A Avaliação de Auxílios de Treinamento Canino ao longo do tempo no desempenho de cães de trabalho

por

Lauren A Alejandro BS

Uma Tese

em

Ciências Forenses

Submetida à Faculdade de Pós-Graduação

da Texas Tech University em
Cumprimento Parcial dos
Requisitos para
o Grau de

Mestre em Ciências

Aprovado

Paola. A. Prada, Ph.D.

Presidente do Comitê

Megan Thoen, Ph.D.

Nathaniel J. Hall, Ph.D.

Mark Sheridan, Ph.D.

Reitor da Escola de Pós-Graduação

maio de 2018

Copyright 2018, Lauren Alejandro

Texas Tech University, Lauren A. Alejandro, maio de 2018

ii
AGRADECIMENTOS
Em primeiro lugar, gostaria de agradecer aos meus queridos pais Patricia e Daniel Alejandro
, que sempre me apoiaram em todos os meus esforços acadêmicos e de vida. Além disso, ao
meu irmão Daniel, que me ensinou a amar a ciência. Eu não seria a pessoa que sou
hoje sem os valores que minha família incutiu em mim pelo amor e
apoio incondicionais. Em segundo lugar, gostaria de agradecer a todos os membros do meu comitê: Dra.
Paola
A. Prada, uma mentora verdadeiramente inspiradora que sempre me impulsionou em direção aos meus
objetivos acadêmicos e acreditou em mim desde o primeiro dia. Adquiri uma riqueza de conhecimento e
experiência trabalhando com ela no Instituto de Ciências Forenses. Dr. Thoen quem
foi fundamental para me ensinar como escrever um bom trabalho de pesquisa. Dr. Hall por
me ajudar na construção dos meus ensaios de campo K9 e sempre oferecendo suporte. Sinceros
agradecimentos à unidade K-9 do Departamento de Polícia de Lubbock (LPD), especialmente o sargento.
Jordan que
dedicou muitas horas certificando-se de que eu tinha tudo o que precisava para realizar esta
pesquisa. Além disso, gostaria de agradecer a todos os funcionários da TTU-IFS e meus colegas de classe
por me
apoiarem quando precisei de ajuda no laboratório para preparar minhas amostras, especialmente Shawna G.
Finalmente, a Andrew Bartnowak, que me deu amor e apoio incondicionais
durante esse e viagem incrível.

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ÍNDICE

AGRADECIMENTOS........... .................................................. .........................ii

RESUMO................................ .................................................. ........................................v
LISTA DE TABELAS ... .................................................. ........................................ vii

LISTA DE FIGURAS................................................. ......................................... viii

1. INTRODUÇÃO............................................... .................................................. ..1

1.1 Objetivos da Pesquisa Metas................................................ .......................................

1.2 Treinamento e Certificações para Cães Detectores de Narcóticos Trabalhadores.. ....................
1.3 Detecção de Odor Canino........................... ....................... .......................................
1.3.1 Prova de cheiro em tribunal... .................................................. .........................
1.4 O Desenvolvimento de Cães Detectores Caninos ........................ .........................
1.5 Narcóticos........... .................................................. .........................................
1.5 .1 Cocaína................................................................ .................................................. ......
1.5.2 Heroína ........................................ .................................................. ...............
1.6 Princípios e Aplicações de Narcóticos VOC .............................. .......................
1.7 Cromatografia Gasosa-Espectrometria de Massa (GC-MS) Com (SPME)........... .......
1.8 Método de Extração SPME ........................................ .........................................
1.9 Objetivo do Estudo de Tese .. .................................................. ....................... .........
2. METODOLOGIA E ANÁLISE DE DADOS................................... ..........
2.1 Materiais e Métodos .................................. .................................................. ..........
2.1.2 Auxílios de Treinamento de Narcóticos Reais ........................ .......................................
2.1.3 Auxílios de Treinamento Pseudo narcóticos.... .................................................. .............
2.2 Participantes e Procedimento Experimental ........................ .........................
2.3 Instrumentação e Procedimentos de Análise Química................ ..............................
2.3.2 Método de tempo de extração de SPME ideal ............... ...................................
2.3.3 Procedimentos de Extração de Auxílios de Treinamento Narcóticos (Reais e Pseudo) .. ...........
2.4 Procedimentos de teste de campo canino ................................ .......................................
2.5 Análise de Dados........ .................................................. ........................ ...................
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3. RESULTADOS E DISCUSSÃO..... .................................................. ..........

3.1 Método de tempo de extração de SPME ideal ....................... .........................

3.2 Avaliação Instrumental de VOC Real e Pseudo........ ....................................
3.2.1 Cocaína................................................................ .................................................. .....
3.2.2 Heroína ........................................ .................................................. ..........
3.3 K9 Teste de campo .................................. .................................................. ..............
3.3.1 Cocaína .................................... .................................................. ...................
3.3.2 Heroína .................................... .................................................. .........................
4. CONCLUSÕES ........................ .................................................. .........................71
5. REFERÊNCIAS................. .................................................. ......................... 75

