
8.2 Plantas txicas ornamentais e de interesse pecurio
Plantas txicas so aquelas que contm produtos fisiologicamente ativos ou substncias
txicas em quantidade suficiente para causar efeitos nocivos no homem e/ou nos animais. Estas podem
ser nativas ou cultivadas, ornamentais, medicinais ou invasoras. Tanto as ornamentais quanto s de
interesse pecurio so influenciadas por determinados fatores capazes de interferir na toxicidade:
tipo de solo;
nutrientes;
fase evolutiva;
clima;
parte da planta.
Dentre os aspectos que caracterizam as plantas txicas, pode-se citar:
algumas plantas necessitam de grandes quantidades ou exposio prolongada para
manifestar efeitos txicos;
os efeitos nem sempre so precoces;
nem sempre as plantas causam alteraes digestivas como timpanismo / diarria;
No estudo das plantas txicas relevante atentar para os seguintes critrios de classificao:
regional;
conforme o quadro clnico-patolgico;
conforme as famlias botnicas;
conforme os princpios ativos txicos.
Para o estabelecimento do diagnstico correto so importantes:
cuidados com os nomes populares;
quadros clnicos vagos;
inspeo da pastagem;
exames laboratoriais como exame de contedo gstrico, histopatolgico;
ensaios biolgicos em animais modelo;
identificao botnica.
Oxalato de clcio
Famlia: Araceae
Diefenbachia picta - Comigo-ningum-pode
Anturium andraeanum Antrio vermelho
Anturium ornatum Antrio branco
Zantedeschia aethiopica - Copo-de-leite
Princpio ativo: rfides de oxalato de clcio.
Quadro clnico: dor em queimao, edema de mucosas, sialorria, disfagia, nuseas e vmitos.
dermatite de contato. contato com olhos: lacrimejamento, fotofobia.
Tratamento: demulcentes, analgsicos, corticosterides.
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Famlia Liliaceae
Sansevieria trifasciata Espada-de-So Jorge
Caractersticas: folhas grandes, eretas, verde-escuras, com faixas transversais ou manchas brancas;
flores verde-claras.
Princpio ativo: rfides de oxalato de clcio.
Quadro clnico: dor em queimao, edema de mucosas, sialorria, disfagia, nuseas e vmitos.
dermatite de contato; contato com olhos: lacrimejamento, fotofobia.
Tratamento: demulcentes, analgsicos, corticosterides.
235
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Glicosdeos saponnicos
Famlia Meliaceae
Melia azedarach - Cinamomo
Caractersticas: flores pequenas, de colorao lils; fruto ovide, pequeno, mole, esbranquiado e de
cheiro desagradvel.
Princpio ativo: glicosdios saponnicos.
Quadro clnico: distrbios gastrintestinais, distrbios hidroeletrolticos; confuso mental, ataxia,
torpor e coma.
Tratamento: esvaziamento gstrico; demulcentes, hidratao, benzodiazepnicos, se convulses.
237
238
antidiarricos; leses na pele e mucosas - descontaminao local e usar solues antisspticas suaves,
analgsicos, anti-histamnicos ou corticides.
Famlia: Solanaceae
Atropa belladona Dama da noite
Datura stramonium Figueira-do-inferno
Brugmansia suaveolens - Cartucheira
Princpios ativos: daturina (hioscina, atropina)
Quadro clnico: anticolinrgico - diminuio das secrees, pele e mucosas secas, midrase, com
viso alterada; vmitos e alterao de conduta.
Tratamento: esvaziamento gstrico, carvo ativado; sintomtico com parassimpaticomimticos
(fisostigmina), sedativos e compressas frias.
Figura 22. A - Lithraea brasiliensis (Aroeira-brava); B - Jathropa curcas (Pinho-de-purga); C Datura stramonium (Figueira-do-inferno); D - Brugmansia suaveolens (Cartucheira).
Alcalides pirrolizidnicos
Famlia Compositae
Senecio brasiliensis - Maria-mole
Princpio ativo: alcalides pirrolizidnicos.
Quadro clnico: anorexia, nuseas, vmitos, dor e distenso abdominal, flatulnca, edema de membros
inferiores, diarria, ascite, hepatoesplenomegalia, cirrose heptica, ictercia, hemorragia
gastrointestinal e encefalopatia; emagrecimento, agressividade, incordenao motora, tenesmo e
fotossensibilizao; alteraes centrais so mais evidentes nos eqinos que nos bovinos.
Anlise laboratorial: elevao de bilirrubinas e transaminases: gamaglutamil transferase pode ser
eficiente para estabelecimento de prognstico nos animais assintomticos. Os alcalides
pirrolizidnicos podem ser detectados por cromatografia de camada delgada. Elevao da enzima
glutamato desidrogenase, da fosfatase alcalina e da gamaglutamil transferase.
Patologia: ocluso dos pequenos ramos da veia heptica por colgeno e formao de canalculos pelos
sinusides dilatados; congesto macia centrolobular e necrose; leses primrias no fgado que
239
consistem em fibrose portal, megalocitose, necrose hepatocelular, hiperplasia do ducto biliar, estase
biliar e hiperplasia nodular; cirrose heptica e edema pulmonar.
Tratamento: no fazer esvaziamento gstrico; corticides.
Famlia Borafinaceae
Symphytum officinale
- Confrei
Caractersticas: erva perene de 50 cm de altura; folhas grandes, alternadas, ovaladas, grossas e
pilosas.
Quadro clnico: distrbios gastrintestinais; hepatite txica (cirrose, ictericia e encefalopatia);
fotossensibilizao.
Anlise laboratorial: elevao das aminotransferases, hipoglicemia, hiperbilirrubinemia e
coagulopatias.
Tratamento: esvaziamento gstrico; correo da hipoglicemia; controlar a ascite; necrose heptica
severa sinal de mau prognstico e o manejo o mesmo dispensado para a insuficincia heptica
fulminante.
240
podem morrer subitamente se exercitados vigorosamente. Alguns rebanhos podem mostrar apenas
perda de peso e falha em ganhar peso de outubro a fevereiro e se recuperam aps o desaparecimento da
planta.
Diagnstico diferencial: Solanum malacoxylon, Vitamina D
Patologia: calcificao da aorta abdominal e artria renal, calcificao da mitral e vlvula artica,
calcificao pulmonar.
Tratamento: no h tratamento especfico; retirar da exposio (recuperao parcial).
Tricotecenos
Famlia Compositae
Baccharis coridifolia - Mio-mio
Princpio ativo: tricotecenos (roridinas A e E) absorvidos do solo.
Quadro clnico: efeito custico em mucosas do tubo digestivo de bovinos e ovinos; maior toxicidade
na florao; anorexia, timpanismo, ausncia de movimentos ruminais; tremores musculares, gemidos
(dor). Morbi-mortalidade altas.
Patologia: congesto, hemorragia e edema das paredes do intestino, dos pr-estmagos; degenerao e
necrose de epitlios.
Tratamento: carvo ativado, remoo da pastagem contaminada, tratar o timpanismo.
Saponinas
Famlia Leguminosae
Enterolobium spp - Timbava, Orelha-de- macaco
Princpio ativo: saponina esteroidal.
Quadro clnico: anorexia, fezes escuras e ftidas; ictercia mucosa ocular; leso de pele; bovinos so
sensveis em condies naturais e experimentais (favas maduras tem boa palatabilidade).
Patologia: degenerao heptica e de tbulos renais; hiperemia medular renal.
Anlise: bilirrubinria alta e filoeritrina srica alta.
Tratamento/ controle/profilaxia: sombra, cicatrizantes, antidiarricos.
Tiaminase
Pteridium aquilinum -Samambaia, Samambaia-do-campo
Caractersticas: planta rizomatosa, bipinada, com folhas de aspecto coriceo; fololos lobados e em
sua parte ventral mostra colees de esporos marrons arranjados linearmente; a largura da planta de
60-120cm e a altura de 60-180cm; habitat: cosmopolita, principalmente em solos arenosos e cidos.
Princpios ativos: toxinas, agudamente suprimem a medula ssea (10 g/kg/dia por 3-4 semanas da
planta verde); cronicamente, causam hematria enzotica (bovinos ingerindo <10 g/kg/dia, por cerca
de dois anos).
Quadro clnico da forma aguda: aplasia de medula, anemia, hemorragias; bovinos afetados
desenvolvem febre (41-42C), palidez e petquias nas mucosas. O curso clnico agudo e muitos
bovinos podem ser encontrados mortos; aqueles que vivem mais tempo acabam sucumbindo aos
efeitos da hemorragia ou de anemia aplstica.
Diagnstico diferencial: ingesto crnica de polpa ctrica, intoxicao por trevo doce, pasteurelose.
Quadro clnico da forma crnica - hematria enzotica: neoplasia de bexiga, hematria
intermitente ou contnua e acabam morrendo, devido anemia; carcinoma de clulas escamosas do
trato digestivo, a morte devido extrema caquexia o desenlace invarivel nessa forma de
intoxicao.
Diagnstico diferencial (hematria): leptospirose e intoxicao por Brachiaria radicans.
Patologia: massas teciduais de crescimento invasivo, nodulares, amareladas ou amarelo-acinzentadas
e ulceraes so encontradas na base da lngua, crdia, esfago e rmen; carcinoma de clulas
241
escamosas: massa nodular invasiva na base da lngua, massa nodular invasiva e ulcerada na entrada do
rmen.
Pteridim aquilinum em eqnos:
Princpio ativo: tiaminase tipo I - provoca a inativao da tiamina.
Quadro clnico: incoordenao motora, tremores musculares, convulses e sonolncia.
Tratamento: Vitamina B1 (100mg/dia, durante uma semana).
Cogumelos
Amanita phalloides
Caractersticas: chapu ovide e convexo, de 5 10cm de dimetro, cor verde-amarelado ou
esbranquiado.
Princpio ativo: falotoxina, amatoxinas
Quadro clnico: distrbios digestivos, cimbras, prostrao, posteriormente hepatite, nefrite tubular.
Tratamento: sintomtico com dieta hiperproteica, hipercalrica, hipogordurosa; correo dos
distrbios hidroeletrolticos.
Psilocibe sp
Caractersticas: fungo conhecido como cogumelo mgico devido aos efeitos alucingenos que
provoca; cresce preferencialmente sobre estrume bovino.
Princpio ativo: derivados triptamnicos, responsveis pela sua neurotoxicidade.
Quadro clnico: em eqinos observou-se dor, clicas, comportamento agressivo e excitabilidade; em
ces, alm dos sintomas observados nos eqinos, temos afetado o sistema de regulao da temperatura
corporal.
Tratamento: no se deve efetuar lavagem gstrica durante as alucinaes; descanso, observao
contnua do paciente para prevenir comportamento agitado ou perigoso durante as alucinaes e
sedao com benzodiazepnicos.
Fitoestrgenos
Trifolium subterraneum Trevo subterrneo
Princpio ativo: isoflavonas.
Medicago sativa - Alfafa
Princpio ativo: cumestanos.
Quadro clnico: infertilidade, ginecomastia em machos castrados.
Patologia: hiperplasia glandular cstica do crvix e tero, piometra, cio permanente, aborto.
Tratamento: evitar alimentao nica ou em altas quantidades de fitoestrgenos; possveis cistos
ovarianos devem ser tratados como de rotina.
8.3 Micotoxinas
Micotoxinas so metablitos secundrios de certos fungos que contaminam alimentos e so
reconhecidamente txicos para vrias espcies animais. As micotoxicoses so intoxicaes alimentares
causadas pelas micotoxinas produzidas pelos fungos. Dentre estas, pode-se citar: aflatoxicose,
zealarenona, intoxicao tremorgnica, leucoencefalomalcia, ergotismo e festucose, como sendo as
mais comuns que afetam ruminantes e eqinos no Sul do Brasil.
Aflatoxicose
Toxicidade: causada pelos fungos Aspergillus flavus ou A. parasiticus, que contaminam gros como
milho, sorgo, amendoim e raes, onde produzem as aflatoxinas fluorescentes B1 (mais abundante),
B2, G1 e G2, sob condies ideais de umidade (mais de 14% de umidade em cereais e 9% em
242
oleaginosas). Alm da produo de um metablito (M1) da aflatoxina B1, encontrado na urina, leite ou
tecidos de animais intoxicados. Ruminantes so menos sensveis do que herbvoros monogstricos ou
aves. Jovens ou animais caquticos so mais suscetveis.
Mecanismo de ao: inibio da sntese protica e conseqentemente do metabolismo energtico,
sendo o fgado o rgo mais afetado.
Quadro clnico: os animais manifestam depresso, anorexia, anemia, ictercia, diarria, tenesmo,
diminuio da produo e fotossensibilizao. Fibrose heptica, lipidose heptica, ictercia, ascite,
dilatao da vescula biliar e edema so as principais leses macroscpicas encontradas. Dentre as
microscpicas pode-se citar: degenerao e necrose de hepatcitos, alteraes gordurosas e
proliferao do epitlio do ducto biliar e fibroplasia interlobular heptica.
Diagnstico laboratorial: inclui hematologia: anemia leve, aumento de enzimas hepticas (AST,
ALT, AP) e cidos biliares, reduo da albumina e da relao albumina:globulina, reduo da
protrombina (sntese dos fatores de coagulao); anlise do metablito M1 na urina, leite ou fgado e
rins ou por quantificao das aflatoxinas nos alimentos (teste da luz negra fluorescncia verdeamarela brilhante, cromatografia em camada delgada, lquida-gasosa ou por espectrometria de massa).
Tratamento: inclui a desintoxicao com aluminosilicato de clcio e sdio hidratado (adsoro) e
medidas de apoio com Vitamina E e Selnio. Para prevenir a aflatoxicose indica-se inibidores de mofo
(evita o agente produtor).
Zealarenona
Toxicidade: causada pelos fungos Fusarium moniliforme e F. roseum, que produzem a zealarenona no
milho, sorgo, trigo, cevada, ... sob timas condies de umidade 22-25%, alternncia de temperatura 721C, armazenamento em espiga. Sunos so particularmente sensveis, principalmente fmeas prpberes.
Mecanismo de ao: de estrutura semelhante ao anabolizante zearalenol, prontamente absorvida pelo
TGI, biotransformada em e zearalenol, realiza o ciclo entero-heptico (reteno prolongada) e
eliminada pela bile, fezes, urina e leite (pouco) aps ligao aos receptores nucleares do 17-estradiol,
portando-se como um estrgeno fraco (potncia 2 a 4 vezes menor que o estradiol), mas capaz de inibir
a secreo de FSH e a maturao do folculo.
Quadro clnico: variam conforme a espcie, idade e fase reprodutiva. Sndrome hiperestrognica em
leitoas pr-pberes, anestro e pseudoprenhez em porcas adultas, ou ainda ninfomania; cachaos
imaturos demonstram reduo de libido e retardo no desenvolvimento testicular e nos castrados, ocorre
um aumento no prepcio e mamilos; em novilhas pode ocorrer aumento das glndulas mamrias ou
mesmo vaginite.
Diagnstico laboratorial: a anlise da zearalenona ou metablitos em tecidos ou na urina preterida a
anlise nos alimentos, pois a intoxicao pode manifestar os sintomas muito tempo aps a exposio.
Tratamento: desintoxicao com carvo ativado previne o ciclo ntero-heptico; prostaglandina F2
para lisar o corpo lteo e corrigir o anestro em porcas.
Ergotismo
Toxicidade: causada pelo fungo Claviceps purpurea, que produz ergoalcalides nas sementes de
gramneas ou em gros de centeio, cevada, trigo e aveia,... sob condies ideais de calor e umidade.
Mecanismo de ao: os alcalides do ergot so potentes indutores da contrao dos msculos lisos,
tais como tero e a camada medial das pequenas artrias.
Quadro clnico: constrio prolongada das artrias, levando isquemia e necrose das extremidades
(cascos, ps, orelhas ou cauda), agalactia (inibio da prolactina), hipertermia, hiperexcitabilidade,
hipermetria, taquipnia, taquicardia e anorexia.
Diagnstico laboratorial: anlise da presena dos alcalides do ergot por cromatografia de camada
delgada, gasosa ou espectrometria de massa dos alimentos.
Tratamento: substituir os alimentos por outros livres da contaminao, tratar as infeces secundrias
gangrena com antimicrobianos.
Festucose
Causada pelo fungo Acremonium coenophialum, que produz a toxina sobre a pastagem de
festuca. Esta toxina provoca sinais semelhantes ao ergotismo como agalactia, transtornos reprodutivos
243
244
Paracetamol
Exposio: comumente acidental ou extraprescrio de medicamentos destinados aos humanos.
Toxicidade: maior sensibilidade dos felinos por serem maus conjugadores (dose txica 50-100
mg/kg); ces menor sensibilidade (dose txica 600 mg/kg).
Mecanismo de ao: relacionado a sua toxicocintica - quando a capacidade de biotransformao por
conjugao excedida, o mesmo sofre N-hidroxilao, seguida da formao espontnea de N-acetilbenzoquinona (metablito de fase I) que se liga covalentemente a macromolculas celulares, levando
necrose heptica; tambm o acmulo de metablitos oxidantes, produz metemoglobinemia, reduzindo
a oxigenao tecidual.
Diagnstico:
sinais clnicos: cianose (4 a 12h), hematria e hemoglobinria, edema de face
(acompanhado de lacrimejamento e prurido) e patas, anorexia, depresso, entre 2 e 7 dias,
hemlise e ictercia;
laboratorial: metemoglobinemia, reduo da glutationa reduzida eritrocitria, presena de
corpsculos de Heinz, reduo do hematcrito, aumento dos nveis de ALT, AST, FA,
bilirrubinemia direta e indireta;
leses: fgado mosqueado, sangue escuro; degenerao heptica centrolobular, necrose,
conjuntivite, edema e necrose linfide focal.
Tratamento: descontaminao oral com induo de vmito, seguida de carvo ativado; antdoto:
acetilcistena (restabelece estoques de glutationa), administrado 2 horas aps o carvo, inicialmente
140 mg/kg, seguida por 70 mg/kg a cada 4-6h por 3 dias;oxigenioterapia, sulfato de Na, cido
ascrbico ou azul de metileno para tratar a metemoglobinemia.
