UNIVERSIDADE FEDERAL DE SÃO JOÃO DEL-REI

CAMPUS CENTRO-OESTE DONA LINDU

CURSO DE FARMÁCIA

Líria Souza Silva

Vítor de Morais Santos

Atividade 01
Via Glicolítica e Destinos do Piruvato

Docente Responsável:
Prof. Dr. José Antônio Da Silva

DIVINÓPOLIS/MG
2022
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 Atividade 01 – Via Glicolítica e Destinos do Piruvato
Essa atividade deverá ser entregue até 13/04 até às 12:00 h e os resultados serão discutidos na próxima aula.

GLICOSE ANAERÓBICA
Vamos estudar uma via metabólica envolvida no catabolismo, através da montagem de um quebra-cabeça. O jogo
funciona da seguinte maneira: serão disponibilizadas algumas pistas sobre a via metabólica estudada e também a
estrutura química dos compostos que participam da mesma. A tarefa do grupo é analisar todos os compostos, e montá-
los numa sequência lógica. Esquematize a via na ultima pagina de este roteiro, incluindo todos os produtos formados e
informações sobre reversibilidade das reações. Após a montagem da via, indique as enzimas envolvidas. Terminada a
atribuição das enzimas/reações, responda às questões do aplicativo no “Modo Jogo” e discuta o roteiro de estudo (Sem
auxílio do livro).

PISTAS
▪ A glicólise anaeróbia é a quebra parcial da molécula de glicose (6 carbonos), com. produção líquida de 2 ATPs
e 2 moléculas de lactato (3 carbonos) no final do processo.
▪ A glicólise anaeróbia envolve o funcionamento de 11 enzimas, das quais somente 3 participam de reações
irreversíveis.
▪ Mg++ é cofator da hexoquinase.
▪ Somente 2 enzimas da via requerem a coenzima NAD+.
▪ As reações de fosforilação da glicose e da frutose-6-fosfato possuem ΔGo’ > 0
▪ Durante a glicólise anaeróbia são gastos 2 ATPs e 2 fosfatos inorgânicos (Pi).
▪ Durante a glicólise anaeróbia dois compostos ricos em energia são produzidos.
▪ Atividade física de alta intensidade requer o fornecimento rápido de ATP para as células musculares envolvidas
no movimento.
▪ As reações químicas envolvidas com nosso metabolismo obedecem a dois princípios básicos: lógica e economia,
ou seja, o caminho correto é sempre o mais simples e o mais econômico, do ponto de vista energético.
▪ A glicólise anaeróbia é responsável por cerca de 80% do ATP produzido em atividades de até 3 minutos de
duração.

OBSERVAÇÕES
a) A glicemia é mantida exclusivamente pelo glicogênio hepático até 8 horas após a última refeição.
b) Os tecidos e células independentes de insulina são: cérebro, hemácias, rim e fígado.
c) A insulina aumenta a permeabilidade celular a aminoácidos e estimula a síntese de proteínas.
d) Enzimas Alostéricas: Possuem na sua estrutura química um sítio de ligação para reguladores(efetores), que é
diferente do sítio onde se liga o substrato.
e) Essas enzimas podem sofrer regulação por seus efetores alostéricos positivos (se aumentam) ou negativos (se
diminuem) a velocidade das reações catalisadas por essas enzimas).

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VIA GLICOLÍTICA

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 VIA GLICOLÍTICA E DESTINOS DO PIRUVATO

1. Baseado no esquema da via glicolítica, responda as questões abaixo:

a) Qual a finalidade biológica dos processos descritos no esquema?
R.: A glicólise é uma série de reações nas quais uma molécula de glicose é degradada em duas moléculas de
piruvato, produzindo energia biologicamente útil na forma de ATP e NADH.

b) Qual o destino dos elementos químicos (esqueleto carbônico, oxigênio e hidrogênio) da molécula de glicose?
R.: O destino dos elementos químicos quando a glicose é quebrada na presença de oxigênio, é a conversão em
seis moléculas de dióxido de carbono e seis moléculas de água.

c) Qual(is) o(s) composto(s) que aceita (m) os átomos de hidrogênio?

