UNIVERSIDADE FEDERAL DE ALFENAS – INSTITUTO DE CIÊNCIAS BIOMÉDICAS

DEPARTAMENTO DE CIÊNCIAS FISIOLÓGICAS

AULA PRÁTICA: EXERCÍCIO DE LABORATÓRIO UTILIZANDO “RATOS VIRTUAIS” PARA O

ESTUDO DE FISIOLOGIA ENDÓCRINA
Prof. Dr. Renato Rizo Ventura

Roteiro de aula prática adaptado do original:

Laboratory exercise using “virtual rats” to teach endocrine physiology. C. M. Odenweller, C. T. Hsu, E. Sipe, J. P.
Layshock, S. Varyani, R. L. Rosian and S. E. DiCarlo. Advances in Physiology Education 273, 24-40, 1997.

Introdução
O presente exercício tem como objetivo o aprendizado ativo de fisiologia endócrina por meio da coleta,
análise e interpretação de resultados. O uso de “ratos virtuais” vem ao encontro da proposta da disciplina de
minimizar o uso de animais de laboratório, ao mesmo tempo em que permite que os estudantes sejam expostos aos
desafios da experimentação animal, delineamento experimental, coleta, análise e interpretação de dados sem as
limitações que envolvem o uso de animais vivos.
Nesta simulação experimental o aluno deverá determinar a identidade de hormônios desconhecidos,
através da observação dos seus efeitos sobre órgãos de animais experimentais (ratos machos). As vias de secreção de
três hormônios serão estudadas neste experimento: hormônios tiroidianos, cortisol e testosterona. Nos três casos
deverão ser avaliadas as relações hipotálamo-hipófise-glândula-alvo, os mecanismos de retroalimentação e os
principais efeitos destes hormônios sobre o organismo.

Objetivos
 Testar os conhecimentos da relação entre o hipotálamo e a adeno-hipófise
 Testar os conhecimentos das ações dos diferentes hormônios sobre o organismo
 Estimular a discussão e o pensamento analítico acerca de fisiologia endócrina

Procedimento Experimental
Os dados apresentados neste estudo foram obtidos a partir de 7 diferentes grupos experimentais, sendo um
grupo de animais controle (sem tratamento) e 6 grupos que receberam tratamento hormonal. Utilizaram-se ratos
machos para simplificar o estudo da relação entre os sistemas reprodutor e endócrino, uma vez que em fêmeas ocorrem
oscilações de acordo com a fase do ciclo estral. Todos os grupos eram constituídos por um rato macho intacto e outro
castrado (a castração envolve a remoção dos testículos para eliminar a produção da testosterona). Com exceção do
controle, ambos os animais (normal e castrado) de cada grupo experimental foram injetados com um determinado
hormônio, diariamente, durante 2 semanas. Ao final desse período os animais foram sacrificados e foram pesados os
seguintes órgãos: hipófise, glândula tireóide, glândulas adrenais, timo (órgão envolvido com a resposta imune do
organismo), testículos, próstata e vesícula seminal. O peso corporal também foi avaliado. Os hormônios usados no
tratamento foram os seguintes: ACTH, cortisol, LH, TSH, TRH e testosterona.
Propostas
Com base nos seus conhecimentos de fisiologia endócrina, identifique na tabela 1 os efeitos esperados dos
hormônios sobre o peso das diferentes glândulas endócrinas e órgãos avaliados. Utilize (+) para aumento do peso, (-)
para redução e (SA) para sem alteração.
Usando a tabela 1 e os dados obtidos na autópsia de cada animal (Figuras 1-7), associe os grupos de ratos com
seus respectivos tratamentos hormonais. Para auxiliar na determinação da identidade do hormônio desconhecido, é
importante comparar os valores obtidos nos animais do grupo controle com os valores obtidos nos animais tratados
com hormônios (sempre comparando intactos e castrados separadamente). As alterações deverão ser consideradas
significativas quando a variação entre os ratos controle e os ratos que foram tratados com o hormônio desconhecido
for superior a 20%. Alterações iguais ou inferiores a 20% deverão ser ignoradas e atribuídas a erros experimentais
ou biológicos. Erros experimentais incluem calibração inadequada da balança, erros na aplicação do hormônio ou na
remoção dos órgãos. Erros biológicos ocorrem devido às diferenças individuais existentes entre os animais. Justifique
as respostas dadas para cada um dos hormônios identificados, explicando os dados encontrados.
Tabela 1 - Efeitos esperados pelos tratamentos hormonais sobre o peso de diferentes órgãos.
TRH TSH ACTH Cortisol Testosterona LH
intacto castrado intacto castrado
Hipófise
Tireóide
Timo
Adrenais
Vesícula Seminal
Próstata
Testículos
Peso Corporal
(+) = aumento; (-) = redução; (SA) = sem alteração

controle Resultados da autópsia

intacto Hipófise: 12,9mg

Tireóide: 250mg

Timo: 475mg

Adrenais: 40mg

Vesícula seminal: 500mg

Próstata: 425mg

Testículos: 3,200mg

Peso corporal: 300g

controle Resultados da autópsia

castrado Hipófise: 16,8mg

Tireóide: 250mg

Timo: 480mg

Adrenais: 40mg

Vesícula seminal: 200mg

Próstata: 85mg

Peso corporal: 270g

Fig. 1 - Resultados da autópsia dos ratos controles (intacto e castrado).

