LPI - LABORATÓRIO DE PRÁTICAS INTEGRADAS

ROTEIRO DE AULAS PRÁTICAS CURSO DE MEDICINA

2023.1
UNIME LAURO DE FREITAS
CENTRO UNIVERSITÁRIO UNIFAS

Concepção e Formação do Ser

Humano
Coordenador do Mòdulo: Prof. Éverton Tenório
Coordenadora do LPI : Profa. Simone Cucco

Módulo

VII
 Diretora Geral
Odília Dantas Moliterni

Coordenador do Curso
Prof. Dr. Paulo Benigno Pena Batista

Assessoria Pedagógica
Profa. Cleyse Dagmar Santos Araújo Bianchi
Profa. Sheyla Maria de Almeida Couto Pastori

Coordenadora Geral do LMF

Profa. Ms. Simone Nascimento Silveira Cucco

AUTORES

Edvana Ferreira
Jorge Ribas
Tatiane Sales
Tiago Landim
Vanessa Riesz Salgado

Copyright © 2023 Os autores

Reservados todos os direitos. É proibida a utilização deste documento, sem
permissão escrita dos autores, fora do curso de graduação em Medicina do Centro
Universitário UNIFAS.
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Índice

ROTEIROS DE AULAS PRÁTICAS

Aula 1: Teste de gravidez……………………………………........…….………..……… 5

Aula 2: Tipagem sangínea………………………………………………………………... 8

Aula 3: Dosagem de glicemia…………………………………………………………... 12

Aula 4: Espermograma……..……………………………..…………..……….………... 15

Bibliografia …………………………………………………………...…………….……... 18

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 LPI – LABORATÓRIO DE PRÁTICAS INTEGRADAS
ROTEIRO DE AULAS PRÁTICAS

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 Teste de Gravidez
Aula 1
Teste Imunológico de Gravidez (TIG) e a dosagem de gonadotrofina
coriônica humana (ßHCG)

Toda mulher da área de abrangência da unidade de saúde e com história de

atraso menstrual de mais de 15 dias deverá ser orientada pela equipe de
saúde a realizar o Teste Imunológico de Gravidez (TIG), que será solicitado
pelo médico ou enfermeiro. Este teste é considerado o método mais sensível
e confiável, embora seja também um teste caro [grau de recomendação D].
Alguns testes urinários têm baixa taxa de resultados falsos positivos, mas
elevada taxa de resultados falsos negativos, o que pode atrasar o início do
pré-natal.

✓ Teste Imunológico da Gravidez -TIG (ßhCG na urina)

✓ É detectado 26 dias após a CONCEPÇÃO

✓ 14º dia do ciclo – ovulação

+ 26 dias para detectar ßhCG na urina

= 40 dias – 28 dias (duração de um ciclo) = 12 dias

Ou seja, podemos detectar o ßhCG na urina com 12 dias de

atraso menstrual

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A dosagem de gonadotrofina coriônica humana (ßHCG) para o diagnóstico
precoce da gravidez, com a utilização de medidas quantitativas precisas e
rápidas, tornou este teste mundialmente reconhecido para confirmar a
ocorrência de gravidez. O ßHCG pode ser detectado no sangue periférico da
mulher grávida entre 8 a 11 dias após a concepção. Os níveis plasmáticos
aumentam rapidamente até atingir um pico entre 60 e 90 dias de gravidez. A
maioria dos testes tem sensibilidade para detecção de gravidez entre 25 a
30mUI/ml. Resultados falsos positivos ocorrem na faixa entre 2 a 25mUI/ml.
Do ponto de vista prático, níveis menores que 5mUI/ml são considerados
negativos e acima de 25mUI/ml são considerados positivos.

✓ Positividade da fração beta do HCG no soro materno a partir do oitavo ou

nono dia após a fertilização.

✓ É o recurso mais precoce de detecção da gravidez e que adquire

especial importância nos programas de infertilidade e frente à
possibilidade de uma gravidez ectópica.