R.: Os compostos que aceitam os átomos de hidrogênio são: as coenzimas (NAD+ e FAD) e ATP (fosforilação
oxidativa). O NAD+ é utilizado como cofator para aceitar os elétrons e o prótons H+, levando à sua redução a
NADH.

2. Indicar, no mapa:
a) Os compostos ricos em energia formados.
R.: Na via glicolítica, os compostos fosforilados ricos em energia são: glicose/frutose, glicose 6 fosfato, ADP e ATP.

b) Qual a localização celular da via glicolítica?

R.: A localização celular da via glicolítica é o citosol.

c) Quais os passos irreversíveis observados no esquema?

R.:Os passos irreversíveis da reação de glicólise envolvem gasto de energia. Neste caso, são irreversíveis as
seguintesreações:
R.: Glicose → Glicose-6-fosfato. Esta reação é exergónica porque a reação de hidrólise de ATP apresenta ΔG ́o<0
(ΔG ́o = -16,7 kJ/mol) que compensa a variação da energia de Gibbs da reação de fosforilação que apresenta ΔG ́o
positivo, e nas condições intracelulares esta reação é fisiologicamente irreversível
R.: Frutose-6-fosfato → Frutose-1,6-bifosfato. Nesta reação a desfosforilação do ATP liberta uma quantidade
considerável de energia que compensa a energia necessária para a fosforilação do 6-fosfato de glicose tornando a
reaçãoglobal exergónica, (ΔG ́o = -14,2 kJ/mol) e fisiologicamente irreversível.
R.: Fosfoenolpiruvato → Piruvato. A reação é exergónica, (ΔG ́o = -31,4 kJ/mol) e irreversível.

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d) Quais as reações onde há fosforilação da molécula de glicose? Sugira alguma explicação para que isso ocorra.
R.: As reações onde há fosforilação da molécula de glicose ocorrem após a sua entrada, a glicose é fosforilada
no carbono 6, dando origem a 6-fosfato de glicose (6-P-G). Esta reação é catalisada por uma enzima denominada
hexocinase. A hexocinase, é uma transferase pertencente à subclasse das cinases.Têm esse nome, porque transferem
um grupo fosfato de uma molécula de ATP para o seu aceitador final, que neste caso é a glicose. A fosforilação da
glicose,tem como principal objetivo impedir o seu retorno para o espaço extracelular. Isso acontece porque os
transportadores de glicose da membrana das células não transportam glicose fosforilada. Assim, ainda que a
concentração da glicose seja maior no interior da célula, não se dará a sua difusão para o espaço extracelular. Deste
modo, a célula não precisará gastar energia para manter a glicose no seu interior. Uma outra razão para a
fosforilação da glicose, deve-se ao fato de os açucares fosforilados diminuírem a energia de ativação e aumentarem
a especificidade das enzimas, facilitando as reações na via glicolítica.

e) Quantos carbonos têm a molécula de glicose, frutose 1,6-difosfato e piruvato?

R.: 6C, 6C e 3C, respectivamente.

f) Que hexose dá origem a trioses? Quais são elas?

R.: O 1,6-bifosfato de frutose é clivado originando dois isômeros (uma cetotriose e uma aldotriose), que são, o
fosfato de di-hidroxiacetona e o 3-fosfato de gliceraldeído, respetivamente. Os três primeiros carbonos do 1,6-
bisfosfato de frutose dão origem a cetotriose, e os restantes carbonos originam a aldotriose.

g) Quantas moléculas de piruvato se formam a partir de uma molécula de glicose?