Determine a identidade do HORMÔNIO 1 e do HORMÔNIO 2 apresentados nas figuras 2 e 3 abaixo, usando os dados da autópsia e os resultados esperados a
partir da tabela 1.

Hormônio 1 Variação em Variação em

Resultados Hormônio 2 Resultados
relação ao
intacto relação ao da autópsia
da autópsia controle intacto intacto controle intacto
Hipófise: 9,8mg Hipófise: 8,0mg

Tireóide: 245mg Tireóide: 500mg

Timo: 250mg Timo: 455mg

Adrenais: 30mg Adrenais: 37mg

V. seminal: 475mg V. seminal: 480mg

Próstata: 410mg Próstata: 405mg

Testículos: 3.200mg Testículos:

2.790mg
Peso corporal: 150g
Tratamento recebido: Peso corporal:
152g
Tratamento recebido:

Resultados Variação em Hormônio 2

Resultados Variação em
Hormônio 1 da autópsia
relação ao castrado relação ao
controle castrado da autópsia controle castrado
castrado Hipófise: 12,7mg
Hipófise: 10,8mg
Tireóide: 247mg
Tireóide: 505mg
Timo: 240mg
Timo: 461mg
Adrenais: 29mg
Adrenais: 37mg
V.seminal: 220mg
V. seminal: 195mg
Próstata: 80mg
Próstata: 95mg
Peso corporal:
Peso corporal:
135g
135g
Tratamento recebido:
Tratamento recebido:

Fig. 2 - Resultados da autópsia dos ratos tratados com o HORMÔNIO 1. Fig. 3 - Resultados da autópsia dos ratos tratados com o HORMÔNIO 2.
Determine a identidade do HORMÔNIO 3 e do HORMÔNIO 4 apresentados nas figuras 4 e 5 abaixo, usando os dados da autópsia e os resultados esperados a
partir da tabela 1..

Hormônio 3 Resultados Variação em Hormônio 4 Variação em

Resultados
intacto da autópsia
relação ao
intacto relação ao
controle intacto da autópsia controle intacto
Hipófise: 9,8mg Hipófise: 15,7mg
Tireóide: 250mg Tireóide: 490mg
Timo: 480mg Timo: 462mg
Adrenais: 40mg Adrenais: 39mg
V. seminal: 900mg V. seminal: 480mg
Próstata: 800mg Próstata: 400mg
Testículos: Testículos:
5.700mg 3.150mg
Peso corporal: Peso corporal:
385g 160g
Tratamento recebido: Tratamento recebido:

Variação em Variação em
Resultados
relação ao
Hormônio 4 Resultados
Hormônio 3 da autópsia controle castrado castrado da autópsia
relação ao
controle castrado
castrado
Hipófise: 17mg Hipófise: 20mg
Tireóide: 250mg Tireóide: 495mg
Timo: 480mg Timo: 460mg
Adrenais: 42mg Adrenais: 38mg
V. seminal: 210mg V. seminal: 190mg
Próstata: 90mg Próstata: 100mg
Peso corporal: Peso corporal:
310g 144g
Tratamento recebido: Tratamento recebido:

Fig. 4 - Resultados da autópsia dos ratos tratados com o HORMÔNIO 3. Fig. 5 - Resultados da autópsia dos ratos tratados com o HORMÔNIO 4.
Determine a identidade do HORMÔNIO 5 e do HORMÔNIO 6 apresentados nas figuras 6 e 7 abaixo, usando os dados da autópsia e os resultados esperados a
partir da tabela 1.

Hormônio 5
Hormônio 6 Resultados Variação em
intacto Variação em relação ao
Resultados intacto da autópsia controle intacto
relação ao
da autópsia controle intacto Hipófise: 10,1mg
Hipófise: 10,2mg
Tireóide: 245mg
Tireóide: 252mg
Timo: 150mg
Timo: 470mg
Adrenais: 100mg
Adrenais: 38mg
V. seminal: 490mg
V. seminal:1.400mg
Próstata: 430mg
Próstata: 900mg
Testículos: 3.000mg
Testículos: 2.400mg
Peso corporal: 200g
Peso corporal: 400g Tratamento recebido:
Tratamento recebido:

Hormônio 5 Resultados Variação em

Resultados Variação em Hormônio 6 relação ao
castrado relação ao
castrado da autópsia controle castrado
da autópsia controle castrado
Hipófise: 12,9mg
Hipófise: 10,1mg
Tireóide: 250mg
Tireóide: 250mg
Timo: 150mg
Timo: 470mg
Adrenais: 95mg
Adrenais: 41mg
V. seminal: 195mg
V. seminal: 1.200mg
Próstata: 90mg
Próstata: 800mg
Peso corporal:
Peso corporal: 485g
195g
Tratamento recebido:
Tratamento recebido:

Fig. 6 - Resultados da autópsia dos ratos tratados com o HORMÔNIO 5. Fig. 7 - Resultados da autópsia dos ratos tratados com o HORMÔNIO 6.