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IMUNO-HEMATOLÓGICOS
Clécia M. C. Oliveira
Farmacêutica
2016
Imuno-Hematologia
2. Coleta de amostra;
3. TESTES PRÉ-TRANSFUSIONAIS;
Transfusão de hemocomponentes
plaquetários:
.
Transfusão de hemocomponentes plasmáticos
e crioprecipitado:
.
Modelo de membrana eritrocitária
.
Antígenos de grupos sanguíneos
ANTICORPOS
.
São imunoglobulinas produzidas com a função de
neutralizar e eliminar o antígeno que estimulou a sua
produção.
Classificação:
• Naturais:formam-se sem necessidade de contato
prévio com o antígeno. Ex:Anticorpos ABO
• Imunes:formam-se após ativação do sistema imune.
Ex: transfusão, gravidez
REAÇÃO ANTÍGENO x ANTICORPO
Sistema ABO
Histórico.
1900 – Landsteiner
Grupo A, B e O
.Regra transfusional:
Sistema ABO
•A classificação do sistema ABO tem como princípio a pesquisa dos
.
antígenos ABO fixados na membrana da hemácia e anticorpos Anti-
ABO presentes no soro do paciente.
.
Os anticorpos do Sistema ABO aparecem
espontaneamente após 3-6 meses de idade,
através de estímulos passivos:Bactérias do trato
gastrointestinal +(Açúcares dominantes
semelhantesA/B)
Tem pico de produção no período entre 5-10
anos e diminuição progressiva na velhice.
Passam a ser Ac Naturais/Regulares
TIPAGEM ABO
.
Métodos:
-Lâmina (em desuso)
-Tubo
-Microplacas
-Gel centrifugação Automação
-Biologia molecular
TIPAGEM ABO (Técnica em tubo)
.
TIPAGEM ABO (Técnica em tubo)
reação de hemaglutinação
.
TIPAGEM ABO (Técnica em tubo)
. Intensidade das reações de hemaglutinação
2+
Vários aglutinados pequenos/
sobrenadante avermelhado Alguns aglutinados grandes
+/-
3+
Aglutinados pequenos/ Botão sólido/nenhuma célula livre
sobrenadante avermelhado
1+ 4+
Sistema ABO
O. grupo ABO só pode ser definido se existir
concordância entre os resultados destas duas
provas, que devem ser interpretados da seguinte
forma:
Prova Direta Prova Reversa Antígeno Anticorpo Grupo
(antígeno) (anticorpo) Sanguíneo
Anti-A Anti-B Anti-AB Hm A Hm B
+ - + - + A Anti-B A
- + + + - B Anti-A B
+ + + - - AeB Ausente AB
- Anti-A e Anti-B O
- - - + +
TIPAGEM ABO (Técnica em Gel)
• .Maior sensibilidade
• Padronização na intensidade de aglutinação
no momento da leitura do resultado
• Testes estáveis por 2 dias
• Realização de teste de Coombs sem
lavagens de hemácias
• Menor contato do profissional com o sangue
(biossegurança)
TIPAGEM ABO (Técnica em Gel)
.
TIPAGEM ABO (Técnica em Gel)
Escala de aglutinação
.
Automação
.
Sistema RhD
Histórico:
1939: Levine e Stetson atribuem uma
Doença Hemolítica Perinatal (DHPN) à atividade
de anticorpos maternos contra suas hemacias;
1940: Landsteiner e Wiener produziram
Anticorpos por meio da imunização de
Coelhos com hemácias de macaco Rhesus
.
Sistema RhD
Doença Hemolítica Perinatal
Sistema RhD
.Do ponto de vista da prática transfusional é o
segundo mais importante, depois do ABO, devido à
imunogenicidade de seus antígenos.
Sistema RhD
. Técnica em tubo:
Hemácias I e II + soro do paciente
•1ª fase: fase salina temperatura ambiente
•2ª fase: fase protéica temperatura ambiente -
albumina bovina 22% ou uso de potencializador
•3ª fase: fase protéica quente - 37ºC
•4ª fase: fase de Coombs
PESQUISA DE ANTICORPOS IRREGULARES
(PAI) OU COOMBS INDIRETO)
Reação
positiva
PESQUISA DE ANTICORPOS IRREGULARES
(PAI) OU COOMBS INDIRETO)
. NTIGRAMA
A
PESQUISA DE ANTICORPOS IRREGULARES
(PAI) OU COOMBS INDIRETO)
.Técnica em gel:
ATENÇÃO!
