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Naunyn-Schmiedeberg
Arch Pharmacol de Naunyn-Schmiedeberg (1988) 337: 649-655
Ações do peptídeo relacionado ao gene da calcitonina e
das taquicininas em relação aos efeitos
contráteis da capsaicina no coração de cobaia e rato in vitro
Anders Franco-Cereceda e Jan M. Lundberg Departamento
de Farmacologia, Karolinska Institutet, Box 60 400, S-104 01 Estocolmo, Suécia
Resumo. 1. Os efeitos do peptídeo relacionado ao gene da calcitonina (CGRP),
neurocinina A (NKA), neuropeptídeo K (NPK) e substância P (SP) na
contratilidade do coração de cobaia e rato foram estudados in vitro em relação
à resposta à capsaicina. 2. O CGRP alfa (c~) e beta (/~) humano (h) foi
equipotente na estimulação da força contrátil e da frequência do átrio direito
da cobaia que bate espontaneamente. 3. Tanto o NKA quanto o NPK inibiram
a força contrátil e a taxa no
átrio de cobaia, enquanto um efeito cronotrópico principalmente negativo foi
observado em todo o coração. SP não influenciou a contratilidade cardíaca. 4.
O CGRP humano c~ e/~ imitou os efeitos contráteis da capsaicina no átrio da
cobaia.
Em toda a preparação cardíaca, o hCGRP e e a capsaicina aumentaram a
frequência cardíaca, enquanto a capsaicina também evocou uma inibição da
força contrátil resistente à atropina. O efeito estimulador da capsaicina na
frequência cardíaca esteve ausente após o pré-tratamento sistêmico com
capsaicina, enquanto a inibição da tensão contrátil ventricular permaneceu
inalterada. 5.
A incubação prolongada com hCGRP e ou/~ foi associada ao desenvolvimento
de taquifilaxia cruzada entre estes dois agentes no átrio da cobaia. No entanto,
a taquifilaxia com CGRP não alterou a resposta auricular à noradrenalina,
forscolina ou NKA. Os efeitos estimuladores da capsaicina na contratilidade
atrial estavam ausentes após taquifilaxia ao hCGRP e ou/~. 6. Não houve
supersensibilidade detectável aos efeitos estimuladores do CGRP de rato (r)
no átrio que bate espontaneamente após o pré-tratamento com capsaicina de
ratos adultos ou neonatais. Em conclusão, os presentes dados fornecem
evidências adicionais de que a estimulação da contratilidade atrial induzida
pela capsaicina é devida à liberação local de CGRP. A taquifilaxia por CGRP
parece ser um evento específico mediado por receptor e não está relacionado
à regulação negativa do sistema adenilato ciclase. A inibição da força contráctil
em preparações de coração inteiro pela capsaicina é provavelmente devida a
um efeito não colinérgico independente da libertação de taquiquinina.
Palavras-chave: Peptídeos relacionados ao gene da calcitonina - Taquicininas
- Capsaicina - Nervos sensoriais cardíacos - Rato -
Porquinho da índia
Introdução
A capsaicina, o agente irritante da pimenta, exerce potentes ações estimulantes
cardíacas. Assim, a capsaicina induz resultados positivos
Enviar solicitações de separatas para A. Franco-Cereceda no endereço acima
Arquivos de
Farmacologia
© Springer-Verlag 1988
efeitos inotrópicos e cronotrópicos no átrio isolado de cobaia (Fukada e
Fujiwara 1969; Molnar et al. 1969; Lundberg et al. 1984). A estimulação da
