UNIVERSIDADE DO ESTADO DO RIO DE JANEIRO

INSTITUTO DE QUÍMICA

DEPARTAMENTO DE TECNOLOGIA DE PROCESSOS

QUÍMICOS

LABORATÓRIO DE BIOTECNOLOGIA EXPERIMENAL

EXPERIMENTO: DOSAGEM DE GRT EM SOLUÇÕES

EM SACAROSE

PROFESSORA: TAMIRES CARVALHO

ALUNA: KAREN DE SÁ GOMES
TURMA: 2
  MATERIAIS E EQUIPAMENTOS

- 3 tubos de Folin-Wu;
- 2 tubos de ensaio;
- 2 estantes;
- Solução padrão de Glicose de 2% m/v;
- Solução padrão de Glicose de 20% m/v;
- Solução de HCl 2M;
- Solução de NaOH 1M;
- Solução de DNS;
- água destilada;
- 2 balões volumétricos de 25 mL e 100 mL;
- 6 pipetas graduadas de 1 mL;
- 1 pipeta graduada de 5 mL;
- Pipeta Pasteur;
- Béquer;
- Pêras;
- Espectrofotômetro;
- Sistema de banho-maria.

 METODOLOGIA

Hidrólise ácida das soluções de sacarose:

Adicionou-se, em cada tubo de ensaio, 1 mL das soluções de sacarose.

Adicionou-se 1 mL de HCl em cada um dos tubos e homogeneizou-se os tubos.
Após isso, levou-se os tubos ao sistema de banho-maria à 65°C por 10 minutos.
Posteriormente, adicionou-se 3 mL de NaOH em cada um dos tubos. Transferiu-se 1
mL dos hidrolisados para o balão de 100 mL do hidrosilado de 20% m/v da sacarose
e para o balão de 25 mL do hidrosilado de 2% m/v da sacarose e completou-se os
balões com água destilada através do béquer e pipeta Pasteur.
 Dosagem de glícidios redutores totais (GRT):

Após a 1° etapa, adicionou-se 1 mL de cada balão em tubos Folin-Wu com 1 mL do

reagente DNS. Para o branco, adicionou-se 1 mL de água destilada e 1 mL do
reagente DNS em tubo Folin-Wu. Os tubos foram levados para o sistema banho-
maria à 65°C por 5 minutos e após isso, os tubos foram resfriados. Posteriormente,
os tubos foram avolumados, com água destilada, até a graduação de 12,5 mL do
tubo.
Por fim, as soluções foram lidas em espectrofotômetro a 540 nm, zerando o
aparelho com o branco.

 Resultados e Discussão

Para efetuar os cálculos das concentrações de glicídios redutores totais e

glicídios redutores foi utilizada a curva padrão feita na prática 3. A curva foi feita
utilizando 4 pontos uma vez que, o quinto ponto foi considerado um outlier, visto
que, o valor do coeficiente de linearidade com o quinto ponto ficou R2 = 0,9944 e
sem o quinto ponto ficou R2 = 0,9997 que está bem mais próximo da linearidade (R2
= 1).

Curva padrão
0,45
0,4 y = 7,2454x - 0,018
0,35 R² = 0,9997
Absorbân

0,3
0,25
0,2
0,15
0,1
0,05
0

0 0,01 0,02 0,03 0,04 0,05 0,06 0,07

[glicose] (g/L)
- Cálculos: Hidrólise ácida do padrão de sacarose 20% m/v/Dosagem
de glicídios redutores totais (GRT)

Fator de diluição total = FD1 x FD2 x FD3 = 5 x 100 x 12,5 = 6250

Utilizando a equação da reta: y = 7,2454x - 0,018 e ABS medida =
0,219
X = [GRT na 0,219+0,018
= = 0,03271 g/L
sacarose]diluída
7,2454

[GRT na sacarose]amostra = 6250 x 0,03271 = 204,44 g/L

[GRT] = 20,44 g/100 mL
[Sacarose]experimental = [GRT] x Fc = 20,44 x 0,95 = 19,42 g/100 mL

- Cálculo da eficiência:

[sacarose]padrão – 100%

[Sacarose]experimental –

20 – 100%

19,42 – Eficiência  Eficiência = 97,1 %

- Cálculos: Hidrólise ácida do padrão de sacarose 2% m/v/Dosagem de

glicídios redutores totais (GRT)

Utilizando a equação da reta: y = 7,2454x - 0,018 e ABS medida = 0,064.

X = [GRT caldo hidrolisado]diluída 0,064 + 0,018

=
 = 0,01132 g/L 7,2454

[GRT caldo hidrolisado]amostra = Fator de diluiçãototal x [GRT caldo

hidrolisado]diluída
[GRT caldo hidrolisado]amostra = 1562 x 0,01132 = 17,69 g/L
[GRT caldo hidrolisado] = 1,769 g/100 mL

- Cálculo da eficiência:

[sacarose]padrão – 100%

[Sacarose]experimental –

2 – 100%

1,769 – Eficiência  Eficiência = 88,4%

Amostra Absorbância [GRT] ou [GR] Eficiência

GRT sacarose 0,219 19,42 g/100 mL 97%
padrão 20%
GRT sacarose 0,064 1,415 g/100 mL 88%
padrão 2%
Quadro 1. Resultados

Após os resultados superiores a 88% é possível afirmar que a maioria da

sacarose presente na solução foi convertida em glicídios redutores atráves da
hidrólise ácida. É importante ressaltar que a eficiência da hidrólise pode variar
dependendo das condições experimentais, como pH, temperatura e tempo de
reação.
Dessa forma, o método da hidrólise da sacarose que resulta na quebra da molécula
em glicose e frutose, que são açúcares redutores possui alta eficiência e
confiabilidade.