Texas Tech University, Lauren A. Alejandro, maio de 2018

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RESUMO
Caninos ( K9) são a linha de frente de defesa na detecção de narcóticos pela polícia e
unidades militares de trabalho em todo o país. A maneira como os caninos aprendem a detectar narcóticos
é usando pequenas quantidades de narcóticos reais conhecidos como auxiliares de treinamento ou com
mímicos de auxílio de treinamento. Essas imitações são feitas sinteticamente e replicam o cheiro narcótico
direcionado
(pseudo). Embora existam vários estudos de pesquisa explorando a detecção canina
em termos de capacidades olfativas, identificação de voláteis de odor alvo, para citar alguns,
não há estudos existentes avaliando a vida útil de auxiliares de treinamento canino narcóticos,
definido como o período de tempo em uso durante o treinamento. Neste estudo, dois tipos de
auxiliares de treinamento são avaliados: auxiliares de treinamento narcóticos reais (cocaína e heroína), que
variam
de fresco a até 10 anos de idade e aromas pseudo narcóticos comprados comercialmente
(cocaína e heroína). O principal objetivo é realizar uma avaliação instrumental em
termos dos odores voláteis emitidos para qualquer amostra em relação à sua
respectiva idade para ver como sua vida útil afeta a detecção de K9. Para tanto, o
período de avaliação incluiu: recém-adquiridos, 2 semanas, 4 semanas, 6 semanas e até 12 semanas de
idade
para observar a taxa de dissipação de vapores químicos em ambiente controlado.
A análise de headspace de todos os auxiliares de treinamento foi coletada com Microextração em Fase
Sólida
(SPME) e analisada com Cromatografia Gasosa-Espectrometria de Massa (GC-MS) para
obter um perfil químico de odor. Simultaneamente, testes de campo com quatro equipes de caninos de
detecção de narcóticos do departamento de polícia local
(todos machos da raça Malinois belga de várias
idades) ocorreram para observar o desempenho do alerta K9 em relação à idade do auxílio de treinamento. A
hipótese é que, com o tempo, os vapores de auxílio ao treinamento diminuam em concentração e forneçam
menos assinatura química de odor para os caninos
detectarem, o que diminui o desempenho do alerta. Os resultados incluem compostos orgânicos voláteis
primários (COV) (80% em abundância de qualidade e frequência de ocorrência em tipos de narcóticos) para
heroína: etanona,1-(2-hidrofenil)-, fenol e undecano, 5-metil-. Os VOCs primários para cocaína incluíam: etanol,
2-butoxi-, benzeno, 1,3-dimetil-, p-xileno. Usando modelagem ANOV A multifatorial, não houve diferença
estatística entre a quantidade desses VOCs alvo em heroína ou cocaína em relação à idade ou tipo de auxílio
de treinamento narcótico. Embora nenhum perfil de odor químico consistente tenha sido encontrado nos
diferentes tipos de auxiliares de treinamento testados, os caninos foram capazes de alertar com grande
precisão, obtendo uma média de 96% de Valor Preditivo Positivo (VPP) em alertas para heroína e 100% VPP
para cocaína. Os Valores Preditivos Negativos Médios (VPL) para a heroína renderam 91% e 94% para a
cocaína. A variação do vapor de odor de COV destaca como os caninos, não importa a idade ou o tipo de
narcótico, são capazes de aprender um odor distinto e seguir seu padrão de odor à medida que muda ao
longo do tempo para identificá-lo. Isso afeta diretamente a detecção biológica de narcóticos, apresentando
evidências científicas sobre os perfis químicos de odor de vários tipos de drogas e seu efeito na detecção
canina eficiente e confiável no campo. Este projeto de pesquisa atende à necessidade de padronizar as
práticas de detecção forense de cães dentro da defesa nacional dos Estados Unidos no país e no exterior.
Palavras-chave: Odor narcótico, cromatografia gasosa de microextração em fase sólida /espectrometria de
massa (SPME-GC/MS), auxílio de treinamento K9 Texas Tech University, Lauren A. Alejandro, maio de 2018 vii
1 6 8 16 19 21 32 34 38 39 53 60 66 69 LISTA DE TABELAS 1. Estatísticas resumidas de Apreensão de Drogas
do Escritório de Operações de Campo do CBP................ 2. Implicações sobre os diferentes tipos de tipos de
resultados de alerta de detecção...... ............ 3. Exemplos de diferentes padrões de certificação de cães
farejadores de 2005..................... 4. Diretrizes aprovadas pelo SWGDOG SC8 Cães de Substância: Materiais de
Treinamento de Narcóticos ............................................. .................................................. ................9 5. Resumo
dos medicamentos CSA Cronograma 1-5 ....................... .......................................... 6. Características dos
diferentes tipos de Heroína................................................. 7. Compostos odoríferos primários e secundários
para drogas ........................................ .... 8. Ambiental condições para todos os tipos de auxílios de
treinamento .............................. 9. Informações sobre a equipe canina. ..................................................
......................... 10. Processo de esterilização do frasco de pedreiro, tampa e septo antes do headspace do
auxílio de treinamento Amostragem .................................................. .................................................. .......... 11.
Parâmetros da Coluna do GC e do Forno ........................ ......................... 12. Frequência de Horas Extras de
VOC's ótimas de Cocaína..... ......................................... 13. Frequência de horas extras de VOCs ideais da
heroína.. ............................................. 14. Medidas de campo de cocaína ..................................................
......................... 15. Medidas de campo de heroína........ .................................................. .............................. Texas
Tech University, Lauren A. Alejandro, maio de 2018 ii 5 18 18 20 26 27 28 36 37 42 44 45 46 47 47 48 48 48 50
54 54 54 55 56 56 LISTA DE FIGURAS 1. Um cão aprendendo a investigar uma linha de identificação de cheiro
onde um dos recipientes contém o cheiro de treinamento......... .................................................. ................ 2.
Estrutura química da cocaína .............................. .................................................. .... 3. Formas físicas de a)
Cocaína HCL b) Crack Cocaína................................. ............ 4. Estrutura química da heroína ........................
.................................................. 5. Esquema da instrumentação geral de GC-MS ........................................
.............. 6. (a) êmbolo SPME (b) Princípio SPME para aplicação de líquido e headspace......... 7. Etapas
sequenciais para extração de SPME e GC- Resultados do MS ....................... 8. Esquema da metodologia do
experimento.... .................................................. ........... 9 Diagrama de análise com s cromatografia gasosa de
microextração em fase sólida (SPME-GC-MS).................................. .................................................. ............... 10.
(a) Carta do observador preenchida durante o teste canino (b) Carta mestre preenchida antes de cada teste
canino ............ .................................................. ............................................. 11. Cromatograma de Íons Totais
(TIC) em incrementos de tempo de 15 min, 30 min. e 1h. coleção 10 anos. cocaína velha (HCL)
28g................................................ ......................... 12. VOC's ideais para cocaína fresca e velha (a) e (b) heroína
............ ....................... 13. TIC de (a) Narcóticos frescos em 1h. comparado ao TIC de (b) narcóticos de 10
anos no momento ideal (1h). .................................................. ............. 14. Semana 0 Coleta de COV (a) pseudo
(b) velho (c) fresco ......... ......................... 15. Semana 2 Coleta de COV (a) pseudo (b) velho (c) fresco....
......................................... 16. Coleta de VOC da Semana 5 ( a) pseudo (b) velho (c) fresco
........................................ ........ 17. Semana 10 Coleta de COV (a) pseudo (b) velho (c) fresco ........................
......................... 18. Semana 12 Coleta de COV (a) pseudo (b) velho (c) fresco ............ ......................... 19. VOC's
observados no perfil de odor do headspace da cocaína durante 12 semanas..... ....................... 20. Resultados
do gráfico de média dos mínimos quadrados para 2-butoxi etanol ............... .............................. 21. Resultados
do gráfico de média dos mínimos quadrados para benzeno, 1,3-dimetil..... ......................... 22: Resultados do
gráfico de média dos mínimos quadrados para p-xileno................................................ ........... 23. Áreas de pico
relativas em relação % de VOCs horas extras................................. ....................... 24. Semana 0 Coleta de COV
(a) pseudo (b) velho (c) fresco......... ....................................... 25. Coleta de VOC da Semana 3 (a) pseudo (b )
velho (c) fresco .......................................... ... Texas Tech University, Lauren A. Alejandro, maio de 2018 iii 57 57
57 59 63 63 63 64 67 70 26. Semana 6 Coleta de COV (a) pseudo (b) velho (c) fresco....... ..................................
27. Semana 10 Coleta de COV (a) pseudo (b) antiga (c) fresco......................................... 28. Semana 12 VOC
coleção ((a) pseudo (b) velho (c) fresco.................................... .... 29 VOC's observados no perfil de odor do
headspace da Heroína ao longo de 12 semanas ....................... 30: Resultados do gráfico de média dos
mínimos quadrados para fenol. .................................................. ..... 31. Resultados do gráfico de média dos
mínimos quadrados para etanona,1-(2-hidr oxfenil) -.................. 32. Resultados do gráfico de média dos
mínimos quadrados para undecano, 5-metil................ ................... 33. Áreas de pico relativas em % de VOCs de
heroína horas extras................... .................. 34. Dados de campo para cocaína ........................
.................................................. .............. 35. Dados de campo para heroína ....................
.................................................. ............. 1 CAPÍTULO 1 INTRODUÇÃO 1.1. Objetivos/ Metas da Pesquisa
Caninos (K9) são a linha de frente de defesa quando se trata de detecção de narcóticos usados ​para atos
criminosos, como o tráfico de drogas. O uso de drogas é uma epidemia que continua aumentando nos EUA
em grande parte devido ao contrabando de drogas ao longo das fronteiras dos EUA. Desde a década de 1960,
ocorreu um aumento no contrabando de drogas e os K9's são a melhor chance de apreender as drogas
ilícitas no local. A Tabela 1 mostra estatísticas resumidas do total de apreensões de drogas pelo escritório de
operações de campo da Alfândega e Proteção de Fronteiras (CBP) dos Estados Unidos (EUA) e da patrulha de
fronteira dos EUA para narcóticos heroína e cocaína apreendidos a cada ano fiscal (FY) [1]. Tabela 1.
Estatísticas resumidas das apreensões de drogas do Escritório de Operações de Campo do CBP (até 30 de
novembro de 2017) Narcóticos EF2015 EF2016 EF2017 Cocaína 49.365 58.276 71.677 Heroína 6.048 4.789
4.876 *pesos em libras (lb) K9 A detecção de narcóticos tornou-se a melhor ferramenta da Segurança Interna
dos EUA disponíveis para detecção em campo devido à sua velocidade e eficiência de detecção de
narcóticos em campo. O treinamento adequado para K9 é um passo imperativo na detecção de narcóticos de
campo proficiente. No entanto, tem havido pouca pesquisa científica sobre o uso de auxiliares de treinamento
narcóticos em relação ao desempenho do K9, que são uma parte fundamental do regime de treinamento. A
maneira como os caninos aprendem a detectar narcóticos é usando pequenas quantidades de narcóticos
reais conhecidos como auxiliares de treinamento ou com imitadores de cheiro de auxílio de treinamento. Os
mímicos também conhecidos como pseudos são feitos sinteticamente para a Texas Tech University, Lauren
A. Alejandro, maio de 2018 2 replicam o perfume narcótico direcionado sem conter nenhum narcótico real.
Muitas associações que certificam cães de detecção de narcóticos K9, como a National Narcotic Detector
Dog Association (NNDDA), que existe desde 1978, não especificam o período de tempo (idade) para
continuar reutilizando ou descartando os mesmos auxiliares de treinamento. Outras organizações nacionais
sugerem que diferentes quantidades e pureza de narcóticos devem ser usadas como auxiliares de
treinamento (assim como diretrizes diferentes para a certificação geral), mas nenhuma especifica o período
de tempo ideal (idade) para continuar reutilizando o mesmo auxiliar de treinamento ou quando descartá-lo . A
criação de padrões científicos para auxiliares de treinamento de narcóticos é vital para o desempenho ideal
na detecção de narcóticos caninos. Embora existam vários estudos de pesquisa explorando a detecção
canina em termos de capacidades olfativas, não há estudos existentes avaliando a vida útil de auxiliares de
treinamento caninos narcóticos, definidos como o tempo de uso durante o treinamento. Ao usar um auxílio
de treinamento real ou pseudo narcótico, a questão da pureza é importante. Independentemente do tipo de
auxílio usado, a pureza é importante porque apresentará o odor mais próximo e mais focado sobre o qual um
cão pode ser treinado [2]. O debate para descobrir o quão puro um auxiliar de treinamento fornece um ótimo
desempenho de treinamento ainda está sendo pesquisado. No entanto, o material típico de auxílio ao
treinamento de narcóticos fornecido à aplicação da lei geralmente não é puro. As substâncias geralmente
vêm da Drug Enforcement Agency (DEA) ou laboratórios criminais estaduais e geralmente são drogas de rua
que foram armazenadas em quartos de propriedade por meses ou anos antes de serem empregadas para
fins de treinamento canino [2]. Não há análise química registrada quanto à pureza dessas amostras, portanto,
os manipuladores caninos normalmente lidam com narcóticos de pureza desconhecida. Sem materiais puros
ou conhecidos, os cães podem aprender durante o processo de treinamento a detectar combinações de
produtos químicos que não representam necessariamente o odor parental ou dominante da droga. Portanto,
é essencial entender a composição química dos auxiliares de treinamento narcóticos K9. Estudos como
Macias et al. (2008) explicaram como os caninos podem responder a compostos orgânicos voláteis
dominantes (VOCs) no headspace acima da droga em vez do próprio composto original [3]. O que os K9s
estão cheirando em termos do composto original ou composto de odor dominante para fazer um alerta de
uma droga ilícita ajuda a identificar como melhorar melhor o treinamento. Fatores que podem afetar os
auxiliares de treinamento, como tempo (idade), também devem ser considerados quando a duração do uso
não for especificada. Não existe 'uma' associação canina que todas as agências que usam cães detectores
de narcóticos sejam obrigadas a passar porque não há um método padronizado. No entanto, para fins
judiciais , é vital que as agências tenham seus K9's certificados para mostrar que passaram por um
treinamento rigoroso e que a eliminação do preconceito ocorreu. A implementação de métodos semelhantes
pode unificar as práticas de treinamento em todo o mundo para aprimoramento de treinamento futuro. Com
números crescentes no tráfico de drogas e abuso de drogas neste país, utilizar caninos detectores com
treinamento otimizado é essencial para a guerra às drogas. Para isso, devem ser avaliados os fatores que
podem afetar os auxiliares de treinamento de narcóticos, como o tempo. Portanto, o objetivo deste estudo é
realizar uma avaliação instrumental e de campo do efeito do tempo na composição do auxílio de treinamento
narcótico (real e pseudo) e no desempenho canino relacionado. A contribuição deste estudo para o campo
forense é fornecer perspectivas científicas fundamentais, implementando estudos químicos e
comportamentais, sobre as assinaturas químicas de odor dos auxiliares de treinamento de narcóticos K9 ao
longo do tempo. Portanto, este estudo aprimorará ainda mais os procedimentos de detecção canina ideais
para fins de segurança nacional. A implementação ideal da detecção de narcóticos caninos afeta o campo
forense, fornecendo à Texas Tech University, Lauren A. Alejandro, maio de 2018 4 uma ferramenta valiosa e
altamente implantável na guerra contra as drogas. O objetivo é o aprimoramento do conhecimento no
domínio dos procedimentos ideais de detecção canina para fins de segurança nacional e desempenho de
detecção de K9. Esta pesquisa visa, em última análise, preencher uma lacuna no conhecimento sobre os
níveis de concentração de odor para auxiliares de treinamento de narcóticos caninos em várias idades e
como essa idade ou expectativa de vida afeta o trabalho prático de campo canino, um aspecto que nunca
havia sido avaliado antes. 1.2 Treinamento e Certificações para Cães Detectores de Narcóticos Cães
detectores caninos confiam em seus narizes para identificar um odor alvo específico, mas o desempenho na
detecção é baseado no treinamento que eles receberam. Dependendo do tipo de cão detector (cadáver,
explosivos, busca e salvamento, etc.), o tipo de odor alvo é diferente, mas o treinamento comum envolve um
manipulador K9 e a colaboração do cão. Para cães detectores de narcóticos , o treinamento envolve o K9
para detectar substâncias controladas amplamente abusadas, como maconha, metanfetamina, heroína,
cocaína e/ou outras drogas sintéticas que são delineadas como ilegais na jurisdição correspondente. Treinar
K9s para detectar narcóticos envolve uma série de variáveis ​usadas na detecção geral de cheiros. Comandos
diferentes, vários aromas e tipos de alerta variam para cada unidade canina, juntamente com os níveis de
desempenho e confiabilidade. As variáveis ​de treinamento envolvem uma colaboração de: tarefa, sugestão,
estímulo e resposta. Por exemplo, um único comando (cue) será emitido pelo manipulador no início de uma
pesquisa (tarefa) e um único alerta (resposta) será fornecido pelo K9 quando a identificação (estímulo) de
qualquer um dos conjuntos de aromas de aprendizado é encontrado [4]. Os narcóticos são treinados como
um alerta de grupo onde vários aromas são identificados por um único tipo de alerta. Dessa forma, se
heroína ou cocaína for encontrada, o tipo de alerta será o mesmo. Uma recompensa (brinquedo, elogio,
guloseima etc.) é então dada quando o odor alvo treinado é encontrado para motivação contínua . A
motivação é fundamental para os cães detectores, porque essa é a base do desempenho deles. As agências
policiais geralmente usam alinhamentos de identificação de cheiros, que é um método de treinamento viável,
onde o K9 escolhe entre vários itens em uma linha ou tipo de alinhamento especificado, no qual os aromas de
treinamento estão ocultos [2, 4]. A Figura 1 [5] é um exemplo de treinamento típico por linha de aromas. Este
tipo de procedimento de treinamento simula situações do mundo real onde os cães trabalham em áreas
abertas como postos de fronteira ou aeroportos para cheirar grandes quantidades de bagagens, pacotes,
carros e assim por diante. Figura 1. Um cão aprendendo a investigar uma linha de identificação de cheiros
onde um dos recipientes contém o cheiro de treinamento [5]. Os tratadores caninos são responsáveis ​por
treinar e identificar um alerta dado pelo seu cão detector especificado. Relacionamentos com seus cães
podem afetar o desempenho devido à comunicação que eles transmitem uns aos outros no campo [4]. Um
condutor deve saber sobre o comportamento de seu cão, como quando ele precisa descansar, e o melhor
alerta que se encaixa no K9. Por exemplo, um alerta passivo seria um cachorro sentado ou deitado ao lado da
Texas Tech University, Lauren A. Alejandro, maio de 2018 6 o local do odor alvo e um alerta agressivo seria
rosnar, morder ou arranhar diretamente o odor alvo localização [2, 4, 5]. Dependendo da personalidade do
cão, o treinador deve decidir o melhor alerta para treinar, para que ele possa identificar o alerta corretamente.
As qualificações do manipulador são baseadas em sua experiência, histórico de desempenho com o K9,
certificações e experiência para testemunhar em tribunal [2]. Grupos como o Scientific Working Group on
Dogs and Orthogonal Detector Guidelines têm se esforçado para delinear as melhores práticas tanto na
seleção de manipuladores quanto nos currículos de treinamento [7]. A precisão dos alertas do K9 geralmente
é estabelecida por meio do testemunho do manipulador do K9. Ao tentar entender a precisão de um alerta, é
importante entender a complexidade da avaliação do desempenho do alerta. Em um cenário de detecção,
uma substância alvo estará fisicamente presente ou ausente, levando a quatro possíveis resultados de alerta:
verdadeiro positivo, verdadeiro negativo, falso positivo, falso negativo. A Tabela 2 [4] explica os resultados
dos alertas com mais profundidade. Para fins de certificação precisa, as respostas de alerta do cão são
fundamentais para determinar o quão eficiente eles realmente são na detecção. A resposta errada de alerta
para cães detectores de narcóticos pode significar a diferença em permitir que uma busca inválida ocorra ou
deixar as drogas passarem , caso em que ambos podem desacreditar uma equipe canina. Tabela 2.
Implicações nos diferentes tipos de tipos de resultados de alerta de detecção [4] Tipos de resultado de alerta
de detecção Implicação Verdadeiro positivo (alerta, acerto, detecção correta) O odor alvo está fisicamente
presente e o cão detector relata sua presença Verdadeiro negativo (sem alerta, correto detecção, rejeição
correta) O odor alvo não está fisicamente presente e o cão detector informa como não presente Falso
negativo (sem alerta, falha, detecção incorreta) O odor alvo está fisicamente presente e o cão detector
informa como não presente Falso positivo (alerta) , acerto falso, alarme falso, detecção incorreta) O odor do
alvo não está fisicamente presente e o cão detector o informa como presente Texas Tech University, Lauren
A. Alejandro, maio de 2018 7 Para medir a precisão, uma proporção pode ser usada conhecida como Positive
Predictive Power (PPP) e Poder Preditivo Negativo (NPP) [2, 4]: Poder Preditivo Positivo (PPP) = Verdadeiro
Positivo/ (Verdadeiro positivo + Falso Positivo) Poder Preditivo Negativo (NPP) = Verdadeiro negativo/
(Verdadeiro e negativos + falsos negativos) Ambas as estatísticas de proporção fornecem medidas precisas
para o desempenho do alerta em um detector canino para determinar a precisão de seus alertas positivos e
negativos. Elementos de incerteza podem influenciar os resultados de alertas, como ruídos, distrações ou até
mesmo viés do manipulador. Um estudo de Lit et al. (2011) avalia como as crenças humanas afetam os
resultados do cão de trabalho no desempenho, onde os manipuladores foram informados falsamente onde
um alvo estava escondido. Os resultados deste experimento indicaram que o manipulador foi responsável
pelo motivo pelo qual o canino teve falsa detecção, mas em aplicações práticas há muitos outros fatores a

É
serem considerados, como ambiente , tipo de alvo de detecção e quão bem o canino é treinado [6]. É por isso
que o treinamento de rotina contínuo é necessário para validar as práticas, bem como implementar testes de
proficiência , como testes duplo-cegos. Esta medida de teste pode ser incorporada em uma linha de aromas
onde nem o experimentador/manipulador, nem o observador/avaliador sabem onde o odor alvo está
escondido [7]. Portanto, um teste duplo-cego pode eliminar ainda mais o viés do manipulador, uma vez que o
manipulador não conhece a localização do odor alvo. A utilização dos melhores tipos de medidas práticas e
procedimentos de teste levará, em última análise, à detecção de campo ideal para cães detectores de
narcóticos que trabalham. Há uma variedade de associações que certificam caninos como cães detectores
de narcóticos, como mencionado anteriormente, e cada associação tem diretrizes diferentes com um tipo
específico de critério de aprovação. A Tabela 3 é uma tabela do Scientific Working Group on Dog and Texas
Tech University, Lauren A. Alejandro, maio de 2018 8 Orthogonal Detector Guidelines (SWGDOG) cuja missão
é melhorar o desempenho de cães detectores de trabalho usados ​na aplicação da lei pelos principais padrões
científicos [7, 8]. Tabela 3. Exemplos de diferentes padrões de certificação de cães de drogas a partir de 2005
[8] Esta tabela mostra agências de certificação comuns e suas diretrizes de aprovação que permitem a
aprovação bem-sucedida das avaliações a partir de 2005, o que ainda é aplicável hoje. Os padrões de auxílio
ao treinamento em todas essas agências certificadoras são limitados a restrições de peso e tipo (real ou
pseudo) durante a certificação. Mais importante ainda, não há um requisito de tempo (idade) especificado
para o uso de auxiliares de treinamento de narcóticos. Ter um cronograma de registro para cada narcótico
em termos de data de obtenção, uso e data de substituição pode fornecer aprimoramento com auxílios de
treinamento de narcóticos. Dependendo do tipo de auxílio de treinamento empregado, diferentes desafios
podem surgir. O manuseio do auxílio de treinamento envolve custo de transporte, aquisição e cadeia de
custódia adequada para odores alvo controlados, como narcóticos e restos humanos. O armazenamento
adequado do auxiliar de treinamento é uma necessidade para conter as concentrações de vapor da Texas
Tech University, Lauren A. Alejandro, maio de 2018 9 para o propósito dos auxiliares de treinamento. “A idade
de armazenamento inadequada pode permitir a contaminação da fonte e do material associado, tornando o
odor alvo praticamente inútil” [7]. O tipo adequado de recipiente de armazenamento para conter auxiliares de
treinamento é seguido pelas restrições do SWGDOG que explicam que um recipiente de armazenamento
adequado evita a penetração de odor dentro ou fora do recipiente de armazenamento [2]. Em termos de vida
útil de um auxiliar de treinamento, algumas associações de certificação sugerem a substituição após 2-3
anos, mas não é necessária, portanto, alguns auxiliares de treinamento foram mantidos por períodos muito
mais longos. Diretrizes aprovadas para material de treinamento que devem ser incorporadas/continuam a ser
incorporadas entre as agências certificadoras de cães narcóticos podem ser vistas na Tabela 4. Diretrizes
Aprovadas pelo SWGDOG. Tabela 4. Diretrizes aprovadas pelo SWGDOG SC8 Substance Dogs: Materiais de
treinamento em narcóticos. [7,8] 4. Materiais de Treinamento 4.1. Os materiais de treinamento devem ser
embalados de forma segura para o canino durante todo o treinamento.

4.2. Os materiais de treinamento devem ser mantidos de forma a evitar perda ou

destruição.
4.3. Os materiais devem ser armazenados de forma a evitar a contaminação por odor ou contaminação
física, ou seja, os materiais devem ser armazenados em
recipientes separados e rotulados.
4.4. Os materiais de treinamento devem ser obtidos de uma fonte confiável e documentada
, como o laboratório da DEA.
4.5. Os procedimentos de segurança necessários relativos aos materiais de treinamento devem ser
seguidos de acordo com as leis locais, estaduais e federais.
4.6. Os registros de substâncias exigidos devem ser registros atuais e precisos
mantidos.
4.7. Os materiais de treinamento devem ser substituídos a cada 1-3 anos, mais cedo se contaminados ou
comprometidos.
4.8.
O descarte/destruição dos auxiliares de treinamento deve seguir as diretrizes locais, estaduais e federais .

