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Metodologias Laboratoriais MÓDULO 5: MÉTODOS CROMATOGRÁFICOS

Cromatografia em camada fina (CCF/TLC)

Procedimento laboratorial
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Material necessário:
Placas pré-revestidas de sílica gel 60 F254 (5 x 10 cm)
Aplicadores de cromatografia
Tina de cromatografia
Tina de revelação (I2)
Lâmpada de UV

Reagentes:
Soluções padrão, em metanol: Azobenzeno; Benzofenona;
2,4-dinitrofenilhidrazona da acetona
Amostra
Desenvolvente: Acetato de etilo/Hexano (1:9)
Revelador: Iodo
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A - Aplicação da amostra na placa

1- A cerca de 1 cm do fundo, marque nas extremidades da

placa um ponto que indique a linha de partida, imaginária,
onde se vai aplicar as várias soluções a cromatografar.
2- Segurando o aplicador verticalmente, toque com a
extremidade do capilar a camada de sílica sem a danificar.
Cada mancha não deverá ter mais de 3 mm de diâmetro. As
manchas das soluções padrão e da amostra a cromatografar
devem ficar distanciadas entre si cerca de 5 mm e
equidistantes das extremidades laterais da placa. No topo da
placa identifique claramente cada mancha.
3- Terminada a aplicação, deixe secar bem o solvente.
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B - Desenvolvimento do cromatograma

4- Coloque a placa na tina, que já deve estar saturada com o

desenvolvente.
5- Deixe subir o desenvolvente até cerca de 1cm do cimo da
placa, retire-a da tina e marque de imediato a linha de frente
do solvente.
6- Deixe secar a placa ao ar ou com um secador de ar quente
num nicho. 
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C - Revelação

7- Observe e marque se existirem manchas coradas.

8- Examine as placas à luz UV e marque as manchas que
observar.
9- Exponha as placas aos vapores de iodo, durante uns
minutos e marque o que observar.
10- Determine o valor de Rf dos vários compostos revelados
e retire as suas conclusões. 