Homenagem e agradecimentos no TELELAB

Homenagem e agradecimentos
Existem companheiros cuja dedicao, profissionalismo e amizade so to presentes em nosso trabalho, que
no so capazes de se dissipar com a ausncia que os desgnios da vida podem s vezes nos impor.
Desde a concepo do projeto TELELAB, at a presente srie, dois desses seres maiores, Cludia Renata
Fernandes Martins e Luiz Fernando de Ges Siqueira, nos deixaram.
Suas contribuies, no entanto, permanecem. Permanecem como uma boa memria, uma inspirao que
maior que a saudade.
A eles fica a homenagem e o registro de que fizeram e sempre faro parte dessa equipe, desse projeto.
Finalmente, nossos agradecimentos aos:
Laboratrio Municipal de Curitiba LMC;
Laboratrio de Sade Pblica do Distrito Federal LACEN/DF
Laboratrio de Sade Pblica de Santa Catarina LACEN/SC
Universidade Federal de Santa Catarina UFSC
Universidade de Caxias do Sul UCS.
Por terem cedido os profissionais que elaboraram essa que a quarta srie do Sistema de Ensino Distncia
para Profissionais de Laboratrio TELELAB.
Coleta de sangue - Diagnstico e monitoramento das DST, Aids e Hepatites Virais
Introduo
Os exames laboratoriais so realizados por solicitao mdica, com o objetivo de diagnosticar, monitorar ou
acompanhar o tratamento de uma doena.
O resultado de todo exame laboratorial deve ter qualidade e isso s ser possvel se houver padronizao dos
processos e controle de qualidade, desde a aquisio dos insumos e reagentes at a emisso do resultado.
O diagnstico laboratorial envolve trs etapas: a pr-analtica, a analtica e a ps-analtica. Qualquer
falha nessas etapas afetar o resultado dos testes.
A etapa pr-analtica abrange a recepo, a identificao, a preparao do usurio, a coleta, o
armazenamento e o transporte das amostras at o laboratrio. desta etapa que trata este manual.
Um dos principais objetivos do Departamento de DST, Aids e Hepatites Virais no diagnstico e no
monitoramento da infeco pelo HIV, da sfilis e das hepatites virais garantir o acesso dos usurios a exames de
qualidade.
Lembre-se
Tudo comea com a orientao correta e a coleta adequada das
amostras.
Ambiente de coleta
e mobilirios
Infraestrutura para a coleta de amostras por puno venosa
Demanda de at 15 usurios por hora: o espao fsico para a coleta pode ser constitudo por uma nica
sala com rea mnima de 3,6 m e um lavatrio.
D e m a n d a s u p e r i o r a 1 5 u s u r i o s p o r h o r a : s e r o n e c e s s r i o s
boxes adicionais de coleta com rea mnima de 1,5 m cada um.
Lembre-se: deve existir um lavatrio para cada 6 (seis) boxes, conforme a RDC n 50/2002 Projetos Fsicos G 1.
Recomenda-se que o local de coleta tenha as seguintes caractersticas:
Pisos impermeveis, lavveis e resistentes s solues desinfetantes;
Paredes lisas, resistentes e com divisrias constitudas de materiais lisos, durveis, impermeveis, lavveis
e resistentes s solues desinfetantes;
Ambiente de coleta com ventilao natural ou artificial, com temperatura variando entre 20 e 26C para o
conforto do usurio e dos profissionais de sade;
Iluminao que permita a perfeita visualizao do ambiente, do usurio e dos materiais usados na coleta;
Janelas protegidas por telas para evitar a entrada de insetos;
Local com dimenses que permitam a passagem de macas e o livre trnsito dos portadores de necessidades
especiais.
Mobilirios e acessrios para a coleta de amostras de sangue

Alm do espao fsico para a coleta de amostras de sangue so necessrios os seguintes mobilirios e
acessrios:
Bancada com cantos arredondados e materiais de baixa ou nenhuma porosidade;
Cadeira com braadeira regulvel ou suporte para brao. Recomenda-se que a cadeira tenha apoio
lateral para os braos, pois se o usurio desmaiar sua queda ser evitada;
Maca, em local acessvel e prximo da sala de coleta;
Lixeira para lixo comum;
Lixeira para material potencialmente infectante.
Figura 1 Mobilirios e acessrios para coleta de amostras.
Ateno
No existem normas sobre a rea fsica para coleta de sangue
por puno digital, pois esse tipo de coleta pode ser realizado
em qualquer local, desde que observados os cuidados de
biossegurana tanto para o usurio quanto para o profissional e
o meio ambiente (descarte seguro de material perfurocortante e
potencialmente infectante).
Orientaes e cadastro
do usurio
Pr-coleta: orientaes ao usurio
Antes de realizar o exame, o usurio deve receber instrues escritas e verbais, em linguagem acessvel, sobre
os cuidados necessrios que antecedem a coleta da amostra.
Deve-se informar ao usurio:
necessidade e tempo de jejum requeridos para os exames;
cuidados com a alimentao caso no seja exigido jejum;
obrigatoriedade de apresentar um documento de identificao com foto;
horrio de funcionamento da coleta.
Veja no quadro a seguir algumas orientaes importantes que devem ser informadas ao usurio:
Perodo de jejum:
O tempo de jejum varia de acordo com o exame laboratorial. Existem
dosagens para as quais a necessidade de jejum varia entre 4 e 12 horas.
Veja abaixo algumas situaes e as orientaes para cada uma delas
com relao ao perodo de jejum:
Situao
Orientao para a coleta
Exames sorolgicos para o diagnstico

Recomenda-se jejum de 4 horas para evitar
da infeco pelo HIV, da sfilis e das
a presena de lipemia G .
hepatites virais.
Contagem de clulas T CD4+/CD8+
ou quantificao da carga viral.
No h necessidade de jejum se a coleta

de sangue for exclusivamente para estes
exames.
Em situaes de emergncia, como

no caso de acidentes com materiais
perfurocortantes.
Deve-se realizar a coleta do sangue

independentemente do usurio estar ou
no em jejum.
Em bebs.
Deve-se realizar a coleta entre as mamadas.
Outros fatores de Interferncia

Fator
Exames sorolgicos,
contagem T CD4+/CD8+ e
quantificao da carga viral
Atividades
fsicas
No interferem.
Podem interferir em alguns casos,

tal como na dosagem de colesterol.
Fumo
No interfere.
Pode interferir.
Ingesto de caf No interfere.
Pode interferir.
Ingesto de gua
Outros exames laboratoriais
A ingesto de um copo, ou menos, de gua no interfere na

qualidade da amostra.
Horrio da Coleta
Tipo de exame
Orientao
Exames de sangue, como hemograma e

contagem de clulas T CD4+/CD8+.
Devem ser colhidos preferencialmente no

perodo da manh, pois h variao no
nmero de leuccitos ao longo do dia.
Exames sorolgicos e quantificao da

carga viral.
Podem ser colhidos a qualquer hora do

dia.
Lembre-se
Verifique as recomendaes de coleta para cada exame
laboratorial e informe ao usurio.
Cadastramento do usurio
O cadastramento do usurio deve ser a primeira atividade a ser realizada. fundamental para garantir a
rastreabilidade G em todas as etapas que se seguiro.
Inicie solicitando um documento de identidade com fotografia e registre as seguintes informaes no cadastro:
Nmero do registro que identifica o usurio;
Nome completo do usurio sem abreviao;
Nome social G , quando solicitado pelo usurio;
Idade e data de nascimento;
Sexo;
Nome completo da me;
Telefone e endereo;
Nome, contato e documento de identidade do responsvel em caso de menor de idade ou incapacitado;
Exames solicitados de acordo com a requisio mdica;
Nome de quem solicitou o exame e nmero do registro no conselho profissional;
Quando necessrio, solicite informaes adicionais, como por exemplo, tempo de jejum, uso de medicamentos,
indicao ou observao clnica;
Indicao de urgncia na realizao do exame, se aplicvel;
Data, horrio e responsvel pelo cadastramento.
Observaes:
Os dados referentes idade e data de nascimento do usurio e ao nome completo da me no so

exigncias da RCD 302:2005,
porm, se o sistema utilizado no servio em que voc atua permitir, inclua-os pois so teis para solucionar
nos casos de problemas com homnimos G .
O nmero de registro no conselho profissional de quem solicitou o exame tambm no uma exigncia
da RCD 302:2005, porm, bastante til nos casos de disputas judiciais.
No caso de perda ou roubo de documento de identidade, o Boletim de Ocorrncia registrado por autoridade
competente deve ser solicitado.
Para os exames de quantificao da carga viral, contagem de clulas T CD4 +/CD8 + e de genotipagem,
feitos na rede do Ministrio da Sade, deve-se utilizar formulrio definido pelo Departamento de DST, Aids
e Hepatites Virais, que exige outras informaes (Boletim de Produo Ambulatorial Individualizado BPA-I,
com carimbo mdico e assinatura).
Ateno
Cada laboratrio tem autonomia para estabelecer seu prprio
sistema de registro das informaes, desde que fique assegurada
a rastreabilidade G em todas as etapas do processo fases pranaltica, analtica e ps-analtica.
Comprovante de atendimento
O comprovante de atendimento entregue aps a coleta e deve conter:
dados da instituio onde o usurio foi atendido;
nmero de registro;
nome do usurio;
data do atendimento;
data prevista para a entrega do laudo
relao de exames solicitados;
informaes para contato com o laboratrio.
Materiais para a coleta

de amostras
Materiais necessrios para coleta insumos
Materiais necessrios para todos os tipos de coleta de sangue
1. Gaze ou algodo hidrfilo;
2
2. lcool etlico a 70% peso/

peso (p/p);
6
4
3. Etiquetas para identificao

de amostras;
4. Caneta esferogrfica;
5. Estantes para os tubos;
6. Recipiente de paredes rgidas
e prprio para desprezar
material perfurocortante.
1
7
7. Garrote;
8. Luvas descartveis;
Figura 1 Materiais para coleta de sangue.
9. Curativos.
Alm dos materiais listados acima, apresentamos, nas tabelas a seguir, os materiais especficos que sero
necessrios para os diferentes tipos de coleta.
Materiais para coletas com sistema a vcuo

2
1. Garrote.
2. Curativo adesivo.
3. Escalpe descartvel com
dispositivo de segurana.
4
4. Agulha descartvel com

5. Adaptador para agulha.
6. Tubos a vcuo.
Figura 2 Materiais para coleta a vcuo.
Materiais para coletas com seringa e agulha