Ter auxílios de treinamento com diferentes idades pode explicar possíveis

desempenhos de alerta canino ao trabalhar no campo devido a idades que variam de meses a anos em que
os níveis de odor flutuam
. Compreender os vapores químicos que emanam em diferentes intervalos de tempo pode mostrar quais
produtos químicos estão presentes para determinar se um canino fará um alerta ou não. 1.3 Detecção de
Olfato Canino Os cães usam seu olfato para identificar narcóticos. A detecção de odor tornou-se uma área de
importância para a pesquisa em ciência forense devido à sua aplicação no campo e nas comunidades
jurídicas. O odor é a mistura química de compostos voláteis que estimulam os neurônios do sistema olfativo
[7]. Compreender o que os K9s estão cheirando em termos de vapores de odor químico pode ajudar melhor a
aplicação da lei a melhorar os regimes de treinamento. Para isso, ter uma compreensão básica do aspecto
anatômico dos cães (Canis familiaris) é o primeiro passo. O sistema olfativo do canino é famoso devido às
suas capacidades fisiológicas. Muitos organismos biológicos têm fortes capacidades olfativas (olfativas),
mas nenhuma tão comum quanto os cães quando se trata de colocar seus narizes em trabalho de campo
real com agências militares e policiais. O nariz de um canino tem muitas funções como: respiração, equilíbrio
hídrico, regulação da temperatura, reciclagem de lágrimas e detecção de moléculas odoríferas [9]. Após
muitos séculos de desenvolvimento evolutivo e fisiológico, os caninos têm uma maneira poderosa de
distinguir substâncias químicas conhecidas como quimiorrecepção através do nariz (olfato), paladar
(gustação) e (enterocepção) a detecção de substâncias químicas dentro do corpo. A estrutura anatômica
geral dos caninos varia de raça para raça, com alguns tendo ossos maiores do focinho (área do nariz) e
alguns muito pequenos. No entanto, quanto maior o focinho do cão , mais área de superfície para a cavidade
tubular (onde o ar passa em direção aos pulmões) para que maiores quantidades de produtos químicos
sejam detectados. As narinas e passagens nasais (turbinados) são as principais portas de como o odor do
ambiente externo é introduzido na Texas Tech University, Lauren A. Alejandro, maio de 2018 11 canino. O odor
é composto de vários produtos químicos transportados pelo vapor de água no ar circundante, portanto,
fatores como umidade e temperatura têm impacto sobre como o odor de narcótico muda em diferentes
ambientes. Cada produto químico fornece sua própria quantidade de odor e identidade no ar. Dentro do
corneto estão as células receptoras olfativas (ORC) , que são células especializadas que possuem receptores
olfativos (OR) anexados que atuam como passagens para enviar mensagens ao cérebro. O OR envia um sinal
elétrico para o cérebro para identificação. O sinal elétrico é então enviado para o bulbo olfatório no cérebro
através do nervo olfativo (Nervo Craniano I) [2, 9]. O número de substâncias que os cães detectores são
treinados para detectar variam dependendo do tipo de cão detector e da agência correspondente. No entanto,
a maioria dos cães detectores são treinados para encontrar vários odores. Em estudos discriminatórios de
odor, como Williams et al. (2002), pesquisadores mostraram que os odores previamente aprendidos não
diminuíram à medida que o número de substâncias treinadas aumentou. Os pesquisadores mostraram isso
treinando cães para detectar um total de 10 novos odores com treinamentos contínuos de atualização de
odores previamente aprendidos. Houve um intervalo de 10 dias entre o aprendizado de novos odores. Em
última análise, o estudo queria ver se havia algum efeito de treinar vários alvos para detecção em novos alvos
e reter alvos antigos, significativamente não houve [10]. Isso é importante para mostrar que os caninos têm
um poderoso olfato discriminatório e podem detectar e lembrar vários tipos de odores de forma consistente.
As agências treinarão cães detectores de narcóticos em várias drogas enquanto ainda obtêm a confiabilidade
adequada. O acesso a materiais de treinamento é um desafio em si e muito difícil. Outros auxiliares de
treinamento canino , como auxiliares de treinamento de cadáveres, têm dificuldades semelhantes. Existem
muitos regulamentos e restrições que são implementados desde que o treinamento auxilia a maioria das leis
Texas Tech University, Lauren A. Alejandro, maio de 2018 12 são restos humanos reais como auxiliares de
treinamento. No estudo de DeGreeff et al. (2012) pesquisadores explicam que o acesso a auxílios de
treinamento apropriados é um problema comum entre os manipuladores caninos de detecção de restos
humanos (HRD), devido a restrições legais excessivamente rígidas, dificuldade de acesso e armazenamento e
os potenciais riscos biológicos [11 e 12]. Uma vez que o acesso tenha sido concedido, o manuseio das
ajudas de treinamento se torna um desafio. O tipo de auxílio de treinamento para o qual a HRD está
trabalhando envolve uma concentração de odor de fluxo de ar dinâmico sem contato em materiais sorventes.
A ideia de usar o mesmo odor químico de um auxiliar de treinamento real é um tema comum para diferentes
tipos de detecção canina. Outros auxiliares de treinamento para cães de detecção, como explosivos, têm uma
abordagem diferente na pesquisa. Para auxiliares de treinamento explosivos, assim como narcóticos,
regulamentos estritos e precauções de segurança devem ser seguidos para manuseá-los. Em pesquisas
emergentes, como o estudo de Moore et al. (2011) explora como “estabelece a necessidade de auxiliares de
treinamento canino não explosivos com os mesmos perfis de componentes voláteis que os explosivos que
eles representam” [13]. Para fazer isso, os pesquisadores usam instrumentação em Automated Training Aid
Simulation usando SPME (ATASS) para identificar compostos voláteis, mas também monitorar mudanças no
perfil do headspace ao longo do tempo, em relação ao tempo e à temperatura [13]. Três tipos de explosivos
foram usados ​e vapores de headspace coletados onde os resultados confirmaram que com o uso do ATASS
uma melhor compreensão dos principais componentes voláteis mudam ao longo do tempo. Esta pesquisa
pode, então, melhorar a criação de auxiliares de treinamento canino para explosivos, onde imitadores de odor
de material perigoso podem ser usados ​em vez de material perigoso real. Este estudo também mostra que a
mudança ao longo do tempo ocorre no headspace do odor alvo, e é por isso que a avaliação pelo tempo de
vida ou idade dos auxiliares de treinamento narcóticos deve ser analisada com mais profundidade. Texas
Tech University, Lauren A. Alejandro, maio de 2018 13 1.3.1 Provas de cheiro no tribunal Os cães detectores
de narcóticos mostraram o quanto são valiosos por seu histórico na detecção de drogas ao longo dos anos.
Durante a década de 1980, na estação de patrulha de fronteira dos EUA em El Paso, Texas, 12 cães
farejadores de drogas detectaram mais de US$ 100 milhões em narcóticos e mais de US$ 1 milhão em
dinheiro contaminado com drogas [14]. Desde então, o uso de cães farejadores de drogas continuou a ter o
mesmo sucesso. A admissibilidade judicial da prova de cheiro surge no tribunal quando a causa provável é
contestada, principalmente com: buscas em veículos, razões para a busca, as qualificações do cão,
justificativa do alerta pelo cão ou pelo condutor e viés do condutor em deixar o cão alertar [15]. É quando os
advogados de defesa querem saber sobre o histórico de treinamento e desempenho do cão para mostrar o
quão proficiente o canino é. Um dos primeiros casos judiciais que envolveram a aceitação de cães narcóticos
foi em 1973, quando um caso da Califórnia aceitou evidências de cheiro de um cão detectando maconha. A
razão pela qual o tribunal aceitou essa evidência, embora nenhum caso relatado envolvesse cães detectores
como detectores de maconha, foi sua aceitabilidade comprovada no tribunal como cães de rastreamento
[16]. Hoje, os tribunais geralmente consideram os cães detectores de narcóticos confiáveis, no entanto, a
violação da quarta emenda com direito à privacidade foi recentemente contestada. A Suprema Corte dos EUA
explica que o uso de cães não é uma revista e não fornece viés para examinar objetos inanimados, pois seu
único objetivo é indicar se um item contém contrabando [17]. As indicações ou alertas dados podem então
fornecer uma causa provável para emitir um mandado, abrir o recipiente etc. para realizar uma nova busca.
1.4 O desenvolvimento de cães detectores de narcóticos caninos Durante séculos, os caninos têm sido
utilizados como os melhores amigos do homem para ajudar os humanos em necessidades básicas, como
caça e proteção. Ao longo da história, os caninos continuaram este padrão de guerra para os exércitos
egípcios, gregos, assírios, persas e romanos como ataque de linha de frente [18] . O uso de caninos para
aplicação da lei começou a aparecer em casos como Jack, o Estripador, no final de 1800, onde o
rastreamento de humanos poderia ser apresentado a um júri. Os cães de aplicação da lei dos Estados Unidos
percorreram um longo caminho no desenvolvimento para uso em tribunais e segurança interna desde os
anos 1900. A Primeira Guerra Mundial influenciou o uso geral de cães durante a guerra em ambos os lados,
mas não foi até a década de 1970 que o uso canino para detecção de narcóticos tornou-se oficialmente de
interesse quando grandes quantidades de drogas começaram a cruzar a fronteira sul dos EUA. Foi quando o
estabelecimento do programa experimental de treinamento de cães detectores de narcóticos começou na
base da força aérea de Lackland em San Antonio, TX [14]. O evento provou ser significativo porque no mesmo
ano Los Angeles incorporou a primeira unidade de narcóticos K9, onde muitos se seguiram. Desde então,
agências em todos os Estados Unidos utilizaram K9s em sua força-tarefa. Isso ocorre porque os cães
detectores são vantajosos devido à sua mobilidade, autodireção, resposta rápida de autoamostragem,
biossensores em tempo real que usam mudanças sutis na concentração de odores para encontrar uma fonte
de odor sob condições de campo difíceis [2, 15, 18]. Hoje, os cães detectores têm muitas funções, como
auxiliar na localização de evidências, interceptar itens contrabandeados e contrabandeados, localizar
pessoas desaparecidas e recuperar restos mortais [15]. Embora muitas práticas e protocolos de manuseio
ainda sejam os mesmos de 50 anos atrás nos Estados Unidos, os avanços tecnológicos no século 20
permitiram mais investigações científicas sobre o uso canino em relação ao cheiro e à detecção de drogas.
Texas Tech University, Lauren A. Alejandro, maio de 2018 15 1.5 Narcóticos Ao longo da história, os Estados
Unidos tentaram proibir o uso de drogas viciantes e de abuso com muitos tipos diferentes de leis sobre
drogas. No entanto, durante a década de 1960, o abuso de drogas e o contrabando de drogas começaram a
ficar fora de controle e a guerra do presidente Nixon às drogas começou. A Lei de Substâncias Controladas
(CSA) promulgada como Título II da Lei Abrangente de Prevenção e Controle do Abuso de Drogas de 1970 foi
criada como uma única lei de drogas que combinou todas as leis anteriores em uma conformidade federal. O
objetivo desta lei foi concebido para regular a fabricação, posse e distribuição legais de plantas, drogas e
substâncias químicas selecionadas sob jurisdição federal. A CSA coloca todas as substâncias em uma das
cinco categorias (onde a categoria um é considerada mais nociva) com base no uso médico da substância,
potencial de abuso, segurança e responsabilidade de dependência [19]. A Tabela 5 é um resumo explicando
os cinco principais esquemas de medicamentos, seus requisitos e exemplos de medicamentos [19, 20].
Texas Tech University, Lauren A. Alejandro, maio de 2018 16 Tabela 5. Resumo dos medicamentos CSA
Schedule 1-5 [19, 20] do que listar todas as substâncias ao criar leis estaduais sobre drogas em
conformidade com o CSA. Isso significa que as leis estaduais sobre drogas podem ser especificadas por
cada estado, mas não podem anular ou entrar em conflito com os padrões da CSA. Se as substâncias
precisarem ser adicionadas, alteradas ou excluídas de seus cronogramas atuais, elas devem ser aprovadas
pela Drug Enforcement Administration (DEA) [19]. Texas Tech University, Lauren A. Alejandro, maio de 2018
17 A DEA foi criada para gerenciar a regulamentação de drogas como resultado da CSA pelo presidente
Nixon em 1973[19]. A DEA, juntamente com o Departamento de Segurança Interna e outras agências
governamentais, trabalham com a aplicação da lei estadual e local em tarefas especiais para ajudar a deter o
tráfico de drogas e a violência relacionada a gangues em todo o país. A fabricação de drogas ilegais é um
crime e durante a década de 1980 a quantidade de condenações federais por drogas mais que dobrou. Foi
quando o Congresso aprovou a Lei de Controle Abrangente de Crimes de 1984, que aumentou as penalidades
para violações de CSA e alterou as violações de drogas criminais gerais da CSA. Embora cada estado tenha
suas próprias leis de drogas específicas em relação a multas e prisão, o objetivo comum da punição no
controle do crime é reduzir o abuso e o contrabando de drogas em todos os EUA . são o foco deste estudo.
Independentemente da implementação de leis severas sobre drogas, elas continuam sendo grandes drogas
de abuso no tráfico de drogas, portanto, entender os componentes científicos dessas drogas apenas
aprimora o treinamento de detecção canina para situações do mundo real [19, 21]. 1.5.1 Cocaína A cocaína,
um alcalóide natural, é derivada da planta da coca e de outras plantas do gênero Erythroxylum [22]. A
Cordilheira Andina Central e Norte é onde a planta de coca foi cultivada em locais como Peru, Bolívia,
Colômbia, Brasil, Argentina e outras áreas vizinhas. Durante o início do século 19 , o cientista alemão Albert
Nieman isolou pela primeira vez a cocaína da planta [23]. Existem duas formas diferentes de cocaína. A
primeira forma está em seu estado de pó branco salino conhecido como 'cloridrato de cocaína', onde a
substância é tipicamente aspirada através da passagem nasal ou dissolvida com água e injetada. A segunda
forma é feita usando o sal cloridrato de cocaína e depois fervendo-o Texas Tech University, Lauren A.
Alejandro, maio de 2018 18 com uma solução alcalina (hidróxido de sódio ou amônia) em água. O solvente é
então evaporado deixando cristais de cocaína de cor branca quase puros comumente conhecidos como
'crack cocaína' que podem ser fumados diretamente. Os efeitos farmacodinâmicos incluem um aumento da
produção de dopamina e norepinefrina no Sistema Nervoso Central (SNC), resultando em psicoestimulação
de euforia, prazer e consciência [23]. A cocaína é classificada como uma droga CSA Schedule II, uma vez que
tem uso médico em anestesia cirúrgica, mas é amplamente abusada, levando ao vício e possível morte. A
cocaína é uma grande ameaça e abrange uma grande área de foco na detecção de narcóticos caninos. A
Figura 2. mostra a estrutura química da Cocaína [24]. A Figura 3 ilustra as diferentes formas físicas entre
cocaína (HCL) e crack [24] Figura 2. Estrutura química da cocaína [24] (a) Cocaína (HCL) (b) Crack Cocaína
Figura 3. Formas físicas de a) Cocaína HCL b) Cocaína de crack [22] Texas Tech University, Lauren A.
Alejandro, maio de 2018 19 1.5.2 Heroína A heroína é produzida pelo homem por morfina de base natural
derivada de sementes de papoula de ópio de plantas Papaver somniferum. A morfina foi identificada pela
primeira vez como a principal substância química do ópio em 1803 e tem sido usada clinicamente como
analgésico desde então [23]. As plantas de papoula do ópio foram inicialmente cultivadas no México,
Colômbia, sudeste e sudoeste da Ásia. A heroína é feita a partir do ópio bruto das sementes da planta de
papoula, onde a morfina é extraída, adicionada de anidrido acético (acetilado) que produz diacetilmorfina
(heroína). O químico inglês Alder Wright sintetizou pela primeira vez a produção de heroína no final de 1800
[20]. Existem várias formas de heroína baseadas na fabricação que podem ser observadas na Tabela 6. [25]
Tabela 6. Características dos diferentes tipos de Heroína [25] Heroína marrom A heroína marrom, ou base
diamorfina, é o resultado da primeira fase de purificação de diacetilmorfina impura . Heroína Branca A heroína
branca, ou cloridrato de diamorfina , é a heroína mais refinada do mercado. O processo de purificação envolve
éter e ácido clorídrico Black Tar Heroin A heroína do alcatrão preto é resultante da acetilação incompleta da
morfina. Raramente é visto na rua hoje Texas Tech University, Lauren A. Alejandro, maio de 2018 20 A heroína
pode ser injetada (mais comum), cheirada ou fumada, dependendo da forma escolhida. Uma vez que a
heroína entra no cérebro, ela se liga rapidamente aos receptores cerebrais opióides, onde é metabolizada em
morfina. Os efeitos incluem analgesia, euforia, depressão respiratória e pupilas pontuais. A heroína é uma
droga CSA Schedule I porque não há nenhum uso médico aceito atualmente onde a morfina é uma droga CSA
Schedule II devido ao seu uso médico aceito. [23, 25] Figura 4. Estrutura química da heroína [26] 1.6
Princípios e aplicações dos COV narcóticos Os compostos orgânicos voláteis (VOCs) são produtos químicos
que contêm carbono e podem facilmente se tornar vapores ou gases [28]. A pesquisa analítica em VOCs para
narcóticos tornou-se uma grande área de foco para a detecção de narcóticos caninos à medida que a
tecnologia avança. A importância de investigar COVs liberados de medicamentos é usada no avanço do
treinamento de detecção, medidas de segurança e uso de validade. Uma grande quantidade de pesquisas
descobriu que os compostos químicos que os caninos estão alertando com drogas ilícitas nem sempre são o
composto original, mas o odor químico mais dominante. Por exemplo, em um estudo realizado por Lorenzo et
al. os pesquisadores descobriram que o benzoato de metila é o odorante ativo, que é o VOC dominante,
fazendo com que os caninos alertem para a cocaína, embora seja um subproduto e não o composto original
[29]. A Tabela 7 ilustra os odores primários e secundários encontrados em drogas amplamente consumidas
[20]. Texas Tech University, Lauren A. Alejandro, maio de 2018 21 Tabela 7. Compostos de odor primário e
secundário para drogas [20] Compreender e identificar as assinaturas de odor ativo de drogas adiciona ainda
mais validação para detecção canina quando surgem desafios no tribunal, como com moeda. Devido à
grande quantidade de contrabando/tráfico de drogas, estudos mostraram que aproximadamente 14,5
microgramas de cocaína estão na maior parte da moeda dos EUA [30]. Isso levou à questão da possibilidade
de que os cães de detecção de narcóticos alertassem para moedas que contêm assinaturas de odor
semelhantes às de drogas. Furton et al [31] realizaram testes de campo com cães detectores de drogas para
experimentar se o benzoato de metila iniciaria um alerta em níveis de microgramas conforme relatado como
moeda corrente. Seu experimento incorporou o uso de SPME-GC para avaliar os VOCs , que concluiu que a
quantidade de cocaína informada em dólares americanos seria insuficiente para sinalizar um alerta de um
cão detector de narcóticos treinado. Outros estudos envolvendo odor semelhante Texas Tech University,
Lauren A. Alejandro, maio de 2018 22 assinaturas de narcóticos, como flores que liberam benzoato de metila,
provaram que cães detectores de narcóticos podem distinguir a singularidade do perfil de odor da cocaína
[32]. Avaliar VOCs de drogas com detecção canina prova ainda mais suas poderosas habilidades
discriminatórias para desafios judiciais. Outras maneiras pelas quais os VOCs têm detecção avançada de
narcóticos é com a investigação de auxílios de treinamento pseudo narcóticos. Em 2008 Macias et al.
compararam pseudos de maconha e heroína reais versus comercialmente disponíveis por testes de campo e
avaliação de VOCs com SPME-GCMS. Os pesquisadores descobriram que nenhuma das pseudo-ajudas foi
detectada de forma confiável. Um raciocínio para isso foi que muitos dos auxílios comerciais contêm
compostos que não emitem ou criam os mesmos VOCs que os compostos originais dos medicamentos reais
[3]. Em 2010, o mesmo grupo de pesquisadores utilizou o sistema de Permeação Mímica de Odor Controlado
(COMPS), tecnologia que contém o odor ativo escolhido em uma bolsa de polímero permeável. Piperonal, o
odorante ativo de 3,4-metilenodioxi-N-metilanfetamina (MDMA ou ecstasy) foi usado; 50g de piperonal
COMPS e 25-35g de comprimidos de MDMA foram testados em teste de campo canino e métodos SPME
para avaliar os VOCs. Este estudo finalmente mostrou que 100% dos caninos alertaram para o COMPS e 96%
alertaram para os verdadeiros comprimidos de MDMA [33]. Estudos como esses mostram a importância de
pesquisas contínuas sobre COVs liberados de substâncias ilícitas. É por isso que é necessário avaliar os
VOCs por outros fatores, como tempo ( idade) de auxílios de treinamento reais e pseudo narcóticos para
avançar ainda mais . No entanto, detectar VOCS em diferentes auxiliares de treinamento é um desafio. O
estudo feito por Rice et al. (2015), explica que existem pequenas quantidades de compostos altamente
odoríferos presentes no headspace de drogas, com limiares de detecção de odor muito baixos. Este artigo
descreve as discrepâncias entre as composições de amostras reais e substitutas ao detectar odores de
drogas. No entanto, a única conclusão que pode ser feita foi que “não houve correlações aparentes entre as
concentrações” e que “a quantidade, idade e adulterantes da droga podem afetar as emissões de compostos
orgânicos voláteis (COV) e seu impacto no odor” [27]. Pseudo-ajudantes de treinamento são feitos por
fabricantes, então a maquiagem tenta imitar o cheiro de um narcótico específico, mas ainda é um desafio
obter em termos de VOCs. As drogas ilícitas são mais complicadas porque as concentrações nunca são as
mesmas na forma como são produzidas e a ampla gama de distribuidores no mundo do tráfico de drogas
produz uma infinidade de locais de origem diferentes. detecção de odor de narcótico. A maconha é outro
narcótico amplamente abusado e com um perfil químico conhecido. No estudo de Wiebelhaus et al. (2016)
as plantas de maconha emitem voláteis que possuem compostos distintos, como α-santaleno, valenceno e β-
bisaboleno. THC e canabinol também estavam presentes no headspace da maconha [11]. Em outro estudo
de Guerra-Diaz et al 2010, a Espectrometria de Mobilidade Iônica de Microextração Planar Dinâmica em Fase
Sólida foi utilizada para análise de drogas ilícitas e explosivos. Os resultados deste estudo encontraram
assinaturas de VOCs para: comprimidos de 3,4-metilenodioximetanfetamina (MDMA) resultando na detecção
de 12-40 ng de piperonal, explosivos (Pentolite) resultando na detecção de 0,6 ng de 2,4,6- trinitrotolueno
(TNT) e explosivos baixos (vários pós sem fumaça) resultando na detecção de 26-35 ng de 2,4-dinitrotolueno
(2,4-DNT) e 11-74 ng de difenilamina (DPA) [41]. Em um estudo de exame, Vu, D. et al (2001) estudaram perfis
de headspace de onze amostras de metanfetamina (MA) analisadas usando (SPME/GC-MS). Uma amostra
foi da Texas Tech University, Lauren A. Alejandro, maio de 2018 24 sintetizada a partir do Laboratório
Southwest da Drug Enforcement Administration (DEA) e outra um cloridrato de metanfetamina de grau
farmacêutico. O resto das amostras foram apreensões ilícitas de MA da fronteira sudoeste dos EUA. Os
resultados indicaram oitenta e sete compostos diferentes identificados em todas as amostras, mas apenas
sete ocorreram de forma consistente em todas as amostras de convulsão, sendo eles: ácido acético,
benzaldeído, acetofenona, P2P, 1-fenil-1,2-propanodiona (P12P), 3-fenil-3-buten-2-ona, 1-cloro-1-fenil-2-
propanona. Esses resultados são importantes, pois mostram que, embora o mesmo tipo e forma de droga
sejam avaliados, diferentes compostos são emitidos, resultando em sete compostos como assinaturas-
chave de odor. [43] Em um estudo conduzido por Lit et al (2006) Vinte e três cães (11 apenas vivos e 12
treinados em cruzamento) receberam comandos para procurar cheiro vivo em quatro áreas de busca
contendo diferentes combinações de cheiro: sem cheiro, cheiro vivo, cheiro de cadáver e cheiro vivo/cadáver.
Cada cão percorreu cada área de busca duas vezes. Esses resultados indicaram que os cães treinados em
cruzamentos têm dificuldade com o cheiro ao vivo quando o cheiro de cadáver ou nenhum cheiro estava
presente. Isso significa que cães treinados em cruzamentos foram capazes de identificar o cheiro duas
vezes, reconhecendo o padrão de odor do VOC[63]. Este estudo reforça a ideia de que mesmo quando o odor
é deixado residual, o odor pode estar presente e os caninos podem detectá-lo, através da contaminação
ambiental [63] . cães de drogas treinados. Compreender como o VOC muda ao longo do tempo pode ajudar a
identificar como os caninos estão detectando esses odores. 1.7 Cromatografia Gasosa-Espectrometria de
Massa (GC-MS) acoplada à Microextração em Fase Sólida (SPME) Texas Tech University, Lauren A. Alejandro,
maio de 2018 25 A cromatografia gasosa (GC) é uma técnica analítica que é usada em muitas indústrias
científicas amplas, como como farmacêutica, ambiental, toxicologia, engenharia química, aplicação da lei e
muito mais. Amostras com compostos moleculares voláteis que podem suportar temperaturas iguais ou
inferiores a 400 C em uma fase de gás ou vapor geralmente podem ser analisadas por métodos de GC. As
amostras analisadas via SPME podem estar na forma de líquido ou gás, que podem ser injetadas diretamente
no GC sem preparação de amostra. Uma vez injetadas, as amostras são volatilizadas em altas temperaturas
entre 250C-300C que são transferidas por um gás de arraste (Ar, He, N2 ou H2) através de uma coluna
especificada. Este estudo utiliza uma coluna GC capilar tubular de sílica fundida de 30m x 0,25mm x 0,25μm
fabricada pela Restek Technologies. Enquanto a amostra flui continuamente através da coluna, ela se dividirá
entre a fase estacionária e a fase móvel de gás até que seja separada por um filme fino de polímero
(especificado nesta coluna). Uma vez que as moléculas separadas são direcionadas para o detector do
espectrômetro de massa (MS) para serem identificadas por suas próprias características físico-químicas

