UNIVERSIDADE DE CAXIAS DO SUL – UCS

DISCIPLINA DE BIOLOGIA MOLECULAR

Profa. Raquel Balestrin

Exercícios: Eletroforese
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1. Observe as ilustrações dos géis abaixo e identifique o tamanho aproximado dos

fragmentos de DNA (bandas) analisados usando como base o marcador de tamanhos
moleculares de fragmentos de DNA (M = Molecular Length Marker).

2. A respeito da eletroforese de ácidos nucleicos, assinale a opção correta.

A- Pode ser realizada em géis de poliacrilamida ou de agarose. A escolha entre os dois dependerá
primariamente do tipo de ácido nucleico a ser analisado, por exemplo, RNA ou DNA.
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Profa. Raquel Balestrin
B- Para eletroforese, os ácidos nucleicos precisam ser misturados a um tampão de amostra, que deve
conter um agente espessante.

C- Deve ser realizada em amperagem constante, a ser determinada pela concentração do gel no qual serão
aplicados os ácidos nucleicos.

D- Géis de poliacrilamida são frequentemente utilizados no controle de qualidade de síntese de

oligonucleotídios. A escolha da poliacrilamida permite a detecção de oligonucleotídio sintetizado com erro
devido a substituição de uma base por outra, em um único poço.

3 - Acerca da extração, purificação e eletroforese de ácidos nucleicos, assinale a opção correta.

A) Diferentemente do que ocorre com bactérias, a purificação de DNA genômico de células eucarióticas
pode ser realizada utilizando-se a sonicação para a quebra das células, uma vez que o DNA eucarioto está
protegido no núcleo, e envolto por histonas.

B) A contaminação de RNA total em uma preparação de DNA pode ser eliminada sem o tratamento da
amostra com RNase H.

C) Se uma preparação de DNA plasmidial se encontra contaminada com DNA genômico não degradado, é
possível separá-los por meio da realização da eletroforese da amostra em gel de agarose, seguida do
isolamento da banda plasmidial a partir do gel e da eluição do DNA plasmidial da banda.
D) A utilização de centrifugação em gradiente de cloreto de césio é uma das etapas da purificação de DNA,
que, contudo, não pode ser utilizada para a separação de RNA.

4 - Acerca da eletroforese de ácidos nucleicos, assinale a opção correta.

A) A escolha entre a utilização de um gel de poliacrilamida ou de agarose baseia-se principalmente no

tamanho dos fragmentos a serem analisados ou separados, sendo aquele utilizado preferencialmente para
pequenas moléculas, e este para grandes moléculas.

B) Os tampões TAE e TBE (Tris-acetato-EDTA e Tris-boratoEDTA, respectivamente) podem ser utilizados

para a eletroforese de forma simultânea; a escolha entre um ou outro deve ser feita apenas por motivos
econômicos.

C) A integridade do RNA total extraído pelo protocolo que utiliza fenol e sais não pode ser verificada em géis
de agarose comum, mas sim apenas em géis tratados com agentes inibidores de Rnase.

5 - A técnica de eletroforese permite separar fragmentos de proteínas e ácidos nucleicos por

tamanho e carga elétrica. Com base na figura
abaixo, que representa uma corrida de
eletroforese de DNA, marque a alternativa
CORRETA:
a) Os fragmentos maiores de DNA
migram mais rápido do que os fragmentos menores,
devido ao seu alto peso molecular.

b) A utilização do Marcador Molecular é indicada para

auxiliar na estimativa da concentração dos
fragmentos de DNA que aparecerem no gel.

c) A coloração da amostra no gel é feita por um

corante intercalante de DNA que tem afinidade com
as ligações fosfodiéster da referida molécula.

d) A migração das amostras ocorre no sentido do polo negativo (–) para o polo positivo (+), devido a carga
negativa do fosfato localizado no nucleotídeo de DNA.