Tranqilizantes
Exposio: acidental por ingesto de tranqilizantes utilizados pelos proprietrios, medicao
extraprescrio ou mesmo iatrogenia; fenotiaznicos esto comumente envolvidos nas intoxicaes.
Toxicidade: acepromazina em ces gigantes deve ter a dose diminuda em 50; cautela no uso em
pacientes fracos, debilitados, idosos, cardiopatas ou hepatopatas; injeo IV rpida pode causar
hipotenso e colapso cardiovascular; no utilizar adrenalina para tratar hipotenso, pois pode reduzir
muito a presso sangnea. noradrenalina pode ser usada; pelo risco de paralisia do msculo retrator do
pnis em eqinos, o uso deve ser feito com cautela ou totalmente evitado em garanhes; uso contraindicado em ces da raa Boxer, uso concomitante com vermfugos ou ectoparasiticidas
organofosforados (incluindo colar para pulgas); com procana; evitar em pacientes com histrico de
convulses.
Mecanismo de ao: exerce bloqueio em receptores da dopamina e reduz ao da serotonina; como
um fenotiaznico, possui efeito depressor do SNC, e por isto causa sedao, relaxamento muscular, e
reduo da atividade espontnea.
Toxicocintica:
absoro: bem absorvida pelas vias oral, SC, IM e IV;
distribuio: amplamente distribuda pelos tecidos, principalmente fgado, pulmes e
encfalo;
biotransformao: heptica;
excreo: urinria e fecal, por vrios dias.
Diagnstico:
245
246
Mecanismo de ao: atua sobre neurotransmisso gabargica., age no parasita estimulando liberao
de GABA nas terminaes nervosas, favorecendo sua ligao aos receptores ps sinpticos; assim
aumenta a permeabilidade da membrana ao on Cl -, interrompendo impulsos nervosos, paralisando e
matando o parasita; interage tambm com receptores GABA no crebro de vertebrados (mamferos)
mas com afinidade 100 vezes menor por receptores que nos invertebrados, entretanto, em determinadas
raas de ces (ex.: Collie e Australian Sheepedogs) o produto atravessa a barreira hemato-enceflica,
alterando a neurotransmisso mediada por GABA.
Toxicocintica:
absoro: os dados farmacocinticos variam com a espcie, em geral, rapidamente
absorvido por via SC, IV, oral e intrarruminal; baixa absoro percutnea;
distribuio: maiores concentraes teciduais em fgado e tecido adiposo; nveis muito
baixos so encontrados no crebro, apesar da solubilidade; pequena quantidade (2%)
aparece no leite materno; mnima deposio em msculo; o volume de distribuio em
ces: de 2,4 L/kg, bovinos, 1,9 L/kg, ovinos, 4,6 L/kg; a T1/2 em ces de 2 a 3 dias;
bovinos e ovinos: 65 horas e, em sunos de 12 horas; preparaes injetveis, no aquosas,
podem ter T1/2 de at 8,3 dias pela lenta absoro que sofrem; alta ligao a protenas
(93%).
excreo: 95% da dose administrada excretada via fecal em 5 a 6 dias; 0,5 a 2% so
eliminados na urina.
Diagnstico:
sinais clnicos: em vrias espcies animais: ataxia, paralisia, coma, morte; em ces:
midrase dose-dependente, cegueira, alteraes comportamentais, depresso, vmitos,
ptialismo e sialorria ataxia, tremores, convulses, depresso, coma e morte; outros sinais:
desorientao, olhar fixo, hiperatividade, inquietao, flacidez, agressividade, bradicardia,
convulses, hipertermia, dificuldade respiratria e cianose; intoxicaes severas levam a
choque, edema pulmonar, dispnia, taquicardia, tremor muscular, coma e morte; em gatos,
ataxia, vocalizao, desorientao, tremores, midrase, perda de reflexo pupilar,
bradicardia, hipotermia, coma e morte;
Tratamento: a maioria das intoxicaes ocorre em ces no uso da forma injetvel, nestes casos, o
tratamento sintomtico e de apoio por longo perodo e inclui respirao assistida, controle de
convulses com barbitricos, se necessrio; nas grandes ingestas de apresentaes para uso oral, a
descontaminao deve ser realizada mediante esvaziamento gstrico e carvo ativado.
Fipronil
Exposio: utilizao de altas concentraes ou mesmo formulaes no adequadas espcie
(produtos formulados para bovinos utilizados em ces ou gatos) por extraprescrio ou iatrogenismo.
Mecanismo de ao: um inibidor reversvel dos receptores do GABA.
Toxicidade: nos vertebrados o Fipronil no se fixa de maneira estvel, o que explica sua boa margem
de segurana, entretanto, durante a intoxicao, h induo de estimulao neurolgica; a DL 50 oral em
ces de 640 mg/kg; ratos, 97 mg/kg; a DL 50 cutnea em ces 2000 mg/kg; a apresentao em spray
comercializada no Brasil que contm o Fipronil o interesse toxicolgico fundamentalmente o
veculo: lcool isoproplico.
Toxicocintica:
absoro: devido a pequena absoro intestinal, sintomas podem ser retardados por vrias
horas 1 dia;
excreo: fecal.
Diagnstico:
sinais clnicos: farmacodermia no local de aplicao (erupo bolhosa); em intoxicaes
experimentais agudas foram observados: vmitos, transtornos gastrintestinais e convulses;
nas crnicas ocorreu alteraes de tireide, fgado e sistema nervoso; em teste cutneos, h
relato de irritao cutnea (dermatite alrgica) e ocular;
laboratorial: o Fipronil e seu principal metablito podem ser detectados no sangue ou
lavado gstrico.
247
Tratamento: em pequenas ingestas, a descontaminao deve ser realizada com carvo ativado; na
superdosagem, deve-se proceder a lavagem gstrica e carvo ativado em mltiplas doses; tratamento
sintomtico, incluindo anticonvulsivantes como fenobarbital e benzodiazepnicos.
Imidacloprid
Exposio: contato drmico ou oral com o pesticida agrcola, para jardinagem amadora ou mesmo o
ectoparasiticida para uso veterinrio.
Toxicidade: moderadamente txico - DL50 em ratos 450 mg/kg; no irritante de olhos e pele de
coelhos; alguns sintomas duraram mais de 5 dias aps exposio (produto que contm apenas
imidacloprid) ou no caso de produtos agrcolas, 12 dias;
Mecanismo de ao: anlogo a molcula da nicotina; encaixa-se no receptor molecular no sistema
nervoso, bloqueando irreversivelmente os receptores de acetilcolina; age interferindo na transmisso
de estmulos no sistema nervoso do inseto; especificamente causa bloqueio nos receptores
nicotinrgicos, que leva ao acmulo de acetilcolina (importante neurotransmissor) resultando em
paralisia do inseto com eventual morte.
Toxicocintica:
absoro: cutnea e oral (estmago), rapidamente e quase completamente;
excreo: via renal (70-80%) e fecal (20-38%).
Diagnstico:
sinais clnicos: sinais e sintomas nicotnicos, incluindo fadiga, contraes musculares,
clicas e fraqueza muscular, inclusive nos msculos necessrios da respirao; para
produtos agrcolas (imidacloprid mais outros ingredientes - slica e Naftaleno), reduo de
atividade, incoordenao, tremores,diarria e emaciao;
Tratamento: sintomtico e de suporte.
Amitraz
Exposio: ingesto por lambedura ou concentrao excessiva de ectoparasiticida para asperso,
imerso ou em coleiras.
Toxicidade: DL50 oral: ces 100 mg/kg; ratos 515-938 mg/Kg; ces podem apresentar sinais clnicos
transitrios de intoxicao com doses de 20 mg/Kg.
Mecanismo de ao: aredita-se que o amitraz atue como um agonista alfa 2-adrenrgico em
receptores do SNC e prifrico, e como inibidor fraco da monoamido oxidase (MAO).
Toxicocintica:
absoro: bem absorvido por via oral e drmica; a concentrao sangnea mxima ocorre 2
horas aps a exposio;
distribuio: se concentra na pele, fgado, olhos, bile, rins, cerebelo, pulmes, bao e
gnodas;
biotransformao: heptica;
excreo: renal.
Diagnstico:
sinais clnicos: vmitos, anorexia, diarria, poliria, bradicardia, hipotenso, depresso,
desorientao, sedao, vocalizao, ataxia, convulses e coma; por contato, irritao e
eritema nas reas expostas;
laboratorial: cromatografia de camada gasosa; anlise de tecidos: fgado, rins, pele,
crebro, pulmes, tecido adiposo ou bao;
leso:
hepatomegalia, se exposio crnica, hiperplasia periportal heptica e
adelgaamento das zonas fasciculada e reticular da adrenal.
Tratamento: descontaminao oral: lavagem gstrica ou induo de vmito (contra-indicado, se
houver solvente na formulao), carvo ativado; drmica: descontaminao cutnea e tosa se
necessria; asistncia respiratria/oxignio, fluidoterapia; ioimbina.
Organofosforados
Exposio: inseticidas agrcolas, domiciliares, medicamentos de uso humano e veterinrio sob vrias
apresentaes: aerossis, ps, solues, sabonetes, xampus, ...; ingesta ou contato acidental (alimentos
248
ou diretamente com produtos), prescrio inadequada (alta concentrao, dose ou inadequado para a
espcie, idade,...) ou extraprescrio.
Toxicidade: dependente da concentrao, via (bucal, oral, drmica, inalatria,...) e do tempo de
exposio ao produto; interessante atentar a classificao relativa de toxicidade dos princpios ativos
mais comuns:
extrema: menvifs e paration;
alta: carbofenotion, diclorvs (DDVP), fention, monocrotofs;
moderada: Diazinon, clorpirifs, dimetoato, naled, fenitrotion, fenclorfs;
baixa: Triclorfon, pirimifs-metlico, azametiofs, bromofs, biodofenfs;
pode ainda ser potencializada por fenotiaznicos, succinilcolina, levamisole, aminoglicosdeos,
nicotina, curarizantes e indutores enzimticos.
Mecanismo de ao: inibio irreversvel da acetilcolinesterase (AChE), resultando em acmulo de
acetilcolina nos receptores muscarnicos, nicotinicos (junes neuromusculares esquelticas) e no
sistema nervoso central.
Toxicocintica:
absoro: so bem absorvidos por via oral, inalatria e drmica; presena de solvente
orgnico intensifica absoro; atravs da pele absoro tende a ser lenta, mas dificuldade de
remoo prolonga contato; temperatura elevada, presena de dermatites potenciam
absoro;
distribuio: ampla, mas no se acumulam por tempo prolongado; altamente lipoflicos, so
armazenados no tecido adiposo, liberados gradualmente durante vrios dias aps exposio;
biotransformao: biotransformados por enzimas oxidases, hidrolases e transferases,
principalmente hepticas; alguns metablitos tem maior toxicidade que o composto
original, por transformao do grupo "tion" em metablito "oxon" (paration, malation,
diazinon);
excreo: principalmente urinria, menor quantidade nas fezes e ar expirado; excreo
mxima em 2 dias, aps diminui rapidamente.
Diagnstico
sinais clnicos:
muscarnicos: broncoconstrio, broncorria, dispnia, cianose, edema pulmonar;
anorexia, nuseas, vmitos, clicas abdominais, diarria, incontinncia fecal, tenesmo;
sudorese, salivao, lacrimejamento; bradicardia, hipotenso, bloqueio av; miose, viso
borrada; incontinncia urinria;
nicotnicos: fadiga, fraqueza, fasciculaes, contraes, arreflexia, paralisia flcida,
insuficincia respiratria ou parada devido fraqueza muscular; hipertenso, taquicardia,
palidez, midrase (porm, predominam efeitos muscarnicos);
efeitos no snc: cefalia, ansiedade, agitao, tremores, ataxia, sonolncia, confuso,
dificuldade de fala, labilidade emocional.fraqueza generalizada, coma, convulses,
depresso central respiratria e cardiovascular;
laboratorial: determinao da atividade colinestersica, plasmtica ("pseudocolinesterase")
ou eritrocitria (indicador mais preciso); ainda, contedo gstrico ou ruminal, plos e urina
(pesquisa deorganofosforado e/ou metablitos); Tambm, atividade colinestersica em
crebro;
leses: edema pulmonar e lquidos no trato digestivo.
Tratamento:
249
Carbamatos
Exposio: semelhante aos organofosforados.
Toxicidade: tem inibio colinestersica reversvel e de curta durao, no penetram efetivamente no
SNC, resultando em toxicidade limitada; usualmente severidade leve a moderada, porm exposio a
altas concentraes, especialmente aldicarb e carbaril pode conduzir a quadros severos, evoluindo ao
bito. Aldicarb tem ALTA TOXICIDADE considerado inseticida sistmico, absorvido do solo pode
concentrar nveis txicos em alimentos.
Mecanismo de ao: inibidores reversveis da AChE, resultando em acmulo de acetilcolina nos
receptores muscarnicos, nicotnicos e no SNC; tem reverso espontnea e curta durao (minutos a
poucas horas); e tm menor penetrao no SNC.
Toxicocintica:
absoro: rpida por todas as vias, oral, inalatria e drmica; a drmica pequena em
comparao aos organofosforados, com exceo do aldicarb que elevada em todas as vias;
temperatura alta, umidade, dermatites, aumentam absoro; aldicarb tem extensiva
recirculao entero-heptica; carbaril tambm tem ciclo entero-heptico considervel,
especialmente pela via oral.
distribuio: rpida distribuio, com menor penetrao no SNC que os organofosforados;
no se acumulam no organismo.
biotransformao: rpida, por hidrlise, oxidao ou conjugao; usualmente os
metablitos tm menor toxicidade, exceto o propoxur e o carbaril, em que os metablitos
tm maior atividade anticolinestersica, elevando toxicidade.
excreo: principalmente urinria, usualmente em 24h, menor percentual nas fezes e ar
expirado.
Diagnstico:
sinais clnicos: efeitos so imediatos, cessando logo aps trmino da exposio;
manifestaes usualmente em menor grau que os organofosforados incluindo as
neurolgicas (devido a menor penetrao no SNC); predominam efeitos muscarnicos:
broncoconstrio, broncorria, dispnia, cianose, edema pulmonar; anorexia, nuseas,
vmitos, clicas abdominais, diarria, incontinncia fecal, tenesmo; sudorese, salivao,
lacrimejamento; bradicardia, hipotenso; miose, viso borrada; incontinncia urinria;
laboratorial: colinesterase plasmtica ou eritrocitria tem valor diagnstico reduzido
devido a rpida reverso e normalizao de nveis alterados (minutos a algumas horas);
metablitos podem ser pesquisados na urina (carbaril).
Tratamento: descontaminao oral com carvo ativado ou, para aldicarb e carbaril, esvaziamento
gstrico seguido de carvo ativado; antdoto - atropina (antimuscarnica); monitorizao respiratria,
limpeza de secrees; edema pulmonar, broncoespasmo, respondem adequadamente a oxigenao;
monitorizao cardaca; diazepam, melhora ansiedade e algumas manifestaes do SNC.
Piretrides
Exposio: inseticidas agrcolas, domiciliares, medicamentos de uso humano e veterinrio sob vrias
apresentaes: aerossis, ps, solues, sabonetes, xampus, ...; ingesta ou contato acidental (alimentos
ou diretamente com produtos), prescrio inadequada (alta concentrao, dose ou inadequado para a
espcie, idade,...) ou extraprescrio.
Toxicidade: baixa para mamferos e aves, muito txico para peixes; felinos so mais sensveis, assim
como animais jovens (menores de 6 semanas - est contra-indicado o uso); em intoxicaes mistas
com organofosforados, a toxicidade dos piretrides fica exacerbada; interessante atentar a classificao
relativa de toxicidade dos princpios ativos mais comuns:
alta: bifentrin, fenpropatrin, lambidacialotrina;
moderada/alta: alfacipermetrina, deltametrina;
moderada: cipermetrina, cialotrina;
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Efeitos clnicos
Conduta
Analgsicos opiides
Digitlicos
Antiarrtmicos
Isoproterenol e dopamina.
Glicocorticides
Estrgenos
Transfuso, fluidos e
corticosterides para o choque.
Difenidramina
Descontaminao oral,
vasopressina.
Atropina
Antidepressivos tricclicos
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Dioxinas
O diclorofenol, herbicidas fenoxiclorados utilizado no preparo do agente laranja, forma tetra,
hexa e octaclorodibenzodioxina, molculas mais txicas e persistentes no ambiente; tambm, a
combusto de dioxinas pode liberar tetraclorodibenzodioxina.
Exposio: leo queimado, herbicida desfolhante
Toxicocintica:
absoro: vias oral ou dermal, inibida pela terra e carvo ativado;
distribuio: acumula no fgado e tecido adiposo;
excreo: maioria inalterada nas fezes, pequenas quantidades na bile e urina Toxicidade:
aguda e crnica (cumulativa); se liga a enzima citoslica e transferida para o ncleo, afetando as
clulas; induz oxidases de funo mista e sintetase heptica, afetando a biotransformao de
medicamentos; teratognica, carcinognica e imunodepressora.
Diagnstico:
sinais clnicos: hiperqueratose, acne, edema palpebral, emagrecimento, porfiria e
fotossensibilizao; edema generalizado em aves;
laboratorial: anemia e trombocitopenia, presena de dioxinas nos tecidos (adiposo,
heptico e renal);
leses: necrose heptica, leses renais e depresso de medula ssea.
Fluoretos
Na natureza encontrado como fluoreto. Tambm encontrado na indstria de ao, alumnio,
suplementos minerais e fertilizantes. Materiais contendo fluor, aquecidos a altas temperaturas, expelem
fluoretos, que reagindo com a gua, se depositam nos vegetais.
Exposio: forragens contaminadas, gua, suplementos minerais,...
Toxicocintica:
absoro: trato gastrintestinal;
distribuio: 96-99% incorporado aos ossos;
excreo: filtrao glomerular.
Toxicidade: reduz a formao da matriz e do esmalte dos dentes; exostose ou osteoporose;
aguda: incontinncia urinria e intestinal, vmitos, insuficincia cardaca, excitao do
SNC, depresso severa e morte;
crnica (meses a anos): defeitos nos dentes e ossos.
