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Estrutura e Desenvolvimento de Artrópodes 63 (2021) 101060

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Estrutura e Desenvolvimento de Artrópodes

página inicial do jornal: www.elsevier.com/locate/asd

É o mais importante (Crustacea, Decapoda, Atyidae) do grupo protândrico.

espécies hermafroditas? Aspectos comportamentais e morfológicos da
sistema reprodutivo
Marina Machado para, * , Fernanda Cristina Salti b , jovem Bertini c , Fernando José Zara b,
Maria Lucia Negreiros-Fransozo uma

uma
~
Grupo de Estudos em Biologia, Ecologia e Cultura de Crustáceos (NEBECC), Universidade do Estado de São Paulo (UNESP), Instituto de Biociências, Campus de
~
Botucatu, Zoology Sector, 18618-970, Botucatu, State of Sao Paulo, Brazil b
~
Laboratório de Morfologia de Invertebrados (LMI), Universidade do Estado de São Paulo (UNESP), Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias, Departamento de
~
Applied Biology, Campus of Jaboticabal, 14884-900, Jaboticabal, State of Sao Paulo, Brazil
c ~
Laboratório de Biologia e Cultura de Crustáceos (LABCRUST), Universidade do Estado de São Paulo (UNESP), Campus de Registro, 11900-000, Registro, Estado de São Paulo, Brasil
~

informações do artigo abstrato

Historia do artigo: Avaliamos o comportamento de acasalamento de Potimirim potimirim em laboratório com base na suposição de que
Recebido em 9 de novembro de 2020
este carideano pode ser hermafrodita. Também realizamos histologia e microscopia eletrônica de varredura
Recebido em forma revisada
análises do sistema reprodutor de fêmeas, machos e indivíduos diferenciados. Os experimentos de acasalamento produziram três
26 de abril de 2021
estágios comportamentais, a saber, interação, posicionamento lateral e cópula.
Aceito em 28 de abril de 2021
Disponível online xxx
(o que não necessariamente ocorreu nesta sequência). A hipótese de um acasalamento de busca puro aleatório
foi corroborada pela falta de namoro masculino, guarda pós-copulatória e a alta agregação de
indivíduos. Três estágios ovarianos macroscópicos foram registrados em fêmeas adultas: rudimentar, em desenvolvimento
Palavras-chave:
Água fresca
e maduro. A vitelogênese secundária começa no estágio de desenvolvimento, produzindo gema madura. O masculino

Acasalamento
O sistema reprodutivo é formado pelos testículos e pelos vasos deferentes (VD), que é dividido em três regiões:
gonocorismo proximal, médio e distal. O VD proximal tem um tiflossolo que produz uma fina camada de tipo II
Histologia secreção ao redor da massa central de espermatozóides imersa em uma secreção tipo I. Externo e aderente
Sistema sexual A secreção do tipo III é produzida do MVD para o DVD, e ambos compõem o espermatóforo primordial.
Potimirim potimirim possui sistema reprodutor gonocórico e comportamento de acasalamento e seu sistema sexual
não se encaixa em nenhum dos sistemas protândricos descritos anteriormente.
© 2021 Elsevier Ltd. Todos os direitos reservados.

1. Introdução fêmeas primárias, 3) protandria de fêmeas precoces, 4) seu mafroditismo com

Camarões Caridean têm diversos sistemas sexuais. Embora o gon ocorismo
(sexos separados) seja o sistema mais comum na maioria
espécies conhecidas, a protandria (mudança de sexo) pode ocorrer em
espécies (Bauer, 2006). A protandria é o processo em que os machos
mudar de sexo; à medida que o corpo aumenta, as características masculinas são suprimidas
e feições femininas são desenvolvidas (Bauer, 2000, 2006). No fim
dessa ontogenia sexual, esses indivíduos são capazes de se reproduzir apenas
como fêmeas (Bauer, 2000, 2006). Cinco tipos de protândrico
sistemas foram descritos (Bauer, 2000, 2001; Baeza, 2018), como
segue: 1) protandria simples ou sequencial, 2) protandria com
* Autor correspondente.
E-mail: mm.costa@unesp.br (M. Machado).
maturação direta em fêmeas, e 5) hermafroditismo protândrico simultâneo (PSH).
Protandria, geralmente,
ocorre quando o sucesso reprodutivo dos machos não é dependente do tamanho,
como em espécies em que os machos não protegem as fêmeas ou tentam forçar a
cópula (Bauer, 2006).
A hermafrodite protândrica em decápodes foi relatada pela primeira vez
durante as décadas de 1920 e 1930 (Berkeley, 1929). Mais tarde, em
década de 1980, vários estudos relataram o sistema sexual protândrico em 37
espécies de decápodes, incluindo 31 espécies de carídeos (Tabela 1) em Brook et al.
(1994). Recentemente, a protandria carideana foi registrada em camarões
das famílias Merguiidae Christoffersen, 1987 e Merguia rhizo phorae (Rathbun,
1900) (Baeza, 2010a, 2010b), Thoridae Kingsley,
1879e Thor amboinensis DeMan, 1888 (Baeza e Piantoni, 2010), e
Rhynchocinetidae Ortmann, 1890 e Rhynchocinetes uritai Kubo, 1942