propriedades. O filtro de massa varre a amostra fragmentada através de um intervalo de massa designado.
A abundância de cada massa é escaneada em um determinado momento produzindo um espectro de massa
[35]. Um esquema de GC-MS pode ser visto na Figura 5.
Texas Tech University, Lauren A. Alejandro, maio de 2018
26

Figura 5. Esquema de instrumentação geral de GC-MS [36]

O método analítico de GC-MS é muitas vezes referido como o 'padrão ouro' na
ciência forense devido à sua precisão, simplicidade, sensibilidade e versatilidade. O uso de GC
-MS em testes de drogas ilícitas provou ser um método de detecção ideal por sua
aceitação científica para provas judiciais e grande quantidade de estudos científicos publicados [37]. Estudos
de espectrometria de massa por cromatografia gasosa
identificaram muitos componentes químicos característicos do VOC
em certos odores de drogas ilícitas para aprimoramento na
detecção de cães policiais e militares. Outros estudos explorando VOCs pelo método de SPME-GC/MS em
aplicações forenses incluem odor de mão humana [2,34,48,49,57] explosivos [2,4,13,20,33,41,43,]
cadáveres [12 ,50-52,57] e dispositivos de armazenamento [3,51,56].
1.8 Método de extração de SPME
A técnica de extração sem solvente, microextração em fase sólida (SPME), foi
criada pelo Dr. James Pawliszyn na década de 1990. SPME é um método versátil que é
usado principalmente para a extração de voláteis e semi-voláteis. A simplicidade de sua estrutura
Texas Tech University, Lauren A. Alejandro, maio de 2018
27
consiste em uma fina fibra de sílica fundida revestida com uma fase estacionária polimérica montada em
uma
seringa modificada. A pesquisa de odor avançou significativamente por essa técnica, especialmente em
disciplinas forenses, como explosivos, toxicologia analítica, identificação humana e
perfil de drogas ilícitas. A principal vantagem desta técnica é que ela pode executar 4 etapas
(amostragem, extração, aprimoramento e introdução) em uma etapa livre de solvente, enquanto
contém baixos limites de detecção (abaixo de 1ppb) precisão e sensibilidade. O SPME é
portátil em campo para amostras difíceis de obter que possuem regulamentações rígidas, como
medicamentos. As amostras
podem estar na forma sólida, líquida ou gasosa, onde virtualmente qualquer fonte pode ser usada para
identificação de VOCs [38]. Ao realizar a extração com amostras líquidas, o SPME pode
ser imerso diretamente na amostra ou exposto na área diretamente acima da amostra conhecida
como headspace (HS) como visto na Figura 6 [35].