Diagnstico:
sinais clnicos: dentes irregularmente desgastados e com manchas no esmalte;
claudicao, caquexia;
laboratorial: concentrao de fluoreto nos dentes e/ou tecido sseo, na urina, nos
alimentos e/ou gua consumidos; RX;
leses: hiperostose peristea, mineralizao irregular generalizada e dentes radiolucentes.
Tratamento: sulfato ou cloreto de alumnio, carbonato de clcio (reduzem a absoro).
Bifenilas polibromadas (BPBS)
Antichamas altamente persistentes no meio ambiente e no tecido adiposo dos animais. Em
1973 foi acidentalmente adicionado a rao animal (aves e gado leiteiro) nos EUA e gerou grandes
perdas.
Mecanismo de ao: ativam a sntese de RNA, induzindo as mono-oxigenases
Diagnstico:
sinais clnicos: distrbios neuroendcrinos com falha reprodutiva, imunossupresso,
retardo no crescimento, alteraes de casco, pele e plos;
laboratorial: aumento do nitrognio urico, aumento de transferases (ALT e AST) e
hipercolesterolemia; cromatografia lquida-gasosa de tecido adiposo, leite (T1/2 de 12
semanas) ou ovos.
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cido actico: vinagre de cozinha, baixo risco toxicolgico, podendo provocar leve
desconforto abdominal.
cido brico: utilizado em medicamentos (colrios - baixas concentraes).
Apresentaes com outras finalidades (15g do produto, representa risco de vida).
cido clordrico ou muritico: utilizado na limpeza de utenslios domsticos, possui
mdia toxicidade.
cido oxlico: presente nos polidores de metais, combina-se com o clcio do organismo
formando oxalato de clcio insolvel, que causa hipocalcemia e leso tubular renal.
cido sulfrico: cido forte, utilizado em baterias de automveis; em contato com pele
e/ou mucosas causa necrose de coagulao.
Toxicidade: os cidos fortes formam uma necrose por coagulao, isto , formam um cogulo que
impede um aprofundamento intenso da leso inicial.
Sinais clnicos: dor local, nuseas, vmitos; edema de glote; tosse com aumento da secreo brnquica
que pode levar a edema pulmonar; contato - queimadura de pele, mucosa e leso de crnea;
desidratao, hipotenso e choque; aumento da temperatura corporal.
Tratamento: demulcentes de forma fracionada; evitar provocar vmito ou lavagem gstrica,
neutralizao qumica (reao exotrmica) e oferecer alimentos slidos; correo do desequilbrio
hidreletroltico; descontaminao de pele, mucosas, olhos por lavagem copiosa com soluo
fisiolgica.
lcalis
xido de clcio: produto alcalino de pouco poder invasivo e sem efeito corrosivo;
quando em contato com a gua produz calor.
Hidrxido de sdio (soda castica): de pH em torno de 12; apresenta-se na forma lquida
e em escamas.
Toxicidade: provocam uma necrose do tipo liquefao com aprofundamento da leso inicial.
Sinais clnicos: dor local (pode ocorrer destruio das terminaes nervosas, ficando prejudicada a
relao dor/ leso); vmitos escuros; desequilbrio hidreletroltico; contato - queimadura de pele,
mucosa e leso de crnea; desidratao; hipotenso e choque; aumento da temperatura corporal.
Tratamento: demulcentes de forma fracionada; evitar provocar vmito ou lavagem gstrica,
neutralizao qumica (reao exotrmica) e oferecer alimentos slidos; correo do desequilbrio
hidreletroltico; descontaminao de pele, mucosas, olhos por lavagem copiosa com soluo
fisiolgica.
Polidores
So produtos utilizados na limpeza e polimento de utenslios domsticos.
Polidor de mveis: contm destilados do petrleo.
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Sinais clnicos: irritao pulmonar, de mucosa gstrica, pele e mucosas; depresso do SNC.
Polidor de metais: contm cido oxlico, substncia castica.
Sinais clnicos: irritao pulmonar, de mucosa gstrica, pele e mucosas.
Polidor de sapatos: contm ceras e anilina (pigmento).
Toxicidade: ceras apresentam baixa toxicidade; a anilina metahemoglobinizante, mas pela
quantidade na formulao, representa pouco risco.
Removedor de ferrugem: contm vrias substncias de interesse toxicolgico:
hipocloritos, cido oxlico,...
Sinais clnicos: irritao pulmonar, de mucosa gstrica, pele e mucosas.
Tratamento: para polidores de mveis, metais e removedores de ferrugem, administrar demulcentes
de forma fracionada; evitar provocar vmito ou lavagem gstrica, neutralizao qumica e oferecer
alimentos slidos; correo do desequilbrio hidreletroltico; descontaminao de pele, mucosas, olhos
por lavagem copiosa com soluo fisiolgica.
Produtos de Higiene e Cosmticos
Desodorantes: produtos a base de agentes antibacterianos/antiperspirantes como alumnio/zircnio e
lcool.
Perfumes/Colnias/Loes de barba
Toxicidade: devido a grande quantidade, o lcool, representa maior risco.
Sinais clnicos: irritao de mucosa, nuseas e vmitos; alteraes neurolgicas como euforia, seguida
de depresso.
Batom: contm leo de rcino e ceras.
Toxicidade: baixa.
Sinais clnicos: distrbio gastrintestinal, se ingerido em grande quantidade.
Loes Depilatrias: produtos a base de tioglicolatos, que por seu pH 8-12, torna-se castico; contm
sulfetos que conferem ao produto odor de ovo podre.
Sinais clnicos: irritao pulmonar, de mucosa gstrica, pele e mucosas.
Loes para Permanente: produtos a base de tioglicolatos, que por seu pH 8-12, torna-se castico;
contm bromatos, substncias metahemoglobinizantes.
Sinais clnicos: irritao pulmonar, de mucosa gstrica, pele e mucosas; metahemoglobinizantes cianose e distrbios neurolgicos devido a hipxia.
Tratamento: descontaminao; azul de metileno (1 mg/kg IV), associado com cido ascrbico 1 a
2g/dia; transfuso de sangue se necessrio.
Tintura para Cabelos: produto a base de pigmentos (metais pesados) e fenilenodiamina (reagente
qumico); agentes oxidantes.
Sinais clnicos: irritao de mucosa gstrica, pele e mucosas; reao de hipersensibilidade com edema
de face, lbios e glote.
Talco: produto a base de carbonato de magnsio.
Toxicidade: praticamente atxico, ocorrendo risco de asfixia por seu efeito mecnico, pois com a
saliva pode formar bolo.
Tratamento geral para todos os produtos de higiene e cosmticos, alm do especfico descrito:
demulcentes; correo do desequilbrio hidreletroltico; descontaminao de pele, mucosas, olhos por
lavagem copiosa com soluo fisiolgica.
Colas e Adesivos: amplamente utilizadas utilizadas, tanto em ambiente domstico, escolar e em
indstrias de calados, aeromodelismo, etc; os acidentes ocorrem por confuso pela semelhana das
embalagens com produtos como pasta de dentes, alimentos, que quando deixados no cho ou local
inadequado, servem para bricadeiras e so mordidos pelos animais jovens.
258
8.6 Pesticidas
8.6.1 Fungicidas
Servem para evitar o crescimento fngico em sementes de gros, plantas (tubrculos, frutas,
etc.), solo ou madeiras. Variam em toxicidade; veculos como solventes tambm podem ser txicos.
Sinais clnicos: inespecficos; anorexia, depresso, fraqueza e diarria.
Tratamento: descontaminao do animal; supresso da fonte de origem do envenenamento (pastagem
ou alimento), tratamento sintomtico.
Ditiocarbamatos: dissulfeto de thiuram; ditiocarbamatos metlicos e etileno-bis-ditiocarbamato.
Caractersticas: derivados do cido ditiocarbamico, degradao mais acentuada devido a maior
umidade ou meio cido; cristais slidos, brancos ou incolores, solveis em solventes orgnicos
apolares (acetona, clorofrmio, benzeno, e xileno).
Toxicocintica: absorvidos por via oral, respiratria ou cutnea.
Toxicidade: varivel; baixa a moderada; lcool favorece o aumento da toxicidade; etileno-etiluria
(ETU) como impureza de fabricao da formulao possui efeitos carcinognico (adenocarcinoma de
tireide), teratognico e mutagnico em animais de laboratrio.
259
Sinais clnicos: depresso, anorexia e diarria amarelada em herbvoros; em exposio intensa dermatite, faringite, bronquite e conjuntivite (mamferos); Thiram e Ziram em aves induz atraso do
crescimento, inibio da postura, diminuio da ingesto de rao, aumento da mortalidade
embrionria e deformaes dos membros de aves jovens;
Tratamento: descontaminao, remoo do animal do local contaminado e suspenso da alimentao
suspeita; sintomtico.
Fungicidas a base de cobre: sulfato de cobre (princpio ativo da calda bordalesa); oxicloreto de
cobre; xido cuproso e hidrxido de cobre.
Toxicidade: intoxicao rara, cobre induz vmito, pouco palatvel, necessrio doses elevadas; aguda
1-2 dias e crnica 1-4 dias.
Mecanismo de ao: inibe enzimas vitais, induzindo alteraes hepticas, metemoglobinemia, crise
hemoltica e necrose renal; sulfato de cobre tem propriedades custicas (leses de pele e mucosas)
Diagnstico:
sinais clnicos: agudos - diarria aguda profusa, hemorragias e ptialismo; sinais nervosos fase convulsiva seguida de paralisia membros posteriores; sinais cardiovasculares diminuio do pulso, taquicardia e morte por colapso; monogstricos - vmito azulado;
laboratorial: alterao das enzimas hepticas, amostras de fgado e rim para exame
toxicolgico;
leses: aguda - gastrenterites, congesto heptica, renal e esplnica; crnico - ictercia,
degenerao heptica, vescula biliar aumentada, rins friveis e com petquias e derrames
cavitrios sero-hemorrgicos.
Tratamento: descontaminao cutnea com gua (contato direto com o produto); demulcentes para
favorercer a precipitao do Cu existente no contedo gstrico; sintomtico e queladores de metais
(BAL, EDTA, e penicilamina) indicados em casos graves - prognstico grave;
Fungicidas derivados do fenol:
Pentaclorofenol: fungicida, herbicida, bactericida, molusquicida e inseticida; preservante de madeira.
Exposio: animais de produo: aves (maravalha), cochos, postes.
Toxicocintica: absorvido rapidamente pela pele, pulmes (volatizao) e tratogastrintestinal; inibidor
enzimticos (diminui a formao de ATP).
Sinais clnicos: irritao de pele e mucosas; fraqueza muscular e anorexia; se grave - hipertermia,
polipnia e morte por colapso.
Leses: rigidez cadavrica precoce, petquias e congesto generalizada.
Tratamento: descontaminao cutnea; diminuio da temperatura com duchas de gua fria;
sintomtico.
8.6.2 Herbicidas
inorgnicos: arsnicos e clorados; a maioria banida para uso;
orgnicos sintticos (mais utilizados): controle de ervas daninhas.
Mecanismo de ao:
herbicidas reguladores de crescimento e inibidores de crescimento, fosforilao oxidativa,
fotossntese, mitose, sntese de clorofila, dentre outros;
Herbicidas fenoxiacticos: 2-4D (cido 2,4-diclorofenoxiactico); 2,4,5 T (cido
triclorofenoxiactico); MCPA (cido metil-4 clorofenoxiactico).
Exposio: ingesto de concentrados, na gua, pastagens ou com plantas txicas (potencializando a
toxicidade: Chenopodium, capim Sudo).
Toxicidade: aumentada por contaminante dioxina teratognica; aumentam o potencial txico de
algumas plantas (nitritos) e a palatabilidade (ingesto); ons de nitrito transformam hemoglobina em
metahemoglobina (anxia tecidual); ces: maior toxicidade - excreo lenta; aguda DT de 200 mg/kg
para bovinos e 100 mg/kg para sunos; DL50 oral 500 mg/kg para ratos e 100 mg/kg paraces; crnica:
100 mg/kg para bovinos (10-30d).
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8.6.4 Rodenticidas
Produtos elaborados a partir de substncias anticoagulantes (derivados cumarnicos ou
indanediona) esto disponveis comercialmente em vrias apresentaes como pastas, granulados,
blocos parafinados, ps. H ainda, produtos ilcitos como a estricnina e o fluoracetato de sdio (1080).
Exposio: iscas colocadas para controle de roedores em locais acessveis aos animais domsticos e
contaminao acidental ou intencional dos alimentos.
Anticoagulantes
Toxicidade: conforme a Tabela 15, pode-se verificar as diferenas de sensibilidade entre as espcies.
Tabela 15. Toxicidade dos rodenticidas anticoagulante nas diferentes espcies animais.
Varfarina
Dose nica / repetida
(mg/kg)
Gatos
5-50 / 1 (5 dias)
Ces
5-50 /5 (5-15 dias)
Sunos
3 / 0,05 (7 dias)
Ruminantes
- / 200 (12 dias)
Fonte: Osweiler (1998). * DL50
Espcie
Difaciona
Dose nica / repetida
(mg/kg)
15*
3*
150*
Brodifacoum
Dose nica / repetida
(mg/kg)
25*
0,25-3,6*
0,5-2,0*
25-33*
Mecanismo de ao: inibio competitiva da enzima Vitamina K epxido redutase, necessria para a
reduo da Vitamina K, forma biologicamente ativa para exercer a ativao dos fatores II, VII, IX e X,
essenciais na cascata da coagulao sangnea.
Toxicocintica:
absoro: altamente absorvido (90%), com pico plasmtico em 12 horas;
distribuio: alta taxa de ligao a protenas plasmticas (90-95% - varfarina);
biotransformao: atravs de oxidases de funo mista microssomais geram metablitos
hidroxilados inativos;
excreo: renal.
Comparao entre anticoagulantes:
1 gerao (varfarina, dicumarol,...): antigos, baixa potncia, excreo rpida e,
usualmente, necessidade de vrias doses para induo de toxicidade;
2 gerao (brodifacoum, bromadiolona, difaciona,...): mais modernos, retidos no
organismo por perodo prolongado, e eficazes aps ingesto de dose nica.
Agentes potencializadores da toxicidade: sulfonamidas, antibiticos de amplo espectro
(reduzem a sntese no trato intestinal), fenilbutazona e corticosterides (deslocamento dos stios
de ligao plasmtica).
Diagnstico:
sinais clnicos: hematoma subcutneo, epistaxe, hemorragia gengival, fezes escuras,
hematemese, hematria (aparentes de 1 a 3 dias aps a ingesto), posteriormente: mucosas
plidas, fraqueza, ataxia, dispnia, freqncia cardaca irregular, pulso fraco, cianose e
choque; pode haver morte sbita.
laboratorial: tempo de coagulao (2-10 vezes mais longo); tempo de protrombina (2-6
vezes mais longo); anlise do anticoagulante ou de seus metablitos em urina, sangue ou
tecidos (renal, heptico).
leso: hemorragias (equimoses ou sufuses), hemotrax, hemopericrdio, edema e
hemorragia pulmonar, necrose centrolobular heptica.
Tratamento: 2-5 mg/kg/dia de Fitonandiona (Vitamina K 1), via oral ou SC, divididos em duas
tomadas no 1 dia e aps, 2-3 mg/kg/dia, via oral, dividido em trs tomadas p dia, por uma semana; se
for anticoagulante de 2 gerao, 1-2 mg/kg/dia, via oral, dividido em trs doses ao dia, por 6 semanas;
tratamento de suporte: transfuso de sangue ou plasma.
263
Estricnina
Uso ilcito como rodenticida.
Toxicidade: aguda causada pelo alcalide indlico extrado da Strychnos nux vomica, sendo este,
relativamente estvel e persistente no alimento e no ambiente. Conforme a Tabela 16, pode-se verificar
as diferenas de sensibilidade entre as espcies.
Tabela 16. Toxicidade da estricnina nas
diferentes espcies animais.
Espcie
Estricnina
(mg/kg)
Aves
5,0
Bovinos
0,5
Ces
0,75
Eqinos
0,5
Gatos
2,0
Ratos
3,0
Sunos
0,5
Fonte: Osweiler (1998).
Mecanismo de ao: bloqueio competitivo dos receptores da glicina (neurotransmissor inibitrio); a
inibio do arco reflexo perdida, resultando em excitao incontrolvel do reflexo medular,
estimulao dos msculos extensores, resultando em rigidez e convulses.
Toxicocintica:
absoro: rpida pelas mucosas do TGI e respiratria;
distribuio: apenas uma pequena parte atinge o SNC (stio de ao), grandes quantidades
so encontradas no fgado e nos rins;
biotransformao: transformada em N-xido de estricnina pelas oxidases microssomais de
funo mista;
excreo: urinria (urina cida aumenta a excreo do alcalide).
Diagnstico:
sinais clnicos: nervosismo, intranqilidade, tremores e abalos musculares,
hipersensibilidade a luz e rudos, convulses tnicas ou tetnicas de incio sbito (15min a
2h da ingesto), hipertermia, mioglobinria.
laboratorial: creatinina fosfocinase, pesquisa de estricnina em urina, contedo gstrico ou
tecido heptico.
leso: rigor mortis rpido.
Tratamento: anticonvulsivantes (barbitrico ou BZD), mesmo antes da descontaminao por lavagem
gstrica (anestesiado e com tubo endotraqueal colocado); diurese lquida e acidificao urinria (caso
no esteja em acidose).
Fluoracetato (1080)
Uso ilcito como rodenticida.
Toxicidade: altamente txico para ces (DL50 de 66g/kg) principalmente se comparada toxicidade
para gatos (DL50 350g/kg).
Mecanismo de ao: o fluoracetato substitui a acetil coenzima A, no metabolismo intermedirio,
combinando-se com o cido oxaloactico formando o fluorocitrato que inibe a aconitase, com a
conseqente interrupo do ciclo do cido ctrico, resultando em bloqueio da produo de energia e da
respirao celular.