✓ Mantém o Tem ação semelhante ao LH

✓ Mantém o corpo lúteo durante o início da gravidez
✓ Assegura produção de progesterona
✓ Manutenção do endométrio
✓ Atua até a produção placentária de progesterona
✓ É produzido já na fase de blastocisto (a partir da nidação – 6º dia da
concepção)

http://www.lascla.com.br/2019/12/beta-hcg.html 6
 https://br.clearblue.com/testes-de-gravidez/hcg

ßhCG no sangue
✓ É detectado a partir de 20 da UR

✓ Ou seja, podemos solicitar assim que houver atraso menstrual

✓ 14º dia do ciclo – ovulação

+ 6 dias para ocorrer a nidação = 200º dia do ciclo

Ou seja, podemos solicitar o ßhCG no sangue: com 20 dias da

última menstruação

FALSOS POSITIVOS

Mola hidatiforme;

Gravidez ectópica.

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Aula 2 Tipagem sanguínea

No teste de aglutinação direta, o antígeno faz parte naturalmente da

célula, e haverá aglutinação dessas células promovida por anticorpos
contra esses antígenos. São exemplos usuais desses testes a
identificação de antígenos eritrocitários na tipagem sanguínea utilizando
anticorpos específicos.
Células bacterianas também podem ser utilizadas como antígeno para a
pesquisa de anticorpos em amostras de soro de pacientes, como por
exemplo na leptospirose, brucelose e salmonelose.
Os testes de aglutinação direta geralmente são feitos em tubos,
incubando amostras de soro em diluições seriadas diante da
concentração constante de suspensão de células (antígeno). Após o
período de incubação de 30 a 90 minutos observa-se a formação de
agregados visíveis. Também pode ser utilizado o recurso de corar as
células bacterianas e realizar o teste em lâminas ou placas.
Também podem ser chamados de hemaglutinação direta os testes que
utilizam hemácias como células antigênicas, como são a tipagem
sanguínea de antígenos eritrocitários e a pesquisa de anticorpos
heterófilos na mononucleose infecciosa.

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 https://recipp.ipp.pt/bitstream/10400.22/16502/2/Manual%20pr%C3%A1tico%20IH_2020.pdf

COOMBS DIRETO E COOMBS INDIRETO

Quando um soro que contenha anticorpos incompletos for incubado, em
um ótimo de temperatura, com hemácias que contenham o antígeno
correspondente, os anticorpos fixam-se à superfície destas hemácias e
bloqueiam o antígeno. As hemácias assim bloqueadas (sensibilizadas)
serão reveladas pelo soro de Coombs (soro antiglobulina humana).
Através do teste de Coombs Indireto, pesquisa-se a presença de
anticorpos incompletos ou imunes presentes no soro.
Os anticorpos ditos incompletos ‘imunes”, quando em contato com
hemácias que contenham o antígeno correspondente, fixam-se na
membrana das mesmas, bloqueando o antígeno; não têm, entretanto, a
capacidade de aglutinar estas hemácias. O soro de Coombs (soro
antiglobulina humana) é capaz de promover a aglutinação dessas
hemácias, ditas sensibilizadas.
Através do Teste de Coombs Direto pode-se evidenciar os anticorpos
contra antígenos dos eritrócitos, isto é, se “in vivo” há anticorpos
incompletos “aderidos” à membrana eritrocitária.
O teste de Coombs direto é usado no diagnóstico de doenças autoimunes
e doença hemolítica do recém-nascido. Ele detecta anticorpos ligados à
superfície das hemácias.
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TÉCNICA
a) Preparar uma suspensão salina (5%) das hemácias a serem testadas;
b) Colocar 2 gotas desta suspensão em 1 tubo, adicionar solução
fisiológica e centrifugar a 3.000 rpm por um minuto;
c) desprezar (com cuidado) o sobrenadante deixando o “ botão” de
hemácias no fundo do tubo;
d) repetir a operação mais duas vezes. Na última operação, com auxílio
de papel de filtro, procurar desprezar toda a solução salina. Quando se
tratar de sangue umbilical, lavar as hemácias no mínimo oito vezes;
e) adicionar duas gotas de soro de Coombs;
f) centrifugar à baixa rotação (1.000 rpm) por 15 segundos;
g) leitura: agitar levemente o tubo e observar se há aglutinção dos
eritrócitos.

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 https://www.biomedicinapadrao.com.br/2010/11/teste-de-coombs-direto.html

PRECAUÇÕES
Tanto para as determinações do Fator Rh em tubo, provas de Coombs
Direta e Indireta, é necessário que se tome uma série de cuidados.
a) Não colocar hemácias em excesso na suspensão, pois poderá haver
formação de um “botão” muito grande, levando eventualmente, a um
resultado falsamente positivo.
b) O tempo de incubação não deverá ser inferior a 30 minutos.
c) A centrifugação final não deve exceder ao tempo e a rpm preconizados,
pois o “botão” poderá aderir ao fundo do tubo, dificultando a leitura e
podendo provocar um resultado falsamente positivo.

