Escolar Documentos
Profissional Documentos
Cultura Documentos
CARBOIDRATOS EXPERIMENTAL
META
Introduzir o aluno ao laboratrio de biomolculas. Familiarizar o aluno com as tcnicas de
caracterizao de carboidratos em laboratrio.
OBJETIVOS
Ao final desta aula, o aluno dever:
saber identificar se uma substncia ou no um carboidrato. Tambm dever ser
capaz de distinguir entre acares redutores e no redutores, entre aldoses e cetoses e
entre mono e polissacardeos. Por fim o aluno deve saber extrair e caracterizar o amido.
PR-REQUISITOS
Aula 01 de carboidratos, reaes de aldedos e cetonas.
INTRODUO
TESTE DE MOLISH
36
Carboidratos Experimental Aula 2
37
Qumica de Biomolculas
ATIVIDADES
Materiais: Reagentes:
Procedimento
38
Carboidratos Experimental Aula 2
2. Teste de Fehling
O teste de Fehling foi desenvolvido pelo qumico alemo Hermann
von Fehling para diferenciar aldedos de cetonas. Entretando acabou
tornando-se um reagente geral para acares redutores, pois as cetoses
sofrem rearranjo e tambm do teste positivo (Figura 5). Por muito
tempo foi utilizado para identificar a presena de acar na urina, com
a finalidade de diagnosticar Diabetes. O reagente composto de duas
solues, a primeira de CuSO4.5H2O e a segunda de sal de Rochelle
(tartarato duplo de sdio e potssio KNaC4H4O6.4H2O) em meio
bsico. O sulfato de cobre (II) reage com a base dando hidrxido, e
39
Qumica de Biomolculas
ATIVIDADES
Materiais: Reagentes:
40
Carboidratos Experimental Aula 2
- 2 Pipetas graduadas de 10 mL - Sacarose (acar de mesa)
- Bquer de 500 mL - Amido (maizena)
- Pegador para tubos de ensaio - Celulose (papel)
- Chapa de aquecimento - gua destilada
- 2 Bales volumtricos de 100 mL - Sulfato de cobre (II)
pentaidratado
- Tartarato de sdio e
potssio
- Hidrxido de potssio
Procedimento
41
Qumica de Biomolculas
2. Teste de Benedict
O teste de Benedict uma modificao do teste de Fehling desenvolvida
pelo qumico americano Stanley Rossiter Benedict e usada para
detectar a presena de acares redutores. Neste teste o tartarato
substituido pelo citrato, o que gera um complexo mais estavel, fazendo
com que uma nica soluo possa ser armazenada sem se deteriorar
(Figura 8). Alm disto, o teste de Benedict muito mais sensvel que o
de Fehling, podendo detectar a presena de carboidratos em menores
concentraes e apresentando uma graduao de cores do azul
(negativo), passando pelo verde, amarelo, laranja e vermelho para as
mais concentradas.
ATIVIDADES
Materiais: Reagentes:
42
Carboidratos Experimental Aula 2
- 5 Esptulas - Frutose
- 2 Pipetas graduadas de 10 mL - Sacarose (acar de mesa)
- Bquer de 500 mL - Amido (maizena)
- Pegador para tubos de ensaio - Celulose (papel)
- Chapa de aquecimento - gua destilada
- Balo volumtrico de 500 mL - Sulfato de cobre (II)
pentaidratado
- Citrato de sdio
undecaidratado
- Carbonato de sdio
Procedimento
43
Qumica de Biomolculas
2. Teste de Tollens
O reagente de Tollens foi desenvolvido pelo qumico alemo Bernhard
Christian Gottfried Tollens (1841-1918), o qual trabalhava com acares.
popularmente utilizado em laboratrios de qumica orgnica para diferenciar
aldedos de cetonas, porm, suas condies bsicas promovem a isomerizao
de cetoses em aldoses impedindo a diferenciao dentre estas. um outro
teste muito til para detectar a presena de acares redutores. O nitrato
de prata inicialmente reage com o hidrxido de amnio precipitanto hi-
drxido de prata. Adio de excesso de hidrxido de amnio dissolve o
precipitado pela formao do on complexo diamin prata. Em presena de
aldedo a prata no complexo reduzida a prata metlica e o aldedo oxi-
dado a carboxilato (Figura 10). A prata metlica sob condies de repouso
e pH adequado se deposita nas paredes do tubo de ensaio formando um
espelho de prata. Caso o pH no esteja bsico o suficiente ou o sistema
seja perturbado, pode-se formar apenas um precipitado cinza, que tambm
caracteriza a presena de acares redutores.