contratilidade cardíaca induzida pela capsaicina está ausente em animais
após pré-tratamento sistêmico com capsaicina (Lundberg et al. 1984), o que
leva a uma degeneração dos nervos sensoriais dentro do coração (Papka et
al. 1984). Esta observação sugere que a resposta da capsaicina se deve à
liberação de um mediador dos nervos sensoriais (Lundberg et al. 1984).
O peptídeo relacionado ao gene da calcitonina (CGRP) é um
neuropeptídeo com 37 resíduos de aminoácidos que está presente em pelo
menos duas formas moleculares, alfa (~) e beta (/~), em diversas espécies,
incluindo ratos (Rosenfeld et al. 1983) e homem (Steenbergh et al. 1985). A
existência de CGRP foi prevista a partir da análise da sequência do gene da
calcitonina de rato e homem (Amara et al. 1982; Rosenfeld et al.
1983). Os CGRP ~ e/~ humanos (h) diferem em três resíduos de aminoácidos,
enquanto os CGRP e e/~ de rato (r) diferem em um resíduo de aminoácidos.
A sequência de aminoácidos do CGRP de cobaia não é conhecida, mas
provavelmente não difere muito daquela do CGRP de rato ou humano (Franco-
Cereceda et al. 1987b; ver Fischer e Born 1987). A imunorreatividade ao
CGRP está localizada em uma população de nervos sensoriais no coração.
Esses nervos também contêm substância P (SP) (Lundberg et al.
1985; Franco-Cereceda et al. 1987 b) e taquicininas relacionadas derivadas
do mesmo gene (Nawa et al. 1983), ou seja, neurocinina A (NKA) e
neuropeptídeo K (NPK) (Hua et al. 1985), em que NPK representa uma forma
alongada de NKA (Tatemoto et al. 1985), em que NPK representa uma forma
alongada de NKA (Tatemoto et al. 1985). .1985). Foi demonstrado que CGRP
(Franco-Cereceda et al. 1987c), SP (Hoover 1987) e NKA (Franco-Cereceda
et al. 1988) são liberados pela capsaicina do coração isolado de cobaia,
enquanto NPK provavelmente não é liberado, mas sim um precursor
intraneuronal de NKA (Hua et al. 1986; Deacon et al. 1987; Saria et al. 1988).
Além disso, a isquemia total do fluxo de parada e a exposição à nicotina
também estão associadas à liberação de CGRP do coração (Franco-Cereceda
et al. 1987 c).
O CGRP imita a estimulação da contratilidade atrial induzida pela
capsaicina e a resposta à capsaicina está ausente após a taquifilaxia por
CGRP (Franco-Cereceda e Lundberg 1985). Na preparação de coração inteiro,
entretanto, foi relatado que a capsaicina exerce um efeito inotrópico negativo
(Franco-Cereceda e Lundberg 1985; Hoover 1987; Franco-Cereceda et al.
1988). É, portanto, interessante que, embora a SP não influencie a
contratilidade cardíaca (Burcher et al. 1977), foi relatado que a NKA exerce
efeitos inotrópicos e cronotrópicos negativos (Lundberg et al. 1985).
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650
Neste estudo, examinamos ainda os efeitos do CGRP, SP, NKA e
NPK em relação à capsaicina nos corações de cobaias e ratos in vitro. Os
efeitos em animais de controle foram comparados com as respostas
obtidas após o pré-tratamento com capsaicina. Além disso, através da
utilização de forscolina, que é conhecida por estimular a actividade da
adenilato ciclase (Seamon e Daly 1981), tentámos elucidar o local de