Figura 6. (a) êmbolo SPME (b) Princípio SPME para aplicação de líquido e headspace [35].
A extração do headspace pode ser obtida colocando a amostra em um frasco ou objeto jar
onde os VOCs podem ser mais concentrados para um equilíbrio e tempo de extração mais rápidos.
Texas Tech University, Lauren A. Alejandro, maio de 2018
28 A
extração de SPME ocorre pela transferência em massa de VOCs da amostra para a
fibra de sílica fundida, onde é aprimorada e coletada. A fibra está então pronta para injeção no GC-
MS para análise posterior.
Os revestimentos de fibra vêm em muitas formas diferentes disponíveis comercialmente , diferenciadas pela
polaridade e espessura da fibra [35-38]. Por exemplo, uma
fibra de polidimetilsiloxano não polar (PDMS) é ideal para extração de compostos não polares, onde
Polar Carbowax/divinilbenzeno (CW/DVB) é projetado para álcoois e outros
compostos polares. Estudos mostraram que a fibra bipolar revestida com
Divinilbenzenocarboxeno/polidimetilsiloxano (DVB/CAR/PDMS) é a
fibra ideal para a extração de VOCs de medicamentos onde seu design alvo de fabricação são odores e
sabores [38,39]. A SPME é simples, econômica, rápida, portátil em campo e uma
técnica de extração sem solvente que revolucionou a indústria científica. Suas amplas aplicações
em análises ambientais, farmacêuticas, de saúde e de aroma levam a avanços futuros
nos estudos de detecção de odor. Figura 7. Mostra as etapas sequenciais de como os VOCs são coletados
pelo método SPME e então analisados ​por GC-MS.
Figura 7. Etapas sequenciais para extração de SPME e resultados de GC-MS.
Texas Tech University, Lauren A. Alejandro, maio de 2018
29

1.9 Objetivo do estudo de tese

O principal objetivo deste estudo é avaliar as
assinaturas de odor de auxílio ao treinamento de narcóticos pseudo e reais em várias idades para ver como
elas afetam o desempenho do alerta canino.
Compreender como o tempo desempenha um papel nos auxílios de treinamento de narcóticos pode melhorar
ainda mais a
detecção canina, um conceito que nunca havia sido avaliado antes.
A hipótese é que, com o tempo, os vapores de auxílio ao treinamento diminuam em concentração
e forneçam menos assinatura química de odor para os caninos detectarem, o que
diminui o desempenho do alerta. Além disso, supõe-se que, independentemente da classe do medicamento,
a diminuição da disponibilidade de odor ao longo do tempo é uma tendência geral para todos os auxiliares de
treinamento testados. No
estudo proposto, a hipótese foi testada tanto por meio de testes instrumentais quanto de campo canino.
Utilizando Microextração em Fase Sólida acoplada à cromatografia gasosa-espectrometria de massas
(SPME-GC/MS), os auxiliares de treinamento foram medidos no período de envelhecimento correspondente.
Os
odores alvo a serem testados incluíam cocaína e heroína. Ambos os auxiliares de treinamento pseudo e
narcóticos reais
foram usados ​para a coleta de headspace para ver as assinaturas de odor e
os níveis de concentração que os auxiliares de treinamento estavam emitindo. Concomitante à
avaliação instrumental, equipes de caninos narcóticos certificadas do Departamento de Polícia de Lubbock
foram
avaliadas nos períodos de envelhecimento testados para observar o desempenho do alerta canino em
campo. Ambos
os testes instrumentais e de campo foram realizados durante um período de 12 semanas para ambas as
classes de drogas.

Texas Tech University, Lauren A. Alejandro, maio de 2018

30
CAPÍTULO 2
METODOLOGIA E ANÁLISE DE DADOS

2.1 Materiais e Métodos Todas as precauções laboratoriais padrão são seguidas para a experimentação
da análise química .
O laboratório envolvido foi o Texas Tech Institute for Forensic
Sciences. Grandes frascos de vidro usados ​para procedimentos de otimização de tempo e testes de campo
K9
foram 20 dois qt. frascos de tamanho grande com tampas de alumínio de vedação hermética especializadas
(Anchor Hocking
Co.). Cinco menores de 16 onças. frascos de vidro foram usados ​para
experimentos de extração de produtos químicos orgânicos voláteis (VOC) com tampas de alumínio de
vedação hermética especializadas (Kerr Co.). As tampas foram
perfuradas para criar um orifício de 2 mm para colocação do septo (Fisherbrand No.9). A cada semana, para
testes de campo canino, foram empregadas
vinte caixas de cartão de 6 x 6 x 6 polegadas recém-compradas . As medições de temperatura e umidade
foram feitas a partir de um higrômetro rastreável
portátil de monitoramento portátil ( Traceable Products Inc., ID 4040C ) HCL) 28g disponibilizados pela
agência local de aplicação da lei - Lubbock Police Department (LPD) que são registrados e fornecidos pela
Drug Enforcement Agency (DEA). Amostras reais de narcóticos de dez anos também foram disponibilizadas
pela LPD, amostras que foram apreendidas e registradas para uso da agência do mesmo tipo e peso; heroína
em pó branco aproximadamente 28g e cocaína (HCL) aproximadamente 28g. Todos os auxiliares de
treinamento de narcóticos reais são embalados individualmente e amarrados em sacos plásticos
transparentes produzidos por fabricantes desconhecidos. O armazenamento de todos os narcóticos reais
inclui frascos de vidro individuais (diferentes variedades de fabricantes desconhecidos) que são colocados
em caixas individuais da Texas Tech University, Lauren A. Alejandro, maio de 2018 31 pelican cases. Todos os
estojos de narcóticos Pelican são então colocados juntos em um grande saco com zíper de pano colocado
em um cofre fechado no LPD. Todos os auxiliares de treinamento de narcóticos reais da LPD permanecem
com a unidade canina LPD em todos os momentos devido aos rigorosos regulamentos da DEA. Portanto, a
experimentação de extração de SPME para todos os narcóticos reais ocorreu no LPD, conforme explicado na
seção 2.3. A Tabela 8 mostra as datas de coleta de extração e os fatores de temperatura e umidade do
ambiente LPD durante o tempo de extração. 2.1.3 Auxiliares de Treinamento Pseudo narcóticos Auxiliares de
treinamento pseudonarcóticos de heroína, cocaína e branco foram adquiridos de Auxiliares de Treinamento
ScentLogix™ Narcotic K9 Scent Imprint (Polymath Interscience LLC, Annapolis, MD) comercialmente
disponíveis. A heroína e a cocaína foram compradas como kits de ajuda dupla SLK-COKE-C (cocaína) e SLK-
HERO-C (heroína). O branco foi comprado como kit de auxílio único SLK1- BLANK (zero componente blank).
Todos os Auxiliares de Treinamento ScentLogix™ Narcotics K9 Scent Imprint são não perigosos, não
explosivos, não narcóticos e não derramam , portanto, seguros para manusear, transportar e armazenar. Os
ScentLogix™ K9 Scent Kits são usados ​atualmente por várias polícias federais, militares, estaduais e
empresas de segurança privada em muitos países [40]. Os procedimentos de manuseio incluem o uso de
luvas sem látex e a abertura cuidadosa da parte superior da bolsa selável com barreira de odor. Todos os
pseudos têm seu perfume quimicamente projetado dentro de uma bolsa de lona permeável que é costurada.
Quando não estiver em uso, os parâmetros de armazenamento para pseudos incluem mantê-los em suas
bolsas de vedação reutilizáveis ​individuais na geladeira no Laboratório TTU a 5°C. Assim que a embalagem é
aberta, ela é registrada como 'semana (0)' para o início da coleta de COVs para a experimentação da análise
química. Em um laboratório controlado , as medições de umidade e temperatura são feitas juntamente com
as medições de peso (g) dos pseudos'. Os procedimentos de extração de VOC são explicados na seção 2.3.
Texas Tech University, Lauren A. Alejandro, maio de 2018 32 Todos os dados compilados de temperatura e
umidade estão descritos na Tabela 8 para cada semana de análise correspondente. A Tabela 8 inclui as
condições ambientais para todos os tipos de auxílios de treinamento no estudo. Mesa. 8 Condições
ambientais para todos os tipos de material de treinamento SEMANA (#) MEDIDAS PSEUDO TESTADOS COM
NARCÓTICOS (EM LABORATÓRIO) MEDIÇÕES REAIS (NO LOCAL DE LPD) SEMANA 0 COCAÍNA Umidade
:70% Temp:17°C. Peso: 38,8g Umidade 27% Temp20,0°C. SEMANA 0 HEROÍNA Umidade 70% Temp 17°C.
Peso: 49,01g Umidade 26% Temp20,9°C. SEMANA 2 COCAÍNA Umidade: 70% Temp:17°C. Peso: 38,4g
Umidade 27% Temp20°C. SEMANA 3 HEROÍNA Umidade 70% Temp 17°C. Peso: 42,13g Umidade 26%
Temp20,9°C. SEMANA 5 COCAÍNA Umidade: 70% Temp:16°C. Peso: 37,34g Umidade 26% Temp19°C.
SEMANA 6 HEROÍNA Umidade 70% Temp:16°C. Peso: 36,16g Umidade 24% Temp21,3°C. SEMANA 10
COCAÍNA Umidade 70% Temp:16°C. Peso: 37,3g Umidade 25% Temp19°C. SEMANA 10 HEROÍNA Umidade
70% Temp:16°C. Peso: 35,35g Umidade25 % Temp19,5°C. SEMANA12 COCAÍNA Umidade: 70% Temp:16°C.
Peso: 37,02g Umidade 27% Temp19,5°C. SEMANA 12 HEROÍNA Umidade 70% Temp:16°C. Peso: 34,89g
Umidade 27% Temp19°C. Texas Tech University, Lauren A. Alejandro, maio de 2018 33 2.2 Participantes e
Procedimento Experimental O LPD tem um total de 6 equipes caninas ativas. Após uma explicação oral do
estudo ter sido dada ao oficial Sargent (Sgt.) LPD K9 encarregado da divisão, foi concedida permissão
voluntária para sua total assistência. Os Comitês Institucionais de Uso e Cuidados com Animais da Texas
Tech University (TTU) (IACUC) aprovaram o estudo como um estudo observacional e , portanto, não exigiu um
número de protocolo, pois não ocorrerá nenhuma experimentação real nos próprios caninos, apenas
observações. Apenas 4 das equipes caninas foram capazes de participar consistentemente durante os testes
de observação de campo. Os demais sujeitos não puderam participar por motivos temporários de saúde. As
quatro equipes caninas que participaram durante todo o estudo eram todos cães detectores de narcóticos
certificados pela National Narcotic Detector Dog Association (NNDDA) e manipuladores certificados como
oficiais do LPD com treinamento extensivo. Mais informações características sobre as quatro equipes
caninas envolvidas podem ser vistas na Tabela 9. Para fins de identificação, os caninos e tratadores recebem
um número ou letra de identificação aleatória para que os dados não possam ser rastreados até nenhuma
equipe específica. Texas Tech University, Lauren A. Alejandro, maio de 2018 34 Tabela 9. Informações da
equipe canina Para maior proteção da identidade das equipes caninas, todas as informações de teste de
campo coletadas foram armazenadas em um local confidencial. Os cães são considerados cães de dupla
finalidade, ou seja, estão qualificados para realizar mais de uma tarefa, encontrar entorpecentes e atuar como
cães de apreensão. Todos os cães são testados semanalmente quanto à proficiência de narcóticos em locais
do mundo real, o que significa que o treinamento ocorre em toda a cidade de Lubbock, dentro/fora em locais
aleatórios. Todos os testes de campo experimentais realizados neste estudo foram em seus locais normais
de treinamento de proficiência em locais aleatórios para simular as condições de treinamento de
manutenção de rotina. O procedimento de teste de campo pode ser visto na seção 2.4 testado para ver quais
auxiliares de treinamento narcóticos (realmente frescos, muito antigos ou pseudo) quando escondidos em
uma linha de cheiro, os caninos alertariam mais. A cada semana de teste de campo, apenas um tipo de
narcótico (heroína ou cocaína) foi avaliado para que o foco adequado de cada auxílio de treinamento de
narcótico de acordo com sua idade fosse concentrado. A parte de análise química do estudo ocorreu
primeiro com a determinação do melhor tempo de extração de SPME para o método envelhecido (narcóticos
antigos reais) na coleta de K9 Volátil (ID) F/M Idade (ano) Treinamento (ano) Tempo de treinamento com
idosos Auxílios (ano) Duração do treinamento com novos auxílios Duração do treinamento com pseudo 1 M 7
6 6 6 MESES N/A 2 M 2 6 MESES 6 MESES 6 MESES N/A 3 M 8,6 5 5 6 MESES N/A 4 M 4 2 2 6 MESES N/A
Texas Tech University, Lauren A. Alejandro, maio de 2018 35 Compostos Orgânicos (VOCs). O melhor tempo
de extração de SPME foi determinado como sendo uma hora e todos os métodos de extração de SPME para
o resto do experimento seguiram conforme explicado na seção 2.3. Dentro de cada semana de teste de
campo, a análise química para o narcótico alvo foi avaliada via SPME. Por exemplo, dentro de um dia da
semana (0) - teste de campo de cocaína, a extração de SPME de auxiliares de treinamento narcóticos reais
(antigos e novos) foram obtidos no LPD, enquanto pseudo (cocaína e branco) foram obtidos no laboratório
IFS TTU. Em seguida, todas as amostras coletadas foram passadas pelo GC-MS no mesmo dia, dentro de
dois dias após a coleta da amostra, para observar quais voláteis estavam sendo emitidos pelos auxiliares de
treinamento durante os testes de campo. Um esquema de uma visão geral básica do experimento pode ser
visto na Figura 8. Texas Tech University, Lauren A. Alejandro, maio de 2018 36 Figura 8. Esquema da
metodologia do experimento 2.3 Instrumentação e procedimentos de análise química O conjunto de fibra
SPME, revestido de 50/30μm com divinilbenzeno/carboxeno/ polidimetilsiloxano (DVB/CAR PDMS) (Supelco,
Inc., Bellefonte, PA), é usado para análises de headspace de voláteis de amostras de odor de narcótico que foi
comprovado para outras análises de voláteis [3,31,34]. Estudos preliminares como Cerreta, Rice e Lorenzo
utilizaram as fibras PDMS SPME enquanto estudos como Prada et al. mostraram que as fibras (DVB/CAR
PDMS) demonstram melhor sensibilidade do que o PDMS sozinho [34]. As etapas gerais para a coleta de
headspace de amostras ao longo deste experimento podem ser vistas na Figura 9. 1. Determinar a
otimização do tempo de extração do SPME 2. Coletar VOCs de auxiliares de treinamento ~ Simultaneamente
~ 3. Conduzir o teste de campo 4. Analisar os dados 15 min. 30 minutos. 1 hora. Texas Tech University,
Lauren A. Alejandro, maio de 2018 37 A fibra SPME tem 1 cm de comprimento composta de sílica fundida
ligada a um êmbolo de aço inoxidável conhecido como suporte SPME (Supelco, Inc., Bellefonte, PA). O
suporte SPME protege a fibra dentro de sua agulha oca até ser pressionado onde o êmbolo estende a fibra
expondo -a ao espaço livre da amostra. Isso permite que os compostos orgânicos voláteis (VOCs) adiram ao
sorvente da fibra. Uma vez que as amostras foram coletadas pelo tempo de extração desejado, a fibra é
retraída e então injetada no GC-MS para análise posterior. Figura 9 Diagrama de análise com cromatografia
gasosa de microextração em fase sólida (SPME-GC-MS) [39] O condicionamento e limpeza das fibras foram
feitos para garantir que estavam livres de contaminantes antes de qualquer amostragem. O condicionamento
inicial ocorre por injeção no GC por 1 hora a 250 graus C. No dia ou antes do dia em que as fibras devem ser
amostradas, as fibras serão então limpas de contaminantes. Após a limpeza da fibra SPME, ela foi colocada
em um pequeno saco de remédios fechado com papel alumínio pré-cozido para preservação extra. Enquanto
as fibras eram limpas, os potes, tampas e septos foram limpos com aproximadamente 1mL de acetona e
secos ao ar. Por uma hora, os frascos de pedreiro foram colocados no forno Científico HERAthermo a 105 C.
As tampas foram colocadas no forno por 30 min e a Texas Tech University, Lauren A. Alejandro, maio de 2018
38 septos foram colocados por 5 min. As tampas são colocadas nos frascos de pedreiro imediatamente
após serem retirados do forno junto com os septos. A Tabela 10. mostra os tempos de esterilização de cada
item. Depois de resfriados, os frascos, tampas e septos são lacrados com parafilme e colocados em uma
lixeira para serem levados ao LPD. Outros itens de laboratório também levados ao LPD para avaliação
instrumental incluíram: luvas, parafilme, chemwipes, canetinha, termômetro e as fibras de SPME limpas
embrulhadas em papel alumínio. Inspeções internas semanais dos instrumentos do GC- MS foram realizadas
para garantir que o instrumento estivesse funcionando corretamente. Tabela 10. Processo de esterilização do
frasco de pedreiro, tampa e septo antes da amostragem do headspace do auxílio de treinamento . Item
Tempo no forno Temperatura ◦C Frascos de conserva 1 hr. 105 Tampas de frascos de conserva 30 min. 105
Septos 5 min 105 2.3.2 Determinação do procedimento de tempo ideal A determinação do tempo de extração
de SPME ocorreu para determinar o parâmetro ideal para a reprodutibilidade do método, sensibilidade e
facilidade de uso. Após o tempo de equilíbrio de 30 min para cada narcótico em análise, três tempos de
extração diferentes foram avaliados: 15 min, 30 min e uma hora. Após o tempo de exposição para cada
incremento de tempo de amostragem, a fibra SPME é retraída de volta para o suporte SPME e levada de volta
ao laboratório. Este método foi usado em amostras antigas de auxílios de treinamento de narcóticos LPD
para detectar o nível de atividade de odor emitido no headspace. Com base na abundância de produtos
químicos, seus tempos de retenção (RT) e áreas de pico (PA) o tempo de exposição de 1 hora. foi
determinado como sendo o tempo de extração ideal de SPME e usado para todas as outras experiências
químicas. Texas Tech University, Lauren A. Alejandro, maio de 2018 39 2.3.3 Procedimentos de extração de
auxílio de treinamento narcótico (real e pseudo) Divinilbenzeno/carboxeno em polidimetilsiloxano (DVB/CAR
em PDMS) Fibras de 50/30 mm (Supelco) foram usadas para extraia os compostos orgânicos voláteis do
Headspace nos pequenos frascos de vidro contendo os auxiliares de treinamento narcóticos. As amostras
foram deixadas equilibrar à temperatura ambiente durante 30 min antes dos procedimentos de extração. O
tempo de extração foi realizado em temperatura ambiente por 1 hora, que foi previamente determinado como
o tempo de extração ideal. Este método foi usado no local do LPD para auxílios de treinamento de narcóticos
reais (frescos e velhos) e os Pseudos foram coletados em laboratório. Todas as amostras foram coletadas
no mesmo dia. Um cromatógrafo de gás (GC) Agilent 6890N foi usado com um detector seletivo de massa
5973 (MSD) para analisar os VOCs. Os analitos foram dessorvidos na porta de injeção do GC com
temperatura de entrada de 250-C. Os parâmetros de coluna e forno de GC para análise de amostras de
narcóticos coletadas podem ser vistos na Tabela 11. Tabela 11. Parâmetros de coluna e forno de GC.
Parâmetros da coluna e do forno do GC Fase do gás transportador Hélio (99,999%) a 1,0 mL/min de vazão e
PSI 7.1 Injetor/ Temperatura 250℃ com 30 seg. tempo de injeção GCColumn programa 40 ℃ (manter 5 min)
Rampa 10 ℃ até 290 ℃ (1 min hold) Tempo total de análise 31 min. Razão de divisão Válvula de purga sem
divisão 1 min aberta, a uma taxa de fluxo de 50 mL/min Detector MS com faixa de varredura de massa 40-
500mu Modo de varredura Modo de varredura completa seguido pelo modo SIM na Texas Tech University
sequencial, Lauren A. Alejandro, maio de 2018 40 2.4 Procedimentos de teste de campo canino Os auxiliares
de treinamento do LPD já estavam sob custódia do LPD e prontos para uso. Os pseudo e os pseudo brancos
foram levados das instalações do laboratório para o local de treinamento semanalmente designado em
bolsas seláveis. Os auxílios de treinamento foram apresentados aos caninos por meio de uma linha de odor
composta por quatro fileiras de cinco caixas, colocando cada amostra no chão, com aproximadamente 3m
de comprimento e 4m de largura. As amostras são colocadas em caixas de papelão de 6x6x6 polegadas que
contêm os grandes frascos de pedreiro de 2qt sem tampas. Os frascos são esterilizados no forno Científico
HERAthermo a 105 C (por uma hora) no laboratório antes de serem inseridos em sua caixa individual e
levados para o local de treinamento. Cada caixa foi então cortada com um pequeno orifício de 1 polegada por
3 polegadas para que os caninos pudessem cheirar as amostras dentro. Todas as caixas sem odores alvo
continham imitações de amostra em branco (que era uma toalha de papel enrolada em um saco semelhante
às drogas LPD) para replicar qualquer representação visual das caixas contendo alvo e reduzir quaisquer
pistas visuais para os caninos. O objetivo era apenas ver qual idade de narcótico o k9 alertaria mais também
(fresco, velho ou pseudo) em testes de campo de cada tipo de narcótico (heroína/cocaína) que foram
testados separadamente. Todos os auxílios de treinamento foram escondidos aproximadamente 30 minutos
antes do início das corridas caninas em locais de treinamento LPD designados. Cada teste de campo avaliou
apenas uma faixa etária de narcóticos, para cada um dos caninos testados. Por exemplo, um teste canino
será para: LPD heroína antiga, LPD heroína fresca, pseudo-heroína e auxiliares de treinamento pseudo em
branco e o próximo dia de teste de campo será com a faixa etária de auxiliares de treinamento de cocaína. Os
locais em que as amostras estão escondidas dentro da linha de odor são randomizados por software de
computador (Research Randomizer versão 4.0) antes do treinamento para que as amostras sejam trocadas
de posição (permanecendo em sua caixa de colocação inicial) entre cada teste canino. As ordens em que os
caninos entram em cada teste da Texas Tech University, Lauren A. Alejandro, maio de 2018 41 também são
aleatórias. Os manipuladores foram instruídos a detalhar cada amostra na programação usando seus
padrões de pesquisa de rotina para que cada uma das 20 caixas fosse marcada. O teste foi executado duplo-
cego, o que significa que tanto o manipulador quanto o avaliador não sabiam o resultado correto do teste. O
tempo total dado por teste foi de 3 minutos. Um exemplo do formulário de coleta de dados é visto na Figura
10. tanto para o observador quanto para o experimentador, bem como o layout da linha de aromas. A ficha do
observador é preenchida pelo observador durante o teste canino para marcar onde o canino alerta, se não há
alerta ou se o canino está interessado em uma caixa. O gráfico mestre é preenchido pelo experimentador que
oculta os auxílios de treinamento de antemão. O avaliador registra então outras variáveis, como umidade,
temperatura, hora de início/término do teste canino. Ambas as folhas de dados são comparadas após a
conclusão de todos os testes caninos . Os testes de campo continuaram todas as semanas após a
disponibilidade de LPDs ao longo das 12 semanas, alternando entre cocaína e heroína todas as semanas, à
medida que a amostra de treinamento envelhecia. (a) Texas Tech University, Lauren A. Alejandro, maio de
2018 42 (b) Figura 10. (a) Gráfico do observador preenchido durante o teste canino (b) Gráfico mestre
preenchido antes de cada teste canino 2.5 Análise de dados Uma ANOVA multifatorial a análise foi conduzida
usando o JMP Pro 13.2.1 (2016 SAS Institute Inc.) para determinar se existe algum efeito de interação entre
várias variáveis ​independentes em variáveis ​dependentes contínuas. Todos os modelos foram executados
com um alfa de p < 0,05 como ponto de corte para significância, o que significa probabilidade de que uma
relação entre duas ou mais variáveis ​seja causada por algo diferente do acaso. As variáveis ​independentes
neste estudo são idade (tempo) e tipo de narcótico (fresco, velho e pseudo) e variável dependente as áreas
de picos relativos de VOCs [64]. Texas Tech University, Lauren A. Alejandro, maio de 2018 43 CAPÍTULO 3
RESULTADOS E DISCUSSÃO 3.1 Método de tempo ideal de extração de SPME desempenho do alerta.
Portanto, antes de realizar o estudo de envelhecimento entre os tipos de auxílio de treinamento, determinar
um tempo ótimo de extração de SPME foi crucial nos métodos de otimização instrumental. Fibras de
microextração em fase sólida (SPME) revestidas com divinilbenzeno/carbono/polidimetilsiloxano
(DVB/CAR/PDMS) foram usadas para extrair o headspace narcótico e esterilizadas antes do uso por GC-MS.
As fibras esterilizadas tinham cromatogramas sem picos presentes para mostrar que todos os picos de VOC
após a extração eram apenas do headspace narcótico extraído. Após o equilíbrio de 30 min, diferentes
tempos de extração de 15 min, 30 min e 1h. foram avaliados os antigos e novos materiais reais de
treinamento de heroína e cocaína do Departamento de Polícia de Lubbock (LPD) no local de LPD (como
explicado anteriormente na seção de métodos 2.3.2.). A Figura 11 mostra os cromatogramas de íons totais
para uma amostra de cocaína antiga em cada tempo de extração avaliado. um exemplo de como a
otimização do tempo foi determinada. Texas Tech University, Lauren A. Alejandro, maio de 2018 44 Figura 11.
Cromatograma de íons totais (TIC) em incrementos de tempo de 15 min, 30 min. e 1h. coleção 10 anos.
cocaína velha (HCL) 28g. A Figura 11 mostra todos os três tempos de extração avaliados para cocaína antiga,

