UNIVERSIDADE DO ESTADO DO RIO DE JANEIRO

INSTITUTO DE QUÍMICA

DEPARTAMENTO DE TECNOLOGIA DE PROCESSOS BIOQUÍMICOS

LABORATÓRIO DE BIOTECNOLOGIA EXPERIMENTAL

EXPERIMENTO: ESPECTROFOTOMETRIA

PROFESSOR(A): Tamires Carvalho

DATA DE REALIZAÇÃO DA PRÁTICA: 03/04/2023

DATA DE ENTREGA DO RELATÓRIO: 10/04/2023

Turma: 2

Aluno:

Karen de Sá Gomes

1
  MATERIAIS E EQUIPAMENTO

- Suspensão de fermento biológico em água destilada de 150 g/L

- 5 balões volumétricos de 50 mL, 100 mL, 200 mL, 250 mL e 500 mL
- 1 béquer 100 mL
- 1 pipeta volumétrica de 1 mL
Água destilada
Pipeta Pasteur
2 suspensões de concentração desconhecida
1 Espectrofotômetro

 MÉTODOS

Preparou-se uma suspensão de fermento biológico de 150 g/L. Com o auxílio da pipeta volumétrica, transferiu-
se a suspensão de 150 g/L para os balões volumétricos e diluiu-se os respectivos balões com a água destilada.
Após a homogeinização, realizou-se o procedimento para zerar o espectrofotômetro com água destilada e
determinou-se as absorbâncias das suspensões diluídas no equipamento a 570nm.

 RESULTADOS E DISCUSSÕES

- Cálculos dos Fatores de diluição:

Vf
Ci
Fator de diluição = =
Vi Cf

50
Fd1 = = 50
1
100
Fd2 = = 100
1
200
Fd3 = = 200
1
250
Fd4 = = 250
1
500
Fd5 = = 500
1

2
 - Cálculo da concentração das soluções-padrão:

[Solução mãe] = 0,15 g/mL = 150 g/L

C
Fator de diluição = i
C𝐹  Cf = Fator C i
de diluição

[Solução mãe] 150

[Solução 1] = = = 3,00 g/L
Fator de diluição 50
[Solução mãe] 150
[Solução 2] = = = 1,50 g/L
Fator de diluição 100
[Solução mãe] 15
[Solução 3] = 0 = 0,75 g/L
Fator de diluição =
200
[Solução mãe]
[Solução 4] = 15 = 0,60 g/L
Fator de diluição 0
[Solução mãe] = 250
[Solução 5] = = 0,30 g/L
Fator de diluição 15
0
=
500

3
 Solução Absorbância Fator de Concentração
diluição (g/L)
1 0,652 50 3,00
2 0,287 100 1,50
3 0,183 200 0,75
4 0,163 250 0,60
5 0,092 500 0,30
Quadro 1. Valores de Absorbância, Fatores de diluição, Desvios padrões e
Concentração das Soluções

Soluçõe Absorbância
s
A 0,123
B 0,393
Quadro 2. Valores de absorbância para as amostras A e B

Com base nos valores de concentração dos padrões e dos valores das
absorbâncias média foi plotado no Excel a curva de calibração de absorbância por concentração
em g/L.

Curva de Calibração
0.7
0.6 f(x) = 0.203371647509578 x + 0.0252528735632184
R² = 0.987499094861145
0.5
Absorbância

0.4
0.3
0.2
0.1
0
0.00 0.50 1.00 1.50 2.00 2.50 3.00 3.50
Concentração (g/L)

4
 A equação da reta obtida foi:

y = 0,2034x + 0,0253

E o coeficiente de linearidade obtido para a reta foi:

R² = 0,9875

- Cálculo das concentrações das soluções A e B:

Para o cálculo das concentrações das amostras desconhecidas utilizou-se os dados obtidos através
equação da reta.

Solução A:

[A] = 0,123 − 0,0253

= 0,480 g/L
0,2034

Solução B:
0,393 − 0,0253
[B ] = = 1,808 g/L
0,2034

5
  CONCLUSÃO

O aumento da concentração da substância analisada não altera as características químicas do meio. A

principal causa de desvios da lei é a utilização de soluções concentradas.

Conclui-se que através da absortividade é possível realizar comparações entre substâncias

desconhecidas desconsiderando as diferenças de concentração. Ademais, não foi possível indicar
proporcionalidade em relação à Lei de Beer, pois não houve a formação da reta entre a
absortividade e a concentração.

Um fator que pode ter influenciado essa proporção seria: concentrações superiores ao limite de
linearidade observado no desvio da lei de Lambert-Beer, já que ele representa a limitação de
concentração para a qual a lei de Lambert-Beer é válida. Ou até mesmo, o erro analítico ao rinsar
a cubeta.