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Mtodos de Preparo de Amostras

Fundamentos sobre preparo de amostras


orgnicas e inorgnicas para anlise elementar
6a Edio Revisada e Ampliada
Editor: Francisco Jos Krug
Abril 2006

Dados Internacionais de Catalogao na Publicao (CIP)

Seo Tcnica de Biblioteca - CENA/USP


Workshop sobre Preparo de Amostras (6 : 2006 : Santa Maria)
Mtodos de preparo de amostras; fundamentos sobre preparo
de amostras orgnicas e inorgnicas para anlise elementar /
editado por Francisco Jos Krug. Santa Maria : UFSM, 2006.
282 p.
1. Preparo de amostras - Workshop I. Francisco Jos Krug, ed.
II. Ttulo
CDU 543.05

APRESENTAO
Este texto foi inspirado no roteiro recomendado por Richard Anderson em
monografia especialmente dedicada ao pr-tratamento de amostras e separaes, mas
contm captulos inditos, baseados na experincia dos autores. Nas edies antigas, os
atuais captulos 5, 6 e 7 correspondiam, em boa parte, traduo dos captulos
correspondentes ao livro de Anderson, complementada com informaes contidas na verso
em ingls da excelente monografia de Rudolf Bock sobre decomposio de amostras e do
histrico texto de M. Wrfels sobre decomposies em sistemas fechados. Na 4a edio
(2003) foram incorporadas aplicaes e abordagem de outros mtodos de decomposio
no

mencionados

nas

verses

anteriores,

as

quais

foram

feitas

pelo

MSc Juliano Smanioto Barin e Prof. Dr. rico Marlon de Moraes Flores. Nesta 6a edio
foram incorporados captulos sobre erros sistemticos, extraes assistidas por ultra-som,
anlise direta de slidos e suspenses. Os captulos 6 e 7 foram reestruturados e reeditados pelo grupo liderado pelo professor rico Flores; o captulo 8 foi atualizado e
revisado pelos professores Joaquim de Arajo Nbrega (DQ-UFSCar), Ana Rita Nogueira
(EMBRAPA Sudeste) e pelo grupo de Santa Maria, contendo vrias aplicaes selecionadas
com experincia dos autores. Quero tambm destacar, que este texto foi inspirado a partir
de materiais didticos preparados pelo Prof. Dr. Ramon Barnes (University of
Massachussets, Amherst, USA), pelo Prof. Dr. Gnter Knapp (Tecnhical University Graz,
Austria), e pelo Professor Dr. Antnio Celso Spnola Costa (Instituto de Qumica-UFBA) para
o I e II Workshops sobre Mtodos de Decomposio de Amostras realizados no CENA-USP,
Piracicaba-SP, em 1996 e 1998, e para o III Workshop realizado em So Carlos-SP no
CCDM, DQ-UFSCar e EMBRAPA Sudeste. Aproveito para expressar meus mais sinceros
agradecimentos a todos os autores, Comisso Organizadora deste VI Workshop, e a todos
aqueles que estaro trabalhando para o sucesso deste evento: conferencistas convidados,
coordenadores e supervisores de aulas prticas, expositores, tcnicos especializados e
pessoal de apoio operacional e administrativo do Departamento de Qumica da Universidade
Federal de Santa Maria.
Francisco Jos Krug

23/04/2006

INFORMAES SOBRE OS AUTORES

Dra. Ana Rita de Araujo Nogueira, pesquisadora da Embrapa Pecuria Sudeste e


professora credenciada no Programa de Ps-Graduao em Qumica da UFSCar, So
Carlos-SP.
Prof. Dr. Antonio Celso Spnola Costa, professor do Departamento de Qumica da
Universidade Federal da Bahia, Salvador-BA
Prof. Dr. Carlos Emanuel de Carvalho Magalhes, professor do Centro de Cincias e
Tecnologia, Departamento de Fsica e Qumica, Univ. Estadual do Cear, Fortaleza-CE.
Dra. Cassiana Seimi Nomura, pesquisadora (FAPESP) junto ao Laboratrio de Qumica
Analtica Henrique Bergamin Filho, CENA-USP, Piracicaba-SP.
Dr. Drio Santos Junior, pesquisador (FAPESP) junto ao Centro de Lasers e Aplicaes,
Instituto de Pesquisas Energticas e Nucleares-IPEN, So Paulo-SP e colaborador no
Laboratrio de Qumica Analtica Henrique Bergamin Filho, CENA-USP, Piracicaba-SP.
Qumico Diogo Pompeu de Moraes, estudante de mestrado do Programa de PsGraduao em Qumica do Departamento de Qumica da Universidade Federal de Santa
Maria, Santa Maria-RS.
MSc. der Lisandro de Morares Flores, professor do Departamento de Qumica da
Universidade Estadual do Rio Grande do Sul, Santana do Livramento-RS.
Qumico Fbio Andrei Duarte, estudante de mestrado do Programa de Ps-Graduao em
Qumica do Departamento de Qumica da Universidade Federal de Santa Maria, Santa
Maria-RS.
Prof. Dr. Francisco Jos Krug, professor do Centro de Energia Nuclear na AgriculturaUSP, Laboratrio de Qumica Analtica Henrique Bergamin Filho, Piracicaba-SP
Prof. Dr. rico Marlon de Moraes Flores, professor do Departamento de Qumica da
Universidade Federal de Santa Maria, Santa Maria-RS.
Prof. Dr. Gnter Knapp, professor do Institut fr Analytische Chemie und Radiochemie,
Graz University of Technology, Graz-ustria
Prof. Dr. Joaquim de Arajo Nbrega, professor do Departamento de Qumica,
Universidade Federal de So Carlos, So Carlos-SP.
Prof. Dr. Juliano Smanioto Barin, professor da Universidade Regional Integrada do Alto
Uruguai e das Misses, Departamento de Cincias da Sade, Curso de Farmcia, Frederico
Westphalen-RS.
Prof. Dr. Mauro Korn, professor do Departamento de Cincias Exatas e da Terra da
Universidade do Estado da Bahia, Salvador-BA.
MSc. Mrcia Foster Mesko, professora do Departamento de Qumica da Universidade
Estadual do Rio Grande do Sul, Sananduva-RS.
Prof. Dr. Marco Aurlio Zezzi Arruda, professor do Instituto de Qumica da Universidade
Estadual de Campinas, Campinas-SP.
Prof. Dr. Pedro Vitoriano de Oliveira, professor do Instituto de Qumica da Universidade
de So Paulo, So Paulo-SP.
Prof. Dr. Valderi Luiz Dressler, professor do Departamento de Qumica da Universidade
Federal de Santa Maria, Santa Maria-RS.

1. INTRODUO
1.1.

A SEQUNCIA ANALTICA: PRINCIPAIS REQUISITOS PARA A


REALIZAO DE UMA ANLISE QUMICA
A primeira etapa de uma anlise consiste em submeter a amostra a um

tratamento adequado visando sua preparao para os passos subseqentes da anlise. A


maneira de se decompor a amostra para a anlise depende da sua natureza, do elemento a
ser determinado e sua concentrao, do mtodo de anlise, e da preciso e exatido
desejadas. O tratamento da amostra pode envolver uma transformao substancial da
espcie qumica de interesse, para uma forma apropriada para a aplicao do mtodo de
determinao escolhido.
Antes de se proceder ao estudo detalhado sobre pr-tratamento de amostras,
conveniente recordar quais so as etapas que um analista dever levar em considerao
sempre que uma amostra tiver que ser analisada:
a) Definio do problema. Este o primeiro passo no planejamento de uma anlise: qual
a informao analtica desejada?
b) Escolha do mtodo. A partir do momento em que se souber exatamente qual a
informao desejada, pode-se decidir com detalhes como ela ser obtida:
i. o mtodo deve ser eficiente e, sempre que possvel, simples e rpido;
ii. no deve causar danos ao recipiente no qual a amostra ser tratada;
iii. no deve causar qualquer perda do constituinte de interesse;
iv. no deve permitir ou promover contaminao dos constituintes a serem determinados,
bem como de quaisquer substncias interferentes, a menos que estas possam ser
facilmente removidas;
v. mnima manipulao experimental;
vi. mxima segurana operacional.
c) Amostragem. o processo de se selecionar e remover uma pequena, representativa e
suficiente parte de um todo, a partir da qual ser feita a anlise. O termo amostragem
representativa muito subjetivo, mas pode ser melhor compreendido como
amostragem apropriada.
d) Pr-tratamento da amostra e separao. Em geral, a amostra deve ser convertida em
uma forma adequada para que a anlise proceda. Somente na mais simples das

Francisco Jos Krug, fjkrug@cena.usp.br. VI Workshop sobre Preparo de Amostras, Santa Maria, 2006

Introduo

situaes a amostra poder ser analisada sem qualquer tipo de pr-tratamento, que
pode incluir ou no alguma forma de separao.
e) Medida. Obteno de dados analticos a partir de medidas na amostra pr-tratada.
f)

Calibrao.

Obteno

de

dados

analticos

partir

de

padres

preparados

adequadamente. Em espectrometria atmica as solues-padro so tambm


denominadas de solues de referncia, a partir das quais se constri uma curva
analtica de calibrao ou curva de calibrao. Tambm podem ser usados materiais de
referncia e materiais de referncia certificados para as calibraes.
g) Avaliao. Interpretao dos resultados obtidos a partir das operaes feitas em (e) e
(f), incluindo o controle de qualidade analtica atravs de um procedimento adequado.
h) Ao. O resultado analtico ser usado para se tomar uma deciso com respeito ao
problema original
Assim, antes de se analisar qualquer amostra, recomenda-se que todos os passos da
seqncia analtica sejam informados atravs de uma planilha:
a) Definio do problema.
b) Escolha do mtodo.
c) Amostragem.
d) Pr-tratamento da amostra.
e) Testes qualitativos na amostra pr-tratada.
f) Testes com materiais de referncia para comparao.
g) Interpretao dos resultados.
h) Ao.
Notas:
(i) Em anlises de rotina o problema e a escolha do mtodo devem ser previamente
conhecidos, lembrando que o mtodo deve estar muito bem estabelecido.
(ii) Em muitos casos a amostragem no feita pelo analista, mas por outra pessoa
habilitada. Idealmente, o analista deve sempre participar do processo de amostragem;
quando isto no for possvel dever tomar cincia da planilha de amostragem, com
descrio detalhada dos materiais utilizados.
(iii) O analista ter sempre que fornecer o resultado analtico, mas nem sempre requisitado
e/ou instrudo para tomar uma deciso com respeito definio do problema analtico. Em
alguns casos, as incertezas inerentes ao mtodo escolhido podem impedir e/ou prejudicar
tomadas de deciso.

Francisco Jos Krug, fjkrug@cena.usp.br. VI Workshop sobre Preparo de Amostras, Santa Maria, 2006

Introduo

(iv) Em muitos casos as operaes de pr-tratamento de amostras, separao dos


constituintes de interesse, controle de qualidade com materiais de referncia e interpretao
dos resultados, e mesmo amostragem podem ser automatizados. Uma ao tambm pode
ser automatizada em um instrumento de controle de processo automtico.
(v) Alguns mtodos analticos so absolutos, podendo dispensar a etapa de calibrao
envolvendo solues-padro, como os gravimtricos, por exemplo.

oportuno observar que, dentre todas as operaes analticas, a etapa de


pr-tratamento das amostras a mais crtica. Em geral, nesta etapa que se
cometem mais erros e que se gasta mais tempo. tambm a etapa de maior
custo. Por isso, os passos de um procedimento de pr-tratamento de amostra
devero ser sempre considerados cuidadosamente.

1.2. EFICINCIA ANALTICA


Virtualmente, cada mtodo analtico inclui algum tipo de pr-tratamento de
amostra. Freqentemente, esta etapa consome a maior parte do trabalho analtico. Assim,
quando um mtodo estiver sendo avaliado, seja quanto ao seu desempenho ser adequado
ou no para o propsito analtico, seja na comparao de dois mtodos, as etapas de prtratamento devero ser sempre consideradas com muito cuidado. Em resumo, a operao
de pr-tratamento das amostras pode governar:
- a preciso (repetibilidade e reprodutibilidade) e a exatido dos resultados obtidos
- o tempo total e esforo envolvidos na anlise

Em geral, o mtodo selecionado dever ser executado com o menor nmero possvel
de operaes de pr-tratamento, desde que seja capaz de fornecer resultados
analticos com a devida confiabilidade metrolgica.

Muitos mtodos instrumentais modernos (fluorescncia de raios-X, anlise por


ativao neutrnica instrumental, ablao com laser em espectrometria de massas
com plasma, espectrometria de emisso tica com excitao por arco ou fasca,
eletrodissoluo andica em fluxo contnuo) requerem pouco ou nenhum prtratamento de amostras comparativamente aos mtodos clssicos.

Francisco Jos Krug, fjkrug@cena.usp.br. VI Workshop sobre Preparo de Amostras, Santa Maria, 2006

2. ERROS SISTEMTICOS NO PREPARO DE AMOSTRAS


Francisco Jos Krug
Drio Santos Junior

2.1.

INTRODUO

A evoluo das tcnicas de espectrometria atmica permitiu que a determinao de


elementos qumicos em baixas concentraes, ao nvel de g/kg a pg/kg fosse possvel.
Esses avanos contriburam fortemente para a caracterizao e desenvolvimento de novos
materiais, assim como aplicaes nas reas de toxicologia, agricultura, medicina, biologia,
qumica forense, entre outras. Contudo, essas tcnicas geralmente envolvem a introduo
das amostras em solues aquosas e essa caracterstica originou uma das ironias da
espectrometria analtica moderna, pois, embora seja possvel a determinao simultnea
com excelente sensibilidade em tempos inferiores a 1 min, a converso da amostra slida
em uma soluo representativa pode levar de 5 min a 48 h ou mais, dependendo da
complexidade da matriz. Os tratamentos podem envolver uma transformao substancial da
espcie qumica de interesse para uma forma apropriada aplicao do mtodo de
determinao escolhido, assim como dependem fortemente da natureza da amostra, do
elemento a ser determinado e sua concentrao, da preciso e da exatido desejada. Aps
duas dcadas de pesquisas e avanos na instrumentao comercial, existe um consenso
que o tratamento da amostra previamente a anlise a etapa de maior custo e de maior
fonte de erros na espectrometria atmica.
Segundo Tlg e Tschpel (1994), os erros, denominados sistemticos, so devidos,
principalmente, insuficiente qualificao dos analistas e/ou inadequada infra-estrutura
laboratorial, tornando impossvel o estabelecimento de qualquer estratgia para o timo
desempenho de um mtodo analtico.
A primeira afirmao j fora colocada de forma mais contundente por Abbey (1981),
em trabalho destacando a importncia da formao da pessoa mais do que o mtodo e a
instrumentao, quando afirmou que A confiabilidade de um resultado depende mais de
quem o produz do que como obtido. No existem maus mtodos, mas apenas maus
analistas que no atentam para suas prprias limitaes. (S. Abbey. Anal. Chem, v.53, n.4,
p.529A, 1981). Esta frase foi oportunamente lembrada pelo Professor Paschoal Ernesto
Amrico Senise, no histrico artigo intitulado A qumica analtica na formao do qumico
publicado na revista Qumica Nova, v.5, n.4, p.137-143, 1982.

Erros sistemticos no preparo de amostras

Com referncia infra-estrutura laboratorial, ela poder ser particularmente crtica


para a determinao de baixas concentraes de elementos, dependendo do analito. A
preocupao sempre se torna evidente para teores da ordem de g/g e aumenta,
consideravelmente, com a quantidade absoluta a ser determinada. No Brasil, no fim da
dcada de 70, um dos principais motivos que contriburam para o insucesso da
implementao da espectrometria de absoro atmica com forno de grafite (GFAAS) eram
os altos valores dos brancos analticos, face inadequao das condies de trabalho
laboratorial. Em GFAAS, comum a determinao de massas da ordem de picogramas (1012

g).
De qualquer forma, este assunto vem sempre tona quando os resultados analticos

apresentam erros no tolerveis e/ou quando so acompanhados de incertezas que


impeam tomadas de deciso. Supe-se, aqui, que o analista possua as ferramentas
metrolgicas necessrias para impedir que falsos resultados (positivos ou negativos) sejam
emitidos. A importncia da qualidade do resultado analtico pode ser colocada de outra
forma: o custo poder ser muito maior que os investimentos feitos na instrumentao para
determin-lo.
Este aspecto fica evidente quando se analisam os resultados obtidos pelo IMEP
(International Measurement Evaluation Program) em uma srie de artigos liderados por Paul
De Bivre, renomado cientista do IRMM (Institute for Reference Materials and
Measurements) na Unio Europia.
O IMEP um projeto do IRMM em cooperao com o NIST (National Institute of
Standards and Technology) com o objetivo de aumentar a confiana das medidas em
qumica sob os auspcios da IUPAC (international Union of Pure and Applied Chemistry),
EURACHEM (Foco em Qumica Analtica na Europa), EUROMET (Association of European
Institutes for Metrology) e CITAC (Cooperation for International Traceability in Analytical
Chemistry).
No artigo de Lamberty et al (1996), referente ao IMEP 3, os resultados de 10
elementos em guas foram fruto da contribuio de 155 participantes. Ao agrupar os
resultados em funo das tcnicas/mtodos utilizados (ICP OES, ICP-MS, FAAS, GFAAS,
por exemplo), observaram-se resultados imprecisos e inexatos, independentemente dos
mtodos utilizados. Os resultados mais contraditrios foram observados na determinao de
ferro.
No artigo de Van Nevel et al (1998) merece meno o fato de que resultados
inexatos e imprecisos tambm foram obtidos por laboratrios denominados acreditados ou
certificados ou autorizados quando se determinou chumbo em amostra de gua.
Os resultados discutidos nos trabalhos do IMEP no surpreendem, quando se
recorre aos trabalhos de Tlg e Tschpel. Segundo estes autores, as dificuldades so

Erros sistemticos no preparo de amostras

maiores para a determinao de elementos-trao que ocorrem em altas concentraes na


crosta terrestre, como Si, Al, Fe, Ca, Mg, Na, K, Mn e Ti, porque estes elementos esto
sempre presentes no ambiente de trabalho, principalmente na forma de poeira. Dificuldades
tambm so comuns na determinao de elementos que contaminam o ambiente de
trabalho como resultado da poluio antropognica (Zn, Pb, Cd, Hg, Cu, As, Ni, por
exemplo).
As mais importantes fontes de erros sistemticos podem ser agrupadas nas diferentes
etapas da seqncia analtica, partindo da sugesto de Tschpel e Tlg (1982):
a) Amostragem inapropriada, manuseio da amostra e armazenamento, homogeneidade
inadequada;
b) Contaminao da amostra e/ou soluo da amostra por ferramentas, aparelhos,
frascos, reagentes e poeira durante o procedimento analtico;
c) Efeitos de adsoro e dessoro nas paredes internas dos frascos e fases slidas de
diferentes materiais (filtros, colunas, precipitados);
d) Perdas de elementos (Hg, As, Se, Cd, Zn) e compostos (xidos, haletos, hidretos de
elementos) por volatilizao;
e) Reaes qumicas incompletas ou indesejveis, como mudana do estado de
oxidao, precipitao, troca inica, formao de complexos;
f)

Influncias da matriz na gerao do(s) sinal(is) analtico(s), como atomizao


incompleta, interferncias espectrais de fundo (background);

g) Calibrao e avaliao incorretas, como resultado do uso de padres inapropriados,


solues-padro instveis, funes matemticas falsas, por exemplo.
O diagrama de blocos da Figura 2.1 mostra as principais fontes de erros nesta
seqncia analtica. Cabe esclarecer que este captulo no tratar das incertezas
devidas amostragem no campo e no laboratrio, por se tratar de tpico muito
especializado, que deve ser tratado separadamente. Tambm no sero tratados os
erros e incertezas devidos calibrao de instrumentos, como balanas e sensores de
temperatura, por exemplo.

Erros sistemticos no preparo de amostras

Apropriada ?

Perdas,
contaminao ?

Calibrao
da balana ?

Preparo da
amostra

Pesagem da
amostra teste

Amostragem

Eficincia,
perdas,
contaminao ?

Eficincia,
perdas,
contaminao ?

Decomposio

Separao de
interferentes

Estabilidade
do analito ?

Estabilidade
do analito ?
Ajuste qumico
do analito

Eficincia da
Converso ?

Medida instrumental
da concentrao do analito

Resultados

Calibrao
com solues-padro, CRMs

Figura 2.1. Incertezas na seqncia analtica (adaptado de Peter Bode, Interfaculty Reactor Institute, Delft University of Technology,
apontamentos de aula da Disciplina CEN5761 Metrologia 2005).

Francisco Jos Krug, fjkrug@cena.usp.br. VI Workshop sobre Preparo de Amostras, Santa Maria, 2006.

Erros sistemticos no preparo de amostras

2.2.

O BRANCO ANALTICO

O branco analtico , reconhecidamente, o calcanhar de Aquiles da qumica


analtica de baixas concentraes.
Quando uma amostra analisada, ela dever ser feita com um nmero apropriado
de repeties (n medidas), de tal forma que o resultado encontrado (mam) venha
acompanhado de uma incerteza, que geralmente equivalente estimativa de 1 desviopadro (sam). A mdia dos resultados das n medidas representada por
mam sam
Na qumica analtica, com particular ateno para a determinao de elementostrao, o resultado final da anlise dever levar em considerao o valor do branco.
Quando se manipulam solues, o branco analtico a soluo resultante de todas as
etapas do procedimento analtico na ausncia da amostra. Em geral o branco mais
afetado na etapa de preparao da amostra, por causa dos riscos de perdas do analito
e/ou contaminao.
Seguindo o mesmo raciocnio, o branco dever ser feito com n repeties e o
resultado ser uma mdia (mbr) acompanhada do respectivo desvio-padro das n
medidas do branco (sbr):
mbr sbr
O resultado final ser a diferena destas mdias acompanhada de um desviopadro que a raiz quadrada da soma dos quadrados dos desvios-padro das medidas
da amostra e do branco:
mam - mbr (sam2 + sbr2)1/2

Tabela 2.1 . Exemplos da propagao da incerteza das medidas do branco no resultado


final da determinao de um analito.
Amostra

Branco

Resultado final

mam sam

mbr sbr

mam - mbr (sam2 + sbr2)1/2

Caso 1

15 1

55

10 5

Caso 2

15 1

21

13 1,4

Francisco Jos Krug, fjkrug@cena.usp.br. VI Workshop sobre Preparo de Amostras, Santa Maria, 2006.

Erros sistemticos no preparo de amostras

Os exemplos mostrados na Tabela 2.1 mostram como o valor do branco pode


comprometer a qualidade de um resultado. No Caso 1, a incerteza das medidas do
branco refletida totalmente no resultado final, ao passo que no Caso 2, a incerteza do
resultado final reflete as incertezas das medidas da amostra e do branco.
Na prtica, o branco analtico pode ser eficientemente diminudo, controlando-se
trs fontes principais:
a) Qualidade do ar do laboratrio;
b) Pureza dos reagentes (nos quais a gua est includa);
c) Qualidade dos materiais, equipamentos e/ou assessrios
Uma das experincias mais interessantes sobre a importncia do controle das fontes
de contaminao foi reportada por Murphy (1974), em publicao especial do antigo
National Bureau of Standards (NBS, atual NIST), apud Kingston (1996). A inteno era
certificar algumas propriedades de um vidro, entre elas o teor de Pb. A mesma massa de
amostra foi analisada sob diferentes condies, e os resultados so mostrados na
Tabela 2.2.

Tabela 2.2. Influncia de brancos analticos na determinao de baixas concentraes


de chumbo. Adaptado de Skip Kingston, 1996. The Role of Analytical Blank in Accurate
Trace Analysis. Thomas Murphy, NBS Special Publication 4222, Accuracy in Trace
Analysis: Sampling, Sample Handling and Analysis. Proc. 7th IMR Symposium, 1974,
Gaithersburg-MD.
Condio

Mdia desvio-padro
(g Pb)

Primeira anlise de vidro NIST

330 250

Anlise com cidos selecionados

260 200

Anlise em capela de fluxo laminar Classe 100

20 8

Anlise com cidos de alta pureza em sala branca

21

muito raro os brancos serem preparados nas mesmas condies da amostra. A


maior dificuldade est na etapa de amostragem e no preparo da sub-amostra, pois,
idealmente, se a amostra for um slido orgnico ou inorgnico, o branco deveria ser
obtido a partir de uma amostra slida com caractersticas similares, mas que no

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Erros sistemticos no preparo de amostras

10

contivesse o analito, e processada de acordo com o procedimento de todas as etapas


correspondentes na seqncia analtica.
No caso de slidos orgnicos a amostra pode, por exemplo, ser substituda por
celulose de altssima pureza, coletada e moda nas mesmas condies das amostras.
Com slidos inorgnicos, pode-se utilizar quartzo de altssima pureza para a anlise de
silicatos, mantendo-se as mesmas condies de moagem e homogeneizao.
Posteriormente, supondo-se que a amostra foi tratada com 10 ml de HNO3 concentrado,
que esta soluo foi evaporada at quase a secura, e que o resduo foi retomado com
1 ml de HClO4, seguido da adio de H2O e de uma filtrao para balo volumtrico de
100 ml, o branco passar por todas as etapas deste procedimento, e a soluo resultante
armazenada nas mesmas condies da amostra.
Em casos mais simples, p.ex. uma amostra de gua filtrada atravs de filtro de
membrana de acetato de celulose de 0,45 m para um frasco de polietileno, seguida da
acidificao com 1,0 ml HNO3 concentrado por litro de amostra, o branco dever ser
obtido com gua da mais alta pureza, seguindo-se o mesmo procedimento de filtrao,
acidificao e armazenamento.
Determinar o valor do branco imprescindvel para a obteno de resultados com
confiabilidade metrolgica, incluindo-se o limite de deteco, e dever ser feito sempre
que as amostras forem analisadas. As condies recomendadas pela IUPAC para
determinaes espectromtricas, referem-se a, pelo menos, 20 medidas instrumentais de
uma soluo do branco para o clculo do limite de deteco. Neste caso, o desvio-padro
das medidas no representa as incertezas nas diversas etapas da seqncia analtica. A
incerteza total do mtodo poder ser estimada, processando-se a amostra do branco
com, pelo menos, 4 repeties.
Com referncia aos erros sistemticos, eles sero aqui tratados obedecendo-se a
seguinte seqncia, conforme sugesto de Knapp (1996):

Erros devidos contaminao

pelo ar

por impurezas em reagentes

por impurezas em materiais

Erros devidos s perdas de elementos

por volatilizao

por adsoro

Erros devidos decomposio/dissoluo incompleta das amostras

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Erros sistemticos no preparo de amostras

2.3.

11

ERROS POR CONTAMINAO

2.3.1. Contaminao pelo ar


A contaminao pelo ar ser a principal responsvel por altos valores de branco,
quando a qualidade da limpeza do laboratrio no for adequada. Os principais
contaminantes presentes nas poeiras de origem geolgica, predominantemente solos,
so Si, Al, Fe, Ca, Mg, Na, K, Ti; poeiras metalrgicas apresentam elevados teores de
Fe.

Segundo Tlg e Tcshpel (1994), a atmosfera de reas densamente povoadas

tambm apresenta elementos que no so comumente encontrados, como V, Zn, Ni, Co,
Mn Pb, Cr, Cu, F em concentraes maiores que 0,1 g m-3 , alm S e Cl. A Figura 2.2

mostra os principais contaminantes que podem estar presentes no ar.


Cinzas
Bactrias
Fumaa de cigarro

Plen
P de cimento
Farinha moda

Fumos
Vrus

Poeiras de carvo
Fumaa de
leo

Poeiras e fumaas metalrgicas


Visvel
Visvel
ao
ao
olho
olho
humano
humano

Poeira de
inseticidas

0,001

0,01

0,1

0,3
0,3

10

100

Dimetro mdio das partculas / m

Figura 2.2. Tamanho dos principais contaminantes do ar. Observar a escala logartmica e
a indicao para filtros de alta eficincia para partculas 0,3 m. Adaptado de T.J.
Murphy. In: P.D. La Fleur. National Bureau of Standards Special Publication 422, p.509541, 1976.

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Erros sistemticos no preparo de amostras

12

Alm disso, a atmosfera do laboratrio poder apresentar partculas provenientes


das paredes, da pintura, do piso, do mobilirio, dos equipamentos, das vestimentas e do
prprio analista. Assim, se material particulado entrar em contato com as amostras, a
contaminao poder ser muito severa. Em alguns casos, a proteo contra a
contaminao poder ser bastante efetiva com um pequeno investimento, ou utilizando
sistemas fechados para o preparo das amostras e das solues. Segundo Tschpel
(1989), o mnimo que se deve ter a disposio uma capela de fluxo laminar; mesmo
num corredor, a atmosfera no interior desta capela muito melhor do que dentro de um
laboratrio sem nenhum tratamento do ar. Entretanto, o melhor para evitar e/ou controlar
a contaminao pelo ar trabalhar em reas limpas. A classe de limpeza destas reas
projetada em funo do nmero mximo de partculas de 0,5 m/p3. Um ambiente com
Classe de Limpeza 100, ou simplesmente Classe 100, apresenta, no mximo, 100
partculas de 0,5 m por p3. Esta classificao se baseava no US Federal Standard 209
(Tabela 2.3) que foi, posteriormente, substituda pela

FS 209E, a qual incorpora o

sistema mtrico, onde a Classe 100 corresponde a, no mximo, 3520 partculas de 0,5
m por m3.

Tabela 2.3. Nmero mximo de partculas por p cbico de ar, segundo a antiga
norma americana FS209 "Airborne Particulate Cleanliness Classes in Cleanrooms and
Clean Zones"
Tamanho da partcula
Classe
0.1 m

0.2 m

0.3 m

0.5 m

35

7.5

10

350

75

30

10

750

300

100

100

5.0 m

1,000

1,000

10,000

10,000

70

100,000

100,000

700

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Erros sistemticos no preparo de amostras

13

Atualmente, os padres de limpeza das salas limpas baseiam-se na ISO 14644-1


"Classification of Air Cleanliness" (Tabela 2.4), que utiliza o sistema mtrico, e as classes
se baseiam na seguinte frmula:
Cn = 10N (0.1 / D)2.08 (1)
Onde
Cn = nmero mximo permitido de partculas por metro cbico igual ou maior que o
tamanho especificado da partcula, arredondado para um nmero inteiro;
N = nmero da Classe ISO, que deve ser um mltiplo de 0.1 e ser 9;
D = o dimetro da particular em m.

Tabela 2.4. Classes ISO de limpeza de acordo com a ISSO 14644-1 "Classification of Air
Cleanliness"
Nmero mximo de partculas no ar
(partculas por m3 iguais ou maiores que o tamanho especificado)
Classe ISO

Tamanho das partculas


> 0.1 m

> 0.2 m

> 0.3 m

> 0.5 m

ISO Classe 1

10

ISO Classe 2

100

ISO Classe 3

24

10

1000

237

102

35

ISO Classe 4a

10,000

2,370

1,020

352

83

ISO Classe 5b

100,000

23,700

10,200

3,520

832

29

237,000

102,000

35,200

8,320

293

ISO Classe 7d

352,000

83,200

2930

ISO Classe 8

3,520,000

832,000

29,300

ISO Classe 9

35,200,000

8,320,000

293,000

ISO Classe 6c 1,000,000

Classe 10 (USFS 209)

Classe 100 (USFS 209)

Classe 1000 (USFS 209)

Classe 10000 (USFS 209)

> 1 m

Francisco Jos Krug, fjkrug@cena.usp.br. VI Workshop sobre Preparo de Amostras, Santa Maria, 2006.

> 5 m

Erros sistemticos no preparo de amostras

14

Apesar da ISO 14644-1, ainda hoje se utiliza o antigo padro americano para
designar as classes de limpeza. Assim, ainda comum ouvir as expresses Classe 10,
Classe 100, Classe 1000, Classe 10000. Cabe chamar ateno para o trabalho de Benett
(1999), que trata do impacto da norma ISO sobre a classificao antiga.
Como j foi afirmado, a maneira mais eficiente e conveniente de se controlar
contaminaes pelo ar realizar o preparo da amostra e das solues em uma sala
limpa. A sala-limpa , por definio, uma rea hermeticamente isolada da atmosfera
externa, onde ar refrigerado e convenientemente desumidificado introduzido por um
sistema de insuflamento, sendo previamente filtrado em um filtro ou conjunto de filtros
primrios. O insuflamento feito de tal forma que a presso no interior da sala seja
positiva com referncia presso externa e que o ar pr-tratado seja introduzido na sala
limpa atravs de filtros especiais, denominados filtros HEPA (acrnimo do ingls High
Efficiency Particulate Air filters). A Figura 2.3 mostra um esquema de sala limpa
desenvolvida para o Laboratrio de Anlise de Materiais de Alta Pureza do Max-PlanckInstitut fr Metallfforschung, Dortmund-Alemanha. Apesar de este laboratrio ter sido
desativado h alguns anos, ele foi uma referncia para muitos laboratrios de vrios

Sada de ar

HEPA

HEPA

Entrada de ar

FAN-COIL

Pr-filtros

centros de pesquisa.

HEPA
HEPA

Dreno
Sada de ar

Figura 2.3. Corte esquemtico de uma sala com limpa com capela de exausto
(adaptado de Tlg e Tschpel, 1994)

Francisco Jos Krug, fjkrug@cena.usp.br. VI Workshop sobre Preparo de Amostras, Santa Maria, 2006.

Erros sistemticos no preparo de amostras

15

Deve-se notar, neste esquema, que possvel trabalhar com capela de exausto,
atravs da qual tambm passa ar de alta pureza, com insuflamento atravs de filtro
HEPA. O ar que passa atravs desta capela no pode ser recirculado por causa dos
gases txicos e corrosivos provenientes das decomposies e/ou dissolues das
amostras com cidos concentrados.
Na sala limpa proposta por Tlg e Tschpel (1994) possivel se obter um
ambiente Classe 10000 (ISO Classe 7) na rea de circulao interna e Classe 100 (ISO
Classe 5) no interior da capela de exausto. Para se ter uma idia do significado destas
salas, em um laboratrio normal o nmero de partculas maiores que 0,5 m pode chegar
a 2 x 107 por m3 (Tschpel e Tlg, 1982)
Os filtros HEPA apresentam uma eficincia de 99,97% para reteno de
partculas 0,3 m. Estes filtros impedem a entrada de partculas de poeira geolgica,
plen, bactria, p de carvo, mas no filtram, eficientemente, partculas menores
presentes na fumaa de cigarro e em poeiras metalrgicas (Figura 2.2). Filtros HEPA
especiais, HEPA Tipo D, denominados filtros ULPA (Ultra Low Penetration Air) devero
reter, por definio, 99,9995% de partculas 0,12 m. So recomendados em ambientes
projetados para atender ISO Classe 3 e ISO Classe 4.
O esquema da Figura 2.4 mostra uma sala limpa com bancada central e bancadas
laterais, onde podem ser instaladas capelas de exausto, desde que o ar no retorne
para o sistema de tratamento, e capelas de fluxo laminar.

Mdulos de insuflamento

Pr-Filtro

Pr-Filtro

Retorno do ar

Filtros HEPA
Forro falso
Parede
falsa

Capela de
exausto

Bancada
Classe 100

Bancada
auxiliar

Figura 2.4. Corte de uma sala limpa com bancada central, bancada auxiliar, e capela
com exausto (opcional). Adaptado de NBS (1989).

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Erros sistemticos no preparo de amostras

16

FAN COIL

Retorno
do ar

Classe 1000

Filtros HEPA

rea de servio
Classe 1000

Retorno
do ar

Unidade de
controle
remoto

Classe 1000

Utilidades
de
distribuio

Figura 2.5. Corte de uma instalao para salas limpas com sistemas de insuflamento centrfugo
no piso superior, piso com salas limpas Classe 1000 com filtros HEPA no teto (a separao fsica
entre estes pisos facilita a manuteno), e um piso inferior onde feita a tomada de ar das salas
limpas, recirculando-o (adaptado de apresentao de R.B. Darling, EE 527-Microfabrication.

http://www.ee.washington.edu/research/microtech/cam/PROCESSES/PDF%20FILES/CleanRooms.pdf

Apesar de aparentemente simples, a construo de salas limpas muito


complexa, pois em alguns casos permitido que o fluxo na rea de circulao seja
turbulento, sendo laminar apenas no interior das capelas ou sobre as bancadas. Em
outros casos, a admisso do ar na sala limpa atravs de fluxo laminar. A Figura 2.5
mostra um dos 3 projetos de salas limpas da apresentao de R. B. Darling. No Brasil
existem vrias empresas especializadas em projetos de salas limpas, inclusive empresas
especializadas na manuteno e contagem de partculas. H, tambm, a Sociedade
Brasileira de Controle de Contaminao (SBCC), www.sbcc.com.br, que tambm edita a
Revista da SBCC. Nesta revista possvel identificar as empresas nacionais, e consultar
artigos bastante esclarecedores sobre salas limpas, como, por exemplo, o artigo de Fei
Peng e Guangbei Tu (1999).

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Erros sistemticos no preparo de amostras

17

Para a manuteno dos ambientes nas classes de limpeza desejadas, existe uma
srie de pr-requisitos mnimos, alm de treinamento de todos os profissionais
envolvidos, para se ter acesso s salas limpas. A lista de pr-requisitos, apresentada a
seguir, relativamente simples, e aqui apresentada apenas para se ter uma idia da
disciplina mnima exigida nestes ambientes:
1. Todos os tens pessoais, como chaves, relgios, anis, brincos, cigarros,
isqueiros, devem ser guardados fora da sala limpa. Itens pessoais, como
documentos, tales de cheque, dinheiro podem ser guardados nos bolsos ou em
capangas sob as vestimentas especiais, sem nunca remov-los.
2. No se deve fumar prximo ao local onde feita a tomada de ar para o
tratamento primrio.
3. A entrada de qualquer pessoa no interior de salas limpas s deve ser permitida
com uso de roupas especiais, que inclui, no mnimo, capas para calados, calas,
jalecos e gorros. Os projetos de salas limpas sempre incluem ante-salas e, em
alguns casos, pr-cmaras para limpeza de partculas dos usurios.
4. O uso de cosmticos vedado s pessoas que ingressarem nas salas limpas,
incluindo rouge, baton, sombra para olhos, lpis para olhos, mscaras,
delineadores, clios postios, esmalte de unhas, fixadores de cabelos, mousse,
shampoo anti-caspa a base de sulfeto de selnio, tintas de cabelo (algumas so
feitas com acetato de chumbo), e uso em quantidade excessiva de loes e
perfumes. A Tabela 2.5 mostra os principais contaminantes presentes em
cosmticos. A composio varia muito e raramente informada pelos fabricantes.
Vide tambm a composio mdia de alguns contaminantes em cosmticos na
Tabela 2.6.
5. Usar somente papis absorventes e outros tipos de papeis aprovados para salas
limpas.
6. Usar somente canetas aprovadas para salas limpas.
7. O uso de papel-toalha proibido. Deve-se usar, se possvel, secador de mos
equipado com filtro HEPA.
8. No se deve tocar na superfcie de qualquer material sem luvas apropriadas,
principalmente quando no houver certeza absoluta de que a superfcie est bem
limpa.
9. Usar somente luvas sem talco ou outro tipo de p. Em alguns casos, usam-se
pinas adequadas para manipular as amostras. As impresses digitais so fontes
severas de contaminao, particularmente para determinao de baixas
concentraes de Na e de Cl.

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Erros sistemticos no preparo de amostras

18

10. Deve-se evitar o contato de solvente com a pele, pois pode haver remoo de
gorduras e tecido morto na forma de escamas. A Tabela 2.6 mostra alguns
contaminantes presentes na pele.
11. O uso de loes ou sabonetes com lanolina pode, s vezes, ser tolerado por
diminuir a emisso de flocos de pele.
12. Todas as ferramentas de trabalho, os reservatrios de gua, e outros materiais
devem ser limpos com o mesmo critrio usado para limpar as superfcies das
bancadas das salas limpas.
13. Nenhum utenslio pode ser colocado diretamente sobre a bancada. Normalmente,
usa-se uma bandeja apropriadamente forrada com papel especial para esta
finalidade.
14. Somente panos de limpeza, apropriados para a Classe de uso da sala limpa,
podero ser usados.
15. Todos os equipamentos e materiais introduzidos em ambiente estril devero ser
passveis de esterilizao.
16. No permitida a entrada de qualquer pessoa fisicamente doente em ambientes
estreis, especialmente aquelas com desordens estomacais ou respiratrias. Esta
uma boa prtica em qualquer sala limpa.

Tabela 2.5. Contaminantes comumente encontrados em alguns cosmticos (adaptado


de Richter, 2003)
Cosmtico

Elementos presentes na composio

Baton

Bi, Fe, Mg, Mn, Ti e Zn

Sombra para olhos

Al, Bi, Cr, Fe, Mg, Mn, Si e Ti

Rouge (Blush)

Ca, Fe, Mg, Si e Ti

Mscara

Al, Cr, Fe, Mg, Na e Ti

Ps faciais

Bi, Ca, Fe, Mg, Si, Ti e Zn

Base

Al, Fe, Mg, Na, Si, Ti e Zn

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19

Tabela 2.6. Potenciais contaminantes em ambientes de trabalho (adaptado de Iyengar e


Sansoni, 1980)

Poeira geolgica (g g-1)

Al

Ca

Fe

Pb

Zn

3000

2700

3200

8000

2150

1600

Fumaa de cigarro (g g-1)

10

Cosmticos (g g-1)

60000

1100

250

Suor (g ml-1)

4 - 10

350

Pele (g g-1)

1-2

250

10

3000

Cabelo (g g-1)

4 - 30

3200

5 - 70

900

35000
0,1 - 3

1
6 - 20

3 - 70

450

Alm destas precaues, deve-se ter um controle rgido de parmetros


operacionais, tais como a direo e o fluxo de ar, a presso interna, a umidade relativa e
temperatura, e avaliar, periodicamente, o nmero de partculas por m3.
A Tabela 2.7 mostra como a qualidade do ar do laboratrio melhora, utilizando-se
salas limpas ou capelas de fluxo laminar, com considervel diminuio da contaminao
por Fe, Cu, Pb e Cd.

Tabela 2.7. Concentrao ( g/m3 ) de alguns elementos no ar de laboratrios.


E.J. Maienthal, In: J.K. Taylor ed. National Bureau of Standards. Technical Note 545,
p.53-54, 1970
Fe

Cu

Pb

Cd

Laboratrio comum

0,2

0,02

0,4

0,002

Sala limpa

0,001

0,002

0,0002

nd

Capela de fluxo laminar

0,0009

0,007

0,0003

0,0002

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Erros sistemticos no preparo de amostras

20
2.3.2. Contaminao por reagentes e solues

Os brancos devidos aos reagentes podem ser diminudos consideravelmente


utilizando-se quantidades mnimas de reagentes de alta pureza, os quais podem ser
encontrados

no

comrcio

ou

purificados

no

prprio

laboratrio.

gua

reconhecidamente o reagente ou o solvente que pode contribuir para a ocorrncia de


altos valores de brancos. Idealmente, o branco do solvente no deve prejudicar o limite
de deteco instrumental.
gua
gua ultra-pura um pr-requisito indispensvel para a diminuio dos brancos,
podendo ser obtida em volumes razoveis com a combinao de sistemas de purificao,
sendo um para o tratamento primrio da gua bruta (destilao, osmose reversa ou trocainica) e outro para o tratamento desta gua pr-tratada (sistema fechado com
recirculao atravs de colunas de troca-inica, ou destilao abaixo do ponto de
ebulio em destiladores de quartzo). A Tabela 2.8. mostra como varia a composio de
uma gua no tratada, utilizando-se tratamento convencional (desionizao com colunas
contendo resinas de troca inica) e destiladores de quartzo.
Uma das combinaes comerciais mais utilizadas tem sido a osmose reversa com
resinas de troca-inica em sistema fechado. A unidade de tratamento primrio pode ser
feita somente com osmose reversa ou combinada com processo de eletrodeionizao.
Segundo Darbouret e Kano (1998), a eletroionizao fundamental para a obteno de
gua isenta de ons. O processo baseia-se na utilizao de um campo eltrico com fonte
de baixa potncia e de resinas de troca-inica e membranas on-seletivas para a
desionizao contnua da gua. Segundo os autores o mdulo de eletrodeionizao
facilita a ultra-purificao da gua na etapa seguinte, uma vez que este processo permite
a contnua regenerao das colunas de troca-inica com a aplicao do campo eltrico, e
a qualidade da gua nesta etapa mantida independentemente da vazo de entrada e
da concentrao inica na gua bruta. A unidade de produo de gua ultra-pura
geralmente emprega uma mistura de resinas de alta qualidade empacotada em
polipropileno de alta pureza. Alguns fabricantes incorporam processo de foto-oxidao
com radiao UV (185 e 254nm) na entrada do sistema para garantir a produo de gua
com maior pureza, visando decomposio de compostos orgnicos e organo-metlicos.
Os ons so ento retidos nas resinas de troca inica e a qualidade da gua pode ser, em
princpio, pr-avaliada com a medida da resistividade ou da condutividade. Em alguns
casos, utiliza-se, ainda, uma membrana com 0,1 m de porosidade para reteno de
colides antes da medida.

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21

Tabela 2.8. Impurezas em guas . Dados em g.l-1 ( Iyengar e Sansoni, 1978)


Elemento

torneira

desionizada

destilada em quartzo

Al

57

0,10

<0,002

Br

95

0,10

Ca

55 000

<0,0003

Cd

0,70

<0,10

<0,007

Cl

14 100

<0,0004

Co

<0,10

0,02

Cr

<0,10

0,0002

Cs

0,02

<0,00001

Cu

0,20

<0,002

1,40

<0,0002

0,20

<0,0005

Hg

<1

9,40

<0,001

28 000

0,04

<0,0001

Mg

10 400

0,30

<0,0002

Mn

2,20

0,05

<0,0005

Mo

0,02

Na

8100

0,03

<0,0002

Ni

30

<0,1

<0,0002

43

0,004

<0,0003

Pb

8,50

0,10

<0,003

Rb

10

<0,001

14100

<0,0003

Sb

0,60

<0,50

<0,002

Se

3,30

Si

4900

0,50

Sn

0,60

0,10

<0,004

Sr

11000

0,06

<0,007

Th

<0,0002

Ti

<0,1

Tl

<0,0001

18,50

<0,1

0,40

Zn

5,60

<0,1

<0,002

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Erros sistemticos no preparo de amostras

22

Naturalmente, a produo da gua dever ser conduzida em ambiente com


Classe de limpeza apropriada (ISO Classe 5 recomendvel) e a armazenagem em
recipientes isentos de contaminantes.
A qualidade da gua como reagente definida pela ASTM (American Society of
Testing and Materials), NCCLS (National Committee for Clinical Laboratory Standards),
CAP (College of American Pathologists) e ISO 3696/BS 3997 como Tipo I, Tipo II, Tipo
III ou Tipo IV, em funo da condutncia especfica (mhos cm-1), da resistividade (Mohm
cm), do teor de silicato (mg/l), contagem de bactrias e pH (Tipos III e IV). Para fins de
tratamento, um sistema que produz gua de altssima pureza dever atender aos critrios
para o Tipo I, com resistividade 18 M. cm.

gua Tipo II dever apresentar

resistividade 1-2 M. cm.


A resistividade maior que 18,2M.cm uma indicao da qualidade, mas no ,
necessariamente, um atestado de gua de altssima-pureza. Para tanto recomendvel
determinar os elementos de interesse, utilizando tcnicas com limites de deteco da
ordem de ng/l ou g/l como ICP-MS e GFAAS, por exemplo. A Tabela 2.9. mostra um
exemplo da qualidade de gua tratada em sistemas comerciais produzidos pela
Millipore (Darbouret e Kano, 1998). O sistema denominado Millipore Elix
recomendado para o tratamento primrio da gua bruta e o Milli-Q para a obteno de
gua de altssima pureza.
Tabela 2.9. Teores de elementos determinados por ICP-MS em guas tratadas com
sistemas comerciais (adaptada de Darbouret e Kano, 1998). Dados em ng/l.
Analito
7

Millipore Elix (Tipo II)

Milli-Q

Li

0,34

0,034

23

Na

545,5

0,32

24

Mg

0,99

< 0,34

9,9

< 0,18

36,2

5,2

Ca

27

Al

39
40

12,14

6,8

52

Cr

0,29

<0,082

55

Mn

0,51

<0,4

56

Fe

1,10

0,46

63

Cu

1,38

0,067

34,6

4,4

1,15

0,94

64

Zn

208

Pb

Millipore Elix e Milli-Q so marcas registradas da Millipore

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Erros sistemticos no preparo de amostras

23

cidos
Os cidos inorgnicos podem ser fontes de contaminao severas, dependendo
do elemento a ser determinado e da qualidade e do volume do cido utilizado. Mesmo
cidos de alta pureza comerciais podem apresentar concentraes relativamente
elevadas de alguns contaminantes (Tabelas 2.10 e 2.11), inviabilizando a determinao
de elementos-trao em baixssimas concentraes, concorrendo para altos valores dos
brancos. Naturalmente, os valores dos brancos dependem do volume utilizado, que pode
ser significativamente diminudo, utilizando-se sistemas fechados ou estratgias que
concorrem para a diminuio do consumo, particularmente na decomposio de
amostras.
Mesmo assim, o consumo de cidos de alta pureza pode ser relativamente alto,
implicando em custos elevados quando cidos comerciais so utilizados. A melhor
alternativa para a utilizao de cidos de altssima pureza, a um custo relativamente
baixo, a purificao por destilao abaixo do ponto de ebulio do cido. Este mtodo,
denominado em ingls sub-boiling distillation, baseia-se no aquecimento de um lquido
com radiao infravermelha, utilizando-se uma resistncia eltrica aquecida por efeito
Joule, devidamente protegida por um invlucro de vidro ou de quartzo. A superfcie
lquida , ento, vaporizada sem entrar em ebulio, que a chave para a purificao.
Quando a destilao feita abaixo do ponto de ebulio, no h formao de aerossol
devido disperso de gotculas do lquido na fase gasosa, que naturalmente ocorreria se
o lquido entrasse em ebulio. O lquido vaporizado condensado em um dedo frio, em
geral feito de quartzo de alta pureza, obtendo-se um produto final de pureza equivalente
ou at maior que um produto comercial, quando devidamente coletado e armazenado
em frascos de alta pureza (Figura 2.6). Os cidos ntrico e clordrico concentrados so
facilmente purificados, coletando-se os destilados em frascos de quartzo de alta pureza.
gua de altssima pureza tambm pode ser obtida desta forma. cido fluordrico pode ser
destilado utilizando-se polmeros de alta pureza. A Tabela 2.12 mostra a composio de
gua purificada por destilao abaixo do ponto de ebulio, e permite a comparao de
cidos purificados neste sistema com cidos comerciais.
Soluo de acido clordrico ca 2-4 mol l-1 de alta pureza pode ser obtida por
destilao isotrmica de 12 mol l-1 HCl. Coloca-se um volume do cido diretamente na
base inferior do interior de um dessecador de vidro, e um bquer com 200 ml de gua de
alta pureza sobre uma placa de porcelana perfurada que possa ser apoiada no interior do
dessecador. O conjunto fica fechado por cerca de 10-15 dias sob temperatura ambiente.
A concentrao do cido no bquer determinada por volumetria de neutralizao.

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Erros sistemticos no preparo de amostras

24

Tabela 2.10. Impurezas em cidos clordrico, fluordrico e ntrico. Dados em g.l-1


( adaptada de Iyengar e Sansoni, 1978)
Elemento

HCl

HF

HNO3

p.a.

Ultrapuro

p.a.

Ultrapuro

p.a.

Ultrapuro

Al

0,80

0,5

As

0,005

Br

2,60

Ca

72

0,30

0,4

52

0,2

0,4

Cd

0,03

0,003

0,005

0,1

0,03

Cl

Co

0,09

0,001

<1

0,018

0,01

Cr

1,10

0,008

0,6

72

0,10

Cs

0,002

<0,002

<0,01

<0,1

Cu

0,20

0,03

0,50

0,30

1,30

0,2

60

0,60

1 300

0,80

Hg

<10

<10

200

0,10

0,40

<10

Mg

0,30

0,1

0,40

Mn

<2

0,001

0,60

0,03

Na

500

0,20

100

0,60

80

0,01

Ni

0,20

0,005

0,50

0,05

0,70

0,03

0,20

0,80

0,50

Pb

0,20

0,0015

2,20

0,002

0,20

0,01

Rb

0,60

15

Sb

0,20

0,38

3,0

0,03

0,04

Se

0,20

0,09

Si

20

30

Sn

0,07

0,002

11

0,05

0,10

0,002

Sr

0,06

0,50

0,10

0,20

0,01

Ti

0,006

0,50

0,50

0,80

Tl

0,10

0,10

0,20

0,10

0,20

0,08

0,05

Zn

0,03

0,10

0,08

Francisco Jos Krug, fjkrug@cena.usp.br. VI Workshop sobre Preparo de Amostras, Santa Maria, 2006.

Erros sistemticos no preparo de amostras

25

Tabela 2.11. Impurezas em cidos


(adaptada de Iyengar e Sansoni, 1978)
Elemento

sulfrico

perclrico.

H2SO4

Dados

em

g.l-1

HClO4

p.a.

Ultra-puro

p.a.

Ultra-puro

Al

As

Br

Ca

10

760

0,2

Cd

<1

<1

0,1

0,05

Cl

Co

<1

<1

Cr

25

10

Cs

Cu

11

0,10

Fe

330

Hg

<10

<10

200

0,6

Mg

3.30

500

0,2

Mn

0,8

Na

20

20

Ni

<1

0,20

<1

0,20

Pb

1,2

1,2

Rb

Sb

Se

200

200

Si

18

18

Sn

0,60

0,20

0,60

0,20

Sr

0,40

0,30

0,40

0,30

Th

Ti

Tl

0,10

0,10

0,10

0,10

<2,40

<2,40

Zn

<1

<1

<1

<1

Francisco Jos Krug, fjkrug@cena.usp.br. VI Workshop sobre Preparo de Amostras, Santa Maria, 2006.

Erros sistemticos no preparo de amostras

26

Invlucro
de quartzo

Sada
de gua

Irradiador IR
Condensador

Entrada
de gua

Funil

Sifo

Lquido a ser
destilado
Frasco
de quartzo

Figura 2.6. Corte esquemtico de um destilador sub-boiling (Kuerner et al, 1972)

Tabela 2.12. Impurezas residuais em gua purificada por destilao abaixo do ponto de
ebulio e em diferentes cidos com diferentes graus de pureza. Dados em ng/ml (adaptada
de Tschpel et al, 1980)
Cd

Cu

Fe

Al

Pb

Mg

Zn

H2O subboiling

0,01

0,04

0,32

<0,05

0,02

<0,02

<0,04

HCl 10 mol l-1 subboiling

0,01

0,07

0,6

0,07

0,05

0,20

0,2

HCl 10 mol l-1 ultrapuroa

0,03

0,2

11

0,8

0,13

0,5

0,3

HCl 12 mol l-1 pr anlise.

0,1

1,0

100

10

0,5

14

8,0

HNO3 15 mol l-1 subboiling

0,001

0,25

0,2

0,15

0,04

HNO3 15 mol l-1 Suprapur

0,06

3,0

14

18

0,7

1,5

5,0

HNO3 15 mol l-1 pr anlise

0,1

2,0

25

10

0,5

22

3,0

HF 54% subboiling

0,01

0,5

1,2

2,0

0,5

1,5

1,0

HF 40% ultrapuroa

0,01

0,1

3,0

1,0

3,0

2,0

1,3

HF 54% pr anlise

0,06

2,0

100

5,0

4,0

3,0

5,0

<0,005 <0,002

Produto comercial

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Erros sistemticos no preparo de amostras

27

2.3.3. Impurezas em frascos de reao e recipientes


Em princpio, nenhum material absolutamente resistente a uma soluo, mesmo
que somente gua entre em contato com o mesmo. Conseqentemente, cada elemento
presente no material ser encontrado na soluo em maior ou menor quantidade, e esta
quantidade depender do material, do tempo de contato e da temperatura. O vidro de
borosilicato, por exemplo, que contem vrios elementos maiores e menores, alm de um
grande nmero de elementos-trao em concentraes relativamente elevadas (Tabela
2.13), muito impuro quando comparado com o quartzo, polietileno, polipropileno e
polmeros fluorinados (PTFE, PFA, FEP). Alm disso, as perdas por adsoro em vidros,
conforme j comentado, so muito grandes. Assim, como regra geral, solues de
amostras e solues-padro no devem ser armazenadas em vidro para determinao
de elementos-trao em baixssimas concentraes.
Quartzo
Dentre os materiais mencionados, o quartzo pode ser considerado um dos
materiais mais puros encontrados no mercado, e disponvel em diferentes graus de
pureza. O quartzo composto quase que totalmente de SiO2 e a concentrao de
elementos-trao depender do tipo de quartzo e do mtodo de produo (Richter, 2003).
O quartzo encontrado nos laboratrios pode ser do Tipo I (fuso eletrotrmica) ou do Tipo
II (fuso com chama H2 O2). O quartzo Tipo II apresenta maior pureza porque os
elementos contaminantes so volatilizados na chama. Componentes de quartzo sinttico
so obtidos por hidrlise de SiCl4 na fase vapor (Tipo III) ou por oxidao e fuso eltrica
de SiCl4 (Tipo IV). Heralux e Suprasil, marcas registradas da Heraeus, correspodem
aos quartzos Tipo II e Tipo III, respectivamente. A Tabela 2.14 mostra as principais
impurezas que podem ser encontradas nos vrios tipos de quartzo. Vide, tambm, a
Tabela 2.13 que permite a comparao com outros materiais.

Polmeros sintticos
Infelizmente,

custo

extremamente

elevado

do

quartzo

restringe

consideravelmente seu uso. Alternativamente, materiais polimricos sintticos de alta


pureza podem ser usados em muitas aplicaes. O custo depende do tipo de polmero,
das propriedades fsicas e do grau de pureza de cada material.

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Erros sistemticos no preparo de amostras

28

Tabela 2.13. Impurezas em diferentes materiais (ng/g). Adaptado de Tlg e Tschpel, Anal.
Sci. 3(1987) 199-208.
Elemento

Carbono

PTFE

Quartzo

Quartzo

Vidro

vtreo

Teflon

Heralux

Suprasil

Borossilicato

100

100

10

principal

Na

350

25000

1000

10

principal

Mg

100

100

100

6x105

Al

6000

30000

100

principal

Si

85000

principal

principal

principal

80000

800-3000

100

106

Ti

12000

800

100

3000

Cr

80

30

3000

Mn

100

10

10

6000

Fe

2000

10

800

200

2x105

Co

100

Ni

500

2000

Cu

200

20

70

10

1000

Zn

300

10

50

100

3000

As

50

80

0,1

500-22000

Cd

10

10

1000

Sb

10

0,4

8000

Hg

10**

Teflon marca registrada da DuPont


Heralux e Suprasil so marcas registradas da Heraeus

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Erros sistemticos no preparo de amostras

29

Tabela 2.14. Impurezas de alguns elementos em vidro borosilicato e diferentes tipos de


quartzo. Dados em g. g-1. LOD = limite de deteco. (adaptado de Richter, 2003)
Elemento

Vidro
borossilicato

Quartzo

Quartzo

Quartzo

(Tipo I)

(Tipo II)

(Tipo III)

Al

principal

74

68

< 0,25

principal

0,3

0,1

Ca

1000

16

0,4

< 0,1

Cr

0,1

< LOD

0,03

Cu

<1

3000

1,5

< 0,2

3000

<1

0,1

< LOD

Li
Mg

600

< LOD

< LOD

Mn

1000

0,2

< 0,02

Na

principal

< 0,1

Sb

2,9

0,3

0,1

0,1

Polietileno, polipropileno e polmeros fluorinados

Tanto o LDPE (polietileno de baixa densidade) como o HDPE (polietileno de alta


densidade) pode ser usado para a determinao de elementos-trao. O LDPE
produzido por polimerizao do etileno sob alta presso. O HDPE produzido sob baixa
presso, e a polimerizao catalizada por metais de transio (Al, Ti, Zr, V e Cr). A
temperatura mxima de servio do LDPE de 80C, ao passo que o de alta densidade
pode ser usado at 110C. No obstante, considerando-se os potenciais contaminantes,
o polietileno de baixa densidade prefervel ao de alta densidade.
O PP (polipropileno) produzido cataliticamente com Al e Ti a partir do propileno,
e tambm pode conter teores elevados de alguns contaminantes. Este polmero estvel
at 135C. Pode ser usado para armazenar solues, mas no recomendado para
aquelas com baixas concentraes de analitos.
Polmeros fluorinados so mais caros que polietileno e polipropileno, e podem ser
obtidos com elevado grau de pureza (Tabela 2.15). Apresentam como vantagens
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Erros sistemticos no preparo de amostras

30

adicionais maior resitncia aos cidos e maiores temperaturas de servio.

O PTFE

(politetrafruoroetileno) convencional torna-se poroso quando submetido a temperaturas


maiores que 150C. Atualmente os fluoropolmeros mais utilizados so o PFA
(perfluoroalcoxi),

com

temperatura

mxima

de

servio

de

260C,

FEP

(fluoroetilenopropileno) com temperatura mxima de servio de 200C e o TFM (PTFE


modificado pela Hoescht) com temperatura de trabalho de at 300 C. Alm disso, os
polmeros PFA, FEP e TFM so mais puros que o PTFE convencional e, assim, mais
recomendados nos procedimentos para a determinao de elementos-trao. Destes, o
TFM preferido para a decomposio de materiais sob altas temperaturas por sua
maior resistncia fsica e qumica e por apresentar menores brancos quando comparado
ao PFA. As contaminaes devidas s impurezas presentes em materiais tambm
ocorrem nos copinhos ou tubos de amostradores, ponteiras de micropipetas, entre outros
materiais. A Tabela 2.16. mostra os principais contaminantes presentes em frascos de
polietileno usados em anlise por ativao neutrnica instrumental.