tempo de extração ideal como uma (1) hora para coleta de odor, conforme descrito tanto pelo número de
compostos detectados quanto pela abundância química. 1 hora foi o tempo mais longo
disponibilizado para extração de VOC no local com LPD e, portanto, mantido constante com os
parâmetros do laboratório. Este resultado de extração foi visto em todos os tipos de drogas narcóticas e
idades (antigas/frescas)
avaliadas para determinar o tempo de extração ideal. Os produtos químicos que tinham uma qualidade
mínima
de mais de 80% em abundância foram considerados VOCs ótimos detectados em uma hora.
A presença ideal de VOCs para ambas as faixas etárias de tipos de narcóticos pode ser vista na Figura 12.
15 min.
30 minutos.
1h.
Texas Tech University, Lauren A. Alejandro, maio de 2018
45

(a) Cocaína (b) Heroína

Figura 12. VOCs ideais para (a) cocaína fresca e antiga (a) cocaína e (b) heroína
Uma grande diferença foi observada nos compostos gerais presentes, conforme mostrado dos
cromatogramas de íons totais entre as idades em ambas as classes de narcóticos. Os achados
incluem voláteis de odor de vários grupos funcionais em cada classe de narcóticos exibindo
diferentes perfis de odor como fator de idade, considerando apenas compostos com
limiar de detecção acima de 80% em abundância. Produtos químicos de alta abundância que estavam
presentes em
amostras envelhecidas e frescas de heroína: 4-cianociclohexeno e limoneno. Os produtos químicos de alta
abundância que estavam presentes em amostras envelhecidas e frescas de cocaína
foram: benzaldeído e 1,3-dimetil benzeno. Os compostos químicos de cocaína ou heroína
não foram detectados diretamente pelo GC/MS no teste de extração ideal.
(a)
Texas Tech University, Lauren A. Alejandro, maio de 2018
46
No entanto, seus derivados foram detectados. Existem muitas razões pelas quais a droga em si
não foi detectada, que serão discutidas mais adiante nesta seção.

(a) fresco (b) velho

Figura 13. TIC de (a) narcóticos frescos em 1 hora. comparado ao TIC de (b) narcóticos de 10 anos
no momento ideal (1 hora)