1
1. Garrote.
2. Curativo adesivo.
3. Seringa.
4. Agulha.
5
Figura 3 Materiais para coleta com seringa e agulha.
5. Escalpe descartvel com

6. Tubos.
Materiais para coletas por puno digital
1. Carto de coleta com crculos

demarcados em papel-filtro
e rea para identificao da
amostra.
2
1
2. Lanceta.
3. Suporte para secagem do
papel-filtro.
Figura 4 Materiais para coleta por puno digital.
Normas e regulamentaes para agulhas e tubos

Caractersticas das Agulhas
Quanto ao tipo: vrios tipos de agulhas podem ser utilizados para a coleta de amostras de sangue. Elas
podem ter o bisel bifacetado ou trifacetado e, ainda, serem tratadas com silicones.
Quanto unidade de medida: no sistema brasileiro de medidas, os comprimentos e dimetros das agulhas
so expressos em milmetros (mm). Por exemplo, uma agulha de 32 x 0,8 mm corresponde a 32 mm de
comprimento e 0,8 mm de dimetro ou de calibre.
Obs.: nas embalagens os dimetros so apresentados em milmetros e em Gauge (G), que uma unidade
inglesa.
A seguir so apresentados dois exemplos da relao entre o calibre nas unidades Gauge (G) e em milmetros,
assim como a indicao de uso das agulhas:
Agulhas 21G
Agulhas 22G
Possuem 0,8 mm de dimetro
Possuem 0,7 mm de dimetro
So utilizadas para as coletas

em usurios que possuem veias
com grosso calibre e facilmente
visualizadas.
So utilizadas para as coletas

em usurios que possuem
veias com mdio calibre (difcil
acesso venoso).
Ateno
As coletas com escalpe so indicadas para usurios com difcil acesso venoso.
As agulhas e os escalpes para coleta de sangue devem ter um dispositivo de segurana,
conforme definido pela NR 32/2005 e regulamentada pela portaria GM n 939, de 18 de
novembro de 2008, Ministrio do Trabalho e Emprego.
Agulhas para coletas a vcuo

As agulhas para coleta a vcuo tm caractersticas adicionais, alm das descritas anteriormente.
Em uma das extremidades est o bisel que ir penetrar na veia;
Na outra extremidade, coberto por uma manga de borracha, est o local onde ser encaixado o tubo e uma
rosca para encaixe da agulha em um adaptador. A funo da manga de borracha evitar o vazamento de
sangue para dentro do adaptador durante a puno.
Figura 5 Agulha para coleta a vcuo.
Figura 6 Escalpe.
Caractersticas dos tubos:

Tubos para coleta com seringa e agulha:
A escolha dos tubos utilizados na coleta de amostras com seringa e agulha deve respeitar as seguintes
recomendaes:
Podem ser de vidro ou plstico;
As tampas devem ser seguras para que:
no se desprendam durante a homogeneizao ou centrifugao da amostra;
permitam a completa vedao do contedo; e
possam ser removidas manualmente ou por mtodos mecnicos.
Importante
Sempre deve ser respeitada a proporo entre volume de sangue
e anticoagulante.
Proporo de EDTA recomendada para cada mL de sangue:

EDTA
mg/mL de sangue
EDTA dissdico (EDTA Na2 2H2O)
1,4 a 2,0
EDTA dipotssico (EDTA K2 2H2O)
1,5 a 2,2
EDTA tripotssico (EDTA K3)
1,5 a 2,2
Fonte de referncia: NCCLS. Tubes and Additives for Venous Blood Specimen Collection; Approved Standard
Fifth Edition. NCCLS document H1-A5 (ISBN 1-56238-519-4). NCCLS, 940 West Valley Road, Suite 1400, Wayne,
Pennsylvania 19087-1898 USA, 2003.
Tubos para coleta a vcuo:

Os tubos para coleta de sangue a vcuo podem ser de plstico ou de vidro e possuem tampas com cores
diferentes, que so padronizadas internacionalmente pela Norma ISO 6710:1995. No rtulo de cada tubo tambm h
uma indicao do volume de amostra que deve ser coletada.
A Norma ISO 6710:1995 determina que os tubos devem:
ser fabricados com material que apresente transparncia suficiente para permitir a clara viso do seu
contedo e as caractersticas da superfcie interna;
ser estreis, para segurana da amostra e do usurio;
ter espao suficiente para homogeneizao mecnica ou manual da amostra;
ter tampas seguras para que:
no se desprendam durante a homogeneizao ou centrifugao da amostra;
permitam a vedao; e
possam ser removidas manualmente ou por mtodos mecnicos.
Ateno
No recomendada a reutilizao dos tubos. Alm de resduos do
sabo utilizado em sua limpeza, outros resduos podem permanecer
no seu interior, interferindo ou alterando o resultado dos exames.
As cores das tampas dos tubos a vcuo:

As cores indicam o tipo de anticoagulante ou de tratamento que o
tubo recebeu. Veja na tabela abaixo:
Cores
Obs.: alguns
fabricantes utilizam
apenas um circulo
amarelo na parte
superior da tampa
vermelha para indicar
a presena do gel.
Aditivo
Mecanismo
de ao
Amostra
obtida
Principais
aplicaes
Citrato
Liga clcio
Sangue total
ou plasma
Exames de
coagulao
Com ou sem
ativador de
cogulo e sem
gel separador
O ativador
acelera a
coagulao
Soro
Exames
sorolgicos,
bioqumicos e
hormonais
Com ativador
de cogulo e
com
gel separador
O gel
separador
mantm
separado
o soro do
cogulo
Soro
Exames
sorolgicos,
bioqumicos e
hormonais.
Heparina
Inibe
trombina
Sangue total
ou plasma
Exames
bioqumicos
Sangue total
ou plasma
Exames de
hematologia,
CD4+ /CD8+,
carga viral e de
genotipagem
Plasma
Exames de
glicose e
lactato
EDTA
Liga clcio
Fluoreto/EDTA
Inibe a
degradao
da glicose
10
Qual a funo do gel separador?

O gel atua como uma barreira fsica entre as partes slida e lquida
do sangue aps a centrifugao. Assim, possvel utilizar o prprio tubo
de coleta o tubo primrio nos equipamentos para a realizao dos
exames.
O seu uso evita a transferncia da amostra para outro tubo, de
modo que:
elimina os riscos de troca de amostras que poderiam ocorrer
durante a separao da amostra de soro para outro tubo;
otimiza o trabalho tcnico;
reduz o risco de acidentes de trabalho.
Ateno
No congele amostras dentro de tubos contendo o gel separador,
pois sofrero hemlise.
Ordem de utilizao de tubos plsticos na coleta de sangue: na figura 7, da esquerda para a direita.
Figura
7 Sequncia
de utilizao
pelas
Figura
7 Sequncia
dos tubos
na coleta
de cores.
sangue.
Inicie colhendo as amostras para testes de coagulao que utilizam tubos com citrato de sdio (tampa azul);
Na sequncia, os tubos para obteno de soro, ou seja, sem anticoagulante somente (tampa vermelha) ou
contendo gel
separador com ativador de cogulo (tampa amarela ou vermelha com anel amarelo).
Em seguida, se voc for colher amostras em tubos plsticos que contm outros anticoagulantes, inicie pelo
tubo que contm heparina (tampa verde) e, na sequncia, o tubo com EDTA (tampa roxa) e por ltimo o
tubo com fluoreto de sdio/EDTA (tampa cinza).
IMPORTANTE:
A sequncia da coleta de sangue para exames sorolgicos, contagem de CD4 +/CD8 + e quantificao de
carga viral:
Inicie com o tubo de tampa vermelha/amarela ou vermelha com anel amarelo para obter soro para os exames
sorolgicos.
Em seguida, colete amostra em trs tubos de tampa roxa. Um para obter o sangue total para a contagem de
linfcitos T CD4+/CD8 + e dois para obter o plasma para a quantificao de carga viral.
Armazenamento de agulhas e tubos

Siga rigorosamente as instrues determinadas pelo fabricante para a conservao e para a armazenagem
de tubos e agulhas;
Esses materiais devem ser armazenados ao abrigo da luz, em locais secos e arejados;
Os tubos devem ser armazenados entre 4 C e 25C;
Nunca utilize tubos ou produtos com prazo de validade vencido ou que apresentem alteraes em sua cor, forma
ou caractersticas originais.
11
Preparao do profissional
Equipamentos de Proteo Individual EPI
No momento da coleta de sangue, o profissional de sade dever utilizar equipamentos de proteo
individual (EPI), pois em todos os locais onde se faz a coleta de sangue ou h manipulao de materiais biolgicos
existe o risco de contaminao com agentes infecciosos.
Transmisso de agentes infecciosos
A transmisso de agentes infecciosos durante a coleta de amostras
de sangue ocorre:
Por contato direto com material contaminado.
Esse contato pode ser resultante:
de transmisso direta:
em acidentes com objetos perfurocortantes;
pelo respingo de sangue diretamente na pele ou mucosas;
inalao de aerossis.
de transmisso indireta, pelo contato da pele ferida ou mucosas
com superfcies, mos e/ou luvas contaminadas.
Assim sendo, imprescindvel a utilizao de:
Avental ou jaleco de comprimento abaixo dos joelhos, com mangas longas, sistema de fechamento nos
punhos por elstico ou sanfona e fechamento at a altura do pescoo;
Luvas descartveis;
culos ou protetor facial.
Alm disso, obrigatrio o uso de roupas e calados que cubram completamente pernas e ps.
Figura 8 EPI de uso freqente na coleta de sangue.