https://doi.org/10.1016/j.asd.2021.101060
1467-8039/© 2021 Elsevier Ltd. Todos os direitos reservados.
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M. Machado, FC Salti, G. Bertini et al.
(Bauer e Thiel, 2011). A protandria dos gêneros Lysmata Risso, 1816 e
Exhippolysmata Stebbing,1915 tem sido amplamente investigada (Bauer e
Holt, 1998; Bauer, 2002a, 2002b; Braga et al., 2009, 2016; Baeza, 2009, 2013,
2018).
A Família Atyidae (Infraorder Caridea) inclui cinco espécies com sistemas
reprodutivos protândricos (Carpenter, 1978), Paratya curvirostris (Heller, 1862),
Atya bisulcata (Randall, 1839), Atyoida. serrata (Spence Bate, 1888) e Caridina
richtersi Thallwitz, 1891.
Entre os Atyidae, o gênero Potimirim (Holthuis, 1954) ocorre em rios e córregos
costeiros do México, América do Sul e América Central. O gênero Potimirum
inclui cinco espécies válidas, atualmente: P. americana Guerin-Meneville, 1855,
P. mexicana De Saussure, 1857, P. glabra (Kingsley, 1878), P. potimirim
(Müller, 1881), P. brasiliana Villalobos (1959), e outras duas espécies pendentes
detectadas apenas por meio de análise molecular (Torati e Mantelatto, 2012;
Mantelatto et al., 2021).
O camarão carídeo P. potimirim é nativo de rios costeiros no Brasil e os
indivíduos realizam a maior parte de seu ciclo de vida em água doce e
geralmente estão associados à vegetação subaquática marginal.
Com base na distribuição tamanho-frequência dos indivíduos e variações
no apêndice masculino, Alonso-Reyes et al. (2010) propuseram que P.
mexicana é uma espécie hermafrodita protândrica; os machos são menores
que as fêmeas com uma sobreposição de tamanho muito pequena entre os
sexos. Machado et ai. (2020) concluíram que os machos da espécie brasileira
P. brasiliana possuem dois morfotipos adultos sendo machos menores que
fêmeas com sobreposição de tamanho muito pequena, o que sugere protandria
(ainda não foi comprovado). No entanto, os autores não mostraram evidências
de características externas ou internas de reversão sexual, como o aumento
no tamanho dos machos e alterações nas características sexuais primárias (ou
seja, alterações ovarianas ou testiculares), respectivamente. Portanto, o
hermafroditismo em P. mexicana ainda é uma questão em aberto.
Grilli et ai. (2014) testaram a hipótese anterior de que ambas as espécies
brasileiras de Potimirim (P. brasiliana e P. potimirim) compartilham o mesmo
sistema sexual protândrico sequencial. Com base na morfologia externa dos
caracteres sexuais secundários de machos e fêmeas, esses autores concluíram
que ambas as espécies são espécies gon ocóricas. Embora Grilli et al. (2014)
mencionaram análises gonadais em seu estudo, não havia imagens da
morfologia das gônadas. Portanto, até o momento não há análise histológica
que indique uma morfologia separada do sistema reprodutor masculino e
feminino que seria uma evidência de gonocorismo em camarões do gênero
Potimirim. Além da falta de estudos morfo-histológicos gonadais, o
comportamento reprodutivo das espécies deste gênero não foi analisado
previamente.
O objetivo deste estudo foi realizar uma análise detalhada do comportamento
de acasalamento de P. potimirim em condições de laboratório. Também foi
realizada avaliação morfológica do sistema sexual, incluindo a histologia do
sistema reprodutor de fêmeas, machos e indivíduos indiferenciados. Nossa
hipótese é que P. potimirim seja uma espécie gonocórica.
2. Materiais e métodos
2.1. Amostragem e desenho experimental
Os indivíduos foram amostrados no Rio Ribeira de Iguape, município de
Iguape (24º410 1100~ S; 47º330 4700 W), na região sul do Estado de São
Paulo, Brasil. Dois coletores realizaram amostragens durante z60 min com
auxílio de peneiras (abertura de 80 cm 2 mm). As peneiras foram utilizadas
com movimentos ascendentes sob a vegetação marginal em sentido contrário
ao fluxo do rio.
Indivíduos vivos foram transportados para o laboratório em caixas térmicas
preenchidas com água do local da amostra. Em seguida, os indivíduos foram
classificados de acordo com o sexo e identificados de acordo com o diagnóstico.
2
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características da espécie (Villalobos, 1959). O comprimento do cefalotórax