.
1 R1w R1 + + 0 0 + + 0 + 0 + + 0 0 + + + 0 0 2 4
2 R1 R1 + + 0 0 + 0 + + + 0 0 + + + + + 0 0 2 4
3 R2 r + 0 + + + 0 + 0 + + + + + + 0 + 0 0 0 0
4 R1 R2 + + + + + 0 0 + + 0 + 0 + + + 0 0 0 2 4
5 R2 R2 + 0 + + 0 0 0 + + + + + 0 + 0 + 0 0 0 0
6 r r 0 0 0 + + 0 + + 0 + + 0 0 + 0 + 0 0 0 0
7 r r 0 0 0 + + 0 0 + 0 + 0 + + 0 0 + 0 0 0 0
8 r r 0 0 0 + + 0 0 + + + + + + 0 + + 0 0 0 0
9 r” r 0 0 + + + 0 0 + + 0 + 0 + 0 + 0 0 0 0 0
10 r’ r 0 + 0 + + 0 0 + 0 + + + + + 0 + 0 0 2 4
11 Auto 0 0 0 0
IDENTIFICAÇÃO DE ANTICORPOS IRREGULARES
(IAI)
Técnica em tubo:
TUBO DE HEMÓLISE
HEMÁCIAS DO DOADOR 1 GOTA DE SUSPENSÃO 5%
SORO DO RECEPTOR 2 GOTAS
PROVA CRUZADA (PROVA DE
COMPATIBILIDADE
Técnica em tubo:
Temperatura ambiente
Meio protéico
37ºC
Coombs
Resultado:
Ausência de aglutinação: compatível
Presença de aglutinação: incompatível
PROVA CRUZADA (PROVA DE
COMPATIBILIDADE
.
Técnica em Gel:
GEL COOMBS
HEMÁCIAS DO DOADOR 50 µL DE SUSPENSÃO 1%
SORO DO RECEPTOR 25 µL
Aplicações laboratoriais:
• Estudo da Doença Hemolítica Peri-Natal
• Anemia Hemolítica Auto-Imune
• Hemólise induzida por drogas
• Reações hemolíticas imunes pós-transfusionais
TESTE DIRETO DA ANTIGLOBULINA (TAD)
OU COOMBS DIRETO
. DESCRIÇÃO DA TÉCNICA:
1- Lavar as hemácias teste 3 à 4 vezes em salina
preparar uma suspensão de 3 à 5% em salina.
2- Identificar dois tubos ( IgG, Poli) e acrescentar 1
gota de suspensão de hemácias em cada tubo;
3- Adicionar de 1 a 2 gotas do soro antiglobulina
correspondente a cada tubo;
4- Misturar e centrifugar de 3000 a 3600 rpm por 15-
20 segundos;
5- Ressuspender gentilmente e examinar a
aglutinação. Registrar os resultados.
TESTE DIRETO DA ANTIGLOBULINA (TAD)
OU COOMBS DIRETO
.
Reação
positiva
ELUATO
A
. técnica do Eluato é utilizada para a identificação de
anticorpos quando o TAD está positivo.
.
Técnicas:
.Anti-soros
FENOTIPAGEM ERITROCITÁRIA
.Gel centrifugação
FENOTIPAGEM
.
ERITROCITÁRIA
Limitações:
PRESCRIÇÃO
(MÉDICO)
TESTES PRÉ-
TRANSFUSIONAIS
Solicitação de Transfusão
Atenção!!!
A coleta é um momento onde se inicia os testes pré-
transfusionais, portanto é fundamental confirmar a
identificação da amostra e do receptor.
Esta atividade envolve todo profissional na área de saúde.
Identificação da amostra
O .QUE DEVE CONSTAR NO TUBO PARA COLETA
DE AMOSTRA DE SANGUE: