07/03/2022

REQUISIÇÃO, COLETA E ARMAZENAMENTO

DE AMOSTRAS MICROBIOLÓGICAS

Dra. Georgia Alves

MARÇO/2022

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OBJETIVOS
• Discutir as particularidades da fase pré-analítica do exame
microbiológico e micológico, entendendo a importância da
requisição, coleta, transporte e armazenamento das
amostras para o diagnóstico fidedigno.

• Discutir os métodos de coloração empregados na rotina de

um laboratório de microbiologia, entendendo os diferentes
tipos de coloração como ferramenta auxiliar no diagnóstico
microbiológico.

TÓPICOS
• Requisição do exame
microbiológico;

• Coleta, transporte e
armazenamento das
amostras microbiológicas e
micológicas;

• Métodos de visualização e
coloração na prática
laboratorial.
http://lacen.saude.sc.gov.br/arquivos/MCT01.pdfhttp://lacen.sa
ude.sc.gov.br/arquivos/MCT01.pdf

SITUAÇÃO PROBLEMA
• "Quais os critérios para uma amostra biológica
ser aceitável no laboratório?"

• "Será que as normas para coleta de

microrganismos aeróbios são as mesmas para
anaeróbios?"

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REQUISIÇÃO DE EXAMES
• Requisição é uma ficha de
solicitação de exames de
laboratório com amostra
humana ou animal.

• Contém informação suficiente

para identificar o paciente, o
requisitante autorizado,
fornecer os dados clínicos
pertinentes e dados sobre a
amostra biológica.

https://www.inca.gov.br/sites/ufu.sti.inca.local/files//m
edia/document//nova_imagem_23.jpg

REQUISIÇÃO DE EXAMES
• Todas as amostras deverão ser
identificadas e acompanhadas de
requisição médica devidamente
preenchida com letra legível, com
os itens abaixo:
MODELO DE REQUISIÇÃO MÉDICA:
• a) Nome do paciente;
• b) Idade;
• c) Endereço;
• d) Leito ;
• e)Médico requisitante (nome
legível e carimbo);
• f) Tipo de amostra;
• g) Exames solicitados;
• h) Data e hora da coleta;
• i) Início dos primeiros sintomas;
• j) Doença de base suspeita clínica
e se em uso de antibiótico (a
suspeita de fungos deve ser
anotada no pedido de exame).

AMOSTRAS BIOLÓGICAS LACEN

MODELO DE REQUISIÇÃO

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MODELO DE REQUISIÇÃO

MODELO DE REQUISIÇÃO

https://ptdocz.com/doc/769510/n%C2%BA-
da-amostra---sa%C3%BAde-rio

QUESTÃO
A requisição de exames microbiológicos é
imprescindível para o recebimento de amostras
microbiológicas pelo laboratório. Ela contém
informação suficiente para identificar o paciente, o
requisitante autorizado, fornecer os dados clínicos
pertinentes e dados sobre a amostra biológica.

( )CERTO
( )ERRADO

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QUESTÃO
Dentre as informações abaixo, qual não precisa estar
presente na requisição de exames microbiológicos?

( )Tipo de amostra.
( )Exames solicitados.
( )Data e hora da coleta.
( )Suspeita clínica.
( )Uso de antibiótico.
( )Suspeita de fungos.
( )NDA.

COLETA DE AMOSTRAS
• A coleta ou transporte de
material é uma das etapas de  INSTRUÇÕES PARA COLETA
maior importância no isolamento ADEQUADA:
de microrganismos responsáveis
por doenças infecciosas.
 Coletar amostras antes da
• A coleta ou transporte administração da
antibioticoterapia, sempre que
inadequado pode ocasionar falha possível;
no isolamento do agente
etiológico e favorecer o
desenvolvimento da flora
contaminante, podendo conduzir
a uma terapia incorreta.  Instruir do paciente sobre o
procedimento;
https://www.saude.ce.gov.br/wp-
content/uploads/sites/9/2018/06/manual_de_coleta_2013.pdf

COLETA DE AMOSTRAS

COLETA DE SECREÇÃO DA OROFARINGE

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COLETA DE AMOSTRAS
INSTRUÇÕES PARA COLETA  Usar recipientes adequados
ADEQUADA: e enviar imediatamente ao
laboratório;
 Evitar contaminação com
flora normal;

 Observar a antissepsia dos  Se isto não for possível,

materiais; colocar o material em meio
de transporte e
 Coletar do local onde o temperatura adequada;
microrganismo suspeito
tenha maior probabilidade
de ser isolado;

COLETA DE AMOSTRAS
 Considerar o estágio da  Requisição completa.
doença na escolha do
material.
COLETA TUBERCULOSE

 Identificação correta do
material.

