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ENG07064 

– Bioengenharia B
Introdução

Prof. Drª. Luciane F. Trierweiler
Departamento de Engenharia Química 
luciane@enq.ufrgs.br
3308 4403

Baseado no material da Prof. Daniele M. Rossi

Introdução
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Aplicações
Bebidas Saúde e Beleza

Alimentação Química

Introdução
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Definições

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Introdução

Definições
Microbiologia Industrial: Microrganismos como elementos 
chave em processos biotecnológicos industriais

Biotecnologia: “É toda tecnologia de processo ou produto 
que lance mão, em pelo menos uma das etapas, da ação 
de microrganismos, células animais ou vegetais, ou de 
substâncias produzidas por estes agentes biológicos, 
sendo caracterizada por sua multidisciplinaridade” (Rehn
& Reed, 1993).

Introdução
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Introdução

Introdução
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Histórico
Período Acontecimento

bebidas alcoólicas (cerveja e vinho)


6.000 a. C. são produzidas por sumérios e
babilônios

panificação e bebidas fermentadas


2.000 a.C.
são utilizadas por egípcios e gregos

Hooke – Invenção do Microscópio.


1665 ‐ Primeira observação de células –
1670 d.C. início da teoria celular  Livro
Micrographia
Antoni Van Leeuwenhoek –
Observação do conteúdo 
1684 d.C.
microbiano de diversas substâncias 
naturais
Pasteur mostra que a fermentação é
1875 d.C.
causada por microrganismos
Introdução
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Histórico
Período Acontecimento

bebidas alcoólicas (cerveja e vinho)


6.000 a. C. são produzidas por sumérios e
babilônios

panificação e bebidas fermentadas


2.000 a.C.
são utilizadas por egípcios e gregos

Hooke – Invenção do Microscópio.


1665 ‐ Primeira observação de células –
1670 d.C. início da teoria celular  Livro
Micrographia
Antoni Van Leeuwenhoek –
Observação do conteúdo 
1684 d.C.
microbiano de diversas substâncias 
naturais
Pasteur mostra que a fermentação é http://www.microscopy‐uk.org.uk/mag/indexmag.html? 
1875 d.C. http://www.microscopy‐uk.org.uk/mag/artjul07/hl‐loncke2.html
causada por microrganismos
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Os experimentos de Louis Pasteur 
que refutaram a teoria da geração 
espontânea

http://phototheque.pasteur.fr/en/asset/fullTextSearch/search/
g%C3%A9n%C3%A9rations%20spontan%C3%A9es/page/1

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Histórico
Louis Pasteur
Desenvolvimento de vacinas contra cólera aviária e antrax ovino.
1885. Primeira aplicação de vacina antirrábica em um humano. 
Em 1 ano, 2500 pessoas foram a Paris para se vacinar.
1888. Construção do Instituto Pasteur, em Paris. Atualmente, 
principal centro de pesquisa biomédica voltado à produção de 
vacinas.

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Histórico
Período Acontecimento

1880‐1910 surgimento da fermentação industrial (ácido


láctico, etanol, vinagre)

1910‐1940 síntese de glicerol, acetona e ácido cítrico –


Durante o período de guerras.

1928 Alexander Fleming – descoberta da penicilina

1940‐1950 antibióticos são produzidos em larga escala


por processos fermentativos

1953 estabelecida a estrutura do DNA

1973 início da engenharia genética

1982 insulina humana é produzida


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Histórico anaeróbico

Bioprocessos em larga escala: primeira metade do séc XX;


Produção de solventes acetona e butanol por C. acetobutylicum
(1915); 
Primeiro processo que necessitou condições assépticas  desenvolvimento 
de equipamentos para operar em assepsia estrita e controle do processo para 
melhorar o rendimento dos solventes;
1ª guerra: acetona (cordite (propelente), lubrificante de aeronaves)
2ª guerra: butanol (borracha sintética)
Butanol: uso extensivo como solvente para laca usada em automóveis. Até 
substituição por fornecimento mais barato por via petroquímica (propeno). 

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Histórico
Bioprocessos em larga escala: primeira metade do séc XX;
Penicilina (produção e purificação) aeróbico
Desenvolvimento de equipamentos para fornecimento de ar de forma 
asséptica;
Necessidade de purificação (extração centrífuga);
Scale‐up: produção em garrafas de leite  processo industrial.
Produção de enzimas
Inicialmente, apena enzimas extracelulares (amilases, proteases);
1ª enzima intracelular: xilose isomerase. Isomerização de glicose em frutose. 
Usada em conjunto com a amilase para produção de frutose de amido de 
milho (abundância de milho nos anos 70).
Década de 60: desenvolvimento e otimização de processos 
contínuos. Produção de leveduras usando HCs como fonte de C 
para consumo animal. 
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Histórico
Década de 80: biolixiviação BIOX. 
Auxiliar na quebra da matriz mineral sulfídica (via oxidação) e liberação de 
metais (cobre, ouro).
Acidithiobacillus ferrooxidans, Acidithiobacillus thiooxidans, Leptospirillum
ferrooxidans, Acidithiobacillus caldus, Leptospirillum
ferriphilum e  Ferroplasma acidiphilum
Tecnologia DNA Recombinante.
Produção de Insulina por Escherichia coli geneticamente modificada.