Toxicocintica:
absoro: rpida absoro pelo TGI;
biotransformao: hidrolizado a cido monofluoractico.
264
Diagnstico:
sinais clnicos: ces - intranqilidade, hiperirritabilidade, corrida selavagem, histeria,
latidos, emese, defecao, mico, dispnia, sialorria, convulses tnico-clnicas
intermitentes; gatos vocalizao e arritmias cardacas; eqinos e ruminantes parada
cardaca (morte sbita).
laboratorial: hiperglicemia, acidose, nveis de citrato em sangue ou tecido renal, contedo
gstrico.
leso: rigor mortis rpido, corao plido e flcido.
Tratamento: anticonvulsivantes (barbitrico de ao curta), assistncia respiratria, descontaminao
por induo de emese ou lavagem gstrica (anestesiado e com tubo endotraqueal colocado); como
antdoto o monoacetato de glicerol na dose de 0,55 mg/kg via IM a cada hora, at atingir 2-4 mg/kg ou
alternativamente, etanol (50%) em cido actico (5%), 8 mL/kg, via oral (supre de acetato para reduzir
a converso do fluoracetato em fluorocitrato).
de glicose 5%, dividido em 3 doses, sendo a 1 IV e as demais SC, mximo por 5 dias; efeitos adversos
como depresso, anorexia e emese, podem ser antagonizados pela suplementao com zinco; pode
ocasionalmente aumentar os nveis de chumbo por mobiliz-los dos locais de armazenamento inertes
(ossos), sem quelar o chumbo no SNC; o dimercaprol administrado antes do EDTA pode auxiliar no
alvio dos sinais neurolgicos agudos (atravessa a BHE) alm de aumentar a excreo biliar e urinria
do chumbo; a D-penicilamina tambm queladora e ativa por via oral, na dose de 8 mg/kg dividida
em 4 tomadas/dia , utilizada em intoxicaes crnicas ou aps o uso de EDTA; o ADS cido
dimercaptosuccnico recomendado para pssaros (menos txico), na dose de 25-35 mg/kg VO,
dividida em 2 tomadas/dia, por 5 dias. Terapia de suporte: descontaminao do TGI com sulfato de
magnsio (precipita o chumbo e promove a evacuao); tiamina (0,5-1g/dia para bovinos);
corticosteride e manitol (edema cerebral em bovinos e eqinos); diazepam ou barbitricos (controle
de convulses); suplementao com zinco; hidratao; administrao de probiticos ou contedo
ruminal; remoo cirrgica dos objetos ou rumenotomia (estase).
Consideraes de sade pblica: a ocorrncia de surtos de intoxicao por chumbo em rebanhos
deve ser comunicada s autoridades de sade pblica; as fontes de intoxicao so comuns a homens e
animais (podendo estes servir como indicadores biolgicos de contaminao ambiental); apesar da
excreo de chumbo pelo leite ser mnima, especial ateno deve ser dada a produtos contendo ossos
ou farinha de ossos (local de armazenamento).
Arsnico
Fontes: minas, solos prximos de mineraes, fundies, ...; ambiente ele existe na forma
pentavalente, mas pode ser metilado por microorganismos; herbicidas (inorgnicos no passado e
orgnicos na atualidade); tiacetarsamida (tratamento da dirofilariose em ces); aditivo alimentar (cido
aesanlico, arsanilato de sdio,...). A exposio ocorre por contato com os pesticidas armazenados
inadequadamente, solos contaminados, pilhas incineradas, guas contaminadas, iscas para formigas,
uso teraputico, uso crnico ou dose excessiva como aditivo alimentar para aves ou sunos
(pentavalente).
Toxicocintica: facilmente absorvidos pelo TGI e pele; os arseniacais inorgnicos sofrem metilao o
que pode auxiliar na detoxificao; uma pequena frao do pentavalente pode ser reduzida a trivalente
(mais txico), sendo que o pentavalente excretado via renal e o trivalente via biliar-fecal, dentro de
poucos dias.
Toxicidade: inorgnicos trivalentes so 10 vezes mais txicos que os pentavalentes; dentre as espcies
mais suscetveis a intoxicao aguda, citam-se gatos, eqinos seguidos pelos bovinos, ovinos, sunos e
aves; toxicidade crnica rara.
Diagnstico: pelos sinais clnicos associados ao histrico de exposio, confirmado por anlises de
lquidos orgnicos.
sinais clnicos:
agudos/trivalente: vmito, dor abdominal intensa, diarria aquosa grave de incio
sbito, atonia ruminal e gastrintestinal, fraqueza, rigidez, ataxia, decbito, pulso
rpido e fraco, sinais de choque hipovolmico; se sobrevivem, na seqncia pode
haver oligria e proteinria, desidratao, acidose e azotemia o que pode levar a
morte.
agudos/pentavalente: ataxia, incoordenao, torcicolo e cegueira, fraqueza e decbito
lateral.
laboratorial: hemoconcentrao, aumento do nitrognio urico sangneo, proteinria, aumento
de densidade urinria e presena de cilindros no sedimento; pesquisa de arsnico inorgnico em
plos, fezes, urina ou vmito, se post mortem, em fgado, rins ou tecido nervoso; arsnico
orgnico, deve ser investigado principalmente em tecido nervoso.
leses: congesto da mucosa gastrintestinal, edema de submucosa, necrose epitelial e acmulo
macio de lquidos no intestino delgado; rins plidos e edemaciados, fgado plido, petquias da
mucosa e serosa intestinal; as leses microscpicas incluem: dilatao capilar intestinal, necrose
epitelial intestinal e tubular renal, degenerao gordurosa do fgado.
Tratamento: desintoxicao gastrintestinal com emticos e carvo ativado; terapia
hidreletroltica e correo cido-bsica; o antdoto dimercaprol s eficaz se administrado
266
precocemente (antes dos sinais clnicos aparecerem); apesar do cido tiico ser mais eficaz que
o dimercaprol (para bovinos), este no est disponvel comercialmente, nem aprovado para ser
utilizado em animais de produo.
Mecanismo de leso toxicolgica:
A
G
U
D
O
Cardiovascular
Gastrintestinal
Renal
Dermal
Dilatao capilar
Dilatao vascular
esplncnica e necrose
epitelial
Dilatao
capilar
glomerular
Vasodilatao
Vesculas e edema da
camada submucosa
Proteinria
Hipotermia
Necrose e
cilindros
tubulares
N
I
C
O
Morte
Isquemia renal
Fibrose renal
Hiperceratose
267
Tratamento: casos subagudos e graves: glicinato de cobre SC, nos crnicos, sulfato de cobre na dieta.
Ferro
Elemento metlico de transio, de carter bsico, apresentando-se normalmente em duas
formas oxidativas: estado ferroso ( Fe +2) e frrico (Fe+3), podendo-se interconverter dentro do
organismo. Grande proporo do ferro (60%) no organismo encontra-se presente na molcula de
hemoglobina.
Fontes: suplemento nutricional (sulfato ferroso, fumarato-ferroso, fosfato frrico); injetveis: ferrodextrano.
Mecanismo de leso toxicolgica: o excesso de ferro no sangue ocorre pelas vias oral e parenteral. O
ferro srico que excede a capacidade de ligao a transferritina provoca alteraes na membrana que
resultam em leses vasculares e hepticas, choque e morte. O ferro elementar no ligado corrosivo
direto das clulas epiteliais; causa corroso de estmago e intestino delgado; perfurao, hemorragia
gstrica e peritonite; o acmulo de ferro heptico causa leso mitocondrial que tem como
conseqncia necrose heptica; leses nas membranas por radicais livres levam ao aumento da
permeabilidade vascular, hemorragia e colapso cardiovascular.
Toxicidade: maior com preparaes injetveis; dosagens txicas VO: 20-60 mg/kg moderada; > que
60 mg/kg alta; > que 200 mg/kg letal; dietas contendo mais que 5000 ppm de ferro interferem na
absoro de fosfatos, conduzindo ao retardo no crescimento com raquitismo em leites.
Diagnstico:
sinais clnicos:
intoxicao via oral: 1as 6 horas, sonolncia, depresso, vmito e diarria hemorrgica; pode
ocorrer melhora aparente, mas em 24 horas retorna diarria,desidratao, necrose heptica
aguda, choque, acidose e coma.
intoxicao via parenteral: 2 sndromes:
depresso grave, choque, e acidose, resultante do excesso de ferro circulante;
reao tipo anafiltica aps injeo (pode no depender da dosagem e sim, relacionada
com liberao de histamina).
laboratorial: taxa normal de ferro srico: 100-300 g/dl, se aumentada de 50 a 100% acima da
taxa normal (h dificuldade na interpretao por variarem muito as taxas normais em filhotes ou
recm nascidos), requer tratamento com quelante; acidose; bilirrubinemia e enzimas sricas
hepticas aumentadas; radiografia abdominal pode revelar quantidade de comprimidos
ingeridos.
leses: necrose de mucosas; enterite com contedo hemorrgico; congesto de vasos hepticos,
esplnicos e renais; necrose heptica, ictercia e hemoglobinria.
Tratamento: induzir emese (menos de 4 horas); demulcentes; leite de magnsia precipita o ferro, na
forma de hidrxido de ferro que insolvel; carvo ativado NO adsorve o ferro; controlar choque,
desequilbrios hidreletrolticos e cido-bsicos (solues de bicarbonato 6%.via oral que aumenta o pH
no local de absoro); quelao com a deferoxamina (Desferal , 20-40 mg/kg a cada 4 horas ou 15
mg/kg em infuso IV; ateno administrao rpida pode causar arritmia cardaca ou aumentar a
hipotenso por promover a liberao de histamina. A urina com colorao marrom avermelhada no
incio do tratamento pela excreo do ferro. Os nveis sricos devem ser monitorizados at taxas
normalizarem (2-3 dias). Cuidado com convalescentes, pois sobreviventes podem ter escaras
intestinais residuais e leses hepticas que requerem cuidados apropriados.
Cobre
Elemento metlico de transio, de carter bsico, que apresentando como caracterstica
qumica a facilidade de se oxidar, em especial na forma inica (Cu+). A principal via de eliminao do
cobre biliar; para tal, o cobre tem que se ligar uma metaloproteina chamada metalotionena,
produzida nos hepatcitos; quanto menor a capacidade de ligao da metalotionena com o cobre,
menor a capacidade de excreo do cobre heptico e maior predisposio intoxicao. Isto ocorre nos
ovinos, onde apenas cerca de 5% do cobre heptico, est ligado a esta protena, enquanto no homem,
em sunos, ratos e nos fetos de quase todas as espcies, 85% do cobre est ligados metalotionena.
Fontes: sais de cobre so utilizados tanto na agricultura como sulfato de cobre na pulverizao de
rvores frutferas no combate s doenas fngicas (calda bordalesa), solos adubados, e na pecuria nos
268
tratamentos de podermites, como anti-helmntico, nas raes com suplementaes de cobre; solos
contaminados por indstrias de metais; em confinamento de ovelhas com acesso limitado a forragem
verde (com molibdnio suficiente para prevenir acmulo de cobre no fgado).
Txicocintica
absoro: no intestino;
distribuio: fixa-se nos eritrcitos e, quando lanado na circulao, armazenado
basicamente no fgado, podendo ocorrer ciculao entero-heptica;
excreo: via biliar.
Mecanismo de ao: o aumento da concentrao do cobre na circulao e armazenado no fgado leva
a uma disfuno heptica, aumenta a concentrao do cobre nos eritrcitos com conseqente aumento
no tamanho e nmero de eritrcitos, aumentando o hematcrito, o que leva lise macia e rpida dos
eritrcitos - crise hemoltica grave.
Toxicidade: depende da concentrao de elementos como molibdnio,enxofre fero e zinco.
Crnica: em locais de concentraes altas de cobre, levam ao acmulo no fgado e
surgimento de crise hemoltica com ictercia, necrose heptica e disfuno renal; ovinos
so mais suscetveis do que os bovinos ao excesso de cobre e deficincia de molibdnio;
mesmo recebendo doses normais de cobre (8-11 ppm), mas sem molibdnio, intoxicamse (5% do rebanho e desses, 75% morrem). Doses txicas: vacas: 200 a 800 mg/kg;
ovinos: 20-1000 mg/kg; sunos: 250 ppm, como aditivo so perigosos.
Diagnstico
sinais clnicos:
intoxicao aguda: distrbios gastrintestinais, dor abdominal, sialorria, diarria
hemorrgica ou lquida, vmitos (carnvoros), desidratao e morte; evoluo rpida com
morte em 1 a 2 dias;
intoxicao crnica: anorexia, sede e depresso; manifestaes agudas da crise
hemoltica: anemia aguda, fraqueza, ictercia, febre,dispnia.
laboratorial: bilirrubinemia, hemoglobinemia, hemoglobinria, elevao de enzimas
hepticas que indicativas de necrose; nveis de cobre maiores de 1,5 ppm no sangue e maiores
do que 150 ppm em fgado e rins.
Leses: congesto de mucosa gastrintestinal heptica, renal e de bao; na crise hemoltica os
tbulos renais se obstruem com hemoglobina e se observa necrose tubular e glomerular pelo
excesso de cobre, que resulta em insuficincia renal aguda, uremia; na intoxicao crnica:
ictercia, degenerao heptica, aumento vescula biliar, rim frivel com petquias e derrames
cavitrios sero-hemorrgicos.
Tratamento: descontaminao cutnea; imediatamente aps ingesta: gua albuminosa, leite;
penicilamina (50 mg/kg VO, por at 6 dias); corrigir desequilbrios hidreletrolticos, vitaminas,
analgsicos. As medidas de suporte podem salvar, mas o prognstico desfavorvel quando ocorre a
crise hemoltica; morte normalmente ocorre em 24-48 horas aps a crise hemoltica.
Preveno: suplementao com zinco (250 ppm), reduz acmulo heptico; na rao, no mximo 6:1
na relao cobre:molibdnio.
Intoxicao por cobre em ces: acmulo mais comum nas raas de Terries, Pinchers, Dobermann e
ocasionalmente em outras raas. hereditrio: caracterstica recessiva, pode aparecer na idade de 2 a 6
anos.
Mecanismo: cobre acumula-se nos lisossomas dos hepatcitos at esgotar sua capacidade de
armazenamento, sendo liberado para o citoplasma, causando leso inflamatria e necrose.
Diagnstico:
sinais clnicos: ces jovens: sndrome inespecfica com vmitos, anorexia, fraqueza e
desidratao; ces velhos: anorexia, perda de peso, ictercia, ascite, encefalopatia
heptica.
laboratorial: aumento de enzimas hepticas ALT e FA e bilirrubina.
Tratamento: quelao com d-penicilamina (50 mg/kg VO, muitas vezes por toda a vida); corticoides
(estabilizar as membranas dos lisossomas hepticos); cido ascrbico: 500-1000mg/dia, a fim de
aumentar excreo do cobre.
269
Cloreto de Sdio
Fontes: sal mineral; a falta de H2O potvel pode levar intoxicao; medicao na H 2O (exemplo:
antibiticos) diminui o consumo; superlotao dos campos; alimento com muito sal (churrasco,
lavagens, restos de padarias, queijarias); animais estabulados e alimentos com resduos de sal;
mudana de H2O doce para salobra.
Mecanismo de ao: o sdio passa do plasma para o lquido crebro- espinhal de forma passiva, mas
o contrrio requer energia (transporte ativo); os nveis de sdio no plasma sangneo e o lquido
crebro-espinhal ficam entre 135 e 155mEq/L; com a reduo da ingesto de H2O ocorre desidratao
e os nveis de sdio no sangue aumentam para 150-190mEq/L ou mais; nestes nveis de sdio, ocorre a
inibio da gliclise aerbica, com reduo de produo de energia; assim a alta concentrao de sdio
no lquido crebro espinhal impedido de voltar para o sangue por que realizado por mecanismo
ativo, necessitando de energia que no h para o transporte; mesmo diminuindo ou normalizando a
concentrao do sdio no sangue, as concentraes no crebro permanecem por no haver energia;
estabelece-se um gradiente osmtico entre o sangue e o crebro, resultando em edema cerebral com
sinais neurolgicos.
Toxicidade: relacionada com consumo limitado de H2O potvel: sunos e aves so os mais sensveis
(DL50 Oral - sunos: 2,2g/kg; caninos:4,0g/kg e ovinos: 6,0g/kg
Diagnstico:
sinais clnicos: quando no trato gastrintestinal - anorexia, diarria, vmitos e clicas; na
circulao - sialorria, sede, poliria, secreo nasal e sons de fludos em pulmes; em SNC
- edema cerebral: excitao, calafrios tremores, falta de resposta a estmulos, recusa de H 2O
ou incapacidade de beber; marcha desorientada (em crculos), dorso arqueado, prostrao,
agitao dos membros, opisttono intermitente; coma e morte.
Ces: diarria da 2a-feira.
Sunos: tremores e prurido.
Bovinos: fezes com muco.
laboratorial: concentrao de sdio no lquido crebro-espinhal (160 mEq/L), no tecido
cerebral 1800 ppm.
leses: inflamao de mucosa gstrica, lceras e edema; edema de tecidos, lquido nas
cavidades e edema cerebral proeminente; exame microscpico: proliferao endotelial
vascular no crebro; espaos perivasculares distendidos.
Diferencial: pseudo-raiva e organoclorados.
Tratamento: remover alimentos ou H2O contaminados; oferecer H2O fresca em pequenas quantidades
com intervalos regulares; glicose 5%; aliviar prurito.
270
271
A identificao de frmacos em sangue, urina, fluido ruminal ou contedo estomacal pode ser
feita atravs da metodologia de cromatografia em camada delgada (CCD), como por exemplo a
pesquisa de salicilatos, fenobarbital e digitlicos.
9.1.1 Princpio do mtodo analtico
A preparao da amostra consiste em uma extrao lquido/lquido, onde a substncia de
interesse extrada do material biolgico usando-se solventes orgnicos apropriados em dois pH
distintos (cido e bsico). Os extratos obtidos so concentrados e aplicados na placa cromatogrfica e
eluidos em sistema solvente adequado.
