1. Em que se baseia a coloração Hematoxilina e Eosina(H&E)?
A hematoxilina possui natureza básica e possui a função de corar os ácidos nucleicos
do núcleo. A eosina possui natureza ácida e cora os componentes de natureza alcalina do citoplasma. Portanto, a coloração H&E se baseia na afinidade básica ou ácida de cada estrutura da célula.
2. Descreva a diferença entre os métodos de coloração histológica e citoquímicos.
O método que utiliza corantes acidófilos ou basófilos, como hematoxilina, azul de
toluidina, azul de metileno, orange G, fucsina ácida e eosina, se baseia na afinidade ácida ou básica das estruturas celulares e é um dos mais usados para apresentar características estruturais. Um outro exemplo específico é a reação do ácido periódico de Schiff, que cora os carboidratos e as macromoléculas ricas em carboidratos. É usada para exibir glicogênio e muco em várias células e tecidos, as membranas basais dos epitélios e as fibras reticulares do tecido conjuntivo. Além disso, existe o método histoquímico enzimático, em que é usado um reagente de captura, um corante ou um metal pesado, para prender ou ligar o produto da reação da enzima, precipitando-o no local da reação, podendo ser observado por meio de microscópio. Outro método de coloração é o imunocitoquímico, em que se usa anticorpos conjugados a corantes fluorescentes, absorvendo e emitindo luz de comprimentos de ondas específicos. Os métodos imunocitoquímicos são usados para localizar um antígeno-alvo nas células e tecidos. A técnica de radioautografia utiliza emulsão fotográfica para localizar material radioativo em tecidos. Nesse método, muitos precursores moleculares de moléculas maiores podem ser marcados ao incorporar átomos radioativos na sua estrutura molecular. A radioatividade é então rastreada para localizar macromoléculas nas células e tecidos.
3. Descreva as diferenças entre os três tipos de microscopia.
A microscopia de luz utiliza feixes de luz para a formação de imagem com aumento de resolução. O microscópio de luz é composto de partes mecânicas e ópticas, por meio de iluminação que atravessa as lentes. A microscopia eletrônica de transmissão usa um feixe de elétrons que interage com um espécime para produzir uma imagem. As imagens podem ser gravadas em meios digitais. A microscopia eletrônica de varredoura é diferente de MET porque o feixe de elétrons não atravessa o espécime, e sim percorre sua superfície, varrendo a imagem obtida e projetando-a em 3D.
Referências:
Ross, M. H., and W. Pawlina. "Histologia: texto e atlas, 7 edição ed." (2016).