Cocaína
Heroína
Cocaína
Heroína
Texas Tech University, Lauren A. Alejandro, maio de 2018
47 avaliados por até 12 semanas. Os Cromatogramas de Íons Totais (TIC) podem ser vistos nas Figuras 14-
18, onde os compostos orgânicos voláteis (VOC) ideais, com mais de 80% de qualidade, são identificados.
Cada figura TIC exibe o tipo de auxílio de treinamento de narcótico pseudo, antigo e fresco da cocaína para
cada semana avaliada. Figura 14. Coleta de COV da semana 0 (a) pseudo (b) antigo (c) fresco Figura 15.
Coleta de COV da semana 2 (a) pseudo (b) antigo (c) fresco (a) (c) (b) (c) (a) (b) Texas Tech University, Lauren
A. Alejandro, maio de 2018 48 Figura 18. Coleta de COV da semana 12 (a) pseudo (b) antigo (c) fresco Figura
16. Coleta de COV da semana 5 (a) pseudo (b) ) velho (c) fresco Figura 17. Semana 10 Coleta de COV (a)
pseudo (b) velho (c) fresco (a) (b) (c) (c) (b) (a) (b) (a) ( c) Texas Tech University, Lauren A. Alejandro, maio de
2018 49 A Figura 14 destaca vários voláteis de odor presentes com 8 VOCs para o fresco, 6 VOCs para o
pseudo e 3 VOCs para os antigos auxiliares de treinamento de cocaína na Semana 0. O fresco demonstra a
maior número de VOCs para aquela semana. O ácido benzóico aparece pela primeira vez na semana 0 e
ocorre frequentemente no pseudo (apenas) à medida que as semanas continuam. Etanol, 2- butoxi-, benzeno,
1,3-dimetil- e p-xileno começam a ocorrer no fresco aqui. A Figura 15 mostra 5 VOC's para o fresco, 8 VOC's
para o pseudo e 0 VOC para os auxiliares de treinamento de cocaína antigos na Semana 2. Os VOCs que
apareceram na semana 2 para o pseudo são todos diferentes dos VOCs da semana 0. Etanol, 2-butoxi-,
benzeno, 1,3-dimetil- e p-xileno estão presentes em pseudo para a semana 2. A Figura 16 mostra 5 VOCs para
o fresco, 3 VOCs para o pseudo e 0 VOC para os antigos auxiliares de treinamento de cocaína em Semana 5.
O tipo de cocaína antigo continua a não apresentar VOCs ótimos na semana 5 e o fresco permanece
consistente com etanol, 2-butoxi-presente. O pseudo diminui de 8 para 3 VOCs entre semanas. A Figura 17
mostra fresco aumentado para 15 VOC presentes, antigo com 1 VOC e pseudo com 3 VOCs. Etanol, 2-butoxi-,
e benzeno, 1,3-dimetil-, continuam a ocorrer frequentemente em fresco e pseudo A Figura 18 mostra cocaína
antiga emitindo picos muito baixos. Fresh e pseudo mostram picos consistentes e TIC ao longo de todas as
12 semanas. A quantidade de COVs aumenta e diminui em todos os tipos de narcóticos ao longo das
semanas. A técnica de coleta com o real e o pseudo permaneceu a mesma durante todas as 12 semanas. O
número de VOCs presentes a cada semana pode ser visto na Figura 19. Texas Tech University, Lauren A.
Alejandro, maio de 2018 50 A Figura 19 demonstra a flutuação de VOCs observados no headspace de todos
os tipos de cocaína em relação à semana. Não houve problemas de amostragem direta durante as 12
semanas , mas sempre existe a possibilidade de contaminação na transferência de fibras SPME do
laboratório para uma coleta no local, especialmente quando o local de coleta está em constante mudança. Os
VOCs diminuíram entre as semanas 0 e 5 para cocaína fresca, com um grande aumento na semana 10. A
pseudo cocaína flutuou no número de voláteis detectados entre acima/abaixo de 5 VOCs ao longo das 12
semanas. O antigo auxiliar de treinamento nunca teve mais de 3 VOCs presentes. A Tabela 12 mostra os
VOCs específicos presentes durante o período de 12 semanas e a frequência com que ocorreram em todos
os tipos de narcóticos. Os tempos médios de retenção são mostrados para cada composto químico ao longo
das 12 semanas. Na avaliação de VOC da cocaína, o auxílio de treinamento fresco teve os seguintes voláteis
ocorrendo várias vezes: etanol, 2-butoxi-, benzeno, 1,3 -dimetil-, p-xileno e benzeno, 1,2-dicloro-. Pseudo e
fresco compartilharam os seguintes VOCs: etilbenzeno, p-xileno, benzeno, 1,3-dimetil-,etanol, 2-butoxi-,
benzaldeído e ácido 2-propenóico, 3-fenil-, ácido benzóico, éster metílico-, fenol foi detectado em tipos de
auxílios de treinamento novos e antigos. Figura 19. VOC's observados no perfil de odor do headspace da
cocaína ao longo de 12 semanas . 0 5 10 15 Semana 0 Semana 2 Semana 5 Semana 10 Semana 12 Nº de
VOC's Presente Perfil de odor químico de cocaína Pseudo Fresh Old Texas Tech University, Lauren A.
Alejandro, maio de 2018 51 tipos de cocaína: etanol, 2-butoxi-, benzeno, 1 ,3-dimetil-, p-xileno são
considerados VOCs primários neste estudo e foram selecionados para posterior avaliação estatística. Como
mencionado acima, para todos os tipos de auxiliares de treinamento de cocaína, os compostos de ocorrência
de alta frequência foram selecionados para análise posterior. Isso foi realizado com o objetivo de avaliar
como a abundância desses compostos orgânicos voláteis foi afetada por variáveis ​como tipo de auxílio e
idade. Os seguintes compostos foram selecionados para esta modelagem ANOVA multifatorial: 2-butoxi
etanol, benzeno, 1,3-dimentil e p- xileno. Eles podem ser vistos nas figuras 20-22 a seguir. Todos os modelos
foram executados com um alfa de p < 0,05 como ponto de corte para significância. Para o 2-butoxi etanol,
não houve diferença significativa para nenhum tipo de auxílio ao treinamento (p= 0,1049) ou idade (p =
0,5292). Os gráficos quadrados lineares para idade e tipo podem ser vistos na Figura 20. Como pode ser
observado, houve um pequeno aumento na abundância desse composto no tipo pseudo-auxiliar de
treinamento, porém, não suficiente para significância estatística. No que diz respeito à idade, a semana 12
teve a maior abundância média em todos os tipos, mas, novamente, não produziu nenhum resultado
estatisticamente significativo conforme a modelagem ANOVA realizada. Para o benzeno, 1,3-dimetil-., não
houve diferença significativa para nenhum tipo de auxílio de treinamento (p= 0,1812) ou idade (p = 0,4637).
Os gráficos quadrados lineares para idade e tipo podem ser vistos na Figura 21. Como pode ser observado,
houve uma diminuição da abundância desse composto no tipo de auxílio de treinamento fresco, porém, não
suficiente para significância estatística. No que diz respeito à idade, a semana 0 teve a maior abundância
média em todos os tipos, mas , novamente, não produziu nenhum resultado estatisticamente significativo
conforme a modelagem ANOVA realizada. Texas Tech University, Lauren A. Alejandro, maio de 2018 52 Para
p-xileno houve significância estatística para o tipo de auxílio de treinamento (p= 0,0266), mas não houve
significância estatística para a idade (p = 0,4617). Como pode ser observado na Figura 22, houve um aumento
na abundância desse composto no tipo de auxílio de treinamento fresco. Indicando assim uma diferença no
perfil de odor químico que poderia, portanto, impactar na imagem olfativa que está sendo apresentada ao
canino. O P-xileno nunca foi identificado como uma assinatura de odor alvo para a cocaína, no entanto, isso
pode representar uma perspectiva fundamental para um estudo mais aprofundado da concentração desse
composto acima das amostras de cocaína. No que diz respeito à idade , a semana 12 teve a maior
abundância média em todos os tipos, mas, novamente, não produziu nenhum resultado estatisticamente
significativo conforme a modelagem ANOVA realizada. Texas Tech University, Lauren A. Alejandro, maio de
2018 53 Tabela 12. Frequência de horas extras de VOCs ideais da cocaína. Média RT VOCs Freq. (min.)
Composto Químico pseudo fresco velho pseudo fresco velho pseudo fresco velho pseudo fresco velho
pseudo fresco velho # 3,42 Ácido acético, éster propílico X 1 9,91 Ácido 4-piperidinapropanóico X 1 15,11 3-
Fenil-2-propin-1-ol X 1 15,55 Metil cinamato X 1 16,77 3-Metilbenzofurano X 1 13,93 Ácido benzóico XXXX 4
5,11 1,5-Heptadien-3-ino XX 2 5,19 Tolueno XX 2 8,42 Etilbenzeno XXX 3 8,20 p-Xileno XXXXX 5 9,72 Benzeno,
1, 2-dimetil-XXX 3 8,59 Benzeno, 1,3-dimetil- XXXXX 5 15,76 Piridina, 2-etil-4,6-dimetil- XX 2 7,07 Etanol, 2-
butoxi-XXXXXXX 7 12,11 2-butoxietil acetato XX 2 14,67 2 -Ácido propenoico, 3-fenil-, éster metílico XXX 3
13,04 Ácido fosfônico X 1 11,70 Fenol XXX 3 8,41 Benzeno, 1,2-dicloro- XX 2 13,17 Trietilfosfato X 1 17,48
Ciclodecano, metil- X 1 8,53 Benzaldeído XXX 3 10,93 Ácido benzóico, éster metílico XXXX 4 11,93 2-
Bromocicloheptatrienona X 1 12,02 Benzeno, metil-X 1 4,56 1,5-Hexadien-3-ino, 2-metil-X 1 10,66 Benzeno,
1,3-dicloro-X 1 10,77 Piridina , 2,3,5-trimetil-X 1 12,04 Decano, 3,6-dimetil-X 1 14,75 Pentadecano X 1 13,47
Ácido benzóico, éster etílico X 1 7,92 1,3-Ciclopentadieno, 5(1metiletilideno) X 1 Semana 0 Semana 2 Semana
5 Semana 10 Semana 12 Texas Tech University, Lauren A. Alejandro, maio de 2018 54 Figura 20: Resultados
do gráfico de média dos mínimos quadrados para 2-butoxi etanol Figura 21: Resultados do gráfico de média
dos mínimos quadrados para 1,3-dimetilbenzeno, Figura 22: Resultados do gráfico de média dos mínimos
quadrados para p-xileno Texas Tech University, Lauren A. Alejandro, maio de 2018 55 Figura 23. Áreas de pico
relativas em % de VOCs horas extras. Texas Tech University, Lauren A. Alejandro, maio de 2018 56 3.2.2
Heroína Os auxiliares de treinamento de heroína foram avaliados por até 12 semanas no tempo ideal de
extração do headspace de 1 hora. Os Cromatogramas de Íons Totais (TIC) de podem ser vistos na Figura 24-
28 a seguir. Cada figura TIC exibe os auxiliares de treinamento pseudo, antigos e novos da heroína avaliados
por semana especificada. Figura 24. Coleta de COV da semana 0 (a) pseudo (b) antigo (c) fresco Figura 25.
Coleta de COV da semana 3 (a) pseudo (b) antigo (c) fresco (a) (b) (c) (c) (b) (a) Texas Tech University, Lauren
A. Alejandro, maio de 2018 57 Figura 26. Coleta de COV da semana 6 (a) pseudo (b) antigo (c) fresco Figura
27. Coleta de COV da semana 10 (a) pseudo (b) ) velho (c) fresco Figura 28. Coleta de COV da semana 12 (a)
pseudo (b) velho (c) fresco (a) (b) (c) (a) (b) (c) (a) (b) ( c) Texas Tech University, Lauren A. Alejandro, maio de
2018 58 A Figura 24 destaca vários voláteis de odor presentes com 3 VOCs para o fresco, 3 VOCs para o
pseudo e 3 VOCs para os antigos auxiliares de treinamento de heroína na Semana 0. O fenol começa a
aparecer nos tipos frescos e antigos no início e ocorre com frequência ao longo das semanas. Os antigos
também consistem em etanol, 2-(2-etoxietoxi) e 5-decano que só ocorrem nesta semana. A Figura 25 mostra
1 VOC para o fresco, 3 VOC para o pseudo e 0 VOC para a heroína antiga auxiliares de treinamento na
Semana 3. O benzaldeído só é visto aqui na semana 3 em tipos pseudo e frescos ao longo do estudo. Fenol
ocorre no pseudo. A Figura 26 mostra 1 VOC's para o fresco, 4 VOC's para o pseudo e 0 VOC para a cocaína
antiga na Semana 6. Undecano, 3-metil- é o único VOC visto no fresco esta semana. Fenol continua a ocorrer
em pseudo junto com etanona,1-(2-hidroxifenil)- para esta semana. A Figura 27 mostra 3 VOC's para o fresco,
4 VOC's para o pseudo e 2 VOC para a heroína antiga. Na semana 10, o fenol continua a ocorrer no pseudo e
no antigo para esta semana. A Figura 28 mostra 8 VOCs para o pseudo, 3 VOCs para os tipos de heroína
fresca e 3 para os tipos de heroína antiga na última semana 12. A pseudo-heroína teve picos consistentes
com TIC semelhantes ao longo de todas as 12 semanas em que a nova e a antiga flutuaram. O número
específico de VOCs ideais presentes a cada semana pode ser visto na Figura 29. Texas Tech University,
Lauren A. Alejandro, maio de 2018 59 Figura 29. Demonstra a flutuação de VOCs observados no headspace
de todos os tipos de heroína em relação à sua semana. Os VOCs diminuíram entre as semanas 0 e 6 para a
heroína fresca, com um aumento na semana 10. A pseudo-heroína flutuou em abundância acima e abaixo de
4 VOCs ao longo das 12 semanas. Na semana 12, o pseudo teve os VOCs mais altos. O antigo nunca teve
mais de 3 VOCs presentes. A Tabela 13. mostra quais VOCs específicos estão presentes durante o período de
12 semanas e com que frequência eles ocorrem em todos os tipos de narcóticos. Os tempos médios de
retenção são mostrados para cada composto químico ao longo das 12 semanas na tabela 13 também. Na
avaliação de COV da heroína: todos os tipos de narcóticos compartilhados e repetidos: etanona,1-(2 -
hidrofenil)-. Pseudo e antigo compartilhado: fenol. Fresco e velho compartilhado: undecano 5-metil. Devido à
frequência e variação entre os tipos de heroína: etanona,1-(2-hidrofenil) -, fenol e undecano 5-metil são
considerados VOCs primários neste estudo e devem ser analisados ​mais a fundo. 0 2 4 6 8 10 Semana 0
Semana 3 Semana 6 Semana 10 Semana 12 # Compostos de VOC presentes Heroína Perfil de odor químico
Pseudo Fresh Old Figura 29 VOCs observados no perfil de odor do headspace da heroína ao longo de 12
semanas. Texas Tech University, Lauren A. Alejandro, maio de 2018 60 Tabela 13. Frequência de horas extras
de VOCs ideais da heroína. Média RT VOCs Freq. (min.) Composto Químico pseudo fresco velho pseudo
fresco velho pseudo fresco velho pseudo fresco velho pseudo fresco velho # 10,56 Fenol XXXXXXX 7 3,65
Fenol, 2-etil-X 1 11,18 Paroxipropiona XXX 3 3,75 3',4'-(Metilenodioxi)acetofenona X 1 3,60 Nonadecano X 1
11,25 Benzaldeído XXX 3 10,59 Ácido benzenossulfônico, 4-hidroxi- XX 1 13,93 Etanona, 1-(2-hidroxifenil)-
XXXX 4 14,86 Benzenemetanol X 1 5,71 Heptano, 2,4-dimetil- X 1 10,69 Benzeno , 1,3-dicloro-X 1 11,27
Undecano, 5-metil-XXX 3 11,27 Undecano, 3-metil-X 1 10,78 Etanol, 2-(2-etoxietoxi)-X 1 17,48 5-Deceno, (E)-X
1 12,05 Heptadecano, 2-metil X 1 12,24 Nonanal X 1 13,47 Ácido benzóico, éster etílico X 1 11,27 Undecano,
4-metil-X 1 7,17 Benzeno, 1-cloro-4-(trifluorometil)-X 1 14,47 Benzotiazol X 1 14,85 Fenol, 4-etil- X2 13,95
Etanona, 1-(4-hidroxifenil)-X1 14,37 Fenol, 3-(1-metiletil) -X1 15,15 Acetofenona, 4'-metoxi-X1 16,34
Tetradecano X1 11,69 Acético ácido, éster fenil XX 2 Semana 0 Semana 3 Semana 6 Semana 10 Semana 12
Texas Tech University, Lauren A. Alejandro, maio de 2018 61 Como mencionado acima, para todos os tipos de
auxiliares de treinamento de heroína, os compostos de ocorrência de alta frequência foram selecionados
para análise posterior. Isso foi realizado com o objetivo de avaliar como a abundância desses compostos
orgânicos voláteis foi afetada por variáveis ​como tipo de auxílio e idade. Os seguintes compostos foram
selecionados para esta modelagem ANOVA multifatorial: etanona,1-(2-hidroxifenil)-, fenol e undecano 5-metil.
Eles podem ser vistos nas figuras 30-32 a seguir. Todos os modelos foram executados com um alfa de p <
0,05 como ponto de corte para significância. Para o Fenol, não houve diferença significativa para nenhum tipo
de auxílio ao treinamento (p= 0,0599) ou idade (p= 0,6343). Os gráficos quadrados lineares para idade e tipo
podem ser vistos na Figura 30. Como pode ser observado, houve um pequeno aumento na abundância desse
composto no tipo pseudo-auxiliar de treinamento, porém, não suficiente para significância estatística. No que
diz respeito à idade, a semana 3 teve a maior abundância média em todos os tipos, mas, novamente, não
produziu nenhum resultado estatisticamente significativo conforme a modelagem ANOVA realizada. Para
etanona,1-(2-hidroxifenil) – não houve diferença significativa para nenhum tipo de auxílio de treinamento (p=
0,1917) ou idade (p = 0,1326). Os gráficos quadrados lineares para idade e tipo podem ser vistos na Figura
31. Como pode ser observado, houve um pequeno aumento na abundância desse composto no tipo pseudo-
auxiliar de treinamento, porém, não suficiente para significância estatística. No que diz respeito à idade, a
semana 12 teve a maior abundância média em todos os tipos, mas, novamente, não produziu nenhum
resultado estatisticamente significativo conforme a modelagem ANOVA realizada. Para undecano, 5-metil,
não houve diferença significativa para nenhum tipo de auxílio de treinamento (p= 0,4321) ou idade (p =
0,5091). Os gráficos quadrados lineares para idade e tipo Texas Tech University, Lauren A. Alejandro, maio de
2018 62 podem ser vistos na Figura 32. Como pode ser observado, houve um pequeno aumento na
abundância desse composto no tipo de auxílio de treinamento fresco, no entanto, não é suficiente para
significância estatística. No que diz respeito à idade, a semana 0 teve a maior abundância média em todos os
tipos, mas, novamente, não produziu nenhum resultado estatisticamente significativo conforme a
modelagem ANOVA realizada. Texas Tech University, Lauren A. Alejandro, maio de 2018 63 Figura 30:
Resultados do gráfico da média dos mínimos quadrados para fenol Figura 31: Resultados do gráfico da média
dos mínimos quadrados para etanona, 1-(2-hidroxifenil) – Figura 32: Resultados do gráfico da média dos
mínimos quadrados para 5-metil undecano Texas Tech University, Lauren A. Alejandro, maio de 2018 64
Figura 33. Áreas de pico relativas na proporção de % de heroína de VOCs horas extras. Texas Tech University,
Lauren A. Alejandro, maio de 2018 65 3.3 K9 Testes de campo 3.3.1 Cocaína O teste de campo canino foi
realizado para todos os tipos de ajuda de treinamento de cocaína durante um período de envelhecimento de
12 semanas. Isso incluiu tipos de ajuda de treinamento de cocaína nova, velha (10 anos) e pseudo-cocaína .
A Tabela 14 mostra as medidas de campo tomadas para a cocaína. As médias de temperatura para os locais
internos durante os testes de campo de cocaína foram de 22,5 C e 41,9% de umidade. As temperaturas
externas foram em média de 6,3 C e 38,3% de umidade para testes de cocaína. A Figura 34 mostra o
desempenho do alerta para o tipo de auxiliar de treinamento de cocaína (no primeiro gráfico) e o PPV e o NPV
(no segundo gráfico). Cada gráfico é matematicamente independente um do outro. Por exemplo, no gráfico
de desempenho de alerta da figura 34: semana 0 mostra que 4:4 cães alertaram para o antigo tipo de auxílio
de treinamento de cocaína (100% de resposta), 3:4 alertaram para o fresco (75% de resposta) e 0: 4 em
direção aos pseudos (resposta de 0%). As proporções foram ajustadas quando apenas 3 cães estavam
presentes. Este gráfico de desempenho de alerta exibiu uma resposta geral de alerta mais alta para o tipo de
cocaína antigo em comparação com o fresco e o pseudo ao longo das 12 semanas. As semanas 5 e 12
testaram apenas 3 caninos enquanto as outras semanas testaram 4, onde n= o número de caninos
participantes naquela semana. O segundo gráfico da Figura 34. Exibe o PPV e o NPV onde qualquer coisa
diferente de 100% PPV significa que o k9 deu um alerta falso. No entanto, 100% PPV não significa que o k9
alertou para todos os três tipos de drogas ocultos em cada teste, mas que os alertas que eles deram estavam
corretos. A taxa de resposta do NPV % é a taxa de rejeição correta para as caixas que não tinham nenhum
medicamento alvo ou para quantos o K9 não alertou, um falso negativo. Os caninos tiveram uma média de
100% de valor preditivo positivo e acima de 90% de valor preditivo negativo ao longo das 12 semanas. Texas
Tech University, Lauren A. Alejandro, maio de 2018 66 Ao examinar os ambientes interno e externo, nenhuma
alteração no alerta é observada ao comparar as semanas 0 e 2, sugerindo que os diferentes ambientes não
afetaram o desempenho do alerta na identificação do vapor do odor da droga. No entanto, uma mudança é
observada da semana 0 para a semana 12, em que o auxílio de treinamento dominante era a forma antiga de
cocaína e na semana 12 os caninos estavam detectando os dois tipos com o mesmo desempenho de alerta.
Isso sugere que os caninos estão aprendendo e se adaptando ao padrão de reconhecimento de odor aos
novos auxiliares de treinamento, assim como se adaptaram ao antigo regime de treinamento. Os pseudos
raramente receberam um alerta e apenas um alerta pode ser visto na semana 5, sugerindo que a fabricação
deste precisa ter aromas químicos alternativos para obter alertas caninos. O benzoato de metila não foi visto
no headspace da pseudo cocaína, mas não foi visto nos tipos reais de narcóticos, sugerindo outros produtos
químicos que estão presentes para oferecer o alerta. Os caninos deram 100% de precisão sem falsos
positivos ao longo das 12 semanas. Tabela 14. Medidas de campo de cocaína Interior/Exterior Média. Temp
(°C) Média % Úmido Semana 0 Interior 22,5 52,75 Semana 2 Exterior 8,5 35 Semana 5 Interior 22,63 31,1
Semana 10 Exterior 8,1 28 Semana 12 Exterior 2,3 52 Texas Tech University, Lauren A. Alejandro, Maio de
2018 67 Figura 34. Dados de campo para cocaína 0% 25% 50% 75% 100% Semana(0) n=4 Semana(2) n=4
Semana(5) n=3 Semana (10) n=4 Semana (12) n=3 % Resposta Desempenho de Alerta Semanal para Ajuda
de Treinamento de Cocaína Tipos Pseudo Velho Fresco 80% 85% 90% 95% 100% Semana(0) n=4 Semana(2)
n=4 Semana(5) n=3 Semana(10) n=4 Semana(12) n=3 % Resposta ao longo do tempo (Semanalmente)
Cocaína Semanalmente Valores Preditivos Positivos e Valores Preditivos Negativos VPP do VPP (n)= cães em
estudo (n)= cães em estudo Texas Tech University, Lauren A. Alejandro, maio de 2018 68 3.3.2 Heroína Teste
de campo canino foi realizado para todos os tipos de auxílio ao treinamento de heroína durante um período
de envelhecimento de 12 semanas. Isso incluiu tipos de auxílio ao treinamento de heroína fresca, velha (10
anos) e pseudo-heroína . A Tabela 15 mostra as medidas de campo para a heroína. A temperatura média
interna foi de 18 °C ​e umidade de 31% para testes de campo de heroína. As temperaturas externas variaram
de 12,95 C e 35,4% de umidade. A Figura 35 mostra a coleta de dados de campo para heroína da mesma
forma que a cocaína. O gráfico de desempenho de alerta e PPV/NPPV foram calculados da mesma maneira
que a Figura 34 dos dados de campo de cocaína. O desempenho médio de alerta mostra que o auxílio de
treinamento antigo teve uma resposta geral de alerta mais alta em comparação com o fresco e o pseudo ao
longo das 12 semanas, semelhante aos resultados da cocaína. A semana 12 testou apenas 3 caninos
enquanto as outras semanas testaram 4, onde n= o número de caninos participaram naquela semana. Os
caninos tiveram uma média de 96% de valor preditivo positivo ao longo das semanas, pois na semana 10 um
canino apresentou um alerta falso positivo em um local ao ar livre. Os valores preditivos negativos foram
superiores a 91% ao longo das 12 semanas. Ao examinar os ambientes internos e externos, uma mudança
inconsistente no alerta é observada ao comparar as semanas, sugerindo que nenhum ambiente específico
produziu mais ou menos alerta em termos de desempenho de alerta em como o vapor do odor da droga foi
identificado. Uma mudança, no entanto, é observada da semana 0 para a semana 12, em que a ajuda de
treinamento dominante era a antiga heroína, mas um aumento da nova forma aumentaria os alertas. Isso
sugere que os caninos estão aprendendo e se adaptando ao padrão de reconhecimento de odor aos novos
auxiliares de treinamento, assim como se adaptaram ao antigo regime de treinamento. O padrão de odor de
aprendizagem é visto especificamente em um cão que alertou repetidamente para a pseudo-heroína quando
os outros cães não o fizeram. Os pseudos raramente receberam um alerta como um todo e apenas um cão
apresentou resultados repetidos na semana 0 e novamente na semana 10. O ácido acético não foi visto no
headspace da pseudo-heroína, no entanto, o fenol foi um volátil repetido visto sete vezes entre o velho e
pseudo. Isso sugere que outros produtos químicos presentes no headspace também podem ser
categorizados como possíveis marcadores de odor, resultando em um alerta positivo. Os caninos deram 96%
de precisão dentro do período de 12 semanas, sugerindo precisão precisa mesmo com um falso positivo na
semana 10. As condições externas naquele dia estavam ventosas e frias e o canino que deu o falso alerta
parecia desmotivado naquele dia em seu teste de campo. Isso é importante notar, uma vez que esses cães
são cães de mordida de apreensão de duplo propósito, onde eles têm uma personalidade mais agressiva do
que talvez um cão de drogas treinado apenas. Tabela 15. Medidas de Campo de Heroína Interna/Externa
Média Temp (°C) Média % Úmido Semana 0 Exterior 12,2 31,75 Semana 3 Interior 17,25 29 Semana 6 Interior
20,3 24 Semana 10 Exterior 13,7 39 Semana 12 Interior 17,6 40 Texas Tech University, Lauren A. Alejandro,
Maio de 2018 70 Figura 35. Dados de campo para heroína 80% 85% 90% 95% 100% Semana(0) n=4