A CCD uma metodologia cromatogrfica de separao e identificao de componentes de
uma mistura atravs da migrao sobre uma camada delgada e uniforme de adsorvente em uma
superfcie plana (vidro, metal ou plstico), com base na diferena de afinidade destes componentes
com a fase mvel e a fase estacionria. O resultado baseia-se na comparao da amostra com padres
das substncias sob suspeita.
9.1.2 Amostra
Colher cerca de 20 mL de sangue total e/ou 30 mL de urina e/ou 30 mL de fluido ruminal e/ou
30 mL de contedo estomacal. Manter sob refrigerao a 4 oC at o momento da anlise.
9.1.3 Procedimento analtico
Aplicar na placa cromatogrfica com indicador fluorescente UV 254 todo o extrato e os padres
Leitura em UV e clculo do Rf
As cubas cromatogrficas (Figura 25) devem ser saturadas por 30 min antes de serem usadas.
Forrar as paredes internas da cuba com papel filtro que permitir uma saturao mais eficiente. A cada
272
troca de papel saturar a cuba duas vezes antes do uso. Preparar as cubas cromatogrficas, com o
sistema solvente adequado, tomando cuidado para que o volume total utilizado seja de 20 mL para
cubas 10 x 10 cm ou 40 mL para cubas de 20 x 20 cm.
Origem: 1,0 cm
Linha de frente: 8,5 cm
Divises: 1,0 cm entre cada aplicao.
Seqncia com Ninidrina para frmacos de carter bsico (ex.: anfetaminas, opiceos,
cocana, carbamazepina, antidepressivos tricclicos)
1) Ninidrina 0,5%
2) Aquecimento a 105 C por 10 min
3) Reativo de Forrest
4) Iodoplatinato
5) Reativo de Dragendorff
Seqncia com Cloreto Frrico para frmacos de carter cido e neutro (ex.: Ac. Acetilsaliclico, paracetamol, benzodiazepnicos, digoxina, haloperidol)
273
Reativo de Forrest:
Soluo estoque:
a) Dicromato de Potssio 0,2% (m/v): dissolver 0,2 g de dicromato de potssio em 100 mL de
gua purificada.
b) cido Sulfrico 30% (v/v): misturar 17 mL de H2SO4 em 100 mL de gua purificada.
c) cido Perclrico 20% (v/v): misturar 17 mL de HClO4 em 100 mL de gua purificada.
d) cido Ntrico 50% (v/v): misturar 55 mL de HNO3 em 100 mL de gua purificada.
Soluo Uso: misturar volumes equivalentes das solues a, b, c e d.
Iodoplatinado:
Solues Estoque :
a) Iodeto de Potssio 10%: dissolver 10 g de KI em 100 mL de gua purificada.
b) cido Hexacloroplatnico: dissolver 1 g de cido hexacloroplatnico em 100 mL da soluo
a.
Soluo Uso: diluir a soluo b na proporo 1:5 (v/v) com gua destilada. Em proveta
colocar 20 mL da soluo b e qsp 100 mL com gua purificada.
Cloreto Frrico 38%: pesar 38 g de FeCl3 e dissolver em qsp 100 mL de gua purificada.
9.1.8 Resultado
9.1.9 Referncias
RIO GRANDE DO SUL. Secretaria da Sade. Fundao Estadual de Produo e Pesquisa em Sade.
Centro de Informao Toxicolgica. Ncleo e Anlise Laboratorial. Procedimento Operacional
274
Padro: guia prtico para pesquisa de drogas por CCD baseado na sintomatologia do paciente. Porto
Alegre, 2004. 18p.
UFRGS. Faculdade de Farmcia. Laboratrio de Pesquisa Toxicolgica. Procedimento Operacional
Padro: deteco de substncias de carter cido e bsico em material biolgico. Porto Alegre, 2004.
FLANAGAN, R.J. et al. Basic Analytical Toxicology. Genebra: World Health Organization, 1995.
BRITO FILHO, D. Toxicologia Humana e Geral. Rio de Janeiro, So Paulo: Atheneu, 1988.
9.2 Produtos de uso veterinrio (colinesterase)
A colinesterase plasmtica no um indicador especfico para inibidores da colinesterase
porque pode ser influenciada por diversos fatores, tais como: espcie, raa, caractersticas genticas,
idade, sexo, variaes individuais como estado nutricional, prenhez, alteraes de funo heptica e
diversas enfermidades que alteram os nveis da atividade da colinesterase plasmtica, diminuindo ou
aumentando. Entretanto a determinao dos nveis de colinesterase plasmtica tem sido utilizada na
prtica toxicolgica como um dos mais importantes biomarcadores nas intoxicaes por compostos
inibidores da colinesterase como, por exemplo, os inseticidas organofosforados e carbamatos.
9.2.1 Princpio do mtodo analtico
Mtodo proposto por ELLMAN et al. modificado.
A enzima colinesterase catalisa a hidrlise do iodeto de butiriltiocolina com formao de
tiocolina que em reao secundria com o cido 5,5-ditio bis-2-nitrobenzico (DTNB), forma o 5mercaptano-2-nitrobenzico de colorao amarela. A intensidade da cor diretamente proporcional a
atividade da colinesterase, a qual pode ser determinada em espectrofotmetro na regio do visvel 405
nm.
Metodologia: Espectrofotometria Visvel.
9.2.2 Amostra
Colher cerca de 2 mL de sangue total. Aps, separar o soro e acondicionar em tubo de ensaio
seco, bem vedado e mantido sob refrigerao a 4 oC at o momento da anlise. Estabilidade da amostra
a temperatura ambiente de apenas 4 h, aps este tempo ocorre reativao da enzima. Caso a anlise no
ocorra imediatamente congelar a mesma.
O plasma pode ser utilizado quando colhido com heparina ou EDTA. Os anticoagulantes a
base de citrato, fluoreto ou oxalato inibem a atividade enzimtica da colinesterase, no podendo ser
utilizados. Cuidados com a amostra igual ao soro.
9.2.3 Procedimento analtico
Determinar a absorbncia mdia (A) atravs da diferena entre cada leitura a cada acrscimo
de 30 segundos. Calcular o resultado empregando a seguinte equao:
275
NOTA: Quando o A/30 seg exceder 0,300, dilua a amostra com soluo salina e multiplique o
resultado pelo fator da diluio.
9.2.4 Referncias
FUNDAO ESTADUAL DE PRODUO E PESQUISA EM SADE. Centro de Informao
Toxicolgica. Laboratrio de Anlise de Emergncia. Procedimento Operacional Padro: dosagem
de colinesterase plasmtica por espectrofotometria visvel, Porto Alegre. 2004. 18p.
OGA, S. Fundamentos de toxicologia. 2. ed. So Paulo: Atheneu Editora, 2003. 474 p.
WIENER LAB. Colinesterase. Argentina: Wiener, s.d. Bula de kit.
9.3 Pesticidas (cumarnicos, estricnina, paraquat e diquat)
9.3.1 Pesquisa de Paraquat e Diquat
O paraquat e o diquat so herbicidas amplamente utilizados e extremamente txicos. Do
ponto de vista toxicolgico, o paraquat o composto mais importante da classe de compostos
bipiridlicos. A ingesto de qualquer quantidade da soluo a 20% deve ser considerada
potencialmente grave. A determinao qualitativa do paraquat e diquat, em amostra de urina,
constitui-se em teste rpido e prognstico na avaliao dos quadros de intoxicao.
9.3.1.1. Princpio do mtodo analtico
O paraquat reage com o ditionito de sdio (Na2S204), em meio alcalino (NaHC03), produzindo
um radical semiquinide (dieno) de colorao azul e o diquat produz um radical de colorao verde.
9.3.1.2 Amostra
Coletar cerca de 30 mL de urina, preferencialmente em frasco plstico, pois o paraquat ligase superfcie do vidro. Aps a coleta, manter a amostra sob refrigerao a 4 oC.
9.3.1.3 Procedimento analtico
276
o
o
277
As cubas cromatogrficas devem ser saturadas por 30 min antes de serem usadas. Forrar as
paredes internas da cuba com papel filtro que permitir uma saturao mais eficiente. A cada troca de
papel saturar a cuba duas vezes antes do uso. Preparar as cubas cromatogrficas, com o sistema
solvente adequado, tomando cuidado para que o volume total utilizado seja de 20 mL para cubas 10 x
10 cm ou 40 mL para cubas de 20 x 20 cm.
9.3.2.5 Placa cromatogrfica
Preparar as placas cromatogrficas obedecendo aos seguintes parmetros:
cido Clordrico 1N (HCl 1N): Diluir 21 mL de HCl conc (37%) em 250 mL de gua
destilada. (8,3 mL em 100 mL H2O)
Reativo de p-Nitroanilina
Soluo estoque:
a) p-Nitroanilina 1% em HCl 1 N Etanol (1:1): pesar 0,5 g de p-Nitroanilina e dissolver em
25 mL de HCl 1 N. Diluir at 50 mL com etanol.
b) Nitrito de Sdio 5%: pesar 0,5g de nitrito de sdio e dissolver em 10mL de gua destilada.
278
9.3.2.9 Referncias
FUNDAO ESTADUAL DE PRODUO E PESQUISA EM SADE. Centro de Informao
Toxicolgica. Laboratrio de Anlise de Emergncia. Procedimento Operacional Padro: pesquisa
de pesticidas por cromatografia de camada delgada. Porto Alegre, 1999. 16p.
9.4 Metais (ALA-U)
O chumbo metal no essencial e cumulativo que determina efeitos txicos ao nvel do
sistema nervoso central e renal, sendo que a principal alterao tem lugar no sistema hematopotico,
interferindo na sntese do heme. O chumbo inibe vrias enzimas necessrias sntese do heme e dos
eritroblastos da medula ssea, privando assim o organismo do principal componente para a formao
da hemoglobina e, conseqentemente o aparecimento de anemia hipocrmica. Intoxicao por chumbo
pode provocar a interferncia em vrios sistemas enzimticos, pela sua ligao aos grupos sulfidrilas,
presentes em vrias enzimas.
A inibio da enzima cido delta aminolevulnico desidratase ocasiona acmulo de cido
delta aminolevulnico (ALA), com conseqente aumento da sua excreo urinria. Para o diagnstico
precoce da intoxicao por chumbo inorgnico, a determinao do cido -aminolevulnico tem-se
mostrado extremamente til.
9.4.1 Princpio do mtodo analtico
Mtodo proposto por Tomokuni e Ogata, 1972.
O cido -aminolevulnico urinrio (ALA-U) reage com o acetoacetato de etila quente (95100 oC), atravs de uma reao de condensao, produzindo o 2-metil-3-acetil-4-(3-cido propinico)
pirrol que extrado em acetato de etila. Aps a adio do reativo de Ehrlich, ocorre a formao de um
complexo de colorao rosa, cuja intensidade diretamente proporcional a concentrao do cido aminolevulnico.
Metodologia: Espectrofotometria Visvel.
9.4.2 Amostra
Colher cerca de 30 mL de urina em frasco plstico protegido da luz. Aps a coleta, reservar 5
mL de amostra para dosagem de creatinina o restante da amostra deve ser preservada com cido
actico na proporo 1 mL de cido, para cada 100 mL de urina (pH=4) e conservada sob refrigerao
a 4 oC. A urina, no preservada quando exposta luz, em temperatura ambiente mostra uma
diminuio de 40 a 60% dentro das primeiras 24 h.
279
equao:
Por exigncia da NR-7 os resultados do cido -amino levulnico em mg/L, devem ser
divididos pelo valor da creatinina da amostra.
Clculo final:
ALA- U (mg/g de creatinina) = ALA-U (mg/l)/creatinina(g/l)
O resultado final dever ser expresso em mg/g de creatinina, desde que o valor de creatinina
obtido para a amostra, esteja dentro do intervalo 0,5 at 3,0 g/L. Caso contrrio, liberar os resultados
obtidos para cada uma das anlises individualmente.
9.4.4 Preparo das solues e reagentes
Reagente de Ehrlich
Em um becker de 50 mL, pesar 1 g de p-dimetilaminobenzaldedo (C 9H11NO). Adicionar
cerca de 30 mL de cido actico glacial. Transferir para uma proveta de 50 mL e adicionar 4,3 mL de
cido perclrico 70% e 5 mL de gua destilada. Completar o volume at a marca com cido actico
280
glacial. Instvel, preparar somente o volume necessrio Manter ao abrigo da luz, envolvendo a proveta
em papel alumnio.
9.4.5 Referncias
FUNDAO ESTADUAL DE PRODUO E PESQUISA EM SADE. Centro de Informao
Toxicolgica. Laboratrio de Anlise de Emergncia. Procedimento Operacional Padro:
quantificao de cido delta-aminolevulnico por espectrofotometria. Porto Alegre, 2001. 16p.
LADENSON, Jack H. Non analytical sources of variation in clinical chemistry results. 8 a ed. In:
Gradwohls Clinical Laboratory Methods and Diagnosis. St. Louis: Mosby Company, 1980 vol.1.
LEITE, Edna Maria Alvarez et all. Otimizao das condies analticas para a determinao
espectrofotomtrica de cido delta-aminolevulnico urinrio (ALA-U). Revista Brasileira de Sade
Ocupacional, 17 (66), 1989.
MORAES, Ester C.F.; SZNELWAR, Rywka B.; FERNICOLA, Nilda A.G.G. Manual de Toxicologia
Analtica. So Paulo: Roca, 1991.
ROELS, Harry et all. Comparison of Four Methods for Determination of -Aminolevulinic Acid in
Urine, and Evaluation of Critical Factors. Clin. Chem. 20/7, 753-760 (1974).
TOMUKUNI, K; OGATA, M. Single method for determination of urinary aminolevulinic acid as na
index of lead exposure. Clin. Chem., 19 (12), 1972.
VESTERBERG, Olof; LINDSTEDT, G. A modified method for determining -aminolevulinic acid in
urine eliminating some interferences. Work-environm-hlth 11 (1974) 166-169.
10 Avaliao de toxicidade
A toxicidade de uma substncia a um organismo vivo pode ser considerada como a
capacidade de causar dano grave ou morte.
Fatores relevantes:
interao: agente/organismo;
relao: concentrao do agente X intensidade do efeito;
tempo de exposio;
suscetibilidade do organismo (relativa idade, doenas intercorrentes, estado
fisiolgico como gestao, lactao, entre outros);
potncia do agente (mais txico aquele que necessita menor quantidade para
produzir efeito).
A exposio relacionada dose (ex: mg do agente/kg de massa corporal ou mg/cm de
superfcie corporal) ou concentrao (mg de agente/mL de solvente) do agente e o tempo de interao
com o organismo.
Um desafio constante na toxicologia o de estabelecer nveis de exposio tolerveis. Para
tanto, necessrio definir o que deve ser considerado dano ou efeito adverso: uma alterao anormal,
indesejvel ou nociva aps exposio a substncias potencialmente txicas. Efeitos adversos incluem
alteraes nos consumos de gua e alimento, no ganho de massa corporal, na massa relativa dos
rgos, em nveis enzimticos, ou mesmo, alteraes anatomopatolgicas.
10.1 Relao dose-resposta e concentrao-resposta
Representada por uma curva Gausiana terica. Na prtica calculada a partir de observaes
de mortalidade aps exposio a doses ou concentraes relacionadas da substncia testada (Tabela
18). Geralmente empregada para calcular a dose letal mdia (DL 50) ou concentrao letal mdia (CL50).
Outros so a LOAEL (Lowest Observed Adverse Effect Level) - menor dose com efeito adverso
observado e NOAEL (No Observed Adverse Effect Level) dose sem efeito adverso observado. Tanto a
DL50 quanto a CL50 devem ser referidas em relao via de exposio, ao nmero de administraes
(dose nica = aguda, ou doses repetidas = sub-aguda) e a espcie testada (rato, coelho, entre outros).
281
Tabela 18. Classificao relativa de toxicidades de acordo com a Organizao Mundial da Sade.
Categoria
Classificao
Ia
Ib
II
III
IV
Extremamente txico
Altamente txico
Moderadamente txico
Levemente txico
Praticamente atxico
* Classificao semelhante efetuada para outras vias de exposio, como tambm para o
ambiente.
Todos os dados obtidos pela curva dose/concentrao-resposta permitem a seleo de
doses para a realizao de testes com exposies a mdio e longo prazo. A tendncia atual
substituir os experimentos e clculos de DL50/CL50 (reduzindo de forma tica o sofrimento dos
animais) pelo teste de dose fixa. Para tanto, administra-se uma nica dose oral de 500 mg/kg a um
grupo de ratos (5 machos e 5 fmeas) ou outra espcie e, na ausncia de sinais de toxicidade
avaliados por 14 dias, a substncia no ser classificada em nenhuma das categorias citadas
anteriormente. Se houver toxicidade sem morte, a substncia ser classificada como nociva e, se
houver morte, deve-se proceder novo teste com 50 mg/kg. Da mesma forma, a substncia que
provoca sinais de toxicidade nesta faixa de exposio, ser classificada como txica e, se houver
mortalidade, est dever ser testada na dose de 5 mg/kg. Nesta dose, tanto sinais de toxicidade
quanto morte, permitem classificar a substncia como muito txica. No entanto, se 500 mg/kg de
uma substncia no produzir sinais de toxicidade, esta dever ser testada na dose de 2.000 mg/kg
(avaliao total de risco).
10.2 Tipos de testes toxicolgicos
No Brasil, a ANVISA estabelece oito tipos de testes de toxicidade para aprovao de
substncias a serem utilizadas ou produzidas em larga escala como pesticidas, produtos qumicos,
produtos de uso veterinrio, medicamentos, entre outros:
aguda;
subaguda/subcrnica;
crnica;
mutagenicidade;
teratogenicidade;
carcinogenicidade;
estudos especiais (reprodutivos, neurotoxicidade,...);
ecotoxicolgicos (organismos aquticos).
Fatores como: uso, tipo de efeito txico produzido pela substncia em si ou por substncias
estruturalmente semelhantes, podem definir quais os testes que devem ser realizados em situaes
especficas.
O objetivo dos testes toxicolgicos caracterizar o tipo efeito txico que uma substncia
qumica produz. Sendo assim, justifica-se a exposio de animais experimentais a altas doses de um
agente txico para prever provveis efeitos danosos ao homem.