Saiba mais
Leia a NR 32 de 2005.
No site do Ministrio do Trabalho e Emprego
http://www.mte.gov.br
clique no link Legislao Normas regulamentadoras
12
Higienizao das mos

A medida individual mais simples e menos dispendiosa para prevenir a propagao das infeces relacionadas
assistncia sade a higienizao das mos (termo mais amplo que substituiu lavagem das mos).
As mos constituem a principal via de transmisso de microrganismos durante o atendimento aos usurios.
A higienizao das mos pode ser simples ou antissptica:
Higienizao simples: so utilizados gua e sabo comum. Esses sabes possuem atividade detergente,
removem gorduras, sujeiras e substncias orgnicas das mos. Tm pouca ou nenhuma atividade antimicrobiana,
porm seu uso remove mecanicamente muito dos microrganismos.
Higienizao antissptica: so utilizados gua e sabo contendo antissptico ou somente antisspticos.
Os antisspticos mais utilizados so alcois, clorexidina, compostos de iodo, iodforos e triclosan. So mais
eficientes na eliminao de microrganismos patognicos das mos.
Antissptico: toda substncia capaz de eliminar parcialmente
microrganismos de tecidos vivos.
Desinfetante: toda substncia capaz de eliminar parcialmente
microrganismos em materiais inanimados.
O que utilizar para higienizar as mos

Na maioria dos casos, lavar bem as mos com gua e sabo suficiente para a descontaminao, mas em
situaes de maior risco recomendada a utilizao de sabo germicida.
Quando as mos devem ser higienizadas

Antes de iniciar o trabalho;
Antes de sair do ambiente de trabalho;
Antes e aps ir ao banheiro;
Antes e aps as refeies;
Aps a manipulao de agentes qumicos ou de material infeccioso, mesmo que o procedimento tenha
sido executado com luvas;
Antes e aps o contato com usurios;
Antes de calar as luvas;
Aps retirar as luvas;
Ao chegar em casa;
Deve haver, em cada laboratrio, um lavatrio instalado prximo sada.
As torneiras devem ter, preferencialmente, acionamento automtico (com p ou sensor). Se esses dispositivos
no estiverem disponveis deve-se usar papel toalha para fechar a torneira a fim de evitar a contaminao das mos
lavadas.
Ateno
O uso de luvas de proteo para manipular materiais
potencialmente infectantes e outras substncias contaminantes
no elimina a necessidade de lavar as mos regularmente e de
forma correta.
13
Como higienizar as mos
1. Molhe as mos com gua.
2. Cubra as mos com a

espuma do sabo.
3. Esfregue bem as palmas.
4. Lave entre os dedos,

entrelaando-os.
5. Lave as palmas com os

dedos entrelaados.
6. Esfregue a base dos

dedos nas palmas das
mos.
7. Limpe o polegar esquerdo com a palma da mo

direita e vice-versa.
8. Esfregue novamente as
palmas das mos com a
ponta dos dedos.
9. Enxgue todo o sabo

comeando pelos dedos
e subindo em direo ao
pulso.
10. Enxugue as mos com

uma toalha descartvel.
11. Use esta mesma toalha

para fechar a torneira.
12. Pronto, sua mos esto

completamente limpas!
Saiba mais
Faa o curso Biossegurana - Diagnstico e monitoramento das

DST, AIDS e hepatites virais
14
Coleta de sangue por

puno venosa informaes complementares
Cuidados para retirar as luvas
1. Pegue na parte externa da luva e puxe

em direo aos dedos para retirar.
2. Feche a outra mo com a luva retirada.
3. Com a mo sem luva pegue na parte

interna da luva e puxe em direo aos
dedos para retirar.
4. Jogue a luva em recipiente para

material infectante.
Figura 1 Orientaes para retirar as luvas.
15
Problemas que podem ocorrer na coleta de sangue

Ateno
Ao verificar algum problema mantenha-se calmo e tranquilize
o usurio. Analise a situao e adote a conduta cabvel.
Veja abaixo alguns problemas que podem ocorrer durante a coleta de sangue e como resolv-los:
Problema
Voc puncionou
a veia e o sangue
no fluiu para o
tubo.
Problema
O que pode ter

acontecido
O que fazer para resolver
Transfixao G da
veia.
Retroceda um pouco a agulha para

que ela volte para dentro da veia.
Erro na direo da
agulha.
Localize a veia com a sua mo livre e

redirecione a agulha.
O que pode ter

acontecido
O que fazer para resolver
Transfixao da veia.
Retroceda um pouco a agulha para

que ela volte para dentro da veia.
possvel que
a agulha esteja
encostada na parede
da veia.
Retroceda um pouco a agulha e gire

sutilmente o adaptador ou a seringa
para permitir o restabelecimento do
fluxo.
Estenose G ou
colabamento da veia.
Retire o garrote para permitir o

restabelecimento da circulao.
Tente virar lentamente o adaptador
ou a seringa para que o bisel
seja desobstrudo e permita a
recomposio da veia.
Se o tubo perder o vcuo, troque
de tubo e lembre-se de identificlo ao final do procedimento. Se o
problema no for resolvido, retire a
agulha e faa uma nova puno em
outro local.
O bisel est
encostando na parede
superior da veia.
Aumente o ngulo da agulha em

relao ao brao e depois avance
a agulha no interior da veia para
permitir o fluxo sanguneo.
Sangramento
externo contnuo
no local da puno.
O bisel penetrou
apenas parcialmente
a veia.
Corrija o problema introduzindo a

agulha corretamente na veia. Se o
tubo perder o vcuo, troque de tubo
e lembre-se de identific-lo ao final
do procedimento.
Formao de
edema ou
hematoma G aps
a puno.
A veia rompeu
ou ocorreu
extravasamento de
sangue sob a pele.
Interrompa imediatamente a coleta.

Comprima o local e aplique uma
compressa de gelo.
O sangue flui de
forma pulstil.
Uma artria foi

puncionada.
Interrompa imediatamente a coleta

e comprima o local ao menos por 5
minutos. Em seguida cubra o local
puncionado com curativo oclusivo.
Voc puncionou
a veia e o fluxo
sanguneo foi
interrompido.
16
Figura 2 Transfixao da veia.
Figura 3 Erro na direo da agulha.
Figura 4 Estenose da veia.
Figura 5 Bisel encostado na parede

superior da veia.
Figura 6 Bisel parcialmente

penetrado na veia.
Figura 7 Veia rompida.
Ateno
Em qualquer um dos casos, se o problema no for resolvido, retire
a agulha, cubra o local puncionado com algodo e pressione.
Escolha um novo local, faa a antissepsia e realize nova puno.
17
Como obter o soro e o plasma
Sangue, soro e plasma

O sangue circula atravs do corao, artrias, capilares e veias.
Tem como funes o transporte de oxignio, gs carbnico, hormnios,
nutrientes e tambm o transporte dos resduos do metabolismo at os
rgos de excreo.
Alm disso, tem papel regulador na distribuio de calor, do equilbrio
cido-bsico e do equilbrio osmtico. formado por uma fase slida e
outra lquida:
A fase slida contm os glbulos brancos (neutrfilos, eosinfilos,

basfilos, linfcitos e moncitos), os glbulos vermelhos (hemcias)
e tambm as plaquetas.
Curiosidade: o volume total de sangue em um homem de
70 Kg cerca de 5,5 litros.
A fase lquida do sangue o plasma, no qual a fase slida est

suspensa. O plasma um lquido de cor amarelada que compe
cerca de 55% do volume total do sangue. Contm gua, sdio,
gases, nutrientes, hormnios, enzimas e protenas tais como
fibrinognio, globulinas e albumina. obtido aps coleta do
sangue em tubo contendo anticoagulante.
O soro a parte lquida obtida aps a coagulao do sangue

coletado em tubo sem anticoagulante. Na formao do cogulo
o fibrinognio consumido.
Veja a tabela abaixo:

Soro
Plasma
Obtido a partir da coleta de sangue em

tubo sem anticoagulante
Obtido a partir da coleta de sangue em tubo

contendo algum tipo de anticoagulante
No contm fibrinognio
Contm fibrinognio
18
Como obter o Plasma

Para obter o plasma voc dever utilizar um tubo contendo anticoagulante como, por exemplo, o de tampa roxa
ou lils contendo EDTA. O plasma tambm pode ser obtido em tubos com heparina (tampa verde), com citrato de sdio
(tampa azul) e com fluoreto de sdio/EDTA (tampa cinza). A escolha do tubo depender do tipo de exame que ser
realizado com o plasma.
Figura 8 Obteno do plasma.
Passo a passo
1.
2.
3.
4.
Colha o sangue em tubo contendo anticoagulante.

Homogeneze a amostra por inverso, entre 5 e 10 vezes.
Centrifugue por 10 minutos entre 2.500 e 3.500 rpm.
O plasma a parte lquida amarela que fica na parte superior do tubo.
Como obter o Soro

Para obter soro, voc dever utilizar um tubo sem anticoagulante, com ou sem gel separador (tampa
vermelha ou amarela) e, ainda, com ou sem acelerador de cogulo.
Passo a passo
1. Colha o sangue em tubo sem anticoagulante.
2. Se utilizar o tubo com gel separador, homogeneze a amostra por inverso, entre 5 e 10 vezes.
3. Deixe em temperatura ambiente, em repouso, at a total retrao do cogulo. Veja no quadro a seguir os
tempos recomendados.
4. Centrifugue por 10 minutos entre 2.500 a 3.500 rpm. A centrifugao deve ocorrer dentro de, no mximo,
2 horas aps a coleta;
5. O soro a parte lquida superior amarela que fica na parte superior do tubo.
O ativador de cogulo
O ativador de cogulo acelera o processo de coagulao. Veja
a tabela abaixo com os tempos recomendados para que ocorra a
coagulao do sangue, segundo as cores das tampas dos tubos de coleta
a vcuo utilizados para coletar a amostra, segundo a ISO 6710:1995:
Tipo de tubo
Tempo de coagulao
Sem ativador de cogulo (tampa vermelha)
60 minutos
Com ativador de cogulo (tampa vermelha)
30 minutos
Com ativador de cogulo e gel separador (tampa amarela)
30 minutos
Observao:
Amostras de sangue de usurios que esto utilizando anticoagulante ou que so portadores de alguma
coagulopatia demoram mais tempo para coagular.
19
Cuidados na centrifugao de amostras
Certifique-se de que as centrfugas do seu laboratrio tenham passado por manuteno preventiva e que a
calibrao e as condies metrolgicas estejam corretas para garantir seu correto funcionamento
(Faa o curso Equipamentos Utilizao e Monitoramento em Unidades Hemoterpicas e Laboratrios

de Sade Pblica do sistema TELELAB);
Utilize sempre rotores e caapas apropriados ao tamanho dos tubos que sero centrifugados. Caapas
muito grandes ou muito pequenas podem causar a quebra, o deslocamento dos tubos ou a separao
inadequada da amostra;
Os tubos devem ser centrifugados com tampa para evitar evaporao, a formao de aerossis e a contaminao
da amostra, do equipamento e do tcnico;
Assegure-se que os tubos estejam corretamente encaixados na caapa da centrfuga. Um encaixe incompleto
pode fazer com que a tampa de proteo do tubo se desprenda, ou o tubo seja quebrado durante a
centrifugao;
Sempre equilibre os tubos para no quebr-los durante a centrfuga ou danificar o eixo do rotor da centrfuga.
Tubos de mesmo peso devem ser colocados em locais opostos no rotor;
Aguarde at que a centrfuga pare completamente antes de abrir a tampa para retirar os tubos;
No use o freio da centrfuga com o intuito de interromper a centrifugao dos tubos; esta brusca interrupo,
alm de causar hemlise, pode deslocar o gel separador;
Retire os tubos da centrfuga com o auxlio de uma pina.
20
Converso de fora centrfuga relativa e