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Aula 3 Dosagem de glicemia

Para um bom acompanhamento pré-natal, é necessário que a equipe

de saúde efetue os procedimentos técnicos de forma correta e uniforme
durante a realização dos exames complementares, assim como quando
da realização dos exames clínico e obstétrico. Do contrário, ocorrerão
diferenças significativas, prejudicando a interpretação dos dados e a
comparação entre eles. Cabe aos profissionais de formação
universitária promover a capacitação dos demais membros da equipe, a
fim de garantir que todos os dados colhidos sejam fidedignos.
É importante ressaltar, no contexto da qualidade da atenção e da
proteção biológica, a necessidade da lavagem das mãos do examinador
antes e após o atendimento à gestante e, especialmente, na
eventualidade da realização de procedimentos.
Devem ser solicitados na primeira consulta os diversos exames
complementares, incluindo a Glicemia de jejum. A glicose deve ser
medida em um laboratório credenciado para estabelecer o diagnóstico
de diabetes e rastrear indivíduos de alto risco. O sangue deve ser
retirado depois que o indivíduo jejuou durante a noite. Se o plasma não
puder ser separado das células dentro de 60 min, um tubo contendo um
inibidor glicolítico deve ser usado. A glicose deve ser medida no plasma.

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Embora os métodos de análise de glicose exibam baixa imprecisão nos
limites de decisão diagnóstica de 7,0 mmol / L [(126 mg/dL), jejum] e
11,1 mmol/L [(200 mg / dL), após glicose], o relativamente grande A
variabilidade biológica (CVs de 5-7%) pode produzir erros de
classificação. Com base na variação biológica, a análise glicêmica deve
ter imprecisão analítica ≤3,3%, viés ≤2,5% e erro total ≤7,9%.

TÉCNICA

a) Separar 3 tubos de ensaio e identificá-los como “Branco”, “Teste” e

“Padrão”;

b) No tubo de ensaio marcado como “Branco”, adicionar 1,0 mL de

Reagente 1 (fornecido pelo fabricante);

c) No tubo de ensaio marcado como “Teste”, adicionar 1,0 mL de

Reagente 1 (fornecido pelo fabricante) e 0,01 mL da amostra a ser
testada;

d) No tubo de ensaio marcado como “Padrão”, adicionar 1,0 mL de

Reagente 1 e 0,01 mL do Padrão (ambos fornecidos pelo
fabricante);
e) Homogeneizar os 3 tubos e incubar em banho-maria a 37ºC por 10
minutos;
f) Vale ressaltar que o nível da água nos tubos deve ser superior ao
nível dos reagentes dentro dos tubos de ensaio;

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g) No espectrofotômetro, determinar as absorbâncias dos tubos de
ensaio “Teste” e “Padrão” em 505 nm (490 a 520);
h) Acertar o zero como o branco;
i) Lembrar que a cor é estável por 30 minutos;
j) Caso o espectrofotômetro utilizado não tenha capacidade de ler
volumes na escala de 1,0 mL, verificar a necessidade de ajuste de
volume em proporções exatas;
k) Os volumes de amostra e reagente podem ser modificados
proporcionalmente sem prejuízo no desempenho do teste

Observação!: Ao final do teste descartar corretamente os reagentes e

amostras utilizados.

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 Espermograma
Aula 4

http://eduardodale.com.br/espermograma

https://origen.com.br/espermograma-e-a-avaliacao-da-fertilidade-masculina/
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 Espermograma
Aula 4
Identificação de lâminas permanentes de espermatozoides
para a avaliação da morfologia.

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http://eduardodale.com.br/espermograma

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 Bibliografia

MONTENEGRO, C.A.B.; REZENDE-FILHO, J. Rezende obstetrícia. 13.

ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2017.
SACHS, D.B.; BRUNS, D.E; GOLDSTEIN, D.E; et al. Guidelines and
recommendations for laboratory analysis in the diagnosis and
management of diabetes mellitus. Clin Chem, 2002; 48:436-72.
ZUGAIB, M.; FRANCISCO, R.P.V. Zugaib obstetrícia. 3. ed. Barueri:
Manole, 2016.

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