Bases Biológicas

Prof. Dr. Layon Zafra Lemos

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▰ Sequenciamento gênico:

▰ O sequenciamento de DNA é uma série de métodos que têm como finalidade

determinar a ordem das bases nitrogenadas: Adenina (A), Guanina (G), Citosina (C)
e Timina (T).

▰ Sua montagem do genoma é feito através da união de um grande número de

sequências de DNA que são juntadas para criar uma representação do
cromossomo original do DNA em estudo.

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• Método Sanger: sequencia o genoma de qualquer espécie, utiliza a DNA-

polimerase I de Escherichia coli para sintetizar cópias complementares do DNA de
fita simples a ser sequenciado, sendo constituído por uma adição de nucleotídeos
modificados (ddNTP’s).

• Sequenciamento de Nova Geração (NGS);

• Sequenciamento de segunda geração;
• Sequenciamento de terceira geração;
• Sequenciamento de quarta geração.

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• Clonagem e vetores de clonagem:

• Conhecida também por DNA recombinante, clonagem gênica ou manipulação

gênica. Essa tecnologia permite pegar um “pedaço” do DNA e combiná-lo com
outro, produzindo muitas cópias de diferentes combinações genéticas.

• O principal resultado das aplicações da tecnologia do DNA recombinante é o

isolamento e propagação de moléculas idênticas de um determinado indivíduo.

• Molécula de DNA recombinante (clivagem do DNA de interesse de uma

determinada espécie) e vetor (veículo de clonagem).

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• Etapas da clonagem molecular:

• Isolamento do fragmento de DNA de interesse;

• União do gene ao vetor: DNA recombinante;
• Etapa de Transformação;
• Seleção dos clones recombinantes;
• Multiplicação ou expressão do gene.

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• Tipos de clonagem:

• Clonagem reprodutiva:
• O núcleo de uma célula somática de um doador é transmitido para um óvulo
receptor.

• Esse óvulo é estimulado quimicamente, dando-se início ao processo de divisão

celular e de formação do embrião, que é, então, implantado no útero do receptor.

• O embrião gerado será, portanto, um clone do doador, tendo o mesmo material

genético.
• Exemplo: processo utilizado na clonagem da ovelha Dolly.

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• Tipos de clonagem:

• Clonagem terapêutica:

• Técnica que permite a criação de células-tronco embrionárias.

• Essas células são muito importantes para estudos sobre tratamentos de doenças:
• Doenças degenerativas do sistema nervoso - ou de regeneração de tecidos
danificados por acidentes ou doenças.

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Obrigado!
Prof. Dr. Layon Zafra Lemos
Contatos: layon.zafra@fatecie.edu.br