acção e a especificidade da taquifilaxia do CGRP para inibir as respostas
da capsaicina.
Métodos
Contratilidade atrial. Porquinhos-da-índia e ratos adultos (pesando cerca
de 300 g) foram mortos por atordoamento. O átrio direito foi rapidamente
excisado e montado em banho de órgãos de 2 ml a uma força passiva de
5 raN. Os átrios foram perfundidos com solução de Tyrode da seguinte
composição (raM): NaC1 137; NaHCO3 11,9; KC12.7; MgC12 1,05;
NaH2PO4 0,42; CaCI2 1,8 e glicose 5,6 a uma temperatura de 37°C. Além
disso, a solução continha ácido ascórbico 0,057 mM e foi aerada com
95% de O2 e 5% de CO2. A actividade mecânica foi medida utilizando
transdutores Grass FTO3C e registada num polígrafo Grass modelo 7B
em ligação com uma unidade taquigráfica. As preparações foram deixadas
em equilíbrio durante 30 minutos de chuva antes da administração dos
medicamentos. As respostas foram expressas como alterações de pico
na força contrátil e alterações de frequência máxima, comparando um
período de um minuto antes e depois da adição de drogas.
Contratilidade cardíaca total. Depois de matar as cobaias como acima, a
aorta foi canulada e 5 ml da solução de Tyrode contendo 100 UI de
heparina foram injectados na circulação coronária. Os corações foram
então perfundidos de acordo com a técnica de Langendorff (ver Broadley
1979) a uma pressão de 6,7 kPA (70 cm H20). A perfusão coronária bem
sucedida foi estabelecida dentro de 15 chuvas após a morte. Uma tensão
diastólica de
10 mN foram aplicados através de uma sutura no ápice dos ventrículos e
a contratilidade e a frequência cardíaca foram registradas continuamente
como acima.
Pré-tratamento com capsaicina. Cobaias e ratos foram pré-tratados com
capsaicina (dose total de 50 mg x kg-1 sc) quando adultos duas semanas
antes dos experimentos (cobaias e ratos) ou neonatos (ratos) estudados
na idade adulta. Isso causa uma perda quase total de nervos imunorreativos
a SP e CGRP no coração, conforme visualizado por imuno-histoquímica
(ver Lundberg et al. 1985). Terbutalina (50 txg x kg -1 sc) e teofilina (100
mg x kg -1 ip) foram administradas para garantir a função respiratória e
cetalar (50 mg x kg -1 im) foi administrado como analgésico durante o pré-
tratamento com capsaicina. O sucesso do pré-tratamento foi controlado
pela ausência de blefaroespasmo e comportamento de evitação após
administração de uma gota da solução estoque de capsaicina (10 mg x
m1-1) em um olho dos animais pré-tratados imediatamente antes dos
experimentos.
Drogas. Noradrenalina (cloridrato), forscolina, atropina (sulfato) e
capsaicina (Sigma, St. Louis, MO, EUA); CGRP c ~ e fl de rato e humano,
neurocinina A, neuropeptídeo K e substância P (Península, Belmont, CA,
EUA); terbutalina (Draco, Lund, Suécia); teofilina (ACO, Solna, Suécia);
ketalar (Parke-Davis, Gwent, Inglaterra); acetilcolina (cloreto) (Hoffmann-
La Roche, Basel,
Suíça). Todas as drogas foram dissolvidas em solução de Tyrode
imediatamente antes dos experimentos, exceto a capsaicina que foi
dissolvida em etanol 70% até uma concentração de 10 mg x ml-1, e diluída
em solução de Tyrode até as concentrações utilizadas nos experimentos.
