QFL0241 – Química Analítica Instrumental – 2022

FLUORIMETRIA
Bibliografia
Sotomayor, M. D. P. T.; Dias, I. L. T.; Lanza, M. R. V.; Moreira, A.
B.; Kubota, L. T. Quím. Nova, 31(7) p.1755, 2008.
O’Reilly, J.E., J. Chem Education, 52 (9) p. 610, 1975.
Objetivo
Familiarização com a técnica de fluorimetria. Utilização das técnicas
de calibração externa e adição de padrão para a determinação de
quinino (sulfato de quinina) em amostra-problema.
6. Fazer a leitura dos padrões e construir uma curva de calibração de
intensidade de emissão por concentração. Não descarte os tubos de
ensaio contendo as soluções de 0,00 e 0,80 mg/L, pois estas
soluções serão utilizadas nas etapas seguintes.
7. Medir a intensidade de emissão da amostra A. Caso o valor de
emissão fique acima do valor obtido na construção da curva de
calibração, faça diluições apropriadas da amostra com H2SO4
0,2 mol/L e repita a leitura.
8. Calcular a concentração de quinino. Apresentar os resultados e os
cálculos no relatório.

Estudo do efeito do íon cloreto

9. Repetir a preparação das soluções da etapa 4, incluindo, porém, a
adição de 0,2 mL da solução estoque de NaCl 0,1 mol/L em cada um
dos balões.
10. Fazer as leituras de fluorescência nas mesmas condições
instrumentais utilizadas anteriormente. Se necessário, utilize as
soluções de 0,00 e 0,80 mg/L da etapa 5 para recalibrar o instrumento.
11. Construir nova curva de calibração sobrepondo-a a anterior
(etapa 6) e avaliar o efeito do cloreto.

Espectros de absorção e emissão de fluorescência da quinina.

Instruções gerais
1. Ligar o fluorímetro Turner e a lâmpada UV, deixando aquecer por
quinze minutos.
2. Escolher os filtros primário e secundário. Os filtros primários
disponíveis são identificados como NB360, NB405, NB440, NB490
e NB540, sendo que o número coincide com o  de máxima
transmitância do filtro. Os filtros secundários são identificados como
SC415, SC430, SC515, SC535, SC585 e SC668, sendo que o número
coincide com o  a partir do qual o filtro é transparente. Escolha um
filtro primário e outro secundário para a análise de quinino, pela
observação dos espectros de excitação e emissão.
3. Justifique sua escolha no relatório.
Determinação de quinino em amostra
contento cloreto pela técnica de adição de
padrão
12. Em 5 balões de 10,0 mL, pipetar 1,0 mL da amostra B. Adicionar
volumes apropriados de uma solução estoque de sulfato de quinino
2,0 mg/L, para que a concentração adicionada de padrão seja, ao final,
0,00; 0,20; 0,40, 0,60 e 0,80 mg/L. Completar o volume com a
solução 0,2 mol/L de H2SO4 e homogeneizar.
13. Se necessário, utilize as soluções de 0,00 e 0,80 mg/L da etapa 5
para recalibrar o instrumento. Em seguida, medir a fluorescência das
soluções.
14. Plotar os valores obtidos em papel milimetrado e determinar a
concentração de quinino na amostra. Apresentar os resultados e os
cálculos no relatório.

Determinação de quinino em amostra

sintética por calibração externa
4. Partindo de soluções estoque 2,0 mg/L de quinino, preparar
soluções contendo 0,00 (branco); 0,20; 0,40; 0,60 e 0,80 mg/L em
balões de 10,0 mL, completando o volume com H2SO4 0,2 mol/L.
5. Utilizar as soluções de 0,00 e 0,80 mg/L para o ajuste,
respectivamente, de zero e de fundo de escala do fluorímetro.
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