A lista de testes pode variar entre os pases, mas basicamente inclui:
Informaes preliminares
caracterizao qumica (qualitativa e quantitativa em relao as impurezas);
282
283
284
285
286
287
Referncias
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de acidentes ofdicos. Braslia, 1991. 53 p.
BRASIL. Ministrio da Sade. Fundao Nacional de Sade. Manual de diagnstico e tratamento
de acidentes por animais peonhentos. 2. ed. rev. Braslia, 2001. 120 p.
BRASIL. Ministrio da Sade. Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria. Monografias de produtos
agrotxicos.
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2002.
3
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p.
Ilustraes - fonte: uso autorizado pelo Centro de Informao Toxicolgica do Rio Grande do Sul
CIT/RS.
289
1.
INTRODUO
Os
fungos
constituem
um
grupo
diversificado
de
microorganismos
por inalao;
2. CLASSIFICAO
290
Diviso
Ascomycota
Basidiomycota
Zygomycota
Ascosporos
Basidiosporos
Zigosporos
Deuteromycota
Inexistente ou
Desconhecida
Tipo de Hifas
Condios
Septadas
Esporangiosporos
Asseptadas
(cenotticas)
Condios
Septadas
Ordem: Entomophthrales
ASCOMYCOTA
Classe:
Ascomycetes
Arthroderma
BASIDIOMYC
OTA
Classe:
Classe:
Basidiomycetes
Blastomycetes
Ordem:
Ustilagenales Famlia:
Criptococaceae
Gnero:
Filobasidiella Gneros:
Cryptoccocus
Malassezia
Candida
Rhodotorula
Torulopsis
Trichosporon
Gneros:
Conidiobolus
Basidiobolus
DEUTEROMYCOTA
Famlia:
Moniliaceae
Tuberculariaceae
Gneros:
Aspergillus
Coccidioides
Epidermophyton
Geotrichum
Histoplasma
Microsporum
Paecilomyces
Penicillium
Scopulariopsis
Sporothrix
Trichophyton
291
Classe:
Hyphomycetes
Famlia:
Dematiaceae
Gnero:
Alternaria
Famlia:
Gnero:
Fusarium
Bipolaris
Cladosporium
Curvularia
Drechslera
Exophiala
Fonsecaea
Helminthosporium
Nigrospora
Phialophora
Wangiella
Xylohypha
3. PORTA
DE
ENTRADA,
SUSPEITA
CLNICA,
AMOSTRAS
BIOLGICAS E PROCEDIMENTOS
Micose/actinomicose
Micoses sistmicas e oportunsticas, nocardiose, rodococose,
actinomicose,
Dermatofitoses
Micoses subcutneas e micetoma
Actinomictico
Zigomicose, aspergilose, feohifomicose, hialohifomicose
Rinosporidiose, pitiose,
Candidose
Aspergilose, hialohifomicose
Sangue
Medula ssea
Lavado
Broncoalveolar
Lquor
Ouvido
Plo
Unha
Pele
Pus e Exsudatos
Escarro
Urina
292
Micose
Coccidioidomicose, criptococose, esporotricose, cromomicose,
zigomicose, micetoma
Aspergilose, pitiose, rinosporidiose, lobomicose
Pssaros
Histoplasmose, criptococose
Roedores
Adiaspiromicose, dermatfitos
Tatu
Paracoccidioidomicose, esporotricose
Morcegos
Histoplasmose, adiaspiromicose
Diversos animais
Dermatfitos zooflicos
Tcnica
Raspado cutneo
Princip. Indicaes
Dermatofitose, Malasseziose,
Candidose
Dermatofitose
Plos
Unhas
Cerume
Exsudato
Lq. Abscesso
Ndulo
Malasseziose
Candidose
Criptococose, Esporotricose
Criptococose
Ulcerao
Puno, bipsia
Criptococose, Candidose,
Esporotricose, Feohifomicose
Dermatofitose
Tcnica de obteno
Principais Indicaes
Descarga nasal
Aspergilose, Criptococose,
Rhinosporidiose
Aspergilose, Criptococose,
Feohofomicose;
Rhinosporidiose
Aspergilose, Pneumocistose,
Histoplasmose
Idem
293
Tcnica de obteno
Principais Indicaes
Candidose, Criptococose
Endoscopia; bipsia
Material fecal
Candidose, Mucormicose;
Aspergilose
Candidose, Geotricose
Quantidade
Processamento
O mximo possvel
Sangue
1-5 ml
Prata, Giemsa
Lavado broncoalveolar
10-20 ml
Direto, Prata
Lquor
3-5 ml
Tinta da China
Plo
Pele
KOH (**)
Unha
KOH (**)
Pus e exsudatos
3-5 ml
Tecido (bipsia)
Urina
10-20 ml
* Devem estar heparinizados. (**) Pode ser acrescido de tinta Parker ou branco de calcoflor;
Os materiais lquidos so centrifugados 3.000 r.p.m./10 min.
294
Sabouraud + Cloranfenicol
Swab otolgico
Pele e plos
Pulmonar
lquidos
Bipsias
secrees
vaginal
urina
5 dias
15 dias
5 dias
10 dias
15 dias
295
48 horas
20 dias
30 dias
SCl
2c
Meios de cultivo
My
BHI
1
1
1
2
2
2
2
2
L-J
AN
3t
3t
3t
3t
3t
Pele
Plo
Unha
Lquor
Lquido ascite
Lq. pleural/Aspirado pul.
Lquido sinovial
Sangue
1
1
1
1
1
Medula ssea
3t
3t
2c
Aspirado gstrico
Urina
Secreo vaginal
Lavado brnq./Asp.
Traqueal
Ouvido, olhos, nariz, boca
Tecidos
Material de necropsia
1
1
1
2
2d
1
2
1
3t
2d
B) Coccidioides immitis
Transmisso: causada pela inalao de condios do fungo proveniente do solo,
encontrado em regies semi-desrticas. Acomete humanos e diversos animais.
Cultivo:em gar glicose-petona ou BHI a 37 C. A colnia tem caracterstica branca e
flocosa, com artrocondios, os quais so altamente infectantes. No possuem fase
leveduriforme e sim esfrulas na fase tecidual.
Para diagnstico sorolgico, RFC e ID esto disponveis.
C) Sporothrix schenckii
Transmisso: fungo dimrfico encontrado no solo e em fragmentos de vegetais, plantas
em decomposio,etc. A esporotricose cutnea est associada a certas profisses, como
as que lidam com produtos vegetais ou solo (floricultores, jardineiros, trabalhadores
florestais, nariz de palhao em gatos) por estarem freqentemente expostas ao
organismo. Ocorre em animais, principalmente em gatos.
Cultivo: Material como exsudato de lcera ou fragmento de tecido obtido por bipsia,
devem ser semeados em gar glicose-peptona ou gar BHI (ambos podendo conter
cicloheximida e cloranfenicol). Crescimento (fase filamentosa) de colnias brancas ou
cinzentas a 26 C que escurecem, as vezes tornando-se negras com a maturidade do
cultivo. As colnias apresentam uma superfcie pregueada e textura mida. A
microscopia revela agrupamento de condios ovides, formados no pice de
conidiforos em um padro semelhante a ptalas de margarida (simpodiocondio).
Confirmao da identificao obtida por subcultivo em gar BHI a 37 C, para
converso para a fase leveduriforme (que a forma encontrada no tecido subcutneo).
Colnias midas, de textura pastosa e cor de creme se desenvolvem, sendo formadas
por leveduras alongadas que se desenvolvem nestas condies de cultivo.
Corpos asterides: formao de complexo Ag-Ac que aparece em cortes histolgicos
de animais imunocompetentes. Se encontrado no pus, patognomnico da
esporotricose. Nos cortes histolgicos encontra-se leveduras com forma tipo charuto.
D) Rhinosporidium seeberi
297
298
299
300
H) LEVEDURAS
H.1 - Candida
Transmisso: ocorre em humanos, em todas as espcies de animais domsticos, em
uma imensa variedade de mamferos selvagens,alm de pssaros que so imputados
tambm como reservatrios. At o presente, no foi encontrada Candida em anfbios.
Isolar C. albicans na natureza uma condio excepcional e geralmente est
relacionada a uma contaminao, sobretudo com matria fecal.
As espcies mais comumente isloadas de quadros clnicos so: C. albicans, C.
tropicalis, C. parapsilosis, C. glabrata ( Torulopsis glabrata) e C. krusei. Outras
espcies menos freqentes C. lusitaniae, C. rugosa, C. pseudotropicalis e C.
guillermondii.
Cultivo: As colnias de leveduras s devem ser identificadas, quando estiverem puras e
em grande quantidade, ou seja, sem contaminao bacteriana ou mistura com outras
espcies.
Os meios utilizados podem ser : Agar Sabouraud (AS), Yeast Medium (YM),
Dixon (para espcies do gnero Malassezia).
A morfologia das leveduras, ao contrrio do que ocorre com os fungos
filamentosos, no apresenta muita diversidade. Porm, em determinadas situaes, a
morfologia celular permite a diferenciao de gneros. Desse modo, realiza-se a
microscopia celular da levedura e observa-se a presena blastocondios, pseudo-hifas,
hifas, cpsula, entre outras estruturas caractersticas.
301
302
303
H.2 - Cryptococcus
Trasmisso:A transmisso se d via inalatria, onde o pulmo o local primrio da
infeco. isolado de excretas e restos de poleiros de pombos.
Cultivo: O organismo cresce bem em diversos meios (2 a 6 dias a 37 C), mas inibido
pela cicloheximida. A identificao baseada na presena de uma cpsula, produo da
enzima urease e outras reaes bioqumicas especficas. A pesquisa da fenilxoidase com
cido cafeico pode ser um teste til para a diferenciao de Cryptococcus de Candida.
O gnero Cryptococccus composto por vrias espcies, entretanto, apenas
Cryptococcus neoformans capaz de crescer na temperatura de 37 C. O meio
Canavanina glicina azul de bromotimol (Meio CGB), til para tipagem das cepas de
Cryptococcus neoformans var. neoformans e Cryptococcus neoformans var. gattii. A
304
variedade gatti utiliza o cido mlico, fumrico e o succnico como nica fonte de
carbono, contrariamente ao que se observa com a outra variedade. A variedade
neoformans extremamente sensvel glicina, no crescendo na presena desta; assim,
no Meio CGB, observamos o crescimento da variedade gattii , atravs da viragem do
indicador de pH para azul cobalto, demonstrando sua resistncia glicina presente no
meio.
Sorologia: Ao contrrio das outras micoses sistmicas, os procedimentos sorolgicos
usados no diagnstico da criptococose baseiam-se na deteco do antgeno, no do
anticorpo. O teste de aglutinao do ltex para deteco do antgeno polissacardio
criptoccico no lquor e/ou soro muito usado tambm para avaliao do tratamento e
prognstico.
H.3 - Malassezia
Transmisso: No ocorre em condies normais. Esta levedura pode ser isolada de
diversas regies do corpo.
Cultivo: Malassezia pachydermatis (espcie no lipodependente) cultivada em
meio de Sabouraud, Sabouraud com BHI, Sabouraud com cloranfenicol e tambm
com ciclohexamida (em concentrao baixa, pois em altas concentraes observou-se
resistncia), Agar glicosado acrescido de Tween 80 a 1%, associado a extrato de
levedura a 1,5%. O crescimento das colnias possvel em temperaturas de 25 a
41 c, sendo a temperatura tima de 37 C em cerca de 24 a 48 horas.
Existem outras espcies de Malassezia, as quais so lipodependentes como : M.
sympodialis, M. slooffiae, M. Globosa e M. restricta entre outras.
I) Pythium insidiosum
305
5. HISTOPATOLOGIA
Coloraes Histopatolgicas teis no diagnstico micolgico
Colorao
Utilidade
Hematoxilina & eosina Permite o estudo da resposta tecidual; permite a vizualizao da cor
cora muitos fungos
natural dos elementos fngicos; demonstra o fenmeno de SplendoreHoeppli
Prata (Grocott)
Cora todos os fungos, includos os no viveis; a principal tcnica
diagnstica para P. jirovecii; cora filamentos actinomicticos
(Nocardia, Actinomyces)
Permite
Mucicarmin
a diferenciao
de MayerCryptococcus da marioria dos fungos com igual tamanho e forma.
Gram (Brow & Brenn)
Kinyoun
Fontana - Masson
Demonstra
agentes
de
actinomicose,
nocardiose,
rodococose e botriomicose, alm de outras bacterioses
Evidencia a cido-resistncia de Mycobacterium, Nocardia,
Rhodococcus, Legionella micdadei
Evidencia melanina na parede de hifas jovens dos agentes de
feohifomicose
307
Cryptococcus sp.
A. naeslundii
Histoplasma capsulatum***
A. viscosus
Pseudallescheria boydii
Aspergillus spp.*
Proprionibacterium propionicum
Blastomyces dermatitidis**
Protheca wickerhamii
Candida spp.*
P. zopfii
Coccidioides immitis**
Sporothrix schenckii**
* Identificao de gnero, ** Forma tecidual, *** Forma tecidual das duas variedades.
Atividade
Contato com gros de cereais, ambientes de muito p, construes,
demolies
Cozinheira, enfermeira, lavadeira
Agricultura, solo rido; arqueologista; antropologista; paleontologista;
zoologista; militares; tcnico de laboratrio de microbiologia
Contato com fezes de pombas e eucaliptos
Agricultura
Jardineiro, florista, horti e agricultores,Vets.
Histoplasmose
Paracoccidioidomicose
Agente etiolgico
Tamanho
Forma
Tropismo tecidual
Blastomyces
dermatitidis
Coccidioides
immitis
8-15 m
Esfrico brotamento
com base larga
Esfrula com
endosporos
Histoplasma
capsulatum
var. capsulatum
Histoplasma
capsulatum
var. duboisii
2-5 m
Oval, unibrotante
com base estreita
Pulmo,
fgado,
linfonodos, bao, etc.
10-15 m
Oval, brotamento
nico ou em cadeia
curta
Pele,
ossos..
P.brasiliensis
5-20 m
Polimrfico,
multibrotante
Pulmo,reas
mucocutnea,..
Nome
30-60 m
308
linfonodos,
6. SOROMICOLOGIA
309
Amostra
Sorologia
Aspergilose
Soro, liquor
Histoplasmose
Soro, liquor
Imunodifuso H. capsulatum
Paracoccidioidomicose
Soro
Imunodifuso P. brasiliensis
Criptococose
Soro,urina,liq.
310
Fungo
T. equinum
T. megninii
Artrocondios grandes com 8-10 m, formando T. rubrum (raro)
uma bainha ou cadeias na superfcie externa do
plo
T. verrucosum
7.2 CULTIVO:
1. Tanto o exame microscpio direto positivo quanto o negativo devem ser
seguidos de cultura dos espcimes clnicos. essencial isolar os dermatfitos,
pois o exame direto no permite a identificao das espcies e o prognstico
e/ou a instituio de terapia medicamentosa podem depender da espcie
envolvida.
2.
3. A incubao deve ser feita a 25C. Todavia, algumas espcies, tais como T.
verrucosum, crescem melhor a 37 C. Nesta temperatura a maioria dos
dermatfitos inibida.
4. A taxa de crescimento relativamente demorada, levando, em geral, de 5-10
dias a 3 semanas para atingir a maturidade.
5. As culturas devem ser observadas diariamente para evidenciar o crescimento.
Quando o crescimento se torna aparente, fragmentos de cultura primria devem
ser retirados e montados em lactofenol com azul de algodo (LPCB ou Azul de
Aman), para a observao microscpica. Algumas vezes esse procedimento
311
Lamnula
Com a ala em L, destacar pores bem pequenas da colnia e colocar nos quatro lados
do pedao de agar.
Cobrir com lamnula esterilizada, pressionando levemente.
Lmina suporte
Umedecer com 4
ml de gua
esterilizada
Agar
batata
Lmina para
microcultivo
312
Macro e micromorfologia
313
Resistnciaciclohexim
ida
M
ycosel
Semcrescim
ento
Crescim
ento
Chrysosporium
M
acrocondios
predom
inantese
m
icrocondiospresentesou
ausentes
M
acrocondiosequinulados
Paredesgrossas
M
. audouinii
M
. canis
M
. cookei
M
. distortum
Paredesfinas
M
. fulvum
M
. gypseum
M
. nanum
M
. persicolor
M
acrocondiosem
cachos, emform
ade
raqueteecom
paredeslisas
M
acrocondioslisos
Paredesgrossas
T. ajelloi
M
icrocondiospredom
inantes
em
acrocondiosrarosou
ausentes
M
icrocondios
Epidermophyton
floccosum
Globososa
piriform
es
Paredesfinas
T. mentagrophytes
T. rubrum
T. simii
T. terrestre
Globosos
Perfuraodoplo(+)
Urase(+)
M
ulticelulares
T. terrestre
Emform
adebalo
comcrescim
ento
estim
uladopela
tiam
ina
T. tonsurans
Piriform
es
Perfuraodopelo(-)
Ureaase(-)
T. mentagrophytes
T. rubrum
A maioria dos dermatfitos pode ser identificada apenas pelo estudo de suas macro e
micromorfologias. Contudo, existem alguns poucos testes fisiolgicos que podem ser
empregados para a confirmao do diagnstico. Estes testes tambm podem fornecer
314
Produo de Urease
Muitos dermatfitos possuem capacidade de hidrolisar a uria. Assim, um teste
demonstrando sua produo, pode ser empregado para diferenciao das espcies.
7.5.3 Crescimento em Arroz
As espcies de Microsporum variam em sua habilidade de crescer em arroz e a
diferenciao entre M. Audouinii e M. Canis pode ser feita desse modo. Esse meio
tambm ir encorajar a formao de tpicos macrocondios em culturas com pouca
conidiognese.
7.5.4 Produo de Pigmentos
A capacidade dos dermatfitos em produzir pigmentos, quando esto crescendo
em determinados meios de cultura (PDA, Agar Fub com 1% de glicose ou Agar
peptona 1%), no perodo de 1 ou 2 semanas, uma caracterstica de algumas espcies, e
pode ser usada como um critrio para a identificao.
