Universidade Politécnica

Trabalho de Microbiologia e Bioquímica Ambiental

Bárbara Cleusa Danune Caetano

Engenharia Ambiental, 2º ano

1. Diferencie os processos de esterilização pelo Calor Seco do Calor Húmido.

A diferença entre os processos de esterilização pelo calor húmido e calor seco, é que no calor

húmido há uma hidratação, ou seja, usa-se vapores de água em elevadas temperaturas, enquanto

que no calor seco não há presença de água, está num meio completamente seco.

2. Comente sobre o processo de pressão osmótica utilizado no controle de microrganismos.

O processo de pressão osmótica para controle de microrganismos é um método usado para

conservar alimentos que consiste em desidratar o alimento, ou seja, quando entram em contacto

com meios hipertônicos (alta concentração de sais e açúcares) as células dos microrganismos

perdem água por osmose, ficando murchas, impedindo assim o crescimento bacteriano. Temos o

exemplo da geleia, que tem altas concentrações de açúcar e da carne seca que tem altas

concentrações de sal.

3. Complete com os termos adequados relacionados à esterilização:

O cirurgião vai intervir na cavidade peritoneal, procura por todos os meios evitar a contaminação

do peritónio, utilizando técnicas assépticas;

A água aquecida em recipiente fechado, onde o vapor fica retido sob pressão, atinge temperatura

elevada sem ferver, é um princípio da: autoclavação;

Para esterilizar a alça de platina, as pipetas, as bocas dos tubos e balões, utiliza-se: flambagem;

Os quartos de doentes contagiosos devem ser, posteriormente, tratados com formol, objetivando

a: desinfecção.

4. Defina os termos: Assepsia, Anti-sepsia, Desinfecção, Esterilização e Descontaminação.

Assepsia é o conjunto de procedimentos que visam impedir a introdução de germes patogênicos

em determinado organismo, ambiente e objetos. É o cuidado com a limpeza e higiene de tudo

que nos cerca.

A anti-sepsia é o processo que visa reduzir ou inibir o crescimento de microrganismos com uso

de de agentes químicos na pele ou em outros tecidos vivos.

Desinfecção é a destruição dos microorganismos, excepto dos esporulados, podendo ocorrer a

sobrevivência dos mais resistentes. Pode haver utilização de procedimentos físicos e agentes

químicos.

Esterilização é o extermínio total de microorganismos, incluindo esporos, micobactérias, vírus

não envelopados e fungos, que são formas mais resistentes. Esse método utiliza procedimentos

físicos ou agentes químicos.

Descontaminação é a eliminação parcial ou total de microrganismos de materiais ou superfícies

inanimadas após os procedimentos.

5. A ordem crescente de resistências de formas de vida aos métodos de controle de

microrganismos são: (Indique as alternativas correctas)

d) Vírus lipídicos, bactérias vegetativas, fungos, vírus não lipídicos, mycobacterias, esporos

bacterianos e prions.
6. Por que são necessários tratamentos distintos para controle de microrganismos tais como

prions, esporos bacterianos, Mycobacterias, vírus não lipídicos, bactérias vegetativas e

vírus lipídicos?

São necessários processos distintos para microrganismos como vírus lipídicos, bactérias

vegetativas, fungos, vírus não lipídicos, mycobacterias, esporos bacterianos e prions porque estes

microrganismos apresentam estruturas moleculares em diferentes níveis de resistência.

7. Qual é o significado da morte para uma célula microbiana? E quando ela é considerada

morta?

Para uma célula microbiana a morte significa a perda irreversível da capacidade de reprodução.

E a célula é considerada morta se não for capaz de formar uma colónia em qualquer meio.

8. Quais são os mecanismos de acção dos agentes antimicrobianos?

Os mecanismos de acção dos agentes antimicrobianos são: lesão do DNA, desnaturação das

proteínas, ruptura da parede celular e inibição da função da membrana celular.

9. Qual é a abordagem usada no Laboratório de Bacteriologia do Laboratório Central de

Veterinária da Direcção de Ciências animais do IIAM que visitou para o diagnostico de

Doenças através da análise de diferentes amostras? Justifique.

No Laboratório de Bacteriologia as amostras entram para investigar causas bacterianas de

morbilidade (doença) ou mortalidade (necropsia). Elas são cultivadas em meios de cultura para o

isolamento e desenvolvimento de bactérias. Em seguida, estas amostras passam por provas

bioquímicas, cerológicas ( que é uma prova de aglutinação rápida) e biológicas. Daí dá-se o

diagnóstico da investigação.

10. No Laboratório de Bacteriologia da DCA usam alguns Meios de Cultura para a

sementeira bacteriana (para o seu crescimento). Diga qual é o meio usado para o cultivo de

TODAS AS BACTÉRIAS E FUNGOS? E qual é o meio usado para o cultivo de

BACTÉRIAS ENTÉRICAS e BACTÉRIAS GRAM- (GRAM NEGATIVAS)? E qual é o

meio usado para o cultivo de FUNGOS APENAS?

