UNIVERSIDADE DO ESTADO DO RIO DE JANEIRO

INSTITUTO DE QUÍMICA

DEPARTAMENTO DE TECNOLOGIA DE PROCESSOS

QUÍMICOS

LABORATÓRIO DE BIOTECNOLOGIA EXPERIMENAL

EXPERIMENTO: DOSAGEM DE GLICÍDIOS

REDUTORES

PROFESSORA: TAMIRES CARVALHO

ALUNA: KAREN DE SÁ GOMES
TURMA: 2
  MATERIAIS E EQUIPAMENTOS

- 7 tubos de Folin-Wu;

- 2 estantes;

- Solução padrão de Glicose de 0,9 mL

- Solução de amostra desconhecida;

- Reagente DNS;

- água destilada;

- 4 pipetas graduadas de 1 mL;

- Pipeta Pasteur;

- Pêras

- Espectrofotômetro

- Sistema de banho-maria.

 METODOLOGIA

Adicionou-se a 6 tubos de Folin-Wu 0 (branco); 0,2 mL; 0,4 mL; 0,6 mL; 0,8
mL e 1,0 mL da solução padrão de glicose de 0,9 g/L e completou-se cada um deles
para 1 mL com água destilada. Ademais, adicionou-se a um tubo de Folin-Wu 1 mL
de solução da amostra desconhecida.

Adicionou-se 1,0 mL do reagente do DNS a todos tubos de Folin-Wu. Após isso, os

tubos foram aquecidos no sistema de banho-maria em ebulição por 10 minutos. Os
tubos foram resfriados e preenchidos com água destilada até 12,5 mL do volume.

Posteriormente, as absorbâncias das soluções foram determinadas em

espectrofotômetro a 540 nm, zerando o aparelho com o branco.
  RESULTADOS

Solução Absorbância Concentração

(g/L)

1 0,000 0
2 0,073 0,2
3 0,134 0,4
4 0,283 0,6
5 0,356 0,8
6 0,468 1,0
Quadro 1: Valores de Absorbância e Concentração das Soluções

Solução Absorbância

Desconhecida 0,235
Quadro 2: Valor de absorbância para amostra desconhecida

Com base nos valores de concentração das soluções e dos valores das
absorbâncias foi plotado no Excel a curva de calibração de absorbância por
concentração em g/L.

Curva de Calibração
0.5
0.45
f(x) = 0.476857142857143 x − 0.0194285714285714
0.4 R² = 0.986409413797744
0.35
Absorbância

0.3
0.25
0.2
0.15
0.1
0.05
0
0.00 0.20 0.40 0.60 0.80 1.00 1.20
Concentração (g/L)

Gráfico 1: Curva padrão de glicose

A equação da reta obtida foi:

y = 0,4769x - 0,0194

E o coeficiente de linearidade obtido para a reta foi:

R² = 0,9864

A partir da equação obtida no gráfico, podemos calcular a concentração da

amostra desconhecida através do seguinte cálculo:

0,235+0,0194
Concentração da amostra desconhecida=
0,4769

Onde:

X: é o valor da concentração em g/L

Y: é o valor da absorbância

Isso indica que a concentração encontrada da amostra desconhecida é de 0,53

g/L de glicose.

 CONCLUSÃO

A quantificação dos açúcares foi feita pelo método DNS (3,5-dinitrosilicílico).

Neste método, a dosagem de açúcares com poder redutor é realizada com base na
redução, em solução alcalina, do ácido 3,5-dinitrosalicílico, sendo os grupos
carbonila do açúcar oxidados a carboxila (figura 1).
 Figura 1: Reações envolvidas Método de dosagem de açúcares com DNS

O composto resultante desta reação, o ácido 3-amino-5-nitrosalicílico, tem uma

cor vermelho-acastanhada. A intensidade da cor, medida pela absorbância a 540
nm, é diretamente proporcional à concentração de açúcares redutores da solução
original.

Como o espectro foi calibrado com o branco, há possibilidade de mais erros,

no entanto é mais direta.

Devido à prática realizada em laboratório percebemos que o método do DNS é

uma medida rápida e eficaz. Entretanto, a concentração encontrada na amostra
desconhecida foi de 0,53 g/L, e pode-se provar que este é um valor não tão
confiável visto que o coeficiente de correlação linear foi de 0,9864.

Conclui-se que através da absorbância é possível realizar comparações entre

substâncias desconhecidas desconsiderando as diferenças de concentração.
Ademais, não foi possível indicar proporcionalidade em relação à Lei de Beer, pois
não houve a formação da reta entre a absortividade e a concentração.