UNIVERSIDADE ESTADUAL PAULISTA “JÚLIO DE MESQUITA FILHO” -

FACULDADE DE CIÊNCIAS E LETRAS, CÂMPUS ASSIS

MARIA CLARA POLI DA SILVA

RELATÓRIO DE AULA PRÁTICA: PHMETRO, SOLUÇÃO TAMPÃO E

PIPETAGEM

ASSIS
2023
1 INTRODUÇÃO
As Micropipetas tem as mesma função que as pipetas graduadas e volumétricas: medir
um volume pequeno pré-determinado de um líquido. A diferença entre elas é que enquanto as
pipetas graduadas e volumétricas medem volumes da ordem de mililitros, as micropipetas
medem na ordem de microlitros.
São instrumentos importantíssimos nas áreas de química, biologia, biotecnologia entre
outras. As mais usadas nos laboratórios são as micropipetas de deslocamento de ar que
podem pipetar qualquer líquido mas, existem as micropipetas de deslocamento positivo que
são feitas para pipetar líquidos específicos. Elas são de fácil uso e pouco erro, quando
calibradas. O mecanismo é simples pressionar o êmbolo em cima manualmente, que aspira o
líquido e, o mesmo êmbolo escoa o líquido por impulsão do ar.
A Solução Tampão, ou solução tamponada, é uma solução que seu pH varia muito
pouco com a adição de um ácido forte ou uma base forte. Normalmente é composta por um
ácido fraco e sua base conjugada, para que tenha uma espécie que possa reagir com os íons
H+ e outra espécie que possa reagir com os íons OH -. As soluções tampões são usadas quando
necessita-se de um valor de pH mais preciso do que quando usamos os indicadores ácido-
base ao fazer uma titulação. Pode - se ter um tampão ácido e um tampão básico. Para se ter
um tampão ácido na titulação de um ácido fraco por uma base fraca, a adição da base
neutraliza o ácido, fazendo com que o ácido fraco e sua base conjugada existam na mesma
solução, criando assim um tampão ácido; e quando a solução atingir seu ponto de
equivalência, fazendo com que a base fraca e seu ácido conjugado coexistam, criando um
tampão básico. Esses diferentes tampões podem ser usadas para calibrar um pHmetro.
O famoso pHmetro, criado em 1934 pelo médico Arnold O. Beckman, é um
dispositivo que tem como objetivo medir o pH das soluções. Este consiste no aparelho que
vai dizer qual o pH da solução, depois de ser calibrado, e o dois eletrodos, um serve como
referência enquanto o outro irá detectar os íons de hidrogênio.
2 RESULTADOS
Para o primeiro experimento, foram usadas micropipetas de 100μl e de 1000μl com
suas respectivas ponteiras. Três microtubos de eppendorf de 2ml e três béquers sendo que um
deles continha álcool, corante de metil e água destilada respectivamente. Foi pré-estabelecido
que a solução 1 seria a de álcool, a solução 2 seria o corante de metil e a solução 3 seria a
água destilada. A tabela 1 apresentada abaixo, especifica o volume de cada solução que foi
colocada em cada microtubo.

Tabela 1: Resultado obtido no primeiro experimento.

Solução

1 2 3 Total
A 100μl 700μl 200μl 1000μl
B 50μl 250μl 700μl 1000μl
C 500μl 500μl - 1000μl
Fonte: Própria autora (2023)

Nota-se que a solução contida no microtubo C foi pipetada corretamente já que

apresentou 1ml de solução conforme se observa na figura 1 apresentada abaixo. Os
microtubos A e B excederam o volume esperado, conforme apresentado na figura 1. Isso
aconteceu porque ao pipetar uma das soluções entrou uma bolha de ar na ponteira fazendo
com que o volume pipetado fosse maior do que o estabelecido.
Figura 1: Soluções 1, 2 e 3.

Fonte: Própria autora (2023)

Para o segundo experimento foi usado um pHmetro e as soluções de fosfato de sódio

monobásico e fosfato de sódio bibásico, pois o aparelho precisava ser calibrado. O processo
de calibragem é de certa forma simples, primeiramente deve-se ligar o aparelho e, em seguida
pressionar a tecla C para que o aparelho entenda que será calibrado. Na sequência, deve-se
lavar o eletrodo usando uma pisseta com água destilada (não se recomenda o uso de água
comum pois os íons dela podem afetar a medição do pH da solução que se quer descobrir). O
aparelho vai pedir para que o eletrodo seja colocado na solução tampão de pH igual a 7 e, em
seguida pressionar a tecla C. Nesse momento, o aparelho vai começar a medir os íons e,
assim que acabar vai pedir para que se coloque o eletrodo em uma solução tampão de pH
igual a 4. Antes de colocar o eletrodo na solução de pH 4 deve-se lavar o eletrodo novamente
e, assim que colocar o eletrodo na solução deve-se apertar a tecla C e aguardar. Ao terminar
de medir os íons o aparelho estará calibrado e pronto para medir a solução que foi preparada
mas, antes é necessário lavar o eletrodo. A solução de 100ml, denominada solução A, é
composta por 80ml de fosfato de sódio monobásico (onde 10g do sal foi diluído em 100ml de
água destilada em um béquer) e 20ml de fosfato de sódio bibásico (onde 3g do sal e foi
diluído em 100ml de água destilada dentro de um béquer). Ao colocar o eletrodo na solução
A, o pHmetro indicou que a solução tinha um pH igual a 5.27, conforme apresentado na
figura 2, sendo que, o pH ideal desta solução é um pH de 5.5. É possível verificar uma
pequena variação que pode ser justificada pelo fato da solução ter sido preparada em um
béquer e não em um balão volumétrico sendo que o béquer não é considerado um tipo de
vidraria adequada para preparar soluções por não ser considerado preciso.
Figura 2: Medidor de pH.

Fonte: Própria autora (2023)

3 REFERÊNCIAS
pHmetro: Instrumento de Medição de Acidez, por Cristiano Bertulucci Silveira. Disponível
em: https://www.citisystems.com.br/phmetro/#:~:text=O%20phmetro%20foi%20inventado
%20em,medir%20a%20acidez%20dos%20lim%C3%B5es. Acesso em: 19 mar. de 2023.

Titulação ácido-base e formação de solução-tampão por Marco César Prado Soares –

Engenharia Química – Universidade Estadual de Campinas – UNICAMP – 2013. Disponível
em: https://d1wqtxts1xzle7.cloudfront.net/38724835/Titulacaoacidolibre.pdf?
1441885544=&responsecontentdisposition=inline%3B+filename
%3DTitulacao_acido_base_e_formacao_de_soluc.pdf&Expires=1679494191&Signature=N
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q7lgwmpCW95slKTWOqj5YXkRBpKu2hzg__&KeyPairId=APKAJLOHF5GGSLRBV4Z.
Acesso em 22 mar. de 2023.

Importância da Calibração de Micropipetas nos Ensaios Analíticos por Elsa Batista.

Disponível em:
https://www.metroquality.com.br/pastas/artigo/OID49801/IQS11pg38_40.pdf. Acesso em 22
mar. 2023.