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UNIVERSIDADE FEDERAL DO CEARÁ

DEPARTAMENTO DE BIOLOGIA
DISCIPLINA: Microbiologia Básica

CONTROLE MICROBIANO
POR AGENTES QUÍMICOS
Profa. Suzana Martins
HISTÓRICO
Ignaz Semmelweis- médico húngaro
• Utilizou
. compostos clorados em 1846 na enfermaria do
hospital-redução da febre puerperal (doença pós-parto

Joseph Lister- Após tomar conhecimento dos estudos de


Pasteur sobre a teoria microbiana das doenças, utilizou o
fenol para reduzir infecção em incisões cirúrgicas
Desinfecção: Processos de controle microbiano que
promovem a eliminação de células vegetativas de
microrganismos patogênicos
• .
Desinfetantes: Utilizado para materiais inertes
Capacidade de penetração na matéria orgânica sem
perder sua ação germicida e ausência de ação corrosiva.

Antissépticos: Utilizado para seres vivos


Não ser irritante, não interferir no processo de cicatrização
e não ser absorvido pela pele
CARACTERÍSTICAS DE UM AGENTE QUÍMICO IDEAL
Alta toxicidade para os microrganismos
-Solubilidade
-Estabilidade
-Ausência de toxicidade
-Ausência de afinidade por matéria orgânica estranha
-Toxicidade para os microrganismos em temperatura ambiente
-Capacidade de penetração
-Ausência de poderes corrosivos e tintoriais
- Poder detergente e desodorizante, Disponibilidade e baixo
custo
Condições que influenciam a atividade antimicrobiana

I Tamanho da população;

ii) Intensidade ou concentração do agente microbiocida;

iii)Tempo de exposição ao agente;

iv) Temperatura na qual os micro- organismos são expostos ao agente


microbiocida;

v) Natureza do material contendo os micro-organismos;


Condições que Influenciam o Controle Microbiano

vi) Tipo de microrganismo:


Bactérias Gram (-), principalmente do gênero Pseudomonas, as
micobactérias e as bactérias produtoras de endosporos apresentam
resistência natural ao controle microbiano

vii) Condições ambientais (pH, concentração de carboidratos, presença de


matéria orgânica)
MORTE MICROBIANA

Perda da capacidade de reprodução

Os microrganismos não morrem instantaneamente

Osmicrorganismos morrem em uma relação constante,em um dado período


de tempo(morte exponencial)
MORTE EXPONENCIAL
1 milhão de bactérias (população inicial)

1 min -eliminou 90% - restaram 100.000

2 min-eliminou 90% - restaram 10.000

3 min –eliminou 90% - restaram 1000

4 min –eliminou 90% - restaram 100

5 min. –eliminou 90% - restaram 10

6 min –eliminou 90% - restou 1 sobrevivente


Condições que Influenciam o Controle Microbiano

https://slideplayer.com.br/slide/51595/
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MECANISMOS GERAIS DE AÇÃO

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Agentes químicos de controle microbiano
1 Fenol e compostos fenólicos (cresol, hexaclorofeno, em desuso por
causar alterações neurológicas).
Fenol: atividade bactericida em [0,2 a 1%]

Alterações na estrutura do fenol aumento da ação antimicrobiana e


diminuição da toxicidade (alquil-fenóis – orto, meta e para-cresóis;
creolina
Mecanismo de ação: Ruptura da membrana plasmática, desnaturação
de proteínas e de enzimas

Bacteriostático/bactericidadependendodaconcentração
Elevada toxicidade, características irritantes e odor desagradável
HEXACLOROFENO: derivado clorado do fenol (mesma ação)

USO: sabonetes (assepsia das mãos em pré-


operatório), antiperspirantes / pastas de dente

Biguanidas → semelhante ao hexaclorofeno (composto clorado derivado do


Fenol)
COEFICIENTE FENÓLICO

Razão do inverso de diluições do desinfetante em teste e do fenol,


que provocam o mesmo efeito deletério sobre as bactérias

Metodologia descrita em 1903 por Rideal e Walker, para avaliar e comparar


a atividade antibacteriana dos derivados fenólicos naturais do ácido fênico
(fenol).
O protocolo oficial está descrito, no manual da Association of Official
Analytical Chemist (AOAC) para a avaliação microbiológica de
desinfetantes químicos

Cepas padrões: Staphylococcus aureus ATCC 6538, Pseudomonas


aeruginosa ATCC 15442 e Salmonella choleraesuis ATCC 10708
COEFICIENTE FENÓLICO
Cada produto possui três valores de coeficiente fenólico,
correspondente à sensibilidade de cada espécie bacteriana utilizada

Embora sujeito a críticas, o coeficiente fenólico ainda é reconhecido


como método de avaliação da atividade bactericida de um composto
químico em relação ao fenol
COEFICIENTE FENÓLICO
Cálculo Coeficiente Fenólico