Avaliação estatística. A análise estatística foi realizada usando análise de
variância não paramétrica de Kruskall-Wallis com comparações múltiplas
(ver Theodorsson-Norheim 1983). P < 0,05 foi considerado significativo.
Resultados
Uma contratilidade experimental
O CGRP ~ e o NA de rato induziram efeitos inotrópicos e cronotrópicos
positivos, dependentes da concentração, no átrio direito do rato com
batimento espontâneo (Fig. IA; n = 10). Na faixa de concentração utilizada,
o rCGRP foi um pouco mais potente (cerca de 5 vezes) do que o NA na
estimulação da força e frequência contrátil atrial. Após o pré-tratamento
com capsaicina de ratos adultos (Fig. 1 B; n = 9) ou neonatais (Fig. 1 C; n
= 5), não houve mudança significativa da curva concentração-resposta
para rCGRP ~. Além disso, a resposta ao NA permaneceu inalterada após
o pré-tratamento com capsaicina (Fig. 1A-C). A capsaicina (5 x 10 -6 M)
causou um aumento na taxa e força contrátil (Fig. 1 A) dos átrios de ratos.
A resposta atrial à capsaicina foi marcadamente deprimida tanto em ratos
adultos (Fig. 1 B) quanto neonatais (Fig. 1 C) pré-tratados com capsaicina.
O CGRP 7 e fi humano estimularam equipotentemente a força
contrátil e a frequência no átrio direito da cobaia que bate espontaneamente
(Fig. 2A). O CGRP foi cerca de 50 vezes mais potente numa base molar
do que o NA como agente inotrópico e cronotrópico positivo. A taquifilaxia
desenvolveu-se após cerca de 15-20 min na presença de hCGRP ~ (5 x
10-7 M; n = 6), e então os efeitos da adição de hCGRP fl foram abolidos
(Fig. 2B). Por outro lado, após taquifilaxia ao hCGRP fi, os efeitos
estimuladores do hCGRP ~ estavam ausentes (não mostrado). A
taquifilaxia ao hCGRP ~ não influenciou significativamente a curva
concentração-resposta ao NA no átrio direito da cobaia em comparação
aos controles (fig. 2B).
NKA (5x10 9, 5x10-8 e 5x10 -7 M; n=5) induziu inibição de
desenvolvimento rápido da frequência (em 9 3, 15 ± 7 e 33 +____ 3 batimentos
x min-*, respectivamente) e força contrátil (por 0,76 ___: 0,4, 1,22 +_ 0,5
e 1,5 0,4 mN, respectivamente) no átrio direito da cobaia
___ (Fig. 3 A). A
resposta atrial à NKA foi sujeita a taquifilaxia rápida. Após a taquifilaxia ter
evoluído para 5 x 10-v M NKA, a inibição da contratilidade atrial por NPK
(10 -6 M) (52 + 12 batimentos x min -1 e 0,96 _+ 0,1 mN nos controles; n
= 3) estava ausente. A resposta atrial ao NKA não foi influenciada pela
taquifilaxia por CGRP (não mostrado). SP até uma concentração de 10-6
M (n = 7) não induziu quaisquer alterações na força contrátil ou frequência
no átrio da cobaia.
A capsaicina (10 -6 M; n = 10) causou efeito cronotrópico positivo
(31 4 batimentos
_ x min -1) e inotrópico (1,1 + 0,1 mN) no átrio da cobaia
(fig. 4A). A taquifilaxia para os efeitos da capsaicina se desenvolveu após
10-15 min de exposição a 10 -6 M. Os efeitos da capsaicina foram
completamente abolidos após a taquifilaxia para hCGRP a ou ft. não foram
observados efeitos consistentes da capsaicina na força ou frequência
contrátil atrial (fig. 4 B).
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651