(CL) foi medido em estereomicroscópio (Zeiss® Stemi SV6) equipado com um
sistema de captura de imagem (Zeiss® Stemi, 2000-C, AxioVision Rel. 4.8)
seguindo as técnicas propostas por Anger e Moreira (1998) e Hoffmann e
Negreiros-Fransozo (2010), sempre que possível. Os indivíduos foram
armazenados em caixas d'água (0,45 m 0,20 m 0,30 m) mantidas por sistema
fechado de recirculação de água e condições estáveis de temperatura (21e27
C) e fotoperíodo (12:12). Cada tanque tinha algas artificiais, rochas e areia fina
como substrato (Fig. 1A) e os indivíduos foram alimentados com raízes de
macrófitas do local de amostragem.
Os indivíduos foram aclimatados por 24 horas antes do início dos
experimentos. Os animais foram mantidos dentro de tubos de PVC (38,1 mm
de diâmetro e 60 mm de comprimento) com malha de 125 mm em ambas as
extremidades. Um total de 20 tubos de PVC (10 com oito fêmeas cada e 10
com seis machos cada) foram mantidos dentro dos tanques e após 24 horas
os indivíduos foram transferidos para os tanques experimentais (Fig. 1C).
As observações comportamentais foram conduzidas de acordo com a
técnica de amostragem de sequência. O comportamento de acasalamento foi
registrado com base nos seguintes eventos (não necessariamente nesta ordem
específica): 1) interação, 2) posicionamento lateral e 3) cópula. Os espécimes
utilizados nos experimentos estão alojados na coleção científica do Grupo de
Estudos em Biologia, Ecologia e Cultura de Crustáceos - NEBECC, Instituto de
Biociências, Universidade do Estado de São Paulo,
~
Botucatu, Estado de São
Paulo, Brasil .
2.1.1. Experimento I: comportamento de
acasalamento Os experimentos tiveram como objetivo descrever o comportamento de acasalamento de
P. potimirim em condições experimentais.
As seguintes diferentes estratégias de acasalamento foram consideradas
possíveis: 1) o macho copula com várias fêmeas, 2) o macho guarda a fêmea
antes e depois da cópula, 3) a cópula ocorre por busca pura, ou 4) os machos
podem mudar para fêmeas funcionais.
Indivíduos que fizeram a muda durante a noite no período de aclimatação
(exúvias observadas na manhã seguinte no fundo dos tubos de PVC) foram
transferidos para um experimento, mas não foi possível estimar o momento
exato em que ocorreu a muda. Todos os indivíduos sofreram muda pelo menos
uma vez durante o período de estudo.
O experimento foi realizado em um aquário de vidro com aeração constante
e uma porção de areia como substrato (Fig. 1E) para descrever o repertório
comportamental da espécie. A análise do comportamento de acasalamento de
P. potimirim foi realizada com base em dez repetições experimentais de 4 h
cada, sem intervalos. Cada repetição incluiu indivíduos diferentes, quatro
machos adultos e seis fêmeas adultas receptivas (receptivas à cópula por 12 h
após a muda pré-matura). A gravação começou quando os camarões foram
soltos no fundo do aquário. As observações em cada repetição foram
registradas com uma câmera de vídeo (SJ400 Sjcam).
Em seguida, as fêmeas foram transferidas para tubos de PVC e mantidas
em observação por cinco a seis dias após o experimento de acasalamento
para observar a presença ou ausência de ovos fertilizados presos aos
pleópodes. Após esse período, as fêmeas foram fixadas em etanol 70%.
Os machos foram fixados imediatamente após o término dos experimentos,
mas as fêmeas foram fixadas em etanol 70% 6 dias após o experimento de
acasalamento. Durante este período, as fêmeas acasaladas permaneceram
em tubos de PVC e foram mantidas sob observação para detectar a presença
ou ausência de ovos fertilizados presos aos seus pleópodes.
2.1.2. Experimento II e hermafroditismo protândrico simultâneo?
A hipótese de PSH foi testada usando um tanque de vidro retangular (Fig.
1C) em um experimento de 10 dias. Seis fêmeas ovígeras (dos tanques de
aclimatação) foram isoladas dentro de tubos de PVC; imediatamente após a
desova e a muda, as fêmeas agora não ovígeras foram isoladas nos tanques
experimentais. Em seguida, seis fêmeas ovígeras pré-desovantes foram
inseridas no mesmo tanque experimental possível.
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M. Machado, FC Salti, G. Bertini et al. Estrutura e Desenvolvimento de Artrópodes 63 (2021) 101060