Tabela 2.15. Contaminantes presentes em alguns polmeros (adaptado de Moody e


Lindstrom, 1977). Valores em g g-1
Elemento

LDPE

HDPE

PP

Al

0,5

30

55

Ca

PFA

FEP

PTFE

0,2

0,23

800

>5

> 0,6

Na

1,3

15

4,8

Sb

0,005

0,2

0,6

Ti

60

Mn

0,01

0,02

Zn

520

90
0,1

0,4

0,02

0,06

0,16

Tabela 2.16. Elementos presentes em frascos plsticos para irradiao de amostras


(adaptado de Heydorn e Damsgaard, 1982)
Elementos em ordem de concentrao

Massa total (g) em frascos de 1,1 g

Fe

1 - 10

Cl, Na, K, Al, Zn

0,1 1,0

Cu, Cd, Cr, Br, Mn

0,01 0,1

Sb, W, Co, As, Au

0,001 0,01

Se, V, La, Ag, Sc

< 0,001

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Erros sistemticos no preparo de amostras

31

Outros materiais
Especialmente durante a amostragem, deve-se evitar que a amostra entre em
contato com outros materiais que causam contaminao. A borracha, muitas vezes usada
como tampa em alguns frascos, pode contaminar as amostras por causa dos elevados
teores de As, Sb, Cr, Co, Zn e Sc. O nylon contem altos teores de Co e o PVC (cloreto de
polivinila) contem Zn, Fe, Sb, Cu em quantidades relativamente altas.
Ferramentas usadas para moer, peneirar, cortar, furar, macerar oferecem
altssimo risco de contaminao para muitos analitos.
A moagem, particularmente, deveria ser evitada sempre que possvel, mas a
homogeneizao poder ficar comprometida. Em muitos casos, as contaminaes
ocorrem durante a homogeneizao. Tradicionalmente, os materiais que oferecem menor
risco de contaminao durante a moagem so aqueles feitos de gata, monocristais de
xido de alumnio ou nitreto de boro. Os principais contaminantes presentes em materiais
usados para moagem so apresentados na Tabela 2.17 e 2.18.
Em geral, uma regra bastante simples que deve ser observada para evitar ou
minimizar a contaminao por componentes do sistema de moagem que estes
componentes sejam mais duros (mais resistentes) que a amostra. Por exemplo, se
carbeto de tungstnio for modo num moinho com componentes de ao, a contaminao
por Fe dever ser muito alta, pois o carbeto de tunstnio muito mais duro que o ao.
Neste ponto, cabe a observao (Nbrega, 2004) de que ao invs de moermos a
amostra, estaremos moendo o moinho. Por outro lado, se um moinho de carbeto de
tungstnio for utilizado para moer materiais relativamente frgeis, como Al2O3 ou dureza
similar, partculas de carbeto de tunstnio podero ser incorporadas na amostra moda.
Durante a moagem criognica, por exemplo, quando feita em tubo de
policarbonato por impacto de uma barra de ao contra extremidades fixas de ao, podese constatar a contaminao por Fe e Cr, particularmente na moagem de celulose de
alta pureza. Muitas vezes, no se percebe a contaminao, porque ela poder ser
desprezvel em comparao com o alto teor do analito na amostra.
O nvel de contaminao poder variar com as condies de moagem e
dependente do tipo de moinho, da intensidade da moagem, da durao da moagem, do
desgaste das peas, da natureza do p, da natureza dos materiais de moagem, da
atmosfera ambiente, entre outros fatores. Segundo Suryanarayana (2001), apesar de
muitos fabricantes preconizarem a qualidade de seus moinhos com relao a outros,
no existe ainda um trabalho sistemtico sob contaminao, comparando-se moagens
sob condies idnticas.

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Erros sistemticos no preparo de amostras

32

A contaminao por Cr, Fe, Ni, Co, Mn, Cu e outros elementos tambm poder
ser constatada durante o corte de tecidos biolgicos com escalpelos e durante a
amostragem de sangue por agulhas hipodrmicas. Neste aspecto, o uso de esptulas,
facas, pinas e agulhas feitas de plstico, titnio de alta pureza ou quartzo
recomendado.
No se deve perder de vista as perdas por volatilizao que podem ocorrer
durante a moagem. Neste particular, a moagem criognica a melhor estratgia.
Detalhes sobre este tipo de moagem so apresentados no captulo 3.2.
Cuidados adicionais tambm devem ser tomados para evitar mudanas nas
amostras causadas por microrganismos e/ou reaes fotoqumicas, que podem alterar as
ligaes dos analitos. Nestes casos, o uso de embalagens que impedem a entrada de
radiao UV-visvel e a refrigerao recomendvel.
Alm destas, precaues tambm devem ser tomadas com respeito aos
equipamentos e acessrios usados no preparo das sub-amostras nos laboratrios.
Suportes metlicos dos mais variados, como aqueles para buretas, placas aquecedoras
(frequentemente com sinais de oxidao), estufas, fornos tipo muflas, entre outros
materiais so fontes de contaminao.
Tabela 2.17. Composio aproximada de materiais usados em equipamentos de
moagem (adaptado de Market, 1995).
gata

Porcelana

Alumina

xido de

zircnio %

SiO2

99,91

61,0

16,5

0,1

Al2O3

0,02

34,0

83,0

Na2O

0,02

K2O

0,01

Fe2O3

0,01

MnO

0,01

CaO

0,01

1,5

MgO

0,01

1,5

3,0
0,03

ZrO
Outros xidos

97,0
2,0

0,5

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Erros sistemticos no preparo de amostras

33

Tabela 2.18. Composio aproximada de materiais usados em equipamentos de


moagem (adaptado de Market, 1995)

Fe

Carbeto de

Carbeto de

Titnio

Ao cromo

Ao

boro

tungstnio

carbono

0,1

Cr
C

21-23

Si

0,1

Mn
Co

0,1

84,0

0,08

12,0

0,08

1,65

0,15

0,3

0,25

0,3

0,40

99,1

6,0

Mo

0,3

0,3

2.4.

94,0

0,5

PERDAS POR VOLATILIZAO

As perdas de elementos por volatilizao ocorrem, principalmente, em altas


temperaturas (> 500C), mas observam-se perdas significativas de alguns elementos sob
temperatura ambiente. Os analitos podem ser perdidos na forma elementar, raramente
como xidos, e predominantemente como haletos. A Tabela 2.19 mostra exemplos de
diferentes formas como os elementos podem ser perdidos. A extenso das perdas
depende do tipo de amostra, e das variveis temperatura e tempo. No captulo 6.1,
especialmente dedicado decomposio por combusto, os riscos de perdas por
volatilizao de vrios analitos em diferentes amostras nos vrios mtodos so discutidos
em detalhes. De um modo geral, o mercrio voltil em grande parte de suas formas
qumicas, o mesmo ocorrendo com As, Sb, Sn, Ge, Se, porm, em menor proporo.
Alm disso, Cd, Pb, Zn so volteis como cloretos ou brometos a temperaturas elevadas

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Erros sistemticos no preparo de amostras

34

(i.e. > 700 C). Neste sentido, o conhecimento prvio da composio qumica das
amostras permite prever os riscos de perdas por volatilizao. Em alguns casos, por
exemplo, elementos presentes nas amostras atuam como modificadores de matriz,
impedindo perdas em temperaturas relativamente elevadas.
O Hg , reconhecidamente, o melhor exemplo de elemento extremamente voltil,
podendo ser perdido durante a amostragem, armazenamento e preparo da amostra,
quando solues aquosas so armazenadas em frascos abertos ou frascos feitos de
polmeros orgnicos. As perdas de Hg podem ocorrer em poucas horas e, alm disso, o
Hg atravessa rapidamente paredes de frascos plsticos de polietileno ou de polipropileno.
Assim, amostras para determinao de Hg no devem ser armazenadas em frascos
plsticos, para evitar as perdas por volatilizao e/ou evitar contaminao por Hg
presente na atmosfera ambiente.
Durante a dissoluo de metais e ligas metlicas com cidos no oxidantes, os
elementos S, P, As, Sb, Bi, Se ou Te podem ser separados e/ou perdidos na forma de
hidretos. Alm disso, hidretos tambm podem ser perdidos durante a amostragem de
ligas metlicas. O odor caracterstico de H2S e PH3 uma indicao da perda de P e S
por volatilizao, quando se utilizam ferramentas de corte ou furadeiras, por exemplo.
Tabela 2.19. Elementos e compostos que podem ser perdidos por volatilizao
Forma

Elementos

Elementar

As, Te, Sb, Se, Sn, Cd, Pb, Tl, Zn, Hg, S, P, Br, I,

xidos

As, S, Se, Te, Re, Ru, Os, Cd, Hg, Zn

Fluoretos

B, Si, Ge, Sn, P, As, Sb, Bi, S, Se, Ti, Zr, Hf, V, Nb, Ta, Mo, W,
Re, Ru, Os, Ir, Hg

Cloretos

Al, Ga, In, Tl, Ge, Sn, P, As, Sb, Bi, S, Se, Te, Ti, Zr, Hf, Ce, V,
Nb, Ta, Mo, W, Mn, Fe, Ru, Os, Au, Zn, Cd, Pb, Hg

Hidretos

Si, Ge, Sn, Pb, P, As, Sb, Bi, S, Se, Te

Haletos volteis de As3+, Sb3+, Sn4+, Ge4+, Se4+, Pb4+ tambm podem ser perdidos
durante a evaporao de solues cidas ou durante a combusto de materiais
orgnicos. Durante a calcinao de sedimentos para eliminar a matria orgnica, que
normalmente feita em temperaturas acima de 400 C, a perda destes elementos pode
ser significativa. A Tabela 20 mostra os pontos de ebulio de alguns haletos.
A determinao de elementos-trao requer, muitas vezes, uma etapa de prtratamento da amostra para concentrar o analito. Um dos mtodos mais simples baseia-

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Erros sistemticos no preparo de amostras

35

se na evaporao do solvente, que pode ser feita em frascos abertos com aquecimento
por conveco (placas aquecedoras, blocos de aquecimento, mantas), assistida por
microondas ou em sistemas de destilao controlada (roto-evaporadores). A temperatura
para a evaporao do solvente depende do sistema escolhido e do meio reacional que
pode levar formao de misturas azeotrpicas, podendo chegar a 150C.
A separao, por volatilizao, da matriz ou de elementos e compostos
indesejveis presentes na matriz que possam interferir na determinao do elemento de
interesse, tambm prtica utilizada em muitos procedimentos. comum evaporar um
cido at quase a secura, ou elimin-lo para evitar a formao de precipitados ou
complexos insolveis. Neste caso, a temperatura pode chegar a 220C.
Alternativamente, o analito pode ser separado da matriz por destilao e coletado
em uma soluo absorvedora ou em uma superfcie slida quimicamente modificada.
Neste caso, alm da separao do analito, promove-se a concentrao do mesmo.
Idealmente, este procedimento deve ser feito sem que ocorram perdas do analito durante
a separao/concentrao.
Certamente, os erros sistemticos causados pela volatilizao durante a
decomposio das amostras podem ser evitados com a utilizao de sistemas fechados
e uso de materiais apropriados. Decomposies em sistemas abertos com cidos podem
ser feitas sem riscos de perdas por volatilizao de vrios elementos, mas requerem
vrias precaues, entre as quais o rigoroso controle da temperatura. Decomposies
por fuso implicam em perdas de inmeros elementos por volatilizao (Tabela 21)

Tabela 2.20. Sais volteis de alguns elementos (adaptado de Lide, 2004 valores
arredondados)
Elemento
Chumbo

Sais volteis
PbCl4

Ponto de ebulio (C)


50

Arsnio

AsCl3

130

AsF3

58

SbF5

150

SbCl5

79

GeBr4

26

GeCl4

87

SeCl4

191 (sublima)

SeF4

106

Estanho

SnCl4

115

Vandio

VCl4

152

Crmio

CrF5

117

Antimnio
Germnio
Selnio

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Erros sistemticos no preparo de amostras

36

Tabela 2.21. Perdas por volatilizao durante a fuso de alguns materiais (adaptado de
A. C. Spnola Costa, 1996)
Fundente

Temperatura

Cadinho

Amostras

volteis

LiBO2
ou

900 - 950

Li2B4O7

Elementos

silicatos, solos, xidos,

Ag, As, Bi, Br,

Pt

carbonatos, sulfatos,

Cd, Cl, F, Ga,

Pt-Au

fosfatos , fluoretos

Hg, In, I, Os, Pb,

Grafite

Re, Ru, S, Sb,


Se, Te, Tl, Zn

KH2SO4
ou

420 - 700

Pt

K2S2O7

Bi, Cd, Hg, Pb,

Fe, Nb, Ta, Ti, Zr, xidos

S, Sb, Se, Tl, Zn

de lantandeos
Ni, Fe, Ag,

Na2O2

sulfetos, xidos de Be, Cr,

450 1000
(mx. 450C)

Zr, Pt
Carbono
vtreo

Concentrados de metais
preciosos,refratrios,
solos, silicatos, xidos de
Al,Ti, Fe, Mn, Cr, Sn, Zn,

Cd, Hg

Nb, Ta, ligas metlicas a


base de zinco, minrios

2.5.

ERROS DEVIDOS ADSORO E DESSORO

2.5.1. Aspectos gerais


Os teores de elementos-trao presentes em solues muito diludas podem mudar
rapidamente em funo da adsoro ou dessoro. Por meio destes processos, ons ou
compostos de elementos-trao podem ficar ligados superfcie interna dos frascos de
reao ou de armazenagem e, posteriormente, ser lixiviados com a mudana da
composio da soluo. As perdas de elementos por adsoro tornam-se apreciveis em
concentraes menores que 10-6 mol l-1 e so da ordem de 10-9 a 10-12 mol cm-2 (Tlg e
Tschpel, 1994). Em geral, a quantidade de elementos adsorvidos depende de um
grande nmero de fatores que dificilmente podem ser especificados conjuntamente.
difcil estimar as perdas ou ganhos de elementos-trao como resultado de processos de
adsoro ou dessoro, mas os fatores mais importantes so:

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Erros sistemticos no preparo de amostras

37

o analito, sua concentrao e seu estado de oxidao;


os elementos e os compostos orgnicos e inorgnicos concomitantes na soluo
do analito (especialmente os componentes que ocorrem em altas concentraes,
mas

tambm,

elementos

menores

traos),

as

concentraes

destes

concomitantes, o estado de oxidao dos concomitantes e o pH do meio;


a durao do contato e a temperatura.
Perdas significativas de elementos podero ocorrer, como resultado da adsoro,
especialmente quando a soluo da amostra entrar em contato com uma grande rea
superficial. Este o caso que ocorre durante filtraes, emprego de colunas de trocainica, e mudanas de recipientes. De acordo com Tlg e Tschpel (1994), as seguintes
precaues devem ser tomadas para minimizar as perdas de elementos por adsoro:
a) Usar frascos de quartzo, PTFE ou carbono vtreo. O vidro no um material
adequado na anlise de traos porque responsvel pelas maiores perdas por
adsoro:
VidroSiOH + M+

VidroSiOM + H+

b) A superfcie e o volume do frasco, assim como o volume da soluo da amostra


devem ser os menores possveis;
c) A durao do contato entre a soluo da amostra e a superfcie do frasco deve
ser a menor possvel;
d) As solues das amostras devem ser acidificadas, se possvel, porque as perdas
so muito menores quando comparadas com solues neutras ou alcalinas;
e) A limpeza e pr-condicionamento dos frascos utilizados devem ser feitos,
idealmente, com vapores cidos. Este procedimento reduz consideravelmente os
brancos, assim como as perdas por adsoro.
Elementos-trao tambm podem ser perdidos por cimentao eletroqumica, durante
a amostragem e preparo da amostra (Tlg e Tschpel, 1994). Este processo ocorre
quando elementos-trao dissolvidos em um eletrlito entram em contato com a superfcie
de um metal mais eletronegativo que o elemento-trao. Neste caso, o elemento trao
(p.ex. Pt, Pd, Au, Hg, Cu) precipitado sobre a superfcie metlica, da qual ser
removido com dificuldade. Perdas de elementos por cimentao podem ocorrer durante a
amostragem, moagem, corte, homogeneizao etc, particularmente quando amostras
aquosas e tecidos ou fluidos biolgicos, como peixes, carnes, sangue, frutas, entram em
contato com ferramentas metlicas. Segundo os autores, a cimentao pode ser evitada
ou reduzida congelando-se a amostra em nitrognio lquido e manipulando-a enquanto
estiver congelada.

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Erros sistemticos no preparo de amostras

38
2.5.2. Limpeza e descontaminao de materiais

A descontaminao de materiais um pr-requisito indispensvel para evitar


erros devidos dessoro de contaminantes e/ou adsoro dos analitos. Existem vrios
mtodos de descontaminao na literatura, mas aqui sero apresentados somente os
mais clssicos:
Mtodo 1. Descontaminao de frascos LDPE, PP, PTFE, FEP, PFA (recomendado por
Moody e Lindstron, 1977).
Este procedimento um dos mais clssicos da literatura. Segundo os autores o HCl
o melhor cido para a descontaminao, mas, como a eficincia da limpeza varia com o
elemento e com o material, recomenda-se que a descontaminao adicional seja feita
com HNO3. Os autores tambm chamaram a ateno de que no necessrio o uso de
cidos de alta pureza:
a) Encher o recipiente com soluo aquosa 1 + 1 (v/v) HCl p.a..
b) Deixar em repouso por uma semana em temperatura ambiente. Para PTFE a
soluo cida dever ser aquecida a 80C.
c) Esvasiar o recipiente e lavar com gua desionizada ou destilada.
d) Encher o recipiente com soluo aquosa 1 + 1 (v/v) HNO3 p.a.
e) Deixar em repouso por uma semana em temperatura ambiente. Para PTFE a
soluo cida dever ser aquecida a 80C.
f)

Esvasiar o recipiente e lavar com gua desionizada ou destilada

g) Encher com gua da mais alta pureza (gua Tipo I)


h) Deixar em repouso por vrias semanas. Trocar a gua periodicamente para
garantir a limpeza.
i)

Lavar com gua Tipo I e secar capela de fluxo laminar em ambiente ISO Classe 5.

Mtodo 2. Procedimento para limpeza de frascos de polietileno (LDPE) para coleta e


armazenamento de guas de alta pureza (adaptado Barbante et al, 1997).
a) Lavar com gua de torneira para remover material particulado;
b) Remover gordura com clorofrmio e lavar com gua de alta pureza Tipo I;
c) Deixar em imerso no primeiro banho cido contendo 1 + 3 v/v HNO3/gua ultrapura a 50C durante 2 semanas.
d) Lavar com gua Tipo I e transferir para segundo banho cido contendo 1:1000
(v/v) HNO3/gua ultra-pura a 50C, durante 2 semanas.

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Erros sistemticos no preparo de amostras

e)

39

Finalmente, lavar vrias vezes com gua Tipo I, encher os frascos com HNO3 de
alta pureza e guard-los em bolsas de polietileno de duas camadas
descontaminadas em banho cido.

Mtodo 3. Descontaminao com vapor cido


Considerado o mtodo mais rpido e mais efetivo na descontaminao de
recipientes plsticos ou de quartzo, este mtodo se baseia na limpeza com vapores de
cidos ntrico ou clordrico. O mtodo pode ser implementado nos laboratrios, utilizandose um sistema fechado, de tal forma que os vapores do cido se condensem,
principalmente, nas paredes internas dos recipientes, lavando-os continuamente.
A Figura 2.7 mostra um aparelho desenvolvido para limpeza/descontaminao de
materiais (quartzo, PTFE, FEP, TFM) como bales volumtricos, frascos para
armazenamento de solues, tubos de digesto, copos, entre outros visando
determinao de ultra-traos. Em geral, os materiais so limpos com vapor de HNO3
durante a noite, sendo posteriormente lavados com gua de alta pureza (Tipo I), secos e
armazenados em ambiente Classe 100.

Copo invertido

Figura 2.7. Aparelho para limpeza e purificao de frascos com vapor cido (adaptado de
Tschpel et al, 1980)

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Erros sistemticos no preparo de amostras

40

Segundo Tlg e Tschpel (1993) a lavagem contnua durante 4-6 h com vapor de
HNO3 e subseqente lavagem com vapor de gua durante 1-2 h so suficientes para
efetiva descontaminao de vrios elementos presentes em diferentes materiais, com
exceo de Fe em PTFE.
A limpeza com vapor de HNO3 tem sido muito recomendada para a
descontaminao de frascos de TFM e outros materiais de alta pureza utilizados na
decomposio de amostras em fornos de microondas. Existem sistemas alternativos no
mercado (Richter, 2003) em que o volume interno til permite que se descontamine um
grande nmero de frascos, que podem ser mantidos no interior do aparelho at sua
utilizao. Outros argumentos a favor deste mtodo de limpeza, comparativamente aos
mtodos que se baseiam na lixiviao dos contaminantes (frascos cheios com cidos de
alta pureza), que, alm de ser mais rpido, utiliza-se vapor de alta pureza a partir de
HNO3 p.a. Segundo Tlg e Tschpel (1994), Alm disso, aps este processo de limpeza
as perdas por adsoro so consideravelmente diminudas. Copinhos de amostradores
automticos (2-3 ml) podem ser eficientemente descontaminados em frascos de reao
utilizados em sistemas de decomposio assistidos por microondas utilizando o mesmo
mtodo (Barnes et al, 1998). A Figura 2.8 mostra um esquema que permite
descontaminar at 6 copinhos em cada frasco, dependendo do volume do frasco de
reao e dos copinhos

Copinhos

Suporte de TFM

HNO3

Figura 2.8. Descontaminao de copinhos de amostradores com vapor cido em sistema


fechado assistido por radiao microondas (adaptado de Barnes et al, 1998)

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Erros sistemticos no preparo de amostras

2.6.

ERROS

DEVIDOS

41

DECOMPOSIO

OU

DISSOLUO

INCOMPLETA DAS AMOSTRAS


2.6.1. Erros devidos decomposio
Quando se decompe uma amostra, possvel a obteno de solues
verdadeiras (observa-se por inspeo visual somente uma fase), que podem ser ou no
compatveis com os mtodos de determinao escolhidos. Em alguns casos, o analito
pode estar na forma de um complexo solvel que no interage com um reagente
colorimtrico, ou que interfere na sua determinao. Em outros, se o teor de carbono
residual for alto, interferncias nos mtodos de determinao podero prejudicar a
exatido dos resultados analticos. As interferncias podem ser previstas, e devidamente
evitadas, dependendo da amostra orgnica e do mtodo de decomposio escolhido.
As matrizes orgnicas ou seus produtos, quando reagem com cido ntrico sob
alta presso (> 25 bar), por exemplo, so dissolvidas completamente para uma grande
variedade de amostras. As substncias que contm protenas e gorduras, entretanto,
produzem resduos orgnicos (Wrfels et al, 1987, 1988), os quais no so atacados pelo
cido ntrico se a temperatura for de apenas 180 C. Carboidratos puros (acar,
celulose, etc) so completamente mineralizados pelo cido ntrico a 180 C, e, nestes
casos, baixas concentraes de metais que permanecem nas cinzas podem ser
determinadas sem problemas por voltametria de redissoluo andica, por exemplo, ou
por outras tcnicas analticas.
As solues livres de carbono so tambm obtidas quando gorduras que no
contm cidos graxos insaturados so decompostas. Se, entretanto, as gorduras a serem
determinadas possuirem cido linolico ou cido linolnico-steres, o cido 1,2ciclopropanodicarboxlico formado pela reao com cido ntrico, sendo estvel neste
cido e permanecendo como resduo ou carbono residual.
A decomposio de substncias contendo protenas (e de todas as substncias
contendo aminocidos) produz cidos benzicos nitrificados, fomados a partir da
fenilalanina pela digesto com cido ntrico, os quais so eletroquimicamente ativos.
Como outros produtos da decomposio de aminocidos permanecem nos digeridos,
alm dos cidos nitrobenzicos, interferncias so igualmente esperadas, semelhana
do

que

ocorre

na

decomposio

de

amostras

contendo

cidos

linolico

linolnico.(Wrfels et al, 1987, 1988)


importante lembrar que, mesmo aumentando-se o tempo de reao e o volume
de cido ntrico, no ocorrer a mineralizao desses resduos orgnicos se a

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Erros sistemticos no preparo de amostras

42

decomposio for feita a 180-200C. Entretanto, Wrfels et al (1987, 1988) observaram


que, quando as decomposies eram feitas com HNO3 a 300 C, os teores de carbono
residual diminuiam consideravelmente e deixavam de interferir em medidas por tcnicas
eletroanalticas. Sinais de onda quadrada para Zn, Cd, Pb e Cu obtidos por voltametria de
redissoluo andica, empregando-se uma amostra de alga digerida (NIES - Material
certificado de referncia de Sargassum fulvellum Nr. 9) e uma amostra de mexilho
(NIES - Material certificado de referncia de Mytilus edulis Nr. 6), indicaram que no
permaneciam resduos orgnicos indesejveis na soluo resultante (Figura 2.9). De fato,
quando as digestes eram feitas a 180C os teores de carbono residual variavam entre 2
e 4 %; aps a digesto a 300 C, o teor de carbono residual foi menor que 0,2%. Antes
das determinaes, as solues foram evaporadas at a secagem para remover o NO2
dissolvido, o qual interferia nas determinaes por voltametria inversa (Wrfels et al,
1987, 1988).

Corrente lquida (A)

HNO3 180 oC

2,0

2,0

1,0

1,0

2,0

Cd

Pb

1,0

Cu

Zn
0,0

0,0

0,0

Corrente lquida (A)

HNO3 300 oC

4,0

2,0

Zn

2,0

4,0

1,0

2,0

Cd
0,0

Cu

Pb

0,0

0,0

tempo

Figura 2.9. Sinais de zinco, cdmio, chumbo e cobre obtidos por voltametria de
redissoluo andica em amostras digeridas com HNO3 em sistema fechado a 180 e 300
C (adaptado de Wrfels et al., 1988)

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Erros sistemticos no preparo de amostras

43

Normalmente, os compostos orgnicos no digeridos no afetam as tcnicas de


espectrometria atmica, mesmo quando os teores de carbono residual forem
relativamente elevados (10-30%). Entretanto, o carbono residual elevado pode contribuir
para aumentar a absoro de fundo em espectrometria de absoro atmica com forno
de grafite, quando a etapa de pirlise do forno de grafite no completar a decomposio.
Uma outra fonte de erro, que pode afetar todos os mtodos espectromtricos que
empregam nebulizao de amostras, a interferncia causada por substncias orgnicas
com mudanas na viscosidade e na tenso superficial da soluo a ser analisada.
Diferenas apreciveis na nebulizao de solues de referncia e das amostras so
fontes de erros sistemticos. Mais importante, entretanto, so as interferncias isobricas
causadas por ons moleculares contendo carbono em ICP-MS (espectrometria de massa
com plasma acoplado indutivamente). Estas interferncias so facilmente constatadas
em espectrmetros de mdia resoluo sem dispositivos ou acessrios para minimiz-las
(Tabela 22).
De qualquer forma, para se oxidar completamente amostras biolgicas,
independentemente de sua composio qumica, recomenda-se a decomposio com
cido ntrico a 300C (Wrfels, 1988). Nesta temperatura com 2 h de decomposio, as
solues resultantes praticamente no contm carbono, ou acima de 99,9% do contedo
original em carbono da amostra so oxidados. Considerando-se que a vida til dos
frascos de polmeros diminui consideravelmente nesta temperatura, recomenda-se a
utilizao de frascos de quartzo.

Tabela 22. Interferncias espectrais que podem ser causadas pela presena de
carbono residual (compilado de Tan e Horlick, 1986 por J.A. Nbrega)
Massa

on interferente

Analito
(% abundncia)

24

12

C12C+

24

Mg (78,6)

26

12

26

Mg (11,3)

28

12

48

12

52

12

53

13

C14N+

28

C16O+

C36Ar+
C40Ar+
C40Ar+

Si (92,2)

48

Ca (0,18) e 48Ti (73,5)


52

Cr (83,8)

53

Cr (9,6)

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Erros sistemticos no preparo de amostras

44

oportuno observar, que erros tambm so esperados, se o teor de cido


residual for muito varivel nas solues das amostras obtidas por diferentes mtodos de
decomposio por via mida. As situaes mais crticas so observadas em ICP-MS,
dependendo do cido e sua concentrao na soluo da amostra. Dos cidos
mencionados na Tabela 23, observa-se que interferncias causadas pelo cido ntrico
no so crticas, formando-se somente o on ArN+, que ir interferir nos istopos de
massa 54 dos ons Fe+ e Cr+. Neste caso, elegem-se outros istopos de Fe e Cr, mais
abundantes e que no so interferidos. Teores residuais de cidos perclrico ou clordrico
podem comprometer totalmente as determinaes de vandio e de arsnio.

Tabela 23. Interferncias isobricas em diferentes meios cidos (compilado de Tan e


Horlick, 1986 por J.A. Nbrega)
cido

Ions*

m/q

HNO3

N+

14

ArN+

54

Analito(%)

54

Fe+ (5,8)

54

Cr+ (2,3)

HCl, HClO4

Cl+
ClO

35 e 37
+

ArCl+

H2SO4

51

51

53

53

Cr+ (9,6)

75

75

77

77

S+

32, 33 e 34

SO+

48

SO2+

V+ (99,7)

As+ (100)
Se+ (7,6)
-----

48

Ti+ (74,0)

49

49

50

50

64

Ti+ (5,5)
Ti+ (5,2)

64

Zn+ (48,9)

64

Ni+ (1,2)

65

65

Cu+ (30,9)

66

66

Zn+ (27,8)

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Erros sistemticos no preparo de amostras

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2.6.2. Dissoluo incompleta do analito


Um dos erros mais srios durante a dissoluo de algumas amostras aquele
que ocorre com amostras inorgnicas polifsicas, particularmente aquelas com
composio qumica desconhecida, quando uma ou mais fases individuais resiste aos
agentes escolhidos para a decomposio. No caso de slidos inorgnicos, a resistncia
dissoluo do slido depende do tipo de solvente utilizado, mas algumas substncias no
so dissolvidas mesmo em sistemas fechados com cidos concentrados sob altas
presses e temperaturas, como nitreto de boro, carbeto de silcio, topzio, entre outros.
Um aumento na solubilidade dos materiais est, geralmente, ligada mudanas na
estrutura cristalina da substncia a ser analisada, alm de sua rea superficial e
porosidade (Sulcek e Povondra, 1989). Neste sentido, imprescindvel que se conheam
previamente os mtodos de decomposio a serem empregados e suas limitaes. Em
alguns casos, a dissoluo completa, mas as perdas por volatilizao so
considerveis, como as que ocorrem nas decomposies por fuso.

2.7.

OUTROS ERROS

2.7.1. Perdas de analitos por interaes com frascos de reao


Outra fonte de erro que componentes da amostra podem reagir com os
materiais empregados em alguns mtodos de decomposio, particularmente as quando
decomposies so feitas em cadinhos. A dimenso das perdas depende da
temperatura, do material do cadinho e da composio da amostra. Se o cadinho for de
porcelana ou slica, por exemplo, o elemento pode reagir e ficar aderido nas paredes do
cadinho, sendo perdido neste tipo de pr-tratamento. Silicatos, fosfatos e xidos
combinam-se facilmente com o esmalte dos cadinhos de porcelana, e por esta razo
prefervel trabalhar com cadinhos de platina. Por outro lado, cadinhos de platina podem
formar ligas com metais nobres.

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2.7.2. Perdas de analitos e contaminao durante lavagem de amostras


Aplica-se, particularmente, lavagem de vegetais, como folhas, razes e frutos,
para remover contaminantes. As lavagens devem ser feitas conforme recomendado no
captulo 3, mas deve-se tomar o cuidado com possveis perdas por lixiviao e
contaminaes. Neste sentido, recomenda-se ler o artigo de Markert (1995) que faz uma
boa reviso sobre este tema. Quando a lavagem imprescindvel, as perdas por
lixiviao podem ser minimizadas, quanto mais rpida for a lavagem. Em geral, a
lavagem ultra-snica no recomendvel por potencializar as perdas por lixiviao (vide
captulo 3.3). Para evitar a contaminao durante a lavagem, deve-se usar gua de alta
pureza Tipo I.

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3. TRATAMENTOS PRELIMINARES

3.1.

ASPECTOS GERAIS
Em geral, a maioria das amostras requer etapas de pr-tratamento

preliminares. Estas etapas preliminares so procedimentos aplicados s amostras a partir


do estado em que so coletadas e, em alguns casos, antes de serem entregues ao
laboratrio

analtico.

maioria

destas

operaes

envolve

procedimentos

predominantemente fsicos, como lavagem, secagem, moagem, peneiramento, refrigerao,


agitao mecnica, ou simples polimento, dependo do tipo de amostra.
Lavagem
Em geral a lavagem restrita a alguns tipos de materiais, particularmente,
partes de vegetais como razes, folhas e frutos.
Amostras

de

vegetais

destinadas

determinaes

de

macro

micronutrientes podem necessitar descontaminao, devido poeira ou resduos de


pulverizao no local da coleta, dependendo dos elementos a serem determinados e das
possibilidades de contaminao. Caso necessrio, as amostras devem ser lavadas com
soluo detergente neutra (entre 0,1 e 0,3% v/v) e em seguida com gua desionizada. Este
procedimento deve ser rpido, para se evitar perda de nutrientes durante a lavagem. Se as
amostras estiverem secas ou murchas, aconselhvel no lavar com gua (Nogueira et al.,
1998). Ateno deve ser observada para o risco de perdas de elementos por lixiviao,
recomendando-se a leitura de artigo de Markert (1995).
Secagem
A operao de secagem at massa constante comum para amostras
slidas que apresentem gua em quantidade varivel e em forma no determinada. Em
muitos casos (solos, rochas, minrios, sedimentos) a secagem poder ser feita a 105 C,
desde que no haja riscos de perdas de elementos por volatilizao e, excepcionalmente,
degradao (decomposio) trmica da amostra. Materiais biolgicos so, em geral, secos
em estufa com circulao forada de ar a 60 65 C. Alguns minerais, como vrios
aluminatos e silicatos, podem necessitar de temperaturas maiores que 1000 C.
Alternativamente, a secagem pode ser feita em dessecador, ou por liofilizao, processo no

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Tratamentos preliminares

50

qual a amostra congelada entre -80 e -60 C, e depois seca sob vcuo em temperaturas
entre -20 e + 40 C.
No caso particular de vegetais, a secagem feita em sacos de papel ou de
algodo limpos, em estufa com circulao de ar a 65C, por um perodo de 48 h ou at peso
constante. Para o caso de silagem, a pr-secagem deve ser feita a 45C por 72 h. A carga
de cada estufa deve estabelecida de tal modo que a circulao interna de ar no seja
prejudicada. Amostras de fezes que sero analisadas aps secagem e moagem devem ser
colocadas em bandejas limpas e secadas a 65C durante 48 h ou at peso constante.
Amostras que sero analisadas frescas devem ser colocadas em sacos plsticos, sendo
ento retirado o ar e congeladas at a sua manipulao. Em alguns casos, a pr-secagem
necessria quando a amostra possui alto teor de umidade. Aps secagem, a bandeja ou o
saco de papel retirado da estufa e posto sob condies ambientais do laboratrio por pelo
menos 1 h. Esse tempo necessrio para que a umidade da amostra entre em equilbrio
com a umidade do ambiente e atinja peso constante e para evitar erros de pesagem
(movimentao de ar ascendente sobre a balana). No caso de gros, o seguinte
procedimento para controle de qualidade da matria prima adotado nas indstrias: prsecagem a 45C por 24 h; em seguida, o gro triturado ou quebrado e colocado em estufa
por 1 h a 130C para determinao da matria seca. Recomenda-se consultar monografia
especializada editada por Nogueira e Souza, 2005.
importante recordar que, dependendo dos elementos a serem
determinados, a secagem dever ser feita em ambientes limpos (ISO Classe 5, Classe 6 ou
Classe 7), conforme comentado no Captulo 2.

Moagem
A moagem necessria, porque amostras finamente modas so mais
homogneas, podendo ser subdivididas, mantendo a representatividade se cuidadosamente
misturadas. A homogeneidade pode ser avaliada estatisticamente e feita elemento por
elemento numa determinada massa de amostra. A relao entre homogeneidade e massa
da amostra abordada no item 4.1, assim como outros mtodos de moagem, por tratar da
anlise direta de slidos na forma de material finamente modo.
Por outro lado, a diminuio no tamanho das partculas aumenta a relao
entre rea superficial e o volume da soluo, facilitando processos de dissoluo,
decomposio e de extrao.

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Tratamentos preliminares

51

Existem diferentes tipos de moinho que diferem na capacidade (massa de


amostra), rendimento operacional (amostras modas por unidade de tempo), temperatura, e
contaminao. A escolha do moinho de muitos fatores, como o tamanho desejado das
partculas (distribuio do tamanho das partculas), como o tipo e quantidade de amostra
disponvel, capacidade do moinho (que massas podem ser modas), da velocidade de
moagem, da constituio final do produto modo e do elemento a ser determinado.
A moagem das amostras ocorre basicamente pelo choque entre a amostra e
o material que compe o moinho, sendo por isso, uma grande fonte de contaminao
[KURFRST, 1998]. Desse modo, a moagem pode ser considerada como uma das etapas
mais crticas da seqncia analtica, principalmente quando os analitos se encontrarem em
baixas concentraes, conforme mencionado no captulo 2. Para excluir a possibilidade de
abraso ou reduz-la ao mnimo, a dureza ou resistncia abrasiva do material que compe o
moinho deve ser superior da amostra. Na Tabela 1 est apresentada uma escala,
proposta por Mohs, que determina a dureza do material.

Tabela 1 Escala de Mohs


Dureza

Mineral

Talco

Gesso

Calcita

Fluorita

Apatita

Feldspato

Quartzo

Topzio

Corindon (rubi, safira, esmeralda oriental)

10

Diamante

Nota: Esta escala foi criada pelo austraco da cidade de Graz, Friedrich Mohs. O valor de
dureza 1 foi dado ao material menos duro que o talco, e o valor 10 dado ao diamante que
a substncia mais dura existente na natureza. Esta escala no corresponde dureza
aboluta de um material. O diamante, por exemplo, tem dureza absoluta 1500 vezes superior
ao talco.

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Tratamentos preliminares

52

De um modo geral, a moagem pode ser classificada como moagem grosseira


e moagem fina que resulta em partculas de aproximadamente 5 mm e 63 m,
respectivamente, e a moagem extra-fina com partculas < 63 m [MARKERT, 1995]. Com
relao caracterizao do tamanho das partculas, pode-se usar a seguinte classificao:
gigante (> 300 mm), macro (30-300 mm), grande (10-30 mm), mdio (1-3 mm), pequeno
(0,1-3 mm), fino (0.1-0.3 mm), denso (0,03-0,1 mm), microcristalino (1-30 m),
criptocristalino (0,1-1 m), cristalino raio-X (< 0,1 m).
A moagem das amostras pode ser promovida de diversas maneiras, como o
esmagamento entre duas superfcies, frico contra uma superfcie, alterao e fragilizao
da estrutura. O tipo de moagem a ser empregado e o equipamento que ser utilizado
depende, alm do tipo de amostra, do objetivo do analista.
A moagem grosseira (partculas com ca. 5 mm) comumente empregada
como uma pr-moagem para a maioria das amostras. Dentre os moinhos para essa
finalidade, destacam-se o liquidificador, os processadores e o moinho de facas. No caso da
moagem fina pode-se empregar o moinho de disco e o almofariz, enquanto que para a
moagem extra-fina pode-se utilizar o moinho de bolas, o moinho vibracional, o moinho de
jato de ar e o moinho criognico.
A moagem em moinhos mecnicos, como o liquidificador e o processador, o
almofariz e pistilo, os moinhos de facas, disco e bolas, ocorre devido ao atrito entre o
moinho e a amostra, deve ser evitado se houver risco de perdas de elemenos volteis ou de
degradao de componentes da amostra, uma vez que estes tipos de moagem promovem
aquecimento do sistema.
O grande diferencial do moinho de jato de ar que a moagem promovida
pelo choque entre as partculas da prpria amostra, diferentemente de outros moinhos, nos
quais a moagem ocorre pelo choque entre amostra e moinho. Como resultado observa-se
uma diminuio da contaminao. Fajgelj e Zeisler (1998) observaram que esse moinho o
mais apropriado para moer amostras biolgicas e ambientais. Eles chegaram a essa
concluso depois de avaliarem a distribuio do tamanho de partculas de diversos materiais
certificados pela IAEA (International Atomic Energy Agency, Viena- ustria) e NIST. Os
materiais modos com esse tipo de moinho foram os que apresentaram as menores
distribuies de partculas, sendo os mais adequados para microanlises.
Em artigo de reviso sobre sntese de ligas por processos de moagem,
Suryanarayana (2001) apresentou os tipos de moinho mais freqentemente usados e as
principais variveis experimentais que afetam a moagem, tais como configurao do moinho
e recipiente de moagem, velocidade e tempo de moagem, massa de amostra, atmosfera e
temperatura de moagem. A discusso envolve a sntese de ligas metlicas na rea de

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Tratamentos preliminares

53

engenharia de materiais, porm muitos aspectos abordados so gerais e vlidos para


aplicaes analticas.
Neste captulo, ser feita uma abordagem mais dealhada somente a moagem
criognica, por se tratar de um mtodo de cominuio moderno, de custo razoavelmente
acessvel,

com

aplicao

para

diferentes

materiais,

mas

pouco

conhecido,

e,

conseqentemente, pouco utilizado nos laboratrios.

Separao de componentes de amostras slidas.


A maior parte deste texto dedicada aos mtodos de pr-tratamento que
transformam amostras slidas em solues verdadeiras. Entretanto, existem situaes em
que no necessrio dissolver ou decompor a amostra completamente. Em alguns casos,
possvel dissolver quantitativamente alguns analitos de interesse, ou extrair somente um ou
alguns componentes de interesse, deixando o resto da amostra (frao insolvel) no estado
slido, como ser abordado no Captulo 3.2, dedicado s extraes assistidas por ultra-som.
Outros exemplos so apresentados a seguir:

Extrao de espcies inorgnicas de amostras slidas inorgnicas.


Em geral tem larga aplicao em anlises de solos para fins de fertilidade. As
amostras podem ser tratadas com soluo de cido diluido (0,05 mol l-1 HNO3) ou de
mistura de cidos diludos (Mehlich 1- 0,0125 mol l-1H2SO4 + 0,025 mol l-1HCl ),
soluo-tampo (1,0 mol l-1 acetato de amnio, pH 7), soluo de um agente
complexante (0,005 mol l-1 DTPA + CaCl2 + 0,1 mol l-1 Trietanolamina em pH 7,3),
soluo 1,0 mol l-1 KCl, dependendo da espcie qumica ou grupo de elementos a
serem extrados. Este tpico muito especializado e recomenda-se o livro editado
por B. van Raij, J. C. de Andrade, H. Cantarella, J.A. Quaggio, Anlise qumica para
avaliao da fertilidade de solos tropicais, Campinas, Instituto Agronmico, 285p.,
2001.

Lixiviao de compostos de elementos metlicos solveis presentes em slidos


inorgnicos. muito recomendada para ensaios de lixiviao em resduos slidos.
Utiliza-se gua ou soluo de cido diluido. A ABNT (Associao Brasileira de
Normas Tcnicas) possui normas especficas (NBR 10004, 10005 e 10006) para
ensaios de lixiviao e solubilizao. A ABNT-NBR 10005, por exemplo, refere-se a
ensaio de lixiviao com soluo de 0,5 mol l-1 acido actico. O ensaio de
solubilizao descrito na ABNT-NBR10006 feito com H2O.

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Tratamentos preliminares

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Extrao com solventes de compostos orgnicos de amostras slidas. Muito utilizada


em separaes de compostos poliaromticos em amostras de solos e sedimentos.
Recomenda-se consultar literatura especializada editada por SOMENATH MITRA,
Sample Preparation Techniques in Analytical Chemistry, Hoboken, WileyInterscience, 458 p, 2003.

Vaporizao, sublimao, destilao. Em alguns casos, possvel separar o analito


de uma fase slida, aquecendo-se a amostra e analisando-se diretamente a espcie
voltil ou coletando-se a fase voltil em um suporte slido ou em uma fase lquida.

Filtrao.
Muitas tcnicas analticas requerem a necessria separao de partculas em
suspenso como tratamento preliminar. Em anlise de guas, por exemplo, recomenda-se
uma filtrao atravs de filtro de membrana de acetato ou de nitrato de celulose com
porosidade de 0,45 m ou de 0,20 m. A frao que passa pelo filtro denominada solvel.
A utilizao de um pr-filtro de fibra de vidro com porosidade de 1 a 5 m recomendada
em amostras com elevado teor de slidos em suspenso. O resduo que permanece no filtro
pode ser lixiviado ou decomposto, e subsequentemente analisado. importante lembrar que
materiais em suspenso podem entupir irreversivelmente nebulizadores pneumticos
utilizados em espectrometria de emisso atmica com plasma, e interferir em medidas feitas
por espectrometria de absoro molecular e turbidimetria, por exemplo, o que pode ser
evitado com filtrao apropriada.

Referncias bibliogrficas
FAJGELJ, A.; ZEISLER, R. Particle size determination of some IAEA and NIST
environmental and biological reference materials, Fresenius J. Anal. Chem., v.360, p.442445, 1998.
KOGLIN, D.; BACKHAUS, F.; SCHLADOT, J. D. Particle size distribution in ground biological
samples, Chemosphere, v.34, p.2041-2047, 1997.
KURFRST, U. Solid sample analysis, Springer-Verlag, Berlin-Heidelberg, Germany, 1998
MARKERK, B. Sample preparation (cleaning, drying, homogenization) for trace element
analysis in plant matrices, Sc. Tot. Environm. v.176, p.45-61, 1995.
NOGUEIRA, A. R. ; SOUZA, G.B. (ed.). Manual de Laboratrios: Solo, gua, Nutrio
Vegetal, Nutrio Animal e Alimentos. So Carlos: EMBRAPA- CPPSE, 294p., 2005.
SURYANARAYANA, C. Mechanical alloying and milling. Progress in Materials Science,
v.46, p.1-184, 2001.

Francisco Jos Krug, fjkrug@cena.usp.br. VI Workshop sobre Preparo de Amostras, Santa Maria, 2006.

Moagem criognica

3.2.

55

MOAGEM CRIOGNICA PARA O PREPARO DE AMOSTRAS EM


TCNICAS ANALTICAS

Drio Santos Jnior


Andra Cristina Tomazelli
Francisco Jos Krug
Joaquim A. Nbrega

Na determinao de metais em baixas concentraes a maioria das tcnicas


analticas utilizadas requer que a amostra esteja na forma de uma soluo 1. Entre as
vantagens da dissoluo da amostra esto a facilidade do uso de solues aquosas para
calibrao, facilidade para diluies e possibilidade de separaes de constituintes com ou
sem pr-concentrao. Alternativamente, algumas tcnicas, como a espectrometria de
absoro atmica com atomizao eletrotrmica em forno de grafite (GFAAS) ou com
chama (FAAS), a espectrometria de emisso tica com plasma induzido (ICP-OES) e a
espectrometria de massas com plasma induzido (ICP-MS) permitem a determinao de
metais por meio da anlise direta de slidos e/ou da amostragem de suspenses. Os
benefcios da anlise de slidos incluem: diminuio do tempo de preparo das amostras,
menor possibilidade de contaminao, menor possibilidade de perda do analito devido
reteno por resduos insolveis ou volatilizao prematura, menor uso de reagentes, menor
produo de resduos e diminuio dos custos analticos.
Neste contexto, exceto nos casos de equipamentos com amostradores de
ablao por laser, a introduo da amostra na forma slida ainda requer um mnimo
tratamento. Na amostragem direta de slidos em atomizadores ou vaporizadores
eletrotrmicos, assim como na amostragem de suspenses, esse tratamento pode consistir
apenas em uma etapa de moagem. Contudo, devido pequena massa de amostra utilizada
nesses mtodos, geralmente entre 10 e 500 g, fundamental que o material modo
apresente distribuio homognea de tamanho de partculas. Essa condio pode ser
crtica, principalmente, na anlise de suspenses em ICP-OES 2, na qual o tamanho de
partculas requerido , freqentemente, menor que 10 m. Por outro lado, a anlise de
suspenses usando-se atomizadores ou vaporizadores eletrotrmicos mais tolerante ao
tamanho de partculas. Nesse caso, usualmente recomendam-se partculas menores que
100 m

3-7

, mas o uso de partculas de at 500 m, em algumas situaes, pode ser

aceitvel 8-9.
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Moagem criognica

56

Infelizmente, a maioria dos moinhos convencionais no produz, em poucos


minutos, distribuies homogneas de partculas menores que 100 m, principalmente para
amostras de alta dureza ou com altos teores de fibras e gorduras 10.
Visando diminuir os problemas associados homogeneizao e ao tamanho das
partculas, Iyengar e Kasperek

11

desenvolveram a tcnica de moagem criognica para

homogeneizao de amostras biolgicas. O princpio da tcnica consiste em promover o


congelamento da amostra para aumentar a dureza dos materiais provocando falhas na
estrutura. Dessa forma, o material se torna quebradio, sendo necessria uma menor
energia para sua cominuio. No procedimento investigado, a amostra foi colocada em um
moinho de bolas, no qual o recipiente da amostra era constitudo de PTFE e as bolas
constitudas de metal e revestidas com PTFE. O recipiente da amostra foi resfriado em
nitrognio lquido (N2) por alguns minutos e agitado por 1 min a 3000 ciclos por minuto. O
procedimento foi aplicado para moagem de fgado bovino visando determinao de Ag, Cl,
Co, Fe, K, Mn, Na, P, Rb e Zn empregando-se anlise por ativao neutrnica instrumental.
Aps o trabalho de Iyengar e Kasperek, vrios autores demonstraram a eficincia da
moagem criognica para homogeneizao de diversos materiais.
Aplicaes da moagem criognica no preparo de amostras
De Boer e Maessen 12 aplicaram a moagem criognica para homogeneizao de
placenta humana. Os autores compararam a eficincia na reduo do tamanho das
partculas utilizando-se nitrognio lquido (-196C) ou gelo seco em acetona (-78C) para
congelamento das amostras. Demonstrou-se que a maior percentagem de partculas
menores que 100 m foi obtida quando o conjunto de moagem foi refrigerado sob menor
temperatura com nitrognio lquido. Atravs de experimentos com traadores radiativos os
autores observaram melhores homogeneizaes utilizando nitrognio lquido e, alm disso,
concluram que alquotas de 10 mg poderiam ser utilizadas representativamente a partir de
10 g da amostra.
Zeisler et al.

13

investigaram essa tcnica utilizando nitrognio lquido para

homogeneizar amostras de fgado bovino, gordura de porco e tecido muscular fibroso. No


procedimento investigado foram avaliados um moinho criognico de bolas e um moinho
criognico de disco. Observou-se que o moinho de disco foi mais eficiente para produzir
partculas menores. Aps 4 min de moagem, as amostras congeladas foram peneiradas em
meio de nitrognio lquido para prevenir a aglomerao das partculas. As amostras de
gordura de porco apresentaram maior dificuldade de homogeneizao, sendo que de 10 a
15% do material modo apresentou partculas maiores que 460 m. Para as amostras de
tecido muscular fibroso, aps 8 min de homogeneizao, observou-se que a maioria das
Francisco Jos Krug, fjkrug@cena.usp.br. VI Workshop sobre Preparo de Amostras, Santa Maria, 2006.

Moagem criognica

57

partculas foram inferiores a 460 m. Os autores atestaram a homogeneidade para 26


elementos em alquotas de 250 mg utilizando-se a tcnica de anlise por ativao
neutrnica instrumental para os dois tipos de moinhos utilizados.
May e Kaiser

14

avaliaram o procedimento de moagem criognica para

homogeneizao de amostras de peixes, utilizando um moinho criognico modelo 6700


Freezer Mill (Spex, Metuchen, NJ, EUA). Nesse moinho as amostras so modas por
impacto em um conjunto de moagem, constitudo de um tubo de policarbonato e de peas
magnticas de ao inoxidvel (440C), o qual imerso em nitrognio lquido. Uma vez que as
amostras entram em contato com as peas de ao inoxidvel, investigou-se a possibilidade
de contaminao de 30 elementos em amostras de alta dureza (quartzo) e amostras de
tecido de peixe. Aps 3 min de moagem os autores observaram contaminaes de 1,5 g/g
Cr, 15 g/g Fe, 0,1 g/g Mo e 1,0 g/g Ni. Os autores concluram que, comparativamente
aos procedimentos freqentemente utilizados para homogeneizao de materiais biolgicos,
a moagem criognica produziu menores tamanhos de partculas (< 100 m) com melhor
homogeneidade.
Mierzwa et al. 5 aplicaram a moagem criognica no preparo de amostras visando
determinao de Ba, Cu, Fe, Pb e Zn em folhas de ch por GFAAS e ICP-OES. As
amostras foram modas durante 20 min em um moinho com um acessrio para resfriamento
com nitrognio lquido. Os autores verificaram que a refrigerao melhorou a eficincia da
moagem e que o tamanho mdio das partculas, examinado por microscopia eletrnica de
varredura (SEM), foi inferior a 60 m.
Engelsen e Wibetoe

determinaram Al, Cu, Li e Mn em sementes de pinheiro e

materiais de referncia certificados (CRMs) de plantas por GFAAS com amostragem de


suspenses. A moagem criognica foi utilizada para evitar problemas de aglomerao das
partculas que ocorria durante a moagem das sementes em temperatura ambiente. Os
autores observaram que, para moagem em temperatura ambiente, a distribuio do
tamanho das partculas foi dispersa at 170 m, tendo sua maior frao situada at 100 m.
Para moagem criognica a distribuio do tamanho das partculas foi mais uniforme, com a
maioria das partculas menor que 50 m.
Gouveia et al.

15

utilizaram a moagem criognica para homogeneizao de

cereais matinais visando determinao de Fe, Mn e Zn por FAAS aps digesto assistida
por microondas. A moagem consistiu apenas de 1 etapa de pr-congelamento da amostra
por 2 min e uma etapa de moagem por 2 min. As medidas dos tamanhos das partculas
foram feitas por SEM e apresentaram valores mdios de aproximadamente 30 m. Os
autores tambm observaram menores coeficientes de variao na determinao dos
analitos em amostras modas criogenicamente em comparao com amostras modas em
moinhos de facas.
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Moagem criognica

58

Kamogawa et al.

16

determinaram Cd, Cu e Pb em amostras de cabelo por

GFAAS empregando anlises de suspenses. As amostras foram modas criogenicamente


durante 13 min, obtendo-se distribuies homogneas, sendo 90% das partculas menores
que 95 m.
Santos Jr et al. 10 avaliaram a aplicao da moagem criognica para amostras de
alimentos com diferentes teores de fibras e gordura visando ao preparo de suspenses para
a determinao de Cd e Pb por GFAAS. As medidas dos tamanhos das partculas foram
feitas por difrao de laser e apresentaram distribuies homogneas com partculas
geralmente menores que 60 m aps 5 min de pr-congelamento e 2 min de moagem. No
equipamento utilizado (Spex, Metuchen, NJ, EUA, modelo 6800) possvel a moagem de
at 4 amostras simultaneamente. Os autores demonstraram que a homogeneidade das
amostras aps a moagem criognica possibilitou a determinao de Cd e Pb em massas de
5 a 20 mg, preparando-se as suspenses diretamente nos copos de 1,5 mL do amostrador
automtico. Um aspecto relevante observado foi a possibilidade de moagem de amostras
com alto teor de leos. Para amostras de castanha do Par, aplicando-se um perodo de
pr-congelamento de 15 min e 3 ciclos de moagem de 2 min, observou-se a disperso de
partculas no leo e a separao entre as partculas e o leo aps um perodo de
decantao. Nesse ponto, importante ressaltar que essa caracterstica da moagem
criognica poderia ser implementada como uma alternativa para os procedimentos
convencionais de triturao e/ou macerao empregados na extrao de pequenas massas
de leos vegetais para anlise qumica, uma vez que aps a moagem ocorre a liberao
direta do leo (e.g. castanha do Par e azeitona) ou facilitam-se os procedimentos de
extrao por solvente, sem que ocorra a degradao de compostos termolbeis.
Outras aplicaes da moagem criognica tm sido relatadas na literatura
visando homogeneizao de amostras biolgicas

17-22

, diminuio de perdas de

componentes com alta volatilidade ou de fcil oxidao quando modas em temperaturas


ambiente (i.e. condimentos, frmacos, leo e gorduras)

23-29

, produo de CRMs

preparo de amostras para extrao de DNA em ossos

35

30-34

e dentes humanos

e ao
36,37

Particularmente para a produo de CRMs, a moagem criognica atrativa pois possibilita


a obteno de materiais mais finos e, consequentemente, que viabilizaro uma
representatividade adequada mesmo para massas reduzidas do material.
Para a maioria dos constituintes de interesse a moagem temperatura do
nitrognio lquido pouco afetada por contaminao, principalmente se as peas do
equipamento forem feitas de PTFE ou titnio. Alm de a moagem criognica ser rpida, uma
das vantagens dessa tcnica, dependendo do material processado, est na gerao de
partculas com tamanhos inferiores a 150 m (Tabela 3.1).

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Moagem criognica

59

Tabela 3.1 Amostras modas por moagem criognica.


Material

Massa (g)

Tempo* (min)

Tamanho (m)

Ref.

Sementes de pinheiro

10

< 50

Vegetais e tecido animal

< 60

10

Placenta humana

10

40

< 250

12

Tecido de peixe

1-2

< 100

14

Cereais matinais

30

15

1-2

< 95

16

74 149

38

Escama de peixe

1,5

< 74

38

Pelo animal

0,5

< 74

38

Vrtebra humana (7 mm)

< 74

38

Pele de rato (natural)

< 74

38

Nylon (3 mm)

74 149

38

Polietileno

< 74

38

Polipropileno

1,5

< 74 149

38

Borracha

0,5

149 297

38

Madeira

1,3

< 149

38

Dente humano

< 74

38

Dente humano

< 150

39

150

< 460

13

Cabelo
Termoplsticos (pellets)

Fgado bovino e tecido


muscular fibroso

* Os valores apresentados referem-se apenas etapa de moagem criognica.


Embora as vantagens apresentadas acima, um problema associado
mecanizao da moagem criognica visando aplicaes analticas o estresse mecnico
sofrido pelas peas mveis do moinho sob baixas temperaturas. Esse estresse pode levar
ao desgaste e, at mesmo, ao cisalhamento do material empregado na construo do
moinho. Uma alternativa atraente para esse problema foi implementada nos moinhos que
utilizam a moagem por impacto com barras magnticas (Figura 3.1). Nesses moinhos o
conjunto de moagem constitudo de um tubo de policarbonato, uma barra magntica e
duas tampas de ao inoxidvel. A amostra introduzida junto com a barra magntica no
tubo de policarbonato, o qual vedado nas extremidades com as tampas de ao. O conjunto
de moagem imerso em nitrognio lquido durante todo o programa de moagem, o que
diminui a possibilidade de perda de componentes volteis e/ou oxidveis da amostra. Aps
o perodo de pr-congelamento selecionado, um campo magntico alternado aplicado

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Moagem criognica

60

fazendo com que a barra magntica atinja as tampas do tubo em alta velocidade. A
cominuio promovida pelo impacto da barra magntica com as amostras e com as
tampas do conjunto de moagem. Assim, apenas as barras magnticas esto em movimento
no moinho, sem o auxlio de braos ou pistes mecnicos, evitando-se o desgaste ou
cisalhamento do material empregado, principalmente em juntas ou conexes. Para amostras
de maior dureza, o tubo de policarbonato pode ser substitudo por um tubo de ao
inoxidvel.

Figura 3.1 - Conjunto de moagem utilizado nos moinhos de moagem por impacto com
barras magnticas.
Entre as vantagens desses equipamentos est a possibilidade de moer
rapidamente amostras de maior dureza (i.e. ossos, quartzo, dentes, polmeros etc.), assim
como de materiais de difcil homogeneizao (fibras, borrachas, tecidos animais com alto
teor de umidade e gordura etc.), e a diminuio dos riscos de contaminao entre as
amostras, uma vez que cada amostra moda em um conjunto individual de moagem.
Uma alternativa ao procedimento descrito acima o pr-congelamento da
amostra em nitrognio lquido antes da moagem. Neste caso, alguns fabricantes
recomendam a utilizao de frascos de moagem com bolas constitudas de PTFE, ao
inoxidvel ou carbeto de tungstnio. A principal desvantagem dessa estratgia o gradual
aquecimento da amostra durante a etapa de moagem, uma vez que a mesma no mantida
sob nitrognio lquido.
As Figuras 3.2, 3.3 e 3.4 mostram a distribuio do tamanho de partculas para
amostras de siri, mexilho e dentes humanos, respectivamente, congeladas por
5 min e modas por apenas 2 min em moinhos criognicos que utilizam a moagem por
impacto com barras magnticas. As medidas do tamanho das partculas foram feitas em
medidores de tamanho de partculas por difrao de laser. Observa-se que 90 % das
Francisco Jos Krug, fjkrug@cena.usp.br. VI Workshop sobre Preparo de Amostras, Santa Maria, 2006.

Moagem criognica

61

partculas possuem dimetro inferior a 64 m para siri, 76 m para mexilho e 137 m para
dentes. A moagem destes materiais

por perodos

mais

extensos no reduziu

significativamente o tamanho das partculas.


4

80

Volume (%)

60
2
40
1

20

Volume acumulado (%)

100

0
0,0

0,1

0,2

0,6

1,5

3,9

9,8

25,0 63,4 161,2

Dimetro das partculas (m)

Figura 3.2 - Distribuio do tamanho das partculas de carne de siri liofilizada, prcongelada por 5 min e moda em moinho criognico de impacto por 2 min.
4

80

Volume (%)

60
2
40
1

20

Volume acumulado (%)

100

0
0

13

21

34

56

92 151 247 404

Dimetro das partculas (m)

Figura 3.3 - Distribuio do tamanho das partculas de mexilho liofilizado, pr-congelado


por 5 min e modo em moinho criognico de impacto por 2 min.

Francisco Jos Krug, fjkrug@cena.usp.br. VI Workshop sobre Preparo de Amostras, Santa Maria, 2006.

Moagem criognica

62

80

Volume (%)

60
2
40
1

20

Volume acumulado (%)

100

0
0

13

21

34

56

92 151 247 404

Dimetro das partculas (m)

Figura 3.4 - Distribuio do tamanho das partculas de dente humano pr-congelado por 5
min e modo em moinho criognico de impacto por 2 min.
Assim como observado por May e Kaiser

14

, deve-se ressaltar que como as

amostras ficam em contato com as peas metlicas do conjunto de moagem, h o risco de


contaminao por Cr, Fe, Mo e Ni. Assim, no preparo de amostras visando determinao
desses metais, esses equipamentos somente devem ser usados se a concentrao
endgena dos elementos for substancialmente maior que a contribuio da contaminao.
Em trabalhos recentes, Arajo et al.

, Gouveia et al.

22

15

e Carrilho et al.

40

demonstraram a

possibilidade de utilizar moinhos de impacto com barras magnticas para moagem de


diferentes amostras sem contaminao perceptvel de ferro.
Concluses

De acordo com a complexidade das amostras j investigadas e com os


resultados j obtidos, a moagem criognica pode ser recomendada para diminuir o tempo
gasto no preparo de amostras em procedimentos analticos. Alm disso, o tamanho reduzido
de partculas aumenta a rea de ataque dos reagentes, facilitando fortemente os
procedimentos de digesto de amostras ou os procedimentos de extrao. A
homogeneidade do material modo permite o uso de tcnicas micro-analticas como a
anlise por ativao neutrnica ou a espectrometria de absoro atmica com amostragem
direta de slidos em forno de grafite. Alm disso, com partculas diminutas a anlise direta
de suspenses por espectrometria de absoro atmica com chama (FAAS) pode ser
implementada em alguns casos.

Francisco Jos Krug, fjkrug@cena.usp.br. VI Workshop sobre Preparo de Amostras, Santa Maria, 2006.

Moagem criognica

63

At o presente momento, na maioria dos procedimentos de moagem criognica


descritos na literatura, no se alcanaram distribuies homogneas com tamanhos de
partculas menores que 10 m. Esse pr-requisito, como j mencionado, fundamental para
introduo e o transporte de suspenses, assim como para atomizao do analito em ICPOES. Dessa forma, apesar das vantagens aqui descritas, a investigao de novos
equipamentos com diferentes mecanismos de moagem criognica ainda necessria para
uma melhor cominuio.
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Francisco Jos Krug, fjkrug@cena.usp.br. VI Workshop sobre Preparo de Amostras, Santa Maria, 2006.

