Preparo de amostras biológicas com interesse forense
Introdução
A toxicologia forense tem como objetivo
detectar a presença de substâncias externas
e relaciona-las aos seus efeitos tóxicos.
O resultado dessas análises precisam ser
exatos e irrefutáveis, dessa forma, existem
diversas matrizes biológicas que podem ser
utilizadas para essas análises, deve-se
escolher a matriz correta para determinado
tipo de análise para que não ocorra alteração
no resultado.
Atualmente existem técnicas capazes de
detectar as substâncias em baixa
concentração, devido ao seu nível de
sensibilidade, como a cromatografia em fase
gasosa combinada com a espectrometria de
massas, e a cromatografia em fase líquida,
combinada com a espectrometria de massas
(in tandem)
Claro, que todo o processo de preparo da
amostra pode ajudar ou prejudicar o
resultado final dessa análise.
Principais matrizes biológicas empregas
nas análises toxicológicas forense
Matrizes biológicas: Urina, sangue, cabelo,
fluido oral, suor, humor vítreo e mecônio
(substância verde viscosa composta
primariamente de água e secreções
gastrointestinais que são produzidas pelo feto
a partir de 10 semanas. Estas secreções são
normalmente eliminadas pelo feto na
primeira evacuação após o parto)
A matriz biológica vai ser escolhida a partir
das informações de como aquela substância
foi parar ali, tempo, entre outros fatores.
1. Urina
Matriz comum, muitas vezes pela facilidade da
coleta, e a quantidade disponível para análise.
Entretanto, é uma amostra fácil de ser
adulterada (Por que?)
Utilizada como alvo de investigação de
matabólitos, que são eliminados pela urina
para reduzir os impactos negativos de
substâncias tóxicas no organismo, ja que
esses metabólitos são residuos que não são
utilizados organismo, já que esses
metabólitos são residuos que não são
utilizados pelo organismo.
Drogas e metabólitos são encontrados em
altas concentrações na urina, e na maioria
dos casos podem ser detectados em um
periodo de 2 a 5 dias após o uso, mas
também algumas substâncias podem ser
detectadas até 20 dias após o consumo.
2. Sangue
Essa matriz oferece a relação da
concentração de droga no sangue com o
estado clínico do indivíduo, ou seja, o
profissional consegue ligar os sintomas do
paciente, com a substância ingerida.
Torna-se uma matriz idel para saber se o
paciente está sob efeito da substância, mas
possui uma detecção mais restrita
dependendo do período desde o consumo
até a realização da análise. (nesses casos:
urina)
No caso de autopsia deve ser levado em
consideração o local onde o sangue foi
coletado, pois há uma redistribuição de
substâncias de orgãos que funcionam como
reservatório, logo, é aconselhavel que essa
coleta seja feita em um local afastado do
coração.
3. Fluido Oral
Mistura de células da mucosa bucal, resto de
alimentos e saliva.
A droga é transferida do sanfue para a saliva
por processos de ultrafiltração ou difusão
passiva.
Essa matriz é utilizada para analisar
exposições recentes a determinada
substância.
Pórem, com o avanço nos procedimentos de
preparo, há a possibilidade de detectar
cocaina, anfetamina, canbinoides, etanol e etc.
na coleta do fluido oral.
4. Suor
Matriz alternativa.
As drogas são incorporadas no suor por
difusão passiva e migração transdérmica
(absorção cutânea).
A coleta do suor oferece um menor risco de
adulteração e uma ampla janela de detecção
de até 14 dias após o consumo.
No suor, encontra-se a própria substância, ao
invés dos residuos que não foram absorvidos
pelo organismo.
Entretanto, a quantidade da amostra é
limitada, alem das baixas concentrações das
substâncias nessa matriz, o que leva a realizar
técnicas de alta sensibilidade e seletividade.
5. Cabelo
As drogas podem ser incorporadas nessa
matriz de diversas maneiras, como difusão
ativa ou passiva do sangue presente nos
vasos capilares para o folículo capilar; através
do suor e secreções das glandulas
sudoríparas e sebáceas adjacentes a porção
intradérmica do fio; substâncias externas que
se depositam na fibra capilar.
"À medida que as células se alongam e
envelhecem, elas morrem e coalescem,
formando a fibra capilar com a droga
incorporada na matriz."
"Portanto, as drogas são incorporadas no
cabelo progressivamente, assim, estas
poderão estar presentes em determinado
segmento do cabelo, dependendo da taxa de
crescimento dos fios"
A melanina afeta a ligação da droga ao
cabelo, portanto, cabelo, etnia, são fatores
que devem ser considerados durante a
análise dessa matriz.
Fatores, tais como lipofilicidade e
basicidade das substâncias, também
influenciam sua incorporação no cabelo:
drogas de caráter básico, como a cocaína
e as anfetaminas, tendem a se incorporar
no cabelo em maior quantidade quando
em comparação com drogas de caráter
ácido ou neutro, como os canabinóides e
benzodiazepínicos.
Essa matriz oferece uma ampla janela de
detecção, possibilitando a identificação da
substância com semanas, meses ou anos
após o consumo. Mas, não possibilita
identificar o uso recente, já que o processo de
incorporação da droga na matriz leva dias.
Processos quimicos realizados no cabelo,
reduzem a quantidade da droga presente na
matriz, diminuindo de 50% a 80% da
concentração.
6. Mecônio
Utilizado para verificar a exposição uterina às
drogas de abuso e outras substâncias.
As drogas utilizadas pela mãe são
incorporadas ao mecônio de duas maneiras:
difusão passiva dos vasos sanguíneos da
placenta para o feto, ou por deglutição do
líquido aminiotico.
7. Humor vítreo
Líquido gelatinoso presente no interior do
olho.
As drogas incorporam ao humor vítreo
através da passagem pela barreira sangue-
retina. Nessa matriz droga original prevalece a
droga original ao invés do metabólito.
Matriz muito utilizada nas utopsias, já que a
câmara ocular é protegida de traumas,
contaminação, e não é afetado em caso de
putrefação ou carbonização (parcial)