Fig. 1. Detalhes do desenho experimental utilizado no estudo. AB. Sistema fechado de recirculação de água. A e B ¼ tanques experimentais (0,45 m 0,20 mx 0,30 m); C ¼ reservatório de água (0,70 m 0,50 mx
0,40 m) utilizado para o sistema de filtragem; 1 ¼ aeração; 2 ¼ sistema de filtragem; 3 ¼ de lã acrílica; 4 ¼ bolas biológicas; 5 ¼ de cerâmica porosa; 6 ¼ de carvão ativado; 7 ¼ bomba de reforço. As setas
pretas indicam a direção do fluxo de água. CD. Detalhes dos tubos de PVC usados para separar machos e fêmeas. EF. Detalhe do protocolo usado para os experimentos de comportamento de acasalamento. G.
Detalhes do tamanho do tanque em experimentos de comportamento de acasalamento (esquerda) e tanques experimentais (direita).

parceiros de acasalamento. A premissa é que se a fêmea não ovígera os cortes foram obtidos com um micrótomo rotativo. As amostras
(que já havia desovado) desovasse após 7e10 dias, outro indivíduo (uma utilizadas para a análise histológica foram coradas com hematoxilina e
das fêmeas ovígeras) teria sido um parceiro de acasalamento, i. e, um eosina (Junqueira e Junqueira, 1983). As amostras histoquímicas foram
hermafrodita simultâneo. As fêmeas continuaram a ser alimentadas e coradas com xilidina ponceou para proteína (Mello e Vidal, 1980) e ácido
mantidas nas condições descritas acima. periódico Schiff (PAS) e azul Alcian 2,5% para polissacarídeos neutros e
ácidos, respectivamente (Junqueira e Junqueira, 1983).
As imagens das lâminas foram gravadas e digitalizadas em microscópio
2.2. Análise ultraestrutural e anátomo-histológica
de luz (Zeiss® Axio Image Z2). Para integrar as características
macroscópicas e histológicas dos estágios de desenvolvimento ovariano,
Após a amostragem, os indivíduos foram anestesiados por choque
os oócitos primários foram classificados de acordo com seus estágios de
térmico (20 C por 5 min) e as gônadas e ductos associados foram
vitelogênese (Charniaux-Cotton, 1980, 1985; Subramoniam, 2017).
dissecados e preservados. Todo o cefalotórax dos machos e indivíduos
A região ventral do cefalotórax de machos e fêmeas utilizada para a
não diferenciados (sem caracteres sexuais secundários externos
microscopia eletrônica de varredura (MEV) foi fixada em glutaraldeído
masculinos/femininos), mas apenas os ovários das fêmeas, foram fixados.
2,5% em tampão cacodilato de sódio 0,08 M (pH 7,2) por 24h (Paschoal
Os estágios de desenvolvimento ovariano de fêmeas adultas (Fig. 2AeC)
e Zara, 2018). As amostras foram lavadas no mesmo tampão, desidratadas
foram macroscopicamente classificados em: rudimentar (RUD), em
em série ascendente de etanol (70e100%), e secas no ponto crítico (EMS
desenvolvimento (DEV) e maduro (MAT).
850) em CO2 líquido. As amostras foram fixadas em stubs com fita
Amostras do sistema reprodutivo foram fixadas em paraformaldeído
adesiva dupla face, revestidas de carbono, e vaporizadas com ouro
4% em tampão fosfato 0,2 M (pH 7,4) por 24e48 h.
utilizando a metodologia de sputtering (Denton vacuo desk II). As
As amostras foram então lavadas em tampão fosfato de sódio 0,2 M,
amostras foram analisadas e fotografadas em SEM Zeiss® Evo 10 (10e20
desidratadas em série crescente de etanol (70 e 95%) e embebidas em
k Zeiss® Evo 10).
glicol-metacrilato historesina (Leica®). Os 5 milímetros
3
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3. Resultados Com base nos resultados agrupados da observação do casal,