Extraes assistidas por ultra-som

67

3.3. EXTRAES ASSISTIDAS POR ULTRA-SOM

Drio Santos Jnior


Francisco Jos Krug
Mauro Korn

Nos procedimentos de amostragem de suspenses com agitao ultra-snica


comum que uma frao significativa do analito seja extrada para a fase lquida, melhorando,
em alguns casos, a preciso das medidas. Com base nessas observaes muitos autores
propuseram estudos mais detalhados sobre os efeitos do ultra-som no preparo de
suspenses e, neste sentido, vrios trabalhos foram propostos utilizando a extrao dos
analitos assistida por ultra-som e a amostragem apenas do sobrenadante 1. Comparando-se
com a amostragem de suspenses, a extrao do analito para a fase lquida tem sido
ressaltada na literatura com as seguintes vantagens:
(i)

o uso de agentes surfactantes pode ser dispensado, uma vez que no


necessrio manter uma suspenso homognea. Neste aspecto, os erros devidos
s diferentes taxas de sedimentao so eliminados;

(ii)

a massa representativa proporcional massa utilizada para o preparo das


suspenses (e.g. 50 500 mg). Conseqentemente, melhor exatido dos
resultados esperada quando comparada anlise de suspenses ou
amostragem direta de slidos de materiais pouco homogneos;

(iii)

os erros volumtricos devido falta de homogeneidade no tamanho das


partculas so evitados;

(iv)

as diluies podem ser implementadas pelo uso do prprio autoamostrador;

(v)

menor efeito de matriz, melhor ao dos modificadores qumicos e maior


possibilidade de calibrao utilizando-se padres aquosos em GFAAS;

(vi)

baixo consumo de cidos (e.g. solues de cido ntrico e/ou clordrico diludas
< 3 mol/l);

(vii)

maior tolerncia ao tamanho de partculas, comparando-se com a amostragem


de suspenses e a introduo da amostra por nebulizao (e.g. ICP-OES, ICPMS). Partculas menores que 300 m j foram utilizadas, combinando-se
diferentes solues extratoras e tempo de extrao;

(viii)

o princpio do frasco nico, onde a amostra preparada diretamente nos frascos

68

Extraes assistidas por ultra-som

do autoamostrador ou em tubos de centrfuga volumtricos, pode ser


implementado minimizando os riscos de contaminao;
(ix)

maior segurana quando comparada aos procedimentos de decomposio da


amostra via mida a quente (> 100 C), uma vez que, em geral, os mtodos de
extrao ultra-snica so conduzidos temperatura ambiente.
Entretanto,

literatura

tambm

ressalta

algumas

caractersticas

dos

procedimentos de extrao assistidos por ultra-som como limitaes, entre elas:


(i)

a massa de amostra geralmente menor que aquela utilizada nos


procedimentos de digesto em sistemas abertos. Neste aspecto, deve-se
destacar que no existe uma limitao bem definida e que, para a maioria dos
casos, existe um compromisso entre tamanho do frasco utilizado para extrao,
composio de reagentes e tempo de sonicao;

(ii)

o tamanho de partculas pode ser crtico e deve ser bem avaliado. Novamente,
deve-se ressaltar que no existe na literatura uma definio do melhor tamanho
das partculas. O melhor tamanho deve ser obtido estatisticamente, assumindose, tambm, um compromisso com outros parmetros, como o tempo de
sonicao, composio e concentrao da soluo extratora;

(iii)

a robustez dos procedimentos de extrao utilizando-se banhos ultra-snicos


questionvel, uma vez que a distribuio da intensidade ultra-snica no interior
da cavidade do banho no homognea e pode variar de acordo com o volume
de gua na cavidade do banho, com o nmero de frascos utilizados dentro do
banho e posio do transdutor ultra-snico;

(iv)

embora o tempo de extrao seja baixo (i.e. geralmente menor que


20 min), a freqncia analtica drasticamente limitada ao nmero de frascos
que podem ser utilizados dentro da cavidade do banho sem que haja prejuzo
para a distribuio da energia ultra-snica.

Frente s vantagens e limitaes inerentes a qualquer procedimento analtico,


possvel inicialmente inferir que a extrao ultra-snica apresenta potencialidades como
uma alternativa aos procedimentos convencionais utilizados no preparo de amostras em
espectrometria atmica.

Extraes assistidas por ultra-som

69

Fundamentos e aplicaes da extrao ultra-snica


Nos ltimos anos observou-se um crescente desenvolvimento de mtodos de
preparo de amostras assistidos por ultra-som. Em pesquisa realizada no (Institute for
Scientific Information, Webofscience.com), combinando-se as palavras do ingls:
ultrasound, ultrasonic, sonication, extraction e leaching, foi possvel observar o crescimento
do nmero de trabalhos que utilizaram a extrao slido-lquido assistida por ultra-som
como uma alternativa ao preparo de amostras em espectrometria atmica. Nesta pesquisa,
no foram considerados os trabalhos envolvendo a extrao de metais em leos vegetais e
leos lubrificantes, a extrao de analitos adsorvidos em colunas de pr-concentrao em
anlises de guas, e trabalhos que reportaram a extrao parcial do analito para fase lquida
durante a agitao ultra-snica, mas cujo objetivo principal foi a amostragem de
suspenses. A Figura 3.4 apresenta o perfil do desenvolvimento da extrao assistida por
ultra-som em espectrometria atmica entre os anos de 1996 e 2005. Ressalte-se que o
nmero de trabalhos apresentados para cada tcnica no acumulativo em relao ao total
de trabalhos, uma vez que, em alguns casos, foram utilizadas duas ou mais tcnicas de
espectrometria atmica no mesmo trabalho. Neste caso, apenas a linha sobre as colunas
representa o total de trabalhos em cada ano. Observa-se que o nmero de trabalhos
envolvendo a extrao ultra-snica ainda incipiente, principalmente, se for comparado ao
nmero de mtodos de preparo de amostras assistidos por microondas propostos na
literatura 2.
A Figura 3.5 apresenta o perfil da participao de cada analito em relao ao
total de mtodos apresentados na literatura. O nmero de trabalhos apresentado para os
analitos no acumulativo em relao ao total de trabalhos, uma vez que alguns mtodos
foram avaliados para extrao multielementar. Como pode ser observado a extrao
assistida por ultra-som de alguns elementos como cdmio, chumbo, cobre e mangans foi
avaliada em um nmero significativo de trabalhos. No entanto, as informaes sobre a
extrao de elementos como antimnio, brio, bismuto, molibdnio, entre outros, ainda
incipiente.
Embora a aplicao do ultra-som visando induo de reaes qumicas
(i.e. sonoqumica) parea uma tarefa simples, so necessrios conhecimentos bsicos de
alguns fundamentos da aplicao dessa forma de energia, bem como dos principais fatores
fsicos que podem influenciar no sucesso de um mtodo sonoqumico. Aspectos relevantes
sobre a teoria da aplicao do ultra-som com nfase extensiva nos efeitos qumicos e
fsicos, assim como nos clculos matemticos pertinentes aos fenmenos de cavitao
acstica so abordados em diferentes publicaes 3-8.

70

Extraes assistidas por ultra-som

35

FAES
HGAAS

BIFF-AAS
GFAAS

AFS
ICP-OES

FAAS
ICP-MS

CVAAS
TXRF

Nmero de publicaes

30

25

20

15

10

0
1996

1997

1998

1999

2000

2001

2002

2003

2004

Ano
Figura 3.4 - Desenvolvimento da extrao assistida por ultra-som em espectrometria atmica entre 1995 e 2005
Francisco Jos Krug, fjkrug@cena.usp.br. VI Workshop sobre Preparo de Amostras, Santa Maria, 2006.

2005

Extraes assistidas por ultra-som

71

60

Cu

Zn

Cd

50

Nmero de citaes

Pb

Fe
40

Cr

Mn
Ni

As

30

Mg
Ca
20

Al

Se
Hg

Co
10

Ba
Ag

Bi

Cs

Ge

In

Na
Li

Mo

Sn Sr
P

Sb
Rb Sc

TbTe

Analito
Figura 3.5 Nmero de citaes de cada analito nos trabalhos apresentados na literatura entre 1995 e 2005.
Francisco Jos Krug, fjkrug@cena.usp.br. VI Workshop sobre Preparo de Amostras, Santa Maria, 2006.

V
Ti
Zr

72

Extraes assistidas por ultra-som

O fundamento da aplicao do ultra-som em procedimentos de extrao


baseado no conceito de se empregar uma energia externa que aumente a ao qumica de
um solvente sobre o soluto. Assim, a aplicao de ondas mecnicas, como as ultra-snicas,
que se propagam em meios materiais, deve favorecer a interao do solvente sobre uma
amostra slida pela renovao das molculas do solvente na interface lquido/slido. Para o
tratamento de amostras, a faixa de freqncia ordinria das ondas ultra-snicas est entre
20 e 100 kHz. Esta regio, denominada de faixa de baixa freqncia e alta potncia,
proporciona a formao de pequenas bolhas de cavitao quando a onda atravessa um
meio lquido. De fato, a faixa de freqncia disponvel para sonoqumica foi estendida at
2 MHz com o desenvolvimento de equipamentos de alta potncia capazes de gerar
cavitaes nessas freqncias 9. As bolhas de cavitao se desenvolvem durante as fases
de compresso e rarefao da onda ultra-snica. Durante a fase de rarefao, uma frao
dos gases presentes no lquido absorvida pela bolha de cavitao, e nos ciclos
consecutivos de compresso e rarefao, a bolha tem seu dimetro modificado at atingir
um dimetro crtico, acima do qual ocorre sua imploso. Este tamanho crtico determinado
pela freqncia do ultra-som (e.g. 170 m a 20 kHz) 10, 11. Esse fenmeno leva formao
de uma variedade de espcies no meio exposto, pela combinao dos radicais livres
formados pela energia oriunda da imploso 12, 13, 14. De acordo com Suslick et al.15, o colapso
das microbolhas formadas pelo efeito do ultra-som resulta na produo de temperaturas
instantneas de aproximadamente 5200 K na fase gasosa e 1900 K na interface com o meio
lquido, com taxa de aquecimento e resfriamento de aproximadamente 10 10 K s -1 e presses
instantneas localizadas na interface entre a bolha e o solvente no momento do colapso de
at 1000 atm.
Os fenmenos de cavitao acstica em sistemas sob sonicao proporcionam
condies de temperatura e presso normalmente inusitadas na qumica. Entretanto, devese ressaltar que alguns fatores podem afetar diretamente a formao, crescimento e colapso
das bolhas de cavitao, entre eles a freqncia e intensidade do ultra-som, caractersticas
do solvente, presso e temperatura do meio, viscosidade, presso de vapor do lquido,
presena de gases e presena de material slido no meio. Deve-se destacar, tambm, que
no existe uma relao simples que correlacione esses fatores de maneira generalizada. A
influncia de cada um deles sobre a eficincia de um processo sonoqumico depende do
tipo de aplicao. Entre as caractersticas mais importantes para a escolha do processador
ultra-snico a ser usado na sonoqumica destaca-se a intensidade de energia acstica (W
cm -2), a qual proporcional ao quadrado da amplitude de vibrao. Assim, especial ateno
deve ser dada potncia do processador ultra-snico 9.
Entre os processadores ultra-snicos comercialmente disponveis, os mais
utilizados so o banho ultra-snico e a sonda ultra-snica. De acordo com Mason e
Francisco Jos Krug, fjkrug@cena.usp.br. VI Workshop sobre Preparo de Amostras, Santa Maria, 2006.

Extraes assistidas por ultra-som

Lorimer

73

nem todos os banhos ultra-snicos tm intensidade suficiente para serem usados

em processos sonoqumico. Os banhos ultra-snicos de baixa intensidade com modernos


transdutores piezeltricos usam, em geral, intensidades entre 1 e 2 W cm -2. De acordo com
os autores, a determinao da intensidade ultra-snica em um determinado ponto da
soluo no uma tarefa fcil e, geralmente, apenas realizada por mtodos
calorimtricos. Os autores sugerem que um teste simples pode ser realizado, utilizando-se
uma folha de alumnio no interior do banho ultra-snico com gua e detergente durante 30 s.
Em um banho apropriado para o uso em sonoqumica a folha de alumnio deve ser
perfurada extensivamente pela imploso das bolhas de cavitao durante a sonicao. A
regio de maior perfurao tambm serve como um indicativo da regio de maior
intensidade ultra-snica, na qual devem ser posicionados os frascos de reao.
De acordo com Capelo et al.1, os resultados mais contraditrios reportados na
literatura acerca do uso de ultra-som no preparo de amostras so relacionados ao uso de
banhos ultra-snicos. Geralmente, a potncia desses equipamentos e a dissipao da
energia ultra-snica dependem estritamente da freqncia, da configurao e posio dos
transdutores piezeltricos, assim como do volume da cuba do banho, sendo que essas
caractersticas variam de acordo com o fabricante. Isso significa que difcil fazer
comparaes diretas quanto a resultados obtidos utilizando-se diferentes banhos ultrasnicos. Nesses equipamentos, a energia ultra-snica transmitida de forma indireta para
os frascos de reao. Assim, a potncia e o perfil de distribuio da energia ultra-snica
podem levar a resultados contraditrios quanto reprodutibilidade de resultados analticos
obtidos em diferentes laboratrios. Como exemplo, Santos et al.16 encontraram diferentes
percentuais de extrao de arsnio em alimentos marinho, at mesmo utilizando-se um
nico banho ultra-snico.
O aspecto da transmisso indireta da energia em banhos ultra-snicos tambm
ressalta caractersticas importantes. Como a energia ultra-snica tem que atravessar as
paredes do frasco de reao, e parte dessa energia absorvida e/ou refletida neste
processo, a energia resultante para induo de cavitao no interior do frasco
significativamente menor que aquela no interior da cuba logo acima do transdutor. Assim,
especial ateno deve ser dada s caractersticas dos frascos de reao como geometria,
espessura da parede, velocidade do som no material e coeficiente de atenuao do
material. Por outro lado, a transmisso indireta de energia para os frascos proporciona
menor possibilidade de contaminao, visto que no h contato direto das amostras com o
meio lquido do banho, assim como com peas metlicas. Ressalta-se tambm, neste
aspecto, a possibilidade de sonicao de mais de uma amostra simultaneamente, mas o
perfil de distribuio da energia ultra-snica no interior do banho com diferentes quantidades
de frascos de reao deve ser avaliado previamente. Neste sentido, especial ateno deve
Francisco Jos Krug, fjkrug@cena.usp.br. VI Workshop sobre Preparo de Amostras, Santa Maria, 2006.

74

Extraes assistidas por ultra-som

ser dada s caractersticas tcnicas do equipamento, assim como aos frascos de reao
antes do desenvolvimento de mtodos analticos utilizando-se banhos ultra-snicos.
Outro processador comumente utilizado para extrao slido-lquido a sonda
ultra-snica. Nestes processadores o transdutor acoplado a uma sonda de titnio ou liga
de titnio (e.g. Ti-6AL-4V), a qual inserida diretamente no meio contendo as partculas. A
sonda ultra-snica geralmente proporciona ao meio de extrao intensidades ultra-snicas
muito maiores que quelas observadas em banhos ultra-snicos (e.g. 1 5 W/cm2 com
banhos versus 50 500 W/cm2 com sondas). As sondas ultra-snicas utilizadas para
extrao slido-lquido em qumica analtica so operadas tipicamente a 20 kHz e com
intensidades geralmente entre 50 e 200 W/cm2. Como essas intensidades de potncia so
dissipadas diretamente na suspenso, alguns autores tem destacado sua eficincia tambm
para reduo do tamanho das partculas

17

, reduo do tempo de extrao e melhor

eficincia de extrao 1. Entretanto, a insero da sonda diretamente na suspenso pode


representar uma fonte de contaminao da amostra por metais presentes na composio da
sonda 1. A Tabela 3.2 apresenta as principais caractersticas entre banhos e sondas e os
valores mdios freqentemente reportados para equipamentos designados para uso em
laboratrio. Ressalte-se que banhos ou sondas de maior potncia designados para
diferentes aplicaes esto disponveis comercialmente.
Tabela 3.2 - Caractersticas dos processadores ultra-snicos (banho e sonda) disponveis
para uso em laboratrio e dos procedimentos analticos freqentemente reportados para o
uso em extrao assistida por ultra-som.
Banho

Sonda

Intensidade (W/cm2)

1-5

50 - 200

Intensidade varivel *

Sim

Sim

Aplicao direta na amostra

No

Sim

< US$ 1000

US$ 2000 - 4500

HNO3 / HCl (< 3 mol/l)

HNO3 (< 1,4 mol/l)

Baixa (1-6 amostras / 20 min)

Baixa (1 amostra / 5 min)

Custo
Soluo extratora
Freqncia analtica

* a intensidade depende da amplitude do deslocamento imposto pelo transdutor, o qual depende da


freqncia e da potncia nominal aplicada.

banhos ultra-snicos de maior volume podem ser usados para aumentar a freqncia de
amostragem, mas a distribuio das ondas ultra-snicas dentro da cuba deve ser observada.

Multi-sondas podem ser utilizadas para aumentar a freqncia de amostragem.

Francisco Jos Krug, fjkrug@cena.usp.br. VI Workshop sobre Preparo de Amostras, Santa Maria, 2006.

Extraes assistidas por ultra-som

75

A Tabela 3.3 apresenta as caractersticas de alguns mtodos os quais


destacaram as potencialidades e limitaes da extrao assistida por ultra-som como
alternativa para o preparo de amostras em espectrometria atmica. O percentual de
extrao foi determinado a partir da concentrao certificada do analito em materiais de
referncia certificados ou pela comparao com os valores obtidos aps a decomposio
cida das amostras. Em alguns casos o percentual de extrao foi comparado frao
correspondente de cada analito em mtodos de extrao seqencial. Nos trabalhos
apresentados na Tabela 3.3 observa-se que a utilizao de sondas ultra-snicas proporciona
tempos de extrao significativamente mais baixos e, principalmente para materiais
biolgicos, observou-se a potencialidade do uso de ambos processadores ultra-snicos para
extrao quantitativa e multielementar dos analitos. Entretanto, alguns resultados
contraditrios a respeito da extrao ultra-snica tambm foram relatados na literatura
recente, principalmente, em relao ao uso de banhos ultra-snicos nos procedimentos de
extrao para diferentes tipos de amostras. Entre alguns exemplos, Mierzwa et al.18 no
obtiveram recuperaes quantitativas para selnio em amostras de fgado bovino utilizando
um banho ultra-snico operando a 70 C por 18 min, enquanto Bermejo-Barrera et al.19
obtiveram recuperaes quantitativas de selnio em amostras de cabelo operando um
banho ultra-snico a 90 C por apenas 10 min.
El Azouzi et al.20 utilizaram uma mistura HNO3 (1,6 mol/l) / HCl (1,2 mol/l)/ H2O2
(0,1 mol/l) para extrao ultra-snica de metais em tecido de mexilho. Apenas aps 120
min de sonicao os autores obtiveram recuperaes quantitativas de cdmio (95%) e cobre
(100%), e extrao parcial de crmio (54%). Por outro lado, Minami et al.21, tambm usando
banhos ultra-snicos, reportaram extraes quantitativas de Cd, Cu, Mn e Pb em diferentes
materiais biolgicos de origem animal e vegetal utilizando apenas HNO3 (1 mol/l) com
apenas 5 min de sonicao.
Bermejo-Barrera et al.22 propuseram a extrao de As, Ca, Cd, Co, Cr, Mn, Pb,
Se, Zn, Ca, Fe, Hg e Mg em tecidos de animais marinhos utilizando-se banhos ultra-snicos.
De acordo com os autores, o tempo de sonicao entre 10 e 120 min no promoveu efeito
significativo na extrao, com exceo ao selnio, no qual foi necessria sonicao durante
30 min a 90 C. A concentrao de cidos na mistura extratora foi otimizada para cada
analito, variando as solues extratoras entre 0,5 e 4,5 mol/l HNO3 e entre 2,0 e 4,0 mol/l
HCl.
Lima et al.23 obtiveram recuperaes quantitativas de cdmio em CRMs de
materiais biolgicos e sedimentos com uma sonda ultra-snica de 50 W

por

24

2 min, enquanto Capelo et al. alcanaram extraes quantitativas apenas para cdmio em
materiais biolgicos com tamanho de partculas < 50 m, operando uma sonda de 100 W
por 1 min. Os autores no alcanaram recuperaes quantitativas de cdmio para o mesmo
Francisco Jos Krug, fjkrug@cena.usp.br. VI Workshop sobre Preparo de Amostras, Santa Maria, 2006.

76

Extraes assistidas por ultra-som

tipo de CRM de sedimento utilizado por Lima et al.23 (i.e. CRM 320 River Sediment) mesmo
com o aumento do tempo de sonicao.
Recentemente, Canepari et al.25 avaliaram a extrao seqencial (BCR)
assistida por microondas ou ultra-som para determinao de Cd, Cr, Ni, Pb, Zn, Cu, Al, As,
Co, Fe, Mg e Mn em sedimentos. O mtodo assistido por ultra-som apresentou
recuperaes significativamente menores que 100 % para todos os elementos quando
comparado ao mtodo assistido por microondas (e.g. Fe < 24%, Mg < 78 %, Zn < 62 %,
Cu < 62 %). Os autores ressaltaram que o mtodo assistido por ultra-som tambm foi menos
reprodutvel, at mesmo quando comparado com agitao mecnica.
Davidson e Delevoye

26

reportaram valores concordantes entre a extrao

seqencial (BCR) convencional e com auxlio do ultra-som para determinao de Fe, Mg e


Zn (84 - 98 %) em solos e sedimentos. Nesse trabalho, tambm foram reportados baixos
nveis de extrao de Cu (74 %) e a performance do mtodo assistido por ultra-som foi
deficiente para extrao de alguns dos analitos em sedimento marinho, variando entre
58 - 104 %. De acordo com os autores, os nveis de variao observados para essas
amostras evidenciam as dificuldades do desenvolvimento de mtodos de extrao
seqencial BCR assistidos por ultra-som para aplicao em diferentes amostras.
Domnguez-Gonzlez et al.

27

avaliaram a extrao de Al, As, Ba, Fe, V, Ca, K,

Na, Mg, Cd, Cr, Cu, Mn, Ni, Pb e Zn em algas marinhas. Os autores enfatizaram que uma
etapa de 10 min de sonicao em meio 6,0 mol/l HCl a 65 C foi necessria para destruir a
parede celular e permitir melhores percentuais de extrao de alguns elementos, como Al,
As, Fe, Ba e V. Aps essa etapa, foram necessrios mais 35 min de sonicao a 65 C em
meio 3,7 mol/l HNO3 + 3,0 mol/l HCl + 3,0 mol/l H2O2 para extrao dos analitos. Nesse
trabalho, foram obtidas extraes quantitativas de Fe (e.g. 93 - 97% em CRMs), o qual um
elemento reconhecido como de difcil extrao em muitos tecidos vegetais, mas os autores
tambm destacaram a falta de exatido obtida na determinao de Al, Cr, Pb e V em CRMs.
Por outro lado, Nascentes et al.

28

demonstraram que 10 min de sonicao em meio

0,14 mol/l HNO3 foi eficiente na extrao quantitativa de Ca, Mg, Mn e Zn em diferentes
amostras de tecido vegetal.

Francisco Jos Krug, fjkrug@cena.usp.br. VI Workshop sobre Preparo de Amostras, Santa Maria, 2006.

Extraes assistidas por ultra-som

77

Tabela 3.3 - Alguns trabalhos que destacam o efeito da extrao assistida por ultra-som em espectrometria atmica. (continua)
Amostra

Analitos / (extrao, %)

Processador /
(tempo)

Soluo extratora /
(tcnica analtica)

Ref.

Fgado bovino e crustceo

Se (85 88%)

Banho (18 min)

4% v/v HNO3 / (GFAAS)

18

Cabelo

Cd, Cr, Pb, Se / (> 90%),

Banho (10 min)

4,8 mol/l HNO3, 4,8 mol/l HCl e 0,5

19

mol/l H2O2 / (GFAAS)


0,5 mol/l HNO3, 4.8 mol/l HCl e 0,5

Me-Hg (> 90%)

mol/l H2O2 / (CVAAS)


Mexilho

Ca, Cd, Cu, K, Mg, Mn, Na, V, Zn /

Banho (120 min)

Cd ( 100), Cu ( 100%),

Banho (5 min)

Mn ( 100), Pb ( 100%)
Tecido animal marinho

20

0,1 mol/l H2O2 / (FAAS e GFAAS)

(> 90%)
Tecido animal e vegetal

1,6 mol/l HNO3, 1,2 mol/l HCl e

0,5 mol/l HNO3 /

21

(GFAAS e MIP-MS)

As, Ca, Cd, Co, Cr, Cu, Fe, Hg, Mg, Mn, Pb,

Banho

(0,5 - 4,5) mol/l HNO3

Se, Zn / (85 105%)

(10 - 30 min)

(2,0 - 4,0) mol/l HCl

22

(1,5 mol/l) H2O2 /


(GFAAS, FAAS e CVAAS)
Tecido animal e vegetal

Cd (97%), Cu (98%), Pb (96%)

Sonda

0,5 a 5,0 % v/v HNO3 /

Sedimento

Cd (97%), Cu (60%), Pb (54%)

(2 - 5 min)

(GFAAS)

Material biolgico e

Cd (> 96%)

Sonda (1 min)

3% v/v HNO3 / (GFAAS)

sedimentos

Cd (> 75%)

Tabela 3.3 - Alguns trabalhos que destacam o efeito da extrao assistida por ultra-som em espectrometria atmica. (continuao)
Francisco Jos Krug, fjkrug@cena.usp.br. VI Workshop sobre Preparo de Amostras, Santa Maria, 2006.

23

24

78

Extraes assistidas por ultra-som

Amostra

Sedimento

Solos e sedimentos
Alga marinha

Analitos / (extrao, %)

Cd (< 74%), Cr (< 38%), Ni (< 67%),


Pb(< 58%), Zn (< 62%), Cu (< 62%),
Al (< 53%), As (< 65%), Co (< 60%),
Fe(< 24%), Mg (< 78%), Mn (< 79%)

Processador /

Soluo extratora /

(tempo)

(tcnica analtica)

Banho

Extrao seqencial BCR /


(ICP-OES)

25

26
27

(20 - 30 min)

Fe, Mn, Zn (84 98%)

Sonda (10 min)

Cu (74%)

Banho (180 min)

Extrao seqencial BCR /


(FAAS e ICP-OES)

As, Ca, Cd, Cu, Fe, K, Mn, Mg, Na,


Ni, Zn ( 100%),

Banho

6,0 mol/l HCl (etapa 1) e

(10 + 35 min)

3,7 mol/l HNO3, 3,0 mol/l HCl,


3,0 mol/l H2O2 (etapa 2) / (ICP-OES)

Banho (10 min)

0,14 mol/l HNO3 / (FAAS)

Al (<48%), Ba (<70%), Pb (<93%)

Ref.

V (< 80%), Cr (34 - 100%)


Vegetais

Ca, Mg, Mn, Zn / (96 102%)


Fe (98%, repolho)

28

1,4 mol/l HNO3 / (FAAS)

Carne

Zn ( 100%)

Banho (0,5 min)

Tecido animal,

Hg e Me-Hg ( 100%)

Sonda (10 min)

0,75 mol/l HNO3 - 0,75 mol/l HCL


(FAAS)
5% v/v HNO3 - 0,02% v/v tiouria,

tecido vegetal,

10% v/v HNO3 0,02% tiouria,

partculas de carvo

20% v/v HNO3 - 0.2% v/v tiouria

29
30

/ (CVAAS)
Sedimento

As(III), As(V), MMA, DMA ( 100%)

Sonda (1 min)

Especiao em tampo fosfato (pH


5,5 5,6) / (HPLC-AFS)

Tabela 3.3 - Alguns trabalhos que destacam o efeito da extrao assistida por ultra-som em espectrometria atmica. (concluso)
Francisco Jos Krug, fjkrug@cena.usp.br. VI Workshop sobre Preparo de Amostras, Santa Maria, 2006.

31

Extraes assistidas por ultra-som

79

Amostra (, m)

Analitos / (extrao, %)

Processador /
(tempo)

Soluo extratora /
(tcnica analtica)

Ref.

Mexilho

Cd, Pb ( 100%)

Banho (2 - 3 min)

3 mol/l HNO3 / (FAAS)

32

Msculo de peixe

Ca, Cu, Fe, Mg, Zn ( 100%)

Banho (25 min)

30 % v/v H2O2 5% v/v CFA-C

33

/ (ICP-OES)
Solos

Ge ( 100%)

Sonda (10 min)

12 mol/l HCl / (GFAAS)

34

Tecido animal

Se (93 - 102%)

Sonda (2 min)

Especiao / (ICP-MS)

35

Mexilho, peixe e plantas

Cu (93 103%)

Sonda (3 min)

3% v/v HNO3 (GFAAS)

36

Cabelo

Ca, Cu, Fe, Mg, Mn, Zn

Banho (10 min)

4 mol/l HNO3, 3,5 mol/l HCl (FAAS e

37

GFAAS)

(> 93%)
Lama, Cinza e crustceo

Cd (89 102%)

Cabelo

Cd (29%)

Alimentos marinhos

As (> 94%)

Banho (20 min)

6 mol/l HCl (FI-CV-AAS)

38

Sonda (3 min)

3% v/v HNO3 (GFAAS)

39

2 mol/l HCl para Me-Hg e

40

Banho (30 min)


Mexilho

Me-Hg, Hg / (> 92%)

Sonda (5 min)

5 mol/l HCl para Hg (CVAAS)


Vegetais

Mg (98%), Mn (99%), Zn (102%)

Sonda (3 min)

0,3 % v/v HNO3 (FAAS)

41

Lama de esgoto

Cr, Cu, Ni, Pb, Zn / (> 96%)

Sonda (22 min)

Extrao seqencial BCR (FAAS)

42

Material biolgico e sedimento

As (8 111%)

Sonda (20 min)

15 % v/v HCl (FI-HGAAS)

43

Francisco Jos Krug, fjkrug@cena.usp.br. VI Workshop sobre Preparo de Amostras, Santa Maria, 2006.

80

Extraes assistidas por ultra-som

Os resultados descritos na literatura permitem inferir que as ondas ultra-snicas


geradas por processadores ultra-snicos promovem a extrao de analitos importantes na
anlise de matrias biolgicos, solos e sedimentos. Neste sentido, o uso da extrao
assistida por ultra-som pode ser recomendado como um mtodo de screening,
configurando-se como uma alternativa rpida e de baixo custo para o preparo de amostras
visando, principalmente, determinao de Ca, Cd, Cu, Fe, Mg, Mn, Mo, Pb e Zn em
vegetais, de As, Ca, Cd, Cu, Fe, Mg, Mn, Pb, Se e Zn em tecidos animais, e de As, Cd, Cu,
Mn, Pb e Zn em solos e sedimentos.
Em geral, observa-se que a agitao ultra-snica diminui o tempo de extrao e
a concentrao de cidos, quando comparada aos mtodos de agitao manual ou agitao
por efeito vortex frequentemente utilizados em laboratrio. Entretanto, a extrao
quantitativa depende fortemente da interao dos analitos com a matriz. Assim, embora os
mtodos assistidos por ultra-som sejam promissores, recomendvel que as variveis que
influenciam na extrao dos analitos sejam avaliadas em diferentes tipos de amostras antes
da utilizao deste mtodo. As Tabelas 3.4, 3.5, 3.6 apresentam as condies observadas
por Santos Jr.

44

para mxima extrao de diferentes analitos em amostras de tecido

vegetal, tecido animal e solos e sedimentos, respectivamente. Os resultados apresentados


nessas Tabelas devem ser considerados apenas como condies recomendadas por esse
autor, uma vez que, em geral, as caractersticas dos mtodos de extrao como tempo de
sonicao e concentrao de cidos podem variar fortemente de acordo com a amostra e
com o processador ultra-snico utilizado.

Francisco Jos Krug, fjkrug@cena.usp.br. VI Workshop sobre Preparo de Amostras, Santa Maria, 2006.

Extraes assistidas por ultra-som

81

Tabela 3.4 - Condies obtidas para mxima extrao de Al, Ca, Cd, Cr, Cu, Fe, Mg, Mn, Mo, Pb e Zn em tecidos vegetais com sonda de
50 W (Vibracell VC50, Sonics and Materials) e banho de 90 W (Aquasonic 75D, VWR Scientific).
Varivel

Elementos

Sonda

Al

Ca

Cd

Cr

Cu

Fe

Mg

Mn

Mo

Pb

Zn

HNO3 (mol/l)

2,8

1,4

0,7

2,8

1,4

2,8

1,4

1,4

1,4

1,4

1,4

HCl (mol/l)

2,4

2,4

2,4

1,2

Tempo (min)

20

10

20

10

10

10

10

Partcula (m)

< 62

< 62

< 212

< 62

< 212

< 62

< 62

< 62

< 62

< 62

< 62

Extrao (%) *

18 - 85

80 - 95

93 - 105

41 - 91

96 - 102

75 - 102

83 - 98

89 - 105

90 - 102

93 - 101

94 - 102

6-9

6 - 11

3-8

5 - 12

4-7

5 - 12

3 - 11

2-8

3-7

2-9

2-6

Banho

Al

Ca

Cd

Cr

Cu

Fe

Mg

Mn

Mo

Pb

Zn

HNO3 (mol/l)

2,8

1,4

1,4

2,8

2,8

2,8

2,8

2,8

2,8

2,8

1,4

HCl (mol/l)

2,4

2,4

2,4

2,4

Tempo (min)

20

10

10

20

10

20

10

10

20

10

10

Partcula (m)

< 62

< 62

< 212

< 62

< 62

< 62

< 62

< 62

< 62

< 62

< 62

Extrao (%) *

11 - 65

75 - 97

90 - 98

46 - 71

91 - 99

48 - 85

72 - 99

78 - 101

75 - 105

91 - 105

87 - 96

4-9

3-7

4 - 10

7 - 19

2-9

6 - 15

4-7

2 - 11

5 - 14

5-7

1-4

CV (%) **

CV (%) **

* faixa de extrao e ** faixa de coeficientes de variao obtidos utilizando-se diferentes amostras.

Francisco Jos Krug, fjkrug@cena.usp.br. VI Workshop sobre Preparo de Amostras, Santa Maria, 2006.

82

Extraes assistidas por ultra-som

Tabela 3.5 - Condies obtidas para mxima extrao de Al, As, Ca, Cd, Cr, Cu, Fe, Mg, Mn, Pb, Se e Zn em tecidos animais com sonda de
50 W (Vibracell VC50, Sonics and Materials) e banho de 90 W (Aquasonic 75D, VWR Scientific).
Varivel

Elementos

Sonda

Al

As

Ca

Cd

Cr

Cu

Fe

Mg

Mn

Pb

Se

Zn

HNO3 (mol/l)

2,8

1,4

2,8

0,7

2,8

1,4

2,8

2,8

1,4

0,7

10

0,7

HCl (mol/l)

2,4

2,4

Tempo (min)

20

10

10

20

10

10

10

10

10

Partcula (m)

< 62

< 62

< 212

< 212

< 62

< 212

< 62

< 62

< 212

< 212

< 62

< 212

Extrao (%) *

35 - 73

87 - 96

90 - 95

95 - 103

76 - 98

95 - 105

85 - 97

92 -102

86 - 95

96 - 105

RSD (%) **

6 - 12

3-6

49

1-5

3-8

4 - 10

2 - 12

3-8

2-7

3-8

5-8

2-6

Banho

Al

As

Ca

Cd

Cr

Cu

Fe

Mg

Mn

Pb

Se

Zn

HNO3 (mol/l)

2,8

2,8

2,8

2,8

2,8

2,8

2,8

2,8

1,4

2,8

1,4

1,4

HCl (mol/l)

2,4

2,4

2,4

2,4

1,2

Tempo (min)

20

20

20

10

20

10

20

10

20

10

20

10

Partcula (m)

< 62

< 62

< 212

< 212

< 62

< 62

< 62

< 62

< 212

< 62

< 62

< 62

Extrao (%) *

23 - 31

87 - 98

70 - 91

86 - 102

77 - 94

82 - 97

92 - 103

89 - 98

86 - 93

93 - 98

RSD (%) **

9 - 17

4-8

6 - 11

5-9

3 - 10

4-7

2-6

2-7

3 - 11

2-4

86 - 101 90 - 105
3-7

1-6

91 - 102 96 - 107

* Faixa de extrao e ** faixa de coeficientes de variao obtidos utilizando-se diferentes amostras.

Francisco Jos Krug, fjkrug@cena.usp.br. VI Workshop sobre Preparo de Amostras, Santa Maria, 2006.

Extraes assistidas por ultra-som

83

Tabela 3.6 - Condies obtidas para mxima extrao de Al, As, Ca, Cd, Cr, Cu, Fe, Hg, Mg, Mn, Pb e Zn em solos e sedimentos com sonda
de 50 W (Vibracell VC50, Sonics and Materials) e banho de 90 W (Aquasonic 75D, VWR Scientific).
Varivel

Elementos

Sonda

Al

As

Ca

Cd

Cr

Cu

Fe

Hg

Mg

Mn

Pb

Zn

HNO3 (mol/l)

2,8

1,4

2,8

1,4

2,8

1,4

2,8

2,8

2,8

2,8

2,8

HCl (mol/l)

2,4

1,2

2,4

2,4

1,2

2,4

2,4

2,4

2,4

2,4

Tempo (min)

20

20

20

10

20

10

20

20

10

10

20

Partcula (m)

< 62

< 62

< 62

< 212

< 62

< 62

< 62

< 62

< 62

< 62

< 62

< 62

Extrao (%) *

13 - 47

92 - 103

28 - 82

93 - 102

8 - 48

85 - 103

38 - 66

80 - 105

41 - 65

86 - 95

85 - 105

82 - 96

CV (%) **

2 - 12

3-6

3-9

1-5

4 - 11

3-9

3 - 13

6 -15

4-8

2-8

3-8

4 - 11

Al

As

Ca

Cd

Cr

Cu

Fe

Hg

Mg

Mn

Pb

Zn

HNO3 (mol/l)

14,0

2,8

14,0

1,4

14,0

2,8

14,0

14,0

2,8

2,8

2,8

HCl (mol/l)

12,0

2,4

12,0

1,2

12,0

2,4

12,0

2,4

12,0

2,4

2,4

2,4

20

20

20

20

20

20

20

10

20

20

20

20

Partcula (m)

< 62

< 62

< 62

< 62

< 62

< 62

< 62

< 62

< 62

< 62

< 62

< 62

Extrao (%) *

3 - 38

73 - 95

21 - 92

91 - 105

4 - 37

88 - 95

25 - 70

70 - 102

37 - 72

78 - 98

91 - 98

72 - 97

CV (%) **

6 - 19

2-8

7 - 13

4-8

2-9

5 - 18

7 - 11

12 - 25

3-9

4 - 11

7 - 11

3-8

Banho

Tempo (min)

* Faixa de extrao e ** faixa de coeficientes de variao obtidos utilizando-se diferentes amostras.

Francisco Jos Krug, fjkrug@cena.usp.br. VI Workshop sobre Preparo de Amostras, Santa Maria, 2006.

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Francisco Jos Krug, fjkrug@cena.usp.br. VI Workshop sobre Preparo de Amostras, Santa Maria, 2006.

4. ANLISE DIRETA DE SLIDOS E SUSPENSES

Dentre os diversos tipos de amostras submetidas anlise elementar, uma grande


parte se encontra na forma slida. A forma mais usual de realizar esse tipo de anlise tem
sido a converso da amostra slida em uma soluo por meio de procedimentos de
decomposio por via seca ou via mida para compostos orgnicos, dissoluo cida para
slidos inorgnicos ou por fuso para matrizes inorgnicas refratrias [SULCEK e
POVONDRA]. No entanto, de um modo geral, esses mtodos de tratamento de amostra
consomem muito tempo, podendo variar de 5 min a 48 h ou mais, dependendo da
complexidade da matriz. Alm disso, sempre h um maior risco de ocorrncia de erros
sistemticos como contaminaes ou perdas por volatilizao com prejuzo para a exatido
e a preciso dos resultados analticos.
Nesse contexto, a possibilidade para se analisar diretamente as amostras slidas
sem nenhum ou com o mnimo tratamento prvio deve ser vista como uma boa alternativa
[JACKSON, 1999]. De um modo geral, a anlise direta de slidos apresenta importantes
vantagens quando comparada aos procedimentos convencionais: (1) simplificao no prtratamento da amostra diminuindo-se o tempo gasto nessa etapa, aumentando-se, assim, a
freqncia analtica, (2) minimizao dos riscos de contaminao devido ao uso de
quantidades reduzidas de reagentes, pouca manipulao ou baixa exposio ao ambiente,
(3) minimizao das perdas do analito de interesse, (4) menor periculosidade devido no
necessidade de utilizar reagentes txicos ou corrosivos, (5) minimizao da gerao de
resduos, (6) maior poder de deteco, uma vez que as amostras no so diludas, e (7)
possibilidade de se analisar pequena quantidade de amostra [KURFRST, 1998].
Apesar das diversas vantagens associadas anlise direta de slidos, existem
algumas dificuldades que ainda precisam ser vencidas. A anlise de diminutas massas de
amostras reflete em resultados com baixa preciso devido, principalmente, falta de
homogeneidade do material. Nessa situao, importante considerar que a massa mnima
para anlise represente a amostra como um todo sem prejuzos para a preciso e exatido
dos resultados.
A calibrao um outro desafio da anlise direta de slidos que merece destaque.
Embora solues de referncia possam ser empregadas nas calibraes, em muitos casos,
materiais de referncia certificados (CRM) so necessrios. No entanto, os CRM disponveis
comercialmente apresentam homogeneidade garantida para massas que variam entre 100 e
500 mg [ZEISLER, 1998], muito superiores quelas comumente empregadas em anlise
direta de slidos. Nesse contexto, importante produzir novos materiais e avaliar a

Francisco Jos Krug, fjkrug@cena.usp.br. VI Workshop sobre Preparo de Amostras, Santa Maria, 2006.

Anlise direta de slidos

90

aplicabilidade dos materiais existentes nas calibraes ou validaes de mtodos em


procedimentos de microanlise, ou seja, anlises que envolvem massas inferiores a 10 mg
de amostra. Cabe ressaltar que o NIST (National Institute of Standard and Technology,
Gaithersburg, MD, USA) est direcionando esforos para produzir esses novos materiais.
Atualmente, existe disponvel no mercado um material certificado para microanlise, o
sedimento marinho (NIST SRM 2703), cuja homogeneidade garantida para massa igual ou
superior a 0,7 mg [MAY e WATTERS, 2004].

4.1. ANLISE DIRETA DE SLIDOS: ASPECTOS GERAIS

Cassiana Seimi Nomura


Pedro Vitoriano de Oliveira
4.1.1. Homogeneidade e massa de amostra
Considerando a quantidade de amostra, a SS-ETAAS pode ser classificada como a
tcnica que pratica desde a semimicroanlise, para massas de at 25 mg, at a
ultramicroanlise, para massas de at 20 g. Esses termos esto inseridos dentro do
contexto de microqumica que pode ser definida como uma parte da qumica analtica que
extrai informaes analticas a partir de quantidades de amostra muito pequenas (< 10 mg)
[STOEPPLER et al, 2001]. Algumas dessas classificaes esto apresentadas na Tabela
4.1 [GRANT e GRANT, 1987].
Tabela 4.1 - Magnitude da anlise expressa com relao massa de amostra empregada
Nome

Massa de amostra (g)

Macroanlise

> 0,1

Mesoanlise (semimicroanlise)

0,1 0,01

Microanlise

10-2 10-3

Submicroanlise

10-3 10-4

Ultramicroanlise

< 10-4

Apesar da possibilidade de analisar massas de amostras to pequenas ser uma das


grandes vantagens associadas SS-ETAAS, essa mesma caracterstica se torna um
grande desafio, pois obter resultados precisos e exatos nessas condies no uma tarefa
Francisco Jos Krug, fjkrug@cena.usp.br. VI Workshop sobre Preparo de Amostras, Santa Maria, 2006.

Anlise direta de slidos

91

trivial. Em geral, massas muito pequenas (< 100 mg) tendem a comprometer a
representatividade e a homogeneidade, uma vez que os elementos traos podem no estar
homogeneamente distribudos nos materiais [PAUWELS et al, 1994]. Quando a amostra
subdividida em pores cada vez menores, ela tende a se tornar cada vez mais no
homognea, pois a probabilidade de se encontrar a mesma concentrao mdia de uma
determinada espcie na poro menor (Figura 4.1).

a)

b)

Figura 4.1 - Diagrama representativo da homogeneidade de um analito () para diferentes


sub-amostragens: (a) grande massa de amostra e (b) pequena massa de amostra
Quando um material homogneo se torna heterogneo para pequenas massas de
amostra, deve-se estabelecer uma massa mnima que seja representativa do todo para
garantir a preciso e a exatido dos resultados analticos [PAUWELS et al, 1994].
A influncia da massa de amostra sobre a preciso dos resultados analticos foi
avaliada por Rossbach e colaboradores [ROSSBACH et al, 1998], quando verificaram que o
desvio padro relativo (RSD) das medidas diminuiu de 50% para 0,5% quando massas de
amostras analisadas foram aumentadas de 0,01 mg para 100 mg.
Considerando a homogeneidade de materiais, pode-se dizer que a maioria dos
slidos, com raras excees, como algumas ligas metlicas e vidros, uma mistura
heterognea. Materiais biolgicos, geolgicos e ambientais so caracteristicamente no
homogneos sendo as rochas, os solos e os sedimentos, os materiais que apresentam
composies mais heterogneas [JACKSON, 1999].
A boa homogeneidade pr-requisito para anlise direta de amostras slidas
[ZEISLER, 1998]. Esse parmetro depende de fatores como o tipo de material, a massa de
amostra a ser utilizada e a concentrao do elemento de interesse. Experincias tm
mostrado que a heterogeneidade encontrada em pequenas massas de amostras
geralmente conseqncia da presena de partculas grandes chamadas nuggets, nas
quais podem estar contidas concentraes de elementos traos muito maiores do que
Francisco Jos Krug, fjkrug@cena.usp.br. VI Workshop sobre Preparo de Amostras, Santa Maria, 2006.

Anlise direta de slidos

92

aquelas encontradas em toda a amostra [KURFRST, 1993]. Uma maneira de contornar


esse tipo de problema reduzir o tamanho das partculas das amostras, utilizando eficientes
procedimentos de moagem.
A homogeneizao uma das etapas mais importantes e crticas do processo de
produo de CRMs. Esses materiais so muito importantes na Qumica Analtica e atuam
como a principal fonte de avaliao da exatido dos mtodos propostos. Desse modo,
importante que as caractersticas desses materiais, entre elas, a homogeneidade sejam bem
definidas. A maioria dos CRMs atualmente disponveis comercialmente apresenta
homogeneidade garantida somente para massas elevadas de amostra, variando entre 100 e
500 mg [ZEISLER, 1998]. Isso um problema, pois tcnicas que praticam a microanlise
utilizam massas de amostra, geralmente, inferiores a 10 mg. Considerando a escassez de
CRMs para microanlise, necessrio que esforos sejam direcionados nesse sentido.
Avaliao da microhomogeneidade
De acordo com o Guia ISO 35 [ISO GUIA, 1989], um material perfeitamente
homogneo com relao a uma determinada caracterstica, se ao comparar duas partes
distintas do mesmo material, no houver diferena nos valores dessa caracterstica. Na
prtica, um material pode ser considerado homogneo com relao a uma caracterstica se
a diferena entre o valor de uma parte com relao outra parte no puder ser identificada
experimentalmente. O conceito bsico de homogeneidade, portanto, engloba tanto a
caracterstica como o parmetro da medida (geralmente o desvio padro), incluindo a massa
de amostra da poro testada.
Na prtica, o grau de homogeneidade pode ser determinado fazendo-se medidas de
uma propriedade (por exemplo, concentrao de um elemento) em uma pequena unidade
(por exemplo, massa de amostra), utilizando uma tcnica de preciso relativamente elevada.
Segundo Pauwels e colaboradores [PAUWELS et al, 1994] a escolha da tcnica um fator
importante e deve ser realizada considerando-se alguns requisitos:

No deve requerer pr-tratamento da amostra para evitar perda de analitos e


riscos de contaminaes. Desse modo, incertezas provenientes de processos
de digesto no influenciaro na variao das medidas.

Deve possibilitar uma anlise suficientemente precisa de pequenas massas


de amostras, preferencialmente menor que 1 mg.

Deve apresentar, preferencialmente, uma elevada freqncia analtica, para


que um grande nmero de anlises possa ser efetuado em um curto espao
de tempo.

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Anlise direta de slidos

93

Considerando essas caractersticas, a SS-ETAAS uma tcnica que se mostra


bastante conveniente para essa tarefa. Por isso vem sendo utilizada na avaliao da
homogeneidade de diversos tipos de materiais.
Informaes a respeito da homogeneidade de amostras foram inicialmente propostas
por Igamells e Switzer [INGAMELLS e SWITZER, 1973], quando apresentaram a constante
de amostragem (KS) para estimar a impreciso de resultados devido a erros de amostragem
(Equao 4.1):
RSD = (KS/m)1/2

(Equao 4.1)

De acordo com essa equao, KS pode ser estimada pelo RSD das medidas das
sub-amostragens de massa m. Porm, um grande problema dessa aproximao que erros
aleatrios provenientes dos procedimentos analticos no so considerados. Nesse caso,
dever-se-ia considerar essas outras incertezas (SH) de acordo com a Equao 4.2.
SH2 = RSD2 - (outras incertezas)2

(Equao 4.2)

Enquanto KS foi originalmente proposta para estimar a homogeneidade de massas


relativamente altas de amostras geolgicas, Kurfrst [KURFRST et al, 1993] introduziu o
conceito de constante de homogeneidade, He (Equao 4.3) visando pequenas massas de
amostras:
He = SH * m1/2

(Equao 4.3)

O erro de amostragem SH de uma determinada massa de amostra m (em mg) pode


ser estimado diretamente a partir dos valores de RSD das medidas, considerando os erros
randmicos do procedimento analtico. Como a massa de amostra m empregada nessa
avaliao tipicamente 1 mg, He representa a impreciso devido ao erro de amostragem
para uma unidade de massa (1 mg). Quando o fator de homogeneidade menor do que 10
(He < 10), o material pode ser considerado suficientemente homogneo.
Aplicando essa equao, Rossbach e colaboradores [ROSSBACK et al, 1998]
investigaram a homogeneidade de materiais de referncia de algas. Nesse estudo, os
autores observaram que os materiais apresentavam boa homogeneidade (He < 10) para As,
Cd, Co, K e Zn e eram no homogneos para Na, Cr, Fe e Br. Ainda nesse estudo, os
autores observaram que enquanto He assegura a incerteza somente devido
heterogeneidade do material, o coeficiente de variao estaria relacionado incerteza

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Anlise direta de slidos

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devido massa de amostra utilizada. Nesse caso, os valores certificados poderiam ser
escritos como:
mdia He m-1/2 %, m= massa de amostra (mg)

(Equao 4)

Por exemplo, estabelecendo He = 5 e concentrao de Cd igual a 200 ng g-1, o


coeficiente de variao poderia ser calculado substituindo-se o valor da massa de amostra
empregada na equao 2. Desse modo, nas determinaes de Cd em algas, os autores
verificaram que o coeficiente de variao quando 0,01 mg de amostra eram analisadas, era
de 50%, enquanto que, para massas de 10 e 100 mg, os desvios no ultrapassam de 1,58%
e 0,5 %, respectivamente.
Do mesmo modo, na avaliao da microhomogeneidade de Cd em amostras de
plsticos certificados proposta por Pauwels [PAUWELS et al, 1993], foi verificado que
massas de 13 a 27 mg de amostra poderiam ser utilizadas sem comprometer a
representatividade da mesma. Em reviso sobre a tcnica de amostragem direta de slido
por espectrometria de absoro atmica escrita por Langmyhr [LANGMYHR, 1985], tambm
consta que amostragens de massas de amostra entre 0,1 e 10 mg podem ser feitas para
diversos tipos de materiais sem comprometer a representatividade e os resultados
analticos.
Por outro lado, Belarra e colaboradores [BELARRA et al, 1997] demonstraram que
massas muito elevadas tambm podem gerar resultados inexatos em SS-ETAAS. O estudo
que visava a determinao de cobre em complexo vitamnico mostrou que o uso de
elevadas massas de amostra gerava resultados superestimados, provavelmente devido
influncia do resduo da matriz presente no atomizador. Para Nakamura e colaboradores
[NAKAMURA et al, 1992], 0,2 a 1 mg (dependendo do analito) de amostra de rochas
silicosas eram suficientes para serem analisadas. Segundo os autores, elevadas massas de
amostra introduzida no atomizador podem inibir a difuso do vapor atmico. Por outro lado,
Hinds e Kogan [HINDS e KOGAN, 1994] atribuam a obteno de baixo sinal analtico para o
silcio na sua determinao em ouro, ao fato das partculas agirem como superfcies
absorvedoras dos tomos dos analitos na fase gasosa.
Influncia do tamanho de partcula na homogeneidade
Muitos autores tm observado que h melhora da preciso, entre replicatas da
mesma amostra, quando o tamanho das partculas reduzido. Em geral, a homogeneidade
desejada

assegurada

pela

estreita

distribuio

do

tamanho

preferencialmente inferiores a 10 m [KURFRST, 1998 e ZEISLER, 1998].

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de

partculas,

Anlise direta de slidos

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Fuller e colaboradores [FULLER et al, 1981] mostraram que as partculas das


amostras de dixido de titnio deveriam apresentar dimetros mdios inferiores a 25 m,
enquanto Nakamura e colaboradores [NAKAMURA et al, 1992] observaram melhora na
preciso quando as amostras de rochas foram modas at um tamanho de partcula que
variavam de 0,3 a 25 m.
A diminuio do tamanho de partcula uma forma de homogeneizar o material e
pode ser feita por meio de procedimentos de moagem. Existem diversos tipos de moinhos
que podem ser utilizados para essa finalidade entre eles, os moinhos de jato de ar,
criognicos e mecnicos. A escolha do moinho depende de diversas propriedades da matriz
como a dureza e a quantidade de fibras e gorduras presentes na mesma (algumas
informaes sobre moagem so apresentadas no Captulo 3).
Influncia do tamanho de partcula na atomizao eletrotrmica
Sinais transientes de absorbncia provenientes de elementos que se encontram em
soluo e daqueles que esto associados matriz podem apresentar diferenas no tempo
de aparecimento e na durao. O sinal de absorbncia para o Pb, proveniente da
suspenso de sedimento, por exemplo, possui um maior tempo de durao em relao ao
sinal obtido com soluo aquosa. Essas diferenas se devem principalmente s condies
do forno, aos efeitos de transferncia de calor, cintica de evaporao do analito e s
foras fsicas e qumicas existentes entre o analito e a matriz slida [JACKSON, 1998].
Muitas vezes, quando a amostra introduzida na forma de soluo, a etapa de secagem do
programa de aquecimento resulta em uma deposio uniforme dos microcristais dos sais. A
maioria dessas partculas entra em contato direto com a superfcie da plataforma de grafite e
como os tamanhos das partculas so muito menores, quando comparado a grande massa
de grafite, o efeito de transferncia de calor se torna desprezvel. No entanto, quando uma
amostra slida introduzida, a distribuio das partculas sobre a plataforma j no mais
to uniforme. Nesse caso, a transferncia de calor para partculas maiores, em relao aos
microcristais obtidos das solues, menor, resultando, assim, no alargamento do sinal de
absorbncia.
Um outro aspecto que dificulta o processo de atomizao a velocidade de difuso
do analito atravs da amostra. Nesse contexto, o tamanho da partcula se torna um
parmetro crucial, uma vez que o tempo de migrao do analito depender do dimetro
mdio da partcula, ou seja, quanto maior a partcula, maior ser a dificuldade para o analito
se libertar da mesma, alterando, assim, a cintica de atomizao. Em solues aquosas,
essas variaes cinticas so desprezveis quando a medida do sinal analtico de
absorbncia for feita em rea de pico. No entanto, para a anlise direta de slidos, o

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Anlise direta de slidos

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alargamento do pico pode estar relacionado no somente a parmetros cinticos, como


difusionais e de ocluso.
A baixa eficincia de atomizao, provocada pela dificuldade de difuso do analito,
foi verificada por Bendicho e Loos-Vollebregt [BENDICHO e DE LOOS-VOLLEBREGT,
1990] na determinao de Cu, Co Cr, Mn, Fe e Ni em vidro. O tempo de aparecimento do
sinal de absorbncia de Mn e Fe, em amostras de p de vidro introduzidas na forma de
suspenso, era maior em relao queles obtidos com solues aquosas. Estudos de
microscopia revelaram que as partculas de vidros se fundiam durante a etapa de secagem
e se aglomeravam formando gotas grandes. Essas, por sua vez, atuavam como uma
barreira aos analitos, dificultando sua libertao.
Takada e Hirokawa [TAKADA e HIROKAWA, 1982] observaram que a rea
superficial das partculas exerce importante influncia sobre o processo de atomizao do
Cu em amostras de ao. Segundo os autores, quando sucessivos procedimentos de
atomizao so aplicados a uma amostra com partculas de forma esfrica, somente aps n
atomizaes, o sinal de absoro desaparece. Isso ocorre, pois cada esfera subdividida
em vrias camadas com uma determinada espessura (d), como apresentado na Figura 4.2.

3 2 1

d d
d

Figura 4.2 - Modelo das repetidas atomizaes para amostras com partculas esfricas.
FONTE: Takada, K.; Hirokawa, K; Fresenius Z. Anal. Chem., v.312, p.109-113,1982.

Durante a primeira atomizao, o Cu presente na camada mais externa vaporizado


(camada 1) enquanto o Cu da segunda camada se difunde para a primeira e da terceira,
para a segunda e assim sucessivamente. Na segunda atomizao, o Cu da camada mais
externa atomizado e todo o processo de difuso se repete. Sendo assim, de acordo com o
modelo proposto possvel entender que, quanto maior o tamanho da partcula, maior
tempo ou temperatura de atomizao sero necessrios para atomizar todo o analito.

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Anlise direta de slidos

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4.1.2. Anlise direta aplicada em tcnicas espectroscpicas


A anlise direta de slidos pode ser feita seguindo dois procedimentos distintos: via
suspenso ou amostragem direta [CAL-PRIETRO et al, 2002]. Os dois procedimentos
apresentam todas as vantagens da anlise direta de slidos, como j foi mencionado
anteriormente. A grande vantagem do procedimento que emprega o preparo das
suspenses que o mesmo combina a amostragem slida com a lquida, ou seja, as
amostras podem ser introduzidas no equipamento utilizando o sistema de amostragem de
solues, por exemplo, com um nebulizador pneumtico [ALVES et al, 2001]. No caso da
amostragem direta, necessrio um sistema especial para a introduo da amostra.
Apesar de reunir diversas vantagens, o procedimento de suspenso no est isento
de algumas dificuldades. Entre eles, pode-se destacar como fator crtico, a estabilidade da
suspenso que pode comprometer a reprodutibilidade na amostragem e conseqentemente,
a preciso dos resultados. Um outro fator que deve ser rigorosamente controlado o
tamanho de partculas, pois esse pode prejudicar a eficincia no transporte ou causar
entupimento dos nebulizadores.
A anlise direta de slido seja na forma de suspenso ou amostragem direta pode
ser efetuada utilizando-se diversas tcnicas analticas. Algumas mais tradicionais como a
espectrometria de emisso ptica com fonte de arco e centelha (SS OES) possui baixa
preciso, a espectrometria de fluorescncia de raio-X (XRFS) apresenta baixa sensibilidade
e a anlise por ativao de nutron (NAA), requer instrumentao complexa e de alto custo.
Nos ltimos anos, muitos esforos foram centralizados na tentativa de adaptar a anlise
direta de slidos a outras tcnicas espectroanalticas, como a espectrometria de emisso
ptica com plasma de argnio induzido (ICP OES), a espectrometria de massas acoplada a
fonte de plasma (ICP-MS),ou a espectrometria de absoro atmica com chama (FAAS) e
com atomizao eletrotrmica (ETAAS) [JACKSON, 1999] .
Apesar dos inmeros esforos que tem sido realizados para adaptar essas tcnicas
espectroscpicas anlise direta de slidos, pode-se dizer que nenhuma delas se mostra
inteiramente satisfatria. Idealmente, um mtodo de anlise direta de slidos deve
apresentar alguns atributos listado a seguir [KURFRST, 1998]:
(i) Deve ser aplicvel a uma grande variedade de amostras
(ii) Deve ser relativamente rpido
(iii) A padronizao deve ser simples
(iv) Deve possibilitar a anlise de elevadas massas de amostra para evitar problemas
de homogeneidade
(v) desejvel que seja multielementar
(vi) O custo por anlise deve ser o mais baixo possvel
(vii) Deve apresentar boa preciso e exatido
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Anlise direta de slidos

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A ICP OES e ICP-MS so excelentes fontes de vaporizao, atomizao, ionizao e


excitao de espcies qumicas. Na maioria das aplicaes analticas, a amostra
convertida em soluo antes de ser introduzida no equipamento. Esse requerimento deriva
da vasta experincia da nebulizao dos lquidos que facilitou o desenvolvimento incial dos
plasmas analticos. No entanto, no h nenhuma limitao que impea o uso dos ICPs para
anlise direta de slidos. Pelo contrrio, as caractersticas dessas fontes como a elevada
energia do plasma, que melhora a eficincia de atomizao, torna os ICPs potencialmente
atrativos para essa funo. Em anlise direta de slidos por ICPs, importante adaptar os
espectromtros com sistemas de introduo de amostra especficos [BOUMANS, 1987].
Os nebulizadores com ranhura em V e fluxo cruzado so comumente empregados
para introduo de solues ou suspenses [MONTASSER e GOLIGHTLY, 1992], enquanto
a ablao a laser [RUSSO et al, 2002] e vaporizao eletrotrmica [BELARRA et al, 2002]
possibilitam a amostragem direta de slidos. Segundo Silva e colaboradores [SILVA et al,
2002], a principal dificuldade encontrada na utilizao de nebulizadores para a introduo de
suspenses est relacionada ao tamanho de partculas que deve ser rigorosamente
controlado para que a eficincia no transporte e a sensibilidade no sejam prejudicadas.
No sistema de ablao a laser, a introduo da amostra ocorre aps a volatilizao
de uma pequena frao de amostra a partir da ao de um laser de baixa freqncia.
Embora esse sistema apresente como as principais vantagens a possibilidade de utilizar
pequenas massas de amostras ( microgramas), e permitir a caracterizao espacial de
homogeneidade da amostra, ela apresenta algumas limitaes que impedem a sua larga
utilizao em laboratrios de rotina. O alto custo, a baixa eficincia no transporte, a
necessidade de um rigoroso controle sobre o tamanho de partculas e a dificuldade
encontrada na calibrao so alguns exemplos.
A atomizao eletrotrmica, por sua vez, apresenta algumas vantagens quando
comparada aos nebulizadores pneumticos ou sistemas de ablao a laser. Sua elevada
eficincia no transporte (100%) possibilita analisar pequenas massas de amostras e fornece
limites de deteco superiores queles obtidos por tcnicas que empregam nebulizadores
pneumticos. Adicionalmente, o programa de aquecimento possibilita a remoo da matriz,
o qual minimiza os problemas de interferncias.
Assim como os ICPs, a FAAS que tambm conhecida por analisar, comumente,
amostras na forma de soluo, possibilita a anlise na forma de suspenso ou slido direto.
No entanto, a nebulizao de suspenses apresenta baixa eficincia de transporte e baixa
eficincia de atomizao, pois as partculas slidas so mais difceis de serem dissociadas
quando comparadas s solues. Adaptando um sistema especial para introduo de
amostra slida na chama, Flores e colaboradores [FLORES et al, 2002; FLORES et al, 2001
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Anlise direta de slidos

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e FLORES et al, 2004] tornaram possvel a determinao direta de Cd, Cu e Mn em


sedimentos, fgado bovino e carvo, respectivamente. Os resultados obtidos foram
satisfatrios, mas a necessidade de um controle rigoroso no tamanho das partculas visando
eficincia do transporte foi uma das dificuldades que teve que ser superada. Outro
problema relacionado ao procedimento proposto a necessidade de construir a curva
analtica de calibrao com materiais de referncia que possussem composio semelhante
s das amostras, pois a composio da matriz afetava os processos de transporte e
atomizao. Desse modo, o uso de materiais de referncia certificados foi praticamente
obrigatrio.
A ETAAS apresenta algumas caractersticas que favorecem a amostragem direta de
slidos, seja na forma de suspenso ou na forma de introduo direta de slidos
[JACKSON, 1999]: (1) o programa de aquecimento que permite o pr-tratamento trmico da
amostra, sobretudo durante a etapa de pirlise, facilita a remoo de parte dos
concomitantes que podem provocar interferncias durante a atomizao; (2) pequenas
quantidades de amostras podem ser analisadas; e (3) apresenta boa seletividade e
sensibilidade. Alm disso, os problemas relacionados ao sistema de transporte so
praticamente inexistentes, uma vez que o transporte das suspenses feito por
amostragem discreta (no depende de nebulizadores), enquanto os slidos so pesados
diretamente nas plataformas de grafite que so, posteriormente, introduzidas no atomizador
eletrotrmico. A adequada otimizao dos programas de aquecimento, aliada ao uso de
modificadores qumicos tem possibilitado a calibrao do equipamento com solues de
referncia. Devido todas essas caractersticas, SS-ETAAS tem se mostrado muito atrativa
e promissora para a determinao de elementos em nveis de traos e ultra-traos em
diversos tipos de amostras slidas e vem se concretizando como uma alternativa rpida e
simples [JACKSON, 1999 e KURFRST, 1998].