Semana(2)
n=4
Semana(5)
n=3
Semana(10)
n=4
Semana(12)
n=3
%Resposta ao
longo do tempo (Semanalmente)
Heroína Semanalmente Valores Preditivos Positivos e Valores
Preditivos Negativos
PPV
VPL
0%
25%
50%
75%
100%
Semana(0)
n=4
Semana(3)
n=4
Semana(6)
n=4
Semana (10)
n=4
Semana (12)
n=3
% Resposta Desempenho de Alerta
Semanal
ao Auxiliar de Treinamento de Heroína Tipos
Pseudo
Old
Fresh
(n)= cães em teste
(n)= cães em teste
Texas Tech University, Lauren A. Alejandro, maio de 2018
71

CAPÍTULO 4
CONCLUSÃO
O treinamento adequado para K9 é um passo imperativo na detecção proficiente de narcóticos em campo,
uma vez que eles são os linha de frente de defesa na detecção do tráfico de entorpecentes no local. Embora
existam vários estudos de pesquisa explorando a detecção canina em termos de
capacidades olfativas, identificação de voláteis de odor alvo, não há estudos existentes
avaliando a vida útil de auxiliares de treinamento canino narcóticos, definido como o tempo de
uso durante o treinamento.
No presente estudo, o tempo de extração do headspace otimizado para coletar a
maior quantidade de compostos foi determinado como sendo uma hora com
disponibilidade de LPD. Foi utilizado semanalmente na coleta dos compostos orgânicos voláteis (COV's)
no local do LPD juntamente com os pseudos no laboratório controlado. Este estudo foi um
estudo qualitativo (que compostos estavam presentes) e uma perspectiva semiquantitativa
(com base na área de pico ou abundância química existente dos compostos) para observar como
os padrões de odor volátil flutuavam no tempo em relação ao tipo de auxílio de treinamento estudado
(ou seja, antigo, fresco ou pseudo).
Compostos previamente detectados designados como assinaturas de odor chave para cocaína HCL
, como benzoato de metila, não foram detectados em nenhum dos headspaces de 12 semanas coletados
para
qualquer um dos auxiliares de treinamento [3]. No entanto, derivados químicos semelhantes (subprodutos)
foram vistos
, como o éster fenílico do ácido acético para a heroína. Isso pode ser devido ao
armazenamento/contaminação por
mascaramento de fatores ambientais, compostos dominantes sobrepostos no GC, como essas
formas de drogas foram fabricadas e/ou métodos de coleta de SPME (mais tempo necessário para
Texas Tech University, Lauren A. Alejandro, maio de 2018
72
coleta de headspace com idade prolongada) ou tipo de fibra SPME. Para a cocaína, os principais voláteis
identificados foram superiores a 80% em abundância de qualidade e uma frequência de ocorrência acima de
2
incluiu: ácido benzóico, 1,5 heptadien-3-ino, tolueno, etilbenzeno, p-xileno, benzeno,
1,2-dimetil- , Benzeno, 1,3-dimetil-, Piridina, 2-etil-4,6-dimetil-, Etanol, 2
-butoxi-, ácido 2-propenoico, 3-fenil-, éster metílico, Fenol, Benzeno, 1,2 -dicloro-,
benzaldeído e ácido benzóico, éster metílico. Os voláteis de odor com
frequência de ocorrência superior a 3 em todas as formas de idade da cocaína (antiga, fresca e pseudo)
incluíram: , p-
xileno, benzeno, 1,3-dimetil e Etanol, 2-butoxi-.
Para a heroína, os principais voláteis de odor identificados acima de 80% em abundância de qualidade e
frequência acima de 2 incluíram: fenol, paroxipropiona, benzaldeído, etanona, 1-(2-
hidroxifenil), undecano,5-metil, fenol, 4-etil e ácido acético, éster fenílico. Os voláteis de odor
com uma frequência de ocorrência superior a 3 vezes em todas as formas de idade da heroína
(antiga, fresca e pseudo) incluem: fenol, etanona, 1-(2-hidroxifenil) e undecano,5-
metil. Ambos os VOCs primários de heroína e cocaína neste estudo foram examinados com mais
profundidade utilizando a modelagem ANOVA multifatorial para mostrar uma correlação de como
eram suas áreas de pico em relação ao tempo. Todos os modelos foram executados com um alfa de p < 0,05
como
ponto de corte para significância, no entanto, não
foram relatados resultados estatisticamente significativos de acordo com a modelagem ANOVA. Apenas um
dos VOC's primários da cocaína caiu abaixo do nível alfa,
p-xileno em relação ao tipo narcótico tendo a (p= 0,0266). No entanto, devido ao tamanho da amostra,
essa diferença não seria considerada prática ou significativa o suficiente para ser considerada
completamente estatisticamente significativa. Isso significa apenas que, na cocaína, esse VOC foi
estatisticamente abundante no tipo de narcótico fresco.
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73
As principais conclusões que este estudo apresenta é que a idade do auxílio de treinamento
não prejudica o desempenho do alerta canino. Não houve padrão distinto em como os VOCs
em qualquer uma das classes de drogas frescas, novas ou pseudo-drogas emitiram seus voláteis ao longo do
tempo dos
VOCs primários avaliados pela análise ANOVA. No entanto, os caninos ainda eram capazes de dar com
grande precisão, alertas corretos, como visto nos gráficos de PPV, com média de 96% em alertas para heroína
e 100% PPV para cocaína. A média (NPV) para heroína rendeu 91% e 94% para cocaína
(Figura 34 e 35). Essa flutuação da emissão de odor químico ao longo do tempo destaca que
os caninos, não importa a idade ou o tipo de narcótico, são capazes de aprender um odor distinto e seguir
seu padrão de odor distinto ao longo do tempo para identificá-lo. Este conceito é reforçado por
pesquisas anteriores sobre como os caninos são capazes de aprender e lembrar consistentemente padrões
ao longo do tempo,
enquanto aprendem novos odores [10].
Quanto à recomendação quanto à idade adequada do adestramento antes do descarte, este
estudo enfatizou que o uso rotineiro de adereços de treinamento antigos evita que o canino
seja introduzido em perfis de odor químico fresco que se distinguem pelos
diferentes compostos orgânicos voláteis detectadas para cada faixa etária. Portanto, para que o
canino esteja no mesmo nível das ameaças de rua atuais, os auxílios de treinamento devem ser atualizados
com a
frequência que as restrições da agência permitirem (o autor sugere a cada dois anos), de modo a introduzir
novos compostos no canino que podem ser encontrados em ambientes operacionais . Ao
estabelecer um intervalo de vida útil designado para o uso do auxílio de treinamento de narcóticos k9 (como
2-5 anos),
a padronização das práticas de treinamento canino pode ser estabelecida, permitindo
avaliações de reconhecimento de odor usando padrões de odor de drogas atualizados. Quanto aos pseudo-
auxiliares de treinamento, deve haver aprimoramento para criação de auxílios de treinamento de
entorpecentes, visto a falta de
alertas neste estudo. No entanto, pesquisas como essa podem levar ainda mais ao aprimoramento da
pseudocriação da
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74 na análise de outros possíveis compostos químicos ideais.
Este conceito
pode então ser aplicado e estendido a qualquer tipo de cão de detecção no que diz respeito ao uso de
auxiliares de treinamento de qualquer tipo, como explosivos, cadáveres, onde as restrições de idade
não são especificadas nos regimes de treinamento. Pesquisas futuras devem examinar como outras
agências
com auxiliares de treinamento mais antigos e seus caninos se comparam a este estudo.

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