http://www.biomin.co.za/biox/technology.html

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Introdução
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Jeans
Stone washed jeans:  tambor rotativo
com pedra‐pomes ou usando produtos
químicos para dar esta aparência 
Alternativa: utilização de celulases (início
na Europa, em 1989). O gene para a 
síntese da enzima é isolado do Trichoderma
reesei e expresso em bactéria para reprodução
de massa celular e obtenção da enzima.
Atualmente, várias aplicações na 
indústria têxtil.
http://www.dupont.com/content/dam/dupont/products‐and‐services/industrial‐
biotechnology/documents/DuPont‐Textiles‐Product‐List.pdf

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Esquema Geral de um Processo Fermentativo

Bioprocessing Part 1 Fermentation. mp4


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MICROBIOLOGIA

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Classificação dos micro‐organismos

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Classificação dos micro‐organismos
Os três domínios (Carl Woese, 1977)

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Características da vida
Organização: a célula é a forma mais simples da organização 
biológica.
Única célula (unicelular)
Mais de uma célula (pluricelular)
Metabolismo: soma total de todos os processos químicos que 
ocorrem na matéria viva
Anabolismo: reações de síntese
Catabolismo: reações de degradação
Irritabilidade: resposta a estímulos externos ou mudanças no meio 
ambiente
Ciclo vital: nascimento, crescimento, reprodução, envelhecimento e 
morte

Introdução
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Nomenclatura 
Reino: grupo de filos (Monera)
Filo: grupo de classes ou divisões (Schyzophyta)
Divisão ou Classe: grupo de ordens (Schyzomycetes)
Ordem: grupo de famílias relacionadas (Eubacteriales)
Família: grupo de gêneros relacionados (Lactobacilaceae)
Gênero: grupo de espécies relacionadas (Lactobacillus)
Espécie: organismos de um mesmo tipo (L. delbruekii) 

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Nomenclatura 

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Nomenclatura 

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Procarioto x Eucarioto

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Procarioto
Menores
Mais simples estruturalmente Bacteria e Archea
Não possuem núcleo organizado
Não possuem organelas celulares envoltas por membranas
Suas paredes celulares quase sempre contem o polissacarídeo 
complexo peptideoglicano.
Eles normalmente se dividem por fissão binária. Durante esse 
processo, o DNA é duplicado e a célula se divide em duas. A fissão 
binária envolve menos estruturas e processos que a divisão das 
células eucarióticas.
Em termos evolutivos, são os organismos mais antigos da Terra 
(fósseis de cerca de 3,5 bilhões de anos)

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Procarioto

Bacteria e Archea
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Metabolismo

Crescimento
Fatores nutricionais:

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Metabolismo 

Metabolismo
Obtenção de energia e forma de conservação para outros usos.

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Metabolismo 

Influência da Temperatura

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Metabolismo 

Influência do pH

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Metabolismo 

Micro‐organismos e Oxigênio
Micro‐organismos aeróbios: oxigênio atua como aceptor final de 
elétrons (respiração aeróbia)
Aeróbios estritos: requerem oxigênio em concentrações similares a 
atmosférica (20%)
Aeróbios microaerófilos: requerem oxigênio em concentrações inferiores (5 –
10%)
Micro‐organismos anaeróbios: não requerem oxigênio.
Anaeróbios facultativos: crescem na ausência e na presença de oxigênio
Anaeróbios estritos: metabolismo não requer oxigênio
Anaeróbios aerotolerantes: não requerem oxigênio, mas o toleram, sem 
crescer.

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BACTÉRIAS

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Bactérias

Morfologia
Esférica 
Cilíndrica
Espiralada

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Bactérias

Morfologia
Esférica
Cilíndrica
Espiralada

Introdução
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Bactérias

Morfologia
Esférica 
Cilíndrica
Espiralada

Introdução
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Bactérias

Morfologia
Esférica 
Cilíndrica
Espiralada
Outras formas

Menor bactéria – 0,2 m (Chlamydia)
Maior bactérica conhecida – 600 m (Epulopiscium fishelsoni)
Mar Vermelho e costa da Austrália
Tamanho médio: 1 – 10 m
Introdução
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Bactérias
São unicelulares e procariotos
Apresentam vários formatos (bacilos, cocos, espirilos etc).
Podem agrupar‐se em pares, grupos e cadeias.
Apresentam parede celular composta de carboidrato complexo: 
peptideoglicana
Se reproduzem por fissão binária: divisão de uma célula simples.
Nutrição autótrofa, heterótrofa ou por fotossíntese
Podem apresentar apêndices móveis chamados flagelos. 