4.1.3. Anlise direta de slidos por ETAAS: Caractersticas e aplicaes


Devido todas as caractersticas da ETAAS e sua versatilidade para ser aplicada
em anlise direta de slidos, nesse tpico ser feita uma breve apresentao da tcnica
visando aspectos histricos assim como as suas principais aplicaes que so [BELARRA
et al, 2002]:
(i)

Anlise de materiais refratrios de difcil decomposio

(ii)

Anlise de materiais de alta pureza

(iii)

Anlise de pequenas quantidades de amostra

(iv)

Avaliao da microhomogeneidade

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Anlise direta de slidos

100

Espectrometria de absoro atmica com amostragem direta de slidos Abordagem histrica


A SS-ETAAS quase to antiga quanto prpria tcnica de AAS. Boris L Vov foi um
dos pioneiros, quando testou o desempenho do seu modelo de forno de grafite aps a
amostragem direta de NaCl, visando determinao elementar de Cu [LVOV, 1984 e
LVOV, 1976]. O primeiro forno de grafite idealizado por LVov apresentava uma
configurao que era bastante adequada para amostragem direta de slidos [LVOV, 1984].
Na simplificao do modelo, posteriormente proposta por Massmann, e que foi aquela
adotada pela maioria dos fabricantes, a amostragem direta de slidos no era to trivial
[MASSMANN, 1968]. Acredita-se que por esse motivo, a tcnica de ETAAS utilizada at
hoje predominantemente para a anlise de amostras na forma de soluo aquosa
[JACKSON, 1999].
Ao longo do desenvolvimento instrumental da ETAAS, diversos acessrios e
modificaes nos fornos surgiram na tentativa de facilitar e permitir a anlise direta de
slidos [KURFRST, 1998 e WELZ e SPERLING, 1999]. conveniente salientar que
nesses trabalhos iniciais as adaptaes eram feitas no sentido de viabilizar a introduo de
amostra slida em um atomizador convencional utilizado para amostragem de solues
aquosas.
Apesar do interesse na anlise direta de slidos por ETAAS, as pesquisas que
culminaram em um modelo de forno de grafite designado para essa finalidade se
intensificaram a partir da dcada de 80 [JACKSON, 1999]. Dois fatores podem ser atribudos
a esse crescente interesse: o surgimento dos tubos de grafite com aquecimento transversal,
que conferem maior isotermicidade durante a atomizao, e o uso de corretores de radiao
de fundo baseados no efeito Zeeman, que apresentam melhor eficincia do que os
corretores com lmpada de deutrio.
Atualmente, encontra-se comercialmente disponvel um modelo de espectrmetro de
absoro atmica com atomizao eletrotrmica que opera no modo convencional, com
soluo aquosa, ou com amostragem direta de slidos. Nesse equipamento, a amostra
slida pesada diretamente sobre uma plataforma de grafite piroltico (Figura 4.3), que
inserida no interior do tubo de grafite por uma janela lateral com auxlio de uma pina
[FRIESE e KRIVAN, 1998]. Esses sistemas de amostragem podem ser muito simples, com
operao manual (Figura 4.4a), ou mais sofisticados, com as operaes totalmente
automatizadas (Figura 4.4b).

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Anlise direta de slidos

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Figura 4.3 - Plataforma de grafite piroltico utilizada em SS-ETAAS


FONTE: AnalytikJenaAG (www.analytik-jena.de)

a)

b)

Figura 4.4 - Fotografias de amostradores de slidos: (a) manual e (b) automtico.


FONTE: AnalytikJenaAG (www.analytik-jena.de)

Anlise de materiais refratrios de difcil solubilizao


A possibilidade de analisar materiais slidos diretamente sem a necessidade de
digesto um atrativo da SS-ETAAS, principalmente nos casos em que as amostras so de
difcil decomposio. Em geral, esse tipo de amostra requer condies drsticas para que a
solubilizao completa seja alcanada. A elevada temperatura e/ou presso, e a
necessidade de utilizar misturas de diferentes reagentes so alguns exemplos. Existem
ainda situaes nas quais a solubilizao da amostra alcanada somente mediante
procedimentos de fuso. importante salientar que, nesses casos, a introduo de
contaminao bastante provvel e o elevado teor salino da soluo final pode
comprometer a posterior deteco.
Schffer e Krivan [SCHFER e KRIVAN, 2001] verificaram que a determinao direta
de alguns elementos em amostra de carbeto de silcio por SS-ETAAS era muito mais
atrativa, simples e rpida do que aquela obtida aps submet-la a digesto cida. No
procedimento desenvolvido, a determinao era efetuada em alguns minutos, enquanto o
processo de digesto demorava cerca de 12 h e deveria ser feito em sistema fechado (alta

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Anlise direta de slidos

102

presso) utilizando misturas de cidos concentrados (HF, HNO3 e H2SO4). A digesto de


amostras de xidos de tungstnio tambm bastante demorada (6 horas) e requer
condies drsticas para ocorrer (sistema de alta presso, alta temperatura e uso de mistura
de reagentes). No entanto, Hornung e Krivan [HORNUNG e KRIVAN, 1999] desenvolveram
um procedimento rpido (3 a 6 minutos) para determinao direta de algumas impurezas
nesse tipo de amostra. Da mesma maneira, Krivan e Janickova [KRIVAN e JANICKOVA,
2005] determinaram 9 impurezas em xido de zircnio de alta pureza. Segundo os autores,
a tcnica SS-ETAAS apresenta limites de deteco muito melhores que os procedimentos
convencionais. Alm disso, por possibilitar a separao analito/matriz in situ, o tempo de
anlise pode ser reduzido de algumas horas para somente alguns minutos.

Anlise de materiais de alta pureza


Ao contrrio do que ocorre em procedimentos de digesto, o risco de contaminao
em SS-ETAAS muito menor, uma vez que a manipulao e o uso de reagentes so
mnimos. Com isso, a tcnica pode ser caracterizada por apresentar baixo valor do branco
analtico e de limite de deteco. Alm disso, como a SS-ETAAS apresenta a elevada
sensibilidade como uma de suas principais caractersticas, ela tem sido intensamente
empregada nas determinaes de alguns elementos em materiais tecnolgicos de alta
pureza. O carbeto de silcio [SCHFER e KRIVAN, 2001] e xido de tungstnio [HORNUNG
e KRIVAN, 1999], anteriormente mencionados so alguns exemplos.
Huang e Krivan [HUANG e KRIVA, 2000] tambm desenvolveram um procedimento
que possibilitou a determinao de algumas impurezas como Al, Co, Cr, Cu, Fe, K, Mg, Mn,
Na, Ni, e Zn em amostras de pentxido de nibio de alta pureza. Muitos desses metais
devem estar presentes na amostra em concentraes inferiores a 0,2 g g-1, pois
dependendo da sua aplicao, a pureza exigida desse material varia de 99,9 a 99,999%.
Para cada determinao, massa de aproximadamente 15 mg de amostra foi necessria. Os
limites de deteco obtidos variaram de 0,5 a 2 ng g-1, ou seja, 330 vezes melhores do que
os obtidos aps digesto e anlise por ETAAS.
Resultados semelhantes foram obtidos por Lucic e Krivan [LUCIC e KRIVAN, 1998],
na determinao de alguns elementos em xido de alumnio de alta pureza. Enquanto os
limites de deteco obtidos na anlise de suspenses por ETAAS e por ICP OES foram de 5
e 130 ng g-1 e 2,1 e 900 ng g-1, respectivamente, para SS-ETAAS, o menor e o maior valor
encontrado foi de 0,5 (Zn) e 25 (Co) ng g-1.
Dong e Krivan [DONG e KRIVAN, 2001] tambm fizeram uso da SS-ETAAS para
determinar Si em amostras de xido de nibio, titnio e zircnio. Como esses materiais tm
importantes aplicaes no campo da alta tecnologia, suas purezas devem ser superiores a
99,997%, especificamente para Si, a concentrao deve ser inferior a 1 g g-1. Dentre vrias
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Anlise direta de slidos

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tcnicas testadas como a anlise de suspenso por ETAAS e ICP OES, ou a anlise direta
de slidos por XRFS e SSMS, a SS-ETAAS foi a que apresentou menores valores de limite
de deteco e a nica que possibilitou a quantificao de Si em amostra de xido de nibio
(1,1 g g-1).

Anlise de pequenas quantidades de amostra


Em certos casos, a determinao de baixa concentrao acompanhada de um
complicador, a quantidade de material disponvel para anlise. Como exemplo, pode-se citar
as investigaes de intoxicao por exposio a metais txicos por meio de anlises de
cabelo, pele, unha, dente, osso, fluidos biolgicos, tecidos biolgicos e saliva. Devido ao fato
de muitos desses materiais serem obtidos por meio de procedimentos como a necrpsia ou
bipsia, nas quais a quantidade retirada muito pequena, o uso da SS-ETAAS para a
determinao elementar se torna uma opo conveniente.
Na tentativa de simular uma situao real de bipsia, Herber e colaboradores
[HERBER et al, 1985] fizeram a determinao de Cd em placenta de rato utilizando dois
procedimentos diferentes: anlise direta e determinao aps decomposio da amostra por
ETAAS. Como resultado, o autor concluiu que a anlise direta era mais rpida e menos
susceptvel contaminao, sendo por isso a mais conveniente nessas situaes. Nordahl e
colaboradores [NORDAHL et al, 1990] tambm fizeram uso da SS-ETAAS e obteve sucesso
na determinao de Al em crebro proveniente de necrpsia e em mucosas retiradas por
procedimentos de bipsia.
A anlise qumica aplicada s investigaes forenses uma outra situao na qual a
disponibilidade de amostra, geralmente, baixa. A anlise de resduos de armas de fogo
(GSR, do ingls, gunshot residues) um exemplo que contribui significantemente na
investigao de casos criminais envolvendo a utilizao de armas de fogo. GSR so
substncias liberadas das armas durante o disparo e que podem, posteriormente, ser
analisadas por diferentes mtodos analticos. Os elementos comumente analisados so o
Pb, Ba e Sb, seguido pelos Sn, Ti, Mn, Hg, Al, Cu, Fe, Si, K e S, pois os mesmos fazem
parte da composio das armas e projteis. De um modo geral, a anlise de GSR permite
desvendar alguns fatos como a reconstruo do evento, encontrar alguma informao sobre
o autor do disparo e obter informaes sobre o tipo de arma e munio utilizadas.
Nesse contexto, muitas tcnicas analticas tem sido utilizadas na determinao de
GSR. Lichtenberg [LICHTENBERG, 1987] avaliou a distribuio de Pb e Sb por SS-ETAAS
na mo de um suspeito que fez disparos com armas de fogo. Nesse estudo, foi possvel
fazer a determinao da concentrao desses elementos ao longo do dedo indicador at
parte da mo onde a arma apoiada. Os resultados mostraram que a concentrao do
elemento de interesse maior na ponta do dedo e na mo, sendo que os menores valores
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Anlise direta de slidos

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encontravam-se ao longo do dedo. Estudo parecido foi proposto por Lcker [LCKER, 1999]
quando verificou a distribuio de Pb nos tecidos musculares de patos, aps disparos com
arma de fogo.
A avaliao de penas de aves como biomonitores de contaminao um outro
exemplo de aplicao da SS-ETAAS na forense ambiental. No estudo conduzido por Hahn e
colaboradores [HAHN et al, 1990], amostragens de pequenas massas ao longo das penas
de aves foram feitas e os resultados mostraram que o Cd e Pb estavam presentes em
maiores concentraes na parte externa da pena (regio mais distante da raiz), indicando
que a contaminao dos animais era exgena (por exemplo, pelo meio ambiente). Ao
contrrio, a concentrao de Hg era praticamente a mesmas ao longo de toda a pena,
indicando contaminao endgena, proveniente de alimentos, por exemplo.
A anlise de cabelo para fins forenses um outro importante exemplo que merece
destaque. O primeiro caso de investigao de envenenamento atravs da anlise de cabelo
foi publicado em 1858, por Hoppe, na Inglaterra, quando determinou As no cabelo de um
cadver exumado 11 anos aps o sepultamento [CASPER, 1997]. Aproximadamente 100
anos depois, em 1954, Goldblum determinou anfetamina em pelos de cobaia. No entanto, a
publicao que realmente garantiu a relevncia do uso de cabelo para determinao de
drogas ocorreu em 1979, quando Baumgartner e colaboradores analisaram opiceos em
cabelo por radioimunoensaio (RIA) aps extrao com metanol [BAUMGARTNER et al,
1997].
Um fato que merece destaque a investigao sobre a morte de Napoleo
Bonaparte na qual, sua sucessiva exposio a As pde ser verificada atravs da anlise de
seu cabelo por NAA. Segmentos do cabelo foram analisados de modo que foi possvel
verificar as diferentes exposies de Napoleo ao As. Isso foi possvel, pois o As ligou-se
irreversivelmente s protenas do cabelo, cujo crescimento dirio do folculo de
aproximadamente 0,35 mm, fazendo com que a distribuio do elemento ocorresse de
forma segmentada [POZEBOM et al, 1999]. Partindo dessa mesma idia, cabelos de uma
populao de um vilarejo no Iraque tambm foram analisados para comprovar a
contaminao por Hg proveniente do trigo (utilizado na fabricao de pes) tratado com
fungicida base de compostos de mercrio [CHAT e KATZ, 1999]. So muitas as
aplicaes voltadas anlise de cabelo. Dentre elas pode-se destacar a determinao de
elementos traos como uma ferramenta para avaliar o estado nutricional ou toxicolgico
[PEREIRA et al, 2004 e CARNEIRO et al, 2002], o impacto ambiental sobre a sade
humana [SENOFONTE et al, 2001 e MORRISSETE et al, 2004], e para desvendar crimes e
investigar casos de morte por envenenamento [BERMEJO-BARRERA et al, 2002 e DANIEL
III et al, 2004].

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Anlise direta de slidos

105

Dentre todas essas aplicaes, a possibilidade em desvendar crimes ou reconstruir


episdios nutricionais ou toxicolgicos do passado torna essa amostra bastante atraente
para ser aplicada na qumica forense. Em geral, nessas situaes, pequenas quantidades
de amostras de cabelo so analisadas, requerendo, portanto uma tcnica como a SSETAAS, que apresenta de elevada sensibilidade e possibilita analisar com preciso e
exatido, diminutas massas de amostras.
Avaliao da microhomogeneidade de materiais
Os CRMs tm papel fundamental no controle de qualidade analtico e tm sido
intensamente utilizados na Qumica Analtica. A necessidade em comparar resultados entre
laboratrios e entre pases cresceu a partir de 1906, perodo no qual a NBS (US National
Bureau of Standards) comeou o programa de fornecimento desse tipo de material. Desde
ento, a confiana em todos os resultados analticos fortemente dependente da
disponibilidade desse tipo de material [ZSCHUNKE, 2000], uma vez que, eles apresentam
caractersticas e concentraes de analitos bem definidas, podendo ser utilizado como
parmetro para verificar a confiabilidade de um mtodo analtico.
Os CRMs so produtos relativamente caros [VENELIOV e QUEVAUVILLER, 2003].
Isso se deve ao fato da sua produo ser bastante complexa e exigir muitos cuidados para
que a qualidade analtica do mesmo seja mantida. Evitar perdas de compostos ou
contaminaes durante a transformao do material ou manter a composio qumica da
mesma so alguns dos cuidados requeridos [PAUWELS et al, 1990]. Alm disso, muitos
desses materiais, principalmente os biolgicos, requerem condies de estocagem
especiais como temperaturas e umidade controladas

[VENELIOV e QUEVAUVILLER,

2003].
Como os CRMs so materiais ou substncias cuja propriedade e homogeneidade
so bem definidas e estabelecidas e por esse motivo, utilizado para certificaes de
mtodos75, o controle sobre o processo de sua produo de extrema importncia e ele
deve ser feito de forma a avaliar a composio do material antes, durante e depois da
produo. A deteco de eventual contaminao ou perda do analito de interesse durante a
produo do material e a avaliao das mudanas na microdistribuio dos elementos nas
amostras so alguns dos controles mais comumente realizados [LCKER et al, 1991 e
PAUWELS et al, 1991].
A SS-ETAAS vem sendo intensamente utilizada para realizar tais controles na
produo e padronizao de diversos tecidos animais utilizados como materiais de
referncia certificados (CRMs). Segundo Pauwells e colaboradores [PAUWELS et al, 1991],
essa tcnica apresenta 3 caractersticas importantes que so exigidas nessa situao: (1) o
mtodo no deve requerer pr-tratamento de amostra para que contaminaes ou perdas
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Anlise direta de slidos

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de analitos por volatilizao sejam evitadas; (2) anlises precisas devem ser realizadas
utilizando massas de amostras muito pequenas (<1 mg); e (3) o procedimento deve ser
rpido e permitir que grande nmero de anlises seja feito em curto espao de tempo.
A aplicao da SS-ETAAS na avaliao da microhomogeneidade de materiais um
dos estudos mais explorados na literatura. Nomura e colaboradores avaliaram a
homogeneidade de Cu e Zn [NOMURA et al, 2005] e de Cd e Pb [NOMURA e OLIVEIRA,
2006] em fgado bovino certificador e alguns materiais preparados no laboratrio. Nesse
estudo, os autores observaram que apesar de o material de referncia certificado (NIST
SRM 1577b) garantir homogeneidade para massa superior a 250 mg, massas inferiores a
0,100 mg puderam ser utilizadas sem perda na preciso e exatido dos resultados
analticos. No estudo visando avaliar a homogeneidade na distribuio de Cd e Pb em
materiais certificados de farinha de trigo e de arroz, fgado e msculo bovino, leite em p,
rim suno, po e peixe, proposto por Mohl e colaboradores [MOHL et al, 1987], as massas
de amostras variaram de 0,04 a 5 mg. Dentre os materiais avaliados, os autores observaram
que a distribuio de Cd em farinha de milho e arroz era homognea, enquanto em fgado
bovino, a heterogeneidade era predominante. Com relao ao Pb, o rim suno mostrou-se o
mais homogneo e o fgado bovino, o menos. Da mesma maneira, Pauwels e colaboradores
[PAUWELS et al, 1993] verificaram que Cd e Pb no esto homogeneamente distribudos
em amostras de msculo de bacalhau certificado. Por outro lado, a distribuio de Hg, Fe e
Zn homognea. Bagschick e colaboradores [BAGSCHIK et al, 1990], por sua vez,
demonstraram que a homogeneidade de Cd, Cu, Ni e Pb em diversos vegetais era bastante
satisfatria, mesmo quando massas de amostra inferiores a 2 mg foram utilizadas.

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Amostragem de suspenses

112

4.2. AMOSTRAGEM DE SUSPENSES

Drio Santos Junior


Francisco Jos Krug
4.2.1. Introduo
A anlise de suspenses tem sido proposta como alternativa para os
procedimentos de decomposio de amostras e determinao de elementos inorgnicos por
diferentes tcnicas

1-5

. Os benefcios freqentemente ressaltados para anlise direta de

suspenses incluem:
(i) diminuio do tempo de preparo das amostras;
(ii) menor consumo de cidos concentrados;
(iii) menor possibilidade de perdas do analito pela formao de resduos
insolveis ou por volatilizao prematura;
(iv) menor possibilidade de contaminao;
(v) facilidade para mecanizao do procedimento de introduo da amostra,
utilizando-se o prprio auto-amostrador do equipamento.
Entretanto, a amostragem de suspenses tambm possui caractersticas restritivas:
(i) a falta de homogeneidade na distribuio do analito na amostra representa
uma limitao para o uso de alquotas menores que 1 mg nos atomizadores
eletrotrmicos ou nos vaporizadores eletrotrmicos;
(ii) dificuldade para encontrar materiais de referncia adequados para a
calibrao, quando no possvel calibrar com padres aquosos;
(iii) altos sinais de fundo podem ser observados, dependendo do comprimento
de onda a ser medido e das caractersticas da matriz;
(iv) dificuldade para obteno de diminutos tamanhos de partculas (geralmente
< 5 m) para introduo em ICPs;
(v) necessrio o uso de suspenses concentradas para a determinao de
baixas concentraes do analito, o que diminui a preciso das medidas,
potencializa os efeitos de matriz, aumenta a formao de resduos carbonceos
para amostras orgnicas e diminui a interao do analito com o modificador
permanente em GFAAS 5,
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Amostragem de suspenses

113

(vi) as suspenses provocam uma diminuio da vida til do atomizador em at


50% quando comparada com a amostragem de solues da amostra
decomposta 6.
Entre as restries expostas, a objeo mais comumente encontrada para
amostragem de suspenses a necessidade de partculas com tamanho diminuto.
importante observar que o tamanho das partculas do material slido tem papel decisivo na
estabilidade das suspenses durante a aspirao, transporte ou introduo da amostra,
assim como na eficincia da atomizao 1. A introduo de suspenses em plasmas, por
exemplo, requer que a eficincia no transporte do analito (i.e. ocluso na partcula) atravs do
sistema de introduo da amostra, bem como a eficincia de atomizao, sejam idnticas
quelas obtidas para o analito em soluo 7. Se esse critrio for alcanado, possivelmente a
curva analtica de calibrao poder ser feita com solues aquosas 2. Em geral, o melhor
tamanho de partcula para introduo de suspenses em plasmas est abaixo de 5 m 2.
Para alcanar uma frao da amostra com esse tamanho de partcula so utilizados
procedimentos de moagem, os quais, dependendo da amostra, podem se estender de
minutos a muitas horas, aumentando a possibilidade de contaminao 2.
Para a introduo de suspenses em GFAAS, alguns autores sugerem que o
tamanho de partculas no deve exceder 30 m

8,9

. Para materiais biolgicos, Miller-Ihli

10

sugere que tamanhos de partculas da ordem de 30 m no so crticos. O melhor tamanho


de partculas depende essencialmente da composio da amostra. Esse efeito mais
acentuado nos sistemas de atomizao com chamas e com plasmas em comparao aos
sistemas eletrotrmicos e, provavelmente por essa razo, tem-se dado maior preferncia
aos sistemas eletrotrmicos na anlise direta de suspenses. De acordo com Miller-Ihli

10

,a

anlise direta de suspenses em espectrometria de absoro atmica com forno de grafite


(GFAAS) pode tolerar partculas de materiais biolgicos com tamanhos at 500 m.
Geralmente, a anlise de suspenses de alimentos por GFAAS no sofre to severamente a
influncia da distribuio do tamanho das partculas como as tcnicas com nebulizao
pneumtica. Embora as partculas possam ter tamanhos variados, o que poderia provocar
possveis problemas com a eficincia de atomizao, o uso de absorbncia integrada com
tempos de residncia longos proporciona determinaes precisas na anlise de
suspenses 11.
Contudo, um dos problemas pertinentes na amostragem direta de slidos e na
amostragem de suspenses refere-se falta de homogeneidade na distribuio dos
elementos qumicos nas amostras para massas menores que 1,0 mg. Por exemplo, a
maioria dos materiais de referncia certificados (CRMs) apresenta homogeneidade atestada
apenas para massas maiores que 100 mg

12

. Dessa forma, as etapas de cominuio das

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Amostragem de suspenses

114

amostras visando uma distribuio granulomtrica mais homognea das partculas, assim
como a representatividade de pequenas massas de amostra necessitam de investigaes
bem detalhadas.
No aspecto da falta de homogeneidade das amostras para massas menores que
1,0 mg, seria difcil compreender, por exemplo, o emprego com sucesso da amostragem de
suspenses na espectrometria atmica com atomizao eletrotrmica, uma vez que massas
menores que 500 g so introduzidas nos atomizadores. No entanto, uma frao
significativa dos elementos determinados parcialmente extrada para fase lquida das
suspenses durante os procedimentos de agitao, aumentando consideravelmente a
massa representativa da anlise.
De acordo com Miller-Ihli

13

, a amostragem de suspenses em GFAAS um

procedimento apropriado para a caracterizao da homogeneidade de materiais slidos.


Contudo, uma questo interessante, principalmente quando so feitos testes de microhomogeneidade, o quanto a alquota introduzida no atomizador representa a massa
utilizada para o preparo da suspenso. Como exemplo, em digestes cidas completas todo
analito presente na amostra est em soluo e a homogeneidade atestada para toda
massa de amostra digerida. Em suspenses a homogeneidade da amostra pode ser
atestada para massas de microgramas ou miligramas, dependendo da percentagem de
extrao do analito para a fase lquida da suspenso. No caso de 0% de extrao, a
amostragem de suspenses oferece um meio reprodutvel e preciso para testar a
homogeneidade na ordem de microgramas, visto que a determinao do analito refere-se
apenas massa de amostra introduzida no atomizador (e.g. 200 g so introduzidos quando
uma alquota de 20 l de uma suspenso 1% m/v utilizada). Porm, 0% de extrao
representa uma situao pouco realista, uma vez que at mesmo uma pequena frao do
analito adsorvido na superfcie da partcula pode ser extrada. Para 100% de extrao a
homogeneidade do material atestada para a massa utilizada no preparo da suspenso. As
massas usadas freqentemente para o preparo das suspenses esto entre 10 e 30 mg,
quando preparadas diretamente no copo do auto-amostrador ou entre 100 mg e 1,0 g,
quando preparadas em bales volumtricos.
Considerando-se que a percentagem extrada para fase lquida represente uma
percentagem equivalente da amostra, a massa representada pela alquota da suspenso
pode ser calculada de acordo com a seguinte equao proposta por Miller-Ihli 14:
Ma = Vs . (Ms / V0) . (1 - fx) + (fx . Ms)
Onde Vs o volume da suspenso (L) depositado no atomizador, Ms a massa utilizada
para preparar a suspenso (mg), V0 o volume de diluente utilizado para preparar a
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Amostragem de suspenses

115

suspenso (L), fx a frao do analito extrado para fase lquida e Ma seria a massa
representada pela alquota da suspenso (mg). Nesse caso, para amostragem de 20 l de
uma suspenso 1 % m/v preparada com 500 mg da amostra e 50 mL do diluente, a
homogeneidade na ausncia de extrao seria atestada para os 200 g depositados sobre a
plataforma. Para extraes de apenas 20%, a homogeneidade seria atestada para 100,16
mg da amostra utilizada no preparo da suspenso. Vale ressaltar que, na maioria dos
mtodos propostos na literatura para amostragens de suspenses, o percentual de extrao
do analito para a fase lquida no informado. Esses dados seriam interessantes para uma
avaliao prvia da homogeneidade das amostras e caracterizao do mtodo analtico.
Bendicho e Loos-Vollebregt

15

concluram que a amostragem de suspenses

proporciona melhor desempenho analtico quando comparada amostragem direta de


slidos. Entre as vantagens da amostragem de suspenses destacam-se, principalmente,
facilidade para efetuar mudanas de concentraes, e facilidade para mecanizao do
procedimento de introduo da amostra, utilizando-se o prprio auto-amostrador do
aparelho, e combinando os benefcios da amostragem simultnea de slidos e lquidos.

4.2.2. Preparo das suspenses


Para garantir que uma alquota representativa da amostra seja introduzida no
tubo de grafite, a suspenso deve ser homogeneizada imediatamente antes da anlise.
Entretanto, para solues aquosas, o material slido facilmente sedimentado devido sua
natureza hidrofbica. A velocidade de sedimentao depende da viscosidade e densidade
do meio diluente, e do tamanho e densidade das partculas 1, 15.
Alguns

experimentos

para

estabilizar

as

suspenses

previamente

determinaes foram feitos com o uso de agentes tixotrpicos, como Viscalex 9 e Glicerol 10.
Em todos os experimentos foram descritos problemas com a repetibilidade proporcionada
pelo auto-amostrador, devido aderncia da amostra nas paredes do tubo de amostragem.
Outros experimentos indicaram que a homogeneizao das suspenses deve ser feita por
agitao

11

. Dentre as tcnicas de homogeneizao de suspenses a agitao ultra-snica

parece ser a mais eficiente, pois proporciona a extrao total ou parcial do elemento de
interesse da fase slida para a fase lquida

1,16

. Em 1989 foi proposto um acessrio

mecanizado de homogeneizao ultra-snica de suspenses para GFAAS

17

. Usando a

agitao ultra-snica, vrios trabalhos com amostragem de suspenses em GFAAS foram


realizados com sucesso 3. Nos ltimos anos o preparo de suspenses tem sido bastante
empregado na anlise de materiais biolgicos e inorgnicos.

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Amostragem de suspenses

116

Embora as pesquisas indiquem a eficcia da amostragem de suspenses em


GFAAS e em outras tcnicas analticas, ainda se faz necessrio o estudo para otimizao
do preparo de amostras para diferentes matrizes. Nesse sentido, alguns trabalhos foram
publicados, e os fatores de maior interesse na otimizao da amostragem tm sido a
homogeneidade, densidade do material slido, tempo de homogeneizao da suspenso,
concentrao da suspenso, distribuio do tamanho das partculas e distribuio do analito
nas partculas 11,12,13,18.
A densidade e o tamanho da partcula tm sido utilizados para determinar o
nmero de partculas inseridas no tubo de grafite. Segundo Miller-Ihli
densidade de 1 g cm

-3

14

, para materiais com

e tamanhos de partcula at 250 m, 20 mg da amostra so

suficientes para preparar 1 mL de suspenso e assegurar um mnimo de 50 partculas em


20 L, enquanto que, para partculas com tamanhos de 500 m, so necessrios 163 mg de
amostra. A densidade tambm deve ser considerada quando for estabelecida a mxima
concentrao da suspenso que pode ser preparada, desde que a razo entre o volume de
slido por unidade de volume do lquido no seja suficiente para prejudicar a eficincia do
auto-amostrador, assim como o observado para suspenses viscosas. Razes menores do
que 0,25 foram determinadas experimentalmente e consideradas aceitveis 11,14.
Preparo de suspenses aps calcinao

O procedimento de calcinao baseia-se na queima da frao orgnica da


amostra com o oxignio do ar, obtendo-se um resduo inorgnico na forma de cinza solvel
em cido diludo. Hoenig e Kersabiec 19 em reviso sobre preparo de amostras descreveram
algumas limitaes dos procedimentos de calcinao, como a volatilizao de alguns
analitos e a insolubilidade do material calcinado.
Devido a problemas de perdas por volatilizao, o procedimento de calcinao
em cadinho aplicvel apenas para elementos metlicos, visto que a maioria dos no
metais oxidada a produtos volteis. s vezes um elemento mais propenso perda por
volatilizao se determinadas espcies estiverem presentes na matriz. O on cloreto, por
exemplo, pode reagir com metais produzindo cloretos volteis. O chumbo e o cdmio so
facilmente perdidos dessa maneira como PbCl2 e CdCl2 volteis. Outra fonte de erro que a
amostra pode reagir com o material do cadinho. A extenso dessa perda depende da
temperatura, do material do cadinho e da composio da amostra. Se o cadinho for de
porcelana ou slica, o elemento pode reagir e ficar aderido nas paredes do cadinho, sendo
perdido nesse tipo de pr-tratamento.
A preparao de suspenses carbonceas um procedimento qumico, no qual
a suspenso obtida aquecendo-se a amostra em cido sulfrico concentrado e diluindo-se
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Amostragem de suspenses

117

a soluo resultante em gua. Fagioli e Landi

20

foram os precursores da utilizao da

oxidao parcial por via mida para materiais biolgicos e subseqente anlise da
suspenso carboncea formada. Embora esses procedimentos proporcionem apenas a
decomposio parcial da matriz, os autores concluram que o procedimento proposto
poderia ser aplicado para todos os tipos de materiais biolgicos.
Preparo de suspenses via processamento de materiais in natura

Os procedimentos de homogeneizao da amostra para o preparo de


suspenses de alimentos, contendo gua e com alto teor de fibras, parecem ser rpidos e
apropriados para amostras com elementos de fcil extrao. Contudo, esses procedimentos
no so apropriados para alimentos com alto teor de gorduras, as quais dificultam ou
impossibilitam uma efetiva reduo do tamanho das partculas.
Fry e colaboradores investigaram o procedimento de homogeneizao para o
preparo de suspenses de alimentos com diferentes homogeneizadores

21-23

. Segundo os

autores, os resultados obtidos para determinao de Cu, Mn, e Zn por espectrometria de


absoro atmica com chama (FAAS) foram concordantes com os valores certificados para
fgado bovino. Os autores tambm determinaram Na e K por espectrometria de emisso
atmica com chama (FAES) em suspenses preparadas a partir de amostras de
sanduches. Nesse trabalho, os autores observaram que os metais alcalinos foram
dissolvidos quantitativamente, quando homogeneizados em gua, e os resultados no foram
afetados quando as partculas slidas foram centrifugadas e os analitos determinados
apenas no sobrenadante resultante

23

. Embora os resultados obtidos por esses autores

sejam interessantes, esse procedimento poderia ser melhor caracterizado como um


procedimento de extrao e no como preparo de suspenses, uma vez que as partculas
slidas foram removidas por centrifugao e apenas o sobrenadante foi utilizado para
analise.
Preparo de suspenses aps moagem de material seco
Vrios procedimentos de moagem mecnica tm sido utilizados para o preparo
de suspenses. A escolha do equipamento adequado depende das caractersticas da
matriz, principalmente da sua dureza. Segundo Kurfrst

24

, materiais biolgicos devem ser

modos usando-se esferas de PTFE em frascos de polietileno. Como alternativas podem ser
usados almofarizes

25-26

e moinho de bolas de gata 9. Geralmente, as tcnicas de moagem

podem ser aplicadas a uma grande variedade de materiais, principalmente se a amostra for
previamente submetida a uma etapa de secagem. Porm, o contato da amostra com peas
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Amostragem de suspenses

118

confeccionadas em ao inoxidvel deve ser evitado, principalmente, para determinao de


Cr, Fe, e Ni. Para amostras nas quais esses metais sejam de interesse analtico, os
materiais mais recomendveis seriam nitreto de silcio e carbeto de boro, os quais oferecem
uma boa resistncia abrasiva e reduzida contaminao

24-25

. Alternativamente, esferas de

27

zircnio podem ser utilizadas , porm pode causar contaminao por Al, Cr, e Fe

25

, no

sendo recomendvel para determinao desses elementos 24.


Vias et al. 28 propuseram um procedimento para preparo de suspenses para
determinao de Ca, Fe, Mg, e Zn em farinhas. Os autores observaram que aps um
perodo de 30 min de moagem em um moinho de bolas, apenas 52 % das partculas tinham
tamanhos menores que 30 m. Os valores de concentrao determinados estavam de
acordo com os valores obtidos para a preparao convencional em dissoluo cida. Os
autores enfatizaram que o procedimento proposto no tinha aplicao geral e que o sucesso
obtido foi devido s caractersticas fsicas do material em suspenso.
Krug e colaboradores determinaram Se e Cd em amostras de peixes

29-30

. Para

determinao de Se 29, as amostras foram congeladas por 3 dias, liofilizadas por mais 2 dias
antes de serem modas em um almofariz e em seguida peneiradas para obteno de
partculas com dimetros em torno de 53 m. Para determinao de Cd

30

, as amostras

foram previamente liofilizadas por 2 dias antes de serem modas em um moinho de bolas,
obtendo-se partculas com dimetros inferiores a 30 m. Nesses trabalhos observa-se que o
procedimento para o preparo das suspenses moroso devido ao alto teor de gua nas
amostras.
Em geral, os procedimentos de moagem convencional so apropriados para o
preparo de suspenses de amostras de alimentos que estejam na forma de p ou que
tenham sido secas antes da moagem, mas no so eficazes para reduo do tamanho de
partculas de alimentos com elevados teores de gua, fibras e gorduras. Para essas
matrizes o procedimento de moagem mais indicado a moagem criognica.
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Francisco Jos Krug, fjkrug@cena.usp.br. VI Workshop sobre Preparo de Amostras, Santa Maria, 2006.

5.

DECOMPOSIO E SOLUBILIZAO DE SLIDOS


INORGNICOS
Antonio Celso Spnola Costa
Francisco Jos Krug

5.1. INTRODUO
A grande maioria das tcnicas analticas utilizadas para determinaes de
elementos em amostras inorgnicas requer que a amostra esteja na forma de uma
soluo aquosa. De um certo modo, correto afirmar que a maioria das tcnicas analticas
trabalha melhor com solues aquosas. Alm disso, as amostras na forma de solues so
mais versteis do que na forma de slidos :
- as curvas analticas de calibrao podem ser feitas com solues-padro de fcil
preparao,
- diluies so simples,
- separaes de constituintes com ou sem pr-concentrao so possveis.
Por outro lado existem vrios inconvenientes: a maioria dos materiais inorgnicos
so inerentemente pouco solveis em gua ou outros solventes, e s podem ser dissolvidos
atravs de drsticas decomposies qumicas. Alm disso, frequentemente nos deparamos
com materiais de difcil dissoluo. No obstante, conveniente recordar que:
existem tcnicas que requerem as amostras na forma de solues, como as clssicas
(volumetria, gravimetria), espectroanalticas (espectrometria de absoro atmica,
espectrometria

de

absoro

molecular,

espectrometria

de

emisso

atmica,

espectrometria de fluorescncia atmica, etc), eletroanalticas (voltametria, amperometria,


potenciometria), cromatogrficas. Deve-se tambm lembrar que pequenas alteraes na
distribuio dos elementos nas amostras originais so mascaradas quando as amostras
estiverem na forma de soluo aquosa, o que necessariamente no constitui uma
desvantagem.
existem tcnicas que so aplicveis a amostras slidas ou lquidas, como anlise por
ativao neutrnica instrumental, fluorescncia de raios X, espectrometria de absoro
atmica, ICP OES, ICP-MS).
existem tcnicas que requerem as amostras na forma slida, como espectrometria de
emisso atmica com arco, fasca, ablao com laser, e aquelas baseadas em reaes
de combusto, por exemplo.

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Decomposio e solubilizao de slidos inorgnicos

123

5.1.1. DEFINIES
Aqui chamada a ateno do leitor para o significado dos termos
"dissoluo" e "abertura" de amostras, conforme sugerem Bock (1979) e Anderson (1991).
Cumpre observar que nos laboratrios de anlises qumicas brasileiros, no se costuma
fazer uma distino muito rgida entre estes termos. Os termos solubilizao e
decomposio, tambm muito empregados, corresponderiam aos termos dissoluo e
abertura, respectivamente. No obstante, o termo digesto de amostras, muito empregado
para materiais orgnicos, tambm muito usado, indiscriminadamente, para decomposio
de outros materiais.
Dissoluo significa que a amostra slida, lquida ou gasosa dissolvida em lquidos
adequados a baixas temperaturas (Bock). No presente captulo, dedicado ao pr-tratamento
de materiais slidos inorgnicos, dissoluo corresponde transformao direta da amostra
em uma soluo, envolvendo ou no uma reao qumica (Anderson) (e.g., uma amostra de
ferro-silcio tratada com uma mistura de HNO3 e HF; a soluo levada secura e o
resduo dissolvido com HNO3 e H2O2 ,dando origem a uma soluo lmpida).
Abertura significa converter a amostra em uma outra forma slida com transformao
qumica (Anderson). A nova forma slida facilmente solvel em soluo aquosa (Ex.: uma
amostra de silicato insolvel superaquecida com um excesso de Na2CO3 at a fuso da
mistura em um produto claro, o qual se solidifica aps esfriar, sendo prontamente dissolvido
com soluo de cido clordrico diludo). Segundo Bock, entende-se por abertura a
decomposio de amostras em altas temperaturas: quando se faz a decomposio por
fuso, utiliza-se a expresso "abertura".
5.1.2. UM PROCEDIMENTO IDEAL PARA A DISSOLUO DE SLIDOS INORGNICOS.
Antes de se proceder a uma descrio dos diferentes mtodos para a
dissoluo de materiais, interessante ter-se uma idia sobre quais seriam as
caractersticas mais desejadas nestes mtodos, ou, qual seria o mtodo ideal.
(i)

Capaz de dissolver a amostra completamente, sem deixar nenhum resduo.

(ii)

Razoavelmente rpido para ser executado, ou apresentar uma taxa de amostragem


compatvel com o mtodo de determinao.

(iii)

Os reagentes utilizados no devero interferir na determinao do analito e/ou na


separao dos constituintes de interesse. Caso contrrio devero ser facilmente
removveis da soluo da amostra.

(iv)

Os reagentes devero estar disponveis em alto grau de pureza para no contaminar


as amostras.

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124

(v)

Decomposio e solubilizao de slidos inorgnicos

As perdas dos analitos por volatilizao, por formao de aerossis, por adsoro
e/ou absoro nas paredes dos frascos de reao, ou por quaisquer outras razes,
devero ser desprezveis.

(vi)

Tanto os reagentes como a amostra no devero atacar o recipiente onde ser feita a
reao.

(vii) As contaminaes devidas ao ambiente devero ser desprezveis.


(viii) O procedimento dever apresentar o mnimo de insalubridade e de periculosidade.
(ix)

A soluo final dever conter todos os analitos de interesse.

CRITRIOS PARA A ESCOLHA DO PROCEDIMENTO DE DISSOLUO MAIS


ADEQUADO

Antes de tomar alguma deciso sobre o emprego do mtodo de


decomposio a ser utilizado, conveniente verificar se ele atende todos ou alguns destes
critrios:
(a) Amplitude do mtodo: nmero de materiais e de elementos a serem determinados por
material; relao massa/volume adequada.
(b) Durao da dissoluo: muitos procedimentos so muito lentos, porque as reaes
qumicas envolvidas so freqentemente lentas; o uso de amostras finamente modas
facilita a dissoluo.
(c) Natureza da soluo final e remoo de excesso de reagentes.
(d) Materiais usados para a dissoluo.
(e) Pureza dos reagentes.
(f) Perdas por volatilizao.
(g) Aspectos associados segurana
-queimaduras com HF
-exploses com HClO4
-vapores txicos de cidos volteis e de produtos gasosos (H2S, SO2, Cl2)
-fuses a temperaturas elevadas
-exploses em sistemas fechados sob presses elevadas (transdutores de presso e
temperatura, por exemplo)

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Decomposio e solubilizao de slidos inorgnicos

125

5.2. MTODOS DE DISSOLUO


De um modo geral, a maioria dos procedimentos de dissoluo de amostras,
como ser visto adiante, pode ser agrupada em mtodos baseados na:

dissoluo direta em gua ou soluo aquosa sem mudana qumica;

dissoluo em cido, ou mistura de cidos, com mudana qumica (mudana no


estado de oxidao do elemento a ser determinado);

dissoluo aps fuso da amostra com fundente apropriado (naturalmente


envolvendo mudanas qumicas);

outras tcnicas.

5.2.1. DISSOLUO SIMPLES SEM REAO QUMICA


So raras as aplicaes, mas muitos produtos acabados em processos, como
sais inorgnicos, podem ser analisados aps dissoluo direta em gua ou em soluo
aquosa diluda, sem que haja mudana qumica. Este caso pode ser exemplificado pela
anlise de fertilizantes solveis em gua.
5.2.2. DISSOLUO EM CIDO
Em muitos casos o tratamento com cido(s) no leva dissoluo quantitativa das
amostras. Os minerais que no contm silicatos podem ser excees (carbonatos e sulfetos
solveis em cido, por exemplo).
Assim, de certa forma, o tratamento cido pode significar uma dissoluo seletiva; a
escolha decidida pela composio da amostra, propriedades qumicas e concentrao do
elemento a ser determinado, bem como a forma na qual est ligado. Recomenda-se
fortemente que o leitor complemente estas informaes com excelente material disponvel
na pgina http://www.sampleprep.duq.edu/sampleprep/

Francisco Jos Krug, fjkrug@cena.usp.br. VI Workshop sobre Preparo de Amostras, Santa Maria, 2006.

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Decomposio e solubilizao de slidos inorgnicos

cidos diludos
Quando uma amostra for insolvel em gua, a alternativa mais simples
tentar uma soluo aquosa de um cido mineral diludo.
A maioria dos metais mais eletropositivos que o hidrognio, muitos xidos
simples de metais, carbonatos e sulfatos dissolvem em cidos diludos. O mecanismo de
dissoluo uma reao simples entre a amostra e o cido, formando um sal do metal
solvel em gua ou algum outro produto, dependendo principalmente da natureza qumica
da amostra.
Alguns metais, como Al, Cr, Mo e W, podem ser passivados durante a
dissoluo pela formao de uma pelcula insolvel dos seus xidos, impedindo o ataque
cido.
A dissoluo de muitas amostras pode ser feita a frio, mas leve aquecimento
pode ser aplicado, quando necessrio. Em alguns casos, o uso de cidos diludos
recomendado para um ataque preliminar da amostra.
importante lembrar nestas reaes que, normalmente, o interesse est na
determinao do on metlico. A converso do nion em uma forma voltil, como CO2 e
H2S, por exemplo, no deixa de ser conveniente na maioria das aplicaes.
Cumpre observar que, para os metais serem dissolvidos, eles teriam que ser
pelo menos

mais eletropositivos que o H2. A Tabela 5.1 mostra alguns dos potenciais

padro de eletrodo para os ons metlicos mais comuns e importantes: um potencial padro
positivo significa que o metal mais eletronegativo que o hidrognio (convencionalmente
mostram-se as reaes-padro de eletrodo como redues).
Alm disso, deve-se considerar que o uso de cidos diludos pode dar origem
a um sal insolvel (precipitaes de prata como cloreto e de brio como sulfato). No caso da
prata pode-se usar soluo de HNO2. Carbonato de brio dissolve-se em cidos clordrico
ou ntrico diludos.
Deve-se lembrar que o simples fato de o metal ser mais eletropositivo que o
hidrognio no implica, necessariamente, que a dissoluo ocorrer. o caso dos metais
que podem ser passivados.
Existem excees para esta regra, como na reao de dissoluo de cobre (e
de outros metais) em 1+1(v/v) HNO3. Neste caso, o cobre metlico oxidado a cobre(II)
pelo HNO3, que se reduz dando a mistura H2O, NO e NO2.
O ouro o mais eletronegativo dos metais e mesmo o uso de um cido
oxidante concentrado, como o HNO3, no suficiente para lev-lo a um estado inico.
Neste caso, um agente oxidante mais poderoso necessrio, o que ser visto mais adiante.

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127

Algumas reaes tpicas

(a)

Zn

2HCl

ZnCl2

H2

(b)

MgO

2HCl

MgCl2

H2O

(c)

CaCO3

2HCl

CaCl2

H2O

(d)

FeS

2HCl

FeCl2

H2S

(e)

BaCO3

H2SO4

BaSO4

H2O

+ CO2

(f)

2 Cu

2 HNO3

2CuO

NO

+ NO2 +

(g)

Au

HNO3

+ CO2

H2O

no reagem

cidos minerais concentrados


O uso de cidos diludos mostrou que um bom nmero de amostras
inorgnicas pode ser dissolvido sem maiores inconvenincias. No entanto, uma infinidade
de materiais resistentes, incluindo os metais mais eletronegativos, muitas ligas metlicas,
muitos minerais comuns, solos, rochas, argilas, especialmente os aluminatos e silicatos,
deve ser dissolvida com cidos minerais concentrados a quente.
Na prtica, um dos seguintes procedimentos de pr-tratamento com cidos
minerais concentrados a quente poder ser adotado para a dissoluo de amostras
inorgnicas:

Simplesmente levar a mistura ebulio em um copo coberto com vidro de relgio;

levar a mistura ebulio com refluxo;

levar a mistura ebulio e deixar o cido evaporar at quase secura;

dissolver a amostra em sistema fechado.

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Tabela. 5.1. Potenciais padro de reduo para alguns ons (a 25C)


Semi-reao
3+

Potencial-padro (volts)

Au (s)

+1,50

Pt (s)

+1,12

Ag + e

Ag (s)

+0,80

Hg2+ + e-

Hg (l)

+0,80

Cu (s)

+0,34

H2 (g)

0,00

Pb (s)

-0,13

Sn (s)

-0,14

Ni (s)

-0,26

Co + 2e-

Co (s)

-0,28

Tl+ + e-

Tl (s)

-0,34

Cd (s)

-0,40

Fe (s)

-0,45

Cr (s)

-0,74

Zn (s)

-0,76

Mn (s)

-1,18

Al (s)

-1,66

+ 2e-

Mg (s)

-2,37

Na+ + 1e-

Na (s)

-2,71

Ca + 2e-

Ca (s)

-2,87

K+ + e-

K (s)

-2,93

Au + 3e
Pt

2+

+ 2e

2+

Cu + 2e
+

H + e2+

Pb + 2e2+

Sn + 2e2+

Ni + 2e2+

2+

Cd + 2e2+

Fe + 2eCr

3+

+ 3e-

2+

Zn + 2e
2+

Mn + 2e3+

Al + 3eMg

2+

2+

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No pr-tratamento de amostras com cidos minerais, as seguintes


propriedades dos cidos devem ser levadas em considerao:

(i) A fora do cido.


(ii) O ponto de ebulio (governa a mxima temperatura que pode ser usada sem a
necessidade de se recorrer a sistemas fechados de dissoluo).
(iii) Poder oxidante do cido e/ou de um de seus produtos de decomposio.
(iv) Poder complexante com respeito aos ons de interesse (propriedade do nion).
(v) A solubilidade dos sais correspondentes.
(vi) Grau de pureza e /ou facilidade de purificao
(vii) Aspectos relacionados segurana durante a manipulao.

Propriedades dos cidos minerais mais comuns (HCl, HNO3, H2SO4 , HClO4 e HF)
(a) cido Clordrico
O cido clordrico concentrado aproximadamente 12 mol l-1. Quando
aquecido ebulio HCl gasoso liberado e o ponto de ebulio da mistura aumenta at a
formao de uma mistura azeotrpica1 (HCl 6 mol l-1, ebulio a 109 C). O cido clordrico
um cido forte, mas no apresenta propriedades oxidantes alm daquelas associadas ao
on H+. Possui propriedades redutoras relativamente fracas durante a dissoluo. O on
cloreto, no entanto, forma complexos bastante fortes com muitos ons metlicos,
especialmente Au3+, Tl3+ e Hg2+, e menos fortes com Fe3+, Ga3+, In3+ e Sn4+, por exemplo.
A solubilidade da prata pode aumentar muito pela complexao de cloreto de
prata com excesso de ons cloreto:
Ag+ + Cl- AgCl; log K1 = 3,04
AgCl + Cl- AgCl2- ; log K2 = 5,04
A concentrao de prata dissolvida em uma soluo 1 mol l-1 HCl de apenas 8 mg.l-1, mas
aumenta para 130 mg. l-1 em 3 mol l-1 HCl

Uma mistura azeotrpica uma mistura de lquidos que, no seu ponto de ebulio , produz um vapor de
composio qumica idntica do lquido. Nesta situao, durante a ebulio no ocorre mudana na
composio da mistura. O ponto de ebulio de uma mistura azeotrpica, a uma presso fixa, permanece
constante. Consequentemente, os componentes individuais de uma mistura azeotrpica no podem ser
separados por destilao.
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Decomposio e solubilizao de slidos inorgnicos

A maioria dos cloretos metlicos solvel em gua, exceto Hg2Cl2, AgCl e


TlCl, enquanto PbCl2 pouco solvel a frio, mas solvel em gua quente.
O HCl usado para dissolver a maioria dos metais mais eletropositivos que o
hidrognio, alem dos seus xidos e hidrxidos. tambm usado para dissolver boratos,
carbonatos, sulfetos e fosfatos, assim como alguns silicatos, embora o componente
contendo Si no permanea estvel em soluo. Para muitos metais e xidos, o cido
clordrico um solvente muito mais eficiente que outros cidos minerais oxidantes.
(b) cido ntrico

O cido ntrico, conhecido como "cido concentrado", varia de 65 a 69%


HNO3 e, aquele com teor maior que 69% denominado "cido ntrico fumegante". Uma
mistura azeotrpica com gua formada a 67% com ponto de ebulio de
aproximadamente 121C, embora seja possvel obter HNO3 a 100% cujo ponto de ebulio
de 83C. O cido muito concentrado instvel, decompondo-se pela ao da luz e
produzindo O2, H2O e NO2, este ltimo sendo responsvel pela cor marrom das solues
cidas.
O cido ntrico um cido forte e um agente oxidante bastante poderoso.
Com exceo dos metais nobres ele poderia oxidar todos os metais, mas poucos so
dissolvidos porque muitos elementos, como Al, B, Cr, Ga, In, Nb, Ti, Ta, Th, Zr e Hf, tornamse passivos2 na presena do cido. Ca, Mg e Fe so passivados pelo cido altamente
concentrado, mas so dissolvidos em solues mais diludas. Outros elementos que so
dissolvidos incluem Se, Te, As, e os semicondutores GaSe e CdTe.
Quase todos os nitratos de metais so solveis em gua. O on nitrato um
on complexante muito fraco3. Isto faz com que alguns ons metlicos sejam hidrolisados
em meio de cido ntrico, precipitando como xidos hidratados, como Sn, W a Sb. Isto pode
ser explorado beneficamente para separar estes metais pela filtrao dos precipitados
correspondentes, aps reao dos metais com o cido ntrico.

2 Um metal "torna-se passivo" na presena de um cido, quando o cido reage com o metal formando um xido
insolvel, ao invs de se dissolver na soluo na forma de on metlico. Este xido pode formar uma pelcula
protetora na superfcie do metal, evitando o ataque subsequente do cido. Por isso, o metal no ser dissolvido.
3 A adio de espcies complexantes s solues de cido ntrico pode ajudar na dissoluo de alguns metais
listados como insolveis em cido ntrico. Os cidos clordrico e fluordrico so os mais utilizados para este
propsito, mas cidos orgnicos, como tartrico e ctrico, tambem so empregados.
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(c) cido sulfrico


O cido sulfrico concentrado comercial contm aproximadamente 98%
H2SO4. O ponto mximo de ebulio de 339C alcanado no sistema gua-cido sulfrico
a 98,3% H2SO4. Este o ponto de ebulio mais alto dentre os cidos minerais
concentrados mais comuns. Uma das suas principais vantagens justamente o fato de
permitir a execuo de processos de dissoluo sob elevadas temperaturas.
O cido sulfrico um cido forte e, quando aquecido, capaz de oxidar um
grande nmero de metais, reduzindo-se a SO2, enxofre elementar ou H2S. Ele tambm
possui propriedade desidratante. Quase todos os compostos orgnicos so parcialmente,
ou mesmo totalmente, destrudos pelo cido concentrado a quente.
Os sulfatos de metais so, em sua maioria, solveis em gua, exceto CaSO4
(levemente solvel), BaSO4, SrSO4 e PbSO4. Vrios metais em estados de oxidao
elevados (Cr3+, Al3+, terras raras) podem formar sulfatos duplos com sulfato de potssio, os
quais so difceis de serem solubilizados.
Uma outra vantagem dos sulfatos de metais que, de uma maneira geral,
eles apresentam baixa volatilidade. Assim pode-se levar a mistura secura, desde que o
cido sulfrico esteja presente em quantidade adequada.
O cido sulfrico utilizado para dissolver xidos, hidrxidos, carbonatos,
vrios minrios (sulfetos e arsenitos) e muitos outros compostos. No recomendado em
amostras com teores de clcio muito elevados, face baixa solubilidade do CaSO4 (2 g/L).
Alguns xidos, podem ser convertidos em sulfatos solveis por aquecimento com cido
pouco concentrado. TiO2 requer aquecimento com H2 SO4 85%, e minrios de trio, nibio e
tantlio (samarsquita) requerem H2SO4 concentrado.
O cido sulfrico tambm usado para a remoo de HF e/ou solubilizao
de fluorocomplexos, quando comum a expresso "aquecendo at fumos do cido
sulfrico". Os fluoretos de metais reagem com H2SO4, promovendo a liberao do HF e a
formao dos sulfatos metlicos correspondentes. Esta remoo recomendada tanto aps
a decomposio de amostras com HF, como na anlise de minrios contendo flor.
(d) cido perclrico

O cido perclrico e a gua formam um azetropo com 72% HClO4, ponto de


ebulio de 203C, conhecido como cido perclrico concentrado. A mistura azeotrpica
pode ser armazenada sem perigo e pode ser purificada por destilao. O cido contendo
100% HClO4 um oxidante perigosssimo: ele se decompe em repouso, no incio
lentamente, mas pode explodir violentamente depois de certo tempo.

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Decomposio e solubilizao de slidos inorgnicos

Quando solues contendo acima de 72% do cido so aquecidas, o cido


perclrico se decompe em cloro, oxignio e gua:
4HClO4 2Cl2 + 7O2 + 2H2O
O cido perclrico empregado a 60-72% m/v. Quando aquecido, torna-se
um agente oxidante muito poderoso, capaz de dissolver ligas metlicas e todos os metais
(exceto os metais nobres), convertendo-os em ons nos seus estados de oxidao mais
2+

2+

altos, exceto chumbo e mangans que so oxidados a Pb e Mn , respectivamente.


Todos os percloratos de metais so prontamente solveis em gua, exceto
KClO4, RbClO4 e CsClO4. Uma de suas virtudes o fato de o on perclorato ser o agente
complexante mais fraco dentre os nions dos cidos minerais mais comuns.
No metais tambm reagem com o cido perclrico. Uma das melhores
aplicaes a oxidao do fsforo, e muitos de seus compostos, a fosfato.
Na dissoluo de aos e outras ligas ferrosas o cido silcico formado
rapidamente desidratado, e facilmente filtrado.
Mas, talvez o mais importante destaque do cido perclrico deva ser dado ao
fato de que, em muitas aplicaes, existe o perigo imprevisvel de exploso 4 face ao seu
elevado poder oxidante quando empregado na forma concentrada e a quente. Este risco
particularmente grande quando a concentrao do cido exceder 72%, ou quando o cido a
quente for colocado em contato com material orgnico ou inorgnico facilmente oxidvel.

ALGUMAS REGRAS NA MANIPULAO DO HClO4


(i)

nunca use um cido mais concentrado que 72%.

(ii)

nunca deixe que o cido concentrado a quente entre em contato direto com
materiais facilmente oxidveis (por exemplo - tenha cuidado com amostras de
metais com leo ou graxa).

(iii)

no utilize capelas de exausto com superfcies expostas construdas com


material orgnico no recomendado (com batentes de madeira, por exemplo).

(iv)
(v)

no armazene o cido em frascos com tampa de borracha.


lave o papel de filtro com bastante gua aps seu uso com solues contendo
cido perclrico. Caso contrrio, h o risco de exploso quando estiver seco.

(vi)

lave com gua os locais onde o cido possa ter entrado em contato, como o
piso da capela (preferivelmente de cermica), por exemplo.

4 Ler, por exemplo, descrio de mais de 30 casos de exploses violentas no "Handbook of Laboratory Safety".
nd
Boca Raton, CRC Press, 2 ed., 1971, 854p
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133

(e) cido fluordrico


O cido fluordrico forma uma mistura azeotrpica com gua contendo 36%
HF, com ponto de ebulio de 111C. um cido fraco, no oxidante, cuja reatividade se
baseia na sua natureza complexante. Solues aquosas a 38-40% e aproximadamente 48%
so encontradas comercialmente.
O on fluoreto o mais poderoso nion complexante dentre todos aqueles
aqui mencionados, formando fluoretos estveis e fluorocomplexos com muitos elementos.
Reage especialmente com aqueles elementos que formam xidos refratrios, os quais so
justamente difceis de serem dissolvidos por se tratarem de xidos estveis insolveis. O HF
aumenta a solubilidade e a establidade de alguns elementos como Si, Sn, Ti, Zr, Hf, Nb eTa
O HF utilizado principalmente para a dissoluo de materiais contendo
silicatos:
SiO2 + 6HF H2SiF6 + 2H2O
O cido fluorosilcico pode ser separado da matriz na forma de SiF4 gasoso,
promovendo sua dissociao a quente em sistema aberto com cido sulfrico, ntrico ou
perclrico:
H2SiF6 (g) SiF4 + 2HF (g)
O resto da matriz permanece em soluo, com algumas excees como mostra a Tabela
5.2. Nos casos em que se deseja evitar perdas de As, B, Se, Sb, Ge, Cr, Re, Os e Ru, por
exemplo, sistemas de destilao apropriados devem ser utilizados. Quando se usa cido
fluordrico, algumas precaues devem ser tomadas:
(i)

vidraria no pode ser utilizada, porque o HF reage com o xido de silcio que faz parte
da composio dos vidros. Podem-se utilizar materiais de:

platina (mesmo muito aquecida)

PTFE (at 220 C), polipropileno (at 135C), policarbonato (at 110C), polietileno
de baixa densidade (at 80C), e outros polmeros.

(ii)

Freqentemente, faz-se necessria a separao de todo o fluoreto que estiver na


3+
forma de complexos (AlF6 por exemplo, muito estvel e no se comporta em

soluo como o on Al3+) e/ou para ressolulilizar os fluoretos insolveis (CaF, MgF,
NaAlF4, MgAlF5, por exemplo), alm do prprio HF que est em excesso. Na prtica
esta etapa pode ser relativamente simples, ou muito trabalhosa, podendo ser feita
uma separao por destilao com auxlio de cidos perclrico ou sulfrico. Quando
isto feito, o silcio separado por volatilizao, sendo perdido em sistema aberto,
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Decomposio e solubilizao de slidos inorgnicos

conforme j foi mencionado. Mascaramento de ons fluoreto com cido brico


tambm muito recomendado, quando h compatibilidade com o mtodo de
determinao do analito de interesse. A reao do cido brico com cido fluordrico
ocorre em um processo com duas etapas:

H3BO3 + 3HF HBF3(OH) + H2O


HBF3(OH) + HF HBF4 + H2O
Se a soluo for resfriada em banho de gelo aps a adio do cido brico, a velocidade da
reao aumenta. Entretanto, a maioria dos analistas prefere adicionar cido brico em
excesso (10 a 50 vezes) para aumentar a velocidade da reao.
(iii)

o cido fluordrico, quando em contato com a pele, pode causar serssimas


queimaduras. A manipulao deste, assim como dos outros cidos mencionados deve
ser feita atendendo todas as normas de segurana, incluindo mscaras faciais, luvas,
etc. Nos primeiros socorros para queimadura de pele com cido fluordrico,
recomenda-se o uso de gel de gluconato de clcio.

