UNIVERSIDADE FEDERAL DE SÃO PAULO

CAMPUS BAIXADA SANTISTA

Curso de Nutrição. Módulo: Ciência de Alimentos III
Profa: Vanessa Dias Capriles e Veridiana Vera de Rosso
Técnicas: Teresa Figueiredo, Juliana Curcio, Cinthia Santos
Aluna PAD: Marión Aguilar

Contagem Padrão de bactérias aeróbias Mesófilas – Contagem Padrão em Placas (PCA)

Esta contagem detecta em um alimento, o número de bactérias aeróbias ou facultativas e

mesófilas presentes tanto sob forma vegetativa quanto esporulada. A contagem padrão em placas
(PCA) tem sido usada como indicador da qualidade higiênica dos alimentos, fornecendo também
ideia sobre seu tempo de vida útil de conservação. Para a área ambiental, a contagem permite a
quantificação de microrganismos heterotróficos no ambiente ou substrato (solo, águas de
recreação, ar, etc). Sua presença em grande número indica:
o Matérias-primas excessivamente contaminadas;
o Limpeza e desinfecção de superfícies inadequadas;
o Higiene inadequada na produção;
o Presença de microrganismos heterotróficos no ambiente

Metodologia e técnicas de análise

Técnica:
a. Retirar assepticamente 25 g ou 25 mL da amostra e diluir em 225 mL de água peptonada
tamponada a 0,1% (solução diluente), obtendo-se desta maneira a diluição 10 -1 .
Preparar as demais diluições necessárias.
b. Pipetar alíquotas de 1 mL de cada diluição e transferir para placas de petri (100 x 20 mm)
esterilizadas.
c. Adicionar 0,4 mL de TTC estéril no centro de cada placa de petri (etapa para facilitar a
contagem – coloração dos microrganismos);
d. Adicionar a cada placa 15-20 mL de ágar para contagem padrão, previamente fundido e
resfriado à temperatura de 45ºC.
e. Homogeneizar com movimentos suaves, em forma de oito (cerca de 10 vezes) e deixar a
temperatura ambiente até a completa solidificação do ágar.
f. Após solidificação, incubar as placas em posição invertida a 35-37ºC por 48 horas.

Obtenção do Resultado:
a. Transcorrido o tempo de incubação, considerar para contagem, somente as placas da
mesma diluição que apresentem de 30 a 300 colônias;
b. Para calcular o número de Unidades Formadoras de Colônias (UFC) por grama ou mL do
produto, multiplicar o n.º significativo encontrado pelo fator de diluição correspondente;
Exemplo:
Diluições No de UFC/g Calcule
10-1 INC INC
10 -2
240 240 x 100= 24000 UFC/g
10-3 160 160 x1000=160000 UFC/g
10 -4
30 30 x 10000=300000 UFC/g
Somando os resultados=
Calcule a média=
Expresse o resultado

Observe e anote seus resultados:

Diluições No de UFC/g Calcule
10-1
10-2
10-3
10-4
Somando os resultados=
Calcule a média=
Expresse o resultado