44
Carboidratos Experimental Aula 2
ATIVIDADES
Materiais: Reagentes:
Procedimento
45
Qumica de Biomolculas
2. Teste de Seliwanoff
46
Carboidratos Experimental Aula 2
ATIVIDADES
Materiais: Reagentes:
Procedimento
47
Qumica de Biomolculas
48
Carboidratos Experimental Aula 2
2. Teste de Br2/H2O/H3O+
49
Qumica de Biomolculas
ATIVIDADES
Materiais: Reagentes:
Procedimento
50
Carboidratos Experimental Aula 2
soluo coloidal. Entretanto, qualquer agente desidratante promove a
precipitao do amido, como etanol ou uma soluo saturada de sal.
O amido na verdade formado por dois polmeros da glicose, a amilose
e a amilopectina. A estrutura helicoidal da amilose pode acomodar os
ons triiodeto I3- formando um complexo de transferncia de carga.
Esse o teste mais conhecido para a presena de amido, denominado
teste de Lugol. Para acomodar o triiodeto so necessrias seis voltas
da hlice, sendo que cada volta contm seis unidades de glicose num
total de 36 unidades monomricas, formando um complexo azul. A
amilopectina, por ser ramificada possui hlices menores, formando
um complexo marrom-avermelhado. A maltodextrina, por possuir
no mximo 20 unidades de glicose forma um complexo vermelho. O
aquecimento desfaz a estrutura helicoidal, quebrando o complexo que
perde sua cor, mas ao ser resfriado o complexo retorna.
51
Qumica de Biomolculas
ATIVIDADES
Materiais: Reagentes:
Procedimento
Raspe alguns pedaos da parte interna de uma batata com uma lmina
e transfira para um bquer de 100 mL. Adicione 50 mL de gua destilada
e agite vigorosamente com um basto de vidro. Filtre o material com gaze
recolhendo o filtrado em um bquer de 250 mL, espremendo delicadamente
a gaze. Deixe em repouso por 10 min. Decante o lquido sobrenadante. O
depsito slido no fundo do bquer o amido que foi extrado da batata e
ser utilizado nos procedimentos de caracterizao. Em outro bquer ferva
50 mL de gua destilada. Acrescente 50 mL de gua fria ao amido extrado
e agite de forma a obter uma suspenso. Adicione ento lentamente e com
constante agitao os 50 mL de gua fervente. Aquea at que se forme
uma soluo opalescente. Pipete 1,0 mL da soluo e realize o teste de Molish
para confirmar a extrao de carboidrato. Reserve o restante da soluo.
52
Carboidratos Experimental Aula 2
corrente e observe a cor. Realize o teste de Lugol em um pedao de po, uma
rodela de banana verde e uma rodela de banana madura, pingando uma
gota sobre elas. Reativo de Lugol: Dissolver 1,0 g de iodo e 5,0g de iodeto
de potssio em 100mL de gua destilada.
53
Qumica de Biomolculas
CONCLUSO
RESUMO
PRXIMA AULA
AUTO-AVALIAO
54
Carboidratos Experimental Aula 2
4- Quais testes identificam acares redutores?
5- Qual a diferena entre o teste de Fehling e o teste de Benedict?
6- Qual teste, Fehling ou Benedict mais sensvel para detectar acar na urina
de um diabtico?
7- O teste de Tollens usado para diferenciar aldedos de cetonas, porque ele
no consegue diferenciar aldoses de cetoses?
8- Proponha um mecanismo para a isomerizao da D-frutose em D-glicose
e D-manose em meio bsico:
9- Como o teste de Seliwanoff consegue diferenciar aldoses de cetoses?
10- Porque cetoses no podem ser oxidadas pelo bromo?
11- Porque a celulose no reage com o Lugol?
12- Porque a amilose d colorao azul com Lugol, enquanto a amilopectina
d colorao marrom e a maltodextrina colorao vermelha?
13- Porque o complexo amido/triiodeto desfeito ao aquecer-mos a
amostra?
14- Porque o amido precipita com a adio de etanol?
REFERNCIAS
55