Tabela 5.2. Pontos de ebulio de fluoretos volteis


Espcie

Temperatura (C)

AsF3

+ 63

AsF5

- 53

BF3

-100

GeF4

- 37 (sublima)

NbF5

+236

SbF3

+376

SbF5

+150

SeF4

+ 93

SiF4

- 95 (sublima)

TaF5

+229

TeF4

+375

TiF4

+284 (sublima)

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Decomposio e solubilizao de slidos inorgnicos

135

Misturas de cidos minerais


Na prtica, a grande maioria dos mtodos de dissoluo de amostras inorgnicas
baseia-se no uso de uma mistura de dois ou trs cidos. A dissoluo da amostra pode ser
feita inicialmente com uma mistura de dois cidos seguida pela adio de um terceiro cido
ou vice-versa, pode tambm envolver um cido numa etapa at a secura e posterior
retomada da amostra com um outro cido, etc.
As misturas de cidos so muito usadas, porque

diferentes propriedades teis podem ser combinadas ( um cido oxidante com um


cido com poder complexante).

dois cidos podem reagir formando produtos com maior reatividade do que qualquer
um deles empregado isoladamente.

uma propriedade indesejvel de um cido pode ser moderada pela presena de um


segundo cido.

a amostra pode ser dissolvida com um cido, o qual separado da mistura por um
outro cido que o substitui.

Alguns exemplos
(i)

Um cido complexante e um cido oxidante

HF + HNO3

HF + HClO4

HF + H2SO4

HF + HNO3 + HCl
Muitos metais e ligas metlicas podem ser solubilizados com estas combinaes de

cidos. Misturas de HF com HNO3 so usadas para dissolver silcio metlico, titnio, nibio,
tantlio, zircnio, hfnio, tungstnio e suas ligas, vrios carbetos e nitretos, minrios de
tungstnio, minrios de urnio, minrios de sulfetos e muitos silicatos.
(ii) Dois cidos formando produtos reativos
A mistura de 1 parte de HNO3 concentrado (69%) com 3 partes de HCl concentrado,
em volume, conhecida como gua rgia. O cido ntrico oxida o acido clordrico dando
origem a vrios produtos de oxidao, como cloro molecular e cloreto de nitrosila (NOCl) .
Estes produtos tem altssimo poder oxidante e so muito reativos. Esta propriedade
associada presena do on cloreto (complexante), faz desta uma mistura de dissoluo
altamente eficiente para os metais nobres. Diz-se que a gua rgia mais eficiente se a
mistura for mantida em repouso por 10 a 20 minutos antes de seu uso.

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136

Decomposio e solubilizao de slidos inorgnicos

A gua rgia usada para atacar muitos metais e ligas metlicas, incluindo aos,
ligas de alta temperatura, ligas de molibdnio, face rapidez da dissoluo.
Os cidos ntrico e clordrico tambm so usados em outras propores. A gua
rgia de Lefort, ou gua rgia invertida, uma mistura de 3 partes de cido ntrico para
uma de cido clordrico.
(iii)

Moderao da ao poderosa de um cido

HNO3 + HClO4
O cido ntrico modera a ao oxidante do cido perclrico, reagindo com materiais

facilmente oxidveis, que poderiam reagir com o cido perclrico perigosamente.


(iv)

substituio de um cido por outro

HF + HClO4

HF + H2SO4
A amostra dissolvida em HF ou mistura contendo HF, e a mistura levada secura

uma ou mais vezes com cido perclrico ou sulfrico.


Misturas de cidos com outros reagentes
Alguns reagentes so utilizados para melhorar a eficincia da dissoluo com um ou
mais cidos minerais:
(i) agentes oxidantes
O poder oxidante de um cido pode ser aumentado pela utilizao de um agente
oxidante auxiliar, assim como um cido no oxidante tambm pode ser usado com um
agente oxidante. Trs destes agentes oxidantes podem ser:

H2O2 para a dissoluo de aos

Br2 para minrios contendo telrio

KClO3 com HCl para a dissoluo de minrios contendo arsnio e /ou enxofre
A utilizao de pequenas quantidades de H2O2 bastante comum como tratamento

final para a remoo de produtos coloridos que permanecem em soluo em alguns


procedimentos para a oxidao de materiais orgnicos com misturas cidas ( cidos ntrico
e sulfrico, por exemplo). H2O2 tambm usado em combinao com cidos sulfrico e
ntrico isoladamente. O uso do H2O2 apresenta as seguintes vantagens:

um agente oxidante poderoso.

a gua o nico produto de decomposio presente.

encontrado com alto grau de pureza.

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Decomposio e solubilizao de slidos inorgnicos

137

(ii) Eletrlitos inertes


So adicionados para aumentar o ponto de ebulio do cido, resultando
maior temperatura final para a dissoluo (adio de Na2SO4, K2SO4 ou (NH4) 2SO4 aumenta
o ponto de ebulio do H2SO4).
(iii) Agentes complexantes
So usados em muitos procedimentos para manter os analitos em soluo,
na forma de complexos, evitando que os ons metlicos correspondentes sejam precipitados
(como xido ou hidrxido, p. ex.). Os cidos tartrico, ctrico e lctico podem ser usados em
combinao com o cido ntrico para dissolver antimnio elementar, ligas e minrios de
antimnio, evitando a hidrlise do on metlico. Ligas de Pb-Sn so dissolvidas com cidos
ntrico e tartrico ou ntrico+tartrico+ctrico, e os semicondutores PbTe e GeTe com cido
ntrico concentrado e soluo de oxalato de sdio.
(iv) catalisadores
A velocidade de dissoluo de alguns metais com cidos pode ser
aumentada significativamente com catalisadores adequados (Cu2+, Hg2+). A Tabela 5.3.
mostra alguns reagentes empregados na dissoluo cida de vrios minrios.
Tabela 5.3. Reagentes usados para decomposio cida de vrios minrios
Amostras

Analitos

Reagentes

Silicatos

Elementos-trao

HF + H2SO4

Minrio de cromo

Elementos-trao

H2SO4 + HCl + NaCl*

Magnetita

Ge

H3PO4 + KMnO4

Esfalerita

Tl, Co, Ni

HCl + HNO3

Tetraedrita

Fe

H2SO4 + (NH4) 2SO4

Pirita

Traos em geral

HCl + HNO3

Monasita

Lantandeos

H2SO4 + H2O2

Minrios de magnsio

Elementos-trao

HCl (o resduo deve possivelmente

(pirolusita, etc.)
Fluorita

ser tratado separadamente)


Elementos-trao

H2SO4; HCl (possvel digesto do


resduo)

Minrios de mercrio

Elementos-trao

HCl + HNO3 +H2SO4**

Bauxita

Elementos-trao

H2SO4 + HCl + HNO3

Minrios de sulfeto

Cu

H3PO4 + HCl

* O NaCl serve para formar e remover o CrOCl2 voltil


** O HgCl2 evapora
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138

Decomposio e solubilizao de slidos inorgnicos

5.3.

DECOMPOSIO POR FUSO

5.3.1. PRINCPIOS

Muitos materiais no so dissolvidos com cidos minerais concentrados a


quente. Outros so atacados lentamente e/ou dissolvidos parcialmente. Existem tambm
aqueles materiais que do origem a solues cidas instveis apresentando componentes
com tendncia para precipitar, como a slica. Os seguintes materiais constituem uma
seleo representativa de materiais de difcil dissoluo em cidos:

Cimento

Aluminatos

Silicatos

Minrios de Ti e Zr

Minerais mistos de Be, Si, Al

Resduos insolveis de minrios de ferro

xidos de cromo, silcio e ferro

xidos mistos de tungstnio, silcio e alumnio.

Deve-se lembrar que, apesar de muitos silicatos serem dissolvidos com HF,
existem situaes particulares onde o silcio deve ser determinado. O silcio perdido da
soluo como SiF4. O boro similarmente perdido como BF3.
Os

mtodos

de

decomposio

por

fuso baseiam-se no seguinte

procedimento geral:

1) Amostra finamente moda misturada intimamente com um eletrlito cido ou bsico.


Eventualmente um agente oxidante pode ser adicionado.

2) A proporo entre as massas de amostra e de eletrlito (conhecido como fundente)


muito importante, podendo variar de 1:2 a 1:50.

3) A mistura , em geral, colocada em um cadinho de nquel ou de platina.


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Decomposio e solubilizao de slidos inorgnicos

139

4) O cadinho aquecido por um perodo de tempo suficientemente adequado para que a


amostra fique totalmente dissolvida na soluo fundida, resultando em um lquido bem
claro (toma-se o cuidado de se fundir toda a amostra com movimentos do cadinho).

5) O lquido se solidifica quando resfriado temperatura ambiente e o material slido


resultante quebrado em pequenos pedaos ou transferido diretamente para um copo.

6) Se a fuso for bem sucedida, o material ser facilmente solvel em gua ou cido
diludo.

As razes que explicam o sucesso dos mtodos de decomposio por fuso


so as seguintes:

i)

os eletrlitos inorgnicos fundidos so solventes muito poderosos;

ii)

como as temperaturas de fuso so muito mais elevadas que nas decomposies


com cidos, chegando a 1200 C dependendo do fundente utilizado, as reatividades e
a solubilidade dos materiais so tambm muito maiores;

o eletrlito fundido age como um cido ou uma base de Lewis5.

iii)

O Na2CO3 um exemplo de fundente muito utilizado na abertura de materiais


contendo slica. Quando aquecido o carbonato de sdio uma excelente fonte de
ons O2- :
CO32-

CO2 + O2-

Os ons O2- (base de Lewis) reagem com a slica (cido de Lewis):


2-

SiO2 + O2- SiO3

O on SiO32- formado pelo preenchimento dos orbitais vazios do Si atmico


com eltrons do on O2-.

2O sal sdico do SiO3 solvel em gua, e assim a slica solubilizada.

Um cido de Lewis qualquer espcie (atmica, inica ou molecular) capaz de aceitar eltrons de
uma outra espcie, e uma base de Lewis qualquer espcie capaz de doar eltrons.

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140

Decomposio e solubilizao de slidos inorgnicos

5.3.2. CARACTERSTICAS DE ALGUNS FUNDENTES

(a) Carbonato de sdio (p.f. 851C): um fundente bsico muito utilizado para a abertura
de silicatos e outros compostos refratrios. Sua utilidade pode aumentar quando em
combinao com oxidantes como KNO3, KClO3, ou Na2O2 para amostras que requerem um
ambiente oxidante (materiais contendo S, As, Sb ou Cr, p.ex.). O K2CO3 (p.f. 891C) e
NaKCO3 (mistura 1:1 de Na2CO3 e K2CO3, p.f. 712C) tambm so usados em algumas
aplicaes.

(b) Hidrxido de sdio (p.f. 318C) ou hidrxido de potssio (p.f. 360C): so fundentes
bsicos poderosos para silicatos, aluminosilicatos, carbeto de silcio e outros compostos.

(c) Perxido de sdio (Na2O2): decompe-se quando aquecido, e age como um poderoso
fundente bsico oxidante para sulfetos e ligas metlicas insolveis em cidos.

(d) Sulfato cido de potssio (KHSO4) e pirossulfato de potssio (K2S2O7): estes dois
compostos so na realidade um mesmo fundente. Sob aquecimento ocorrem as seguintes
mudanas:

2 KHSO4

K2S2O7 + H2O

K2S2O7

K2SO4 + SO3

O SO3 age como um cido de Lewis, e assim estes fundentes so cidos. Eles so usados
a 500 C e muito teis para a abertura de muitos xidos metlicos como Al2O3, BeO, Fe2O3,
Cr2O3, MoO3, TeO2, TiO2, ZrO2, Nb2O5 e Ta2O5. Todos estes xidos so convertidos em
sulfatos solveis.

(e) cido brico (p.f. 450C): um fundente cido muito til para silicatos, podendo ser
usado como alternativa aos fundentes bsicos, quando se pretende determinar metais
alcalinos. Uma vantagem adicional deste fundente que qualquer excesso de B2O3 pode
ser separado da matriz, como o ster inorgnico voltil trimetilborato, destilando-se o
resduo com metanol:

B2O3 + 6 CH3OH

[2 B(CH3O) 3]3 + 3 H2O

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Decomposio e solubilizao de slidos inorgnicos

141

(f) CaCO3 + NH4Cl: quando aquecida esta mistura produz CaO e CaCl2. Este fundente
recomendado para a extrao de metais alcalinos em silicatos.

(g) Fluoreto de potssio e NaF.HF: so fundentes de baixas temperaturas, caracterstica


particularmente til para a determinao de alguns metais que formam fluoretos metlicos
volteis. So usados para a abertura de silicatos e xidos de elementos formadores de
fluorocomplexos estveis, como Be, Nb, Ta e Zr. O produto da fuso pode ser levado a
fumos com H2SO4 para a remoo de F-. Deve-se recordar que, neste caso, o Si e o B so
perdidos nas formas de SiF4 e BF3, respectivamente.
(h) Brax, Na2B4O7.10H2O: as fuses com tetraborato de sdio so muito usadas para a
abertura de Al2O3, ZrO2, minrios de Zr, minerais contendo terras raras, Ti, Nb ou Ta, assim
como materiais contendo Al, minrios de Fe, etc. O tetraborato de sdio pode ser utilizado
diretamente, ou em combinao com Na2CO3. As temperaturas de fuso variam de 1000 a
1200C.

Literatura de uso geral dos itens 5.1 a 5.3

ANDERSON, R. Sample Pretreatment and Separation. Analytical Chemistry by Open


Learning. Chichester, John Wiley, 1991, 632pp.
BOCK, R. A Handbook of Decomposition Methods in Analytical Chemistry. Glasgow,
International Textbook, 1979, 444pp.

SULCEK, Z.; POVONDRA, P. Methods of decomposition in inorganic analysis. Boca


Raton, CRC, 325p, 1989.

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Piroidrlise

142

5.4. PIROIDRLISE
der L. M. Flores - DQ/UFSM
rico M. M. Flores - DQ/UFSM
Fbio A. Duarte - DQ/UFSM
Juliano S. Barin - DQ/UFSM
Valderi L. Dressler - DQ/UFSM

A piroidrlise consiste, essencialmente, na decomposio da amostra em um reator


aquecido (~1000 C) e na presena de vapor dgua misturado com oxignio, ar ou um gs
inerte. Esta tcnica tem sido aplicada para decomposio de amostras slidas, geralmente
materiais inorgnicos. Neste sistema, durante a decomposio, muitos xidos ou hidrxidos
de metais so formados e permanecem no reator. Quando presentes, alguns elementos
como os halognios, o boro e alguns complexos, so convertidos em seus cidos volteis
correspondentes, os quais so quantitativamente volatilizados e carreados pelo vapor dgua
para um condensador, onde a soluo contendo os analitos coletada.1 Desta forma,
durante a piroidrlise ocorre uma separao dos analitos da matriz, a qual permanece no
reator o que, em alguns casos, ajuda a minimizar problemas de interferncia na etapa de
determinao.
O conceito de piroidrlise no novo, pois este procedimento foi proposto por
2

Fremy, em 1856. Porm, a primeira aplicao da piroidrlise com fins analticos ocorreu
somente em 1890 para a anlise de nitreto de boro.3 Mais tarde, em 1926, foram feitas as
primeiras investigaes para anlise de fluoreto de zircnio.4 Na mesma poca, Domange5
fez estudos sobre as constantes de equilbrio da decomposio de vrios fluoretos de metais
pesados e alcalino-terrosos em vrias temperaturas. Utilizou uma plataforma de platina para
suportar a amostra e passou sobre ela um fluxo de vapor dgua. O vapor, depois de
condensado, foi analisado para determinar as respectivas constantes de equilbrio. Este
estudo foi posteriormente ampliado por Domange e Wohlhuter6 para determinar a constante
de equilbrio do fluoreto de urnio IV (UF4), na faixa de 200 a 500 C. Neste trabalho foi
proposto que a reao de piroidrlise procede de acordo com a equao (1) e que com o
aumento da temperatura a reao de hidrlise favorecida.

UF4 + 2H2O UO2 + 4HF

(1)

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Piroidrlise

143

A partir destas investigaes, Domange e Domange e Wohlhuter estabeleceram


que a reao de hidrlise a altas temperaturas ocorre de acordo com a equao (2).

MF2n + nH2O MOn + 2nHF

(2)

Neste caso, M um elemento metlico.


Posteriormente, Warf7 revisou os princpios destas reaes, estabelecendo mais
dados termodinmicos da reao, demonstrando claramente as potencialidades analticas
da piroidrlise. Neste perodo o campo de aplicaes da piroidrlise teve maior expanso e
importncia, pois com a implantao do Projeto Manhattan (1942 - 1945) houve a
necessidade do desenvolvimento de procedimentos rpidos de preparo de amostras e que
permitissem a determinao de halognios em diversos materiais, principalmente em
fluoretos de urnio e trio. Neste caso, o aparato consistia de um tubo de platina (150 x 20
mm) no qual era inserida uma barqueta (50 x 18 mm) contendo a amostra. O vapor dgua,
aps passagem pelo tubo aquecido, era condensado e o cido fluordrico contido na soluo
era quantificado por volumetria de neutralizao com soluo de NaOH. O tempo para a
piroidrlise de uma amostra durava cerca de 10 a 20 minutos. Em vista da crescente
necessidade de se determinar flor e outros halognios nos mais variados materiais, muitos
estudos foram feitos para implementar mtodos de decomposio de amostras que
levassem a obteno de resultados com boa preciso e, principalmente, exatido.8
Nas investigaes de Warf et al.8 sobre o mecanismo de liberao do flor a partir de
diversos compostos fluorados, concluiu-se que estes compostos podem ser classificados em
dois grupos.
(i)

O primeiro grupo inclui compostos naturais e sintticos de elementos que formam


hidrxidos pouco solveis como o AlF3, BiF3, MgF2, ThF4, UF4, UO2F2, VF3, ZnF2, ZrF4,
ZrOF2 e outros fluoretos de elementos do grupo das terras raras. Estes compostos so
facilmente piroidrolisveis e liberam quantidades equivalentes dos haletos de hidrognio
correspondentes, os quais podem ser quantificados na soluo condensada.

(ii)

O segundo grupo inclui os fluoretos dos metais alcalinos e alcalino-terrosos. Para


este grupo, observou-se que os xidos formados na decomposio reagem
imediatamente com o fluoreto de hidrognio liberado. Consequentemente, a
decomposio lenta e, em alguns casos, no-quantitativa. Neste caso, necessria a
adio de uma substncia que facilite a liberao do fluoreto. Estas substncias foram
denominadas de aceleradores ou catalisadores.

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Piroidrlise

144

O xido de urnio (U3O8) foi um dos aceleradores da reao de hidrlise testados,


sendo proposto que a reao procede de acordo com a equao (3).

6NaF + 2U3O8 + 3H2O + O2 6HF + 3Na2U2O7

(3)

De acordo com os dados promissores obtidos nestes estudos, diversos sistemas


foram propostos para fazer a reao de piroidrlise, porm mantendo a configurao bsica
originalmente proposta. Estes sistemas tm sido aplicados para a decomposio de diversos
tipos de amostras para posterior determinao, alm do fluoreto, de outros elementos nometlicos, entre eles o cloro, bromo, iodo, boro e enxofre. Na Fig. 5.1 est representado um
esquema do sistema convencional para piroidrlise.

Figura 5.1 Esquema de um sistema para piroidrlise. 1. Entrada de gs; 2. fluxmetro; 3.


unidade de gerao de vapor dgua; 4. sistema para remoo de gotas de gua;
5. unidade de aquecimento; 6. reator; 7. recipiente da amostra; 8. condensador;
9. frasco receptor da amostra.

No sistema mostrado na Figura 5.1, a amostra colocada em um pequeno recipiente


(barqueta) (7) e introduzida no reator (6). O gs ao passar pela unidade de gerao de vapor
d'gua (3) arrasta o vapor at o reator aquecido onde esta mistura reage com a amostra,
com ou sem a adio de acelerador, liberando os analitos presentes na amostra. Por fim, o
vapor com os analitos passa por um sistema de condensao (8) e recolhido em um
recipiente adequado (9). Dependendo do elemento, o vapor dgua pode ser somente
condensado ou condensado e absorvido numa soluo com pH na faixa de 8 a 11
(geralmente uma soluo tampo).
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Piroidrlise

145

No processo da piroidrlise, a liberao do analito da amostra dependente,


basicamente, da temperatura, da forma qumica em que o analito est na amostra e da
constituio da matriz da amostra. A liberao do analito ocorre na faixa de 700 a 1400 C,
mas temperaturas em torno de 1000 C geralmente so adequadas. Para o aquecimento do
reator podem ser empregados fornos eltricos ou uma chama, como a obtida com o
queimador de Meker. Em alguns casos, tambm so usadas combinaes entre
queimadores e fornos. Entretanto, atualmente, os fornos com aquecimento eltrico so
amplamente empregados, por permitir alcanar temperaturas mais elevadas e facilitar o
controle da temperatura, porm o arrefecimento do reator mais lento. Uma vez que a
introduo da amostra no reator feita geralmente temperatura ambiente, o tempo de
processamento maior quando so empregados fornos eltricos como unidade de
aquecimento, comparativamente aos sistemas aquecidos com chama.

Para suportar as altas temperaturas necessrias na piroidrlise, os reatores


normalmente utilizados so constitudos de tubos de quartzo, slica fundida, platina, nquel
ou cermica.1 Da mesma forma, os recipientes empregados para suportar a amostra
geralmente so construdos com materiais similares. Porm, alguns materiais podem reagir
com o analito, possivelmente aps ser volatilizado da amostra na forma de vapor cido,
resultando em recuperaes no quantitativas. Entre os materiais que so mais adequados
para a confeco do reator e do recipiente de suporte da amostra esto o quartzo e a slica
fundida. O nquel um dos materiais que reage facilmente com o analito.10 A unidade de
gerao de vapor dgua consiste, normalmente, de um recipiente aquecido contendo gua
deionizada. Alternativamente, a gua pode ser nebulizada e o aerossol introduzido
diretamente no reator aquecido,11 ou, ainda, atravs da sua volatilizao a partir de um
recipiente colocado na entrada do reator.12 O vapor dgua gerado transportado para o
reator atravs da passagem de um fluxo de gs (onde podem ser usadas vazes de at 2,0
L min-1, dependendo do reator empregado) pela unidade de gerao de vapor. Como gs de
arraste pode ser usado ar, oxignio ou mesmo um gs inerte, uma vez que este tem
somente a funo de transportar o vapor contendo o analito at o condensador.13 Uma vez
que a temperatura para piroidrlise relativamente elevada (cerca de 1000 a 1200 oC),
conveniente que o vapor dgua contendo os analitos seja condensado logo aps a sada do
reator, o que geralmente feito com o auxlio de condensadores refrigerados com gua.
Porm, dependendo da caracterstica do elemento a ser determinado, podem ocorrer perdas
do analito por volatilizao, quando o vapor dgua somente condensado. Entre os
halognios, o cloro, bromo e iodo so mais facilmente perdidos, devido s caractersticas do
prprio cido formado na reao de piroidrlise ou por formao de compostos volteis na
soluo cida condensada, tais como o Br2 e o I2. Assim, alm do uso de um condensador,
necessrio que o vapor dgua condensado seja absorvido numa soluo alcalina. Como
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Piroidrlise

146

solues absorvedoras, solues diludas de hidrxido de sdio, bicarbonato de sdio ou


solues tampo so, geralmente, empregadas. importante salientar que a concentrao
da soluo absorvedora vai depender da quantidade do analito, ou dos elementos passveis
de formarem cidos volteis na reao de piroidrlise, presentes na amostra, uma vez que
so formadas quantidades equivalentes do respectivo cido. Ou seja, para os elementos
facilmente perdidos por volatilizao, a concentrao da soluo absorvedora deve ser tal
que a mesma se mantenha alcalina at o final da reao de piroidrlise. Outra possibilidade,
quando a determinao dos analitos feita por cromatografia inica, a utilizao da prpria
fase mvel como soluo absorvedora.

14

O mecanismo envolvido na volatilizao dos diferentes elementos no o mesmo.


No caso dos halognios, a reao geral da piroidrlise pode ser expressa como mostrado na
equao (4).
MX2n + nH2O MOn + 2nHX
onde X representa o halognio e M o elemento metlico.

(4)
8

Para boro, proposto que a reao ocorra atravs da formao de cido brico,
conforme representado na equao (5).15

MB2 + 8H2O MO2 + 2H3BO3 + 5H2

(5)

Para o caso de enxofre proposto que ocorre a formao de anidrido sulfuroso (SO2)
e anidrido sulfrico (SO3). Neste caso, necessrio o uso de soluo absorvedora contendo
um oxidante (como o perxido de hidrognio - H2O2) em meio alcalino (pH entre 9 e 10) para
absorver os gases de enxofre e oxid-los a sulfato (SO42-).16
Alm do uso de temperaturas elevadas para amostras consideradas refratrias, a
liberao do analito pode ser facilitada na presena de um acelerador que atua, tambm,
como fundente, permitindo que a decomposio da amostra e conseqente liberao dos
analitos ocorram a temperaturas menores. Diversos compostos podem ser empregados na
reao de piroidrlise, mas os xidos cidos so os mais adequados para a liberao
quantitativa dos analitos.17 Entre estes, o SiO2, TiO2, WO3, Bi2O3, Al2O3, MnO2, MoO3, Cr2O3
e V2O5, ou misturas destes, so os mais indicados. Estes compostos normalmente so
empregados na forma slida e so previamente misturados com a amostra. O uso de um
determinado acelerador depender da composio da matriz da amostra, bem como da
forma como o analito se encontra na mesma.18 Entretanto, para garantir a recuperao
quantitativa dos analitos importante uma boa mistura entre a amostra e o acelerador e a
condensao do vapor deve ocorrer sem a formao de nvoa.19
Dentre os aceleradores citados, o pentxido de vandio (V2O5) tem sido o mais
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Piroidrlise

147

utilizado. Muitas aplicaes da piroidrlise usando V2O5 como acelerador para a


determinao de halognios em amostras refratrias (tais como, materiais geolgicos, ligas,
vidro, entre outros) tm sido reportados, principalmente devido ao relativo baixo ponto de
fuso (em torno de 690 C) e ao efetiva na liberao dos analitos.9 Entretanto, alguns
autores relataram a volatilizao parcial do V2O5 em temperaturas acima de 850 C e
conseqente arraste para a soluo condensada, o que pode causar interferncias na
determinao dos analitos por volumetria de neutralizao, devido ao aumento da acidez da
soluo condensada, causado pela presena do V2O5.18 Porm, a presena de V2O5 na
soluo final no causa o mesmo problema quando so usadas tcnicas instrumentais,
como a espectrofotometria, potenciometria e cromatografia.
De maneira geral, o tempo necessrio para se efetuar a piroidrlise varia de alguns
minutos at cerca de uma hora e a composio amostra + acelerador usada na maioria dos
trabalhos varia na ordem de 1 + 3 a 1 + 5. Em algumas situaes, no lugar do uso de vapor
dgua carregado por ar, mais adequado o uso de oxignio, nitrognio ou argnio
previamente umedecido com vapor dgua.
importante salientar que as tcnicas tradicionalmente empregadas para a
decomposio de materiais slidos contendo uma frao mineral elevada, para posterior
determinao de elementos no-metlicos, como os halognios, enxofre e boro, tm sido a
fuso e a destilao baseada no mtodo de Willard e Winter. Essas tcnicas, apesar de seu
uso disseminado e levar a resultados com boa preciso e exatido na maioria dos casos,
possuem como principal inconvenincia o elevado nmero de etapas e o tempo prolongado
de processamento da amostra. Alm disso, as tcnicas de fuso no permitem a separao
do analito da matriz, estando sujeitas a perdas e contaminao. Tambm, a soluo
resultante geralmente possui elevado teor salino, o que pode resultar em srios problemas
de interferncia na etapa da medio do analito. A destilao de Willard e Winter, alm de
ser uma tcnica morosa, cuidado deve ser tomado em relao temperatura de destilao,
pois a soluo cida usada no processo pode projetar quando prximo da temperatura de
ebulio. Neste caso, alm de problemas de segurana com o operador, podero ocorrer
perdas do analito.
Desta forma, a piroidrlise pode representar uma alternativa vivel frente s
limitaes dessas tcnicas, permitindo a liberao quantitativa do analito da amostra e a
separao dos interferentes de uma maneira rpida e relativamente livre de perdas e/ou
contaminaes. A piroidrlise, alm das diversas aplicaes reportadas na literatura,
empregada por laboratrios de certificao de materiais, o que, de certa forma, demonstra a
confiabilidade da tcnica.

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Piroidrlise

148

Resumidamente, a piroidrlise uma tcnica de decomposio de amostra


relativamente simples de ser implementada e, na maioria dos casos, leva a resultados com
boa exatido e preciso. Assim, esta tcnica pode ser uma alternativa de baixo custo para
laboratrios que necessitam determinar halognios, boro e enxofre, principalmente em
amostras de difcil decomposio por outras tcnicas comumente empregadas. Alm disso,
importante salientar que a piroidrlise bastante verstil em relao quantidade de
amostra a ser processada, sendo empregadas quantidades que vo de alguns miligramas
at cerca de 500 mg. A quantidade de amostra utilizada depender da concentrao do
analito e das dimenses do reator. Tambm, uma tcnica bastante segura para ser
manipulada, uma vez que s usado um gerador de vapor dgua, cujo volume pode ser
pequeno, e um forno ou chama para aquecimento do reator. Portanto, no riscos quanto
exposio a reagentes txicos ou corrosivos, radiaes ou frascos com presses elevadas.
Portanto, o principal cuidado que deve ser tomado com relao temperatura do reator e
do gerador de vapor.
Na Tabela 5.4 so mostrados alguns dos principais trabalhos envolvendo a
piroidrlise como mtodo de decomposio de materiais diversos para a determinao de
fluoreto, cloro, bromo, iodo, boro e enxofre.

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Piroidrlise

149

Tabela 5.4. Trabalhos envolvendo a piroidrlise para a decomposio de amostras e


determinao de no-metais.
Analito

Acelerador

Amostra

Ref.

U3O8, Al2O3

Diversos sais inorgnicos

F , Cl

V2O5

Aluminosilicatos

11

V2O5

Amostras diversas

16

F-, Cl-

V2O5

Silicatos

19

F-

Compostos orgnicos volteis

20, 21

F-

Materiais radioativos

22

F-

UO2F2, UF4

23

F-

WO3, U3O8

ThF4, AlF3, ZrF4, UO2F2, UF4, NpF4

24

F-

Cr2O3, U3O8

Terras raras

25

F-

Al2O3

Criolita e materiais similares

26

F-

WO3

Materiais diversos

27

F-

WO3, SiO2, V2O5

Carvo e minerais diversos

28

F-, Cl-, Br-, I-

V2O5

Amostras geolgicas

29

F-

SiO2

Carvo

30, 31

F-

SiO2

Solo

32

V2O5

Amostras geolgicas e biolgicas

33

F-, Cl-

WO3/SiO2/KH2PO4

Amostras geolgicas

34

Cl-

U3O8

Vidro

35

F-

Carvo

36

I-

V2O5

Amostras geolgicas

37

V2O5/CuO

Ao e outras ligas

38

Ao e outras ligas

39

U3O8

Vidro

40

Al2O3

Ao

41

F-, Cl-, S

V2O5

Amostras geolgicas

42

F-, Cl-, Br-, I-, S

V2O5

Amostras geolgicas

43

Cl-

V2O5

Ligas

44

F , Cl , Br
-

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Piroidrlise

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6.

DECOMPOSIO DE MATERIAIS ORGNICOS POR


COMBUSTO
Carlos Emanuel de Carvalho Magalhes DQ/UFCE
rico Marlon de Moraes Flores DQ/UFSM
Francisco Jos Krug CENA/USP
Juliano Smanioto Barin URI-UFSM
Mrcia Foster Mesko DQ/UFSM

INTRODUO
A determinao de elementos individuais em amostras de natureza orgnica
constitui um grande problema analtico, pois normalmente necessria a transformao dos
elementos de interesse da matriz orgnica em uma forma inorgnica simples. Na maioria
dos casos, aps a decomposio, os elementos de interesse ficam dissolvidos em uma
soluo aquosa. Em geral, a amostra original no adequada para anlise direta sem prtratamento, pelas seguintes razes:

a)

o elemento a ser determinado mantido na forma complexa por cidos orgnicos ou


outros ligantes presentes na amostra;

b)

a cor da amostra (soro sanguneo, cido hmico em guas naturais, sucos de frutas,
vinhos tintos, efluentes industriais, por exemplo) interfere em determinaes por
espectrometria de absoro molecular e turbidimetria;

c)

pode ocorrer a formao de emulso, espuma ou precipitado durante a anlise;

d)

o elemento a ser determinado no se encontra no estado dissolvido, o que um


requisito

para

maioria

das

tcnicas

de

determinao

(espectromtricas,

eletroanalticas, entre outras);


e)

em tecidos biolgicos, determinados elementostrao esto presentes em formas


qumicas diversas; algumas no mostram qualquer sinal durante as medidas, enquanto
outras fornecem sinais com diferentes intensidades; a decomposio transforma o
analito em uma forma qumica simples, com uma resposta uniforme;

f)

a heterogeneidade uma propriedade tpica de muitos materiais biolgicos; a


possibilidade de se empregar uma quantidade maior de amostra a qual, aps a
decomposio, resulta em uma soluo homognea, ajuda a superar este problema.

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Decomposio de materiais orgnicos por combusto

155

Pode-se ilustrar isso com um exemplo: considere que se disponha de uma amostra
de um plstico contendo certa proporo de poli(cloreto de vinila) (PVC). O problema
determinar o teor de PVC na amostra e, para tal, a determinao de cloreto no plstico seria
uma medida indireta de avaliar a concentrao de PVC, considerando-se que o PVC seja a
nica fonte de Cl. A tcnica quantitativa mais simples para a determinao de Cl a
gravimetria, onde os ons Cl na soluo aquosa so precipitados como AgCl.
O PVC apresenta a seguinte estrutura:
CH2 CH CH2 CH CH2 CH CH2

Cl
Cl
Cl
Percebe-se que os tomos de cloro esto ligados covalentemente estrutura do
polmero. Estes tomos no esto na forma inica. Mesmo se fosse possvel homogeneizar
o PVC em uma soluo aquosa sem destru-lo, no haveria a precipitao dos tomos de
cloro na presena de ons Ag+. Assim, preciso liberar os tomos de cloro do PVC em ons
Cl- em soluo aquosa. Isto pode ser feito atravs de um tratamento adequado da amostra,
onde as determinaes podem ser feitas sem maiores problemas. Analogamente, essa idia
vlida para qualquer elemento presente em matrizes de natureza orgnica. A maioria dos
elementos, principalmente em soluo aquosa, pode ser determinada por vrias tcnicas. A
Tabela 6.1. mostra exemplos tpicos de alguns elementos que so liberados da matriz
orgnica acompanhados de suas respectivas formas inorgnicas.
Tabela 6.1. Exemplos de formas e estados apropriados de alguns elementos com os
possveis mtodos para as suas determinaes.
Elemento

Forma
Inorgnica

Estado

Tcnica ou Mtodo de
Determinao

CO2

Gs

Absoro e pesagem

H2O

Vapor

Absoro e pesagem

N2

Gs

Medida do volume

Br

Br

Soluo aquosa

Gravimetria

2SO4

Soluo aquosa

Gravimetria

3PO4

Soluo aquosa

Espectrometria de Absoro
molecular

2+

Soluo aquosa

Espectrometria de absoro atmica

2+

Soluo aquosa

Espectrometria de absoro atmica

Soluo aquosa

Espectrometria de absoro
molecular

Pb

Pb

Cu
Fe

Cu
2+

Fe

3+

e Fe

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Decomposio de materiais orgnicos por combusto

156

Compreendendo-se a necessidade de converter os elementos da matriz orgnica


em uma forma inorgnica, a etapa seguinte avaliar como isso pode ser feito. De alguma
forma, as tcnicas com destruio completa da matriz orgnica mantm certo
relacionamento com as tcnicas convencionais de dissoluo, onde decomposies
qumicas drsticas so comuns, levando destruio completa da matriz. Freqentemente
ocorre a oxidao da matriz, convertendo-se carbono em CO2, hidrognio em H2O,
nitrognio ou xidos de nitrognio em N2. Os outros elementos permanecem em formas
inorgnicas convenientes para anlise. A maioria dos mtodos de decomposio que sero
aqui considerados envolve reaes de oxidao. Entretanto, para a determinao de no
metais existem apenas algumas tcnicas envolvendo reaes de reduo; ocasionalmente,
alguns metais, que podem ser associados com espcies orgnicas em um estado inico,
como sais ou complexos, podem ser separados por um tratamento com cido.
Deve-se notar que existem tcnicas disponveis para a determinao de elementos
individuais em uma matriz orgnica sem a necessidade de converso preliminar em uma
forma inorgnica, tais como anlise por ativao neutrnica, anlise direta de slidos por
espectrometria de absoro atmica e espectrometria de fluorescncia de raios-X. Estas
tcnicas so altamente especializadas, mas no so encontradas na maioria dos
laboratrios analticos.

Neste captulo, sero consideradas as seguintes tcnicas de decomposio, as


quais so de natureza oxidativa e que foram subdivididas em dois itens principais:
a) tubo de combusto (principalmente para determinaes de C, H e N);
b) via seca em fornos tipo mufla (de aplicao geral);
c) frasco de combusto de Schniger (de aplicao geral);
d) bomba de combusto (de aplicao geral);
e) via seca em baixas temperaturas com plasma de oxignio (especialmente para
espcies volteis);
f)

combusto em sistema dinmico (especialmente para amostras orgnicas no


volteis);

g) sistema de combusto de Wickbold (de aplicao geral, mas especialmente


desenvolvida para halognios)

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Decomposio de materiais orgnicos por combusto

157

6.1. TUBO DE COMBUSTO

A tcnica do tubo de combusto tem sido usada nos ltimos cem anos para
determinaes de rotina de carbono, hidrognio, oxignio, enxofre e halognios em
compostos orgnicos. A anlise elementar (em especial para C, H e N) uma tcnica que
tem sido muito usada por qumicos orgnicos para a caracterizao de compostos obtidos
em snteses. Atualmente, a grande maioria dos laboratrios, que utilizam esta tcnica em
anlises de rotina, empregam analisadores automatizados.
A tcnica do tubo de combusto baseia-se na oxidao completa de cerca de 500
mg de amostra, convertendo-se os elementos a serem determinados em uma forma gasosa
ou voltil. Isso realizado dentro de um tubo atravs do qual passa um gs, de tal maneira
que os produtos volteis da oxidao sejam levados at dispositivos para coleta e posterior
anlise.
A Figura 6.1 mostra um aparelho simples para a determinao de carbono e
hidrognio em compostos orgnicos.

Forno

22

33

44

7
O2

Figura 6.1. Aparelho com tubo de combusto para determinao de carbono e hidrognio
(adaptado de Anderson, 1991).1
 Recipiente de porcelana para amostra.
 Tubo contendo catalisador de platina.
 Tubo preenchido com CuO.
 Tubo contendo mistura de PbO2 e PbCrO4 + Ag.
 Tubo contendo um material dessecante.
 Tubo contendo ascarita.
 Tubo de proteo contendo dessecante e ascarita.
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Decomposio de materiais orgnicos por combusto

158

A seguir esto descritos os processos que ocorrem no aparelho mostrado na Figura


6.1:

a) A amostra, previamente pesada, colocada em um recipiente de porcelana, que


aquecida a temperaturas elevadas por meio de um forno.
b)

Uma corrente de oxignio (ou ar purificado, livre de CO2 e vapor de H2O) flui sobre a
amostra.

c)

A amostra queimada (ou pirolisada) e os produtos da oxidao (ou da pirlise) so


carreados pelo oxignio para o catalisador de platina cuja funo facilitar a oxidao
da amostra. Considera-se que a amostra seja completamente vaporizada por este
processo.

d)

Em seguida, os produtos da oxidao passam sobre uma fina camada de CuO


aquecido para completar a oxidao. Considera-se que, aps essa etapa, a oxidao
seja completa e que todo o carbono e hidrognio da amostra tenham sido convertidos a
CO2 e H2O, respectivamente.

e)

Os gases passam, ento, sobre uma mistura quente de PbO2 (para reter os xidos de
nitrognio) mais PbCrO4 e Ag (para reter os compostos sulfurosos e halogenados).
Estas espcies volteis, caso no sejam removidas, podem interferir nas determinaes
de carbono e hidrognio.

f)

Nessa etapa, os gases (O2, CO2 do carbono e H2O do hidrognio na amostra) deixam o
tubo de combusto e passam atravs de dois tubos absorvedores previamente
pesados. O primeiro tubo contm dessecante que absorve quantitativamente H2O. O
segundo tubo contm ascarita (uma mistura apropriada de KOH e asbesto) mais um
dessecante extra para absorver o CO2 (a presena do dessecante faz-se necessria
porque H2O desprendida quando ascarita absorve o CO2).

g)

Finalmente, o oxignio passa atravs de um tubo de proteo contendo dessecante e


ascarita para impedir a interferncia de H2O e CO2 da atmosfera na anlise.
Esta tcnica clssica do tubo de combusto pode ser modificada para determinar

outros elementos, como nitrognio, oxignio, enxofre e halognios.

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Decomposio de materiais orgnicos por combusto

159

Nitrognio
A amostra, previamente pesada, misturada com CuO em p e colocada no
recipiente de porcelana. Uma corrente de CO2 flui sobre o recipiente e a amostra
aquecida. O carbono oxidado a CO2, hidrognio a H2O e o nitrognio a N2 (mais alguns
xidos de nitrognio). O oxidante o CuO.
Os gases so arrastados de encontro a cobre metlico em limalhas, o qual reduz
todos os xidos de nitrognio a N2. Os gases so, ento, borbulhados em uma soluo
concentrada que absorve o excesso de CO2, vapor de H2O e quaisquer outros produtos
gasosos, exceto o N2, o qual coletado em uma bureta de gs, que um dispositivo que
mede o volume do gs produzido nas condies padro de temperatura e presso. No caso,
a medida analtica justamente o volume de N2 produzido. interessante observar que o
CO2 usado somente como gs de arraste sendo, posteriormente, absorvido na soluo de
KOH juntamente com outros gases. O N2 deve ser o nico gs saindo do tubo de combusto
e, por isso, o O2 que no retido na soluo de KOH no usado como oxidante.
Oxignio
Quando for necessrio determinar oxignio pela tcnica do tubo de combusto, a
amostra deve ser submetida a uma reao de reduo, e no de oxidao, pois o oxignio
que se deseja determinar. A idia misturar a amostra com carbono em p (agente redutor)
e aquecer a mistura em um recipiente de porcelana sob um fluxo de H2. O oxignio
convertido a CO, o qual passa sobre I2O5 slido, ocorrendo a seguinte reao:
5 CO(g)

I2 O5 (s) 

5 CO2 (g)

I2 (g)

O I2 gasoso absorvido em uma soluo adequada e titulado. Pode-se utilizar


soluo de KI, onde o on triiodeto formado e, posteriormente, titulado com soluo de
Na2S2O3 (tiossulfato de sdio).
Enxofre
A amostra oxidada em uma corrente de oxignio sobre um catalisador de platina
aquecido ao rubro.
SO3

H2O

H2SO4

SO2

+ H2O2

H2SO4

Assim, todo o enxofre convertido em H2SO4 o qual pode ser titulado com lcali
padro ou determinado gravimetricamente como BaSO4.

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Decomposio de materiais orgnicos por combusto

160

Halognios (exceto flor)


Do mesmo modo que para a determinao de enxofre, a amostra tambm
oxidada em uma corrente de oxignio sobre um catalisador de platina aquecido ao rubro. Os
halognios so convertidos em uma mistura dos elementos livres e dos haletos de
hidrognio correspondentes (pode ocorrer, tambm, pequena formao de oxihaletos). Os
gases so borbulhados em uma soluo de Na2SO3 para absorver os produtos de
combusto e reduzir todos os halognios e oxihaletos em haletos, os quais podem ser
determinados por tcnicas apropriadas (p. ex., gravimetricamente como haleto de prata).
Finalmente,

convm

comentar

que,

atualmente,

existem

analisadores

automatizados para a determinao de C, H e N, nos quais as anlises podem ser


concludas em cerca de 15 minutos, sem a necessidade de interveno do operador.

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Decomposio de materiais orgnicos por combusto

6.2.

161

DECOMPOSIO EM FORNO TIPO MUFLA

6.2.1. INTRODUO

Esta , provavelmente, a tcnica mais simples empregada para a decomposio de


amostras biolgicas e orgnicas. Baseia-se na queima da frao orgnica da amostra com o
oxignio do ar, obtendo-se um resduo inorgnico na forma de cinza solvel em cido
diludo. A amostra colocada em um cadinho (quartzo, porcelana, etc.) e aquecida em
atmosfera ambiente (o uso da tampa do cadinho impede que a amostra ou parte da mesma
seja perdida) at que todo o material orgnico seja queimado, resultando apenas em um
resduo inorgnico no voltil. O oxignio na atmosfera atua como agente oxidante e o
resduo proveniente da queima consiste de xidos de metais, assim como sulfatos no
volteis, fosfatos, silicatos e outros mais.
Apesar desta tcnica ser relativamente simples, h srias limitaes uma vez que
alguns elementos podem ser convertidos em uma forma voltil e perdidos parcial ou
completamente. Essas perdas por volatilizao tornam-se mais severas quanto mais alta for
a temperatura usada para a decomposio (Tabela 6.2). Entretanto, se no for usada uma
temperatura suficientemente alta, a amostra no ser decomposta por completo, dando
origem a resultados no exatos. A Tabela 6.3 resume as perdas por volatilizao na via seca
aberta em diferentes temperaturas.
O procedimento de decomposio deve ser conduzido em um forno tipo mufla
ajustando-se a temperatura a um valor suficientemente alto para decompor a amostra em
um tempo razovel, sem que ocorra perda do analito na forma de espcies inorgnicas
volteis. A temperatura conveniente para a pirlise da matria orgnica encontra-se,
freqentemente, entre 450 e 550 C.

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Decomposio de materiais orgnicos por combusto

162

Tabela 6.2. Perdas de elementos durante a decomposio de materiais orgnicos por via
seca presso atmosfrica (Iyengar e Sansoni,1982).

Elemento

Matriz

Temperatura (C)

Ag

fgado de animal

450

<5

rim de animal

450

<20

fgado de animal

450

16

rim de animal

450

12

sangue de boi (seco)

850

16

35

sangue de boi (seco)

550

16

29

sangue de boi (seco)

450

16

28

Ba

rim de animal

450

Ca

tecido nervoso humano

420

16

<1

tecido nervoso humano

600

16

<1

tecido nervoso humano

710

16

<1

fgado de animal

450

<0,7

fgado de rato

600

16

1,6

fgado de rato

500

16

rim de rato

500

16

4,4

molusco

450

26

molusco

800

22

acar refinado

450

acar no refinado

450

47

melao

450

52

acar refinado

450

63

acar-demerara

450

62

acar no refinado

450

86

melao

450

89

fgado de rato

700

16

2,2

fgado de rato

500

16

6,1

sangue de rato

700

16

51,3

sangue de rato

500

16

rim de animal

450

0,4

fgado de animal

450

0,2

rim de animal

450

0,1

fgado de rato

500

16

Al

As

Cd

Co

Cr

Cr

Cu
Fe

Tempo (h)

Francisco Jos Krug, fjkrug@cena.usp.br. VI Workshop sobre Preparo de Amostras, Santa Maria, 2006.

% perdas

Decomposio de materiais orgnicos por combusto

163

Tabela 6.2. (cont.)


Elemento

Matriz

Temperatura (C)

Fe

sangue de rato

500

16

0,4

Hg

peixe (inteiro)

110

24

81,4

tecido nervoso humano

420

16

<1

tecido nervoso humano

600

16

55

tecido nervoso humano

710

16

90

Molusco metabolizado

450

15

molusco metabolizado

800

21

rim de animal

450

<1,5

fgado de animal

450

<0,4

tecido nervoso humano

420

16

<3

tecido nervoso humano

600

16

10

tecido nervoso humano

710

16

20

Mn

Mo

Na

Ni

Pb

Sn

Sr

Zn

Tempo (h)

% perdas

Rim de animal

450

<15

fgado de animal

450

tecido nervoso humano

600

16

<5

tecido nervoso humano

710

16

40

rim de animal

450

<0,3

fgado de animal

450

<11

rim de animal

450

<0,5

fgado de animal

450

<2,5

sangue de boi

450

16

ossos de rato

450

16

<0,5

sangue de rato

450

16

16

rim de rato

450

16

molusco

450

33

molusco

800

44

alga marinha

1000

16

mexilho

500

16

mexilho

1000

16

sangue de boi

850

16

sangue de rato

700

16

rim de animal

450

<1

fgado de rato

700

16

1,1

Francisco Jos Krug, fjkrug@cena.usp.br. VI Workshop sobre Preparo de Amostras, Santa Maria, 2006.

Decomposio de materiais orgnicos por combusto

164

Em vista dos problemas de perdas por volatilizao, a decomposio por via seca
em cadinho aplicvel somente para elementos metlicos, visto que a maioria dos no
metais oxidada a produtos volteis. conveniente recordar que o mtodo do tubo de
combusto foi usado para no metais sendo necessria a completa volatilizao dos
elementos. Logo, sob esta tica, as duas tcnicas so complementares: o mtodo do tubo
de combusto para no metais com derivados volteis e a decomposio por via seca em
sistema aberto para a maioria dos metais resultando na formao de constituintes no
volteis. Entre os elementos que so propensos s perdas por volatilizao esto os F, Cl,
Br, I, S, Se, P, As, Sb, Ge, Tl e Hg.

Tabela 6.3. Perdas por volatilizao por via seca em diferentes temperaturas (Bock,1979).3
Elemento
Al
As
B
Ca
Cd
Co
Cr
Cu
Fe
Hg
K
Mg
Mn
Mo
Na
Ni
Pb
Sb
Zn

400 oC
+++
+++
++
0
+; +++
0
0
++; +++
+++
+++
0
0
++
0
+++
0

450 oC

500 oC

550 oC

0
+++

0; +
0; +++

+++

0
0
0; +++
0
0; +++
0; +

0
++
0; +++
0
0; ++
0; +++
+++
+; +++
0
0; +
0; +++
0
0; +
0; +++
++
0; +++

0
0
0; +++
0; ++
0
0; +
0; ++

600 oC

700 oC
+++

0
0
0; +++
0; +++
+++
0; +

0; +++
+++
0; +

0; +++
++
0; ++
0; +++
+++
++; +++
0; +
0; ++
++
++

0
0
++
0
0; +
+
0; +++

+
0

0
0; +
0; +

0; +++
+++
0; +++

nenhuma perda

++

6 a 20 % de perda

2 a 5 % de perda

+++

> 20%

s vezes um elemento mais propenso perda por volatilizao se determinadas


espcies estiverem presentes na matriz da amostra. O on cloreto (do sal adicionado s
amostras de alimentos, p.ex.) pode reagir com metais produzindo cloretos volteis. O
chumbo e o cdmio so facilmente perdidos desta maneira como PbCl2 e CdCl2 volteis.
Outra fonte de erro que a amostra pode reagir com o material do cadinho. A
extenso desta perda depende da temperatura, do material do cadinho e da composio da
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Decomposio de materiais orgnicos por combusto

165

amostra. Se o cadinho for de porcelana ou slica, o elemento pode reagir e ficar aderido nas
paredes do recipiente, sendo perdido neste tipo de pr-tratamento. Silicatos, fosfatos e
xidos combinam-se facilmente com o esmalte dos cadinhos de porcelana, e por esta razo
prefervel trabalhar com cadinhos de quartzo ou de platina. Entretanto, apesar destes
problemas potenciais, a decomposio por via seca usada em muitas anlises devido a
sua simplicidade. Em muitos procedimentos, nenhum reagente utilizado, exceto o O2 do ar,
minimizando os riscos de contaminao se o ar for de boa qualidade.

6.2.2 DECOMPOSIO ASSISTIDA COM ADITIVOS.


Em muitos casos os procedimentos de decomposio so mais eficientes quando
alguns aditivos so misturados amostra antes de ser decomposta. Decomposies por via
seca quando acompanhadas por outros reagentes, alm do oxignio do ar, servem para
vrios propsitos:

a) acelerar a oxidao;
b) prevenir a volatilizao de certos componentes das cinzas;
c) prevenir reaes entre os componentes da cinza e o material do cadinho.
Os aditivos mais comuns so oxidantes, tais como cido ntrico ou um nitrato, este
ltimo sendo adicionado como soluo concentrada em gua (ou em metanol ou etanol,
quando nitrato de magnsio for adicionado para assistir a oxidao de substncias
gordurosas). A amostra , ento, seca antes de ser transferida ao forno para decomposio.
Alm de assistir a oxidao, a adio de nitrato ajuda a desprender as cinzas durante o
processo de combusto.
O cido ntrico tambm pode ser adicionado no incio do procedimento de
decomposio, mas mais habitual fazer a combusto da amostra que j foi decomposta
parcialmente com cido, tornando a pirlise da matria orgnica mais rpida. O cido ntrico
no deve ser empregado quando traos de estanho forem determinados em materiais
biolgicos, pois o cido estnico resultante tende a reagir com os cadinhos de slica.
A perda por volatilizao tambm pode ser evitada, em alguns casos, pela adio
de cido sulfrico: os cloretos relativamente volteis, tais como PbCl2, CdCl2 e NaCl, so
convertidos em sulfatos no volteis, e alguns complexos organometlicos volteis so
destrudos, como os compostos de vandio-porfirina.
As perdas de nions, por outro lado, tais como as de cloretos, e nions contendo
arsnio, fsforo e boro, podem ser evitadas pela adio de vrias bases, geralmente xidos
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Decomposio de materiais orgnicos por combusto

166

e hidrxidos de metais alcalinos ou alcalino-terrosos, carbonatos de metais alcalinos, nitrato


de metais alcalino-terrosos e acetato de magnsio. Nas tcnicas espectromtricas, que
empregam atomizao e vaporizao eletrotrmica, comum a adio de uma espcie
qumica para aumentar a estabilidade trmica do analito durante a etapa de pirlise. Neste
caso, o aditivo denominado modificador qumico, sendo muito comum o uso de uma
soluo contendo paldio e magnsio.
A Tabela 6.4 resume, de um modo geral, as principais vantagens e desvantagens
dos mtodos de decomposio por via seca em sistemas abertos.

Tabela 6.4. Vantagens e desvantagens da via seca em sistemas abertos


Vantagens

Desvantagens

relao entre massa de amostra e volume


perdas de elementos por volatilizao
final muito flexvel
requer pouca ateno do operador

perdas de amostra como aerosol slido

no requer cidos concentrados

perdas de amostra como espuma

no requer capelas especiais

alto risco de contaminao

digerido em meio compatvel com mtodo algumas cinzas so de difcil dissoluo


de determinao

Em sntese, a decomposio por via seca em mufla um dos procedimentos mais


simples para o preparo de amostras, onde a decomposio das amostras orgnicas ocorre
atravs da combusto e/ou pirlise em uma mufla, normalmente com temperaturas entre
450 C e 550 C.4 O equipamento empregado simples e barato, empregando-se materiais
como bqueres, cadinhos de porcelana, quartzo, platina e zircnio. Grandes quantidades
(>10 g) de amostra podem ser decompostas, necessitando pouca ateno do analista
durante o processo, particularmente em muflas com rampas de aquecimento. Existem
muflas com capacidade de grande nmero de cadinhos, propiciando uma grande freqncia
analtica. A diluio da amostra pode ser pequena, uma vez que o resduo pode ser
reconstitudo em um pequeno volume de um cido mineral (HCl ou HNO3), normalmente
diludos. Os teores de matria orgnica residual normalmente encontrados so
extremamente baixos (<0,1%, m/m).
Apesar de existirem resultados contraditrios na literatura, a perda de elementos
por volatilizao pode ser significativa. Mercrio voltil em grande parte de suas formas

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Decomposio de materiais orgnicos por combusto

167

qumicas, o mesmo ocorrendo com As, Sb, Sn, Ge, Se, porm, em menor proporo. Alm
disso, Cd, Pb, Zn e Co so volteis como cloretos ou brometos em temperaturas elevadas.

Para solucionar o problema, podem ser utilizados modificadores qumicos, tais como nitratos
e sulfatos, produzindo sulfatos e/ou nitratos dos elementos de interesse menos volteis ou,
ainda, eliminando os cloretos como NOCl ou HCl. Porm, se cido ntrico e/ou cido
sulfrico ou alguns nitratos e sulfatos forem introduzidos no sistema, a possibilidade de
contaminao aumenta se os cidos no forem de alta pureza. Perdas tambm podem
ocorrer atravs da reteno dos elementos no recipiente de decomposio. Alm disso,
muitas vezes pode ocorrer a formao de fosfatos e silicatos. Os silicatos podem ser
formados por reao de xidos de alguns elementos com vidro ou quartzo. Cadinhos de
platina podem formar ligas com metais nobres. Outro problema que pode ser encontrado
que se o aumento da temperatura for feito muito rapidamente (>50 C h-1), pode haver
perdas da amostra por projeo ou ignio.6 Por se tratar de um sistema de decomposio
aberto, existe a possibilidade de contaminao pelo ar atmosfrico.
Apesar de boas recuperaes serem encontradas na literatura para vrios
elementos, os procedimentos envolvendo decomposio por via seca em mufla no so
facilmente aplicveis para a determinao posterior de elementos volteis, tais como Hg, As
e Se. Alm do mais, como resultado dos possveis erros sistemticos relacionados ao
procedimento, tem sido recomendado por programas de qualidade minimizar a utilizao de
procedimentos de decomposio baseados na decomposio por via seca em mufla em
certificaes dos materiais de referncia, tendo em vista que este procedimento ainda
permanece entre os mtodos oficiais nos pases nrdicos. Conseqentemente, o uso de
procedimentos de decomposio por via mida aparece ainda, como determinantes em
processos de certificao.4
Alguns problemas como contaminao e dificuldades associadas ao lento
aquecimento de sistemas tradicionais de decomposio por via seca, como as muflas,
podem ser resolvidos. Atualmente esto disponveis no mercado muflas com sistema de
aquecimento realizado atravs da irradiao de microondas, onde carbeto de silcio ou
grafite so empregados, por apresentarem altssima capacidade de absoro de microondas
com uma elevada taxa de aquecimento. Alm disso, neste sistema evita-se o ambiente
inadequado de certos sistemas tradicionais, minimizando a contaminao.7

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168

Decomposio de materiais orgnicos por combusto

REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS DO ITEM 6.2

1. R. ANDERSON. Sample Pretreatment and Separation. Analytical Chemistry by Open


Learning. Chichester: John Wiley, 1991. 632p.
2. G. V. IYENGAR, B. SANSONI. Sample Preparation of Biological Material for Trace
Element Analysis. Vienna: International Atomic Energy Agency, 1980, 255p.
3. R. BOCK. A Handbook of Decomposition Methods in Analytical Chemistry. Glasgow:
International Textbook, 1979, 444p.
4. HOENIG, M., BAETEN, H., VANHENTENRIJK, S., VASSILEVA, E., QUEVAUVILLER, PH.
Critical discussion on the need for an efficient mineralization procedure for the analysis of
plant material by atomic spectrometric methods. Analytica Chimica Acta, Amsterdam,
v.358, n.1, p. 85-94, 1998.
5. IYENGAR, G.V., SUBRAMANIAN, K.S., WOITTIEZ, J.R.W. Element Analysis of
Biological Samples Principles and Pratice. New York: CRC Press, Boca Raton,
1997.
6. JORHEM, L. Dry ashing, sources of error, and performance evaluation in AAS.
Mikrochimica Acta, Vienna, v.119, n.3-4, p. 211-218, 1995.
7. CEM Corporation, Innovators in microwave technology,
http://www.cem.com/pages/arwv.htm, acessada em 20/03/2006.

Francisco Jos Krug, fjkrug@cena.usp.br. VI Workshop sobre Preparo de Amostras, Santa Maria, 2006.

Decomposio de materiais orgnicos por combusto

169

6.3 DECOMPOSIO EM BAIXAS TEMPERATURAS


Conforme j foi comentado, as duas principais causas de erros sistemticos na
decomposio de amostras orgnicas por via seca em sistemas abertos so as perdas por
volatilizao e as perdas do analito pela reao com o cadinho. Ambas as causas de erro
tornar-se-iam muito menos severas se as decomposies por via seca pudessem ser feitas
em temperaturas inferiores a 500 C, ou somente na temperatura necessria para oxidar
completamente a matriz orgnica1.
possvel decompor amostras em baixas temperaturas, utilizando-se o poder
oxidante de um plasma contendo radicais oxignio e oxignio excitado. O plasma
produzido em um sistema baixa presso de oxignio aplicando-se um campo eltrico de
alta freqncia (usualmente indutivamente acoplado) ou radiao microondas. A amostra
fica situada no interior de um sistema, onde as espcies no reativas de oxignio e oznio
so retiradas atravs da suco realizada por uma bomba de vcuo. Para evitar a perda de
elementos volteis utiliza-se um sistema de resfriamento com circulao de gua. O calor
produzido proveniente das reaes de oxidao exotrmicas sendo que, normalmente, no
ultrapassa 150 C, sendo a tcnica, portanto, chamada de decomposio baixa
temperatura. Uma caracterstica importante que, como a reao ocorre entre um slido e
um gs, a decomposio depende do contato da amostra com o plasma e, portanto, a rea
superficial da amostra um parmetro relevante.
Assim, por exemplo, quando uma corrente de oxignio puro a uma baixa presso,
na faixa de 1 a 5 torr, passa atravs de um campo eltrico de alta freqncia, o oxignio
converte-se em oxignio excitado, ou um plasma de oxignio. Este plasma consiste de
uma mistura de tomos, ons e de molculas de oxignio nos estados fundamental e
excitado, com um tempo de vida de aproximadamente 1 s, e apresenta altssima reatividade.
Aps esse tempo, o oxignio excitado reconvertido ao seu estado molecular normal (O2).
Existem dois sistemas de decomposio baixa temperatura com oxignio excitado
disponveis no mercado. O sistema da Figura 6.3 conhecido como LTA (do ingls Low
Temperature Asher), e emprega freqncia de 13,5 MHz e potncia de at 300 W. Algumas
verses mais recentes utilizam microondas com freqncia de 2450 MHz e potncia de at
200 W para criar o plasma.

Francisco Jos Krug, fjkrug@cena.usp.br. VI Workshop sobre Preparo de Amostras, Santa Maria, 2006.

Decomposio de materiais orgnicos por combusto

170

Figura. 6.2. Sistema de decomposio a baixa temperatura com oxignio excitado

Neste equipamento, um fluxo de O2 admitido em um tubo de slica a baixa


presso (1 a 5 torr). Ao redor do tubo fixa-se uma bobina feita com um fio de metal, atravs
do qual passa uma corrente eltrica alternada No campo eletromagntico de radiofreqncia
gerado, o oxignio molecular convertido em um plasma muito reativo contendo tomos de
oxignio excitado, radicais livres, ons e eltrons livres. O plasma envolve ento as partculas
da amostra moda permitindo a sua decomposio sem nenhuma fonte externa de calor. A
amostra oxidada em temperaturas que raramente excedem 200 C e que geralmente so
menores que 150 C. A amostra posicionada bem prxima ao campo de alta freqncia
face ao tempo de existncia do oxignio excitado ser de apenas 1 s. Os produtos volteis da
combusto e o excesso de oxignio so purgados em direo a um mdulo de exausto.
Um outro sistema de decomposio de amostras baixa temperatura com oxignio
excitado, desenvolvido por Knapp et al.2 e denominado CPA (do ingls Cool Plasma
Asher), mostrado nas Figuras 6.3 e 6.4, sendo construdo de quartzo e contendo uma
barra magntica (quando necessrio) para agitao da amostra, para constante renovao
da camada de slido em contato com o plasma.
O plasma gerado por induo usando-se um gerador de 27,12 MHz e potncia de
20 a 40 W. At 1 g de amostra pode ser decomposta empregando-se uma vazo de
oxignio de 4 l h-1, sendo que a amostra, no contendo mais que 10% de teor de gua, deve
ser previamente pulverizada. Aps a decomposio, coloca-se um condensador na parte
superior do sistema e pe-se em refluxo com cerca de 2 ml de um cido apropriado. Desta
maneira, alguns elementos que fiquem adsorvidos nas paredes podem ser solubilizados no
meio cido.