rotaes por minuto
Como converter RCF em RPM ou vice versa?
Em algumas situaes, os fabricantes indicam a RCF adequada para a centrifugao de tubos. Por exemplo,
a RCF recomendada para tubos com gel separador, na obteno de soro, de 1300 a 2000 g. Vamos usar como
exemplo um valor intermedirio, de 1800 g.
Tire a medida do raio do seu rotor:
a) para rotores mveis, o raio deve ser medido do fundo de um tubo ao fundo do tubo do lado oposto, mas os
dois abertos, como ficam quando a centrfuga est ligada. Veja a figura:
raio
b) Para rotores fixos, o raio deve ser a medida do fundo de um tubo ao fundo do tubo oposto. Veja a figura:
raio
21
Voltando converso RCF/RPM. Na coluna RCF localize o valor 1800 e trace uma linha horizontal na tabela.
Depois de traar a linha a partir da RCF, trace outra linha perpendicular a partir do valor correspondente ao raio do
seu rotor. Como exemplo, vamos supor que o raio de 13 cm.
Onde as duas linhas se encontrarem estar o valor em RPM correspondente.
Com a tabela possvel tambm converter RPM em RCF.
Tabela de relao entre fora centrfuga relativa (RCF) e rotaes por minuto (RPM)
Tabela de relao entre RCF e RPM
Raio (cm)
RCF
(g)
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
900 3391 3172 2991 2837 2705 2590 2488 2398 2317 2243 2176 2115 2058 2006 1958 1913 1871 1831 1794
950 3484 3259 3073 2915 2779 2661 2557 2464 2380 2305 2236 2173 2115 2061 2012 1965 1922 1882 1844
1000 3575 3344 3153 2991 2852 2730 2623 2528 2442 2364 2294 2229 2170 2115 2064 2016 1972 1931 1892
1050 3663 3426 3230 3065 2922 2798 2688 2590 2502 2423 2350 2284 2223 2167 2115 2066 2021 1978 1938
1100 3749 3507 3306 3137 2991 2663 2751 2651 2561 2480 2406 2338 2276 2218 2165 2118 2068 2025 1964
1150 3833 3586 3381 3207 3058 2926 2813 2711 2619 2536 2460 2391 2327 2268 2213 2162 2115 2070 2028
1200 3916 3663 3453 3276 3124 2991 2873 2769 2675 2590 2513 2442 2377 2317 2261 2209 2160 2115 2072
1250 3997 3738 3525 3344 3188 3052 2933 2826 2730 2643 2565 2492 2426 2364 2307 2254 2205 2158 2115
1300 4076 3812 3594 3410 3251 3113 2991 2882 2794 2696 2615 2542 2474 2411 2353 2299 2248 2201 2157
1350 4153 3885 3663 3475 3313 3172 3048 2937 2837 2747 2665 2590 2521 2457 2398 2343 2291 2243 2196
1400 4230 3958 3730 3539 3374 3230 3104 2991 2889 2798 2714 2638 2567 2502 2442 2386 2333 2284 2238
1500 4378 4095 3861 3663 3492 3344 3213 3096 2991 2896 2809 2730 3657 2590 2528 2470 2415 2364 2317
1600 4522 4230 3988 3783 3607 3453 3318 3197 3089 2991 2901 2820 2744 2675 2811 2551 2494 2442 2393
1700 4661 4360 4110 3899 3718 3560 3420 3296 3184 3083 2991 2906 2829 2757 2691 2629 2571 2517 2466
1800 4796 4486 4230 4013 3826 3663 3519
3500 3391 3276 3172 3077 2991 2911 2837 2769 2705 2646 2590 2538
1900 4927 4609 4345 4122 3931 3763 3616 3484 3366 3259 3162 3073 2991 2915 2845 2779 2718 2661 2607
2000 5055 4729 4458 4230 4033 3861 3710 3675 3453 3344 3244 3153 3068 2991 2919 2852 2789 2730 2675
2100 5160 4646 4568 4334 4132 3956 3601 3663 3539 3426 3324 3230 3144 3065 2991 2912 2656 2796 2741
2200 5302 4960 4676 4436 4230 4049 3891 3749 3622 3502 3402 3306 3218 3137 3061 2991 2925 2863 2806
2300 5421 5071 4781 4536 4325 4140 3978 3883 3703 3586 3479 3381 3291 3207 3130 3058 2991 2928 2869
2400 5538 5180 4884 4633 4418 4230 4064 3916 3783 3663 3554 3453 3361 3276 3197 3124 3055 2991 2930
2500 5652 5267 4965 4729 4509 4317 4147 3997 3661 3738 3627 3525 3431 3344 3263 3168 3116 3052 2991
2600 5764 5392 5083 4822 4598 4402 4230 4076 3937 3812 3699 3594 3499 3410 3328 3251 3180 3113 3050
2700 5874 5494 5180 4914 4686 4486 4310 4153 4013 3885 3769 3663 3565 3475 3391 3313 3240 3172 3108
2800 5981 5595 5275 5004 4772 4568 4389 4230 4086 3956 3838 3730 3631 3539 3453 3374 3300 3230 3165
2900 6087 5694 5369 5093 4856 4649 4467 4304 4158 4026 3906 3796 3695 3601 3515 3434 3358 3288 3221
Veja na tabela que 1800 g em uma centrfuga com

rotor de 13 cm de raio corresponde a 3500 RPM.
22
Hematomas, hemlise e lipemias:

como evit-las
A formao de hematomas
O hematoma G o extravasamento do sangue para o tecido adjacente ao vaso e a sua formao bastante
comum. Veja a seguir as situaes nas quais isso ocorre:
Quando as veias so mais finas do que a agulha;
Nas tentativas mal sucedidas como, por exemplo, uma segunda coleta na mesma veia ou mltiplas tentativas
de encontrar a veia redirecionando a agulha;
Quando a agulha for retirada da veia antes de soltar o garrote;
Quando a manga da blusa do usurio estiver apertando o brao como um garrote;
Quando, aps a puno, a presso no local for mantida por tempo inferior a 3 minutos e/ou o local for
esfregado;
Dobrar o brao ou carregar peso aps a coleta de sangue.
Grande parte dessas situaes pode ser evitada seguindo-se corretamente as orientaes deste manual.
Hemlise
A Hemlise o resultado do rompimento da membrana da hemcia, causando liberao de hemoglobina.
a principal causa para rejeio de amostras nos laboratrios. Pode ser identificada a olho nu, pela observao do
aspecto avermelhado presente no soro ou plasma.
Veja a seguir alguns cuidados que voc dever ter aps a coleta de sangue para evitar a hemlise:
Quando coletar com seringa, retire a agulha antes de transferir o material coletado, dispensando-a suavemente
pelas paredes dos tubos;
Aps a coleta, sempre homogeneze o tubo suavemente por inverso;
Sempre que possvel, faa os exames a partir do tubo primrio (o que foi identificado na presena do usurio
e no qual o sangue foi colhido) evitando a transferncia de um tubo para outro. Pode haver ressuspenso
das hemcias, causando hemlise pela ruptura das hemcias que permanecem junto com o soro transferido;
Transporte os tubos sempre na posio vertical. Essa posio permite a completa formao do cogulo e
reduz a agitao no interior do tubo durante o transporte;
Proteja a amostra de sangue total da exposio a temperaturas muito elevadas ou baixas. Mantenha a
temperatura entre 20 e 26C;
No interrompa bruscamente a centrifugao.
Ateno
Nunca coloque o sangue total em contato direto com o gelo,
pois baixas temperaturas podem provocar hemlise!
Lipemia
A lipemia causada pela presena de grande quantidade de lipdios (gordura) no sangue. Pode ser identificada
a olho nu pela observao do aspecto turvo (leitoso) do soro ou plasma.
Alguns usurios em tratamento com antiretrovirais para a infeco pelo HIV ou com outras enfermidades
podem apresentar lipemia permanente. Outros podem apresentar a lipemia transitria, comum aps a ingesto
de alimentos gordurosos.
Para prevenir a lipemia nos exames sorolgicos deve-se seguir as recomendaes de jejum, definidas para
cada tipo de exame, e evitar coletar amostras quando o usurio tiver ingerido alimentos gordurosos a menos de
quatro horas.
23

puno venosa preparao
A escolha do local para fazer a puno venosa
Condies da veia
Em princpio, qualquer veia dos membros superiores pode ser puncionada, desde que apresente boas
condies como:
bom calibre;
flexibilidade; e
integridade.
Veias mais comumente utilizadas

As veias mais utilizadas so a cubital mediana e a ceflica, ambas localizadas na parte anterior do brao,
prximo dobra do cotovelo, conforme figura 1.
A puno na veia cubital mediana costuma ser a melhor opo, pois na puno da veia ceflica existe maior
risco de formao de hematomas.
As veias do dorso da mo tambm podem ser puncionadas. Nessa regio, recomenda-se a veia do arco venoso
dorsal, conforme figura 2, por possuir maior calibre.
A outra veia destacada na figura veia dorsal do metacarpo tambm poder ser puncionada, porm a
coleta ser mais dolorosa.
Veia ceflica acessria

Veia ceflica
Veia cubital mediana
Veia baslica
Veia baslica mediana
Veia baslica
Figura 1- A veias dos membros superiores
Veia
baslica
Veia ceflica
Arco venoso dorsal
Veia dorsal
metacarpal
Veia dorsal superficial
Veia dorsal digital
Figura 2 Veias do dorso da mo.
24
reas que NO devem ser puncionadas:
reas com terapia ou hidratao intravenosa de qualquer espcie;

Locais com cicatrizes de queimadura;
Membro superior prximo ao local onde foi realizada mastectomia, cateterismo ou qualquer outro
procedimento cirrgico;
reas com hematomas;
reas da pele com ferimentos, abscessos e outras leses;
Veias que j sofreram trombose porque so pouco flexveis, com paredes endurecidas;
Veias com mltiplas punes recentes.
Cuidados com o usurio antes da coleta
Posicione o brao do usurio, mantendo-o levemente inclinado para baixo;