CARACTERSTICAS MORFOLGICAS PARA A IDENTIFICAO DOS DERMATFITOS
Colniasuspeita
Resistnciaciclohexim
ida
M
ycosel
Semcrescim
ento
Crescim
ento
Chrysosporium
M
acrocondios
predom
inantese
m
icrocondiospresentesou
ausentes
M
acrocondiosequinulados
Paredesgrossas
M
. audouinii
M
. canis
M
. cookei
M
. distortum
Paredesfinas
M
. fulvum
M
. gypseum
M
. nanum
M
. persicolor
M
acrocondiosem
cachos, emform
ade
raqueteecom
paredeslisas
M
acrocondioslisos
Paredesgrossas
T. ajelloi
M
icrocondiospredom
inantes
em
acrocondiosrarosou
ausentes
M
icrocondios
Epidermophyton
floccosum
Globososa
piriform
es
Paredesfinas
T. mentagrophytes
T. rubrum
T. simii
T. terrestre
Globosos
Perfuraodoplo(+)
Urase(+)
M
ulticelulares
T. terrestre
Emform
adebalo
comcrescim
ento
estim
uladopela
tiam
ina
T. tonsurans
Piriform
es
Perfuraodopelo(-)
Ureaase(-)
T. mentagrophytes
T. rubrum
315
3 Agar-
Trichophyton
Agar-
Agar-
casena
Agar-
Agar-
Agar-
Agar-
casena
casena
casena
casena +
nitrato
nitrato de
inositol
cido
de
amnio +
inositol
tiamina
nicotnico
amnio
histidina
tiamina
T. verrucosum
84%
4+
16%
4+
4+
4+
4+
4+
T. schoenleinii
T.
50%
4+
4+
4+
4+
concentricum
50%
2+
2+
4+
4+
T. violaceum
ou 1+
4+
T. tonsurans
ou 1+
4+
T. rubrum
4+
4+
T.
4+
4+
4+
T. equinum
4+
T. megninii
4+
T. terrestre
4+
4+
mentagrophytes
316
REFERNCIAS
Atlas de Micologia.Diagnstico Laboratorial das Micoses Superficiais e Profundas. 1995. Clarisse Zaitz.
Ed. Medsi, 155 p.
Diagnstico em cores Micologia Mdica. 1998. Gillian Midgley, Yvonne M. Clayton, Roderick J. Hay.
Ed. Manole Ltda,S.P., 155p.
Fundamentos Clnicos e Laboratoriais da Micologia Mdica. 1999. Jos Jlio Costa Sidrim & Jos
Luciano Bezerra Moreira. Guanabara Koogan,S.P., 287p.
Les Mycoses. Patrice Boure. 1993. Pfizer, Paris, 106 p.
Micologia Mdica-Texto & Atlas. 1999. Martha E. Kern & Kathleen S. Blevins. Editorial Premier
S.P.,256 p.
Micologia Veterinria. 1985. Luiz Celso Hygino daCruz. Imprensa Universitria, R.J.,202p.
Microbiologia Mdica. 1990. Patrick R. Murray, W. Lawrence Drew, George S. Kobayashi, John H.
Thompson. Ed. Guanabara Koogan, S.P., pp.215-250.
317
1. Introduo
As helmintoses tem assumido importante papel na sanidade animal, tendo em vista as
perdas econmicas evidenciadas seja pelo bito de animais, como diminuio do ganho de peso,
alm das diarrias e interferncia na reproduo.
O diagnstico inicia pela histria clinica e atravs de exames complementares
estabelecido. Assim, para que os exames sejam adequadamente conduzidos so necessrias
seguir alguns critrios desde a coleta e conservao da amostra. Acrescido a isto, devem ser
observados os prazos entre as coletas e o processamento das amostras. A interpretao dos
exames laboratoriais mais utilizados na rotina em Medicina Veterinria, frente a casos clnicos,
devem ser correlacionada com os sinais clnicos, dados epidemiolgicos da propriedade,
conhecimento prvio do ciclo biolgico dos helmintos, postura das fmeas, patogenicidade dos
helmintos e estado nutricional dos animais, tratamentos j utilizados, idade dos animais.
2. Mtodos de pesquisa de parasitos
O profissional deve ter conhecimento das tcnicas laboratoriais de diagnstico, bem como
saber selecionar as mais apropriadas para que o diagnstico seja correto. Os diferentes exames
parasitolgicos so realizados conforme a localizao de cada agente parasitolgico:
Exame de fezes
Exame de urina
Exame do muco nasal
Sangue
Biopsia
Necropsia
Recuperao de larvas nas pastagens
3. Coleta de amostras para anlise laboratorial
Cada amostra deve estar devidamente identificada com o nome da espcie animal, lote ou
categoria a que pertence, raa, idade, nome do proprietrio, endereo, telefone, exame
solicitado, data e horrio da coleta, data da ltima medicao anti-helmintica e qual o produto
utilizado. Deve ser acompanhado da histria clinica.
318
perifrica. A coleta de sangue em grandes animais pela puno da: veia jugular, coccgea
mdia ou mamria. Em pequenos animais: veia jugular, safena lateral e medial,ceflica, femural
319
320
a) a fresco
b) aps colorao (Iodo, Hematoxilina, Giemsa, Eosina )
c) ou aps concentrao das fezes:
Tcnica de flutuao: Mtodos simples, Willis-Mollay, Sheather modificado, Faust
Tcnica de sedimentao: Mtodos simples ou natural, Dennis, Stones & Swanson
modificado, Baermann modificado, Tubo cnico de concentrao, Ritchie, Ecloso.
Tcnica da aderncia: Mtodo de Graham modificado
Estes mtodos so simples e rpidos e servem para a visualizao direta do material sem
concentrao. So indicados na rotina clinica, em casos de infeces muito altas em que o
animal j est apresentando sinais clnicos. Em caso de infeces leves dificilmente sero
observados ovos de helmintos atravs destes mtodos. Apesar dos mtodos no serem muito
precisos, todo processamento de material dever comear por eles, pois possibilitam a
visualizao de outros resduos no parasitos. Nos herbvoros, pela quantidade acentuada de
fibras nas fezes no um bom mtodo.
Mtodo de Willis-Mollay (Flutuao)
Este mtodo se baseia no fato de que ovos so menos densos que as solues
supersaturadas usadas no processamento (cloreto de sdio, acar,sulfato de magnsio e sulfato
de zinco), por isso flutuam e so recolhidos pela lmina ou lamnula. Os detritos por serem mais
densos e mais pesados se sedimentam. um bom mtodo para ovos de helmintos,
principalmente para carnvoros e herbvoros.
Mtodo de Baermann
baseado na motilidade e no termotropismo das larvas. especfico para a verificao da
presena de larvas de primeiro estgio de Dictyocaulus , Muellerius que so vermes pulmonares
dos ruminantes. Tambm indicado para a recuperao de larvas de Aelurostrongylus,( parasito
de gato) e Strongyloides (parasito intestinal de carnvoros). Nesse mtodo importante a
utilizao de fezes recentes e recolhidas diretamente no reto do animal para evitar tropismo das
larvas de vida livre em direo as fezes.
321
Mtodos indiretos
So realizados quando as fezes esto fixadas ou conservadas em solues especiais,
devido a impossibilidade de um exame mediato.
4.2.2.Mtodos quantitativos:
Tem como objetivo determinar a intensidade do parasitismo, apesar de no expressar a
real infeco do hospedeiro. Os mtodos so: Mtodo de Stoll; Mtodo de Gordon & Whitlock
(McMaster); Mtodo de Roberts & OSullivan e Mtodo de Giro & Ueno (4 tamises).
Mtodo de Stoll
Este mtodo visa a contagem de ovos de helmintos. Indicado para exame coprolgico de
pequenos animais. Tem como principio suspenso titulada de fezes em soluo decinormal de
soda custica
322
Nematdeos
ovos e segmentos
Cestdeos
adultos
ovos
Trematdeos
Acantocfalos
miracdios
adultos
323
a fresco
flutuao
sedimentao
contagem ovos (OPG)
sedimentao
coprocultura
recuperao pastagem
a fresco
necropsia
biopsia
a fresco
flutuao
sedimentao
necropsia
a fresco
sedimentao
ecloso
necropsia
5. Interpretao de resultados
A metodologia de diagnstico laboratorial eleita deve ter alta qualidade de resultados,
rapidez, maior sensibilidade e especificidade, baixo custo, eficincia na deteco ou
monitoramento de doenas. Os resultados podem ser alterados dependendo de alguns fatores
como tamanho inadequado e conservao da amostra, contaminao da amostra e utilizao de
anti-helmnticos.
Ruminantes
Equinos
Suinos
Ces/Gatos
Mtodo
Baermann
Willis-Mollay
Roberts O`Sullivan
Dictyocaulu
Muellerius
Neoascaris
Strongyloidea
Strongyloides
Moniezia
Trichuris
Nematodirus
Neoascaris
Strongyloidea
Strongyloides
Moniezia
Trichuris
Nematodirus
Fasciola
Paramphistomum
Eurytrema
Fasciola
Paramphistomum
Trichostrongylus
Ostertagia
Haemonchus
Cooperia
Bunostomum
Oesophagostomum
Chabertia
Strongyloides
Aelurostrongylus
Strongyloidea
Parascaris
Anoplocephala
Strongyloides
Strongyloidea
Parascaris
Anoplocephala
Strongyloides
Strongyloidea
Ascaris
Strongyloides
Trichuris
Ancylostoma
Toxocara
Trichuris
Spirocerca
Dipylidium
Referncias
HOFFMANN, R.P. Diagnstico de Parasitismo Veterinrio. Editora Sulina. 1987.156 p.
MATTOS, M.J.T.de; HOFFMANN, R.P. Diagnstico Laboratorial em Helmintoses. Grfica de
UFRGS.2007. 30 p.
SLOSS, M.W.; ZAJAC, A; KEMP, R. Parasitologia Clinica Veterinria.Editora Manole Ltda.2003.
198p.
UENO, H.; GUTIERRES, V.C. Manual para o diagnstico das helmintoses de ruminantes.
JICA.1983. 176 p.
324
Introduo
Para a obteno de ttulo acadmico de ps-graduao em cincia, alm de cumprir
determinado nmero de horas/aula cursando disciplinas, o candidato precisa elaborar um
documento monogrfico final cujas caractersticas variam de acordo com o nvel de titulao e
grau pretendido.
O documento monogrfico, segundo Ferreira (1994), caracteriza-se pela abordagem do
trabalho de investigao restrito a um nico, ou um nmero delimitado de assuntos (tema), e a
profundidade com a qual ele elaborado depende de sua finalidade. Assim, denomina-se Tese
ao documento destinado obteno do ttulo de Doutor, de Dissertao ao ttulo de Mestre e de
Monografia ao ttulo de Especialista. Todos devem ser resultado do trabalho de pesquisa
cientfica, havendo alguns acordos sobre as exigncias pelo modo com que devem ser tratados.
A Tese de doutoramento a modalidade mais antiga de trabalho acadmico, com
surgimento ligado s primeiras Universidades na Europa, h 800 anos passados. Os intelectuais
que aspiravam o cargo de docncia em alguma faculdade de Filosofia ou de Teologia, as
primeiras e mais importantes reas de conhecimento ento cultivadas, deveriam apresentar uma
Tese, uma nova doutrina ou teoria, a ser defendida perante uma banca examinadora que argia o
candidato apresentado argumentos contrrios aos propostos. Se a tese fosse vitoriosa, ele
conseguia a aprovao anunciada pela usual expresso Doctorem habemus. Doutor (aquele
que sabe) designa a pessoa que tem conhecimento profundo sobre um assunto, e deu prova
deste seu saber mediante a realizao de um trabalho original e indito (DOfrio, 2000).
Na elaborao de uma Dissertao de mestrado (Tobar e Yalour, 2001), no
necessrio apresentar um novo enfoque terico, construir um paradigma ou formular algo novo
sobre tema especfico. O mestrando tem que saber estudar um tema, mas no necessita levar o
assunto at a fronteira do conhecimento. A dissertao de mestrado destinada demonstrar
que o estudante tem habilidade para sistematizar e processar informaes, para encontrar e
consultar bibliografia e para poder extrair concluses relevantes da pesquisa empreendida.
Igualmente na Monografia para Especializao, o trabalho no necessariamente precisa
ser indito podendo (Salomon, 2001) originar-se de tema ministrado nas disciplinas cursadas.
Porm, o documento, que um trabalho de iniciao em cincia, deve evidenciar conhecimento
e reflexo do candidato sobre o tema tratado e algumas vezes pode ser equivalente uma
Dissertao.
325
O Projeto de Pesquisa
Como escrito acima, melhor trabalho de pesquisa ser desenvolvido quanto mais
organizado o pesquisador. Para organizar a pesquisa, a metodologia da pesquisa oferece regras
destinadas elaborao de um projeto de pesquisa, sendo este entendido como instrumento para
uma ao planejada em investigao cientfica, na aplicao do mtodo cientfico.
O projeto um documento que detalha as intenes, aes e procedimentos que sero
desenvolvidos na busca de dados para formao de conhecimento sobre a realidade biolgica,
qumica, fsica ou social. Os elementos que compem um projeto de pesquisa em cincia devem
responder, na ordem proposta, s seguintes questes:
- Tema de Pesquisa: o que eu quero pesquisar?
- Problema de Pesquisa: o que eu desconheo sobre o que quero pesquisar?
- Hiptese de Pesquisa: o que eu penso que vou encontrar sobre o que eu ainda no sei?
- Justificativa e Levantamento Bibliogrfico: porque eu quero pesquisar?
326
O Tema de Pesquisa
Saber o que se quer pesquisar o primeiro passo para iniciar o trabalho de investigao,
mas nem sempre o mais fcil pois existe uma enorme diversidade de assuntos a sem tratados.
Um critrio que deve ser observado na escolha o interesse que o pesquisador tem pelo assunto.
Pode ser, por exemplo, devido atividade profissional ou subrea de conhecimento que
desenvolve. Outras vezes, o projeto ser desenvolvido porque o orientador assim determina. De
todo modo, no se pode esquecer que a escolha do tema dever ser justificada, seja devido
importncia cientfica, tecnolgica, social, econmica ou outro motivo que determine sua
relevncia no investimento de tempo, dinheiro e emoo.
Talvez a referncia mais marcante na construo de um tema de pesquisa a sua
pertinncia ao campo cientfico. Ou seja, ele deve estar bem localizado na derivao da
hierarquizao dos campos de conhecimento conforme organizado, em nosso pas, pelo
Conselho Nacional de Cincia e Tecnologia (CNPq/MCT). Usando como referncia as Anlises
Clnicas Veterinrias, especialidade na qual o Curso de Especializao para o qual esta
publicao serve de base, sua classificao fica assim constituda:
Grande rea: Cincias Agrrias
rea: Medicina Veterinria
Subrea: Patologia Clnica Animal
Especialidade: Anlises Clinicas Veterinrias.
Alertamos que algumas modificaes nesta classificao ocorrem, com incluso de
novas reas e subreas para acompanhar a complexa dinmica da produo de conhecimento.
Linha de Pesquisa: estas so entendidas como estudos aglutinadores que se fundamentam na
tradio investigativa de um pesquisador, de um grupo de pesquisa ou de uma instituio. Elas
esto relacionadas com as caractersticas da formao dos recursos humanos disponveis. Neste
Curso de Especializao, algumas Linhas de Pesquisa so as seguintes:
- Patobiologia aplicada Veterinria
- Hematologia, transtornos da coagulao
- Bioqumica clnica e transtornos endcrinos
Das linhas de pesquisa so derivados os temas de pesquisa.
327
O Problema de Pesquisa
Tendo delimitado o tema, o assunto de interesse, o passo seguinte o de elaborao do
Problema de Pesquisa. Informar o que desconhecido no tema tratado, e por isso ser
investigado. Atualmente o problema de pesquisa formulado na forma de pergunta, sendo uma
maneira de interrogar-se sobre o fenmeno ou fato que se quer observar ou experimentar. A
pesquisa toda conduzida com a finalidade de encontrar uma resposta questo formulada.
Deve-se lembrar que, assim como o Tema, o Problema de pesquisa deve ser passvel de
demonstrao e verificao pelos sentidos. Alm do mais, exige um considervel conhecimento
da produo cientfica sobre o tema tratado. Quanto maior formao acadmica pretendida,
tanto maior a exigncia da profundidade do problema colocado. No caso de um projeto de Tese
de doutoramento, quando exige-se originalidade no trabalho, deve tambm haver originalidade
na formulao do Problema de pesquisa. Ou seja, descobrir algo que desconhece-se sobre o
Tema, perguntar o que ainda no foi perguntado. O que significa tambm elevado conhecimento
conceitual e terico sobre a Especialidade e a Linha de Pesquisa.
O que ocorre frequentemente a formulao provisria de um Problema de Pesquisa. A
leitura sobre o tema, ou mesmo testes-pilotos e entrevistas iniciais, podero fazer com que o
Problema de Pesquisa seja reformulado. Assim como ocorre com a formulao da Hiptese, o
momento de demonstrao de criatividade por parte do pesquisador.
Exemplo de Problema de Pesquisa:
As coleiras antiparasitrias que apresentam anticolinestersicos como princpio qumico ativo,
afetam a atividade butirilcolinesterase em ces hgidos?
Hiptese de Pesquisa
328
329
A Leitura Exploratria, que j faz parte do Levantamento Bibliogrfico, deve ser feita
mais alinhada como o Tema de Pesquisa, e no com a Linha de Pesquisa, que mais ampla. O
pesquisador deve fazer a leitura de abordagens diversificadas, o que colabora para seu melhor
esclarecimento, bem como dispor de tempo tanto para refletir sobre as informaes recolhidas
quanto para discutir sobre elas com o orientador e outros colegas do grupo de pesquisa. Mais
abaixo, sero indicados procedimentos para qualificar a busca bibliogrfica e organizar as
informaes obtidas.