(B) (c)

E
5C 50 5(:
Fig. 1. Efeitos de concentrações crescentes de

/
Q~..O

>.. rCGRP c~ (It e) e NA (• •), bem como

de uma única concentração de capsaicina (5
C
2G 20 x 10 -6 M; O) na taxa (batidas x chuva- 1;
8 2(3
painel superior) e força contrátil (mN; painel
10, 10' 10.
inferior) do átrio de rato com batimento
espontâneo. A Tecidos de animais de
10-8 10 -7 10 -6 M lo-8 lo-7 1o-6 io-8 io-7 io-6
M M controle. B Tecidos de ratos adultos pré-
tratados sistemicamente com capsaicina
duas semanas antes (ver Métodos).
2.0: 2.01 C Tecidos de ratos tratados neonatalmente
2,0
Z com capsaicina. Os valores são dados
g como médias _+ SEM e representam 5 a 10
1£ 1,0 CI animais em cada grupo. *** P < 0,001,
: comparado aos efeitos nos controles
LU o.41 0,4: usando análise de variância de Kruskal-
EU-.- 0,4-0,2 _
0,2' 0,2' wallis com comparações múltiplas
, , , , , , , , , , , | , |

, ..... eu

10-8 10-7 10-6 10-8 10-7 10-6 10,-8 10-7 10-6 M

(A) (e)
E
50. / 50

>
1:o] (A)
0
Z
LU-.)
20
0
LU
10 • 10
LL
eu
• EU
• eu
• eu

10!9 ;0C8 CoLT ;Ot6 10-9 10-8 10-7 10-6

~
zE 2 15J 10
~"
(B)

• " EU
" " EU
• " NKA
1J "9 10 !8 10 -7 1J "6 M 10 L9 10 -8 10 L7 10 ~6

2. Efeitos do aumento das concentrações de hCGRP (0 O), /~ (11- It) ESTOU DENTRO

e NA (• •) na taxa (batidas x chuva 1; painel superior) e tensão (raN; painel
inferior ) do espontaneamente batendo no átrio da cobaia. Um grupo de
controle. B Após a taquifilaxia ter evoluído para 5 × 10 -7 M hCGRP c~, os
efeitos de ambos hCGRP c~ e fl estavam ausentes enquanto a resposta
ao NA permaneceu intacta. Os valores são dados como médias 4- SEM e
representam 4-6 animais em cada grupo
3. A No átrio direito de cobaia, NKA em uma concentração de 5 x 10 7 M
inibiu tanto a frequência cardíaca quanto a força contrátil, enquanto a
administração em bolus (10 nmol) na preparação isolada de coração
inteiro B inibiu predominantemente a frequência. R em A indica enxágue