 Quantidade suficiente de
material deve ser
coletada.

EXEMPLO

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EXEMPLO

EXEMPLO
HANSENÍASE:

SÍTIOS DE COLETA DO RASPADO INTRADÉRMICO:

• Em pacientes com lesões cutâneas visíveis ou áreas com alteração de

sensibilidade, a coleta deverá ser feita em lóbulo auricular direito (LD),
lóbulo auricular esquerdo (LE), cotovelo direito (CD) e lesão (L);

• Nas lesões planas coletar no centro ou borda interna e nos nódulos,

tubérculos e placas eritematosas marginadas por microtubérculos, coletar
no centro;

• Em pacientes que não apresentam lesões visíveis, colher material do

lóbulo auricular direito (LD), lóbulo auricular esquerdo (LE), cotovelo
direito (CD) e cotovelo esquerdo (CE);

EXEMPLO

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COLETA ANAERÓBICOS E AERÓBICOS

• Sempre que possível para
anaeróbios, a amostra deve ser
coletada por meio de aspirado
com agulha e seringa ou através
de fragmentos do tecido
infectado.
 Contaminação com organismos
presentes na pele ou na
superfície mucosa;
 Os anaeróbios ficarão expostos
ao oxigênio ambiente;

 O material está sujeito à secagem

excessiva;

• A coleta com swab é a menos  A quantidade é relativamente

recomendada pelas seguintes pequena;
razões:
 O uso de swab com meio de
transporte específico deverá ser
utilizado como última opção.

CRITÉRIOS DE REJEIÇÃO DE
AMOSTRAS

CRITÉRIOS DE REJEIÇÃO DE
AMOSTRAS

Observações importantes:
Amostras com as características
acima descritas são inadequadas e
demandam um contato prévio com
o médico solicitante para melhores
esclarecimentos.

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IDENTIFICAÇÃO DA AMOSTRA
ETIQUETA DA AMOSTRA:

a)Nome completo do paciente;

b)Localização do paciente (leito);

c)Tipo e topografia da amostra (Materiais identificados como:

secreção ou pus deverão ser acompanhados da localização
topográfica);

Observação: A anotação da hora da coleta é muito importante.

https://www.saude.ce.gov.br/wp-
content/uploads/sites/9/2018/06/manual_de_coleta_2013.pdf

VISUALIZAÇÃO DE BACTÉRIAS E
COLORAÇÕES NA PRÁTICA
LABORATORIAL

COLORAÇÃO DE GRAM

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COLORAÇÃO DE GRAM
ETAPAS:

(1) O corante cristal violeta cora todas as células em azul/ púrpura;

(2) A solução de iodo é adicionada, formando um complexo cristal

violeta-iodo; todas as células mantêm a coloração azul;

(3) O solvente orgânico, como acetona ou etanol, remove o complexo

corante azul das bactérias gram-negativas (parede fina e ricas em
lipídeos); agora incolores;

(4) O corante vermelho cora em vermelho/rosa as células gram-

negativas descoloridas; as bactérias gram-positivas permanecem
azuis.

DIFERENÇAS ENTRE G+ E G-

COLORAÇÃO DE GRAM

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COLORAÇÃO DE GRAM
IMPORTANTE:

• Por estar presente em bactérias, mas não em células

humanas, o peptideoglicano (MUREÍNA) corresponde a um
alvo adequado para fármacos antibacterianos.

• São necessárias aproximadamente 100.000 bactérias/mL para

que se possa visualizar uma bactéria por campo de
microscopia, utilizando óleo de imersão (objetivas de 1003).
Dessa forma, a sensibilidade da coloração de Gram é baixa.

COLORAÇÃO DE GRAM

QUESTÃO
Todas as células bacterianas possuem uma barreira de
permeabilidade chamada de membrana citoplasmática que
separa o interior da célula (citoplasma) do ambiente externo.

( )CERTO
( )ERRADO

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QUESTÃO
O citoplasma bacteriano é uma mistura aquosa de
macromoléculas: proteínas, lipídeos, ácidos nucleicos,
polissacarídeos, diversos íons inorgânicos, e ribossomos,
as estruturas sintetizadoras de proteínas das células.