3.1. Experimento e comportamento de acasalamento
Um total de 30 casais foi observado em 10 repetições; a gama CL
de indivíduos neste experimento foi de 2,2 e 2,83 mm (machos) e
3,07e4,49 mm (fêmeas). O tempo gasto até que os casais completassem
todo o comportamento de acasalamento foi de 25e360 s e a cópula durou
3e13 s (Tabela 1).
descreveu a sequência de interações realizadas durante o
comportamento de acasalamento. 1) Interação: após um breve contato, o macho
alcança a fêmea e sobe em seu corpo lateralmente, frontalmente ou
anteriormente, posicionando-se na região dorsal da fêmea, tocando
ela com antenas, antênulas e pereiópodes (Fig. 3A e B). 2)
Posicionamento lateral: deixando o lado dorsal da fêmea, o macho
aproxima-se do abdome da fêmea por trás (segundo pleural
segmento) com movimentos para trás e para frente, flexionando o abdômen

tabela 1
Comportamento reprodutivo de Potimirim potimirim (Müller, 1881), em condições laboratoriais, observado em dez repetições (30 casais diferentes).

Número de cada repetição Tamanho das fêmeas (mm) Tamanho dos machos (mm) Comportamento reprodutivo

Número de acasalamentos Tempo total (minutos) Acasalamentos (segundos) Fêmeas ovígeras

1 3.35e4.22 2.22e2.37 3 3; 7,28; 28a8 ; 7; 4; 6; 0

2 3.57e4.32 2.20e2.34 4 5,28; 2,39; 1,49 7,18; 5; 9; 11; 9 2
3 3,34e4,00 2,26e2,72 4 58a ; 3,18; 1,52 1,27; 4,56 11; 3; 9; 5 6; 2
4 3,07e3,71 2,12e2,77 2 5,08; 2,15; 4,32; 21a 16a ; 11 8; 9; 11; 3 1
5 3,07e3,8 2,18e2,83 4 3; 5,17; 3,09 1,39 4,32; 10; 12; 7; 9 4 3
6 3,12e4,31 2,39e2,65 4 2,17; 3,28; 1,57 3,37 5,28; 12; 9; 11; 8 6 4
7 3,4e4,36 2,2e2,72 1 2,14; 18a 0
8 3,75e4,49 2,22e2,62 4 4
9 3,48e4,12 2,04e2,34 1 0
10 3,17e3,73 2,26e2,58 3 10; 13; 6 2

Tempo em segundos.
uma

Fig. 2. Classificação macroscópica do desenvolvimento ovariano (OV) para fêmeas adultas. A. Ovário rudimentar (RUD) característico das gônadas em pré-telogênese e vitelogênese primária (ponta de seta)
ou fase endógena. Os ovários aparecem esbranquiçados após a fixação do tecido. B. Ovário em desenvolvimento (DEV) em vitelogênese secundária (ponta de seta) ou exógeno
Estágio. As gônadas aparecem em amarelo pálido (Pantone® 120e122 C/C) após a fixação do tecido. C. Ovário maduro (MAT) no final da vitelogênese secundária (ponta de seta). Os ovários são
laranja brilhante (Pantone® 123e124 C/C) após a fixação do tecido.