Contratilidade ventricular
Forskolin (10-5 M; n = 10) induziu uma estimulação de desenvolvimento Utilizando corações inteiros perfundidos, a administração em bolus de
lento e de longa duração (até pelo menos 3 h) de força contrátil (resposta hCGRP ~ (260 pmol; n = 6) estimulou a taxa contrátil (28 3 batimentos x
máxima 0,97 _+ 0,29 mN) e taxa (58 ± 7 batimentos x chuva- 1) no átrio chuva-1),
___ enquanto nenhuma influência clara na força contrátil foi
da cobaia com batimento espontâneo (Fig. 5 B). Esses efeitos observada. Nenhuma taquifilaxia aos efeitos de CGRP se desenvolveu
estimuladores da forscolina não foram influenciados pela taquifilaxia ao na preparação de Langendorff após administração repetida de hCGRP ~
hCGRP ~ (0,76 + 0,3 mN e 54 _+ 5 batimentos x min ~ aumento após (até 16 vezes com 3 intervalos de chuva).
CGRP-taquifilaxia; n = 4; Fig. 5A). Por outro lado, a resposta ao hCGRP
c~ (5 x 10-7 M; n = 7) não foi alterada após 45 min de estimulação da A administração em bolus de NKA, I e 10 nmol, inibiu a frequência em
contratilidade atrial pela forscolina (46 ± 3 batimentos x min -1 e aumento 13 _4-2 e 20 + 2 batimentos x chuva-1 e a tensão em 0,7 + 0,22 e 1,7 ±
de 0,92 _+0,15 mN em comparação com 48 _+ 5 batimentos x min -~ e 0,29 mN, respectivamente, da preparação isolada de coração inteiro
0,87 + 0,12 naN antes da aplicação de forscolina; Fig. 5 B). ( Figura 3B). A administração repetida de NKA à mesma preparação não
induziu taquifilaxia.
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652
A perfusão de corações inteiros isolados de cobaias com capsaicina por 5
min (10,6 M, n = 4) induziu uma taquicardia de longa duração (21 + 3 batimentos
x chuva -1), enquanto após uma pequena estimulação transitória e inconsistente,
foi observado um efeito inibitório na força contrátil (4,8 _+ 1,6 mN de uma
tensão basal de 13,7 +_ 5 raN; Fig. 6A). Os efeitos estimuladores da capsaicina
estavam ausentes após o pré-tratamento sistêmico com capsaicina, enquanto
a influência negativa na tensão contrátil permaneceu inalterada (3,9 + _ 0,9 raN;
Fig. 6B; n = 5). A pré-incubação com atropina 10-6 M durante 15 min não
influenciou a inibição da capsaicina na força contrátil (não mostrado).
A perfusão com acetilcolina (10,6 M; n = 6) na preparação de coração
inteiro de cobaia foi associada a um
CAPSAICINA 10 -6 M
1 MINUTO
Fig. 4. Uma exposição à capsaicina (10 -6 M) durante 5 chuvas estimulou tanto
a força contrátil quanto a frequência do batimento espontâneo do átrio direito de
uma cobaia em um animal controle. Após o pré-tratamento sistêmico com
capsaicina B, os efeitos estimulatórios da capsaicina estavam ausentes
CGRP 5x10 -7 M
FORSKOU N 10 -5
30
FORSKOUN 10 -5 M
"~ 21
295
F(~,fiKOUN 10 -5
efeito cronotrópico e inotrópico negativo sensível à atropina (85 + 12 batimentos
x chuva-1, 4,6 + 0,9 mN, respectivamente).
Discussão
Os presentes dados que descrevem os efeitos da capsaicina na contratilidade
cardíaca em comparação com taquicininas e CGRP ampliam relatórios
anteriores (Tippins et al. 1984; Lundberg et al.
1985; Franco-Cereceda e Lundberg 1985; Haas e Skofitsch 1985). Não houve
diferença na potência entre hCGRP e e/3 na estimulação da contratilidade atrial
em cobaias, respectivamente. Isto está de acordo com as estreitas semelhanças
estruturais entre os péptidos. Assim, hCGRP c~ e 13 diferem em apenas 3
resíduos de aminoácidos (Steenbergh et al. 1985) da sequência de 37
aminoácidos. Além disso, o hCGRP e/3 demonstrou ser equipotente na
estimulação do átrio direito humano isolado e acionado eletricamente, bem
como no relaxamento das artérias musculares esqueléticas pré-contraídas
(Franco-Cereceda et al. 1987a). De acordo com esses achados, foi observada
taquifilaxia cruzada entre os efeitos contráteis do hCGRP a e /3. Além disso, a
estimulação do átrio da cobaia induzida pela capsaicina estava ausente após
taquifilaxia para hCGRP e ou /3. Como a curva concentração-resposta ao NA
permaneceu inalterada após a taquifilaxia por CGRP, esse procedimento
aparentemente não alterou a capacidade de resposta do miocárdio à ativação
