Resenha crítica do artigo científico: PCR past, present and future

Nome: Jaqueline
Professor:

Hanliang Zhu, Haoqing Zhang, Ying Xu, Sona LassaKova, Marie

Korabecna e Pavel Neuzil são autores estrangeiros responsáveis pela
publicação do artigo científico em inglês e intitulado: “PCR past, present and
future. O artigo foi publicado no periódico BioTechniques em seu volume 69,
número 4, preenchendo as páginas 317 a 325, em outubro de 2020, ou seja,
em contexto pandêmico de COVID-19. É válido ainda pontuar que esse artigo
foi citado por 64 pessoas até o momento e além disso, os mesmos autores
publicaram outros artigos científicos dentro dessa mesma linha de pesquisa,
tomando como exemplo o seguinte artigo publicado um mês antes desse: “A
vision of point-of-care PCR testing for the COVID-19 pandemic and beyond”.
O artigo abordou a respeito da polimerase chain reaction, ou em
português, conhecida como reação em cadeia da polimerase (PCR) desde o
seu descobrimento até as suas perspectivas futuras, sendo explorados os
subtipos derivados dessa técnica original, suas aplicações na biociência, seus
desafios, dentre outros. Nesse sentido, os objetivos desse estudo foram revisar
historicamente o desenvolvimento da PCR, além de das tecnologias que
surgiram a partir da evolução de seu método original, considerando que o
século 21 tem sido caracterizado por um crescimento exponencial relacionado
aos desdobramentos em ciência e tecnologia.
Ele é caracterizado metodologicamente como uma revisão narrativa de
literatura dividida nos seguintes tópicos e subtópicos: uma breve história da
descoberta da PCR, a história da aplicação da PCR em biociência (história da
miniaturização da PCR baseada em uma plataforma microfluídica, sistemas
baseados em gotículas, sistemas baseados em chip, sistemas híbridos),
tecnologias que evoluíram e foram inspiradas pela PCR digital (PCR digital
baseado em gotículas, PCR digital baseado em chip, amplificação isotérmica),
PCR para outras aplicações, desafios pendentes na PCR, comercialização de
PCR: história e sucesso e conclusão e perspectivas futuras.
 Além disso, as principais referências utilizadas como forma de consulta
bibliográfica para os autores foram estrangeiras, com datas de publicação
variáveis, ou seja, presença de referências antigas e mais atuais, além de
serem em sua maioria provenientes de artigos científicos publicados na língua
inglesa em periódicos renomados, o que reforça a sua construção qualitativa a
partir de publicações amplas, apropriadas para descrever e discutir o
desenvolvimento ou o "estado da arte" de um determinado assunto, sob ponto
de vista teórico ou contextual.
No primeiro tópico, relembrou-se o histórico da PCR. Ela foi descoberta
em 1986 sendo utilizada rotineiramente em clonagens de DNA, diagnósticos
médicos e análises forenses de DNA. Nos últimos 100 anos, a PCR foi uma
técnica laboratorial revolucionária na biologia, assim como na pesquisa
genética, sendo de capaz de multiplicar o DNA com sequências específicas em
um curto espaço de tempo e tendo como objetivo de a PCR fabricar quantidade
suficiente da região de interesse do DNA, de modo que essa possa ser
analisada e utilizada de alguma outra maneira.
Em seguida, a sua aplicação em biociência foi descrita a partir do
momento em que foi mencionado que a PCR foi desenvolvida na realidade
visando detectar mutações no gene HBB que causa a anemia falciforme,
resultando no desenvolvimento de um método de genotipagem para este locus
multialélico utilizando a hibridização de amplicons com alelo- específico
oligonucleotídeos, sendo aplicada desde então no campo da genética clínica,
na microbiologia de infecções virais e bacterianas com o intuito de diagnosticar
de doenças infecciosas. Além disso, com o passar o tempo suas aplicações se
estenderam na ciência forense e na reprodução assistida.
Após 1993, o desenvolvimento de uma forma de monitorar a cinética da
PCR em tempo real, as técnicas de PCR tornaram-se totalmente quantitativas.
Dessa forma, incorporação da transcrição reversa (RT) como o primeiro passo
antes da ciclagem térmica permitiu o uso de tecnologias de PCR (RT-PCR ou
qRT-PCR) em estudos de RNA, se tornando referência para a análise
quantitativa de ácidos nucleicos. Os sistemas microfluídicos levaram ao
desenvolvimento de uma família inteiramente nova de dispositivos, como a
miniaturização de fluxo e a PCR rápida. Surgiram também sistemas baseados
em gotículas, sistemas baseados em chip e sistemas híbridos, além de outras
tecnologias que evoluíram e foram inspiradas pela PCR digital, como a PCR
digital baseada em gotículas, caracterizada pelas vantagens de maior precisão
e menor coeficiente de variação na quantificação absoluta, a PCR digital
baseada em chip, na qual foi eliminada a necessidade de um sistema de
imagem de fluorescência separado e a ampliação isotérmica que supera os
problemas de resfriamento porque não exige processo de resfriamento.
Logo, surgiram outras aplicações para a PCR, principalmente as
plataformas para NGS e foram descritos desafios como o fato de que o
sucesso de cada uma de suas aplicações práticas ser altamente dependente
da qualidade das amostras contendo ácidos nucléicos para amplificação e o
espectro de diferentes inibidores de PCR complicar o trabalho em amostras do
mundo real, como resultados falso negativos ou limites de detecção mais altos.
Ademais, o sucesso da PCR na comercialização se deve ao desenvolvimento
de um instrumento automatizado substituindo as operações manuais e ao
conjunto de reagentes que aumentam a especificidade da PCR, eliminando a
contaminação cruzada e a inibição, reduzindo o tempo de reação e
aumentando a capacidade de multiplexação.
Em relação ao conteúdo exposto pelo artigo, notou-se que os autores
chamam a atenção para a questão temporal da PCR, trazendo informações
ricas a respeito da base técnica e teórica relacionada a PCR que tem diversas
aplicações e que vem sendo muito importante para o diagnóstico de inúmeras
doenças infecciosas, se estendendo a COVID-19. Ela é um processo crucial
para diversos aspectos tecnológicos genéticos que permitem o
desenvolvimento de inúmeras tecnologias. A redação do artigo foi satisfatória,
objetiva e muito fluída, de modo a chamar a atenção do leitor, mantendo-a com
textos curtos e através de belíssimas imagens. O tema é de utilíssima leitura
não só para acadêmicos, como para o público em geral que tenha curiosidade
a respeito desse assunto. Em suma, a conclusão do artigo é pertinente e
corresponde em totalidade respostas em relação aos objetivos.
Por último, é importante frisar o estudo obteve apoio financeiro de uma
doação W099109 da PR China, bem como o projeto GACR no. GA16-11140S
da República Tcheca, sendo financiado pela bolsa no. LTACH19005 do
Ministério da Educação, Juventude e Esporte da República Tcheca, bem como
pelo projeto 2018YFE010900 do Ministério da Ciência e Tecnologia, PR China.