Controle de qualidade microbiológico

O controle de qualidade trabalha com produtos não estéreis que tem carga microbiana
limitada que tem que ter ausência de microrganismos patogênicos e números de
microrganismos viáveis, e tem produtos estéreis que tem que ter ausência total de forma
viáveis capazes de reprodução, tem que ser produtos estéreis e pirogênicos
Estéreis: ausência absoluta de formas viáveis = próteses, cateteres, administração
parenteral (oftálmicos e injetáveis)
Não estéreis = usadas no dia a dia, presença de formas viáveis em quantidade definida,
medicamentos orais, tópicos, cosméticos e outros correlatos. Pra garantir precisa de um
sistema de conservação adequado, por isso a presença de conservantes microbianos, e
pra garantir tem um ensaio de eficácia microbiana especifico.
A partir de 1960 houve aumento do número de casos de infecções atribuídas a produtos
farmacêuticos, correlatos e cosméticos, e houve estudos sobre contaminantes
microbianos e modos de prevenção. E em 1970 houve os limites microbiano e testes de
ausência de contagem dos viáveis.
Não zerou o limite pra tudo porque seria muito caro, como por exemplo o colírio que
tem muitos conservantes e por isso fica mais caro, porque a planta de fabricação de
produtos estéreis são muito caro, porque existe muito controle, e por isso existem os
limites microbianos.
Além de contar faz testes de ausência, e entre os microrganismos escolhidos são o
pseudômonas que é conhecido, coli porque indica uma contaminação por falta de
higiene.
Tabela 1 limites microbianos para produtos não estéreis mostra o produto de origem
sintética ou biológica e vai mostrar a pesquisa de patógenos que deve ter e o limite que
esse patógeno pode ter, cada um vai ter limite e microorganismos pesquisáveis
diferentes.

10-1 = 20
10-2= 200
10-3= 2000 e assim sucessivamente

Fontes de contaminação
Pode ser por bactérias, fungos e vírus
Premissas
 Os contaminantes de matéria prima são transferidos para o produtos
  Os pós sintéticos tem bacia carga microbiana
 Matérias primas de origem natural pode conter elevadas cargas microbianas
 Correlatos médicos – natureza polímera tem baixo risco de contaminação porque
é moldada em altas temperaturas

Produtos biológicos
- risco de contaminação por micoplasmas

Fontes de contaminação microbiana

Na planta da indústria farmacêutica
 O ar deve entrar com filtro, normalmente nas industrias tem filtros de alta
eficiência que filtra o ar do ambiente ara não circular partículas no ambiente
 a equipe pode trazer contaminação e tem a questão de saúde, higiene e
treinamento, uma pessoa gripada não pode trabalhar no setor de controle
microbiológico.
 O desenho da área da produção já é pensado na limpeza, como por exemplo os
cantos quadrados que acumulam sujeira, e monitoramento microbiologico e isso
também se aplica nos equipamentos, eles também tem o processo de validação
de limpeza.
 Nas matérias primas tem o monitoramento, tratamento, irradiação gama, oxido
de etileno.
 A agua também tem o monitoramento microbiológico, tratamento, filtração,
ultravioleta, armazenagem a 70-80 graus, é a principal fonte de contaminação
microbiana de produtos líquidos.
 Controle de qualidade microbiológico do produto, monitoramento
microbiológico e padrões.
Isso aconrece pra garantir que o produto não saia contaminado, mas mesmo assim em
alguns casos chega o medicamento contaminado no mercado.
Tem ações que acontece pra prevenir que a contaminação aconteça e outras que
acontecem depois que o medicamento chega no mercado, por exemplo um medicamento
contaminado com ecoli, foi de algum erro de higiene dos profissionais.
Principais fontes de contaminação microbiana:
 Matérias primas ( almoxarifado) – faz testes que podem perder validade se for
armazenado de forma incorreta, e tem que ter cuidado com pós sintéticos e
origem natural
 Cuidado com sistema de agua e ar
 Equipamentos
 Treinamento dos operadores ( se tiver uma descamação normal na pele tem
microorganismos que pode aumentar contaminação microbiana do local de
operação
  Contaminação durante o uso e estocagem= esta fora da indústria, tem produtos
que já tem mais risco de contaminação, como por exemplo os potes.
 Os produtos estereias, mesmo insento de problemas de contaminação durante a
fabricação, tem a preocupação durante o seu uso clínico ( assepsia do local de
aplicação, falta de higiene do aplicador do medicamenro, etc)

Fatores que afetam a sobrevicencia dos microorganismos nos produtos

 Grandea de organisos introduzidos
 Interação com a formulação
 Atividade de agua
 Ph na faixa da neutrliadde
 Nutrientes
 Oxigênio ( presença ou ausência de oxigênio pode favorecer bactérias aeróbicas
e anaeróbicas, so que são usados os produtos redutores que são sulfito ou acido
ascórbico).
 Pressão osmótica
 Tensão superficial
 Processo de fabricação

Os microorganismos deterioream produtos porqueproduxem enzimas adequadas para as

reações de degradação
Consequência da deterioração
 Queda da potencia, se o produto tem o teor que gira em torno de 95 e 100%,
pode acontecer de abaixar o teor porque o microorganismo esta deteriorando
 Redução da biosisponibilidade = se alterar características físicas ou químicas
pode alterar a biodisponibilidade
 Formação de pigmentos e odores= alterações físicas
 Produção de toxina= n deteriora mas por utilizar nutriente presente ocorre
produão de toxina
 Degradação do sistema conservante.