dos adrenoceptores (ver também Franco-Cereceda e Lundberg 1985).
(B)
Nos átrios, o CGRP estimulou tanto a frequência quanto a força, enquanto
um efeito cronotrópico principalmente positivo foi observado em toda a
preparação do coração. Isto é consistente com a descoberta anterior de que,
em relação ao NA, o CGRP influencia predominantemente a frequência, e não
a tensão, em toda a preparação do coração (Franco-Cereceda e Lundberg
1985).
Foi demonstrado que a forscolina tem um efeito estimulador na atividade
da adenilato ciclase independente da ativação de
(A)
M
TiME (chuva)
Figura 5. Traçados originais mostrando
a estimulação de hCGRP (5 x
10 -7 M) e forscolina (10 s M)
na tensão e frequência do átrio
direito de cobaia com batimento
espontâneo.
Um Tachyph3)laxis desenvolveu-se para
os efeitos do CGRP (a readição de
CGRP não evocou qualquer
(B) resposta), enquanto a adição
subsequente de forscolina
estimulou a contratilidade atrial. B
Forskolin também causou uma
estimulação duradoura na ausência
~RP 5x10-7 M
de CGRP e os efeitos do hCGRP
45 "lIME (min) permaneceram intactos na presença de forscolina
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CAPSNCINA 10 -6 M
1GANHA
receptores extracelulares (ver Seamon e Daly 1981). Foi, portanto,
sugerido que a forscolina pode servir como uma ferramenta para estudar
o papel do monofosfato de adenosina cíclico (cAMP) nas respostas
fisiológicas (Seamon e Daly 1983).
Foi relatado que o CGRP induz a formação de AMPc tanto no tecido
vascular (Edvinsson et al. 1985; Kubota et al. 1985) quanto no miocárdico
atrial (Sigrist et al. 1986). Nas nossas experiências, a forscolina induziu
uma estimulação muito duradoura da contratilidade auricular, em contraste
com o declínio espontâneo da resposta do CGRP. A presença de
forscolina, no entanto, não influenciou a resposta à aplicação subsequente
de CGRP e, inversamente, a taquifilaxia de CGRP não inibiu os efeitos da
forscolina. Parece, portanto, evidente a partir destas experiências que é
improvável que a regulação negativa do sistema AMPc seja responsável
pelo desenvolvimento da taquifilaxia por CGRP. Pelo contrário, os dados
indicam que um evento mediado por receptor específico está subjacente
ao desaparecimento dos efeitos do CGRP após administração repetida.
O efeito estimulador da capsaicina na contratilidade atrial foi imitado
pelo CGRP, enquanto nos ventrículos, a capsaicina diminuiu principalmente
a tensão contrátil (Zernig et al. 1984; Franco-Cereceda e Lundberg 1985;
Hoover 1987; Franco-Cereceda et al. 1988; este estudo) . Isto levanta a
questão se o NKA, que inibe a contratilidade cardíaca (ver também
Lundberg et al. 1985; Hua e Lundberg 1986) e é co-liberado com CGRP
da preparação de coração inteiro de cobaia após exposição à capsaicina
(Franco-Cere-ceda et al. 1988), poderia explicar a inibição da tensão
ventricular induzida pela capsaicina. No entanto, o efeito inotrópico
negativo da capsaicina permaneceu inalterado após o pré-tratamento
com capsaicina, o que causa degeneração dos aferentes da fibra C
cardíaca (Papka et al. 1984) e esgota NKA e NPK do coração (Hua et
al. 1985). Os nervos sensoriais contendo CGRP/NKA estão presentes no
miocárdio dos átrios, mas estão quase exclusivamente associados aos
vasos sanguíneos nos ventrículos (Lundberg et al. 1985; Franco-
Cereceda et al. 1987b). Assim, a NKA influenciou principalmente a
contratilidade atrial. A presença de taquifilaxia cruzada entre NKA e NPK
sugere adicionalmente que estes dois agentes actuam nos mesmos locais
receptores e que a região NKA provavelmente representa a porção
biologicamente activa de NPK (ver também Hua e Lundberg 1986).
Apesar das ações inotrópicas e cronotrópicas negativas claramente
definidas da NKA na contratilidade atrial, a capsaicina não exerceu
qualquer efeito inibitório
653
(para
Fig. 6. Uma exposição à capsaicina (10-6 M)
durante 5 min da preparação isolada de
coração de porquinho-da-índia foi associada
a uma estimulação de frequência e a uma
estimulação transitória e inconsistente
seguida de inibição da força contrátil. B
Após o pré-tratamento sistêmico com
capsaicina, apenas o efeito inibitório da