O brao deve estar apoiado firmemente pelo descanso e o cotovelo no deve estar dobrado.
Visualizao da veia
Para visualizar a veia voc pode executar os procedimentos indicados a seguir:
Solicite que o usurio abra e feche a mo em movimentos suaves;
Caso no consiga visualizar uma veia, solicite que abaixe o brao e novamente abra e feche a mo em
movimentos suaves;
Caso ainda no consiga visualizar, massageie delicadamente o brao do usurio, no sentido do punho para
o cotovelo;
Outra opo garrotear o brao para facilitar a visualizao da veia. Lembre-se: aps localizar a veia
utilizando o garroteamento, afrouxe o garrote. Aguarde no mnimo 2 minutos antes de garrotear novamente
para fazer a puno.
Ateno
No bata na veia com os dedos, no momento da seleo venosa.
Este tipo de procedimento pode provocar hemlise G capilar.
Utilizao do garrote no brao

Como utilizar corretamente o garrote
Posicione o garrote com o lao ou fecho para cima, cerca de 10 cm do local que ser puncionado, a fim de
evitar a contaminao da rea de puno;
No aperte intensamente o garrote, pois o fluxo arterial no deve ser interrompido. Lembre-se que o pulso
do usurio deve permanecer palpvel;
No use o garrote por mais de 1 minuto. O resultado de alguns exames laboratoriais pode sofrer alteraes,
pois, com o garroteamento ocorre aumento da presso nas veias e artrias, facilitando a sada de lquido e de
molculas pequenas para o espao intersticial entre as clulas , gerando uma variao na concentrao
dos elementos do sangue.
Recomendaes:
Utilize somente garrotes limpos;

Caso o garrote seja de ltex, deve-se perguntar ao usurio se tem alergia a este componente. Se relatar
alergia, forre com papel toalha a parte do brao que entrar em contato com o ltex.
25
Figura 3 Posicionamento correto do garrote.
Ateno
Lembre-se de orientar o usurio a no movimentar o brao
durante o ato da coleta.
Antissepsia do local da puno

Para fazer a antissepsia do local que ser puncionado, utilize gaze ou algodo embebidos em uma soluo de
lcool etlico a 70% peso/peso (p/p) ou outro antissptico.
Antissepsia: utilizada para reduzir o risco de contaminao da
amostra e para evitar infeco do local da puno.
Aps escolher o local para puncionar, a antissepsia pode ser feita de duas formas:
OPO 1: com um nico movimento

circular a partir do local escolhido em
direo periferia.
Figura 4 Antissepsia- movimento circular.
OPO 2: com um nico movimento

do algodo ou gaze no sentido do
punho para o cotovelo.
Figura 5 Antissepsia- movimento reto.
Preste ateno:
Em qualquer um dos modos, a antissepsia pode ser repetida, desde que voc utilize um novo algodo ou
gaze embebidos no lcool.
Aguarde a completa secagem da rea (cerca de 30 segundos), para evitar hemlise G da amostra e tambm
a ardncia no local quando o brao do usurio for puncionado;
No assopre, no abane e no toque no local aps a antissepsia para no haver recontaminao na rea.
26

puno venosa seringa e agulha
Leia com ateno o passo a passo para a coleta de sangue com seringa e agulha:
Preparao do material e do profissional

1. Confira se voc dispe de todos os materiais que ir utilizar;
2. Higienize suas mos;
Recepo do usurio
3. Chame o usurio pelo nome completo. Trate-o sempre com respeito, cumprimentando-o de modo
simptico e cordial;
4. Pea que se acomode confortavelmente na cadeira de coleta;
Identificao do usurio e dos materiais

5. Solicite ao usurio um documento de identidade com foto;
6. Verifique se os dados do documento so os mesmos registrados na requisio e nas etiquetas e devolva
o documento a ele;
7. Informe ao usurio como ser o procedimento de coleta;
8. Ordene o material que ser usado na coleta;
9. Pea ao usurio que confirme seus dados na etiqueta;
10. Cole as etiquetas nos tubos;
Preparao da coleta
11. Calce as luvas;
12. Utilize seringas e agulhas descartveis;
13. Mostre ao usurio as embalagens lacradas da agulha e da seringa;
14. Posicione o brao do usurio;
15. Verifique se a manga est prendendo a circulao e atuando como um garrote. Caso isso acontea
desdobre a manga;
16. Analise os possveis locais para a puno venosa e escolha o calibre da agulha;
17. Abra e retire a seringa do envelope. Empurre o mbolo para garantir o seu deslizamento sem dificuldade;
18. Abra a embalagem contendo a agulha e encaixe-a na seringa;
19. Faa a antissepsia do local escolhido para a puno;
20. Garroteie o brao do usurio e solicite que ele feche a mo;
Coleta
21. Retire a capa da agulha e faa a puno imediatamente, com o bisel da agulha virado para cima;
22. Quando o sangue comear a fluir, solte o garrote e pea ao usurio que abra a mo;
23. Aspire o sangue em volume suficiente para as anlises desejadas;
24. Evite a formao de bolhas e espuma, aspirando lentamente o sangue da veia;
25. Execute o procedimento com a maior agilidade possvel, pois o processo de coagulao do sangue ativado
desde o incio da puno e, se a coleta demorar, o sangue pode se coagular dentro da seringa;
27
Finalizao da coleta
26. Remova a agulha da veia e solicite que o usurio faa presso sobre o local da puno com o auxlio de
gaze ou algodo seco;
27. Acione imediatamente o dispositivo de segurana da agulha;
28. Oriente o usurio para que mantenha o local pressionado, sem esfregar por, no mnimo, trs minutos;
29. Descarte imediatamente a agulha em recipiente apropriado para materiais perfurocortantes, adotando
todos os cuidados de biossegurana;
30. Abra a tampa do tubo e transfira o sangue da seringa, tomando o cuidado de deixar o sangue escorrer
lentamente pelas paredes do tubo, evitando a hemlise;
Ateno
Caso a amostra venha a ser transferida para tubo
contendo anticoagulante, respeite a proporo
sangue/anticoagulante.
31. Feche corretamente o tubo e homogeneze o contedo suavemente por inverso entre 5 e 10 vezes;
32. Coloque a amostra colhida em estante para tubos de modo que fique na posio vertical;
33. Descarte a seringa em recipiente para materiais contaminados;
34. Verifique se o local da puno parou de sangrar. Caso continue o sangramento troque o algodo ou a gaze e
oriente para que o usurio continue pressionando o local da puno at parar o sangramento;
35. Cubra o local da puno com curativo oclusivo e oriente ao usurio para mant-lo por, no mnimo, 15
minutos;
36. Retire as luvas e descarte em recipiente prprio;
37. Quando o usurio estiver usando roupa de manga longa, verifique se a manga est prendendo a circulao
e atuando como um garrote. Caso isto acontea desdobre a manga;
Orientaes e encaminhamentos finais

38. Oriente o usurio a no dobrar o brao e no carregar qualquer peso no brao no qual foi feita a puno por,
no mnimo, uma hora;
39. Certifique-se que o usurio est se sentindo bem e em condies de se locomover sozinho;
40. Entregue a ele o comprovante de coleta;
41. Identifique data, horrio e responsvel pela coleta.
42. Encaminhe as amostras o mais rpido possvel para o setor de processamento de amostras.
28
2. Higienize as mos
1. Confira os materiais
Preparao dos
materiais e do
profissional
4. Acomode-o na
cadeira
Recepo
10. Cole as etiquetas

nos tubos
9. Pea que confirme

os dados da
etiqueta
8. Ordene o material
7. Informe os
procedimentos da
coleta
6. Verifique os dados
na requisio e
etiquetas e confirme
com o documento
5. Solicite documento
de identidade com
foto
Identificao
do usurio e do
material
20. Garroteie o brao e

solicite que feche a
mo
19. Faa antissepsia do

local
18. Abra e retire

a agulha da
embalagem e
encaixe-a na seringa
17. Abra e retire

a seringa do
envelope
16. Analise possveis

locais de puno e
escolha calibre da
agulha
15. Verifique a manga
14. Posicione o brao
13. Mostre as
embalagens lacradas
12. Utilize seringas

e agulhas
descartveis
11. Calce as luvas
Preparao
para a coleta
25. Repita o
procedimento na
quantidade de tubos
necessria
24. Coloque a amostra

colhida na estante
para tubos
25. Execute o
procedimento o mais
rpido possvel
bolhas e espuma
24. Evite formao de
23. Aspire o sangue em

volume suficiente
22. Solte o garrote

quando o sangue
fluir e pea para
abrir a mo
21. Retire a capa da

agulha e faa a
Coleta

e desdobre-a se for
necessrio
36. Retire as luvas e

descarte
curativo oclusivo
35. Cubra o local com
parou de sangrar
34. Verifique se o local
33. Descarte a seringa em

recipiente apropriado
para tubos

colhida em estante
31. Feche o tubo e

homogeneze por
inverso entre 5 e 10
vezes
sangue da seringa
30. Abra a tampa do

tubo e transfira o
recipiente apropriado
29. Descarte a agulha no
esticado, sem esfregar o local por

3 minutos
28. Oriente que o usurio

mantenha o brao
27. Acione o dispositivo

de segurana da agulha
pressione o local
26. Retire a agulha e

solicite que o usurio
Finalizao
da coleta
42. Encaminhe as
amostras o mais
rpido possvel
41. Identifique
data, horrio e
responsvel pela
coleta
coleta
40. Entregue o
comprovante de
39. Certifique-se
que est bem e
em condies de
locomover-se
por 1 hora
38. Oriente o usurio

a no dobrar o
brao nem carregar peso
Orientaes e
encaminhamentos
finais
Diagrama passo a passo da coleta de sangue com seringa e agulha
29

puno venosa sistema a vcuo
Passo a passo da coleta pelo sistema a vcuo
Preparao do material e do profissional
1. Confira se voc dispe de todos os materiais que ir utilizar;
2. Higienize suas mos;
Recepo do usurio
3. Chame o usurio pelo nome completo. Trate-o sempre com respeito, cumprimentando-o de modo
simptico e cordial;
4. Pea que se acomode confortavelmente na cadeira de coleta;
Identificao do usurio e dos materiais

5. Solicite ao usurio um documento de identidade com foto;
6. Verifique se os dados do documento so os mesmos registrados na requisio e nas etiquetas e devolva
o documento a ele;
7. Informe ao usurio como ser o procedimento de coleta;
8. Ordene o material que ser usado na coleta;
9. Pea ao usurio que confirme seus dados na etiqueta;
10. Cole as etiquetas nos tubos;
Preparao da coleta
11. Calce as luvas;
12. Posicione o brao do usurio;
13. Verifique se a manga est prendendo a circulao e atuando como um garrote. Caso isso acontea
desdobre a manga;
14. Analise os possveis locais para a puno venosa e escolha o calibre da agulha;
15. Mostre ao usurio a embalagem lacrada da agulha de coleta e abra-a, expondo apenas a parte que ser
colocada no adaptador;
16. Rosqueie a agulha no adaptador;
17. Faa a antissepsia do local escolhido para a puno;
18. Garroteie o brao do usurio e solicite que ele feche a mo;
Coleta
19. Retire a capa da agulha e imediatamente faa a puno com o bisel da agulha virado para cima;
Ateno
Caso exista flacidez no local da coleta, estique a pele
com os dedos para fixar a veia.
30
20. Insira o tubo no adaptador e pressione-o at perfurar a tampa do tubo;