A phenol coefficient that is greater than 1 indicates that the disinfectant is more effective
than phenol. In contrast, a phenol coefficient that is lower than 1 means the disinfectant is
less effective than phenol.
Técnica do Coeficiente de Fenol

http://www.eq.ufrj.br/biose/nukleo/aulas/Microbiol
Teste Coeficiente Fenólico
1 Uma série de tubos contendo 5 ml de cada uma das diluições de
desinfetante teste

Ex: 1/90; 1/100, 1/110

2. Uma outra série de tubos contendo as diluições de fenol.

3. Em cada tubo das duas séries são inoculados 0,5 ml de uma cultura de 24
horas dos micro-organismos padrão

4. Em 5, 10 e 15 minutos uma alíquota de cada tubo é inoculada em outro


tubo contendo meio de crescimento esterilizado.

5.Estes tubos são incubados durante 24 horas e observados quanto à


turvação.
6. a maior diluição de desinfetante que mata os micro-
organismos em 10 minutos mas não mate em 5 minutos é
dividida pela maior diluição de fenol. O valor obtido é o
coeficiente fenólico do desinfetante.
AGENTES QUÍMICOS DE CONTROLE MICROBIANO
2 HALOGÊNIOS
Cloro

cloro + água = ácido hipocloroso


◦Cl2+ H2O H++ Cl- + HOCl

Mecanismo de ação do HOCl: oxida grupos SH e NH2 de enzimas


bacterianas, inibindo-as.

Derivados do cloro
◦ Hipoclorito de sódio;
◦ Dióxido de cloro;
◦ Cloraminas (cloro + amônia);
IODO (forte agente oxidante – complexação e inativação de
proteínas)

a) AÇÃO: age sobre esporos, fungos e vírus


b) USO: 2% em água ou solução alcoólica
O iodo se combina com o aminoácido tirosina, inibindo suas funções,

Oxida os grupos –SH de certos aminoácidos.

É utilizado como antisséptico em soluções 2% em água ou em alcool

O iodo pode agir separadamente ou como componente de


compostos orgânicos e inorgânicos.
Compostos Quaternários de Amônia

➢ Mecanismo de ação: alteram a permeabilidade da membrana,


inibem enzimas, desnaturação de proteínas;

➢ Ativas contra G+ e menos ativas contra G-

➢ EXEMPLOS:
➢ Cloreto de benzalcônio
➢ Cloreto de cetilpiridínio (Cepacol)
ALCÓOIS

➢ Mecanismo de ação: desnaturação de proteínas e


dissolução de lipídios de membranas.

➢ Bactericida;

➢ Não age sobre endósporos e vírus não envelopados.

➢ Álcool etílico: 70%


➢ Álcool isopropílico: puro é superior ao etílico.
ÁLCOOL (etílico ou isopropílico)
a) desnaturação de proteínas
b) desorganização dos lipídeos de membrana
c) agente desidratante
d) Antisséptico e desinfetante
e) Maior ação em células vegetativas do que em esporos
f) Aumento da eficácia: diluição a 70% em água
AGENTES OXIDANTES
➢ Mecanismo de ação: liberação de O nascente;oxida os
sistemas enzimáticos
Exemplos:
✓ Peróxidos: H2O2 3% age sobre organismos anaeróbios;

✓ Ácido peracético: efetivo contra bactérias, fungos, endosporos e


vírus.

✓ Ozônio: empregado na desinfecção de água


ALDEÍDO E DERIVADOS

➢ Mecanismo de ação: alquilação dos grupos funcionais das


proteínas (aminas, carboxilas, hidroxilas), inativando-as.

➢ Alquilação é a transferência de um grupo alquila de uma


molécula para outra
✓ Aldeído fórmico: solução em água de 3 a 8 %

✓ Glutaraldeído: soluções alcalinas a 2%

✓ Formalina: solução aquosa de formol, associada a um sabão ou


detergente 40%
✓ Esterilizantes liquídos

METAIS PESADOS

➢ Mecanismo de ação: desnaturação de proteínas combinam-se com proteínas,


geralmente nos grupos SH (sulfidrilas);

✓ ação bacteriostática;

✓ Mercurocromo e mertiolate
ESTERILIZANTES GASOSOS

➢ Mecanismo de ação: alquilação direta dos grupos carboxilas,


hidroxilas e sulfidrilas, inativando certas enzimas

➢ Óxido de etileno: atua pela interação com proteínas, alta


capacidade de penetração, é explosivo;

➢ Betapropiolactona: baixa capacidade de penetração, carcinogênico


http://www.eq.ufrj.br/biose/nukleo/aulas/Microbiol/eqb353_aula_07.pdf
AVALIAÇÃO DA ATIVIDADE GERMICIDA

✓ Coeficiente fenólico

✓ Teste de diluição em tubos

✓ Teste de difusão em ágar


CIM e CBM (menores valores de MIC maior atividade antimicrobiana)
macrodiluição)

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