R.: A partir de uma molécula de glicose, duas moléculas de piruvato são formadas.

h) Indicar as reações onde há transferência de átomos de hidrogênio e quais os reagentes e produtos da reação.
R.: As reações de transferência ocorrem na cedeis de transporte de elétrons, sendo assim, conforme o elétron passa
pela cadeia de transporte de elétrons, ele libera energia que é usada para bombear prótons ( H+) para fora da matriz
da mitocôndria, formando um gradiente eletroquímico. Quando os H+ retornam a favor do gradiente de
concentração, elespassam por uma enzima chamada ATP sintase, dirigindo a síntese de ATP. Existem dois tipos de
transportadores de elétrons que são particularmente importantes: NAD+ (nicotinamida adenina dinucleótido,
mostrado abaixo) e FAD (flavina adenina dinucleótido). Quando os NAD+ e FAD captam elétrons, eles também
ganham um ou mais átomos de hidrogênio, mudando para uma forma ligeiramente diferente:

NAD+ + 2e- + 2 H+ → NADH+H+

FAD + 2e- + 2 H+ → FADH2
E quando eles perdem elétrons, eles voltam para sua forma original:
NADH → NAD+ + 2e- + H+
FADH2 → FAD + 2e- + 2H+

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i) Identificar no esquema as reações catalisadas pelas seguintes enzimas:
a. Quinase: catalisam a transferência do frupo fosfato de um composto de alta energia para um receptor; (glicose +
ATP glicose 6-P +ATP)
b. Mutase: isomerases que catalisam a transferência de grupos fosfatos de baixa energia, de uma posição para outra,
em uma mesma molécula.
c. Isomerase: catalisam reações de isomeração.
d. Aldolase: cindem açucares fosforilados originando diidroxiacetona-fosfato e outro açúcar com 3 atomos de carbono
a menos que o original. (frutose 1,6-difosfato dihidroxiacetona fosfato + 2 glicerideo – 3- fosfato)
e. Desidrogenase: catalisam reações de oxi-redução (transferem H do substrato para a coenzima, NAD ou FAD) -
substrato + NAD+ + NADH + H+ + substrato.

3. Considerando o número de moléculas de ATP consumidas e formadas na via glicolítica, estabelecer o saldo
final de ATPs para a célula.
R.: O saldo final de ATPs para a célula são: 2 ATPs.

4. Vamos imaginar que vocês receberam um tubo de ensaio contendo as 10 primeiras enzimas da via glicolítica
anaeróbia.Citar os compostos que devem ser fornecidos a via glicolítica para: Iniciá-la e Mantê-la em
funcionamento.
R.: Para que se inicie a via glicolítica, além das enzimas, é necessário ter glicose como substrato, 2 moléculas da
coenzima NAD+, 2 moléculas de ATP, 2 moléculas de ADP e 2 fosfatos inorgânicos. Para mantê-la funcionando, é
necessário a glicose como substrato, 4 moléculas de ADP, 4 moléculas de ATP, 4 moléculas de fosfato inorgânico
e 2 moléculas da coenzima NAD+

5. Discutir porque o produto final da glicólise anaeróbia é o lactato.

R.: Na ausência de oxigénio, o piruvato produzido na via glicolítica é convertido em lactato pela enzima lactato
desidrogenase, sendo este o produto final da via glicolítica. Este processo acontece por exemplo no músculo
esqueléticoquando submetido a atividade física intensa.

6. A glicólise anaeróbia predominaria em células musculares de contração rápida ou lenta?

R.: A glicólise anaeróbia predomina em células musculares de contração rápida.

7. Qual a conseqüência para o funcionamento da via glicolítica quando:

a) Há excesso de frutose 1,6-difosfato?
R.: Quando há excesso de frutose 1,6-difosfato, a enzima Piruvato quinase é ativada alostericamente e a via
glicolítica aumenta sua atividade.

b) Há excesso de glicose 6-fosfato?

R.: Quando há excesso da glicose 6-fosfato, a enzima Hexoquinase é inibida alostericamente e a via glicolítica
diminui a sua atividade.

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c) Como a quantidade de NAD+ oxidado afeta a glicólise anaeróbia?
R.: A quantidade de NAD+ oxidado afeta a glicólise anaeróbia indicando para o piruvato se ele continuará sendo
oxidado,seguindo para o Ciclo de Krebs, ou será reduzido a lactato.

d) Como a quantidade de NAD+ oxidado afeta a glicólise aeróbia?

R.: A quantidade de NAD+ oxidado está relacionado com a continuidade da via glicolítica e a produção de ATP.

e) O que acontece com a via glicolítica quando a razão ATP/ADP está baixa na célula?
R.: Quando a razão ATP/ADP é baixa, indica baixo nível energético e que há bastante ADP disponível e a
glicólise temsua atividade estimulada para produzir ATP.