Francisco Jos Krug, fjkrug@cena.usp.br. VI Workshop sobre Preparo de Amostras, Santa Maria, 2006.

Decomposio de materiais orgnicos por combusto

171

Figura. 6.3. Sistema de decomposio com plasma de oxignio (CPA). 2

Figura. 6.4. Seqncia de operaes com o CPA (conforme Knapp, 1998.)

Os constituintes no volteis permanecem no resduo e podem ser, ento, determinados. A


temperatura durante a decomposio depende amplamente da potncia eltrica, da presso
do oxignio e da natureza da amostra. Alguns exemplos so mostrados na Tabela 6.5.

Francisco Jos Krug, fjkrug@cena.usp.br. VI Workshop sobre Preparo de Amostras, Santa Maria, 2006.

Decomposio de materiais orgnicos por combusto

172

Tabela 6.5. Temperaturas durante a decomposio com plasma de oxignio a 1 torr.


Material

Temperatura (C)

Papel de filtro

120

Resina sinttica, polmero de espuma

150

Tecido animal

160

Plantas

150

Grafite

130

PTFE

190
Em virtude das baixas temperaturas, as perdas por volatilizao e as interaes com

os frascos de reao so sensivelmente diminudas. Alguns elementos como As, Cd, Sb, Pb,
B e Ge so apenas alguns exemplos de elementos que podem ser submetidos a este
mtodo de decomposio sem perdas significantes. Entretanto, halognios, mercrio e
enxofre so perdidos durante a queima da amostra. O motivo das perdas de outros
elementos como Ag, Au, P, Si e Re ainda no bem compreendido, mas possvel que
estes elementos sejam conduzidos para fora do frasco de decomposio como material
particulado.
Outra importante vantagem, em comum com os mtodos de combusto simples,
que nenhuma contaminao por elementos metlicos esperada. Devido s temperaturas
no serem muito altas, as chances de reao entre o resduo e o recipiente so bastante
atenuadas, e as recuperaes obtidas so bem melhores em comparao aos mtodos que
empregam temperaturas elevadas. Uma sria desvantagem que a baixa presso do
oxignio implica em uma velocidade de combusto muito lenta, levando-se horas ou at dias
para a decomposio de um grama de amostra. O tempo depende do tamanho das
partculas, das condies e da natureza da substncia. Alm disso, difcil decompor
materiais com altos teores de cinzas. O oxignio excitado no consegue atingir o centro da
amostra, a no ser que se agite mecanicamente a mesma ou se interrompa periodicamente
o processo para quebrar as cinzas com um basto de platina. Deve-se tambm ter um
cuidado especial com mudanas sbitas na presso, pois quando isso ocorre parte da
amostra perdida como material particulado.
De qualquer forma, deve-se ressaltar que a tcnica de decomposio em baixa
temperatura com oxignio excitado apresenta destaques, tais como a utilizao de
pequenas quantidades de reagentes e, conseqentemente, menor contaminao, pequena
diluio da amostra (uma vez que 2 g da amostra podem ser reconstitudos em 1 ou 2 ml de
cido) e a decomposio de materiais de difcil preparo tais como grafite e PTFE.
Finalmente, o sistema bastante seguro, j que opera baixa temperatura e aberto,
evitando-se, assim, o risco de exploses.
Francisco Jos Krug, fjkrug@cena.usp.br. VI Workshop sobre Preparo de Amostras, Santa Maria, 2006.

Decomposio de materiais orgnicos por combusto

173

Reviso de algumas aplicaes


O tempo necessrio para a decomposio de 250 mg de tecidos biolgicos seguida
da determinao de bismuto por espectrometria de absoro atmica com atomizao
4

eletrotrmica (ET AAS) foi realizada por Djudzman, Eeckhout e Moerloose . Os autores
encontraram 15 horas com sendo o tempo ideal para a destruio da matria orgnica e a
obteno de boas recuperaes.
Carter e Yeoman5 utilizaram uma mistura de oxignio e tetrafluoreto de carbono para
aumentar a velocidade da decomposio de amostras de sangue. Os autores colocaram 10
l de sangue juntamente com 50 l de gua em um copo de nquel (clssico copo de
Delves), secaram em chapa de aquecimento por 2 minutos a 110 C e, finalmente,
introduziam o copo no sistema. O tempo necessrio para destruio da matria orgnica
depende da mistura utilizada na gerao do plasma, sendo necessrios cerca de 12 min
para uma mistura 1+1 de oxignio e tetrafluoreto de carbono. Em 1982, Williams6 substituiu
o tetrafluoreto de carbono por politetrafluoretileno (PTFE) como fonte de flor e como
recipiente para a amostra, obtendo menor interao da amostra com o recipiente. O autor
comenta que apesar dos bons resultados obtidos para a determinao de Sn, Fe, Pb e Cr
em alimentos, pode ocorrer a formao de fluoretos volteis, por exemplo, com B, P, S, Si,
Ti, U e W.
A especiao de constituintes inorgnicos em carvo por vrios mtodos analticos
foi realizada por Vogt7 em 1994, utilizando a LTA para o preparo de algumas amostras. Sob
as condies do sistema, alguns minerais como fosfatos, sulfatos e caolinitas podem sofrer
desidratao e que elementos como Hg, Se, As e Sb podem ser perdidos por volatilizao.
Entretanto, silicatos, carbonatos, xidos e muitos sulfatos permanecem inalterados.
Gillain8 verificou que perdas por volatilizao de antimnio so difceis de prevenir,
obtendo-se boas recuperaes para Sb (III) apenas quando uma baixa potncia foi usada
por um curto perodo de tempo. Para elementos como Zn, Cd, Pb, Cu e Bi boas
recuperaes foram encontradas. Tambm verificou que brancos mais baixos so
encontrados em relao decomposio em sistema pressurizado com aquecimento
convencional. Porm, esta ltima leva menos tempo para decomposio.
Uma perda substancial de arsnio no preparo de amostras de material particulado
atmosfrico e de vrias matrizes sintticas de sais marinhos foi observada por Walsh e
Fasching.9 As perdas no foram relacionadas com relao a alguma forma qumica
especfica de arsnio mas, provavelmente, so dependentes da constituio da amostra, da
potncia empregada na gerao do plasma e da durao da exposio da amostra.

Francisco Jos Krug, fjkrug@cena.usp.br. VI Workshop sobre Preparo de Amostras, Santa Maria, 2006.

Decomposio de materiais orgnicos por combusto

174

10

Mulford

avaliou a influncia da potncia aplicada para gerar o plasma na

decomposio de p de celulose e gar contendo xido de cobre. Verificou que mercrio


era perdido em todas as potncias e que selnio apresentava recuperao que variava de 5
a 70% para as potncias de 295 W e 32 W, respectivamente. Para arsnio, as perdas eram
proporcionais potncia aplicada (no intervalo de 70 a 275 W). A perda de mercrio em
11

amostras de peixe foi avaliada por Pillay et al. Os autores verificaram que aps o intervalo
2+

de 3,5 a 7 horas de preparo, as perdas de mercrio (na forma de Hg ) em seis amostras


diferentes variaram de 81% a 98%.
12

White e Lawrence

investigaram a influncia de determinados parmetros no

processo de decomposio. Para tanto, utilizaram amostras com tamanho de partcula


menor que 75 m, como por exemplo, de materiais botnicos. Materiais biolgicos eram
liofilizados, modos e peneirados, enquanto materiais como papel e cabelo eram apenas
cortados em pedaos de 5 cm e introduzidos no sistema. Para 1 g do material de referncia
(Citrus Leaves), a adio de uma barra magntica recoberta com quartzo para agitao
diminuiu o tempo de decomposio de 80 h para 56 h. Para as mesmas condies, os
autores adicionaram uma vazo de 2 a 5% de argnio, baixando o tempo de decomposio
para 15 h, e posteriormente, introduziram esferas de PTFE diminuindo, assim, o tempo para
6 horas. Tambm, estudaram a influncia do condensador com circulao de gua no
momento do refluxo com cidos, verificando que perdas de B, Hg e S eram significantes
sem a passagem e com a passagem de gua pelo condensador.
A tcnica tambm foi empregada para o preparo de amostras para a determinao
de Cd em sangue13 e arroz,14 B em tecidos animais15 e materiais biolgicos,16 Na em fibras
17

18

acrlicas, Cd e Pb em sangue e vinte e oito elementos em carvo.

19

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Decomposio de materiais orgnicos por combusto

175

Tabela 6.6. Alguns exemplos de decomposio com plasma de oxignio (Anderson ).


Amostra

Elemento Determinado

Perdas

Sangue

As, Cd, Co, Cr, Cs Cu, Fe, Mn, Mo,


Na, Pb, Sb, Ta, Zn

Ag, Au, Hg

Cabelo

Ag, As, Au, Cd, Co, Cu, Fe, Ga, In, La,
Mn, Ni, Sb, Se, Zn

Br, Hg

Material biolgico

As, Cr, Cu, Fe, Mn, No, Pb, Sb, Se, Zn

Ag, Au, Hg, I

Sangue

Soro sanguneo

Ag, Co, Cr, Cs, Fe, Rb, Sb, Sc, Se

Zn

Material biolgico

Ca, Cu, Fe, K, Mg, Na, Zn

Vrios materiais

Mg, Na, Ni, Sn, Sr, Ti

Poeira

Cd, Cu, Pb, Zn

Leite em p

As, Cu, Zn

Soro, plasma, sangue

Be, Cr

Material biolgico

As, Cu

Hg, Se

Carvo, grafite

As, Ga, cinza total

Material biolgico

Tabaco

Cd

Material biolgico

Ge

Plantas

Co, Cu, Mn

Polmeros orgnicos

Cinza total

Fibras

Na

Ag, Au, Hg, (Re, 2%)

P, Si

Cl, S
B (3%)

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Decomposio de materiais orgnicos por combusto

176

REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS DO ITEM 6.3

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Learning. Chichester: John Wiley, 1991, 632p.
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3. G. KNAPP.

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4. DJUDZMAN, R., EECKHOUT, E.V.den., MOERLOOSE, P. Determination of bismuth by
atomic-absorption

spectrophotometry

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electrothermal

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after

low-

temperature ashing. Analyst, Cambridge, v. 102, n. 1218, p. 688-691, 1977.


5. CARTER, G.F., YEOMAN, W.B. Determination of cadmium in blood after destruction of
organic material by low-temperature ashing. Analyst, Cambridge, n. 105, v. 1248, p. 295297, 1980.
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8. GILLAIN, G. Studies of pretreatments in the determination of zn, cd, pb, cu, sb and bi in
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9. WALSH, P.R, FASCHING, J.L. Losses of arsenic during low-temperature ashing of
atmospheric particulate samples. Analytical Chemistry, Washington, v. 48, n. 7, p. 10121014, 1976.
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177

11. PILLAY, K.K.S., THOMAS, C.C., SONDEL, J.A., HYCHE, C.M. Determination of mercury
in biological and environmental samples by neutron activation analysis. Analytical
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12. WHITE J.R., R.T., LAWRENCE, C.W., Journal of Association of Official Anaytical
Chemists, v. 78, p. 99-109, 1995.
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toxic metals in biomatrices. Fresenius Zeitschrift fr Analytische Chemie, New York, v.
285, p. 25-34, 1977.
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extracted from radiofrequency ashed animal tissues using 2-ethyl-1,3-hexanediol.
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other methods of organic sample oxidation for determination of sodium in an acrylic fibre.
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18. HAUSER, T.R., HINNERS, T.A., KENT, J.L. Atomic-absorption determination of cadmium
and lead in whole-blood by a reagent-free method. Analytical Chemistry, Washington, v.
44, n. 11, p. 1819-1821, 1972.
19. NADKARNI, R.A. Multi-technique multi-elemental analysis of coal and fly-ash. Analytical
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Decomposio de materiais orgnicos por combusto

178

6.4

FRASCO DE COMBUSTO COM OXIGNIO

6.4.1. INTRODUO
As principais dificuldades associadas com a decomposio por via seca e at
mesmo com a decomposio em baixas temperaturas centralizam-se na perda de elementos
como espcies volteis. Na tcnica do tubo de combusto o problema contornado ao se
promover a volatilizao quantitativa dos elementos de interesse e recuper-los como
produtos volteis da fase gasosa. Contudo, a tcnica do tubo de combusto relativamente
complicada e a aparelhagem envolvida complexa. Idealmente, a tcnica deveria ser
relativamente fcil de conduzir, sem envolver aparelhagem complexa e que pudesse oxidar
completamente as amostras orgnicas e biolgicas de modo que, tanto a cinza no voltil
como os produtos volteis, fossem recuperados quantitativamente sem perdas.
Chegou-se bem perto de alcanar esses parmetros com o advento do mtodo do
frasco de combusto com oxignio, tambm conhecido como frasco de combusto de
Schniger (originalmente o mtodo foi introduzido em 1892 por Hempel para macroanlise),
mas em 1955, Schniger adaptou e desenvolveu o mtodo para a decomposio de
amostras orgnicas e biolgicas1. Essencialmente, o mtodo consiste em confinar a amostra
em um envoltrio, normalmente papel, o qual fica suspenso em um frasco fechado com
atmosfera de O2 e uma soluo absorvedora de ons, adequada para o elemento que se
deseja determinar. Um tipo de frasco de combusto de oxignio comercial consiste em um
frasco cnico de paredes resistentes com macho de vidro esmerilhado, no qual selado um
fio grosso e rgido de platina, com uma cesta, tambm de platina, fixada na extremidade,
atuando como uma dobradia para prender a amostra.
A seguir est descrito o procedimento com o frasco de oxignio de combusto da
Figura 6.5:

a) A amostra, previamente pesada, envolvida em um tipo de papel de filtro que no deixa


cinzas. Cabe salientar que o peso da amostra depende do volume e do tipo de frasco
utilizado.

b) A amostra, envolta no papel filtro, fixada na tela de platina de forma que seja deixada
uma salincia do papel.

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Decomposio de materiais orgnicos por combusto

179

c) No frasco de combusto adiciona-se um volume adequado de soluo absorvedora.


Normalmente, esta uma soluo de cido diludo quando se pretende determinar um
metal, ou uma soluo de lcali diludo quando se determina um no metal.

d) Em seguida, aplica-se um jato rpido de oxignio no interior do frasco, expulsando o ar


do seu interior, a fim de que a atmosfera no frasco seja de oxignio puro.

e) Imediatamente aps o jato de oxignio no frasco, acende-se a salincia do papel que


envolve a amostra, segurando-a e colocando firmemente o macho no frasco (melhor
ainda seria acend-la por ignio eltrica, ou por meio de uma lmpada infravermelha
com auxlio de uma lente). O frasco (Figura 6.5e) invertido para que a prpria soluo
absorvedora promova a vedao do macho. A amostra e o papel de filtro queimam
brilhantemente na presena da atmosfera de oxignio puro (a combusto rpida e se
completa entre 5 e 15 segundos). Como a presso no interior do frasco aumenta
consideravelmente durante a combusto, faz-se necessrio segurar fortemente a rolha,
pois, caso contrrio, ela ser atirada para fora.

f)

Aps a amostra ter sido completamente queimada, deixa-se o frasco esfriar (se ocorrer
a formao de fuligem ou depsitos de carbono, significa que a amostra no foi bem
decomposta e que algumas determinaes podem ser prejudicadas). A soluo
absorvedora deve ser agitada para garantir a completa absoro de todos os produtos
volteis de oxidao assim como, a dissoluo das cinzas.

g) O frasco deve ser aberto aps a completa absoro de todos os produtos de oxidao
(este processo pode ser observado, aps alguns minutos aps o trmino da
combusto). Finalmente, a soluo absorvedora transferida para um balo
volumtrico.

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Decomposio de materiais orgnicos por combusto

180

(a) Frasco de oxignio com macho e cesta ;

(b) papel de filtro

(c) Introduo de oxignio no frasco e colocao da amostra na cesta

(d) Ignio da amostra e insero do macho

(e) Processo de oxidao no frasco de oxignio

(f) Absoro dos produtos de oxidao na soluo


Figura 6.5. Seqncia operacional em um frasco de combusto comercial (Anderson25)

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Decomposio de materiais orgnicos por combusto

181

6.4.2. TIPOS DE FRASCOS DE COMBUSTO DE SCHNIGER


Os frascos de combusto so feitos, geralmente, de vidro borossilicato,
preferencialmente com paredes reforadas. Usualmente, emprega-se como frasco um
erlenmeyer de borossilicato de 500 ml (suficiente para queimar 50 a 60 mg de amostra).
Porm, alguns autores utilizaram frascos de polietileno para a determinao de silcio, bem
2

como quartzo e policarbonato para a determinao de fluoreto, visando minimizar a


interao do analito com o frasco.
O suporte da amostra, geralmente, composto por um fio de platina de 0,5 a 1,0 mm
de espessura que forma uma espcie de cesta na extremidade, de cerca de 15 x 30 mm.4
possvel ocorrer a formao de ligas de alguns elementos com a platina, tais como
bismuto.5 Para contornar este problema pode-se empregar um espiral de slica como
suporte.
Burfield e Ng6 desenvolveram um sistema semelhante ao frasco de combusto de
Schniger, porm, sem utilizar o suporte de platina para a determinao de cloreto em PVC.
Ure e Shand,7 empregando um suporte de platina, encontraram baixas recuperaes para
mercrio por espectrometria de absoro atmica com vapor frio. Os autores atriburam a
baixa recuperao platina volatilizada do suporte, encontrando 5 a 10 g desta na soluo
absorvedora. Para contornar este problema, os autores empregaram, com sucesso,
suportes feitos de tntalo e tungstnio.
O material mais utilizado para envolver a amostra o papel filtro com baixo teor de
cinzas, porm, alguns autores empregaram papel de cigarro, filmes de polietileno,8 cpsulas
de metilcelulose,9,10 cpsulas de gelatina para lquidos11,12 e slidos volteis,13 e em capilares
de vidro no caso de lquidos de alto ponto de ebulio, alm de envelopes de fita adesiva,14
celofane15,16 e cones de acetato de celulose17 para evaporao de lquidos antes da ignio,
celofane para amostras slidas.18 Para a determinao de iodo e mercrio em ungentos
Johnson19 e Vickers20 empregaram um papel especial para envolver a amostra. Cpsulas de
acetato de celulose para utilizao no frasco de combusto de Schniger foram empregadas
como invlucro da amostra. Cpsulas de policarbonato com capacidade de 0,2 ml (0,085%
Cl, 0,01% P, 0,036% N), foram empregadas para a combusto de amostras de lquidos
volteis e amostras higroscpicas. Tambm so comercializados papis pretos para ignio
com radiao infravermelha. Osborne e Willis21 encontraram contaminao de cloro em
vrios papis filtro, celofane, polietileno e polipropileno variando de 175 a 5500 mg kg-1.
Tambm observaram que o papel filtro Whatman N 42 foi o que apresentou menor
contaminao, e que esta pode ser reduzida a concentraes mais baixas que 20 mg kg-1
deixando o papel de molho por pelo menos uma semana em etanol 95%. McGary22
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Decomposio de materiais orgnicos por combusto

182

encontrou contaminao de iodo em papis utilizados com ignio por radiao


infravermelha, associando esta ao pigmento preto adicionado ao papel. Barney et al.

23

comentam que, para a combusto de leos, as cpsulas de gelatina perdem o formato


rapidamente aps a ignio, e partculas que no foram queimadas podem cair na soluo
absorvedora. Tambm relatam que papis filtro so difceis de manusear sem perdas da
amostra e, para superar tais problemas, elaboraram um microbquer para suspender a
amostra. Fukasawa e Yamane24 mostram que o sucesso na combusto de um leo depende
do tamanho da amostra, da geometria do papel filtro e do espalhamento da amostra no
papel filtro, obtendo bons resultados quando a amostra est bem distribuda no papel.
Com relao ignio, esta pode ser eltrica, com lmpada focada ou, tambm,
manual, sendo as primeiras vantajosas com relao aos aspectos de segurana, uma vez
que efetuada atrs de um anteparo. A ltima (manual), apesar de apresentar menor
segurana, extremamente simples de realizar e no necessita de acessrios para a
ignio. Em alguns frascos verifica-se que, aps a combusto, um pequeno vcuo criado
no interior do frasco devido ao consumo de oxignio e carbono e formao e absoro de
CO2.
Tabela 6.7. Tamanhos de frasco com relao ao peso de amostra.
Massa de amostra

Volume do frasco

1 10 g

2000 10000 ml

500 1000 mg

2000 ml

100 150 mg

1000 ml

50 60 mg

500 ml

20 30 mg

300 ml

2 10 mg

300 ml

30 g 5 mg

25 ml

2 30 g

10 ml

O tamanho do frasco depende da quantidade de amostra a ser queimada,


lembrando que tanto a amostra quanto o papel consomem oxignio durante a combusto.
Em muitos casos, o frasco muito maior do que o tamanho mnimo requerido (p.ex., cerca

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Decomposio de materiais orgnicos por combusto

183

de 30 miligramas de amostra para um frasco de 300 ml). Os tamanhos de frascos e sua


relao com a massa de amostra a ser decomposta so fornecidos na Tabela 6.7.
Um frasco de combusto para amostras de at 1 g pode ser facilmente construdo
em laboratrio, sendo bastante simples e seguro, permitindo o preparo de amostra em
apenas 10 min. Para tanto, utiliza-se um balo de fundo chato de borossilicato de 2 l
adaptado com uma sada lateral na qual adaptada um balo de borracha (tipo bexiga). A
amostra, envolvida em papel, colocada em uma cesta metlica (Ni-Cr) suspensa na tampa
do frasco. Uma barra magntica, recoberta com PTFE, colocada no interior do frasco para
-1

a agitao. Aps adio de 50 ml de soluo absorvedora (p.ex., soluo 0,1 mol l HCl
para mercrio), coloca-se a amostra envolta em papel na cesta e preenche-se o frasco com
O2. feita a ignio do papel contendo a amostra manualmente e coloca-se a tampa
contendo a cesta metlica com a amostra fechando-se o balo. A tampa fixada por meio
de uma presilha durante a combusto da amostra, que dura cerca de 8 min para 1 g de
amostra. Durante a combusto a bexiga infla um pouco, retornando sua forma original
quando a combusto termina. A soluo interna agitada por meio da barra magntica para
que a soluo absorvedora lave a parte interna do frasco sem molhar a cesta e, aps 5 min,
o procedimento est concludo. Este procedimento muito til para a determinao de
mercrio em tecido muscular de peixes (idealmente seca-se a amostra por liofilizao).

6.4.3. COMBUSTO ASSISTIDA POR ADITIVOS


Quando se deseja a decomposio de constituintes da amostra muito resistentes
oxidao, a combusto pode ser assistida por aditivos. Estes aditivos (do ingls combustion
aids) so misturados intimamente com a amostra ou usados como soluo para embeber o
papel de filtro no qual a amostra ser envolvida. A Tabela 6.8. mostra alguns exemplos de
aditivos.
Tabela 6.8. Auxiliares de combusto para compostos de difcil oxidao.
Amostra
compostos halogenados

Aditivos
tolueno, parafina, decalina, sulfato de hidrazina,
acar, nitrato de sdio, nitrato de potssio

compostos organofluorados

acar, clorato de potssio, perxido de sdio

compostos organofosforados

parafina, persulfato de amnio

compostos organoarsnicos

nitrato de potssio

compostos organoborados

acar

material biolgico

acar

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Decomposio de materiais orgnicos por combusto

184

6.4.4. SOLUES ABSORVEDORAS


A escolha da soluo absorvedora deve ser compatvel com o elemento a ser
determinado. Muitos produtos de combusto podem levar horas para serem absorvidos, mas
se o processo for realizado com agitao, este tempo se reduz para 5 a 10 minutos. s
vezes, uma pequena diferena entre duas solues pode ser significativa. Por exemplo,
cloreto de hidrognio absorvido muito mais rapidamente por uma soluo de cloreto de
amnio do que por uma de hidrxido de sdio. Se os elementos a serem determinados
formam produtos de combusto no volteis, deve-se dispensar uma ateno especial na
lavagem das conexes aps o frasco ter sido aberto.
Para o caso particular em que se pretende determinar mercrio, utilizando-se
separao prvia por extrao com solvente (ditizona em CCl4, p.exemplo), recomenda-se
utilizar 50 ml de soluo 0,1 mol l-1 HCl e 4 ml de soluo 0,02 mol l-1 KMnO4. A presena de
permanganato necessria para a oxidao de iodeto e/ou sulfeto, eventualmente
presentes na soluo da amostra, e que podem interferir na separao.

6.4.5. APLICAES DO FRASCO DE OXIGNIO

O frasco de combusto com oxignio tem sido empregado na determinao de


muitos metais (mercrio, zinco, mangans, nquel e cobalto), halognios, enxofre e fsforo
em amostras orgnicas e biolgicas. Os seguintes elementos j foram determinados em
amostras decompostas por esta tcnica:

Ge

Co

Cd

Ca

Cl

Se

Ni

Mg

Ba

Br

Hg

Mn

Zn

Fe

As

Cu

Ti

Al

Deve-se notar que a lista contm uma alta proporo de elementos metalides e
no metais, mostrando o grande alcance da tcnica.
A aplicao para alguns elementos, tais como arsnio, bismuto e chumbo, requer
maior cuidado porque formam ligas com a platina da cesta. Neste caso, a cesta deve ser de
slica. Outros metais, como nquel e glio, formam xidos insolveis e, portanto, necessitam
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Decomposio de materiais orgnicos por combusto

185

de tratamento especial antes de serem determinados. Mas muitos elementos, tais como os
alcalino-terrosos, zinco, cdmio e mercrio, so determinados sem problemas. O mtodo ,
em especial, muito bom para mercrio, um elemento que causa mais problemas do que
qualquer outro em muitos mtodos de decomposio.
Tabela 6.9. Condies para a separao de alguns elementos com a tcnica do frasco de
combusto com oxignio (adaptado de Bock, 1979).
Peso da

Elemento

Tamanho do

amostra

determinado

frasco (ml)

Aditivo

1 mg KClO3

Soluo absorvedora

30-80 g

250

0,4-20 mg

250-500

5-10 ml de H2O

2-4 mg

Cl

250

10 ml de H2O

10-20 mg

Cl

300

15 ml de sol. 0,7 mol l-1


NaOH

2-4 mg

Br

250

10 ml de sol 0,05% H2O2

500 mg

Br

6000

30 ml de sol 5% HCOOH

150 mg

2000

15 ml de H2O2

20-40 mg

350

15-20 mg CHI3 10 ml de sol. 0,1 mol l-1


NaOH

4-6 mg

Se

500

4 mg sacarose

100 mg

Se

1000

50 mg

500

100 mg

1000

4-20 mg

100

5-10 mg

250

10 ml de H2O

1g

Hg

2000

50 ml de sol. 0,01 mol l-1


HCl

1g

Hg

5000

4-5 mg

Cu

500

2-7 mg

Co, Mn

500

5-10 mg

Cd, Mg, Zn

250

1 esptula
Na2CO3
4-20 mg KOH

0,4 g celulose
15-20 mg
Na2CO3
-

30 ml de H2O

10 ml de sol 0,01 mol l-1


5 ml de sol. 0,1 mol l-1
NaOH
10 ml de sol. 1:10 H2SO4
20 ml de sol 1:5 HNO3
2 a 5 ml de H2O

200 ml de sol. 0,1 mol l-1


HCl
20 ml de sol 0,25 mol l-1
H2SO4
5 ml de sol. 6 mol l-1 HCl
5 ml de sol. 1 mol l-1 HCl

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Decomposio de materiais orgnicos por combusto

186

6.4.6. VANTAGENS E LIMITAES


As vantagens do mtodo do frasco de oxignio incluem a velocidade com que as
amostras so decompostas, o baixo risco de perdas e contaminao (por se tratar de um
sistema fechado) e a simplicidade do processo. Como o custo do equipamento pequeno,
comum trabalhar com um conjunto de frascos, tornando a anlise mais rpida.
A principal limitao do mtodo a oxidao incompleta da amostra: s vezes um
pouco de fuligem produzida, a qual pode interferir na determinao de alguns elementos
(p.ex. fsforo), embora a adio de um aditivo para melhorar a combusto contorne este
problema. Tambm, bastante comum a formao de CO, o que torna o mtodo invivel
para a determinao de carbono. Outra fonte de problema a evaporao de compostos
volteis antes de serem queimados. Esta fonte de erro pode ser minimizada envolvendo a
amostra com vrias camadas de papel de filtro. Dependendo da massa de amostra utilizada,
o teor de umidade na amostra no deve ser maior que 3%.

ANEXO I

Devido ao carter histrico, neste anexo feita uma traduo parcial do artigo
original descrito por Hempel em 1892, realizada gentilmente pelo Prof. Dr. Ayrton Figueiredo
Martins. Cabe ressaltar que o artigo impulsionou vrias outras idias de procedimentos de
combusto de amostras orgnicas, mas foi somente em 1955 que o sistema apresentou
uma evoluo significativa, atravs das modificaes realizadas por Schniger. Portanto,
este texto colocado aqui buscando prestigiar esta importante contribuio.

-----------------------------------------------------------------------------SOBRE UM MTODO DE DETERMINAO DE ENXOFRE EM CARVO E CORPOS


ORGNICOS

- por Walther Hempel (Ang. Chem. 13 (1892) p. 393-394)

Estimulado pela experincia de Berthelot, que realiza a determinao de enxofre em


corpos orgnicos de uma maneira simples pela combusto dos mesmos em bomba
recoberta internamente com platina eu pensei se no seria possvel realizar isto sem a
aplicao deste aparelho to caro, apenas atravs da combusto direta e determinao do
enxofre em corpos orgnicos. Uma srie de tentativas demonstraram que, de fato,
possvel fazer a combusto em um grande recipiente de vidro, quantitativamente, sem
problemas e, com isso, obter-se um mtodo muito exato e muito rpido. As substncias a
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Decomposio de materiais orgnicos por combusto

187

serem queimadas so comprimidas em um pequeno cilindro no qual um fio de platina


colocado da mesma maneira como se faz para determinar o poder calorfico. Como
recipiente de combusto, pode ser usado um frasco comum de vidro de 10 l, o qual
provido com uma rolha de borracha com trs furos. Um tubo de vidro com torneira inserida
na rolha, com extremidade externa em forma de tubo de 50 ml e dois tubos de vidro nos
quais so inseridos dois fios de platina de 0,6 mm de espessura. Um deles possui, no seu
final, uma cesta de platina (feita de uma tela de platina), que fica cerca de 25 mm acima do
fundo do recipiente.
Para fins de ignio eltrica, enchem-se os dois tubos com mercrio e faz-se um
contato atravs de fios com uma bateria de 6 elementos. Quando no utilizado, tampam-se
os tubos com pequenas rolhas de cortia. Quando necessrio realizar uma experincia,
ento se retira a rolha de borracha do frasco de gs, coloca-se o cilindro (no qual a
substncia a ser analisada est comprimida) na cesta de platina e enrola-se o seu fio de
ignio em torno dos fios de platina de tal maneira que, na ignio posterior, a eletricidade
passe atravs deles. Ento, enche-se o frasco com gua destilada, fecha-se com uma rolha
comum e coloca-se esta invertida sobre uma grande cpsula de porcelana, posicionada
sobre um trip. Aqui, gua colocada na cpsula de porcelana de tal maneira que o
pescoo do frasco ainda emerge. Aps retirar as rolhas, enche-se o frasco com oxignio.
Muito cmodo para este objetivo, so os recipientes do Dr. Elkkan, disponvel no mercado,
com oxignio comprimido a 100 atmosferas. O frasco cheio com oxignio , novamente,
fechado com rolha e recolocado de p. Agora, retira-se a rolha e mergulha-se o carvo que
sofrer combusto na cesta com o reticulado de fios. Como o oxignio mais pesado que o
ar, no escapa significativamente do frasco. Como, durante a combusto, ocorre uma
pequena sobrepresso no frasco, recomendvel atar a rolha para que no venha a saltar.
O aparelho assim preparado ligado ento aos plos da bateria de 6 elementos e o carvo
entra em combusto quando os fios de platina ficam incandescentes. Se o carvo for
posicionado bem embaixo do frasco, a combusto ocorre sem dificuldades, pois os produtos
quentes da combusto sobem para a parte superior do frasco, de tal maneira que sobra
oxignio embaixo.
Aps a combusto, produz-se um pequeno vcuo pela adio de um pouco de gua
fria no frasco e, atravs do funil com torneira, adiciona-se 100 ml de soluo de HCl 5% (v/v)
contendo uma pequena gota de bromo.
Como grande parte da gua formada na reao fica na forma de uma fina nvoa no
frasco, deixa-se em repouso por uma hora, at que a nvoa desaparea. As paredes
internas do frasco so lavadas com a gua, que posteriormente transferida para um
bquer. Na determinao de enxofre em carvo, aps a separao necessria do resduo

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Decomposio de materiais orgnicos por combusto

188

mineral por filtrao, lava-se a cesta de platina, os fios e o interior do frasco com 75 ml de
gua, comeando a filtrao imediatamente, de tal maneira que, com as pores de
lavagens posteriores, o bquer e o filtro sejam lavados tambm. possvel lavar todo o
cido sulfrico formado sem exceder 500 ml de soluo final resultante. A soluo resultante
levada ebulio e, de maneira convencional, submetida precipitao com cloreto de
brio; a barita formada filtrada, seca, purificada e pesada. No seguinte exemplo, pode-se
verificar o grau de exatido obtido neste procedimento:
(Segue a descrio da anlise de casena bovina.....)
Os resultados demonstram que as diferenas situam-se dentro do erro experimental
do procedimento, de tal maneira que, no sentido de simplicidade, rapidez e exatido, este
nada deixa a desejar.

REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS DO ITEM 6.4.

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Decomposio de materiais orgnicos por combusto

6.5

191

DECOMPOSIO EM BOMBA DE COMBUSTO

Este sistema, similar clssica bomba calorimtrica (Figura 6.6), consiste,


basicamente, de uma bomba de ao inoxidvel, em geral com um volume interno de 300 ml,
inserida em um banho de gua. Para a determinao de elementos trao, o interior da
bomba pode ser revestido com quartzo, vidro ou platina. A amostra, normalmente, inserida
na forma de uma pastilha no copo de ignio (de platina ou quartzo), que est fixado em
dois eletrodos. Uma pequena quantia de soluo absorvedora, normalmente 10 ml,
colocada no fundo do frasco e logo aps, a bomba fechada e preenchida com oxignio at
atingir uma presso, geralmente, da ordem de 25 atm. Durante a combusto, a bomba
resfriada em um banho de gua e terminada esta e a etapa de arrefecimento, a soluo ou o
resduo obtido so utilizados para a determinao do elemento de interesse.

vlvula de escape
dos gases

vlvula de
entrada de O2

eletrodos

fio de Pt
ou Ni/Cr
copo de ignio
soluo
absorvedora

Figura 6.6. Bomba de combusto

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Decomposio de materiais orgnicos por combusto

192

Para comparao dos procedimentos de decomposio para a determinao de Se


em tecido de peixe por voltametria de redissoluo catdica ("stripping"), Lambert e
1

Turoczy, 2000, avaliaram a decomposio por via mida em sistema fechado com
aquecimento por microondas, decomposio em mufla, bomba de combusto e
decomposio em sistema aberto empregando HNO3 + H2O2 e radiao UV. Todos os
procedimentos resultaram em uma soluo clara e incolor, porm, selnio foi detectado
apenas quando utilizaram a decomposio em mufla e a bomba de combusto, atribuindo a
falha nos sistemas de decomposio devido a incompleta destruio da matria orgnica ou
a algum produto da decomposio.
A determinao da variabilidade da concentrao de vrios elementos em cinzas de
termoeltricas foi efetuada por Holcombe et al.2 em 1985. Uma bomba de combusto Paar
foi utilizada para preparo da amostra para posterior determinao de Hg, empregando uma
mistura de H2SO4 e KMnO4 como soluo absorvedora. Para a determinao, empregaram
CV AAS.
Fung e Dao, 1995

e 1996 4, utilizaram a bomba de combusto para decompor

combustveis e efluentes orgnicos industriais visando a determinao de F, Cl, Br, I, S, N e


P por cromatografia inica com detector espectrofotomtrico. Os autores justificam o
emprego da bomba de combusto, afirmando que o frasco de combusto de Schniger
apresenta incompleta oxidao de efluentes refratrios, e que o procedimento de
decomposio com microondas perigoso para a oxidao de combustveis orgnicos.
Encontraram recuperaes muito prximas a 100%, com a exceo de nitrognio, atribuindo
eventuais perdas devido formao de N2 ou outras espcies menos solveis de NO ao
invs da completa oxidao NO2. Problemas tambm podem ocorrer com fsforo, devido
formao de xidos de fsforo que tenham baixa solubilidade em gua.
Vrios elementos foram determinados em polietileno por Fujiwara e Narasaki,5 1968.
Estes autores observaram que Cl e Hg apresentam boas recuperaes quando
determinados imediatamente aps a combusto, e que Cu, Fe, Pb, V e Zn apresentam boas
recuperaes somente se a soluo absorvedora da bomba de combusto aps a
combusto for tratada com cidos concentrados.
Hicks et al.,6 1974, determinaram enxofre em carvo por titulao potenciomtrica.
Logo aps em combusto, determinou-se enxofre na soluo na soluo absorvedora,
constatando-se que o ponto crtico na manipulao do sistema era a lavagem dos eletrodos
e da vlvula de escape dos gases.
A decomposio empregando bomba de combusto foi empregada para o preparo de
amostras biolgicas e posterior determinao de Ca, Cu, K, Mg, Na, P, S, Zn e I por ICP
OES.7 Os autores demonstraram que ambos, soluo a 0,1% (v/v) HNO3 e 10% (v/v) CFA-C

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Decomposio de materiais orgnicos por combusto

193

podem ser empregados como soluo absorvedora para os elementos estudados, com
exceo de iodo, que deve ser absorvido na soluo de CFA-C. Alm disso, para amostras
de leite em p, necessria a adio de um auxiliar de combusto (etanol e parafina) para
aumentar a eficincia da combusto. Tambm observam que uma etapa de resfriamento
aps a combusto imprescindvel para a obteno de bons resultados.
A decomposio com bomba de combusto foi utilizada para a determinao de Hg
em alfafa e arroz,
13

8,9

10

11

12

C em plantas, As e Se em manteiga, Ti em polietileno, S em carvo,

S, N e Cl em carvo,14 F em carvo,15 Cl e S em efluentes,16, 17 P, Cl e S em materiais

biolgicos.

18

REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS DO ITEM 6.5.


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Decomposio de materiais orgnicos por combusto

195

6.6. DECOMPOSIO EM SISTEMA DE COMBUSTO DINMICO


1

Desenvolvido por Knapp et al. em 1981 este sistema (Figura 6.7) permite a
combusto com mnima contaminao, sendo todo construdo em quartzo. At 1 g de
amostras slidas orgnicas ou de material biolgico podem ser queimadas. A amostra
peletizada (7 mm de dimetro e 18 mm de espessura) com uma prensa manual, sendo
inserida no suporte de quartzo (1) com uma pequena tira de papel (2 cm de comprimento, 4
mm de largura) em uma cmara de combusto (II) de 75 ml. A cmara de combusto est
conectada ao tubo de ensaio (I) e a unidade de resfriamento (III), que est preenchida com
nitrognio lquido (continuamente renovado durante a combusto). Uma vazo contnua de
O2, normalmente de 80 a 100 l h-1, introduzida tangencialmente ao suporte da amostra na
cmara de combusto. A amostra, com o auxlio de uma tira de papel, entra em ignio
atravs da irradiao com duas lmpadas de infravermelho (2). A amostra queima durante
cerca de 10 a 20 s, sendo que os produtos volteis da combusto so retidos no
condensador

contendo

nitrognio

lquido,

enquanto

que

elementos

no

volteis

permanecem no suporte. Aps a combusto, retira-se o N2 (lq), e faz-se um refluxo com cido
apropriado, onde a evaporao deste prevenida atravs de condensadores com fluxo de
gua. Normalmente, 2 ml de cido so adicionados, dissolvendo os resduos da combusto
presentes no suporte e demais partes do sistema. O processo de refluxo dura em torno de
meia hora.
Uma caracterstica importante deste sistema, que apenas amostras orgnicas no
volteis podem ser utilizadas. Isto se deve ao fato de que amostras orgnicas volteis (como
p.ex. gasolina), podem evaporar antes e durante o processo de aquecimento com as
lmpadas, podendo gerar uma exploso quando dada a ignio.
Elementos liberados durante a combusto podem difundir para a superfcie do
suporte da amostra, podendo no redissolver no refluxo com cido. Knapp et al.1 estudaram
diferentes suportes para amostra, feitos de quartzo, Pt, Ti e Ta. Verificaram que entre 5% e
30% dos elementos permanecem irreversivelmente ligados nestes materiais, e que as
perdas podem ser reduzidas a menos que 3% utilizando um suporte de quartzo resfriado
com gua. Porm, o uso deste suporte no prtico, e para tanto, desenvolveram um
suporte que evitava o calor da zona de combusto atravs de um formato adequado. Porm,
devido superfcie relativamente fria do suporte, em alguns casos ocorria a formao de
resduos carbonceos, os quais eram eliminados aps o refluxo com cido. Para a remoo
completa dos elementos da superfcie do suporte, este deve ser virado de cabea para
baixo, imergindo no cido durante o refluxo. Tambm observaram que a recuperao
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Decomposio de materiais orgnicos por combusto

196

dependente do tempo de refluxo, sendo de 90-95% com 15 minutos e de 95 a 100% aps 30


minutos. Obviamente, o tipo de cido a ser adicionado depende do elemento de interesse.
Normalmente, cido ntrico utilizado.

1. suporte da amostra
2. lmpada

unidade de resfriamento

3. cmara de resfriamento
4. condensador
5. O2
6. H2O

cmara de combusto

7. N2 (lq)

tubo de ensaio

Figura 6.7. Sistema de decomposio por combusto em sistema dinmico (Trace-OMat).1

Selnio foi determinado por HG AAS em materiais biolgicos, rochas e solos aps
decomposio empregando o sistema dinmico de decomposio.2

Uma mistura com

quantidade 0,5 g de amostra e cido silcico (15 a 30% da mistura, em peso) foi utilizada.
Posteriormente, cerca de 50 l de uma soluo 1% de acetato de celulose em acetona
(agente ligante) foram adicionados. A amostra foi novamente misturada, peletizada e seca
temperatura ambiente em dessecador. Amostras geolgicas ( 0,3 g) foram tratadas de
forma similar, porm, a proporo amostra/celulose variava de 1:1 a 1:2, dependendo da
amostra. Aps a combusto, o suporte com o resduo da combusto foi retirado, e ento um
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Decomposio de materiais orgnicos por combusto

197

refluxo com 2 ml de cido ntrico ou clordrico concentrado foi efetuado. Durante a


combusto, Se volatiliza como SeO2, condensando no condensador. A volatilizao ocorre
atravs da liberao de calor fornecida pela combusto da celulose, e os xidos de vrios
metais (p. ex. Mn, Fe, Cu, Pb) ficam quase que totalmente retidos no resduo da combusto,
sendo retirados anteriormente ao refluxo (45 minutos), separando desta forma, grande parte
da matriz. Alguns outros elementos so liberados como compostos volteis (por exemplo,
Cd, Sb, Tl, Bi). Os autores comentam que uma vao inferior a 400 ml h-1 de oxignio durante
a combusto pode causar a formao de fuligem, enquanto que a utilizao de um fluxo de
oxignio muito elevado pode gerar uma combusto muito violenta. Tambm relataram, que a
adio de cido silcico alm de ajudar na reteno de elementos que formam xidos pouco
volteis, promove uma combusto mais lenta e uniforme.
Os mesmos autores, em um trabalho posterior, utilizaram o mesmo sistema para a
volatilizao de Tl, Cd, Pb e Bi em amostras biolgicas, rochas e solos.3 Neste estudo, para
o preparo de amostras biolgicas foi empregado cido silcico e, em certos casos, cloreto de
magnsio. Rochas e solos foram misturados com cido silcico e celulose, sendo que cloreto
de magnsio foi adicionado quando havia a presena de Tl e Pb. No caso da volatilizao de
cdmio de solos a adio de nitrato de lantnio foi necessria.
Renterghem e Cornelis4 utilizaram o sistema para a decomposio de amostras de
soro sangneo humano e posterior determinao de As, Au, Cd, Cs, Cu, Fe, Hg, Mo, Rb,
Sb, Se e Zn por ativao neutrnica, obtendo bons resultados.
Selnio foi determinado em amostras biolgicas e orgnicas por fluorescncia de
raios-X na faixa de ng g-1 a g g-1, empregando sistemas de decomposio por via mida e
combusto em sistema dinmico.

Outros autores

determinaram iodo em amostras

biolgicas e de interesse nutricional por ICP-MS, empregando uma soluo de aminas


tercirias para a absoro dos produtos da combusto.

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5. RAPTIS, S.E., WEGSCHEIDER, W., KNAPP, G., TLG, G. X-ray-fluorescence
determination of trace selenium in organic and biological matrices. Analytical Chemistry,
Washington, v. 52, n. 8, p. 1292-1296, 1980.
6. GLINAS, Y., KRUSHEVSKA, A., BARNES, R. Determination of total iodine in nutritional
and biological samples by ICP-MS following their combustion within an oxygen stream.
Analytical Chemistry, Washington, v. 70, n. 5, p. 1021-1025, 1998.

Francisco Jos Krug, fjkrug@cena.usp.br. VI Workshop sobre Preparo de Amostras, Santa Maria, 2006.

Decomposio de materiais orgnicos por combusto

6.7

199

COMBUSTO DE WICKBOLD COM CHAMA HIDROGNIO-OXIGNIO


O mtodo de decomposio de Wickbold foi criado em 1952 como um novo
1

mtodo rpido para a determinao de halognios em materiais orgnicos. A idia da


2

pirlise e combusto em uma chama foi desenvolvida em 1922 por Voigt , mas Wickbold foi
o primeiro que obteve uma decomposio completa com recuperaes reprodutveis. A
amostra queimada em uma chama luminosa, composta por uma mistura de
aproximadamente 50% (v/v) de oxignio e hidrognio, atingindo uma temperatura maior que
2000 C. Lquidos e gases so introduzidos diretamente na chama. No caso de amostras
slidas, uma etapa de pirlise pode ser necessria. Atualmente, dois tipos de queimadores
esto disponveis (Heraeus Quarzglas GmbH). O queimador com suco utilizado para
amostras lquidas e o queimador do tipo BITC (Bureau International du Technique Chlorine)
para amostras slidas e lquidos que contenham slidos.
O sistema de combusto de Wickbold pode ser dividido em trs partes principais (Figura
6.8):
-

Queimador com uma unidade de pr-combusto opcional (especialmente para


amostras slidas). Amostras lquidas e gasosas so introduzidas diretamente no
queimador. Amostras slidas so primeiramente pirolisadas em uma unidade de prcombusto e ento transportadas para a chama.

Cmara de combusto com sistema de resfriamento com gua, onde os


produtos da combusto so condensados em uma superfcie de quartzo.

Tubo de absoro dos produtos gasosos e condensados da combusto.

Os produtos gasosos que ficam retidos no sistema e, aps a decomposio de uma


amostra, so retirados com a aplicao de vcuo atravs do tubo de absoro.
O queimador BITC para amostras slidas emprega um recipiente de quartzo para
acondicionamento da amostra. A amostra volatilizada do recipiente e introduzida na chama
atravs de aquecimento (de at 1100 C) na unidade de pr-combusto. O sistema opera
em batelada, onde a chama tem de ser extinta e o queimador removido para introduo de
nova amostra. J o queimador com suco, empregado para lquidos opera de forma
contnua e a taxa de aspirao pode ser regulada.
Lquidos inflamveis podem ser introduzidos no sistema diretamente, mas para
lquidos viscosos, no-inflamveis e aquosos podem ser necessrias diluies com volumes
iguais de acetona e metanol.3

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Decomposio de materiais orgnicos por combusto

200

Figura 6.8. Sistema de combusto de Wickbold com chama hidrognio-oxignio: queimador


com suco para amostras lquidas (A) e queimador para amostras slidas Bureau
International du Technique Chlorine (BITC) (B), cmara de combusto com sistema de
resfriamento com gua (C) e tubo de absoro (D). A) 1. poro final do queimador; 2.
capilar; 3. regulador de PTFE; 4. vlvula do tipo agulha; 5. introduo da amostra. B) 1.
poro final do queimador; 2. capilar interno; 3. cmara de pr-combusto; 4. recipiente de
quartzo; 5. aquecimento; 6. cmara de pirlise; 7. tampa

Erber et al. investigaram a decomposio de amostras orgnicas e inorgnicas


slidas atravs do sistema de combusto de Wickbold para posterior determinao de As,
Sb e Se por espectrometria de absoro atmica com gerao de hidretos (HG AAS).
Segundo os autores, dependendo da natureza da amostra, cerca de 0,1 a 10 g podem ser
pesadas em um recipiente de quartzo. Em alguns casos (certas amostras orgnicas), o
recipiente de quartzo necessitava ser coberto com l de vidro para evitar a projeo da
amostra, impedindo o bloqueio dos capilares do queimador durante a etapa de pirlise. A
cmara de combusto, geralmente, necessitava de uma vazo de nitrognio ou oxignio
contendo tetracloreto de carbono que, aps a decomposio, pode converter os elementos
em seus respectivos haletos. Esta a razo pela qual apenas metais que formam haletos
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Decomposio de materiais orgnicos por combusto

201

com ponto de ebulio menor que 1100 C podem ser determinados aps a decomposio
no sistema. Os autores tambm investigaram diferentes solues absorvedoras, mostrando
que a gua pode atuar como solvente universal para a absoro dos elementos em questo.
Outro aspecto interessante relatado a possibilidade da separao de compostos de alta
volatilidade de compostos com baixa volatilidade atravs do controle da temperatura da
cmara de pr-combusto. Atravs da avaliao do resduo da combusto de um material
de referncia (resduo da incinerao de lixo urbano, BCR 176), pode-se verificar que Al, Cr,
Fe, Ti, Cu, Ni e os metais alcalinos e alcalino-terrosos permanecem no resduo. As
concentraes de Pb, Cd e Zn diminuem significativamente quando altas temperaturas so
empregadas, sendo que menos que 5% destes elementos so volatilizados a 600 C.
A determinao voltamtrica de Pt em gasolina aps a decomposio empregando
o sistema de decomposio de Wickbold foi realizada por Hoppstock e Michulitz.5 Apesar
das condies extremas, os autores verificaram que muitas das solues aquosas obtidas
aps a decomposio continham alguns compostos orgnicos que interferiam na
determinao de platina por voltametria. Porm, nenhum problema foi encontrado quando
estes empregaram a espectrometria de massa com plasma indutivamente acoplado (ICPMS) para a determinao do analito.
A maior aplicao do sistema de combusto de Wickbold encontra-se no preparo de
amostras de petrleo para a determinao de S e Cl.7, 8, 9, 10 Porm, na internet, encontra-se
uma breve descrio do equipamento, onde constam Cl, Br, F, B, S, Hg, I, P, Pb, As, Se, V,
Cd e Zn como elementos que podem ser, tambm, determinados empregando a tcnica no
preparo da amostra.11
O sistema de combusto de Wickbold com chama hidrognio-oxignio tem sido
aplicado, tambm, para a decomposio e posterior determinao de fluoreto em compostos
orgnicos contendo flor,13 cloreto em polmeros de polibuteno,14 nitrognio em leos
minerais

15

e mercrio em petrleo.16 Erber et al.17 verificaram que o sistema adequado

para o preparo de amostras seguido da determinao de mercrio por espectrometria de


absoro atmica com vapor a frio (FI-CV AAS) atravs de testes estatsticos. Segundo os
autores, a faixa de trabalho, definida experimentalmente, foi de at 1000 g de Hg
(absoluto), mostrando que possvel decompor amostras orgnicas e inorgnicas com o
sistema e determinar mercrio por FI-CV AAS de maneira simples.

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Decomposio de materiais orgnicos por combusto

202

REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS DO ITEM 6.7

1. WICKBOLD, R. Neue schnellmethode zur halogenbestimmung in organischen


substanzen. Angewandte Chemie, v. 64, n. 5, p. 133-135, 1952.
2. VOIGT, J., Angewandte Chemie, v. 35, p. 654-655, 1922.
3. Mercury Analysis Working Party of BITC. Standardization of methods for the determination
of traces of mercury. Part II. Determination of total mercury in materials containing organic
matter. Analytica Chimica Acta, Amsterdam, v. 84, n. 2, p. 231-257, 1976.
4. ERBER, D., QUICK, L., ROTH, J., CAMMANN, K. Investigation of sample decomposition
for the trace determination of arsenic, antimony and selenium in organic and inorganic
materials using the Wickbold combustion method. Fresenius Journal Analytical
Chemistry, New York, v. 346, p. 420-425, 1993.
5. HOPPSTOCK, K., MICHULITZ, M. Voltammetric determination of trace platinum in
gasoline after Wickbold combustion. Analytica Chimica Acta, Amsterdam, v. 350, n. 1-2,
p. 135-140, 1997.
7. KULKE, M., UMLAND, F. Improvement of Wickbold combustion apparatus for
decomposition of petroleum-products and used lubricanting oils for trace analysis of
inorganic components. Fresenius Zeitschrift fr Analytische Chemie, New York, v. 288,
p. 273-276, 1977.
8. EHRENBERGER, F., GORBACH, S., HUMMEL, K. Schnellbestimmung von halogen und
schwefel in organischen substanzen mit einer modifizierten wickbold-apparatur.
Fresenius Zeitschrift fr Analytische Chemie, New York, v. 210, p. 349-354, 1965.
9. LIEDERMA D., GLASS, J.R. A modified Wickbold combustion apparatus for determination
of sulfur in liquid hydrocarbons. Microchemical Journal, New York, v. 10, n. 1-4 p. 211211, 1966.
10. EHRENBERGER, F. Determination of oxygen in organic fluorine compound and
phosphorous compound or metal organic compound. Mikrochimica Acta, v. 2, p. 192201, 1959.
11.

Laborgertebrse, Laboratory Equipment Exchange,

http://www.labexchange.com/english/index.html, acessada em 15/03/2006.

Francisco Jos Krug, fjkrug@cena.usp.br. VI Workshop sobre Preparo de Amostras, Santa Maria, 2006.

Decomposio de materiais orgnicos por combusto

203

13. SWEETSER, P.B. Decomposition of organic fluorine compounds by Wickbold


oxyhydrogen flame combustion method. Analytical Chemistry, Washington, v. 28, n. 11,
p. 1766-1768, 1956.
14. ROWE, R.D. Wickbold combustion and spectrophotometric analysis procedure for trace
amounts of orgaganic chlorine in viscous polybutene polymers. Analytical Chemistry,
Washington, v. 37, n. 3, p. 368-370, 1965.
15. GOUVERNEUR, P., SNOEK, O.I., HEERINGA-KOMMER, M. Nitrogen determination in
mineral oils by means of Wickbold oxyhydrogen combustion. Analytica Chimica Acta,
Amsterdam, v. 39, n. 4, p. 413-422, 1967.
16. KNAUER, H.E., MILLIMAN, G.E. Analysis of petroleum for trace-metals - determination
of mercury in petroleum and petroleum-products. Analytica Chimica Acta, Amsterdam,v.
47, n. 8, p. 1263-1268, 1975.
17. ERBER, D., QUICK, L., WINTER, F., ROTH, J., CAMMANN, K. The Wickbold
combustion method for the determination of mercury under statistical aspects. Fresenius
Journal Analytical Chemistry, New York, v. 349, p. 502-509, 1994.

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7.

DECOMPOSIO DE MATERIAIS ORGNICOS POR


VIA MIDA
rico Marlon de Moraes Flores
Francisco Jos Krug
Juliano Smanioto Barin
Marco Aurlio Zezzi Arruda

7.1

INTRODUO
Todos os mtodos de decomposio de amostras orgnicas e biolgicas vistos no

Captulo 6 envolveram, de uma forma ou de outra, oxidao em atmosfera contendo ar ou


oxignio puro. Entretanto, semelhante solubilizao de slidos inorgnicos, muitas
amostras podem ser decompostas com excesso de um cido mineral oxidante concentrado.
Para a oxidao de compostos orgnicos pode-se proceder de maneira semelhante.
Em geral, a decomposio de materiais orgnicos ou biolgicos por via mida
implica em aquecimento da amostra na presena de um cido mineral oxidante concentrado,
de misturas de cidos oxidantes, ou mistura de um cido oxidante com perxido de
hidrognio. Torna-se possvel oxidar completamente a maioria das amostras, deixando os
elementos a serem determinados na soluo cida em formas inorgnicas simples e
apropriadas para anlise, se os cidos forem suficientemente oxidantes, e se o aquecimento
for feito a temperaturas elevadas durante um perodo de tempo adequado.
Os cidos com propriedades oxidantes usados na decomposio por via mida de
amostras orgnicas ou biolgicas so o ntrico, o sulfrico e o perclrico. Estes cidos
podem ser usados individualmente (exceto o perclrico) ou combinados uns com os outros.
So tambm comuns as combinaes de HNO3 ou H2SO4 com H2O2.
A decomposio por via mida particularmente til para a determinao de baixas
concentraes de metais em vrios tipos de amostra, porque muitos elementos de interesse
so convertidos em ctions inorgnicos simples no volteis, que permanecem no meio
cido. Esta tcnica tambm pode ser usada para a determinao de nitrognio, fsforo e
enxofre, entre os no-metais. Entretanto, alguns elementos podem ser perdidos completa ou
parcialmente por volatilizao. Incluem-se, neste caso, os halognios, alm de antimnio,
arsnio, boro, mercrio e selnio, dependendo do procedimento utilizado.
Convencionalmente, quando se obtm uma soluo clara e descolorida ou uma
total recuperao de alguns elementos, tem sido tacitamente assumido que a oxidao da
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Decomposio de materiais orgnicos por via mida

205

matria orgnica foi completa, para fins prticos. Entretanto, tais suposies no so
necessariamente verdadeiras para todos os casos. Informaes mais conclusivas e diretas,
como a deteco e identificao de algum material orgnico residual retido na soluo cida
so, certamente, desejveis, especialmente se estes materiais podem interferir na etapa de
medida. As fontes de erro mais freqentemente encontradas em procedimentos analticos,
ao lado dos erros sistemticos (inerentes em anlise de traos, vide captulo 2), podem ser
devidas a efeitos da matriz: substncias orgnicas no decompostas, interferindo na etapa
de determinao, ou a incompleta recuperao de elementos-trao em etapas de prconcentrao e extrao da soluo de amostra decomposta. No entanto, dependendo da
tcnica analtica empregada, como p. ex., atomizao eletrotrmica em forno de grafite, isto
pode no ser de fundamental importncia.
A principal vantagem de decomposies por via mida, com relao s por via
seca, so as menores temperaturas empregadas, o que minimiza as perdas de elementostrao. A decomposio por via mida, em frascos abertos, uma das mais antigas e mais
usadas tcnicas para a dissoluo de amostras orgnicas e inorgnicas. Normalmente,
necessita de mais ateno do operador do que no caso de decomposies por via seca.
cidos inorgnicos fortes, como HCl, HNO3, HClO4 e H2SO4, so os mais empregados.
cido fluordrico, tambm o , porm com menor freqncia. Algumas substncias so
difceis de serem decompostas com um nico cido e uma combinao de dois, ou mais
cidos, empregada freqentemente; interaes mtuas em misturas cidas produzem
compostos intermedirios instveis que aceleram substancialmente a decomposio. Um
determinado cido indispensvel para a decomposio de uma amostra em particular e
precisa estar presente na mistura. Este cido, normalmente em maior proporo, no
somente determina a taxa e a extenso da decomposio mas, tambm, pode afetar a
escolha do mtodo analtico final.
Em sistemas abertos, as seguintes observaes devem ser lembradas para a
decomposio de materiais orgnicos e biolgicos, quanto escolha do cido ou mistura
cida:
a) muito difcil oxidar amostras completamente utilizando somente HNO3 (este cido tem
o menor ponto de ebulio e o mais moderado dos trs cidos oxidantes). Se por um
lado o baixo ponto de ebulio do azetropo (120 C) facilita a remoo do cido ntrico
aps a oxidao, por outro a baixa temperatura limita a sua eficincia oxidativa. Altas
temperaturas so necessrias para possibilitar maior eficincia nas quebras das
ligaes cabono-carbono das molculas orgnicas.
b) HClO4 apresenta alto poder de oxidao, mas quando utilizado isoladamente, torna-se
muito perigoso, devido ao risco iminente de exploso, pela formao de percloratos

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206

Decomposio de materiais orgnicos por via mida

instveis. Na prtica, recomenda-se usar sempre o cido perclrico em combinao


com outro cido (em geral utiliza-se aps a adio de cido ntrico).
c)

H2SO4 seria o mais til dos trs cidos para ser usado sozinho, face ao seu elevado
ponto de ebulio, mas o processo de oxidao bastante lento. Na maioria dos casos
H2SO4 utilizado em combinao com HNO3, HClO4 ou H2O2, mas o uso com perclrico
muito perigoso. Apresenta especial destaque na determinao de nitrognio pelo
mtodo de Kjeldahl combinado com H2O2 e um catalisador, e ser tratado no item 7.2. A
mistura utilizada para a decomposio de materiais orgnicos apresenta uma srie de
variaes, as quais visam principalmente ao aumento da velocidade de decomposio
da matria orgnica. Assim, muitos sais de sulfato (K2SO4, Na2SO4, CuSO4, Li2SO4)
podem ser usados para aumentar a temperatura de decomposio, uma vez que adio
de um destes sais promove o aumento no ponto de ebulio do H2SO4.

d)

Muitos catalisadores tem sido sugeridos, como o xido de mercrio (II) e selnio, com
preferncia por este ltimo face altssima toxicidade do mercrio. Apesar de a
digesto sulfrica ser utilizada quase que exclusivamente para a determinao de
nitrognio pelo mtodo de Kjeldhal, pode-se determinar P, K, Ca, Mg, Fe, Cu, Mn, Zn, Al
e Na no digerido. No Laboratrio do CENA, utiliza-se um procedimento em blocos
digestores, com a seguinte soluo digestora: misturam-se 350 ml de H2O2 30%, 14 g
de Li2SO4.H2O e 0,42 g de Se (p) em um recipiente de 1000 ml, resfriando-se em
banho de gelo; acrescentam-se, cuidadosamente, 420 ml de H2SO4 conc. mistura,
agitando-se sempre e resfriando no banho de gelo. Esta mistura conservada em
refrigerador. O procedimento consiste em se pesar 200,0 mg de amostra em tubo de
digesto de 50 a 100 ml seco, acrescentam-se 6 ml da soluo digestora fria em cada
amostra, coloca-se o suporte com os tubos em bloco digestor frio e inicia-se o
aquecimento ajustando-se a temperatura para 100C, com um aumento gradativo em
incrementos de 50 C at 350 C. Observam-se as amostras cuidadosamente e
remove-se todo o suporte se alguma amostra reagir violentamente, recolocando-o no
bloco quando a reao cessar. Normalmente, as amostras tornam-se escuras em 15 a
20 min, tornando-se completamente pretas. Com o decorrer da digesto as amostras
tornam-se marrons, amarelas at ficarem incolores (caso sobre algum resduo na
parede do tudo, deve-se remover o tubo do bloco e, cuidadosamente, inclin-lo para
que a soluo entre em contato com o resduo, e retornar ao bloco). Quando a
temperatura atingir 350 C, e as amostras estiverem claras e incolores, continua-se a
digesto por mais 30 min. Desliga-se ento o aquecimento, remove-se o suporte com
as amostras do bloco, deixa-se esfriar por 15 min, pelo menos, adiciona-se um pouco
de gua, agita-se cuidadosamente, espera-se um pouco, e completa-se o volume no
prprio tubo. Utilizam-se tubos aferidos a 50, 75 ou 100 ml.