capsaicina na força contrátil estava presente
efeitos na presença de taquifilaxia por CGRP. Além disso, nenhuma
influência na resposta atrial ao NKA exógeno foi observada pela
taquifilaxia do CGRP. Isto sugere que as taquicininas, que provavelmente
serão liberadas pela capsaicina a partir dos nervos sensoriais dentro do
miocárdio atrial, não ativaram os locais receptores atriais na mesma
extensão que o NKA exógeno.
O efeito inibitório da capsaicina sobre a tensão ventricular permaneceu
inalterado na presença de atropina, o que torna improvável que uma
libertação de acetilcolina tenha mediado esta resposta inotrópica negativa.
Além disso, a perfusão com acetilcolina não só causou um efeito
inotrópico negativo, mas também uma potente inibição da frequência.
Tomados em conjunto, os dados mostram que é muito pouco provável
que os efeitos inibitórios da capsaicina na contratilidade ventricular
estejam relacionados com mecanismos colinérgicos e taquicininas
libertadas pelos nervos sensoriais. Portanto, deve ser considerado um
efeito depressor direto da capsaicina nas células ventriculares do
miocárdio. De acordo com esta sugestão, foi demonstrado que a
capsaicina, por meio de técnicas eletrofisiológicas, tem um efeito inibitório
na velocidade ascendente do potencial de ação em preparações de
músculo papilar de cobaia (Zernig et al. 1984). Nos átrios, entretanto, a
capsaicina tem pouco (Zernig et al. 1984) ou nenhum efeito na velocidade
ascendente do potencial de ação (Franco-Cereceda et al. 1988).
A supersensibilidade pós-juncional a agentes inotrópicos e
cronotrópicos é caracterizada por sua ocorrência independentemente dos
meios utilizados para suprimir a neurotransmissão (ver Rice et al. 1987).
Os efeitos estimuladores da capsaicina na contratilidade atrial de ratos
foram marcadamente deprimidos após o pré-tratamento sistêmico com
capsaicina, que esgota o CGRP do tecido. A falta de qualquer desvio
para a esquerda da curva concentração-resposta ao CGRP após a
depleção do peptídeo nos nervos sensoriais cardíacos de ratos adultos
ou neonatos (Lundberg et al. 1985; Wharton et al. 1986) indica uma
diferença em comparação com alterações de sensibilidade agonistas de
receptores adrenérgicos observados após esgotamento dos estoques
cardíacos de NA por pré-tratamento com reserpina ou simpatectomia
(ver Rice et al. 1987). Possivelmente, isso poderia estar relacionado ao
fato de que, em contraste com a liberação de NA e subsequente ativação
do receptor adrenérgico, a liberação de CGRP dos aferentes da fibra C
pode ser insuficiente para modular a sensibilidade do receptor. Esta
diferença entre a regulação dos mecanismos receptores para o
transmissor clássico e o peptídeo é consistente com relatos do baço de
porco onde
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a depleção de NA e do neuropeptídeo Y por desnervação pós-gang|iônica
induziu uma supersensibilidade seletiva ao NA (de origem presumivelmente
principalmente prejuncional) sem quaisquer alterações de sensibilidade ao
neuropeptídeo Y (Lundberg et al. 1988).
Em conclusão, a estimulação da atividade contrátil cardíaca pela
capsaicina in vitro é provavelmente devida à liberação de CGRP dos nervos
sensoriais, conforme revelado pela ausência desta resposta após a
taquifilaxia por CGRP. Mecanismos receptores específicos, em vez da
fadiga do sistema adenilato ciclase, parecem explicar o desenvolvimento da
taquifilaxia do CGRP após administração repetida. Além disso, a capsaicina
inibe a tensão ventricular que não pode ser explicada pela liberação de
NKA dos nervos sensoriais ou pela ativação de mecanismos colinérgicos.
Nenhuma supersensibilidade aos efeitos contráteis do CGRP pôde ser
detectada em átrios de ratos após pré-tratamento com capsaicina neonatal
ou adulta.
Reconhecimentos. O presente estudo foi apoiado por doações do Conselho
Sueco de Pesquisa Médica (14X-6554), do Conselho Americano para
Pesquisa do Tabaco, da Companhia Sueca de Tabaco, Petrus e Augusta
Hedlunds Stiftelse, do Fundo Sueco de Trabalho e Ambiental e de fundos
do Instituto Karolinska.
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