( )CERTO
( )ERRADO

QUESTÃO
Células microbianas não apresentam motilidade. A motilidade
permite que as células consigam se afastar de condições
desfavoráveis e possam explorar novos recursos ou
oportunidades de crescimento, portanto nenhuma das bactérias
dispõe dessa capacidade.

( )CERTO
( )ERRADO

QUESTÃO
As bactérias apresentam-se em dois formatos: ou são cocos ou
são bacilos, sendo que todas são visualizadas apenas por
microscopia.

( ) CERTO
( ) ERRADO

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QUESTÃO
Helicobacter pylori é uma bactéria Gram
negativa, microaerófila e espiralada que mede
cerca de 3 a 5 μ de comprimento por 0,5 μ de
largura. Coloniza especificamente a mucosa
gástrica.

( )certo
( )errado

QUESTÃO
O ser humano é o principal reservatório de H. pylori, não tendo
ainda sido encontrados animais que sirvam de reservatórios
significantes. Águas contaminadas são fontes importantes em
determinadas áreas. A transmissão interpessoal é, entretanto,
considerada a mais importante. A via pela qual ocorre a infecção
pode ser fecal-oral ou oral-oral.

( )CERTO
( )ERRADO

QUESTÃO
A Helicobacter pylori é uma bactéria muito adaptada ao seu
habitat e de crescimento lento, sendo assim é muito fácil cultivá-
la in vitro, sendo esse o principal diagnóstico. O crescimento
pode ser afetado por vários fatores como o número de biópsias,
o meio, a duração e a temperatura do transporte e o próprio
método de cultivo.

( )CERTO
( )ERRADO

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QUESTÃO
O crescimento bacteriano depende de fatores físicos e químicos
favoráveis. De acordo com o gráfico abaixo, a fase log mostra
uma fase de adaptação inicial, enquanto a fase lag mostra o
declínio do crescimento bacteriano.

( )CERTO
( )ERRADO

QUESTÃO
A maioria das bactérias patogênicas para os humanos apresenta
crescimento ótimo em temperaturas próximas a 37°C, sendo
assim elas são classificadas como:

a) psicrotrófilas.
b) mesófilas.
c ) termófilas.
d) hipertermófilas.
e) termófilos extremos.

QUESTÃO
Dentre as estruturas celulares abaixo, qual está presente
somente em bactérias?

a) Membrana plasmática.
b) Ribossomos.
c) Material genético.
d) Parede celular.
e) Núcleo celular.

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QUESTÃO
Fatores de virulência auxiliam bactérias patogênicas na invasão e
na resistência às defesas do hospedeiro; estes fatores incluem
cápsula bacteriana, enzimas, toxinas.

( )CERTO
( )ERRADO

QUESTÃO
A figura mostra a estrutura de uma célula bacteriana tipo
bastonete, em que I representa a parede celular, II a membrana
plasmática e III a cápsula bacteriana.

I
( )CERTO II
( )ERRADO III

QUESTÃO
A parede celular está presente na maioria das bactérias. A
parede celular é composta principalmente por peptideoglicano.
Com base na morfologia da parede celular, as bactérias podem
ser classificadas em dois grandes grupos: Gram Negativas e Gram
Positivas. ( )CERTO ( )ERRADO

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QUESTÃO
A técnica de Gram, também conhecida como coloração
de Gram, é um método de coloração de bactérias
desenvolvido pelo médico dinamarquês Hans Christian
Joachim Gram (1853-1938), em 1884, o qual permite
diferenciar bactérias com diferentes estruturas de
parede celular a partir das colorações que estas
adquirem após tratamento com agentes químicos
específicos.
( ) CERTO
( ) ERRADO

QUESTÃO
Na coloração de Gram, as diferenças na parede
celular e camada externa de lipídios das
bactérias são determinantes para o resultado
final da coloração de Gram, permitindo uma
classificação de bactérias.

( )CERTO
( )ERRADO

QUESTÃO
São critérios de rejeição de amostras para
análise microbiológica: amostras em material
estéril, identificação correta do material e swab
único para várias requisições e análises
diferentes.

( )CERTO
( )ERRADO

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QUESTÃO
Recomenda-se que a coleta de material para
microrganismos anaeróbicos seja feita por swab.
A coleta de fragmentos de tecido ou o uso de
agulhas e seringas não é recomendado.

( )CERTO
( )ERRADO

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