Exemplo de argumentao Justificativa:
Os organofosforados e carbamatos so muito utilizados em Medicina Veterinria, na formulao
de produtos contra ectoparasitas, como pulgas e carrapatos. Esses inseticidas podem ser
encontrados sob vrias formas como talcos, coleiras, sprays e shampoos. Somente no ano de
2004, foram notificados no Centro de Informaes Toxicolgicas do Rio Grande do Sul
(CIT/RS) 40 casos de intoxicao por agentes anticolinestersicos em animais de companhia .....
O(s) Objetivo(s)
Caracterizam de forma resumida a finalidade do projeto (Goldim, 1997). Dependendo
da magnitude do projeto, o Objetivo pode ser dividido em Geral e Especfico. O Geral explicita
o propsito (mais amplo), e o Especfico caracteriza etapas ou fases do projeto. Como os
Objetivos expressam as aes que sero desenvolvidas no projeto devem iniciar, sempre que
possvel, com verbos operacionais no infinitivo como: descrever, comparar, verificar.
importante a preciso na escolha do verbo, escolhendo aquele que rigorosamente
exprime a ao que o pesquisador pretende executar. Critrio fundamental na delimitao dos
objetivos da pesquisa a disponibilidade de recursos financeiros e humanos e de tempo para a
execuo da pesquisa, de tal modo que no se corra o risco de torn-la invivel. prefervel
diminuir o recorte da realidade do que se perder em um mundo de informaes impossveis de
serem tratadas (Barreto e Honorato, 1998).
Exemplo de Objetivos:
Geral: reduzir o tempo de diagnstico em suspeitas de intoxicaes de ces por agentes
qumicos antiparasitrios como organofosforados e carbamatos.
Especfico: verificar a ocorrncia de alterao na enzima enzimtica butirilcolinesterase em ces
aps sete dias usando coleira antiparasitria.
Material e Mtodo
Nesta seco devem ser descritos todos os procedimentos, meios tcnicos e materiais
que sero adotados e usados durante o processo de investigao. Pode-se iniciar definindo o
tipo de pesquisa:
330
- qualitativa: que especifica os fenmenos em sua razo de ser quanto aos significados,
intencionalidades, motivaes, aspiraes, crenas, valores e atitudes. Este tipo de pesquisa
pode ser utilizado, por exemplo, quando interroga-se sobre que explicaes os criadores de
gado de leite atribuem s causas de aborto?.
- quantitativa: neste caso a pesquisa supe uma populao, ou amostra, qualquer conjunto de
elementos que seja comparveis entre si, objetivando a mensurao de determinadas variveis
do fenmeno, evento ou fato observado ou experimentado. Deve gerar dados para a
interpretao matemtica atravs da estatstica descritiva ou analtica.
Tambm pode-se determinar como tipos de pesquisa:
- observacional: quando as tcnicas de coleta de dados visam descrever o objeto de pesquisa
sem nele interferir, no sentido de no introduzir ou manipular as variveis estudadas. Por ser
observacional no significa passividade de parte do investigador, pois esse examina os
fenmenos no apenas vendo e ouvindo diretamente mas tambm atravs da coleta de
informaes materiais para observao analtica.
- experimental: nesse tipo de pesquisa as variveis capazes de influenciar o objeto de pesquisa
so propositadamente introduzidas ou manipuladas com a finalidade de obter como resultados a
resposta manifestada pela populao ou sua amostra.
- reviso bibliogrfica: tambm aceita como um modo de busca de resultados de pesquisa. A
busca de dados atravs da reviso de pesquisas j realizadas pode ser aceitvel quando se quer
comparar, por exemplo, tcnicas diferentes de anlises clnicas ou intervenes teraputicas e
que, por ordem cronolgica, buscam-se evidncias de melhores eficcias e eficincias de
tratamentos. Nomina-se essa modalidade descrita como reviso sistemtica. Outra modalidade
a reviso crtica, quando ela entremeada por comentrios sobre o mtodo de busca dos dados,
das suas interpretaes ou anlises estatsticas. Vemos que em ambos os casos, o conhecimento
do pesquisador no pode estar sujeito ao nvel de conhecimento de iniciao cientfica. Pelo
contrrio, exige grande conhecimento prvio sobre o tema tratado bem como capacidade de
reconhecer acertos e possveis erros nos resultados, interpretaes apresentadas nas
comunicaes cientficas. Muitos se deixam levar pela falsa aparncia de ser trabalho de mais
fcil execuo e menor tempo para concluso. Uma pesquisa e monografia apresentada como
recorta e cola, inaceitvel do ponto de vista acadmico.
Outro quesito importante a descrio do delineamento da pesquisa. Diz respeito ao
modo como populao ou sua amostra organizada em relao s variveis de observao ou
experimentao. Quando tratamos do delineamento de um experimento, realizamos a descrio
da forma como os tratamentos sero designados s unidades experimentais. O tratamento pode
ser entendido como um produto, substncia ou um processo que se quer testar, e unidades
experimentais pode ser um paciente, um grupo de indivduos ou mesmo uma clula bacteriana.
331
Deve ser especificada a varivel em anlise e a forma como ser medida, alm do nmero de
repeties.
Tomando como referncia desenhos-delineamento de pesquisa com critrio tempo e
direo da amostra (prospectivo: causa efeito), o Estudo de Coorte (dois grupos), que pode
ser: ante facto ou pos facto, apresenta o seguinte arranjo:
futuro
causa
332
Referncias
333
Cronograma
Indica a data de incio e finalizao do projeto, bem como a distribuio temporal
semanal ou mensal, das atividades e procedimentos necessrios sua execuo.
Oramento
Geralmente dividido por recursos necessrios aquisio dos materiais de custeio e
permanentes, que se aparecem como ltima seco do projeto nem por isso a menos
importante.
As seces aparecem no projeto em ordem de apresentao que obedecem uma lgica
de comunicao. Mas nenhuma mais importante que outra. Se o projeto um modo de
planejamento, ele pressupe a sua exeqibilidade. Portanto, mesmo que o oramento seja
apresentado como ltimo item no significa que deva ser o ltimo a ser considerado na
projeo, posto que desde o incio pode ser o fator limitador na execuo do trabalho.
Assim tambm com o tempo disponvel. Por exemplo uma tese de doutoramento, que
mesmo tendo a necessidade de uma complexidade maior no aprofundamentos do tema proposto
permite algumas correes de rumo no desenvolvimento do trabalho planejado posto que tem
tambm maior tempo na sua execuo. J uma monografia de concluso de um curso de
especializao, a margem para correo de rumo caso o planejamento de alguma das seces
no tenha sido bem elaborada, muito menor.
Sintetizando e reforando, todas as seces do projeto devem estar encadeadas de modo
que permitam a construo de dados com o rigor exigido pelas caractersticas cientficas.
O levantamento bibliogrfico
Uma vez definido o tema sobre o qual versar o trabalho, chegado o momento de
organizar-se em relao aos suportes bibliogrficos que tornaro possvel a sua realizao,
embasado em uma bibliografia bsica cuja funo orientar o pesquisador na estruturao dos
tpicos, a partir do problema exposto, na coleta, anlise e interpretao dos dados a serem
relatados na monografia, podendo utiliz-lo como roteiro para sua execuo.
O levantamento bibliogrfico consiste na busca e obteno das informaes pertinentes,
atravs dos suportes oferecidos pelas tecnologias da informao e a utilizao adequada das
ferramentas inerentes.
334
A informao cientfica tais como artigos de peridicos, livros, captulos de livros, teses
de doutorado, dissertaes de mestrado, reunida e armazenada pelos profissionais da
informao, de forma sistemtica e organizada, de maneira a possibilitar sua recuperao com a
finalidade de consulta e leitura, atuando como suporte pesquisa. A esta recuperao de
documentos chamamos levantamento bibliogrfico.
Atualmente, as mais utilizadas so as fontes de informaes eletrnicas (que utilizam os
computadores como suporte - hardware e software), dada a facilidade com que so
disseminadas, resultando em agilidade na obteno dos documentos, alm de oferecer recursos
multimdia, links para artigos relacionados e outros que possam enriquecer a busca do
pesquisador. Embora os recursos e bases oferecidos pela internet sejam incontveis, sero
abordados a seguir aqueles mais comumente utilizados para a elaborao de trabalhos
acadmicos.
Nesse contexto, os peridicos cientficos tendem, na atualidade, a figurarem como a
principal fonte de difuso do conhecimento cientfico devido, justamente, periodicidade da
publicao, tendo como caracterstica atualidade da informao e confiabilidade, uma vez que
os trabalhos publicados so avaliados pelos seus pares, pesquisadores, e passam pelo crivo de
uma comisso editorial especialista na rea.
As bases de dados que contemplam textos, podem ser apresentadas na forma referencial
e texto completo e podem conter, alm de artigos de peridicos cientficos, teses de doutorado,
dissertaes de mestrado, livros, trabalhos apresentados em congressos e outros documentos de
cunho cientfico.
As bases de dados referencias so aquelas que, quando da busca do material, fornece
apenas a referncia do documento, ou seja: autor, ttulo e/ou publicao e outros elementos que
permitam localizar o documento. Estas bases, seguidamente, fornecem tambm os resumos dos
documentos, facilitando ao pesquisador determinar a importncia do documento para o seu
trabalho. A partir destes dados, feita a busca para saber onde est armazenado o documento
impresso (em bibliotecas ou centros de informao do Brasil e do mundo) para que possa ser
providenciada sua chegada s mos do interessado.
As bases de dados de texto completo fornecem o texto na ntegra, permitindo sua leitura
direto na tela do computador, bem como imprimi-lo ou envi-lo por e-mail para leitura
posterior. Podem ser de acesso gratuito ou mediante pagamento (assinatura ou acesso pago a um
nico artigo).
Algumas bases de dados, mesmo tidas como referenciais, fornecem, atravs de links, o
acesso ao texto completo, podendo este ser gratuito ou solicitar senha de assinatura ou, ainda,
pagamento para acesso ao documento na ntegra.
Com o levantamento bibliogrfico em mos, hora de buscar os documentos cujo
acesso no foi imediato. Os catlogos de bibliotecas acadmicas prximas podem e devem ser
consultados nessa busca pois pode haver reduo de nus em relao a tempo e custo.
335
Organizao do material
Uma vez selecionado o material de interesse, o prximo passo organizar aquele que
ser utilizado na elaborao do trabalho. A partir da leitura dos textos, selecionam-se aqueles
que, pelo seu contedo, sero utilizados na fundamentao terica do trabalho e, dada a
quantidade de material que reunida no decorrer da tarefa, urge que os mesmos sejam
organizados facilitando sua posterior recuperao.
momento de colocar-se em prtica as fichas de leitura. Organizam-se fichas que contenham
um cabealho, para a referncia do documento consultado, espao para resumo e observaes
importantes e espao para outras notas relevantes, tencionando recuperar a informao caso haja
necessidade. Este espao pode conter, por exemplo, a biblioteca em que se encontra o material.
importante enfatizar que, no decorrer do trabalho, outras bibliografias interessantes
podem surgir e, para manter-se organizado, no deve ser desconsiderada a prtica das fichas.
Exemplo de ficha bibliogrfica:
Assunto:
Referncia:
Ficha 1
Resumo:
O documento monogrfico
Redao do Trabalho
A recomendao de que o trabalho (elementos textuais) siga uma redao fluente,
concatenada, primando pela clareza, objetividade e impessoalidade, e, conquanto varie o estilo,
dependendo da rea, no deve distanciar-se da objetividade, optando pelas idias concisas e
evitando-se redundncias. A monografia deve ser considerada como um estudo que leve a
concluses pertinentes e passveis de contribuies tericas e/ou prticas nos campos
cientficos, sociais e tecnolgicos relevantes. A ateno e exigncia com o trabalho proposto,
336
parte da utilizao da norma culta para sua redao e segue, at sua concluso, com a acuidade
tcnica quando da sua formatao final.
Quando da adoo de frmulas e/ou termos especficos de determinadas reas,
recomenda-se a adoo daqueles utilizados por fontes autorizadas.
As siglas, na redao do texto devem ser evitadas, entretanto, optando-se por este
formato, na sua primeira aluso no texto, coloca-se o nome por extenso, seguido da sigla entre
parnteses, podendo, ento, as aluses subseqentes valerem-se somente da sigla.
Exemplo:
Associao Brasileira de Normas Tcnicas (ABNT)
A estrutura do trabalho cientfico segue as normas da Associao Brasileira de Normas
Tcnicas, Comit de Informao e Documentao (ABNT).
A ABNT o rgo responsvel por elaborar e revisar, periodicamente, normas visando
normalizar tecnicamente procedimentos nas diversas reas, no Brasil, contribuindo, enquanto
fornecedor oficial das bases necessrias ao desenvolvimento tecnolgico do Pas. Na rea da
documentao, delibera sobre quesitos que englobam disposio, seqncia e estilo, visando a
uniformizao e enquadramento formal dos trabalhos acadmicos, desde a sua forma de
apresentao estrutural, at a elaborao das referncias bibliogrficas. Tais deliberaes visam
a facilitar a leitura, consulta e recuperao de informaes ali contidas. Sendo assim, uma
monografia, enquanto trabalho cientfico, deve segui-la quando da sua elaborao e disposio.
Segundo a Norma da ABNT para Trabalhos acadmicos Apresentao (2002), o
trabalho cientfico composto de elementos pr-textuais, textuais e ps-textuais sendo
estruturados e dispostos conforme o Quadro 1.
Elementos pr-textuais
Constituem-se em elementos que antecedem o corpo do trabalho.
Elementos Textuais
Os elementos textuais so subdivididos em captulos ou sees, de acordo com a
necessidade apresentada.
Introduo
O primeiro captulo (ou seco) a Introduo, que deve expor, sucintamente, a
natureza da pesquisa, abordando de forma geral as informaes que se seguiro e a
intencionalidade do trabalho, tendo o cuidado de evitar j no princpio, aprofundar-se ou
estender-se em demasia no tema, bem como se distanciar da temtica proposta.
Desenvolvimento
Os captulos subseqentes (Desenvolvimento) devem conter os objetivos do trabalho;
reviso de literatura, onde o autor expor seu ponto de vista e abordar outras pesquisas e
337
Elemento
Obrigatrio
Capa
Lombada
Folha de rosto
Errata
Folha de aprovao
Pr-textuais
Textuais
Ps-textuais
Opcional
Dedicatria
Agradecimentos
Epgrafe
Lista de ilustraes
Lista de tabelas
Lista de abreviaturas
Lista de smbolos
Sumrio
Introduo
Desenvolvimento
Concluso
Referncias
Glossrio
Apndice(s)
Anexo(s)
ndice(s)
A reviso bibliogrfica, por sua natureza, far uso das citaes onde, mais uma vez a
ABNT deve ser seguida, atravs da sua norma de citaes de documentos, evitando a cpia ou
apropriao indevida de idias. Toda e qualquer idia, especfica, retirada de um documento,
deve ter sua fonte devidamente citada, no corpo do trabalho e referenciada ao final deste.
Entretanto, esta prtica no impede que o autor contraponha seu ponto de vista ou concorde com
o exposto por outro autor ou autores consultados, ao contrrio, esta a maneira adequada
quando da elaborao do trabalho.
As divises dos captulos (ou seces) e destes em subcaptulos (ou seces
secundrias, tercirias etc.), ficam a critrio do autor, de acordo com a necessidade apresentada
338
pelo trabalho visando sua melhor concatenao. Regra esta, que excetua a introduo e a
concluso ou concluses, que no comportam subdivises.
Concluses
As concluses devem abordar, de forma sinttica, o contedo pesquisado abordando
informaes relevantes e apontando diretrizes presentes ou futuras relacionadas problemtica
levantada.
Elementos ps-textuais
Normalmente contm as referncias, mas pode conter outros elementos que no se
adaptem ao corpo do trabalho.
Citaes bibliogrficas
As citaes bibliogrficas, presentes na reviso de literatura, devem seguir a NBR
10520 de agosto de 2002, que recomenda o seguinte:
Nas citaes, as chamadas pelo sobrenome do autor, pela instituio responsvel ou
ttulo includo na sentena devem ser em letras maisculas e minsculas, e quando estiverem
entre parnteses, devem ser em letras maisculas (ABNT, 2002).
As citaes podem ser diretas ou indiretas. As citaes diretas so caracterizadas pela
transcrio de parte do texto, transcrevendo-se as palavras do autor consultado; as citaes
indiretas, no utilizam as palavras do autor, apenas a(s) idia(s).
Sistema de chamada das citaes:
Quanto ao sistema de chamada das citaes, recomendado seu emprego segundo os
exemplos que seguem:
a)
b)
At trs autores, a pontuao de separao entre os nomes dos autores deve ser de ponto
e vrgula (;). Mais de trs autores, coloca-se o primeiro seguido da expresso latina et al.
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d)
Exemplos:
Conforme Munhoz e Scavone (2007, p. 35) [...] o estresse pode ser definido, de
maneira mais precisa, como qualquer mudana fisiolgica ou psicolgica que altera a
homeostasia do organismo.
ou
[...] o estresse pode ser definido, de maneira mais precisa, como qualquer mudana fisiolgica
ou psicolgica que altera a homeostasia do organismo. (MUNHOZ; SCAVONE, 2007, p. 35).
e)
- at trs linhas, devem estar contidas entre aspas duplas. Citaes no interior da citao,
utilizam-se aspas simples;
Exemplo:
De acordo com o pensamento de Assis (2003, p. 36) Quando falamos em cincia,
precisamos ter em mente onde ela acontece e a que interesse atende. Na perspectiva de um pas
perifrico, cincia um luxo, exercida em universidades e em centros de pesquisa, e visa
basicamente formao de pessoal.
ou
Quando falamos em cincia, precisamos ter em mente onde ela acontece e a que
interesse atende. Na perspectiva de um pas perifrico, cincia um luxo, exercida em
universidades e em centros de pesquisa, e visa basicamente formao de pessoal (ASSIS
2003, p. 36).
-
Exemplo:
O estudo das funes cerebrais, porm, nem sempre possvel pela
simples anlise estrutural. Surgem, ento, as neuroimagens
340
341
Referncias bibliogrficas
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TOBAR, Frrederico; YALOUR, Margot Romano. Como fazer teses em sade pblica. Rio de Janeiro :
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342