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Decomposio de materiais orgnicos por via mida

e)

207

para propsitos gerais, no entanto, prefere-se uma mistura de cidos, ou cidos


usados sequencialmente. Dois exemplos importantes destes procedimentos so os
seguintes:

H2SO4 e HNO3: Aquecer inicialmente a amostra com H2SO4 at o aparecimento de

fumos do cido. Ento, adiciona-se HNO3 gota a gota e depois em maiores propores
para completar a oxidao.

HNO3 e HClO4: Oxidar inicialmente o material somente com cido ntrico (restar

apenas o material mais difcil de se oxidar); resfriar a mistura e adicionar


cuidadosamente HClO4, reaquecer para completar a oxidao. Dessa forma, o uso do
HClO4 relativamente seguro. Um procedimento utilizado no CENA desde 1975
descrito a seguir. Pesam-se 500 mg de amostra em tubo de digesto aferido a 50-100
ml, acrescentam-se 5 ml de HNO3 65% e deixa-se a mistura em repouso por 1 a 2
horas, ou, preferivelmente, por uma noite para iniciar a digesto dos compostos mais
facilmente oxidados. Aps este perodo (ve-se uma suspenso amarelo-alaranjada), os
tubos so colocados no bloco de digesto e o bloco aquecido at 160 C. Observamse as amostras cuidadosamente, e retira-se o suporte com os tubos do bloco se a
mistura comear a subir pelas paredes de algum tubo. Quando a maior parte do cido
ntrico tiver evaporado e a soluo estiver clara (levemente amarelada), observa-se
tambm

que

evoluo

de

fumos

marrons

de

NO2

muito

pequena,

comparativamente ao incio da digesto a quente. Esta uma indicao de que boa


parte da matria orgnica foi oxidada. Se a evoluo de fumos marrons for muito
perceptvel, recomenda-se adicionar mais 5 ml de HNO3 e continuar a digesto at
cessar a evoluo dos fumos (em geral 5 ml so suficientes para oxidar quase toda
matria orgnica contida em 500 mg de amostra). Retiram-se, ento, os tubos do
bloco, e adicionam-se 1,3 ml de HClO4 70% em cada tubo. Recoloca-se o suporte com
os tubos no bloco, eleva-se a temperatura para 210 C, e aps 10-30 min observar-se a evoluo de fumos brancos de HClO4-H2O. A digesto se completa neste estgio
com a obteno de uma soluo incolor ou ligeiramente amarela. Depois de resfriados
temperatura ambiente, completa-se o volume em cada tubo de digesto. No digerido
podem ser determinados P, K, Ca, Mg, S, Fe, Cu, Mn, Zn, B, Al e Na.
ATENO: Sempre conduzir a reao em uma capela com exausto e usar jaleco ou
avental de plstico, culos de proteo ou mscara facial, bem como luvas
resistentes a cidos. Se HClO4 for usado rotineiramente, a capela deve ser construda
ou revestida de material inorgnico. Uma tela protetora tambm uma boa
precauo quando se trabalha com HClO4.

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Decomposio de materiais orgnicos por via mida

208

7.2. DECOMPOSIO PELO MTODO DE KJELDAHL


O uso de H2SO4 a base do mtodo de Kjeldahl para a decomposio de matria
orgnica visando a determinao de nitrognio. Este mtodo baseia-se na oxidao do
carbono a CO2 e reduo do cido sulfrico a SO2; ao mesmo tempo o nitrognio orgnico
da amostra convertido em amnio. soluo resultante, adiciona-se soluo de hidrxido
de sdio, e a amnia destilada em um frasco contendo um volume conhecido de um cido
padronizado. Esta decomposio pode ser conduzida em um frasco de Kjeldahl (Figura 7.1),
ou em tubos de digesto.

Figura 7.1. Decomposio de amostra orgnica ou biolgica em um frasco de Kjeldahl.

O frasco de Kjeldahl um frasco resistente feito de vidro Pyrex, com base


arredondada e gargalo longo e estreito. O formato desse gargalo visa condensao de
vapores, permitindo a fervura do cido sob refluxo, minimizando as perdas por volatilizao.
A capacidade do frasco depende da quantidade de amostra empregada (Tabela 7.1)

Tabela 7.1. Algumas condies para a determinao de nitrognio em materiais orgnicos


pelo mtodo de Kjeldahl.
Capacidade
do frasco
(ml)

Amostra
(mg)

100250

1002000

50
1220

H2SO4
(ml)

K2SO4 / CuSO4

K2SO4 / H2SO4

catalisador

catalisador

(mg)

(mg)

1020

5001000

5001000

10100

24

200

200

210

100

100

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Decomposio de materiais orgnicos por via mida

209

Atualmente, muitos laboratrios utilizam tubos de digesto com capacidade


variando de 50 a 250 ml, ao invs do frasco de Kjeldahl mostrado na Figura 7.1.
importante lembrar que o mtodo de Kjeldahl funciona somente para nitrognio amina e
amida. O mtodo muito usado para a determinao indireta de protenas em vrias
amostras biolgicas, assim como de nitrognio em plantas para avaliao do estado
nutricional. Um procedimento do mtodo o seguinte:
a) A amostra seca e pesada colocada no frasco de Kjeldahl (ou tubo de digesto) e
decomposta com H2SO4 na presena de K2SO4 (para elevar o ponto de ebulio do
cido) e de um catalisador (CuSO4, HgSO4 ou Se). Como o potssio comumente
determinado em materiais biolgicos, prefervel utilizar Li2SO4 ao invs de K2SO4.
Com referncia ao catalisador, o uso de selnio mais recomendvel porque a digesto
mais rpida do que com CuSO4; alm disso, a converso de nitrognio em sulfato de
amnio tambm mais rpida.
b) O nitrognio constituinte de aminas e amidas convertido exclusivamente no on NH4+
sob estas condies. Como esta uma espcie inica, no h problemas de perdas por
volatilizao.
c) Logo que a reao se completa (soluo lmpida), a mistura resfriada e, muito
cuidadosamente, alcalinizada com soluo de NaOH. O on NH4+ convertido em NH3.
d) A soluo destilada imediatamente em um sistema fechado de destilao e o NH3
coletado em um volume medido de soluo cida padro, a qual pode ser ento titulada
com um lcali padro. Nessa etapa preciso alguma habilidade prtica para se
certificar de que no h perda alguma de NH3 para a atmosfera. Existem verses
automatizadas do mtodo de Kjeldhal, que dispensam esta habilidade.

O mtodo de Kjeldahl tambm pode ser aplicado para o nitrognio em outra forma
diferente de amina e amida. O nitrognio, em um grupo nitro ou nitroso, deve,
primeiramente, ser reduzido a um grupo amino por tratamento com agente redutor (e.g., Sn
e HCl). Pode-se tambm incluir o agente redutor no prprio procedimento de decomposio,
mas, neste caso, obtm-se uma estranha mistura de oxidaes e redues ocorrendo
simultaneamente. Contudo, sob condies favorveis, bons resultados podem ser obtidos. A
reduo de nitratos a amnio pode ser feita, tambm, com cido saliclico combinado com o
cido sulfrico.

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Decomposio de materiais orgnicos por via mida

210

7.3. DECOMPOSIO PELO MTODO DE CARIUS


Alguns

elementos

no

podem

ser

determinados

por

procedimentos

de

decomposio por via mida porque so perdidos na forma de derivados volteis. Os


exemplos mais srios de perdas por volatilizao so os halognios (exceto flor), As, B, Hg,
P, S, Sn e Te. Estes elementos podem ser determinados pelo uso do tubo de Carius. A idia
colocar a amostra em um tubo de vidro de parede grossa, junto com HNO3 (6797%,
dependendo da amostra) e selar o tubo. O tubo ento aquecido a 250300 C por algumas
horas. A amostra completamente decomposta (o HNO3 muito eficiente nestas condies
porque tanto a presso como a temperatura so mais altas). O tubo deve ser recoberto por
um tubo protetor de ao porque sempre h risco de exploso com essa tcnica.
O tempo de reao e a quantidade de cido ntrico dependem da natureza da
amostra: para substncias que se decompem facilmente suficiente 1 h de aquecimento e
2 a 3 ml de HNO3 65 % por grama de amostra, ao passo que tecidos de peixe, gorduras e
corantes devem ser aquecidos com 57 ml g-1 de amostra durante 3 a 5 horas.
A reao tpica de materiais orgnicos com o cido ntrico a quente a seguinte:

(CH2)n + HNO3 + calor CO2 (g) + NO(g) + 2H2O


Aps a decomposio ter sido completada, o tubo resfriado e ento, muito
cuidadosamente, aberto (ainda pode estar sob presso) e o contedo recuperado. Devese ter bastante cuidado nesse ponto, no s pelo perigo de acidentes quando o tubo for
aberto, mas tambm pela perda das espcies volteis no curto perodo de tempo em que o
contedo for transferido. Por exemplo, os halognios podem ser perdidos desta forma como
elemento ou haleto de hidrognio. Para contornar este problema recorre-se ao uso de um
aditivo que possa ser selado no tubo junto com a amostra e o HNO3. Neste caso, utiliza-se o
nitrato de prata ou prata metlica (dissolve-se no HNO3). O on prata retm os halognios
como sais insolveis de haletos de prata. No caso do enxofre, a adio de um pouco de
cloreto de brio ao cido, antes de selar o tubo, evita as perdas desse elemento. O flor no
pode ser determinado pelo mtodo de Carius, porque o fluoreto de hidrognio produzido
pode reagir com o vidro do tubo. Uma desvantagem do mtodo de Carius que alguns
compostos orgnicos no so completamente oxidados, mesmo aps aquecimento
prolongado.

Nessa

categoria

incluem-se:

fluorcloropropano,

bifenilas

hexaclorobenzeno, tetrametilsilano e organoboranos.

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cloradas,

Decomposio de materiais orgnicos por via mida

211

7.4. DECOMPOSIO POR VIA MIDA EM SISTEMAS FECHADOS DE


ALTA PRESSO
Este item foi adaptado quase que integralmente da verso em ingls do
texto de M. Wrfels (Kln, Alemanha) sob o ttulo "Decomposition of
biological samples with acids for the determination of trace elements"
(LABO, 3/89, 7-15).
Decomposies de diversos materiais podem ser feitas a presso atmosfrica;
entretanto, as temperaturas atingidas so, freqentemente, limitadas pela presso ambiente
(1 atm). Isto restringe a temperatura de decomposio para a temperatura de ebulio do
solvente ou cido empregado. J que a taxa de reao , fundamentalmente, relacionada
com a temperatura, esta condio impe um limite sobre o tempo necessrio para a
decomposio da amostra. Uma reao mais rpida pode ser obtida, fechando-se
hermeticamente a amostra e o cido em um sistema resistente presso e ao aquecimento.
Ao mesmo tempo em que este sistema proporciona uma decomposio mais rpida,
introduz um elemento de risco em seu manuseio, devido ao potencial de exploso,
particularmente com reagentes fortemente oxidantes. Frascos abertos apresentam,
naturalmente, os mesmos problemas referentes aos gases txicos, mas no sendo
pressurizados, reduz-se a probabilidade de exploso. Apesar destes fatores, o emprego de
sistemas fechados , hoje, amplamente empregado para a decomposio de grande
diversidade de amostras e posterior determinao elementar por diversas tcnicas.
O cido ntrico no um agente oxidante suficientemente forte para mineralizar
completamente o material orgnico em sistemas abertos. Dependendo da natureza da
amostra (Tabela 7.2), de 2 a 50% do carbono original permanece como material no
decomposto.1 Se a oxidao do carbono for parcial, e dependendo do grau de oxidao, a
determinao do elemento ser interferida em menor ou maior grau pelos produtos de
decomposio orgnica. Na voltametria de redissoluo andica, observam-se algumas
interferncias na determinao de baixas concentraes de metais. Em alguns casos, o
potencial de oxidao do cido ntrico no suficiente para a solubilizao de biomolculas.
Grandes quantidades de produtos orgnicos de decomposio permanecem no
dissolvidos, especialmente se as amostras contiverem gorduras.
No obstante, uma vantagem do cido ntrico seu manuseio, pois o risco de
exploso pelo contato com substncias orgnicas muito pequeno. Alm disso, pode-se
obter facilmente um cido de alta pureza por destilao abaixo de seu ponto de ebulio.2
Como a reatividade do cido ntrico menor quando comparada com do cido perclrico,
o cido ntrico pode ser usado em sistemas fechados de decomposio e as perdas de
elementos por volatizao podem ser evitadas.
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212

Tabela 7.2. Teor de carbono residual em solues de amostras decompostas com cido
ntrico em frascos abertos.1
Material

% Carbono residual

Resduos orgnicos
no dissolvidos

Amido

2 - 11

No

Celulose

2 - 12

No

Cana de acar

2 - 10

No

Farinha de trigo

4-6

No

Alga marrom

14 - 16

No

Espinafre

16 - 17

No

Acculas de pinus

10 - 21

No

Folhas de pltano

17 - 23

No

Leite em p desnatado

10 - 12

No

Leite em p

26 - 29

Sim

Alimento de peixe

26 - 39

Sim

Carne magra

25 - 30

Sim

Fgado bovino

24 - 32

Sim

Sangue de porco

9 - 22

No

Sangue humano

25 - 29

No

leo de semente de girassol

43 - 46

Sim

O aspecto mais interessante do cido ntrico que seu potencial de oxidao


diretamente proporcional ao aumento da temperatura, e assim a eficincia de decomposio
com o cido ntrico depende da temperatura. Em sistemas abertos, a temperatura mxima
a do seu azetropo com a gua (120 C), mas em sistemas fechados exploram-se
temperaturas acima de 300 C.
Como j foi comentado, a reao tpica de materiais orgnicos com o cido ntrico a
quente a seguinte:

(CH2)n + HNO3 + calor CO2 (g) + 2NO(g) + 2H2O


De forma a explorar ao mximo o potencial de oxidao do cido ntrico, sistemas
de decomposio sob presso tem sido desenvolvidos, permitindo aplicaes com
temperaturas acima de 120 C. Dependendo do projeto do sistema de aquecimento, e
tomando-se as necessrias precaues, existem procedimentos em que os riscos de
exploso so desprezveis.

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213

7.4.1. DECOMPOSIO COM CIDO NTRICO SOB PRESSO AT 200 C


Para mineralizar amostras em um sistema fechado, utilizam-se frascos de reao
apropriados, adiciona-se cido ntrico concentrado (65-69%) e a mistura aquecida
utilizando-se um programa especial de temperatura no frasco sob presso. As principais
vantagens do emprego de um sistema fechado quando comparado com um sistema aberto
so as seguintes:
a. No h perdas por volatilizao dos elementos;
b. Reaes com durao relativamente curta podem ser realizadas, trabalhando-se em
temperaturas acima do ponto de ebulio do reagente;
c. Reduzem-se as quantidades dos reagentes, diminuindo-se os valores dos brancos;
d. No h risco de contaminao por fontes externas.
As temperaturas utilizadas para a decomposio esto associadas ao material do
frasco de reao: o PTFE, dependendo da sua qualidade, permite empregar temperaturas
entre 160 - 200 C.3-5 Para temperaturas mais altas este polmero perde resistncia fsica,
amolecendo. Diferentes sistemas de decomposio por presso foram descritos na
literatura, muitos quais propostos para a decomposio de amostras geolgicas com cido
fluordrico.6-12
At 1985, a maioria dos sistemas utilizados, baseava-se nos modelos descritos por
Bernas10 e Tolg et al.3 O sistema de decomposio fechado foi denominado de "bomba de
decomposio", e consistia em um recipiente de PTFE, contido em um cilindro de ao. O
recipiente fechado com uma tampa de PTFE que pressionada por uma mola, e ento,
fechada. Quando a presso atinge um valor mximo de segurana, a tampa se abre pela
presso exercida dentro do frasco deixando que os gases gerados escapem, prevenindo
com isso, uma presso excessiva e eliminando o risco de exploso. A bomba aquecida em
um bloco de metal ou em uma estufa termostatizada.13 Alguns frascos de presso usam
discos ou membranas de ruptura, ao invs do dispositivo de segurana do tipo mola; a
tampa do frasco de presso pode servir para a mesma funo.14 A Figura 7.2 mostra as
principais partes de um sistema de um sistema comercial para decomposio sob presso.

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214

sistema de segurana para


alvio de presso

mola
tampa de ao com
rosca

tampa de PTFE

revestimento de ao

copo de PTFE

amostra + cido

Figura 7.2. Sistema de decomposio pressurizado com aquecimento convencional Berghof.

Entretanto, a desvantagem do PTFE como material para frasco de digesto que


ele no pode ser empregado para alguns casos de determinaes de baixas concentraes
de elementos.4 Um outro problema reside no fato de que para altas presses e
temperaturas, alguns elementos difundem-se no PTFE, resultando em efeito de memria e
produzindo erros sistemticos.15 Esses efeitos, entretanto, dependem sobremaneira da
qualidade do PTFE utilizado. Entretanto, para decompor amostras que contm uma grande
quantidade de minerais (p.ex., silicatos), faz-se necessrio o uso de cido fluordrico, para
permitir a dissoluo de resduos de silica que no so decompostos pela ao do cido
16

ntrico, e frascos de PTFE devem ser empregados.


Conforme j foi salientado, o cido perclrico no deve ser usado em sistemas
fechados por razes de segurana: reaes violentas podem causar a exploso dos frascos
de presso, porque os sistemas de segurana dos mesmos podem no responder
rapidamente ao aumento sbito de presso. A mesma recomendao deve ser feita para
misturas de cidos sulfrico e ntrico, os quais no podem ser usados para mineralizar
gorduras em sistemas fechados.17
Jackwerth & Gomiscek18 apresentam uma viso geral a respeito das tcnicas
empregadas na decomposio por presso com cidos para a determinao de baixas
concentraes de elementos.
Quando o cido ntrico usado sozinho, a massa da amostra, o tipo de amostra, o
volume de cido, o volume do recipiente e a temperatura reacional e a durao do
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215

aquecimento, esto relacionados com a qualidade da oxidao da matria orgnica e com a


segurana do procedimento.
Temperatura de decomposio

Em frascos de PTFE as temperaturas entre 170 e 180 C fornecem as melhores


condies de oxidao dos constituintes da matriz em amostras biolgicas. Se a
temperatura for aumentada para 200 C isso no significa, necessariamente uma melhoria
dos resultados de decomposio. O PTFE no indicado para usos onde so empregadas
altas temperaturas, de tal forma que a temperatura ao redor de 180 C a mais
recomendada para processos em frascos de PTFE.
Tempo de reao

O melhor tempo de reao, independentemente da amostra biolgica utilizada, de


aproximadamente 3 h.1 Para tempos mais longos, no se encontrou nenhuma diminuio na
quantidade de compostos orgnicos contidos nas cinzas. Alm deste tempo de reao,
deve-se incluir o tempo necessrio para o aquecimento da mistura at a temperatura
desejada.
Volume de cido ntrico

O volume de HNO3 65-69% indicado para a decomposio de amostras orgnicas,


encontra-se na faixa entre 0,4 e 2,0 ml/200 mg de amostra,3,4,19 dependendo da matriz da
amostra. Entretanto, possvel afirmar que um volume de 2 ml de cido ntrico ser
suficiente para mineralizar uma quantidade de amostra biolgica que corresponda a 100 mg
de carbono puro, independentemente do tipo de substncia orgnica a ser analisada,
quando a decomposio for realizada entre 170-180 C durante pelo menos 3 h.1,20 Volumes
menores do cido podem ser usados para substncias que apresentem menores teores de
gordura.1 Como o cido ntrico encontrado com alto grau de pureza ou, alternativamente,
de fcil purificao,2 2 ml de HNO3/massa de amostra que corresponda a 100 mg de C, pode
ser considerado como um volume razoavelmente pequeno.

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216

Massa da amostra

A massa da amostra determinada pela presso mxima permitida dentro do


frasco de decomposio empregado. O exemplo seguinte se refere ao sistema de
decomposio que emprega uma presso de 20 bar e utiliza um frasco de PTFE de 35 ml.
Nestas condies, as amostras que correspondam a 100 mg de carbono puro, podem ser
decompostas. Independentemente do tipo de material biolgico usada, a presso atingida
durante a fase final do processo de decomposio estar ao redor de 20 bar. Esta presso
gerada por gases que se formam durante o processo de decomposio (CO2 proveniente do
carbono contido na amostra e NO/NO2 devido a reao com cido ntrico), e pelas presses
de vapor de gua e do cido ntrico.21 Assim, uma massa apropriada de amostra orgnica
facilmente calculada com base em seu teor de carbono. Os contedos de carbono de
algumas substncias liofilizadas so apresentados na Tabela 7.3. Se forem empregadas
substncias frescas, o alto contedo de gua permite, correspondentemente, aumentar as
massas das amostras. Assim, podem ser utilizados aproximadamente 200 mg de tecido
liofilizado (ca. 50 % de carbono), 200 a 300 mg de uma substncia vegetal liofilizada (ca. 3050 % de carbono) e somente 120 mg de gordura (ca. 78% de carbono). Alm da
temperatura, do tempo de reao e do volume do cido, um fator importante para que ocorra
uma completa oxidao das substncias orgnicas da amostra, a relao entre a massa
de amostra e o volume do recipiente. Se, por exemplo, em um recipiente de 35 ml a massa
de amostra e o volume de cido ntrico forem diminudos proporcionalmente, a oxidao do
carbono ser menos eficiente, para o caso de amostras contendo menos que 50 mg de
carbono. Isto resulta em um aumento dos produtos de decomposio orgnica em soluo,20
mesmo que a proporo massa de amostra/volume de cido permanea inalterada.
Segundo os autores, os piores resultados so obtidos quando a concentrao de NO2
diminui na fase lquida, o que corresponde a uma diminuio de presso no interior dos
frascos, face s baixas quantidades usadas de amostra e de cido. Assim, o NO2 que
produzido quando o cido ntrico reduzido, est diretamente associado com a destruio
das amostras orgnicas.20 Para uma aplicao prtica de decomposio sobre presso, isto
significa dizer que massas de amostras menores que 1,4 mg (em C)/ml do volume do
recipiente no so recomendadas. No h um limite superior, desde que o sistema de
decomposio usado responda s presses geradas durante o processo. Entretanto,
presses mais altas no frasco no do melhores resultados de oxidao: para relaes ao
redor de 1,4 mg de C/ml do volume do frasco, a taxa de decomposio, i.e. a proporo da
substncia orgnica oxidada durante o processo, no afetada pela presso e, portanto,
independente da massa da amostra. Caso os sistemas de decomposio no estejam

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217

apropriadamente fechados, haver perdas de NO2 e a oxidao do carbono ser


prejudicada.
Tabela 7.3. Teor de carbono em amostras biolgicas liofilizadas
Matriz
Tecido Vegetal

Lipdeos

Tecido Animal

Glicdeos

Amostra
Alga marrom
Farinha de trigo
Espinafre
Folha de lamo
Folha de faia
Folha de pltano
Grama
Trevo
Acculas de pinus
Acculas de abeto
Raz de abeto
Casca de abeto
Polpa de pssego

Manteiga,
leos
vegetais,
gorduras vegetais, sebo

% Carbono
35
45
38
44
48
48
39
36
51
48
49
36
40

74...78

Leite em p desnatado
Leite em p
carne magra
Fgado bovino
Peixe
Sangue humano
Sangue de porco
Tecido de ostra
Rim de porco
Msculo (tecido)
Ovo de galinha

42
52
50
51
52
52
52
46
49
41
50

Glicose
Aucar de cana (sacarose)
Lactose
Celulose
Amido

37
42
42
43
41

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218

Materiais no decompostos
Nessas condies (180 C, 3 h, 2 ml de HNO3 65%/ 100 mg C, razo massa de
amostra/volume do frasco de 1,4 mg C/ml), todas as substncias orgnicas podem ser
dissolvidas. As amostras contendo silicato (p.ex. gramneas e mexilhes) somente podem
ser dissolvidas com uma mistura de cidos ntrico e fluordrico.

20

Os resduos insolveis que

frequentemente permanecem aps o processo de decomposio (CaF2, fluorosilicatos),


podem ser solubilizados, se a mistura for levada secura aps o processo de decomposio
sob presso. Se necessrio, pequenas quantidades de HNO3 podem ser adicionadas. Os
fluoretos e fluorossilicatos insolveis so ento convertidos em nitratos solveis.

20

Dependendo do problema analtico, em muitos casos os silicatos que permanecem


em soluo podem ser tolerados dispensando a adio de cido fluordrico, desde que os
elementos a serem determinados no estejam ligados a estes silicatos. Isto de particular
importncia para decomposies com cido ntrico em frascos de quartzo, face
intolerncia destes materiais ao cido fluordrico.
As matrizes orgnicas ou seus produtos, quando reagem com cido ntrico sob alta
presso, so dissolvidas completamente na maioria dos casos. As substncias que contm
protenas e gorduras, entretanto, produzem resduos orgnicos,20,22 os quais no so
atacados pelo cido ntrico se a temperatura for de apenas 180 C. Carboidratos puros
(acar, celulose, etc) so completamente mineralizados pelo cido ntrico a 180 C,1,20 e
nestes casos baixas concentraes de metais que permanecem nas cinzas podem ser
determinadas sem problemas por voltametria de redissoluo andica ou por outras tcnicas
analticas. Porm, cabe ressaltar que, no caso de decomposies feitas a 300 C,
praticamente todos os compostos orgnicos so completamente oxidados.
Resumo das condies de decomposio em frascos de PTFE (<180 C)

Apesar de algumas amostras no serem completamente decompostas e de que


alguns produtos de decomposio permanecem em soluo existem vrias situaes em
que decomposies a 180 C em sistemas fechados fornecem bons resultados. A Tabela 7.4
resume as melhores condies para a decomposio com cido ntrico em bombas de
PTFE. As condies mostradas nesta tabela asseguram que os resduos orgnicos que
permanecem em soluo, quando amostras biolgicas so decompostas, podem ser quase
que totalmente eliminados e que a decomposio de carboidratos e gorduras que no
contm cidos linolicos ou linolnicos no deixar resduos de compostos orgnicos.

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219

Tabela 7.4. Melhores condies para a decomposio de amostras biolgicas com cido
ntrico e bombas de PTFE.
Temperatura
Massa da amostra em frasco de 35 ml
Presso final
Tempo de decomposio
cido

170 - 180 C
Correspondente a 100 mg C,
20 bar
3 h (mais o tempo de aquecimento)
2 mL de cido ntrico (65-69%)

7.4.2. DECOMPOSIO COM HNO3 SOB PRESSO A 300 C


Como muitas amostras biolgicas possuem protenas e os aminocidos so
digeridos com cido ntrico, frequentemente faz-se necessrio mineralizar completamente os
produtos de decomposio resultantes. Para se oxidar completamente amostras biolgicas,
independentemente de sua composio qumica, recomenda-se a decomposio com cido
ntrico a 300 C.20,23 Nesta temperatura com 2 h de decomposio, as solues resultantes
praticamente no contm carbono, acima de 99,9% do contedo original em carbono da
amostra oxidado.23 Como os frascos de PTFE esto sujeitos a se deteriorar quando so
empregadas temperaturas acima de 200 C, utilizam-se frascos de quartzo. Existe um
equipamento especial para decomposio a altas temperaturas, desenvolvido para a prtica
analtica,15 denominado High Pressure Asher ou HPA produzido comercialmente por uma
empresa austraca, com estas caractersticas.
As presses de vapor do cido e dos gases resultantes da reao com a matria
orgnica, a 300 C, dentro do frasco de quartzo equilibrada por uma presso externa maior
que 100 bar com N2. O frasco de digesto de quartzo fechado por uma tampa de quartzo
sobre um anel de vedao de silicone (7.3). Este pode ser aquecido a temperaturas de at
320 C em uma autoclave sob uma presso externa de 100 bar. possvel com esse
aparelho, obter solues livres de carbono dispensando tratamentos adicionais com cido
perclrico, independentemente do tipo de material orgnico a ser decomposto. Nestas
solues os analitos estaro na forma inica inorgnica, e vrias tcnicas analticas podem
ser empregadas para as determinaes.

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220

Pressoexterna
externa
Presso
(110-140
bar)
110 140
bar

tampa de quartzo
fita de PTFE

Presso

Presso externa

interna

110 140 bar

<100 bar

frasco de quartzo
amostra + cido

Figura 7.3. Frasco de reao do HPA (conforme Knapp, 1998)

Algumas aplicaes de mtodos analticos que eram limitadas pela presena do


resduo orgnico que permanecia em soluo quando as decomposies eram feitas com
cido ntrico a 180 C, como a voltametria de redissoluo andica e todas as tcnicas
empregando gerao de hidretos, deixaram de ser problemticas. Sinais de onda quadrada
para Zn, Cd, Pb e Cu obtidos por voltametria de redissoluo andica, empregando-se uma
amostra de alga digerida (NIES - Material certificado de referncia de Sargassum fulvellum
Nr. 9) e uma amostra de mexilho (NIES - Material certificado de referncia de Mytilus edulis
Nr. 6), indicaram que no permaneciam resduos orgnicos indesejveis na soluo
resultante. Antes da determinao dos metais, as solues foram evaporadas at a
secagem para remover o NO2 dissolvido, o qual interfere nas determinaes por voltametria
inversa.20,23 A corrente de fundo registrada foi quase a mesma obtida com solues-padro
aquosas dos analitos.

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221

Tabela 7.5. Presso de vapor desenvolvida por 10 ml de alguns cidos em frasco de


23 ml, e presso de saturao da gua (dados compilados por Barnes, 1994)
HNO3 91%

HCl 36 %

HCl 22,9 %

gua rgia

H2O

Temp

Pres.

Temp

Pres.

Temp

Pres.

Temp

Pres.

Temp

Pres.

(C)

(bar)

(C)

(bar)

(C)

(bar)

(C)

(bar)

(C)

(bar)

106

21

125

2,3

133

12

165

25

192

43

219

77

256

107

285

163

178

223

255

48

97

146

132

4,8

155

48

150

4,7

159

6,5

162

52

175

8,8

191

18

202

94

200

15,3

220

35

221

114

225

25

250

63

236

133

250

39

285

112

258

170

275

59

315

153

300

85

325

119

Este procedimento de decomposio foi testado em uma grande variedade de


materias biolgicos e, em todas as situaes, os voltamogramas obtidos foram livres de
interferncias. Os resultados para Ni e Co obtidos por voltametria tambm se apresentaram
livres de interferncias. Aps a decomposio por presso a temperatura de 300 C,
tambm foi possvel determinar arsnio por espectrometria de absoro atmica e por
espectrometria de emisso atmica com plasma com gerao de hidreto em praticamente
todos os materiais biolgicos. Este mtodo de decomposio possui a vantagem de no ser
muito caro, alm de ser rpida e dispensar o tratamento dos resduos com cidos
perclrico/sulfrico. Estudos preliminares demonstraram que este mtodo de decomposio
tambm adequado para a determinao de Se e Hg. Alm destes elementos, os enxofre e
fsforo presentes nas amostras de material biolgico so convertidos quantitativamente a
sulfatos e fosfatos.
Os seguintes pontos resumem as vantagens que este mtodo de decomposio
oferece, empregando cido ntrico sob presso a 300 C:
Todos os materiais biolgicos e produtos alimentcios podem ser completamente
decompostos sem o uso de cido perclrico, eliminando riscos inerentes ao se trabalhar
com este cido.
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222

Todas as tcnicas de anlise que requerem solues podem ser empregadas.


As interferncias provocadas pelos resduos orgnicos so eliminadas, de tal forma que o
carbono contido no material biolgico completamente oxidado CO2. Devido a
eliminao desta fonte de interferncia e dos sinais de fundo, a exatido e a preciso das
medidas para a determinao dos elementos podem ser significativamente melhoradas,
quando comparadas com aquelas dos procedimentos de decomposio convencionais.
Empregando um sistema fechado significa que podem ser evitadas as perdas dos
elementos e os problemas de contaminaes, o que novamente melhora a exatido dos
resultados. As perdas dos elementos, muitas vezes observadas quando so utilizados
frascos de PTFE, devido a difuso destes elementos para dentro das paredes dos
frascos, no ocorrem.
A decomposio a 300 C com cido ntrico permite uma completa mineralizao de
materiais que so de significncia em tecnologia: carbono, grafite, fibra de carbono,
material sinttico no contendo fluoreto, leos minerais, etc.
Massa das amostras
Quando se emprega o High Pressure Asher a massa das amostras totalmente
determinada pela temperatura do procedimento de decomposio. Com 2 ml de cido ntrico
(65 %) em um frasco de quartzo de 30 ml e uma temperatura na autoclave de 320 C, que
corresponde a 300 C no interior do frasco, obtm-se completa decomposio de amostras
com massa equivalente a 100 mg de carbono puro, livre de resduos de carbono.
Em princpio, a massa da amostra limitada pela presso de vapor do cido ( 70
bar).

20

Se o frasco de decomposio est sujeito a uma presso interna de 100 bar, a

presso resultante devida aos gases CO2 e N2O no dever exceder 30 bar para que no
ocorra exploso. No ocorrer nenhuma exploso, se a massa da amostra for limitada pela
quantidade correspondente a 100 mg C, independentemente do tipo de material biolgico
utilizado.
Lembrando que a presso de vapor de um cido decresce exponencialmente com a
diminuio da temperatura (a Tabela 7.5 mostra alguns dados compilados por Barnes,1994),
torna-se evidente que quando se utiliza o HPA a 180 C (Tabela 7.6) podem ser utilizadas
massas maiores de amostra do que a 300 C. Assim, se a qualidade dos resultados
analticos no for prejudicada quando as digestes forem feitas a 180C, esta situao de
menor temperatura tornar-se- de particular importncia quando as amostras analisadas no
forem homogneas ou quando as amostras no puderem ser divididas. Isto somente
recomendvel, se o mtodo de determinao no for interferido pelos compostos orgnicos
que eventualmente possam permanecer em soluo.

Francisco Jos Krug, fjkrug@cena.usp.br. VI Workshop sobre Preparo de Amostras, Santa Maria, 2006.

Decomposio de materiais orgnicos por via mida

223

Assim, uma massa de amostra equivalente a 350 mg de carbono pode ser digerida
a 180 C em um frasco de quartzo de 30 ml. Se o frasco for de 70 ml, a massa de amostra
correspondente ao teor de carbono, pode chegar a 800 mg (Tabela 7.6). Isto corresponde a
1,6 g de tecido animal liofilizado ou 4 g de tecido fresco. Por razes de segurana, os
frascos de PTFE no devem ser empregados para a decomposio de grandes quantidades
de amostras. Por outro lado, se a amostra for digerida a 300 C mesmo em um frasco de 30
mL, o limite mximo de massa de amostra recomendado em termos de carbono ser de
apenas 230 mg (Tabela 7.7). Somente para fins comparativos, apresentada a Tabela 7.8,
que resume as melhores condies para a decomposio de amostras a 300 C sob presso
com aquecimento em forno de microondas.
Tabela 7.6. Melhores condies para a decomposio de materiais biolgicos no High
Pressure Asher a 180 C
Temperatura no painel de controle

180 C

Temperatura de decomposio

180 C

Massa da amostra em frasco de 30 ml

correspondente a 350 mg C

Massa da amostra em frasco de 70 ml

correspondente a 800 mg C

Tempo de decomposio
cido

3 h (mais 30 min de aquecimento)


2 ml de HNO3 65-68%/100 mg C

Tabela 7.7. Condies para a decomposio completa de amostras biolgicas com cido
ntrico no High Pressure Asher a 300 C
Temperatura no painel de controle

320 C

Temperatura de decomposio

300 C

Massa da amostra em frasco de 30 ml

correspondente a 100 mg C

Massa da amostra em frasco de 70 ml

correspondente a 230 mg C

Tempo de decomposio
cido

1-2 h (mais 30 min de aquecimento)


2 ml de HNO3 65-68%/100 mg C

Francisco Jos Krug, fjkrug@cena.usp.br. VI Workshop sobre Preparo de Amostras, Santa Maria, 2006.

Decomposio de materiais orgnicos por via mida

224

Tabela 7.8. Condies-padro para a decomposio de amostras biolgicas com cido


ntrico em bomba de decomposio PMD Anton Paar
Frasco de quartzo

30 ml

Massa da amostra

correspondente a 100 mg C

Potncia

Step 5

Tempo de decomposio

10 min

Tempo de refrigerao

10 min

cido

2 ml de HNO3 65-68% (e de 0,1 a 0,5 ml de


HCl 36% se necessrio como ligante)

7.3. REFERNCIAS
1. WRFELS, M.; JACKWERTH, E. Investigations on the carbon balance in decomposition
of biological materials with nitric acid. Fresenius Zeitschrift fr Analytische Chemie,
New York, v. 322, n. 3, p. 354-358, 1985.
2. TSCHPEL, P.; KOTZ, L.; SCHULTZ, W.; VEBER, M.; TLG, G. Causes and elimination
of systematic errors in the determination of elements in aqueous solutions in the ng/ml
and pg/ml range. Fresenius Zeitschrift fr Analytische Chemie, New York, v. 302, n. 1,
p. 1-14, 1980.
3. KOLTZ, L.; KAISER, G.; TSCHPEL, P.; TLG, G. Decomposition of biological materials
for determination of extremely low contents of trace elements in limited amounts with nitric
acid under pressure in a teflon tube. Fresenius Zeitschrift fr Analytische Chemie, New
York, v. 260, n. 3, p. 207-&, 1972.
4. KOLTZ, L.; HENZE, G.; KAISER, G.; PAHLKE, S.; VEBER, M.; TLG, G. Wet
mineralization of organic matrices in glassy-carbon vessels in a pressure-bomb system for
trace-element analysis. Talanta, Amsterdam, v. 26, n. 8, p. 681-691, 1979.
5. KNAPP,

G.

Methoden

zum

Aufschlu

organischer

Materialien

fr

die

Elementspurenanalyse, in. B. Welz, Atomspektrometrische Spurenanalytik, Verlag


Chemie, Weinhein/Bergstrae 1982.

Francisco Jos Krug, fjkrug@cena.usp.br. VI Workshop sobre Preparo de Amostras, Santa Maria, 2006.

Decomposio de materiais orgnicos por via mida

225

6. MAY, I.; ROWE, J. J. Solution of rocks and refractory minerals by acids at high
temperatures and pressures-determination of silica after decomposition with hydrofluoric
acid. Analytica Chimica Acta, Amsterdam, v. 33, n. 6, p. 648-654, 1965.
7. LOUNAMAA, K. Die anreicherung des arsens aus silicatgesteinen fur eine colorimetrische
oder spektrographische bestimmung-aufschluss mit flusssaure unter druck. Fresenius
Zeitschrift fr Analytische Chemie, New York, v. 146, n. 6, p. 422-429, 1955.
8. W. WAHLER. NEUES JAHRB. Mineral. Abhandl., v. 101, p. 109, 1964.
9. LANGMYHR, F. J.; SEVEEN, S. Decomposability in hydrofluoric acid of the main and
some minor and trace minerals of silicate rocks. Analytica Chimica Acta, Amsterdam, v.
32, p. 1-7, 1965.
10. BERNAS, B. New method for decomposition and comprehensive analysis of silicates by
atomic absorption spectrometry. Analalytical Chemistry, Washington, v. 40, n. 11, p.
1982 -1986, 1968.
11. DOLEZAL, J.; LENZ, J.; SULZEK, Z. Decomposition by pressure in inorganic analysis.
Analytica Chimica Acta, Amsterdam, v. 47, n. 3, p. 517-527, 1969.
12. MITCHELL, J. W. Ultrapurity in trace analysis. Analytical Chemistry, Washington, v. 45,
n. 6, p. A 492-&, 1973.
13. SCHRAMEL, P.; WOLF, A.; SEIF, R.; KLOSE, B. J. New device for ashing of biologicalmaterial under pressure. Fresenius Zeitschrift fr Analytische Chemie, New York, v.
302, n. 1, p. 62-64, 1980.
14. STOEPPLER, M.; BACKHAUS, F. Pretreatment studies with biological and environmental
materials. 1. Systems for pressurized multisample decomposition, Fresenius Zeitschrift
fr Analytische Chemie, New York, v. 291, p.116-120, 1978.
15. KNAPP, G. Routes to powerful methods of elemental trace analysis in environmentalsamples. Fresenius Zeitschrift fr Analytische Chemie, New York, v. 317, n. 3-4, p.
213-219, 1984.
16. RHL, R.; HOFFMANN, H. J.; BESLER, W. Fresenius Zeitschrift fr Analytische
Chemie, v. 317, p. 872, 1984.
17. TYLER, L. J. Chemical and Engineering News, v. 32, p. 20, 1973.
18. JACKWERTH, E.; GOMISCEK, S. General - aspects of trace analytical methods. 6. Acid
pressure decomposition in trace-element analysis. Pure and Applied Chemistry, Oxford,
v. 56, n. 4. p. 479-489, 1984.
Francisco Jos Krug, fjkrug@cena.usp.br. VI Workshop sobre Preparo de Amostras, Santa Maria, 2006.

226

Decomposio de materiais orgnicos por via mida

19. STOEPPLER, M.; MLLER, K. P.; BACKHAUS, F. Pretreatment studies with biological
and environmental materials. III Pressure evaluation and carbon balance in pressurized
decomposition with nitric acid. Fresenius Zeitschrift fr Analytische Chemie, New York,
v. 297, p. 107-112, 1979.
20. WRFELS, M. Dissertation, Ruhr-Universitt, Bochum, 1988.
21. WRFELS, M.; JACKWERTH, E.; STOEPPLER, M. (resultados no publicados)
22. WRFELS, M.; STOEPPLER, M. Fresenius Zeitschrift fr Analytische Chemie, New
York, v. 330, p.159, 1988.
23. WRFELS, M.; JACKWERTH, E.; STOEPPLER, M. About the problem of disturbances of
inverse voltammetric trace analysis after pressure decomposition of biological samples.
Fresenius Zeitschrift fr Analytische Chemie, New York, v. 329, p. 459-461, 1987.

Francisco Jos Krug, fjkrug@cena.usp.br. VI Workshop sobre Preparo de Amostras, Santa Maria, 2006.

8.

DECOMPOSIES

ASSISTIDAS

POR

RADIAO

MICROONDAS
Ana Rita de Araujo Nogueira Embrapa Pecuria Sudeste
Diogo Pompu de Moraes DQ/UFSM
rico Marlon de Moraes Flores DQ/UFSM
Francisco Jos Krug CENA/USP
Guenter Knapp Graz University of Technology
Joaquim de Arajo Nbrega DQ/UFSCar
Juliano Smanioto Barin DQ/UFSM
Mrcia Foster Mesko DQ/UFSM

8.1. INTRODUO
Os primeiros experimentos com fornos de microondas para decomposio de
amostras foram realizados em 1975 utilizando-se frascos fechados em fornos domsticos
com resultados muito promissores. Embora os fornos domsticos no fossem apropriados
para se trabalhar em ambientes agressivos, particularmente quando os frascos de reao
deixavam escapar vapores cidos corrosivos, era notria a diminuio do tempo de
decomposio das

amostras, comparativamente aos procedimentos convencionais

utilizando-se placas aquecedoras ou blocos digestores. Aqueles pesquisadores que j


trabalhavam com sistemas fechados viam as vantagens dos aquecimentos por microondas
com certa reserva, pois os sistemas fechados aquecidos de maneira convencional j tinham
desempenho superior aos abertos. Ressaltando-se pequenas excees, o uso do forno de
microondas para o preparo de amostras permaneceu praticamente ignorado at 1985,
quando o interesse na digesto por microondas tornou-se bastante popular. A partir de
ento, as publicaes inicialmente se voltaram quase que exclusivamente decomposio
(em sistemas abertos) de amostras ambientais, alimentos, ligas, leos, metais, minerais,
etc.
Deve ser enfatizado que, ltimos anos, o nmero de aplicaes envolvendo o uso
de radiao microondas cresceu rapidamente, em especial nas primeiras duas dcadas a
partir da primeira publicao, por Abu Samra et al. em 1975. Desde ento, as aplicaes da
radiao microondas nos diferentes ramos da qumica tm crescido exponencialmente, para
as mais diferentes aplicaes, tais como sntese orgnica, sntese de compostos

Francisco Jos Krug, fjkrug@cena.usp.br. VI Workshop sobre Preparo de Amostras, Santa Maria, 2006.

228

Decomposies assistidas por radiao microondas

organometlicos, compostos inorgnicos, catlise etc. No tocante ao preparo de amostras,


a esfera de aplicao tem se expandido cada vez mais em reas que envolvem
decomposies por vias seca e mida, fuso, extraes, ou acelerao de reaes
qumicas, por exemplo. Pesquisas recentes vm avaliando o efeito da radiao de
microondas na formao de complexos, formao de compostos coloridos e processos
cromatogrficos, dentre outros. Os efeitos no trmicos das interaes das microondas com
as substncias ainda so um desafio que necessita ser investigado. Hoje se reconhece que
os fornos de microondas para fins analticos possuem tecnologia que possibilita excelentes
desempenhos para amostras orgnicas e muitas amostras inorgnicas. Destaque tambm
deve ser dado aos sistemas que exploram microondas com radiao focalizada em frascos
fechados mas com presso atmosfrica, e aos sistemas em fluxo contnuo. Neste captulo,
nfase ser dada aos fornos de microondas com frascos fechados de mdia a alta presso
e aos sistemas com radiao focalizada. Avanos recentes na literatura tambm so
mencionados no final deste captulo. De uma maneira geral, pode-se afirmar que o
aquecimento por microondas proporcionam digestes mais rpidas e seguras do que
aqueles baseados em aquecimento convencional, quando realizados em equipamentos
adequados para este fim.

8.2. CONCEITOS TERICOS


As primeiras tentativas para compreender os aspectos qumicos e fsico-qumicos
do processo de dissoluo mediante o aquecimento com microondas revelaram a
necessidade de se conhecer e, preferivelmente monitorar, as condies de temperatura e
presso durante o processo de digesto.
Os sistemas analticos modernos, desenvolvidos especificamente para digestes
assistidas por microondas, apresentam facilidades para medir a temperatura e a presso do
sistema amostra-cido(s) durante o perodo reacional por meio da aplicao da tecnologia
baseada em termometria com sensores de fibras ticas e outros transdutores. possvel
medir tanto a temperatura no meio reacional in situ ou externamente. Alm disso, o
desenvolvimento de materiais de alta resistncia mecnica, como Teflon, PFA e TFM
permite

que

se

conseqentemente,

trabalhe

com

temperaturas

recipientes
mais

fechados

elevadas,

que

presses

podem

ser

elevadas

e,

monitoradas

continuamente. Dependendo do sistema de digesto (do projeto do frasco de digesto), a


presso pode ser controlada e ajustada ao valor programado pelo operador em qualquer
momento do processo. O conhecimento da presso e da temperatura permite que se
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Decomposies assistidas por radiao microondas

229

interfira automaticamente nas etapas do processo de digesto. Desta forma, possvel


determinar experimentalmente a durao e a potncia mais adequadas de cada etapa para
a completa digesto da amostra.

RELAES BSICAS FUNDAMENTAIS


As relaes tericas, que regem a interao da radiao das microondas com a
amostra e com os reagentes utilizados para a digesto so, basicamente, aquelas que, de
uma forma geral, regulam a interao entre matria e energia. Obviamente, o tipo
especfico de radiao restringe as consideraes e os efeitos da mesma energia sobre a
amostra e sobre os reagentes presentes durante a ao das microondas no sistema.
As microondas so ondas eletromagnticas (Figuras 8.1 e 8.2) e, como tal, so
portadoras de energia. Cobrem uma faixa de freqncias do espectro eletromagntico que
varia de 300 a 300.000 MHz (Figura 8.2). De acordo com o regulamento da Comisso
Federal de Comunicaes e das Leis Internacionais de Rdio, somente quatro freqncias
so permitidas para uso industrial, cientfico e domstico: 915 25, 2450 13, 5800 74 e
22125 125, em MHz. Os fornos de microondas comerciais fabricados para uso domstico
ou para laboratrios empregam microondas com freqncia de 2450 MHz. A potncia que
gerada em um forno de microondas do tipo domstico ou analtico normalmente superior a
600 W. Alguns equipamentos modernos operam com uma potncia de 1100 W que, em
outras palavras, significa um fornecimento de at 15.774 cal min-1(1 kW = 239 cal s-1).

H
campo eltrico

campo
magntico

Figura

8.1.

Ilustrao

de

Direo de
propagao

uma

onda

eletromagntica

planopolarizada:

E = campo eltrico; H = campo magntico; = comprimento de onda.

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230

Decomposies assistidas por radiao microondas

Comprimento
de onda (m)
Dimenso
aproximada

menores

maiores
clula

Bola de tnis

bactria

vrus

protena

molcula de gua

Nome comum
da radiao
INFRAVERMELHO

MICROONDAS

Raios-X DUROS

ULTRAVIOLETA

VISVEL

ONDAS DE RDIO

Raios-X MOLES

Raios GAMA

Fontes de
radiao
Rdio
FM

Freqncia
(ondas/s)

Rdio
FM

Forno de
microondas

Radar

Lmpada com
filamento de W

LNL Sncroton

Mquinas
de raios-X

radioistopos

maiores

menores
Energia de
Um Fton (eV)

Figura 8.2. Representao de uma parte do espectro eletromagntico

Quando um material no transparente s microondas absorve este tipo de radiao,


o material pode sofrer um aumento considervel na sua temperatura devido, principalmente,
interao da radiao eletromagntica com os ons dissolvidos e com o solvente,
provocando migrao inica e rotao de dipolos.
A ocorrncia destes dois processos resulta em um movimento molecular no
material, que tambm contribui para o aquecimento do mesmo. Estes dois processos
ocorrem quando microondas interagem com a soluo de um cido (ou mistura de cidos)
usado para a digesto da amostra de interesse.

Aquecimento condutivo

Corrente de
conveco

Aquecimento por microondas

Super aquecimento
localizado

Figura 8.3. Vises pontuais sobre as formas de aquecimento condutivo e por microondas.

Francisco Jos Krug, fjkrug@cena.usp.br. VI Workshop sobre Preparo de Amostras, Santa Maria, 2006.

Decomposies assistidas por radiao microondas

231

Somente a energia das microondas no suficiente para a quebra das ligaes


qumicas, devendo ser ressaltada a importncia destes mecanismos de converso de
energia (Tabela 8.1). A converso de energia in situ apresenta-se muito atrativa do ponto de
vista qumico, pois sua magnitude ir depender das propriedades das molculas, o que
permite algum controle das propriedades dos materiais e na seletividade das reaes. O
aquecimento por microondas, ao contrrio dos sistemas baseados nos sistemas com
aquecimento condutivo (p.ex. chapas aquecedoras, chamas, etc.), envolve adsoro direta
de energia pelo material que est sendo aquecido (Figura 8.3). Assim, novos mtodos so
necessrios para uma correta aplicao das microondas em diferentes campos da qumica.
As microondas apresentam radiao no ionizante, sendo muito menor que a
energia necessria para quebrar as ligaes das molculas orgnicas comuns (Tabela 8.1).
Isto no significa que no ocorram outros efeitos ou significativas interaes da radiao
eletromagntica com a matria.
Tabela 8.1. Comparao entre radiaes do espectro eletromagntico e energias de ligao
de algumas substncias (adaptado de Knapp, 1998)
Tipo de radiao

Frequncia (MHz)

Energia Quntica (eV)

Raios-X

3,0 1013

1,24 105

Ultravioleta

1,0 1013

4,1

Visvel

6,0 10

2,5

Infravermelho

3,0 10

0,012

Microondas

2450

0,0016

Tipo de ligao qumica

Energia de ligao qumica (eV)

H-OH

5,2

H-CH3

4,5

H-NHCH3

4,3

H3C-CH3

3,8

PhCH2-COOH

2,4

Migrao Inica
A migrao inica consiste no movimento eletrofortico dos ons dissolvidos interior
da soluo da amostra. O movimento dos ons causado pela interao entre as espcies
inicas e o campo magntico oscilante das microondas. Os ons se deslocam, produzindo
um fluxo de corrente (Figura 8.4) cujo movimento sofre resistncia causada por outras
espcies com fluxo oposto ao deslocamento. Como resultado dessa resistncia, so
produzidas perdas do tipo I2R (produo de calor), provocando um aumento na temperatura

Francisco Jos Krug, fjkrug@cena.usp.br. VI Workshop sobre Preparo de Amostras, Santa Maria, 2006.

232

Decomposies assistidas por radiao microondas

do meio, imediatamente ao redor de cada on que migra. O movimento dos ons aumenta a
medida que a temperatura tambm aumenta, provocando, assim, um efeito do tipo
avalanche.
Toda soluo inica tem pelo menos duas espcies inicas (ons Na+ e ons Cl-, por
exemplo) e todos os ons contribuem para o processo de aquecimento. A contribuio de
cada on depende de sua concentrao e sua mobilidade no meio (Tabela 8.2). A
mobilidade depende do tamanho, da carga, da condutividade, e tambm da temperatura do
on.

+
+

+
+

+
E

Figura 8.4. Representao esquemtica da migrao inica

Tabela 8.2. Efeito do aumento da concentrao de NaCl no fator de dissipao [adaptado


de Knapp, 1998]
Concentrao (mol l-1)

Tangente

0,0

0,157

0,1

0,240

0,3

0,435

0,5

0,625

Como as ondas eletromagnticas geram campos eltricos positivos e negativos


alternados, provoca-se uma desordem e agitao das molculas dipolares, transformandose em calor a energia absorvida para o realinhamento das molculas. A Figura 8.6 est
exagerada para efeito de ilustrao. No entanto, o que ocorre uma rpida mudana de
posio das molculas, que passam um pouco mais de tempo em uma direo que em
outra. Quando o campo eltrico removido, ocorre o retorno das molculas desordem,
em um tempo de relaxao t e energia trmica gerada.

Francisco Jos Krug, fjkrug@cena.usp.br. VI Workshop sobre Preparo de Amostras, Santa Maria, 2006.

Decomposies assistidas por radiao microondas

233

Rotao de Dipolo
Refere-se ao efeito que o campo eltrico oscilante das microondas causa s
molculas da amostra que possuem momento dipolar induzido ou permanente. Quando se
estabelece um campo eltrico, as molculas dipolares se alinham com os polos deste
campo eltrico (Figuras 8.5).

Campo eltrico

t=0ns

H
+

Campo eltrico

t=0,1ns

H
+

Campo eltrico

t=0,3ns

H
H

Figura 8.5. Rotao de uma molcula de gua com o campo eltrico gerado pela radiao
de uma microonda de 2450 MHz(cortesia Milestone).
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234

Decomposies assistidas por radiao microondas

Figura 8.6. Representao da resposta molecular a um campo eletromagntico. (a)


molculas polarizadas alinhadas com os plos do campo eletromagntico; (b) desordem
termicamente induzida quando o campo eletromagntico alterado.

Quando se utiliza a freqncia de 2450 MHz, o alinhamento das molculas e seu


retorno ao estado de desordem ocorrem 4,9 109 vezes por segundo, resultando
aquecimento rpido e eficiente. O aquecimento devido a esse processo depende do tempo
de relaxao da amostra, o qual definido como o tempo necessrio para ordenar
totalmente e desordenar 63% da amostra que, por sua vez, depende da temperatura e da
viscosidade da amostra.

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Decomposies assistidas por radiao microondas

235

Capacidade de Penetrao das Microondas


Quando se irradia um material qualquer com microondas, existem trs
possibilidades quanto penetrao da onda eletromagntica:
a) Reflexo: o material reflete as microondas sem ser afetado pelas mesmas.
b) Transparncia: as microondas atravessam o material sem provocar nenhum efeito no
material.
c) Absoro: o material absorve total ou parcialmente a radiao.
Nas digestes assistidas por microondas explora-se a absoro. Nessa situao, a
energia eletromagntica das microondas que absorvida convertida em energia trmica
(calor), com o conseqente aquecimento do meio reacional. Como os materiais diferem na
sua habilidade de converso da energia eletromagntica das microondas em calor,
importante conhecer o fator de dissipao de energia da amostra. Esse fator representa a
capacidade que cada material possui em absorver energia de microondas, sendo que a
absoro est diretamente relacionada com o grau de penetrao da radiao no material.
A penetrao nula nos materiais que refletem microondas, como os metais, e infinita nos
meios transparentes (quartzo e Teflon so praticamente transparentes).
Na Figura 8.7 esto representadas as propriedades dieltricas da gua destilada
em funo da freqncia, a 25C. Observa-se que apreciveis valores de perdas dieltricas
ocorrem acima de 10000 Hz, enquanto que os fornos microondas domsticos operam a
freqncias muito inferiores, 2450 Hz. Existe uma razo prtica para se utilizar essa baixa
freqncia: necessrio que os alimentos sejam eficientemente aquecidos em seu interior.
Se a freqncia for tima para uma mxima velocidade de aquecimento, as microondas
sero absorvidas nas regies externas do alimento, e penetraro muito pouco. Portanto, a
profundidade de penetrao, que a profundidade dentro de um material onde a potncia
atinge a metade de seu valor na superfcie, um outro importante parmetro experimental.
Quando a amostra aquecida, o tempo de relaxao dieltrica ir mudar com o fator
de dissipao e conseqentemente com a profundidade de penetrao. A Tabela 8.3 ilustra
esta observao. O fator de dissipao decresce com a elevao da temperatura da gua.
Este decrscimo ocorre porque 1/ aumenta com o aumento da temperatura da gua e
ento a freqncia rotacional da gua no ser coincidente com a freqncia angular
incidente das microondas, e a absoro decresce.

Francisco Jos Krug, fjkrug@cena.usp.br. VI Workshop sobre Preparo de Amostras, Santa Maria, 2006.

236

Decomposies assistidas por radiao microondas

Propriedades
dieltricas

80

40

0
10-1

10
Freqncia (GHz)

Figura 8.7. Propriedades dieltricas da gua em funo da freqncia. [adaptado de


Kingston & Haswell, 1997].

Tabela 8.3. Efeito da temperatura no fator de dissipao da gua


Temperatura C

Tangente (
104)

1,5

3100

5,0

2750

15,0

2050

25,0

1570

35,0

1270

45,0

1060

55,0

890

65,0

765

75,0

660

85,0

547

95,0

470

Medidas feitas a 3000 MHz. Dados extrados de Von Hippel, A.R. Dieletric Materials and
Applications, John Wiley: New York, 1954, p. 301.

Quando ocorre absoro, a penetrao vai depender fundamentalmente da


relao entre o fator de perda () e a constante dieltrica () da amostra em particular.
Esta relao conhecida como fator de dissipao e representada por tan , sendo
expressa pela razo entre o fator de perda e a constante dieltrica:

Francisco Jos Krug, fjkrug@cena.usp.br. VI Workshop sobre Preparo de Amostras, Santa Maria, 2006.

Decomposies assistidas por radiao microondas

237

tan = /
A constante dieltrica pode ser vista como uma medida da habilidade da
amostra em se opor ao caminho das microondas, e o fator de perda como a capacidade
da amostra para dissipar a quantidade de energia absorvida. Quanto maior for a capacidade
de dissipao de uma amostra, menor ser a capacidade de penetrao das microondas na
mesma. A magnitude da razo / fornece uma idia da transformao da energia das
microondas em calor em cada material. Valores do fator de dissipao de alguns materiais
so apresentados na Tabela 8.4. Maiores valores de tan representam maior absoro de
microondas.
Tabela 8.4. Fatores de dissipao(tan ). Medidas efetuadas a 3000 MHz [adaptado de
Kingston & Haswell, 1997]
Material

Temperatura (C)

Fator de Dissipao
(tan 104)

gua

25

1570,0

Quartzo fundido

25

0,6

Cermica F-66

25

5,5

Vidro borossilicato

25

10,6

Vidro fosfatado

25

46,0

Slica

25

0,6

Porcelana n 4462

25

11,0

Plexiglass

27

57,0

Nylon 66

25

128,0

Cloreto de polivinila

20

55,0

Polietileno

25

3,1

Polipropileno

25

2,0

Poliestireno

25

3,3

Teflon PTFE

25

1,5

Teflon PFA

25

1,5

A maioria dos dados de perda e constante dieltrica foram obtidos temperatura


ambiente para um grande nmero de materiais. Alguns trabalhos mais atuais, no entanto,
apresentam dados relacionados s temperaturas que os slidos atingem aps o
aquecimento em fornos de microondas durante um determinado perodo de tempo (Tabela
8.5).

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238

Decomposies assistidas por radiao microondas

gua como solvente


Como na grande maioria dos casos, o analista utiliza solues aquosas para a
realizao de uma anlise, conveniente conhecer o efeito das microondas sobre a gua.
Para molculas pequenas, tais como a molcula da gua, medida que a
temperatura aumenta, a migrao inica tambm aumenta, mas a contribuio da rotao
de dipolo diminui. Portanto, quando a gua aquecida mediante irradiao com
microondas, em princpio a absoro de radiao dominada pela contribuio da rotao
dipolar. Entretanto, medida que a temperatura aumenta, a contribuio da migrao inica
torna-se mais importante. A contribuio relativa de cada um destes fatores depende
essencialmente da mobilidade e do tempo de relaxao. Em uma soluo aquosa contendo
um cido ou uma mistura de cidos, a concentrao inica da soluo tambm
desempenha um papel importante na capacidade da soluo em absorver radiao. Se a
mobilidade e a concentrao inica forem baixas, o aquecimento da amostra depender
essencialmente da rotao dipolar. Por outro lado, medida que a mobilidade e a
concentrao aumentam, o aquecimento por microondas ser dominado pela migrao
inica e o tempo de aquecimento depender cada vez menos do tempo de relaxao da
soluo.
importante observar que a energia no absorvida apenas por solventes polares
(cidos minerais, solventes orgnicos, reagentes, misturas aquosas), produzindo calor e
acelerando as reaes qumicas, mas tambm por algumas molculas da amostra, pelos
materiais onde a amostra est contida e por superfcies que, idealmente, no se desejaria
aquecer durante a reao. As microondas podem tambm ser absorvidas por tecidos. Na
maioria dos pases j esto estabelecidas as faixas de tolerncia e os limites para a
freqncia da energia eletromagntica, tempo de exposio, massa do corpo, tempo,
periodicidade de exposio, etc. A exposio energia de fornos domsticos ou de
laboratrio limitada a 5 mW/cm2 a uma distncia de 5 cm de qualquer superfcie do
sistema. Os fabricantes devem informar o projeto e controle de qualidade, incluindo
medidas de segurana quanto radiao e acidentes, alm de informar qualquer defeito no
produto (i.e., que represente risco de radiao a qualquer pessoa). Os efeitos biolgicos j
esto detalhados em mais de 1000 publicaes, sendo que os principais se referem aos
efeitos trmicos, muitas vezes provocando superaquecimento do tecido exposto.
Comparando-se com a luz do sol, que provoca aquecimentos e fenmenos de superfcie, a
energia das microondas penetra na pele nos tecidos subcutneos, elevando as
temperaturas do tecido e do sangue. Diferentes freqncias promovem diferente energia de
penetrao no tecido humano (Tabela 8.7).

