Tema: Determinação de Gordura pelo Método de Bligh-Dyer

1. Objectivo

Determinar gordura em alimentos como leite integral em pó, amendoim ou sementes, usando o
método de Bligh-Dyer.

2. Resumo Teórico

A determinação de gordura, geralmente se baseia nas propriedades dos lipídios. Estes compostos
apresentam propriedades físicas que reflectem seu carácter hidrofóbico, sendo solúveis em
solventes orgânicos. Os solventes orgânicos são, então, usados na determinação de gordura por
extracção.

No caso de alimentos, nem sempre é possível extrair directamente a gordura. Se a amostra for
húmida é necessário proceder uma secagem pois a água impede a penetração total do solvente.
Quando os lipídios se encontram ligados a proteínas ou açúcares, faz-se necessário uma hidrólise
prévia, como no método de Gerber. Em alguns casos, em vez de combinação de hidrólise e
extracção, é suficiente tratar a amostra com uma mistura de clorofórmio e metanol (Método de
Bligh-Dyer).

Para amostras que podem ser extraídas directamente são usados equipamentos que realizam a
extracção por solvente como o aparelho de Soxhlet (extracção intermitente). O extracto obtido
directamente sem tratamento prévio, pode conter, além da gordura, quantidades pequenas de
ceras, resinas, esteróis e carotenóides.

A escolha do método para extracção de lipídios depende do material a ser analisado e da natureza
das subsequentes análises a serem feitas neste extracto lipídico.

O método de Bligh & Dyer pode ser usado para alimentos secos ou para produtos com altos
teores de água (como peixes, vegetais verdes, por ex.). Devido ao uso de solventes polares, há
extracção de todas as classes de lipídios.

Como os lipídios são extraídos sem aquecimento, o extracto pode ser utilizado para avaliar o
grau de deterioração dos lipídios através do índice de peróxidos e da percentagem de ácidos
graxos livres. O teor de carotenóides, de vitamina E, de esteróis e a composição de ácidos graxos
também podem ser determinadas no mesmo extracto.

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3. Parte Experimental

3.1.Equipamentos e Materiais

Alimentos: Amendoim moído ou leite integral em pó ou sementes de abóbora moídas.

Reagentes:

Metanol Solução aquosa de Na2SO4 1,5%

Clorofórmio Na2SO4 anidro

Material e Vidraria:

Pinças Pipeta de 25 mL
Espátulas Proveta de 10 e 20 mL
Bandeja de alumínio limpa e seca Funil de vidro pequeno
Béquer de 100 mL Grade de tubos
Béquer de 50 mL, previamente Papel de filtro
aquecido (a 110o C) e tarado Pera com válvulas
Pipeta volumétrica de 5 mL

Equipamentos:

Agitador rotativo para tubos Dessecador

Centrífuga de baixa rotação Balança analítica
Estufa a 60 – 80o C

3.2.Procedimento

Testar, com clorofórmio, se há vazamento no tubo de 70 ml.

Para produtos com teores de gordura acima de 20% (leite integral em pó, amendoim, sementes,
etc...) pesar entre 2,00 e 2,50g; e para produtos com percentagem menor que 20% pesar entre
3,00 e 3,50g.

É ESSENCIAL QUE AS AMOSTRAS ESTEJAM COMPLETAMENTE MOÍDAS.

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Transferir a amostra pesada para o béquer de 100 mL e adicionar exactamente:

- 10 mL de clorofórmio,

- 20 mL de metanol e

- 8 mL de água destilada.

Tampar hermeticamente e colocar os béqueres num agitador rotativo por 30 min.

Em seguida adicionar exactamente:

- 10 mL de clorofórmio e

- 10 mL da solução de sulfato de sódio 1,5%.

Tampar e agitar por mais 2 minutos. Deixar separar as camadas de forma natural em funil
de decantação ou centrifugar a 1000 rpm por 2 minutos para acelerar a separação.

Descartar a camada superior e retirar cerca de 15 mL da camada inferior (clorofórmio) e

colocar num tubo de 30 ml. Adicionar aproximadamente 1g de sulfato de sódio anidro, tampar e
agitar para remover traços de água que são arrastados na pipetagem da camada inferior. Filtrar
rapidamente num funil pequeno com papel de filtro. A solução obtida deve ser límpida.

Medir exactamente (pipeta volumétrica) 5 ml do filtrado e despejar em béquer de 50 ml

previamente tarado. Colocar o béquer numa estufa a 80oC até evaporar o solvente (15-20
minutos). Resfriar em dessecador e pesar em balança analítica.

4. Cálculos
p⋅4
=
% lipídios totais ⋅100%
g
Onde:
p = peso dos lipídios contido em 5 mL
g = peso da amostra

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5. Análise dos Resultados

- Apresentar os dados obtidos por seu grupo

- Calcular a % de lipídios totais dessas amostras
- Comparar os dados de Tabela de Composição de Alimentos, e se houver diferença entre esses
valores, explicar porque isto ocorreu.

Bibliografia

GOMES, J . C.; OLIVEIRA, G. F. Análises físico-químicas de alimentos. 1ª reimpressão:

2012. Viçosa, MG. Ed. UFV, 2012.

BOLZAN, R. C. Bromatologia, rede e-Tec Brasil, 2013

FERREIRA, D. N. Proteina e Lipideo, Curais Novos – Brasil, 2016

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