21. Quando o sangue comear a fluir solte o garrote e pea ao usurio que abra a mo;
22. Troque o tubo quando o sangue parar de fluir para seu interior;
23. Enquanto o tubo seguinte est sendo completado, homogeneze o tubo anterior, invertendo-o
suavemente entre 5 e 10 vezes;
24. Coloque a amostra colhida em estante para tubos, de modo que fique na posio vertical;
25. Repita o procedimento anterior, sucessivamente, at ter colhido todos os tubos necessrios;
Finalizao da coleta
26. Retire o ltimo tubo;
27. Remova a agulha da veia e solicite que o usurio faa presso sobre o local da puno com o auxlio de uma
gaze ou algodo seco;
28. Acione imediatamente o dispositivo de segurana da agulha;
29. Oriente o usurio para que mantenha o brao esticado e o local da puno pressionado, sem esfregar,
por no mnimo trs minutos;
30. Descarte imediatamente a agulha em recipiente apropriado para materiais perfurocortantes, adotando
todos os cuidados de biossegurana;
31. Verifique se o local da puno parou de sangrar. Caso continue o sangramento troque o algodo ou a gaze
e oriente para que o usurio continue pressionando o local da puno at parar o sangramento;
32. Cubra o local da puno com curativo oclusivo e oriente ao usurio para mant-lo por, no mnimo, 15
minutos;
33. Retire as luvas e descarte em recipiente prprio;
34. Quando o usurio estiver usando roupa de manga longa, verifique se a manga est prendendo a circulao
e atuando como um garrote. Caso isto acontea desdobre a manga;
Orientaes e encaminhamentos finais

35. Oriente o usurio a no dobrar o brao e no carregar qualquer peso no brao no qual foi feita a puno por,
no mnimo, uma hora;
36. Certifique-se que o usurio est se sentindo bem e em condies de se locomover sozinho;
37. Entregue a ele o comprovante de coleta;
38. Identifique na requisio a data, o horrio e o responsvel pela coleta;
39. Encaminhe as amostras o mais rpido possvel para o setor de processamento de amostras.
Ateno
Colete o volume de sangue indicado para cada tubo.
Tubos com volume de sangue insuficiente ou em
excesso alteram a proporo de sangue/anticoagulante,
podendo levar hemlise ou coagulao da amostra.
31
2. Higienize as mos
1. Confira os
Preparao dos
materiais e do
profissional
4. Acomode-o na
cadeira
Recepo
10. Cole as etiquetas

nos tubos
9. Pea que confirme

os dados da
etiqueta
8. Ordene o material
7. Informe os
procedimentos da
coleta
6. Verifique os dados
na requisio e
etiquetas e confirme
com o documento
5. Solicite
documento de
identidade com
foto
Identificao
do usurio e do
material
18. Garroteie o brao e

solicite que feche a
mo
17. Faa antissepsia do

local
16. Rosqueie a agulha

no adaptador
15. Mostre embalagem

lacrada e abra-a
escolha calibre da agulha
14. Analise possveis

locais de puno e
12. Posicione o brao

do usurio
11. Calce as luvas
Preparao
para a coleta
25. Repita o
procedimento
na quantidade de
tubos necessria

colhida na estante
para tubos
23. Homogeneze o
tubo cheio retirado,
com inverso de 5
a 10 vezes
22. Troque o tubo

quando o sangue
parar de fluir
21. Solte o garrote

quando o sangue
20. Insira o tubo

no adaptador e
perfure a tampa
puno
19. Retire a capa da

agulha e faa a
Coleta
34. Verifique
a manga e
desdobre-a se for
necessrio
33. Retire as luvas e

descarte

curativo oclusivo
31. Verifique se o local

parou de sangrar
30. Descarte a
agulha no
recipiente
apropriado
esfregar o local por 3 minutos
29. Oriente que o

usurio mantenha o
brao esticado, sem
28. Acione o
dispositivo de
27. Retire a agulha e

solicite que o usurio
pressione o local
26. Retire o ltimo tubo
Finalizao
da coleta
39. Encaminhe as
amostras o mais
rpido possvel
38. Identifique
data, horrio e
responsvel pela
coleta
coleta
37. Entregue o
comprovante de
36. Certifique-se
que est bem e
em condies de
locomover-se
35. Oriente o usurio a

no dobrar o brao
nem carregar peso
por 1 hora
Orientaes e
encaminhamentos
finais
Diagrama passo a passo da coleta pelo sistema a vcuo
32
Amostras para quantificao de carga viral

e contagem de linfcitos
Uma das respostas do sistema imune a infeces realizada por clulas sanguneas como, por exemplo, os
linfcitos T que possuem receptores do tipo CD4+ e CD8+. O HIV se multiplica no interior dos linfcitos T CD4+/
CD8+ causando sua destruio. Com o aumento da replicao dos vrus, ocorre uma reduo da quantidade de
linfcitos T CD4+/CD8+, por isso importante quantificar estas clulas e os vrus circulantes (quantificao do RNA
viral ou carga viral).
Com essas medidas possvel fazer a avaliao da progresso da infeco, definindo o momento no qual se
deve iniciar o tratamento e, ainda, permitindo o monitoramento da resposta ao tratamento instaurado.
Amostras para Quantificao de Carga Viral RNA viral

Amostra utilizada
Plasma, obtido a partir de sangue total colhido com o anticoagulante EDTA.
Quantidade: em crianas e adultos colha sempre dois tubos. Cada um deve conter entre 3 e 5 mL de
sangue.
Em algumas situaes como, por exemplo, no caso de recm-nascidos o volume pode ser menor desde que
coletado em tubos para coletas peditricas, com volume de 2 mL cada.
Preparo da amosta
Opo 1: aps a coleta, o mais rpido possvel, centrifugue o sangue total entre 2.500 e 3.500 rpm, durante
15 minutos, para obter o plasma;
Opo 2: o sangue coletado pode permanecer em temperatura entre 18C e 25 C por um perodo mximo
de 6 horas. Neste perodo a amostra deve ser centrifugada para obteno do plasma;
Ateno
No submeta o plasma a processos de filtrao ou centrifugao
adicionais com o intuito de diminuir a turbidez.
Em seguida, com auxlio de uma ponteira estril, sem ressuspender as clulas, transfira pelo menos 1 mL do
plasma para tubos estreis livres de enzimas que degradam o RNA (RNAses) e o DNA (DNAses). Esses tubos
devem estar previamente identificados.
Observao:
Se a separao do plasma no for feita no local de coleta, os tubos com sangue total devem ser enviados, em,
no MXIMO, quatro (4) horas ao laboratrio.
Esse tempo deve ser rigorosamente respeitado, pois o plasma tem que ser obtido em at 6 horas aps a
coleta do sangue total. Se o sangue total for transportado para separao no laboratrio de carga viral, reserve duas
horas para que o transporte at o laboratrio, a recepo das amostras, a conferncia das BPA-I (Boletim de Produo
Ambulatorial individualizado) e a separao do plasma ocorram dentro do tempo limite (6 horas) estabelecido para
que a amostra tenha a qualidade necessria para o exame de quantificao da carga viral.
33
Armazenamento da amostra
Caso o teste no seja realizado imediatamente, fracione o plasma em alquotas e faa seu congelamento. Utilize
somente tubos estreis de polipropileno, livres de RNAses e DNAses, com tampas tipo flap ou de rosca.
Com relao ao tempo, o plasma pode ser armazenado:
Por no mximo 72 horas a menos 20C;
Por perodos mais longos, o plasma deve ser conservado em temperatura entre menos 70C e menos 80C.
Quanto ao volume de cada alquota, estas devem conter a quantidade necessria para a realizao de um
teste. Leia as instrues do fabricante do kit ou consulte o laboratrio que vai realizar os testes para saber o volume
adequado.
Transporte das amostras

Caso as amostras sejam analisadas em outro local, as alquotas de plasma devem ser transportadas congeladas
em caixas apropriadas contendo gelo seco em quantidade suficiente para manter a temperatura adequada durante
todo o tempo do transporte.
Amostras para contagem de linfcitos T CD4 +/CD8 +

Amostra utilizada
Sangue total: de crianas e de adultos colha sempre um tubo de 3 a 5 mL de sangue com o anticoagulante
EDTA. Em algumas situaes como, por exemplo, no caso de recm-nascido o volume pode ser menor desde
que coletado em tubo para coleta peditrica com volume de 2 mL cada.
Cuidados com a amostra

O sangue total coletado para a contagem de clulas T CD4+/CD8+ no pode ser colocado em geladeira ou
congelador, pois baixas temperaturas causam ruptura das clulas e consequentemente hemlise.
Transporte de amostras
As amostras podem ser transportadas at outro local desde que o perodo entre a coleta e a realizao da
contagem no ultrapasse 48 horas. A temperatura das amostras deve permanecer entre 20 e 25C.
Devem estar escritos na etiqueta de cada tubo os dados de identificao da amostra e a data e horrio em que
foi feita a coleta, para possibilitar a avaliao de viabilidade da amostra.
Ateno
No envie amostras nos finais de semana ou feriados no local
de destino.
Antes do envio das amostras, faa contato com o laboratrio
que ir realizar a contagem de linfcitos T CD4+/CD8+ para
saber se pode enviar ou para informar o envio do material.
Lembre-se
As amostras para a contagem de linfcitos T CD4+/CD8+ e para
a quantificao da carga viral so infectantes, pois pertencem a
usurios sabidamente infectados pelo HIV.
Use sempre os Equipamentos de Proteo Individual EPI como
medida de biossegurana e para evitar a contaminao das amostras
com Rnases ou Dnases. Essas enzimas esto presentes nas mos,
pele ou cabelos provenientes de clulas rompidas destes tecidos.
34
Coleta de sangue em papel filtro
Coleta de Sangue em Papel-Filtro