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 ROTEIRO DE ESTUDO OBRIGATÓRIO

1. Observar a formação de lactato a partir de piruvato e indicar:

a) Número de carbonos das moléculas de piruvato e lactato.
R.: Ambos possuem 3 carbonos.

b) As coenzimas necessárias.
R.: A coenzima necessária é: NADH.

c) As vitaminas envolvidas.
R.: Niacina (Vitamina B3).

d) A sua localização celular.

R.: Citosol celular.

2. A um tubo de ensaio foi adicionado um mol de glicose e quantidade suficiente de: hexoquinase, aldolase,
fosfoglicerato quinase, enolase, fosfoglicoisomerase, piruvato quinase, fosfoglicerato mutase,
fosfofrutoquinase, gliceraldeido 3-fosfato desidrogenase, NADH + H+, ATP, ADP e Pi. De posse com o
esquema da via glicolítica responda:
a) O lactato será formado?
R.: Não.

b) Qual a quantidade máxima de mols desse composto (o último intermediário formado)?

R.: A quantidade máxima é de 2 mols.

c) Qual o saldo de ATPs nesse ponto da via glicolítica?

R.: O saldo de ATP é negativo em 2 mols.

d) O que garante que as reações aconteçam em seqüência?

R.: A garantia da sequência das reações é devido às reações enzimáticas, que são específicas.

e) Qual o produto e em que concentração será formada se adicionarmos 1mol de NAD+?

R.: Ao adicionarmos 1 mol de NAD+ será formado 1 mol de 1,3-bisfosfoglicerato.

f) Qual o produto e em que concentração será formada se adicionarmos lactato desidrogenase?

R.: Com a adição de apenas 1 mol de NAD+, teremos a formação de 1 mol de lactato se adicionarmos a lactato
desidrogenase.

g) Explique por que a adição de NAD+ faria o saldo de ATP positivo, no final da via glicolítica.

R.: A adição de NAD + faria o saldo de ATP no final da via glicolítica positivo porque essa molécula participa da
reaçãoredox da via como aceptor de elétrons e H+ originando os próximos compostos da via, os quais participam da
produçãode ATP.

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 ROTEIRO DE ESTUDO OBRIGATÓRIO

1. Escrever a reação de formação de oxaloacetato (OAA) a partir de piruvato (PIR) e indicar:

R.:Piruvato + HCO3 - + ATP -> oxaloacetato + ADP + Pi

a) O número de carbonos das moléculas de piruvato e oxaloacetato.

R.: Piruvato: 3 carbonos e Oxaloacetato: 4 carbonos.

b) Todos os produtos da reação.

R.: Oxaloacetato, ADP e Pi.

c) A enzima que catalisa esta reação.

R.: Piruvato-carboxilase.

d) A vitamina envolvida.
R.: Biotina (vitamina B7).

e) Sua localização celular.

f) R.: Mitocôndria.

2. Na estrutura da Coenzima A, identifique: a vitamina, o nucleotídeo e o grupamento responsável pela ligação

das unidades de dois carbonos (grupo acetil).
R.: Vitamina: Ácido pantotênico; Nucleotídeo: Adenosina-3'-fosfato-5'-pirofosfato; Grupo responsável pela
ligação dedois carbonos: beta-mercaptoetilamina.

3. Observar a reação de formação de acetil-CoA a partir de piruvato e indicar:

a) O número de carbonos das moléculas de piruvato e acetil-coa.
R.: Piruvato: 3C;Acetil-Coa: 23 C.

b) Todos os produtos da reação.

R.: Acetil-Coa, CO2 e NADH.

c) As cinco coenzimas necessárias.

R.: Tiamina pirofosfato (TPP), ácido lipóico, coenzima A (CoA), flavina adenina dinucleotídeo (FAD) e
nicotinamida adenina dinucleotídeo (NAD+).

d) Se há perda de carbono, de que forma ele sai.

R.: O carbono sai em forma de CO2 .

e) Sua localização celular.

R.: Mitocôndria.

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