Um produto contaminado não necessariamente vai causar um problema de saúde, mas

ele pode, mas depende da carga microbiana, as vezes ela n pode ser suficiente pra
pessoa saudável, mas pra pessoa com imunidade baixa pode aumentar de ser
contaminada, depende também da resistência do hospedeiro e via de administração.
Depende de características qualitativas e quantitativas do microorgansmo, do
hospedeiro e da via de administração.

Obtenção de fármaco e excipiente

O processo de obtenção pode levar maior ou menor cocetração microbianano, a
qualidade depende da:
 Rota de síntese
 Tipos de produtos em que o fármaco sera utilizado ( estéril ou não)
 Planejanemtno e instalaçãies
 Equipamentos
 Controles ambientais
 Operações manuais ou automatizadas.
Tem que ter condições sanitárias adeuadas, reatores fechados.
Biofarmacos requer um rígido controle microbiológico e um controle rigoroso do
processo de obtenção.
Durante o desenvolvimento do produto tem que adotar estratégias de controle
microbiológico e laudos dos estudos de estabilidade

Fabricação de produros não estéreis

Pós e comprimidos
 Contaminação decorrente do ambiente\; fungos ou bacillus
 Contaminação do operador
 Granulação aquosa pode ser um problema
 Validação de limpeza

 Tem que considerar a contaminação da emalagem externa

 Contaminação do operador: micrococos e estafilococos da pele
 Validação da limpeza

Ensaios microbiológicos para produtos não estéreis

Produtos farmacêuticos de uso oral e tópico ( capsulas, comprimidos, suspensões,
cremes, adesivos, etc.)
Devem ser considerados
 Limites microbianos
 Tipos de contaminação mais provável
 Via de administração
Na contaminação microbiológica pode aparecer alterações físicas e químicas
A alteração física tem a que a gente pode ver, cor, odor, alteração de fase e tem que a
gente não pode ver como o polimorfismo que precisa de uma lente de aumento muito
grande pra conseguir ver.

Natureza e frequência variável = produtos de origem vegetal, mineral e animal e

produtos com elevado teor de agua tem que fazer a analise rotineiramente, mas os que
tem baixo teor de agua e com pouco histórico faz analise de vez em quando. Mas se
fizer analise e sempre tiver microorganismos presentes pode começar a fazer
rotineiramente.

Condições gerais:
Técnicas assépticas na amostragem e execução ( capela de fluxo laminar, filtração por
membrana)
atividade antimicrobiana ( removida ou neutralizada)

a eficácia e a ausência de toxicidade do agente inativante para os microorganismos

considerados devem ser demonstradas
se usar substancias tensoativas na preparação da amostra, também deve ser demonstrada
ausência de toxicidade para os microorganismos e compatibilidade com o agente
inativante.

Soluções e meios de culturas

Os meios de culturas podem ter propriedades nutritivas e seletivas.
Uma bactéria mesófila são os organismos gerais que são adaptados a todos os
ambientes, eles n são muito seletivos. Basta ter um meio de nutrição e um ph adequado
que vai crescer.
E nesse caso usa meios de culturas nutritivas e o mais indicado é o agar, caseína soja.
Mas quando for mais especifico tem que fazer um meio de cultura com propriedade
seletiva, como por exemplo, um meio especifico pra E.COLI.
Agas-caseina: bactérias 3 a 5 dias.
Agar-saourad- fungos. Crescimento de 5 a 7 dias.
Esse teste n é aplicado para produto que contem microorganismos viáveis com
ingrediente ativo, como por exemplo um regulador da flora intestinal, probiotico.

Ensaio microbiológico para produtos não estéreis

Pesquisa de microorganimos patogênicos
Vereifica presença ou ausência de microorganismos específicos em meios seletivos
. os procedimentos incluem etapas de pre enriquecimento para garantie a recuperação
dos micro-organismos, se presentes no produto.
Exemplo e.coli
Preparo da amostra e pre íncubação = preparar a amostra usando diluição 1:1, utilizar 10
ml da diluição para 90ml de caldo de enriquecimento, homogeniar e incubar durante 18
a 24 horas.
Seleção e subcultura = pegar o que foi feito antes e agitar e transferir 1 ml da amostra
enriquecedora para 100 m de caldo mcconkwy, depois incubar durante 24 a 48 horas a
43 graus celcius.
Interpretação= o crescimento de colônias vermelhas geralmente não mucosas, idica
presencça de e.coli, que deve ser confirmada por testes de identificação microbiana,
como por exemplo coloração de gram, teste de ferementador de lactase.
O produto cumpre o teste se nçao for observado crescimento de tais colônias ou se as
provas microbianas forem negativas.

Procedimento s.aureus
Transferir 10 ml da amostra para 80 ml de caldo caseína-soja, adicionar 10 ml da
solução de tween80 10% e agitar, incubar, fazer cultura em agar sal manitol. Incubar
novmente e analizar, se há colônias brancas ou amarelas rodeadas de zona amarela, se
não tiber passa, se tiver identificação passa por confirmação, se for confirmada
representa falha, se não tiver passa no teste.

Adequação dos métodos farmacopeicos