A coleta de sangue em papel filtro utilizada h muitos anos nos estudos de triagem neonatal de doenas
metablicas congnitas e bem sucedida na triagem de vrias infeces como, por exemplo, a infeco pelo HIV.
As amostras de sangue coletadas em papel-filtro vm sendo cada vez mais utilizadas no diagnstico
laboratorial em virtude da facilidade da coleta, do transporte, da estocagem e do processamento.
As amostras coletadas em papel-filtro so conhecidas como DBS.
Esta uma sigla que em ingls significa Dried Blood Spot ou seja
amostra de sangue seco.
Vantagens da coleta em papel-filtro

A coleta de amostras de sangue em papel-filtro apresenta vantagens nicas para programas de triagem de
doenas infecciosas e anlises epidemiolgicas de grande escala.
Uma pequena quantidade de sangue, obtida facilmente atravs de uma picada no dedo, suficiente para
a realizao de vrios exames.
As amostras secas em papel-filtro no exigem refrigerao, podem ser encaminhadas, inclusive pelos
Correios, reduzindo significativamente os custos do transporte.
Caractersticas do papel-filtro
Para a coleta de amostras em papel-filtro somente podem ser utilizados os papis com fibras com 100%
de algodo, com pH entre 5,7 e 7,5, que possuam a gramatura e uma malha especial que atenda a especificaes
definidas pelo fabricante do conjunto diagnstico que ser utilizado para fazer o exame. A gramatura e a malha
adequadas permitem a absoro dos volumes de sangue necessrios realizao de vrios exames, inclusive
exames sorolgicos e de biologia molecular.
Esses papis so diferentes de outros comumente utilizados nas filtragens feitas em laboratrio.
Ateno
Os profissionais que realizam coleta e manipulao de DBS esto
sob os mesmos riscos biolgicos da coleta de sangue.
Siga as mesmas precaues de biossegurana utilizadas para
outros mtodos de coleta de sangue.
35
Passo-a-passo da coleta em papel-filtro por puno digital

Preparao dos materiais
1. Confira se voc dispe de todos os materiais que ir utilizar:
Carto de coleta com crculos demarcados em papel-filtro e rea para identificao da amostra;
Luvas;
Gaze ou algodo hidrfilo;
lcool etlico 70 % (p/p);
Lanceta;
Recipiente com paredes rgidas para descarte de material perfurocortante;
Caneta esferogrfica;
Suporte para secagem.
Figura 1 Carto de coleta com crculos demarcados em papel filtro.
Identificao do usurio e do material

2. Confira os dados do usurio, verificando essas informaes em um documento de identidade que
contenha foto;
3. Identifque o carto;
4. Informe ao usurio como ser o procedimento;
5. Pea ao usurio que confira os seus dados no carto de coleta;
Preparao para coleta

6. Higienize suas mos e calce as luvas;
7. Antes de iniciar a coleta, sempre que possvel, pea para o usurio que higienize as mos;
8. Observe os dedos do usurio e escolha preferencialmente a ponta do dedo mdio, anelar ou indicador ou
o dedo que tiver menos calosidade;
Dedo mnimo
Dedo anelar
Dedo mdio
Dedo indicador
Polegar
Figura 2 Nomes dos dedos da mo.
9. Se a mo do usurio estiver muito fria, o fluxo de sangue estar diminudo, dificultando a coleta. Aquea
a mo do usurio massageando-a ativamente ou, ainda, caso esteja disponvel, utilize uma toalha
umedecida em gua quente;
10. Posicione-se em frente ao usurio;
11. Segure a mo do usurio com o lado da palma para cima, numa altura abaixo do cotovelo. Pressione
levemente a mo na direo do punho para o dedo no qual ser realizada a coleta;
12. Faa a antissepsia no local de coleta do dedo com gaze ou algodo embebidos em lcool 70% (p/p) ;
13. Deixe o lcool secar espontaneamente;
36
14. Posicione a lanceta na parte lateral da ponta do dedo;
Figura 3 Lanceta.
Coleta
15. Pressione firmemente a lanceta contra o dedo e perfure a pele;
16. Despreze a lanceta em recipiente para descarte de material perfurocortante;
17. Pressione o dedo do usurio prximo ao local da puno para promover a formao da gota de sangue;
18. Mantenha a mo do usurio levemente inclinada para evitar que a gota escorra;
Figura 4 Coleta em papel filtro com a mo inclinada.
19. Coloque o carto de coleta prximo rea puncionada, sem tocar no dedo. Faa uma leve presso na base
do dedo at que se forme uma grande gota;
20. Deixe pingar uma gota dentro do primeiro crculo impresso no carto de coleta. No encoste o
papel na gota. Voc pode pingar mais uma gota caso o crculo no tenha sido totalmente preenchido.
Recomendao: Aplique o sangue apenas em um lado do papel-filtro o que contm o crculo impresso;
21. Repita a leve presso no dedo e aplique uma gota no segundo crculo, impresso no carto;
22. Preencha todos os crculos repetindo o procedimento acima: leve presso no dedo at a formao da gota
e colocao no crculo no papel-filtro;
Finalizao da coleta
23. Aps preencher todos os crculos, cubra com gaze ou algodo o local puncionado no dedo e solicite que o
usurio faa presso no local;
24. Verifique se o fluxo de sangue cessou. Caso contrrio, solicite que o usurio mantenha a presso por mais
tempo.
25. Cessado o fluxo, retire o algodo ou a gaze do dedo do usurio e descarte no recipiente para material
biolgico.
Ateno
No toque na rea dentro do crculo antes e aps a coleta de sangue.
No permita que gua, antisspticos, talco das luvas ou outros
produtos entrem em contato com o carto de coleta antes ou
aps o uso.
37
Diagrama do passo-a-passo da coleta de sangue por puno digital em papel filtro

Preparao dos
materiais e do
profissional
1. Confira os
materiais
Identificao
do usurio e do
material
2. Confira os dados
do usurio em
documento com
foto
3. Identifique o
carto
4. Pea que confirme
os dados no
carto de coleta
Preparao
para a coleta
5. Higienize suas
mos. Calce as luvas
6. Pea para o
usurio higienizar
as mos
7. Observe os dedos
do usurio e escolha
um deles para puno
8. Aquea a mo do
usurio, se necessrio
9. Posicione-se em
frente ao usurio
10. Segure a mo e
pressione-a na
direo do punho
para o dedo
11. Faa antissepsia
do local
12. Deixe o lcool
secar
13. Posicione a
lanceta na lateral
do dedo
Coleta
14. Pressione
firmemente o dedo
e perfure a pele
15. Descarte a lanceta
em recipiente
apropriado
16. Pressione o dedo
prximo ao local
para formao da
gota de sangue
Finalizao
da coleta
gaze e solicite que
faa presso
23. Verifique se o
fluxo cessou
24. Cessado o fluxo,
descarte a gaze
em recipiente para
materiais biolgicos
17. Mantenha a
mo levemente
inclinada para o
sangue escorrer
18. Coloque o carto
prximo ao local,
sem toc-lo
19. Deixe pingar a
gota no 1 circulo
do carto
20. Repita a presso

e preencha o 2
crculo do carto
21. Repita o
procedimento at
preencher todos os
crculos
Coleta por puno venosa e aplicao em papel-filtro

Pode ser realizada coleta com seringa e agulha ou com sistema a vcuo. Siga os seguintes passos:
Colete sangue total em tubo contendo o anticoagulante EDTA.
Homogeneze cada tubo entre 5 e 10 vezes; e
Pipete 50L de sangue total no centro de cada crculo do carto. Cuide para que a rea do carto contendo
o sangue no toque em nada.
38
Validao da amostra em papel-filtro

Tenha certeza de que todo o crculo est preenchido e com bordas regulares.
Observe se os limites do sangue coletado coincidem com os limites dos crculos impressos no papel-filtro.
Respeite este limite, pois importante evitar o excesso de sangue no papel.
Caso haja qualquer dvida quanto qualidade da amostra coletada, repita o procedimento de coleta em
um novo carto de coleta.
Secagem das amostras colhidas em papel-filtro

As amostras de sangue colhidas em papel-filtro devem secar em temperatura ambiente. Os cartes de coleta
devem ser colocados em posio horizontal, suspensos e separados um do outro.
Alguns cartes contm uma extremidade que pode ser dobrada e permite que as amostras fiquem suspensas
sem tocar na superfcie de secagem.
Ateno
As partes do carto que contm as amostras no podem ser
tocadas. O carto deve ficar suspenso em local ventilado at a
secagem completa da amostra.
Figura 5 Secagem das amostras de sangue.
Deixe o papel-filtro com a amostra pelo menos 3 horas em temperatura ambiente, em local arejado, distante
de fontes de calor e da luz solar. Esse tempo varia de acordo com a temperatura e umidade do local de secagem.
Em regies midas a completa secagem pode levar at 24 horas.
Acondicionamento das amostras de papel filtro

Depois de secas, as amostras devem ser acondicionadas individualmente em um envelope de plstico ou de
alumnio, contendo um sach dessecante de slica gel. Utilize envelope com fecho do tipo zip lock.
Ateno
No utilize qualquer equipamento para apressar a secagem,
como, por exemplo, estufa ou secador de cabelo.
39
Para vedar o envelope, pressione a embalagem de forma a retirar a maior quantidade possvel de ar de dentro
e ento feche corretamente a embalagem.
Quando o envio de vrios cartes em um mesmo envelope no puder ser evitado, existem trs maneiras de
proceder, para evitar a contaminao cruzada entre as amostras:
Pegue dois cartes, gire 180, de

modo que as amostras nos crculos
fiquem em posies opostas, como
indicado na foto ao lado.
Coloque entre os cartes de coleta,

uma folha de papel-vegetal, ou
papel-manteiga, de modo que uma
amostra no encoste na outra.
No caso de carto com extremidade

dobrvel, a dobra j permite que a
amostra de um carto no contamine
a de outro.
Figura 6 Formas de acondicionar vrios cartes em um envelope.
40
Armazenamento das amostras em papel-filtro

Amostras secas e bem acondicionadas podem ser armazenadas em temperatura ambiente, desde que fiquem
longe de fonte de luz solar direta e em baixa umidade. Para reduzir a umidade, coloque no interior do envelope um
ou mais sachs dessecantes.
Para armazenar por perodos de at dois anos, as amostras devem permanecer em geladeira.
O armazenamento por tempo superior a dois anos pode ser realizado caso a amostra permanea a -20C.
Condies inadequadas de armazenamento podem comprometer a integridade da amostra.
Ateno
O sach dessecante no deve ser reutilizado, pois pode estar
contaminado por uma amostra.
Ao manipular o sach dessecante j utilizado use EPI, pois um
material potencialmente infectante.
Transporte das amostras em papel-filtro

As amostras devem ser transportadas em temperatura ambiente.
Envelopes contendo amostras estocadas em geladeira ou a -20C devem permanecer fechados e colocados
em temperatura ambiente. Quando atingirem a temperatura ambiente, devem ser abertos e o sach dessecante
substitudo antes do seu envio.
O envelope contendo os cartes deve ser acondicionado em outro envelope mais espesso, endereado e
selado com cola de boa qualidade e remetido para o laboratrio que ir realizar as anlises.
Ateno
Comunique ao laboratrio o envio das amostras.
41
Transporte de amostras
Orientaes para transporte de sangue, soro ou plasma
As Diretrizes para o Transporte Seguro de Substncias Infecciosas e Espcimes para Diagnstico da
Organizao das Naes Unidas ONU orientam que a embalagem para o transporte seguro composta por
trs camadas:
Recipiente primrio: composto pelo tubo com a amostra, com tampa que permita a completa vedao do
contedo. Deve ser de material resistente a impactos, sem rachaduras ou trincas e devidamente identificado.
Ao ser transportado deve ser envolvido em material que tenha capacidade de absorver todo o seu contedo
em caso de quebra.
Recipiente secundrio: deve ser de material rgido, impermevel e prova de vazamentos para proteger
o(s) recipiente(s) primrio(s).
Recipiente tercirio ou embalagem externa: acondiciona o recipiente secundrio e protege o seu contedo
de fatores do ambiente, tais como, batidas, amassados, chuva, etc. durante seu transporte. Alm disso, deve
conter informaes da identificao do contedo, dados do destinatrio e do remetente.
Figura 1 Cuidados no transporte.
Amostras biolgicas como substncias infectantes.