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239

Tabela 8.5. Efeito do aquecimento por microondas na temperatura dos slidos [Kingston &
Haswell, 1997]
Substncia

T(C)

Tempo (min)

Al

577

1283

Co2O3

1290

CuCl

619

13

FeCl3

41

MnCl2

53

1,75

NaCl

83

Ni

384

NiO

1305

6,25

SbCl3

224

1,75

SnCl2

476

SnCl4

49

ZnCl2

609

CaO

83

30

CeO2

99

30

CuO

701

0,5

Fe2O3

88

30

Fe3O4

510

La2O3

107

30

MnO2

321

30

PbO2

182

Pb3O4

122

30

SnO

102

30

TiO2

122

30

V2O5

701

WO3

532

0,5

Nota: Todos os experimentos iniciaram temperatura ambiente. Amostras (25 g) aquecidas


em um forno de 1 kW (2.450 MHz) com um frasco contendo 1000 ml de gua.

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240

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Tabela 8.6. Capacidade calorfica de cidos minerais [adaptado de Kingston & Jassie, 1988]
Soluo cida

-1

Concentrao (mol l )

Capacidade calorfica
(cal g-1 C-1)

Actico (100 %)

17,4

0,4947

Clordrico (37,2 %)

12

0,5863

0,7168

0,9378

Fluordrico (49 %)

28,9

0,6960

Ntrico (70,4 %)

15,9

0,5728

0,7162

0,9497

Fosfrico (85,5 %)

14,8

0,4470

Sulfrico (96,06 %)

18

0,3499

6,7

0,6142

1,1

0,9142

0,9339

55

0,9997

gua

Tabela 8.7. Profundidade de penetrao das microondas em funo da freqncia.


[Kingston & Jassie, 1997].
Frequncia (GHz)

Profundidade de

Energia (
J/cm)

penetrao (cm)
0,915

3,03

17,3

2,450

2,05

20,6

3,0

1,97

20,9

30,0

0,097

143,3

100,0

0,032

376,4

300,0

0,023

579,1

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241

8.3. INSTRUMENTAO

8.3.1. Sistema com cavidade (forno de microondas)


Um forno de microondas com cavidade para propsitos analticos (Figura 8.8)
consta fundamentalmente de seis componentes:
i.
ii.
iii.
iv.
v.
vi.

Magnetron
Guia para as microondas
Distribuidor de ondas (na realidade um refletor rotatrio)
Cavidade
Frasco de reao
Bandeja rotatria ou rotor (usado para fixar os frascos de reao)

Figura 8.8. Desenho esquemtico de um forno de microondas, mostrando bombas de


digesto fixadas em um rotor, sob ao de microondas homogeneamente espalhadas por
um refletor rotatrio
A radiao produzida pelo magnetron transportada atravs do guia de
ondas para a cavidade, onde distribuda pelo distribuidor e circulador em direes
especficas, que permitem uma maior irradiao da zona prxima ao centro da cavidade. A
bandeja rotatria permite expor a amostra a uma radiao homognea e reprodutvel,
dependendo do projeto do forno. Existem fornos que operam com 2 magnetrons e que

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242

Decomposies assistidas por radiao microondas

garantem uma maior e mais homognea transferncia de energia para cada frasco de
reao. O nmero de frascos de digesto varia de 1 a 48, dependendo do fabricante. Existe
um fabricante que oferece um modelo de forno de microondas que emprega sistema de
digesto com refrigerao dos vasos de reao (Figura 8.12), permitindo que os frascos
sejam abertos decorridos cerca de 10 min aps a digesto ter se completado. Existem
frascos de digesto que tambm permitem acomodar minifrascos de digesto em seu
interior.
De todos os componentes mencionados, o magnetron mereceu uma ateno
especial no passado, porque ele considerado o corao do forno de microondas. Hoje
considerado um componente simples e de custo relativamente baixo. Consiste da
combinao de um anodo, um catodo e uma srie de cavidades de ressonncia, todos
arrumados em uma geometria cilndrica. Rente ao catodo deste tubo existe um campo
magntico. Quando se aplica uma alta voltagem atravs dos eletrodos, geram-se eltrons
que entram em ressonncia sob a influncia do campo magntico. Isso produz oscilao do
magnetron. Nestas condies, os eltrons cedem energia com frequncia varivel ou fixa, a
qual irradiada. Todos os instrumentos para decomposio de amostras possuem
magnetron que gera microondas com uma frequncia fixa de 2450 MHz. Em alguns
instrumentos,

potncia

da

energia

eltrica

que

magnetron

recebe

de

aproximadamente 1200 W, sendo que aproximadamente metade (600-700 W) convertida


em energia eletromagntica. Atualmente existem equipamentos comerciais que fornecem
at 1600 W na forma de microondas.
A potncia de radiao emitida pelo magnetron controlada mediante a fixao de
ciclos de operao de forma descontnua. Esses ciclos de trabalho definem a relao de
tempo na qual o magnetron permanece ativo ou inativo. A eficincia na produo de
microondas de um magnetron afetada principalmente pelo superaquecimento do mesmo.
Dentre as principais causas do superaquecimento esto as ondas que retornam por reflexo
ao seu ponto de origem. Em equipamentos modernos esse inconveniente no se constitui
em uma limitao sria.

8.3.2. Recipientes para digesto


A primeira condio a cumprir que os materiais dos frascos de digesto sejam
transparentes s microondas, de tal forma que as microondas sejam absorvidas pela
soluo do meio reacional. Os materiais mais empregados para fabricao dos frascos ou
copos de reao so o PTFE (Teflon marca registrada da DuPont), PFA
(perfluoroalcoxi) e TFM (marca registrada da Hoechst para PTFE quimicamente

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Decomposies assistidas por radiao microondas

243

modificado). Os materiais preferidos so o PFA e TFM por apresentarem melhor


desempenho que o Teflon. A deformao dos frascos de digesto de Teflon
o

considerada desprezvel quando so utilizadas temperaturas menores que 150 C. Para


temperaturas maiores a deformao aumenta com a temperatura, tornando-se mais difcil
manter os frascos vedados. Alm disso a vida til dos frascos tambm diminui. Um outro
aspecto que concorreu para o desenvolvimento do PFA e do TFM que o Teflon um
material poroso mesmo quando de tima qualidade. Dependendo da fabricao a
porosidade pode ser mnima, mas espera-se migrao de vapores atravs do mesmo. Alm
disso, tambm existem riscos de perdas por adsoro e contaminao. O ponto de fuso do
PFA situa-se entre 300 e 310 C. A estabilidade trmica do PFA limita o seu uso para
condies em que a temperatura no ultrapasse 260 C. O ponto de fuso do TFM situa-se
o

entre 320 e 340 C e a mxima temperatura operacional de 300 C. O TFM


recomendado pelos fabricantes dos fornos mais modernos, quando se pretende trabalhar
com temperaturas mais altas, mas no recomendam digestes muito longas nesta
temperatura (<20 min). Mesmo assim, convm salientar que, como a vida til do
revestimento interno ("liner") diminui muito com temperaturas muito elevadas, recomenda-se
no ultrapassar 260 oC. Existem vrios tipos de frascos de digesto para fornos de
microondas. Os frascos de digesto para fins analticos possuem volumes internos que
variam de 25 a 120 ml, podendo ser equipados com sensores de presso e temperatura
individuais ou coletivos, e podem ser de vrios tipos:

com membrana de ruptura (Figura 8.9)

pisto (Figura 8.10),

pisto com refrigerao (Figuras 8.11 e 8.12), e

com vlvula de alvio (Figuras 8.13 e 8.14).


Uma maneira geral de classificar os frascos de digesto se baseia na possibilidade

ou no de continuar a digesto aps um aumento sbito de presso. Um frasco com


membrana de ruptura seria denominado do tipo "sem fechamento" (non-reclosing), pois
permanece aberto aps a ruptura da membrana. Analogamente, um frasco com abertura
momentnea da vlvula seria do tipo com fechamento (reclosing type). Esses modelos de
frascos representam trs geraes de sucessivos desenvolvimentos na rea. Os frascos e
demais dispositivos de segurana so as principais diferenas entre um forno de
microondas para laboratrio e um outro para uso domstico.

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244

Decomposies assistidas por radiao microondas

Figura 8.9. Frasco de digesto com membrana de ruptura

Figura 8.10. Frasco de digesto tipo pisto

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Decomposies assistidas por radiao microondas

245

Ar de
refrigerao
Refletor
Sensor tico
Tampa de rosquear
Mola
Tampa com
disco de Segurana
Vaso de reao
Corpo externo
Camisa de proteo
Dutos para
passagem do ar

Figura 8.11. Corte transversal de um frasco de digesto com vaso de reao refrigerado a
ar modelo PMD (cortesia Anton Paar)

Figura 8.12. Corte transversal de rotor de forno de microndas com duas bombas de
digesto tipo pisto com refrigerao: 1=rotor; 2=vaso de reao; 3=copo externo de
proteo; 4=macho de PTFE; 5=pisto; 6=leo de silicone; 7=transdutor de presso; 8= ar
frio; 9=transmissor de infravermelho para dados de presso e temperatura (Multiwave,
cortesia Anton Paar)
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246

Decomposies assistidas por radiao microondas

Figura 8.13. Frasco de digesto com vlvula de alvio (adaptado de Pirola,1999)

(a)

(b)

Figura 8.14. Ilustrao da abertura da vlvula de alvio quando a presso interna for
superior a 60 bar: (a) fechada, (b) aberta [adaptado de Pirola, 1999]
O uso de recipientes fechados para digestes com microondas tem sido
inevitavelmente recomendado nos casos em que preciso aproveitar o efeito de altas
temperaturas para dissolver amostras de difcil decomposio, nas quais se pretende
determinar componentes volteis. Em geral, as vantagens preconizadas para digestes
assistidas por radiao das microondas em frascos de digesto fechados so semelhantes
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Decomposies assistidas por radiao microondas

247

quelas j mencionadas para os sistemas fechados de alta presso com aquecimento


convencional (bombas de digesto), quando comparados com sistemas abertos:
a) Maior eficincia na dissoluo em altas temperaturas
b) Risco reduzido de perdas de analitos por volatilizao
c) Risco reduzido de contaminaes devidas ao ambiente de trabalho.
d) Menor consumo de reagentes de alta pureza
Entre as desvantagens inerentes aos sistemas fechados que empregam os
materiais mencionados que, geralmente, no se pode digerir massas de amostra muito
elevadas, porque a presso interna que se desenvolve dentro da bomba depende da
presso de vapor do cido empregado e da presso resultante causada pelos produtos
gasosos gerados nas reaes de decomposio. No caso de materiais orgnicos, sabe-se
que o CO2 o principal produto gasoso gerado, com presso parcial proporcional massa
de carbono na amostra. Por exemplo, se as digestes forem feitas com 10 ml HNO3 em
vaso de 100 ml e realizadas a 250 C, recomenda-se no mximo 250 mg de fgado bovino.
Se a temperatura desejada para a digesto for de 200C pode-se digerir at 1 g da mesma
amostra no mesmo frasco. Em ambos os casos, a presso interna no frasco ser de 60 bar.
Deve-se lembrar que altssimas presses podero ser observadas, utilizando-se somente
um cido ou somente gua dentro do frasco fechado, porque as presses de vapor do cido
ou da gua aumentam consideravelmente com a temperatura. Por exemplo, a presso
desenvolvida por 10 ml de HCl 36% v/v em frasco fechado de 23 ml a 223 oC de
aproximadamente 97 bar ou 1430 psi (psi = libras por polegada ao quadrado). Temperaturas
mais altas podero ser empregadas, diluindo-se ou diminuindo-se a quantidade de cido.
Outra limitao seria a necessidade de se digerir amostras com teor de carbono
semelhante, porque muitos equipamentos permitem o monitoramento indireto das digestes
de todos os frascos, utilizando-se apenas um dos frascos de digesto com sensores de
presso e de temperatura. Nesse caso, a opo seria colocar a amostra com o maior teor
de carbono na bomba contendo os sensores. Existe equipamento de um fabricante que
possui um nico transdutor de presso para todos os frascos (Figura 8.12), dispensando o
controle quanto semelhana entre as amostras, e outros com controle independente.
Historicamente, uma das maiores preocupaes quanto aos recipientes fechados
residia na qualidade dos materiais utilizados na fabricao dos frascos de digesto, de tal
forma que pudessem suportar altas presses. Para se ter uma idia, os primeiros frascos
comerciais eram feitos inteiramente de Teflon suportando no mximo 7 bar de presso, e
alguns fabricantes consideravam 20 bar como alta presso. Gradativamente, os frascos de
digesto foram redesenhados, e atualmente todos possuem um corpo externo feito com
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248

Decomposies assistidas por radiao microondas

material tambm transparente s microondas e de altssima resistncia, podendo suportar


presses maiores que 150 bar. Do ponto de vista operacional, utilizam-se presses
menores. Os frascos de reao de PFA ou TFM possuem paredes relativamente finas e se
ajustam no interior deste corpo externo. Os fornos de microondas que empregam frascos de
digesto com vlvula de alvio abrem momentaneamente a vlvula, quando a presso
interna exceder 60 ou 100 bar, dependendo do fabricante. Os fornos com bomba tipo pisto
com ou sem refrigerao limitam-se a presses operacionais de 72 a 82 bar.
Outrossim, deve-se lembrar que, como existem inmeras aplicaes onde so
comuns situaes nas quais as digestes geram presses de trabalho menores que 20 bar,
h fabricantes que oferecem mais de um tipo de frasco de digesto, em geral denominados
frascos para mdia presso e alta presso.
Para fins analticos, a escolha do melhor forno de microondas deve levar em
considerao os frascos de digesto oferecidos (desenho, capacidade, durabilidade e
custo), os sensores de temperatura e de presso (custo, durabilidade e tempo de resposta),
os programas para o controle e aquisio de dados, e a opo para secagem dos digeridos,
alm dos dispositivos de segurana.

8.3.3. Sistemas microondas com radiao focalizada


Sistemas de digesto com frascos pressurizados so usados com muito sucesso
utilizando-se somente cido ntrico, principalmente para as amostras orgnicas e inclusive
amostras inorgnicas, com a possibilidade de se usar at 50 frascos de digesto
simultaneamente. No obstante, uma das maiores desvantagens dos sistemas fechados
a limitao associada ao tamanho das amostras. Uma outra desvantagem dos frascos de
digesto, a gerao de H2 quando ligas metlicas e metais so dissolvidos com cidos.
Nesse caso, alm de provocar um aumento na presso interna do frasco, o hidrognio um
excelente combustvel, aumentando ainda mais o risco de exploso. Alm disso,existe a
necessidade de resfriamento e despressurizao dos frascos para adio de reagentes
durante o ciclo de aquecimento.
Sistemas de digesto de amostras que empregam as chamadas microondas com
radiao focalizada (Figura 8.15), possibilitam um grande nmero de aplicaes
interessantes. As digestes so feitas em frascos adequadamente fechados presso
atmosfrica. Esses frascos tm a forma de um tubo com 30 a 40 cm de altura e 2 a 4 cm de
dimetro, e sero denominados "frascos de digesto" neste texto. Os frascos so
fabricados em quartzo, vidro borossilicato ou PTFE, com capacidade para 50, 100 ou 250
ml. Normalmente, esses frascos recebem a denominao de "abertos". Na realidade, este
tipo de frasco, utilizado nos sistemas microondas com radiao focalizada, possui um
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Decomposies assistidas por radiao microondas

249

dispositivo que adaptado na sua extremidade superior, que construdo de forma a


restringir contaminao pelo ar externo e possui entrada para adio contnua ou
intermitente de reagentes, proporcionando o refluxo do(s) vapor(es) do(s) solvente e do(s)
cido(s), de modo a aproveitar ao mximo a capacidade de digesto e minimizar as perdas
de reagentes. As operaes so realizadas com segurana nos equipamentos modernos,
tomadas as precaues recomendadas pelos fabricantes.
No primeiro equipamento usando microondas com radiao focalizada, projetado
em 1986, um nico frasco de digesto era colocado diretamente no guia de ondas, logo
aps o magnetron, de tal forma que somente a regio do frasco onde a amostra era
colocada ficasse exposta ao feixe de radiao. Como o restante do frasco permanece mais
frio, cria-se uma regio para condensao e refluxo. Segundo diversos autores, essa seria a
razo de no ocorrer perdas por volatilizao, apesar deste aspecto ainda ser controverso
na literatura. No entanto, foram relatados estudos que demonstram a recuperao total de
Hg, [Tseng et al., 1998], As [Vilano & Rubio, 2001] e Pb, Cd, Cu e Zn [Garcia-Rey et al.,
2003]. Nos equipamentos modernos um condensador situado na poro superior do
frasco, como forma de forar a condensao e evitar a perda de elementos potencialmente
volteis (Figura 8.15). Oferecem a possibilidade de se trabalhar simultaneamente com at 6
amostras diferentes com um nico guia de ondas; simultaneamente com 4 frascos de
digesto, utilizando 1 magnetron independente por tubo; e seqencialmente, com frascos
posicionados em um carrossel contendo as amostras de diferentes composies qumicas,
passando um tubo de cada vez pelo guia de ondas. Como os tubos so abertos, com
entrada para diferentes reagentes, possvel fazer um programa de digesto diferente e
totalmente independente para cada amostra.
A potncia do forno microondas com radiao focalizada varia de 200 a 300 W
para cada frasco de digesto. Cumpre lembrar que as microondas esto confinadas em um
guia com dimenses reduzidas (cerca de 109 x 54 mm ou 86 x 43 mm) de acordo com a
IEC (International Electrotechnical Commission). Assim, nesse caso, potncias de 200 W
direcionam maior densidade de energia s amostras, gerando maior eficincia de
aquecimento, em comparao aos sistemas de digesto por cavidade, com dimenses
aproximadas de 30 x 30 x 30 (em cm) [Nbrega et al., 2001]. De acordo com o fabricante,
aumento de eficincia de at 10 vezes na interao amostra radiao microondas pode ser
obtido com o uso de sistema com radiao focalizada quando comparado com o sistema
por cavidade.
Digestes realizadas nos fornos com radiao focalizada podem ser feitas com o
emprego de H2SO4, cujo uso limitado nos frascos de digesto fechados, face ao elevado
ponto de ebulio deste cido.

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250

Decomposies assistidas por radiao microondas

Figura 8.15. Sistema de digesto microondas com radiao focalizada.


Os sistemas de decomposio assistidos por microondas com radiao focalizada
operam em presso atmosfrica, no apresentando problemas associados com o aumento
de presso, como nos sistemas fechados. Neste sistema, alm da possibilidade de
utilizao de at 10 g de amostra, a adio de reagentes em qualquer estgio do processo
de decomposio feita sem dificuldades. Essa adio de reagentes em qualquer momento
do procedimento pode ser benfica em relao eficincia da digesto, constituindo-se em
uma grande vantagem frente aos sistemas fechados, onde a adio de reagentes no pode
ser realizada facilmente nos equipamentos comerciais disponveis, havendo a necessidade
de resfriamento antes da abertura dos recipientes. Outra alternativa deste tipo de sistema
a possibilidade de se vaporar uma mistura reagente at a secura rapidamente e
eficientemente, particularmente interessante para a remoo de HF aps a decomposio
de amostras geolgicas. Medidas de temperatura so possveis, bem como o controle
desta, podendo-se estabelecer programas pr-definidos aps a calibrao do equipamento.
Um aspecto interessante dos sistemas focalizados refere-se capacidade de
aplicar mtodos variados para diferentes amostras simultaneamente, devido possibilidade
de operar cada frasco independentemente. Alm disso, a incidncia da radiao microondas
em baixas potncias possibilita a acelerao da lixiviao de compostos organometlicos,
sem afetar a ligao metal-carbono ou ainda, a extrao de compostos orgnicos [Nbrega
et al., 2001].

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Decomposies assistidas por radiao microondas

251

A
B
magnetron

amostra

amostra

guia de ondas
sensor infravermelho

Sensor infravermelho

Figura 8.16. Sistema de decomposio por via mida aberto com aquecimento por
microondas com radiao focalizada (A); e frasco normalmente utilizado com condensador
(B).

A principal dificuldade da decomposio empregando microondas com radiao


focalizada a distribuio uniforme da radiao entre todas as cavidades quando estas so
operadas simultaneamente e a elevada concentrao cida das amostras aps a
decomposio [Costa et al, 2001]. O primeiro aspecto no to crtico, pois o controle da
liberao da radiao de microondas para cada cavidade est baseada na temperatura do
frasco de reao, que controlada com sensor de infra-vermelho. Por outro lado, a
concentrao cida alta, devido utilizao de grandes volumes de cido sulfrico para
aumentar a temperatura da mistura reagente, como comentado anteriormente.
Esse problema pode ser contornado por mudanas realizadas durante a operao
do sistema. Visando aumentar a aplicabilidade, diferentes estratgias foram propostas, tais
como a digesto cida em fase vapor [Arajo et al. 2000; Trevizan et al., 2003; Arajo et al.,
2003], o emprego de digesto em linha, com o uso de sistemas em fluxo [Filli et al., 2003] e
a adio de amostras ao cido pr aquecido [Nbrega et al., 2002a; Nbrega et al., 2002b;
Santos et al., 2005]. Essas estratgias sero discutidas em mais detalhes no prximo item
deste captulo.

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252

Decomposies assistidas por radiao microondas

A decomposio em sistema aberto, assistida por microondas com radiao


focalizada foi tambm proposta para a extrao de alguns elementos e compostos
organometlicos para posterior especiao de Se em urina [Gonzalez et al., 1998], Sn em
sedimentos [Chao & Jiang, 1998], Hg em peixes [Gerbersmann et al., 1997] e As em
cogumelos comestveis [Larsen et al., 1997]. Outras aplicaes encontradas na literatura
referem-se ao emprego na decomposio de amostras orgnicas e inorgnicas, para
posterior determinao de Hg em cosmticos [Gmiz-Gracia & Luque de Castro, 1999a], Se
em suplementos nutricionais e xampus [Gmiz-Gracia & Luque de Castro, 1999b] e Cd, Co,
Cr, Cu, Fe, Mg, Mn, Ni, Pb e Zn em cinzas de incinerao [Fournier et al., 1997]. Alm
disso, equipamentos como o Discover System (CEM Corporation, USA), originalmente
desenvolvidos para snteses orgnicas, podem tambm ser empregados para o preparo de
amostras. O sistema de operao deste equipamento tambm baseado na radiao
focalizada diretamente nas amostras, em um sistema circular inserido em uma cavidade
projetado de tal maneira que direciona a energia microondas a uma rea definida. As
condies de reao so reprodutveis e controladas e presses da ordem de 25 atm
podem ser obtidas. Uma desvantagem deste sistema que o equipamento operado com
apenas um frasco de amostra por vez.

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Decomposies assistidas por radiao microondas

253

8.4. APLICAES E TENDNCIAS


O tratamento de amostras para a dissoluo mediante o aquecimento com radiao
microondas tem demonstrado ser um processo mais rpido, eficiente e seguro em
comparao ao aquecimento convencional. Alm disso, o uso de recipientes fechados
durante o tratamento com microondas minimiza as possibilidades de contaminao das
amostras e diminui o nmero de reagentes necessrios para converter a amostra em uma
soluo, tornando-a adequada para a determinao dos analitos de interesse.
Uma grande variedade de amostras, desde fluidos biolgicos at materiais para
catalisadores, passando por amostras de interesse geolgico, metalrgico, guas residuais,
efluentes industriais, alimentos e polmeros, j foram testadas em sistemas assistidos por
microondas. Coletnea de mtodos oferecida

pela maioria dos fabricantes desses

sistemas. No obstante, convm lembrar que os conhecimentos sobre os fundamentos


clssicos dos mtodos de digesto so decisivos para o sucesso das reaes qumicas
assistidas por microondas. Boa parte destes fundamentos so apresentados nos tens
iniciais desta monografia, mas recomenda-se visitar o SamplePrep Web da Duquesne
University sob a direo do Professor "Skip" Kingston:
http://www.sampleprep.duq.edu/sampleprep/
A existncia no mercado de um grande nmero de fabricantes de fornos de
microondas projetados especificamente para uso em laboratrio, uma indicao do
sucesso deste tipo de aplicao. Os equipamentos foram e vm sendo constantemente
aperfeioados, permitindo que se realizem as digestes com eficincia, rapidez e
segurana. Em futuro prximo, sistemas de anlise em fluxo contnuo devero estar
disponveis comercialmente. Alm dos equipamentos com 6 a 12 frascos, dependendo do
fabricante, que trabalham sob altas presses, tambm existem alternativas disponveis que
trabalham simultaneamente com 24, 42, 48 e at 50 frascos, normalmente trabalhando a
presso mdia e que apresentam diferentes configuraes e alternativas de segurana.
Enquanto que os rotores que trabalham com 6 frascos so resistentes a presses de at
100 atm, os rotores que operam com nmeros intermedirios, tais como 12, 24, 42 operam
com presses tipicamente por volta de 30 atm. Os rotores que operam com at 50 amostras
o fazem as presses atmosfricas, sendo indicados para laboratrios que trabalham com
amostras facilmente digeridas. Outra opo so mini-frascos comercializados em Teflon
(6 ml) e quartzo (3 ml) e que so inseridos nos frascos de digesto de 100 ml, aumentando
o nmero de amostras simultaneamente processadas. Esses mini-frascos operam em
temperaturas de at 240 C, podendo atingir 30 atm de presso. Alm da vantagem do
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maior nmero de amostras, esses frascos so ideais quando se trata de amostras


pequenas (pequena massa ou volume), pois perdas so evitadas, alm de se utilizar
reduzido volume de reagentes, sendo que o fator de diluio tambm otimizado.
Esses novos acessrios apresentam-se atraentes para serem empregados em
laboratrios de rotina, onde um grande nmero de amostras processado diariamente,
normalmente com o emprego de blocos digestores com aquecimento convencional.

8.4.1. Uso combinado de radiaes microondas e ultravioleta


A decomposio em sistema fechado assistida por microondas em altas
temperaturas empregando radiao ultravioleta foi proposta por Florian & Knapp [ 2001]
(Figura 8.17). Tal sistema foi desenvolvido visando uma completa decomposio, com a
gerao de menor teor de carbono orgnico dissolvido. Esse carbono dissolvido
normalmente encontrado aps a grande maioria dos procedimentos de decomposio,
que posteriormente pode agir como interferente na determinao de elementos por ICP-MS
[Krachler et al., 1996; Begerov et al., 1996] e FAAS [Golimowski & Golimowski , 1996]. Na
proposta os autores introduziram uma lmpada de descarga sem eletrodos, que colocada
no interior do frasco de digesto e ativada pela irradiao de microondas. A lmpada
construda em quartzo, sendo preenchida com vapor de cdmio (linha de emisso
predominante em 228 nm) e apresentando uma antena na parte superior da lmpada feita
de molibdnio (Figura 8.17). Cerca de 75 mg de leite desnatado eram transferidos para um
frasco de decomposio de quartzo, seguidos de 7 ml de gua e 50 l HNO3 mais 50 l
HCl, ambos concentrados. Imediatamente antes de fechar o frasco, 1 ml de H2O2 era
adicionado. O sistema era ento irradiado com microondas por 30 min, sendo mantido na
presso de 72 bar durante a decomposio. Aps resfriamento do sistema, era feita a
aferio 10 ml com gua. Segundo os autores, o tempo de decomposio da amostra no
sistema comparado aos sistemas tradicionais de decomposio por radiao ultravioleta foi
reduzido por um fator de 5 vezes, enquanto que a concentrao inicial de carbono orgnico
dissolvida reduzida por um fator de 50 vezes. Boa concordncia foi encontrada na
determinao de Cd, Cu, Fe e Pb em material de referncia certificado de leite desnatado
(IRMM, CRM 151).

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Decomposies assistidas por radiao microondas

255

1
B
2
3

Figura 8.17. Sistema fechado de decomposio assistida por microondas em altas


temperaturas e radiao ultravioleta. 1- desenho esquemtico do sistema de decomposio
com lmpada UV; a- plug; b- disco de ruptura; c- tampa de vedao; d- tampa com rosca; eradiao de microondas; f- revestimento de PEEK; g- frasco de decomposio de quartzo;
h- lmpada de descarga sem eletrodos; i- radiao ultravioleta; j- base do copo; k- fluxo de
ar; 2- frasco de quartzo com a lmpada UV; 3- rotor e o sistema de decomposio [Florian &
Knapp, 2001].

8.4.2. Uso de radiao microondas em frascos fechados com sistema de


pressurizao externa
Sistema de decomposio fechado foi desenvolvido, empregando-se microondas
focalizadas para decompor amostras com maior eficincia [ Matusiewicz, 1994]. O sistema
capaz de suportar temperaturas e presses de at 300 C e 100 bar, respectivamente, o
que necessrio para a completa destruio de todos os tipos de materiais orgnicos,
utilizando-se apenas HNO3, conforme previamente enfatizado por Wrfels et al. [1989]. O
sistema apresenta algumas vantagens em relao decomposio assistida por
microondas, pois os frascos de PTFE normalmente empregados neste procedimento no
podem suportar tal temperatura. Levine et al. [1999] fizeram uma avaliao do desempenho
desse sistema na decomposio de amostras botnicas, biolgicas e geolgicas. O tempo

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necessrio de decomposio para amostras botnicas foi de cerca de 10 min, enquanto que
para amostras geolgicas e biolgicas foi de aproximadamente 15 min. Produtos orgnicos
de decomposio no-volteis, normalmente presentes nas solues decompostas por
procedimentos convencionais, esto ausentes ou significativamente reduzidos quando o
sistema empregado para decomposio.
A verso do sistema proposto por Matusiewicz [1999] permite atingir temperaturas e
presses de at 320C e 120 bar, alm de possibilitar a decomposio de at 6 amostras
simultaneamente (Figura 8.18).

Figura 8.18. Sistema de decomposio com HNO3 sob presso a 320C com aquecimento
por microondas focalizado (HPA-FM). A) 1- sistema de antena; 2- frasco de decomposio
de quartzo com tampa; 3- suporte; 4- cmara de alta presso; 5- entrada de gs; 6- sada
de gs; 7- anel de ajuste; 8- tampa de proteo; 9- disco de ruptura de metal; 10- cmara
de expanso; 11- tubo e disco de segurana. B) 1- frasco de digesto de quartzo; 2vedante de PTFE; 3- tampa de quartzo; 4- mola de tungstnio; 5- tampa de PTFE.[
Matusiewicz, 1994]
Em trabalho realizado em 1995, Lgre & Salin [1995] discutiram diversos
procedimentos para a decomposio de amostras. Os autores propuseram um sistema de
decomposio baseado no encapsulamento de amostras e decomposio em microondas
sob presso. A cpsula, feita de poliacrilamida, com 70 mg de peso e 2 ml de capacidade
contendo a amostra, era colocada em um tubo de PTFE-PFA em forma de "U" (9,5 mm d.i.),
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Decomposies assistidas por radiao microondas

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que suportava temperaturas de at 200 oC, com vlvulas para fechamento nas
extremidades. A remoo da amostra decomposta era feita com uma haste flexvel de PTFE
(a mesma empregada para a colocao da cpsula). O sistema facilmente mecanizvel.
Outra vantagem que o dimetro interno do tubo era relativamente grande, no
ocasionando problemas de seccionamento da amostra, pois as bolhas saem da soluo
com facilidade (at os gases so aquecidos).

8.4.3. Uso de mini-frascos


As condies timas para a decomposio de amostras em anlise de traos foram
estabelecidas, h mais de vinte anos, atravs de um extenso trabalho publicado por Tlg,
em 1972. Entre estas podem ser citadas: uma relao favorvel entre a quantidade de
amostra e a superfcie do recipiente, emprego de um mnimo excesso de reagentes que
possam ser facilmente purificados e trabalho em uma atmosfera limpa. Em trabalhos mais
recentes, estas assunes tem sido confirmadas e, atualmente, os mtodos analticos
requerem: (i) o emprego de pequenas quantidades de reagentes (de alto grau de pureza);
(ii) que a relao entre a superfcie do frasco e a da amostra seja a menor possvel; (iii) que
materiais inertes sejam empregados como recipientes; (iv) a facilidade de processamento
de grande nmero de amostras; e (v) a miniaturizao. Normalmente, tcnicas morosas no
so apropriadas para o manuseio de um nmero elevado de amostras. Em adio, o uso de
sistemas fechados preferido e, em alguns casos, a matriz orgnica deve ser
completamente decomposta.
Se todas as etapas do procedimento analtico, desde a tomada da amostra,
pudessem ser feitas sempre no mesmo recipiente, os riscos de perdas e de contaminao
seriam reduzidos ao mnimo. A coleta, a pesagem e a preservao da amostra poderiam ser
feitas in loco e, do transporte ao laboratrio at a medida final, os procedimentos poderiam
ser feitos com facilidade, simplicidade e segurana. De acordo com estes conceitos,
Sperling [1984] desenvolveu um procedimento para a decomposio de amostras
ambientais e posterior determinao de Cd por espectrometria de absoro atmica com
forno de grafite (GFAAS). A decomposio era feita em frascos fechados de polipropileno
(1,5 e 4 ml de capacidade), aquecidos a 70 C por uma noite. O procedimento consistia na
decomposio da amostra com mistura cida (H2SO4 + HNO3 : 1 + 4 v/v) e aferio de
volume no prprio frasco usado para a decomposio; a proporo de cido era de 50 l
para cada 5 mg de amostra. Segundo o autor, com esse procedimento era possvel o
processamento de um grande nmero de amostras de cada vez e elevada sensibilidade, j
que a amostra no era excessivamente diluda durante o procedimento. Campos [1988]

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258

Decomposies assistidas por radiao microondas

adaptou este procedimento para a decomposio de amostras de vegetais e determinao


de Cd, Cu e Pb por GFAAS: at 5 mg de amostra + 50 l de mistura sulfontrica (H2SO4 +
o

HNO3 : 1 : 3 v/v) e aquecimento em estufa, 80 C, por 12 horas. O autor observou boa


concordncia entre os valores encontrados e valores para material de referncia certificado,
Spinach leaves: 91,7% (Cd), 95,1% (Pb) e 108% (Cu), atribuindo a variao pequena
massa de amostra utilizada.
Com base nestes trabalhos, Flores [1997] props a decomposio de amostras de
erva-cidreira e fgado bovino empregando recipientes fechados de polipropileno para as
etapas de decomposio, diluio e, mesmo, de determinao de Cr e Cu por GF AAS e Se
por HG AAS. A decomposio foi realizada em meio 80 l de cido sulfrico e 150 l de
cido ntrico concentrados, com aquecimento em estufa ou em forno de microondas
domstico, com prvia calibrao de potncia. A concordncia entre os resultados
encontrados pelo autor com os referidos para amostras certificadas foi de 86 a 98% para
todos os elementos empregando-se a decomposio em estufa. Com aquecimento com
microondas, a concordncia foi de 95 a 98 % para Cr e Cu. Para Se, com aquecimento com
microondas, a concordncia foi de 57% para fgado bovino e 82% para farinha de arroz.
Neste caso, o princpio do frasco nico foi empregado em quase sua totalidade.
Posteriormente, Flores et al. [2001] desenvolveram um procedimento para a
determinao de As em amostras de cabelo, tambm empregando uma estufa convencional
e um forno de microondas domstico para o aquecimento. A determinao de As em
amostras biolgicas por espectrofotometria de absoro atmica com gerao de hidretos
(HGAAS) sujeita a problemas devido dificuldade de decomposio de espcies
orgnicas contendo As, que no so detectadas pelos sistemas convencionais. Para isto,
agentes oxidantes fortes, aliados a sistemas pressurizados, precisam ser empregados.
Entretanto, no sistema proposto, apesar das condies relativamente brandas e da
decomposio no ser completa (25 a 40% de carbono residual), no houve interferncias
na recuperao do analito.
O emprego de frascos de polipropileno fechados adequado para a decomposio
por via mida de amostras biolgicas (Figura 8.19). O procedimento mostra-se apropriado
para a decomposio de um grande nmero de amostras, de maneira simples e com menor
consumo de reagentes (da ordem de l), mnima diluio, alm de ser comparvel a outros
procedimentos descritos na literatura. Alm disso, a facilidade de manuseio e pelo fato de
serem descartveis, torna seu emprego atraente para anlises de rotina. As possibilidades
de contaminao so minimizadas, pois aps a adio dos reagentes o frasco s aberto
para a etapa de diluio e de determinao.

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Decomposies assistidas por radiao microondas

259

4,7 cm

Figura 8.19. Minifrasco de polipropileno empregado para decomposio de amostras


biolgicas [Flores et al., 2001].

8.4.4. Decomposio de amostras empregando cidos diludos


Na decomposio de amostras empregando radiao microondas, o tipo de cido,
assim como sua quantidade so importantes parmetros a serem considerados, seja por
razes de segurana (por exemplo, uso de cido sulfrico em frascos polimricos em
sistemas fechados, devido a seu alto ponto de ebulio, ou cido perclrico, que apresenta
perigo de exploso quando os vapores do cido reagem com vapores orgnicos), ou
mesmo de eficincia de digesto. cido ntrico o mais utilizado, sendo normalmente
adicionado na forma concentrada, sendo indicado para a decomposio de amostras
orgnicas, dependendo dos teores da matriz da amostra, entre 0,4 a 2,0 ml por 200 mg de
amostra [Kingston & Haswall, 1997].
A possibilidade de se diminuir a quantidade de reagentes adicionados durante a
reao atrativa por diversos fatores, entre eles a segurana, a gerao de resduos, os
custos e a reduo dos valores do branco. Alm disso, a gerao de solues com menor
acidez interessante quando se trata de determinao empregando sistemas de
nebulizao da amostra. Solues cidas diludas tambm previnem a ocorrncia de danos
aos equipamentos. A adio de molculas de gua ao sistema microondas interessante,
em funo da alta capacidade calorfica da gua, o que facilita o aquecimento. Alm disso,
pode prevenir a formao de sais insolveis que poderiam ser formados com o emprego de
HNO3 concentrado e elevaes bruscas de presso e temperatura em sistemas com
cavidade, agindo como um amortecedor.

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260

Decomposies assistidas por radiao microondas

Apesar de serem inicialmente propostos para extraes de elementos inorgnicos,


os cidos diludos so tambm empregados para digestes por via mida ou via seca. Na
literatura podem ser encontrados trabalhos que utilizam os cidos ntrico e clordrico, sendo
que o HNO3 diludo o mais freqentemente utilizado [Wietska et al., 1996; Chow et al.,
1995; Zhou et al., 1996]. Alm do cido ntrico, perxido de hidrognio, H2O2 30%, m/v
normalmente utilizado como agente oxidante auxiliar durante a decomposio assistida por
radiao microondas [Kingston & Haswall, 1997], sendo que a combinao de H2O2 e HNO3
-1

diludo tambm foi avaliada, e concentraes to diludas quanto 2 mol l

de HNO3

apresentou-se eficiente para a decomposio de amostras de plantas. Resduos orgnicos


resultantes dessas decomposies, analisados por espectroscopia de ressonncia
magntica nuclear (RMN), confirmaram que em funo das altas temperaturas obtidas nos
sistemas fechados, um ambiente oxidante obtido, mesmo com solues de cido ntrico
diludo. Quando comparados, o espectro aps digesto com HNO3 2 mol l-1 mais simples
-1

que o obtido com HNO314 mol l , indicando que o emprego de cidos concentrados resulta
na ocorrncia de reaes de oxidao mais aleatrias, o que provavelmente seja a causa
para a formao de produtos de decomposio mais complexos. [Arajo et al., 2002].
A possibilidade de reduo dos volumes de reagentes atrativa devido
possibilidade de minimizao da quantidade de resduos gerados, reduo nos custos,
obteno de menores valores de branco e digeridos mais apropriados para introduo por
nebulizadores em equipamentos de anlise. Est claro que o aumento de presso dentro do
frasco de reao promove a elevao do ponto de ebulio da mistura de digesto cida e a
elevao de seu potencial oxidante. Conseqentemente, as reaes de oxidao so
favorecidas e mais rpidas nessas condies. No entanto, tambm necessrio que os
processos qumicos envolvidos sejam considerados quando se considera uma explicao
sobre a eficincia das decomposies quando cidos diludos so empregados. Durante a
oxidao dos compostos orgnicos da amostra pela ao do HNO3 ocorre a formao de
NO gasoso. O NO removido do meio reacional aquecido e reage com o O2 presente na
fase gasosa do frasco de reao. A seguir, o NO2 gerado e reabsorvido na soluo,
resultando na formao de NO3 e NO, sendo que o ciclo de reao se repete, at que no

haja a presena de O2 na fase gasosa do sistema [Nekrsov, 1981, Lee, 1996].

2 NO(g) + O2 2 NO2(g)
2 NO2(g) + H2O(l) HNO3 + HNO2
HNO2

H2O + NO2 + NO

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Decomposies assistidas por radiao microondas

261

8.4.5. Combusto iniciada por microondas em sistema fechado para a


decomposio de amostras biolgicas
O processo de combusto origina-se da interao de fenmenos fsicos e
qumicos. Dentre os fenmenos qumicos, esto a ocorrncia de reaes exotrmicas, as
ondas de detonao e a emisso de luz. J os fenmenos fsicos envolvem, principalmente,
o transporte de matria e energia, como a conduo de calor e a difuso das espcies
qumicas. Normalmente esto envolvidos dois componentes principais, o combustvel e o
oxidante. Um sistema simples de combusto pode ser aquele que ocorre com materiais prmisturados em forma gasosa, sendo aquecido lentamente em um sistema fechado. Se A
temperatura fornecida no ultrapassar um determinado valor, o calor produzido pela reao
ser dissipado atravs das paredes do recipiente [Barnard & Bradley, 1985]. Entretanto,
quando este valor ultrapassado, dependendo das propriedades fsicas dos reagentes e do
recipiente, a taxa de liberao de energia oriunda da reao pode exercer a taxa de perda
atravs das paredes do recipiente. Se isso acontecer, a temperatura ir aumentar,
consequentemente, aumentando a velocidade da reao e a taxa de liberao de energia
da reao. Sendo assim, a reao ser acelerada indefinidamente (de acordo com o
sumprimento adequado de reagentes), levando a uma exploso [Mesko, 2004].
Os procedimentos de combusto, normalmente, envolvem a ao direta do
oxignio como oxidante da matria orgnica, diferentemente dos procedimentos por via
mida, que utilizam cidos inorgnicos. Isso pode ser visto como uma vantagem,
principalmente no caso do oxignio, que apresenta mnimos teores de elementos trao. A
combusto para o preparo de amostras pode ser feita em sistemas abertos [Hoening et al.,
1998] ou fechados [Souza et al., 2001], que utilizam altas temperaturas, mas tambm pode
ser realizada a baixas temperaturas [Anderson, 1987].
Recentemente foi proposto procedimento de digesto de amostras orgnicas
baseado na combusto da amostra cuja ignio iniciada por radiao microondas [Flores
et al., 2004; Mesko, 2004]. O sistema foi avaliado para a decomposio de fgado bovino e
leite em p, apresentando eficincia para a recuperao de analitos e resultando baixos
teores de carbono residual, rapidez e baixo consumo de reagentes. Alm disso, o suporte
da amostra pode ser inserido em frascos comerciais de quartzo (Figura 8.20) e a seguir
adaptado a equipamentos comerciais, com poucas modificaes (Figura 8.21).

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262

Decomposies assistidas por radiao microondas

Entrada/escape
de gases
Vlvula para
escape de gases
20 mm
Suporte de quartzo
para a amostra

13 mm
13 mm

Soluo
absorvedora

50 mm

Figura 8.20. Sistema de decomposio por combusto iniciada por microondas e detalhe do
suporte de quartzo [Flores et al., 2004].
Mesko [2004] avaliou diferentes modelos de suporte de quartzo para a amostra,
optando por um modelo suspenso na parte superior do frasco de decomposio,
possibilitando uma etapa de refluxo e a proteo da tampa do frasco da chama gerada
durante o processo de combusto. A amostra prensada na forma de pellet e colocada
sobre um disco de papel na base do suporte, ao qual foi adicionada soluo de nitrato de
amnio, utilizado como iniciador do processo de combusto. Ao frasco de digesto de
quartzo era adicionada uma soluo absorvedora de analitos, gua ou cido ntrico. O
sistema, fechado e pressurizado com oxignio, era colocado no interior de um forno de
microondas comercial (Figura 8.21). Uma vez iniciada a irradiao, o tempo necessrio para
o incio da combusto foi de cerca de 3 s. O tempo de irradiao com microondas foi de 30
s e o tempo de combusto para 100 mg da amostra de aproximadamente 10 s. O sistema
foi aplicado para a determinao de Cu e Zn em amostras certificadas de fgado bovino e
leite em p, tendo-se obtido resultados superiores a 96 % de recuperao. O teor de
carbono residual foi inferior a 1,3% aps a combusto das amostras e inferior a 0,4 %
quando foi feita a etapa de refluxo.

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Decomposies assistidas por radiao microondas

263

Figura 8.21. (a) Proteo do frasco de quartzo com corte frontal para visualizao do
processo de combusto da amostra e (b) ilustrao da visualizao do processo de
combusto [Mesko, 2004]
A tcnica de combusto iniciada por radiao microondas, alm das vantagens
sobre outras tcnicas convencionais de combusto apresenta algumas particularidades
especficas que podem ser assim relacionadas: i) permite a combusto de at 500 mg de
amostra em um frasco de volume relativamente pequeno; ii) o frasco usado para
decomposio por via mida convencional o mesmo usado nesta tcnica e nenhuma
alterao no modelo do frasco, partes do rotor e sistemas de controle de presso so
necessrios; iii) at oito amostras podem ser simultaneamente queimadas no forno de
microondas comercial (Multiwave 3000), aumentando a freqncia analtica; iv) para a
ignio da amostra, a tcnica usa a radiao microondas convencionalmente aplicada na
decomposio por via mida, no havendo a necessidade da utilizao de aparatos como
eletrodos metlicos ou lmpadas de radiao infravermelha; v) a etapa de descontaminao
executada de forma rpida, utilizando a etapa de aquecimento da decomposio
convencional; vi) os valores obtidos para os brancos so, relativamente, baixos; vii) a
temperatura atingida durante a combusto da ordem de 1300 C, assegurando a completa
destruio da matriz orgnica, mesmo de compostos relativamente estveis (p.ex.,
arsenobatana); viii) ao contrrio dos sistemas envolvendo a bomba de combusto e frasco
de Schniger, a tcnica de combusto assistida por microondas permite que uma etapa de
refluxo seja feita aps a combusto, o que assegura uma eficiente remoo de partculas
que possam ter ficado aderidas s paredes internas do frasco, alm de, dependendo da
soluo de refluxo, auxiliar na decomposio de material no decomposto (cido ntrico
concentrado pode ser usado sem danos ao sistema).

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264

Decomposies assistidas por radiao microondas

Entre aos inconvenientes que podem ser esperados, estes so similares aos
sistemas convencionais (p.ex., Trace-O-Mat), tais como a possvel adsoro de analitos no
suporte de quartzo e a necessidade de que as amostras sejam prensadas previamente
queima.
8.4.6. Decomposio com radiao focalizada - mtodos alternativos
Com j anteriormente discutido, a digesto empregando microondas com radiao
focalizada apresenta-se como uma alternativa bastante interessante quando se trabalha
com grandes massas de amostras orgnicas. No entanto, a elevada acidez do digerido
pode resultar em dificuldades analticas quando tcnicas espectroscpicas de determinao
so empregadas [Nbrega et al., 2001]. A seguir so apresentadas estratgias que podem
ser aplicadas para diminuir a concentrao cida dos digeridos, com concomitantes reduo
do branco analtico e no consumo de reagentes, e obteno de baixos teores de carbono
residual.

Decomposio em fase vapor


A decomposio em fase vapor uma alternativa para se evitar a contaminao
por reagentes e do ambiente do laboratrio. Consiste basicamente no contato da amostra
com atmosfera enriquecida por vapores cidos obtidos a partir do aquecimento do cido ou
da mistura cida. As condies de decomposio previnem a volatilizao de contaminantes
presentes nos cidos e a amostra decomposta sem contato direto com o cido na forma
lquida [Povondra, 1992], ocorrendo simultaneamente a decomposio da amostra e a
purificao do cido, resultando em diminuio nos valores de brancos e no consumo de
cido [Matusiewcz, 1991].
Matusiewicz et al. [1989] foram os primeiros a utilizar a decomposio em fase
vapor para a decomposio assistida por microondas por cavidade, reduzindo o tempo de
preparo das amostras. Outros sistemas foram propostos a seguir [Amarasiriwardena et al.,
1998; Eiola & Peramaki, 2001], sendo que adio de uma pequena alquota de gua s
amostras, facilitando a absoro da radiao microondas, possibilitou uma eficiente
decomposio de amostras biolgicas em aproximadamente 18 min [Amarasiriwardena et
al., 1998].
Outro emprego dos sistemas em fase vapor na limpeza de materiais para se
evitar contaminao [Barnes et al., 1998], existindo um sistema comercial automtico de
refluxo com controle programvel de temperatura e tempo de aquecimento (TraceClean
System, Milestone), que emprega esta alternativa [Richter, 2003].

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Decomposies assistidas por radiao microondas

265

A decomposio em fase vapor tambm foi adaptada a sistemas de decomposio


microondas com radiao focalizada. Para isso, um suporte confeccionado em PTFE,
equipado com 3 ou 4 mini-frascos para a colocao das amostras foi desenvolvido e
adaptado ao frasco de vidro do forno. Na Figura 8.22 apresentado o suporte contendo 4
mini-frascos. Soluo contendo somente cido ntrico [Arajo et al., 2000; Arajo et al.,
2003], ou uma mistura contendo cido ntrico e cido sulfrico [Trevizan et al., 2003], foi
aquecida para a gerao dos vapores cidos.

Figura 8.22. Suporte e mini-frascos confeccionados em PTFE desenvolvido para a


decomposio em fase vapor em sistema microondas com radiao focalizada [Arajo et
al., 2000].

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Decomposies assistidas por radiao microondas

Amostras biolgicas foram pesadas diretamente nos mini-frascos e receberam


agente oxidante (perxido de hidrognio ou hipoclorito de sdio). A seguir os mini-frascos
eram adaptados haste do suporte, que era inserida no frasco de vidro do equipamento
contendo a soluo cida no fundo, sendo ento iniciada a digesto em fase vapor. Aps as
decomposies, os mini-frascos foram diretamente transferidos para o auto-amostrador de
espetrmetro de absoro atmica com forno de grafite (GFAAS), sendo determinados ferro
e cobalto. Visando maior aplicabilidade, frascos com maior volume interno possibilitaram a
determinao de diferentes analitos por espectrometria de emisso ptica com plasma
acoplado (ICP OES) [Trevizan et al., 2003]. Para se evitar que diferentes resultados fossem
obtidos em funo das diferenas de temperatura resultante ao longo do frasco de digesto
(os experimentos demonstraram que apenas o frasco inferior recebia a radiao
microondas), foi adicionado hipoclorito de sdio que, em meio cido, forma o gs cloro, um
agente oxidante bastante efetivo, conforme pode ser observado na equao descrita a
seguir:
OCl- + H+ HOCl

HOCl + H+ + Cl- Cl2 + H2O

Comparando-se o potencial de reduo entre os 2 agentes oxidantes, H2O2 e HOCl


[Weast, 1984], conclui-se que as duas reaes so favorveis em meio cido, porm a
decomposio de H2O2 forma somente molculas de gua como produto, enquanto que a
decomposio de HOCl forma tambm Cl2, aumentando o poder oxidante da reao:

H2O2 + 2 H+ + 2 e- 2 H2O

E0 = 1.78 V

2 HOCl + 2 H+ + 2 e- Cl2 + H2O

E0 = 1.61 V

Cl2 + 2 e- 2 Cl-

E0 = 1.36 V

No entanto, a escolha do melhor agente oxidante ir depender das caractersticas


das amostras, tais como teor de gordura ou protena.

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Decomposies assistidas por radiao microondas

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Utilizao de mini-frascos pra decomposio de amostras lquidas


Baseando-se no princpio do frasco nico para execuo de todo procedimento
analtico, foi proposto um suporte de PTFE ao qual so adaptados 4 mini-frascos de
polipropileno de 5 ml. Esse suporte era fixado em uma haste para permitir a introduo dos
mini-frascos no interior do frasco de vidro do equipamento [Tan et al., 2001; Oliveira, 2003].
Esses frascos tiveram sua parte superior especialmente adaptada para a introduo da
haste com as amostras (Figura 8.23)

guia de ondas

mini-frascos amostras

Figura 8.23. Posicionamento dos mini-frascos de PTFE para digesto de amostras em


forno microondas com radiao focalizada [Tan et al., 2001; Oliveira, 2003].

Com o sistema proposto, foi possvel a determinao de Cu, Fe e Zn em amostras


de fgado bovino e folhas de vegetais, e de Cu, Fe, Zn, Mn e Se em amostras de cabelo
[Oliveira, 2003].

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Decomposies assistidas por radiao microondas

Adio gradual da amostra ao reagente pr-aquecido


O procedimento convencional de decomposio assistida por microondas com
radiao focalizada consiste na adio de reagentes concentrados sobre a amostra e ento
a mistura aquecida. Todavia, possvel a obteno de um meio reacional mais drstico se
a amostra for adicionada ao cido ou mistura de cidos j previamente aquecidos,
ocasionando a decomposio em meio cido mais concentrado, pois o cido estar sempre
em excesso em comparao amostra, ou seja, o cido est menos diludo pela amostra
do que no procedimento convencional [Nbrega et al., 2002a; Nbrega et al., 2002b; Santos
et al., 2005].
Nesta proposta, o reagente aquecido at seu ponto de ebulio e ento so
adicionadas gradualmente alquotas da amostra, sendo que cada poro adicionada
digerida antes da adio da prxima alquota. Essa estratgia permite a reduo do tempo
envolvido e a decomposio de uma grande quantidade de amostra, mesmo com menores
volumes de cido, permitindo a obteno de menores valores de branco e melhor
sensibilidade.
O bom desempenho deste tipo de decomposio provavelmente esteja relacionado
reatividade dos radicais gerados durante o aquecimento dos cidos concentrados e
reao exotrmica durante a decomposio, que ir aumentar ainda mais a velocidade de
aquecimento do meio reacional.
Deve-se tomar cuidado com esse tipo de reao para se evitar acidentes. No
recomendado que se execute esse procedimento em sistemas abertos, como
chapas aquecedoras, blocos digestores ou banhos de areia, nos quais o analista
quem realiza o processo de adio da amostra.
No caso da proposta desenvolvida, foi utilizado sistema comercial, que conta com
acessrio que realiza a adio automtica de reagentes de forma gradual e controlada,
nesse caso empregado para a adio das amostras. Para se evitar contaminao entre as
amostras, deve ser estabelecida uma etapa de limpeza. Amostras de leite bovino e de leo
foram eficientemente decompostas empregando esse procedimento. Como exemplo, 5 ml
de leite foram gradualmente adicionados (10 alquotas de 0,5 ml) sobre uma mistura cida
pr-aquecida contendo 3 ml de HNO3 + 1 ml H2SO4, sendo que H2O2 foi adicionado nas
etapas finais do procedimento. O procedimento proposto permite a decomposio de uma
maior massa de amostra e utiliza um menor volume de reagentes, em comparao ao
procedimento convencional empregando forno microondas com radiao focalizada. No

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Decomposies assistidas por radiao microondas

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exemplo anterior, normalmente recomendada a utilizao de 2,5 ml de leite. No entanto,


foram empregados com sucesso 5 ml, sendo que maior eficincia obtida quando a adio
realizada em 10 aliquotas de 0,5 ml do que em 2 aliquotas de 2,5 ml, sendo o volume de
cido utilizado reduzido de 10 para 3 ml (HNO3) e de 3 para 1 ml (H2SO4). Com essa
estratgia, a acidez final foi cerca de 2,4 vezes inferior ao mtodo convencional e o carbono
orgnico residual foi reduzido de 20% para aproximadamente 2% [Santos et al., 2005].
O mesmo procedimento foi empregado para a decomposio de leo diesel. Nesse
caso, para um volume de 2 ml de leo diesel decomposto nas mesmas condies houve a
reduo de 19 ml HNO3 + 10 ml H2SO4, ambos concentrados, para 5 ml HNO3 + 1 ml
H2SO4. Isso indica que a soluo final apresenta-se menos cida e poder ser menos
diluda antes da determinao, melhorando a sensibilidade.
Como alternativa para se contornar problemas relacionados a amostras viscosas
ou mesmo a contaminao entre amostras, foi proposta a adio das amostras previamente
inseridas em cpsulas gelatinosas, vendidas em farmcias de manipulao [Bressani,
2005]. A decomposio microondas empregando cpsula foi primeiramente proposta para
introduo de amostras slidas em sistemas mecanizados [Lgre & Salin, 1995]. Massa
equivalente a 300 mg de leo lubrificante foi pesada diretamente nas cpsulas de gelatina,
sendo que 2 cpsulas foram adicionadas a uma mistura pr-aquecida contendo 4 ml HNO3
+ 3 ml H2SO4 atravs do condensador do equipamento, durante a pausa do programa de
aquecimento. As cpsulas eram introduzidas em intervalos de 1 min, com o objetivo de se
permitir uma decomposio parcial antes da adio da prxima alquota. Quando
comparado ao sistema convencional empregando microondas com radiao focalizada para
a decomposio de leo lubrificante, significativa reduo no volume de cidos utilizado foi
observada. cido ntrico concentrado foi reduzido de 19 para 7 ml e H2SO4 de 10 para 3 ml,
alm de tambm ser obtida reduo no carbono residual.

Decomposio em linha
A primeira proposta para utilizao de sistemas por injeo em fluxo acoplados a
radiao microondas foi feita por Burguera et al. [1988]. Desde ento, diferentes autores
fizeram propostas para aplicao de sistemas, procurando acoplar o tratamento da amostra
(normalmente digesto), com o sistema de deteco para a determinao de analitos. Para
isso foi empregado tanto o forno tipo caseiro [Pereira-Filho & Arruda, 1999], quanto os
sistemas comerciais, com radiao focalizada [Arruda et al., 1997; Luque-Grcia & Luque
de Castro, 2003]. Esses sistemas visam a automao analtica, com reduo do tempo
entre a chegada da amostra ao laboratrio e os resultados finais, alm da menor

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270

Decomposies assistidas por radiao microondas

manipulao da amostra, com reduo dos riscos de contaminao e maior segurana ao


operados.
Como exemplo da aplicao aos sistemas microondas com radiao focalizada, um
sistema de fluxo foi utilizado para digesto em linha de amostras de suco de laranja para a
determinao de Ca, Cu, Fe, K, Mg, Mn, Na, P e Zn por espectrometria de emisso ptica
com plasma indutivamente acoplado. Uma bobina de reao de PTFE (4 m de comprimento
e 1,6 mm de dimetro interno) foi posicionada no interior da cavidade de vidro do forno de
microondas com radiao focalizada (Figura 8.24). Alquotas de 500 l de amostra e de
1000 l de reagente (80% v/v HNO3) foram misturadas em uma confluncia e conduzidas
para a bobina de reao utilizando ar como carregador. O desvio padro relativo para cinco
determinaes da mesma amostra usando o mtodo proposto foi inferior a 5%.

Figura 8.24. (A): diagrama do injetor-comutator; S: amostra; R: reagente; C: fluxo


transportador (3,0 ml min-1); W: descarte; LS: ala de amostragem; LR: ala de reagente.
(B): diagrama do sistema de digesto em linha: a: magnetron; b: guia de ondas; c: frasco de
vidro; d: bobina de PTFE; e: sistema para resfriamento em PVC; f: tampa de borracha; g:
bobinas de PTFE (5cm); h: balo volumtrico (10 mL) [Filli et al., 2003].
O sistema apresentou boas recuperaes de 91 a 111% para adies de
quantidades conhecidas dos elementos de interesse. Os resultados obtidos foram
concordantes a um nvel de confiana de 95% com aqueles obtidos por digesto total. Com
este mtodo de digesto foi possvel processar 12 amostras h-1, minimizando
contaminaes, consumo de amostra e reagentes e gerando pequena quantidade de
resduos [Filli et al., 2003].

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Decomposies assistidas por radiao microondas

271

8.5. CONCLUSES
Como pode ser observado, existe uma grande variedade de propostas e
alternativas que podem ser exploradas. No foram discutidos os mtodos de preparo de
amostras que empregam sistemas de extrao e hidrlise, outro ramo da qumica onde a
interao da radiao microondas para a quebra das ligaes entre o analito e a matriz
apresenta-se bastante promissora. Outro fato que deve ser enfatizado so os novos
equipamentos que possibilitam a digesto simultnea de um maior nmero de amostras. O
desenvolvimento de procedimentos analticos de rotina demanda um grande nmero de
amostras a serem processados, os que j foi parcialmente resolvido pelas modernas
tcnicas analticas de deteco. No entanto o tempo envolvido nos procedimentos de
preparo das amostras ainda necessita reduo.
Algumas das propostas discutidas, que se reportam ao uso de frasco nico e
empregam pequenos volumes de amostras, mostram-se adequadas, pois permitem a
decomposio simultnea de um maior nmero de amostras e evitam o uso de um grande
volume de cidos, o que se mostra ambientalmente adequado, pela menor gerao de
resduos e melhores limites de deteco pela menor necessidade de diluio antes da
determinao. Alm disso, a comercializao de equipamentos com rotores com um maior
nmero de amostras a serem tratadas simultaneamente tambm devero ser cada vez mais
utilizados. As presses relativamente baixas (at 30 atm) deste tipo de sistema no se
apresentam como problema, pois estudos j demonstraram a obteno de eficientes
decomposies empregando esse tipo de equipamento (Bocca et al, 2003). Por outro lado,
digestes drsticas sero ser cada vez menos necessrias, considerando que as espcies
qumicas devero ser analisadas conforme sua atuao na matriz, sendo que a extrao
ser o procedimento de preparo mais empregado, aqui se considerando a especiao
qumica. Seguindo essa tendncia, os procedimentos de preparo de amostras devero ficar
cada vez mais brandos e gradualmente procedimentos drsticos de preparo, que empregam
grandes quantidades de energia, fortes reagentes oxidantes e altas temperaturas e
presses sero substitudos por mtodos menos agressivos, nos quais o analito separado
da matriz sem a necessidade de decomposio total da amostra. Os mtodos assistidos
por radiao microondas se mostram adequados devido possibilidade de se controlar as
condies da reao, sendo que o estabelecimento de procedimentos voltados para essa
aplicao um desafio a ser enfrentado pelos pesquisadores.

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8.6. MEDIDAS DE SEGURANA NO USO DE MICROONDAS

Uma das primeiras consideraes a se ter quando se usam radiaes certificarse de que as mesmas se encontram contidas em um espao fechado. Em relao ao forno,
seu desenho pensado de tal forma a garantir que no haja vazamento de radiao. Cada
sistema possui sistemas de segurana que no permitem o funcionamento do magnetron
quando no existem condies mnimas de segurana neste aspecto. Assim, importante
que se reflita sobre a adequao de fornos domsticos para uso em laboratrio,
certificando-se de que as modificaes feitas no constituem possveis causas de
vazamento de radiao. Qualquer indcio de corroso pode significar um alto nvel de
vazamento de radiao.
Com respeito ao uso de recipientes fechados para a digesto de amostras, deve-se
ter a precauo de evitar superaquecimento e presses elevadas que possam causar
rupturas do recipiente com as conseqentes possibilidades de danos ao equipamento e
riscos fsicos ao analista. Quando ocorrer exploso do recipiente e/ou derrame de lquidos
corrosivos no interior do forno, deve-se fazer uma investigao nos sistemas de segurana.
Em caso de acidentes, o mais importante, obviamente, a integridade fsica do analista.

8.7. REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS


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