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Bactérias

Citologia

Introdução
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Bactérias ‐ Citologia

Parede Celular
Citoplasma com alta concentração de solutos dissolvidos  pressão 
osmótica  2 atm em E. coli  PAREDE CELULAR.
Principal componente: peptideoglicano
Gram‐positivo: mais espessa e quase
sempre apenas 1 tipo de molécula
Gram‐negativo: multicamadas e 
bastante complexa

Introdução
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Bactérias ‐ Citologia

Parede Celular
Citoplasma com alta concentração de solutos dissolvidos  pressão 
osmótica  2 atm em E. coli  PAREDE CELULAR.
Principal componente: peptideoglicano
Gram‐positivo: mais espessa e quase
sempre apenas 1 tipo de molécula
Gram‐negativo: multicamadas e 
bastante complexa
Archeas e algumas bactérias: sem parede
celular. Membranas celulares mais 
rígidas ou habitats osmoticamente 
protegidos.

Introdução
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Bactérias ‐ Citologia

Parede Celular

Introdução
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Bactérias ‐ Citologia

Parede Celular

Introdução
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Bactérias ‐ Citologia

Parede Celular
Gram positiva: 90% é peptideoglicano
Lisozima: enzima que cliva as ligações glicosídicas ‐1,4  entrada 
de água na célula, levando a lise celular.

Introdução
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Bactérias ‐ Citologia

Parede Celular
Gram negativa: parede + fina formada por 1 a 3 camadas de 
pepidioglicano.  Possui uma membrana externa de 
lipopolissacarídeo. (vermelha)

Introdução
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Bactérias ‐ Citologia

Parede Celular
Coloração diferencial: Gram

Gram Stain Animation.mp4
Introdução
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Bactérias ‐ Citologia

Membrana Citoplasmática
Funções:
Barreira osmótica
Transporte de substâncias (permeases)
20 – 30% fosfolipídeos
50 – 70% proteínas

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Bactérias ‐ Citologia

Membrana Citoplasmática
Funções:
Barreira osmótica
Transporte de substâncias (permeases)
20 – 30% fosfolipídeos
50 – 70% proteínas

Introdução
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Bactérias

Esporulação
Endósporo.  
Estrutura de sobrevivência  estágio latente. A esporulação ocorre qdo o 
crescimento cessa devido a exaustão de um nutriente essencial;
Exibem extrema resistência ao calor, produtos químicos e radiação; 
Bacillus e Clostridium; Cuidados na 
Permanecem dormentes por muito tempo (décadas). Esterilização

Introdução
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Bactérias

Esporulação
Endósporo.  
Estrutura de sobrevivência  estágio latente. A esporulação ocorre qdo o 
crescimento cessa devido a exaustão de um nutriente essencial;
Exibem extrema resistência ao calor, produtos químicos e radiação; 
Bacillus e Clostridium;
Cuidados na 
Permanecem dormentes por muito tempo (décadas). Esterilização

Introdução
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Archaea
Procarióticas;
Membrana celular com composição diferente
das bactérias
Se possuem parede celular, a mesma não é composta por 
peptidoglicanas;
Habitam ambientes extremos;
Dividem‐se em três grupos principais: 
Metanogênicos: eliminam metano durante a respiração.
Halofílicos extremos: vivem em ambientes muito salinos (Great salt
lake, Utah; Mar morto).
Termofílicos extremos: habitam águas quentes e sulfurosas (fontes 
termais). 

Introdução
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FUNGOS

Introdução
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Eucariotos

Introdução
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Eucariotos

Introdução
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Fungos
Apresentam parede celular composta por quitina.
As formas unicelulares denominam‐se Leveduras.
Os mais típicos são os bolores (filamentosos). Micélio: longos 
filamentos (hifas) que se ramificam e expandem.
Reprodução: Sexuada ou assexuadamente.
Nutrição: geralmente heterótrofa, absorvendo matéria orgânica de 
solos, águas, animais ou plantas hospedeiras.

Introdução
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Fungos

Leveduras
Características: 
eucariotos
unicelulares
não formam filamentos
imóveis
quimioheterotróficos (fte de C orgânica)
aeróbio facultativo (metabolismos oxidativo e fermentativo)
reprodução assexuada e sexuada
não são capazes de utilizar amido e celulose como fonte de C.
Presentes em:  solos, ar (esporos), flora de intestinos animais, casca 
de frutas, folhas.  
A maioria não é patogênica para os homens e animais.

Introdução
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Fungos ‐ Leveduras

Interesse industrial
agentes de fermentação alcoólica, na produção do álcool industrial 
e de todas as bebidas alcoólicas destiladas ou não destiladas; 
panificação;
são, pelo menos potencialmente, importantes fontes de proteína e 
de fatores de crescimento, possíveis de serem utilizadas na 
alimentação animal e, mesmo, humana;
como agentes de fermentação são prejudiciais à conservação de 
frutos, e de sucos vegetais. Algumas espécies, são patogênicas a 
plantas, animais e ao homem.

Introdução
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Fungos ‐ Leveduras

Morfologia

Introdução
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FUNGOS FILAMENTOSOS

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Introdução
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Introdução
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