O meio de cultivo utilizado para todas as bactérias e fungos é o ágar. O meio usado para o

cultivo de bactérias entéricas e bactérias gram-negativas é o Ágar MacConkey. O meio de

cultivo para fungos é o Ágar Sabouraud.

11. Descreva o Método de Coloração de Gram para identificação de bactérias.

Para fazer a cultura em placa com o objetivo de fazer o método de coloração de gram começa-se

por escolher o órgão ou tecido. Desinfecta-se o mesmo e passa-se 3 vezes na chama. Em seguida

passa-se o órgão na placa e deixa-se agir por 18 à 24h de tempo. Depois do tempo recomendado

passar, escolhe-se a lâmina e identifica-se (dizendo o meio de cultivo que vai usar e de que órgão

vem a colónia de bactérias que vai usar). Em seguida passa-se o soro fisiológico na lâmina para

diluir e espalhar as colónias. Retira-se a colónia da placa ao pé da chama para as bactérias não se

espalharem e contaminarem o ambiente. Depois espalha-se a colónia na lâmina para não deixá-

las aglomeradas num só sítio. Em seguida passa-se a lâmina na chama e deixa-se secar para

melhor fixação das bactérias. Por fim, vem a coloração de gram:

1º passa-se o cristal violeta que cora as bactérias gram positivas por 1 minuto e tira-se o excesso

com água

2º passa-se o lugol por 1 minuto que tem efeito adistrinsgente e tira-se o excesso com água

3º passa-se o álcool acetona por 5 segundos para eliminar as gorduras na lâmina e tira-se o

excesso com água

4º passa-se a safranina que cora as bactérias gram negativas por 30 segundos e tira-se o excesso

com água.

Por fim, é só deixar secar e observar ao microscópio. As que tiverem coloração violeta são gram

positivas e as que tiverem coloração rosa são gram negativas.

12. Qual é o caldo específico usado no Laboratório de Controle de Qualidade

Microbiológica de Alimentos para a detecção de coliformes fecais? E qual e o meio usado

para a detecção de coliformes totais em carnes vermelhas, brancas e agua?

O caldo específico usado para a deteção de coliformes fecais é o escherichia coli e o meio de

cultivo para a deteção de coliformes totais em carnes vermelhas, brancas e água é o caldo bile

verde brilhante e o caldo MacConkey.

13. Um dos objectivos na análise de qualidade de lacticínios é ver se o número de bactérias

está dentro dos padrões aceitáveis para o consumo pelas pessoas. Qual é o Meio usado para

identificação de fungos e leveduras em lacticínios naquele Laboratório?

O meio usado para identificação de fungos e leveduras naquele laboratório é o Caldo Bile Verde

Brilhante.
14. Indique as grandes categorias de proteínas integrais da membrana plasmática e diga

qual é a função de cada uma delas.

Uma proteína integral da membrana e uma molécula proteica que está ligada permanente a

membrana plasmática. Estas proteínas incluem transportadores, canais iónicos, receptores,

enzimas, domínios estruturais de ancoragem membranar, proteínas envolvidas na acumulação e

transduçao de energia, proteínas responsáveis pela adesão celular.

15. Explique para que os lisossomas são usados nos processos de fagocitose e de autofagia.

Os lisossomas são usados nos processos de fagocitose e autofagia, pois na fagocitose, eles

hidrolisam macromoléculas para realizar a digestão intracelular, é um processo usado como

mecanismo de defesa para destruir invasores e bactérias.

Na autofagia, os lisossomas são usados para reciclar os materiais da própria célula.

16. Diga em que escalas os impactos da actividade humana sobre o ambiente podem

ocorrer e explique para cada escala.

O ser humano é um importante protagonista da aceleração dos impactos ambientais no meio

ambiente, podendo estes impactos ser positivos ou negativos.

Os impactos ambientais estão associados às questões negativas causadas nos ecossistemas

terrestres, os quais interferem em sua composição e ações naturais, levando aos diversos

prejuízos ambientais.

Existem os impactos ambientais considerados positivos ou benéficos, visto que resultam numa

melhoria das condições de vida no planeta.

Além dos impactos positivos e negativos, eles podem ser classificados em:

• Diretos e Indiretos

• Temporários, Permanentes e Cíclicos

• Imediatos, de Médio e Longo Prazo

• Reversíveis e Irreversíveis

17. Indique as principais vias metabólicas do metabolismo e as reacções que ocorrem nessas

vias.

As principais vias metabólicas do metabolismo são o anabolismo e o catabolismo. No

anabolismo as moléculas simples dão origem a compostos orgânicos de peso molecular mais alto

com gasto de energia, que está armazenada na molécula de ATP. Já no catabolismo compostos

orgânicos complexos são convertidos em moléculas mais simples, com libertação de energia,

sendo uma parte conservada em moléculas de alta energia (ATP) e a outra dissipada na forma de

calor.