As amostras biolgicas G como sangue, soro ou plasma so
classificadas como de risco 2. So assim classificadas porque podem
conter agente biolgico capaz de provocar infeco ou doena
em pessoas ou animais, com risco limitado de disseminao e com
disponibilidade de tratamento e profilaxia.
O que define o Risco Biolgico a probabilidade da exposio
a agentes biolgicos G que podem estar presentes em amostras
biolgicas.
Saiba mais
Sobre detalhes das normas vigentes para o transporte de amostras
biolgicas, consulte:
Resolues 420/2004 e 701/2004 Transporte de Produtos
Perigosos da Agncia Nacional de Transportes Terrestres
ANTT e sua atualizao.
No site http://www.antt.gov.br clique em Legislao
Transporte de Cargas/Produtos Perigosos/Nacional.
Por taria 472, de 09 de maro de 2009, Resoluo
GMC N 50/08 do Ministrio da Sade. Regulamento
Tcnico Mercosul para Transporte de Substncias Infecciosas
e amostras biolgicas entre os Estados Partes do Mercosul.
No site http://portal.saude.gov.br/saude/
42
Glossrio
Agentes biolgicos: so bactrias, vrus, ricketsias, fungos e protozorios, geneticamente modificados ou

no, as culturas de clulas, as toxinas e os prons.
Amostras biolgicas: so produtos obtidos diretamente de seres humanos ou animais como, por exemplo,
sangue e seus componentes, secrees, excrees, tecidos, clulas, fluidos orgnicos e restos mortais
transportados com fins de estudo, diagnstico, investigao, tratamento e/ou preveno de enfermidades,
controle de qualidade e outros. Amostras biolgicas coletadas em laboratrio podem conter substncias
infectantes.
Emolientes: so combinaes de gua, leos e gorduras destinadas a ajudar a hidratar a pele e restaurar a
oleosidade perdida devido ao ressecamento.
Estase venosa: situaes em que h diminuio da velocidade da circulao do sangue.
Estenose: um estreitamento anormal de um vaso sanguneo ou outro rgo do corpo.
Fase pr-analtica: fase que se inicia com a solicitao da anlise, passando pela obteno da amostra e
finda ao se iniciar a anlise propriamente dita.
Fibrina: um agregamento das plaquetas na regio onde houve rompimento dos vasos sanguneos, essa
protena produz uma rede que estanca o sangue, pois forma o cogulo composto por hemceas, leuccitos
e plaquetas, que ficam presos na rede de fibrina.
Hematoma: o acmulo de sangue em um rgo ou um tecido, geralmente bem localizado e que pode
ser decorrncia de traumatismo, alteraes hematolgicas ou outras causas.
Hemlise: o resultado do rompimento da membrana da hemcia causando liberao de hemoglobina.
Pode ser visualizado pelo aspecto avermelhado do soro ou plasma.
Homnimos: quem tem o mesmo nome que outra pessoa.
Lavatrio: pea sanitria destinada exclusivamente lavagem das mos (RDC ANVISA 50/2002).
Lipemia: a presena de grande quantidade de lipdios (gordura) no sangue causando turvao da amostra.
Pode ser visualizado pelo aspecto turvo do soro ou plasma.
Materiais Biolgicos: lquidos, secrees, excrees, e fragmentos de tecidos obtidos do corpo humano
ou de outros animais.
Nome social: o nome pelo qual pessoas preferem ser chamadas cotidianamente, em contraste com o
nome oficialmente registrado que no reflete sua identidade de gnero.
Norma ISO 6710.2: uma norma internacional que padroniza os requisitos e metodologias para a produo
de tubos de coleta de sangue a vcuo.
RDC 50/2002: resoluo n 50, de 21 de fevereiro de 2002, que dispe sobre o Regulamento Tcnico para
planejamento, programao, elaborao e avaliao de projetos fsicos de estabelecimentos assistenciais
de sade. Para obter o documento na ntegra, acesse o site da Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria
(ANVISA) http://www.anvisa.gov.br e clique no link LEGISLAO.
Rastreabilidade: a capacidade de recuperao do histrico, da aplicao ou da localizao daquilo
que est sendo considerado, por meio de identificaes registradas. Ela importante porque possibilita
acompanhar os processos, encontrar possveis erros, identificar a sua origem, a sua causa, corrigi-lo e evitar
sua repetio. (Fonte: RDC/ANVISA n 302 de 13 de outubro de 2005).
Substncias infectantes: para os fins de transporte, entende-se por substncias infectantes as que se sabe
ou se suspeita que contenham agentes patgenos tais como bactrias, vrus, ricketsias, parasitas e fungos
ou outros agentes tais como prons, que podem causar enfermidades nos animais e nos seres humanos.
Transfixao: quando h perfuramento do vaso sanguneo ou outro rgo, atravessando de lado a lado.
43
Referncias Bibliogrficas
ANDRIOLO, A; BALLARATI, C.A.; BARBOSA, I.V.; MARTINS, A.R.; MELO, M.R.; MENDES, M.E.; ROMANO, P.; SUMITA, N.M.;
TRINDADE, P.A. Recomendaes da Sociedade Brasileira de Patologia Clnica/ Medicina laboratorial para
coleta de sangue venoso 2. ed. So Paulo: Minha Editora, 2010.
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de Vigilncia Sanitria. Braslia: Anvisa, 2007.
HENRY, J. B. Diagnsticos clnicos e tratamento por mtodos laboratoriais. 20. ed. So Paulo (SP): Manole, 2008.
xvii,1734p. ISBN 9788520415115
JANICE L. FULS; NANCY, D. RODGERS; GEORGE, E. FISCHLER; JEANNE M. HOWARD; MONICA PATEL; PATRICK L.
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da higienizao das mos. Disponvel em: www.anvisa.gov.br. Acesso em: 20 de julho de 2010.
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2010.
44
Crditos e autoria
MINISTRIO DA SADE
MINISTRO DE ESTADO DA SADE
Jos Gomes Temporo
SECRETARIA DE VIGILNCIA EM SADE
Gerson Oliveira Penna
DEPARTAMENTO DE DST, Aids e Hepatites Virais
Dirceu Bartolomeu Greco
UNIDADE DE LABORATRIO - ULAB
Lilian Amaral Inocncio
COORDENAO DO TELELAB - ULAB
Nvea Orm de Oliveira Guedes
Nbia Gonalves Dias
COORDENAO DE PRODUO DO PROJETO TELELAB 2009/2010
Maria Luiza Bazzo UFSC
AUTORES:
Elaine Sanae Sumikawa
Elizabeth Martins Hermes
Flvia Martinello
Leonardo Rapone da Motta
Lilian Amaral Inocncio
Luiz Alberto Peregrino Ferreira
Maria Luiza Bazzo
Miriam Franchini
REVISO TCNICA
Roberto Ferreira de Melo
PROJETO GRFICO, EDIO E DIAGRAMAO
Virtual Publicidade Ltda
DESIGN INSTRUCIONAL
Luciane Sato
ILUSTRAES E FOTOS INDITAS
Maurcio Muniz
FOTOS DOS VDEOS
Projeto Telelab 2009/2010
TIRAGEM: Tiragem: 1 edio 2010 6000 exemplares
permitida a reproduo parcial ou total desde que citada a fonte.
PRODUO, DISTRIBUIO E INFORMAES:
Ministrio da Sade
Secretaria de Vigilncia em Sade
Departamento de DST, Aids e Hepatites Virais
Coordenao Geral de Sangue e Hemoderivados
0800 61 24 36
www.aids.gov.br/telelab
telelab@aids.gov.br ou telelab.sangue@aids.gov.br
45

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Figura 1 Mobilirios e acessrios para coleta de amostras.

Orientao para a coleta

Exames sorolgicos para o diagnstico

No h necessidade de jejum se a coleta

Em situaes de emergncia, como

Deve-se realizar a coleta do sangue

Deve-se realizar a coleta entre as mamadas.

Outros fatores de Interferncia

Podem interferir em alguns casos,

Ingesto de caf No interfere.

Outros exames laboratoriais

A ingesto de um copo, ou menos, de gua no interfere na

Exames de sangue, como hemograma e

Devem ser colhidos preferencialmente no

Exames sorolgicos e quantificao da

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Figura 2 Materiais para coleta a vcuo.

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Normas e regulamentaes para agulhas e tubos

Possuem 0,8 mm de dimetro

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Agulhas para coletas a vcuo

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Caractersticas dos tubos:

Proporo de EDTA recomendada para cada mL de sangue:

EDTA dissdico (EDTA Na2 2H2O)

EDTA dipotssico (EDTA K2 2H2O)

EDTA tripotssico (EDTA K3)

Tubos para coleta a vcuo:

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As cores das tampas dos tubos a vcuo:

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Qual a funo do gel separador?

Armazenamento de agulhas e tubos

Figura 8 EPI de uso freqente na coleta de sangue.

Higienizao das mos

O que utilizar para higienizar as mos

Quando as mos devem ser higienizadas

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Como higienizar as mos

1. Molhe as mos com gua.

2. Cubra as mos com a