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para baixo próximo à pleura (Fig. 3C e D). 3) Cópula: o macho aproxima-se
lateralmente do abdômen da fêmea. A fêmea flexiona o abdômen para cima e
move repetidamente os pleópodes; o macho se move por baixo da fêmea e a
cópula ocorre. Durante a cópula, o macho usa o par de apêndices masculinos
que provavelmente o ajudam a permanecer mais próximo da fêmea. A cópula
também pode ocorrer durante os movimentos de natação dos indivíduos.
Durante esse movimento, a fêmea usa os pleópodes para nadar e o macho
permanece em sua região dorsal por um tempo, e então se move sob ela.
abdome e a cópula ocorre (a cópula pode ocorrer durante a natação ou com o
indivíduo parado - Fig. 3E e F). Depois, a fêmea pode libertar-se do macho
flexionando o abdómen e o télson ou simplesmente nadando na direcção
oposta ao macho.
O comportamento de acasalamento observado de P. potimirim apresenta
diferentes variações. Os machos costumam realizar uma espécie de guarda
pré-copulatória das fêmeas em que, uma vez que um macho monta em uma
fêmea, nenhum outro macho alcançaria essa fêmea. A guarda pós-copulatória não era

Fig. 3. Comportamento de acasalamento. AeB. interação do casal após um breve contato; os machos ficam na região dorsal da fêmea e a tocam com antênulas, antenas e pereiópodes. B. Desenho
esquemático baseado em imagens obtidas durante os atos comportamentais. CeD. Posicionamento lateral; região dorsal masculina ou feminina, aproximando-se do abdome feminino (segundo somito pleural
feminino) por meio de flexão do abdome com movimentos descendentes da pleura. D. Desenho esquemático do ato comportamental. E. Cópula (cópula de natação); macho está sob a fêmea e ocorre a cópula.
As fêmeas podem liberar-se flexionando o abdômen e o télson ou simplesmente nadando na direção oposta aos machos. F. Desenho esquemático baseado em imagens obtidas durante o ato comportamental.

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M. Machado, FC Salti, G. Bertini et al.
observado. Os machos recém-copulados permaneceram, parcialmente, parados e não
se aproximaram de nenhuma outra fêmea, enquanto as fêmeas permaneceram ativas.
As fêmeas copulavam com mais de um macho.
Machos que não seguiram a sequência comportamental descrita (interação,
posicionamento lateral e cópula) tiveram tentativas de cópula sem sucesso durante os
eventos de acasalamento. Durante as tentativas de cópula direta, sem interação ou
posicionamento lateral, os machos rejeitaram os machos movendo ativamente os
pleópodes em direção à câmara esternal abdominal. Este comportamento possivelmente
está relacionado ao fato de os pleópodes femininos estarem bloqueando ou obstruindo
a área onde o espermatóforo deveria ser depositado.
Após 150 min de observação em todas as repetições do experimento I, os
indivíduos se agregaram nas paredes laterais dos tanques, sobrepondo-se uns aos
outros. Este comportamento de agregação é típico de espécies com populações
altamente densas. De todas as cópulas observadas, 50% resultaram em transferência
bem-sucedida de material genético e fertilização e as fêmeas tiveram embriões com
manchas visíveis através da membrana do ovo.
3.2. Experimento II - hermafroditismo protândrico simultâneo?
Durante o experimento de 7 e 10 dias, nenhuma das fêmeas não ovígeras desovou
(fêmeas que foram lançadas pela primeira vez nos tanques).
Apenas as fêmeas previamente ovígeras inseridas no experimento eclodiram larvas
em sequência, durante o segundo dia.
Exúvias foram encontradas diariamente nos tanques durante todo o período do
experimento, mostrando que as fêmeas estavam frequentemente em muda.
Comportamento agonístico, hierarquia ou dominância não foi observado entre as
fêmeas, apenas um comportamento de forrageamento já esperado.
A agregação foi o ato comportamental mais comum observado entre as fêmeas.
3.3. Anatomia funcional do sistema reprodutor
Fêmeas de P. potimirim possuem ovários pareados conectados anteriormente
próximo ao hepatopâncreas. Cada ovário tem dois lobos grossos, um lobo cefalotorácico
anterior e um lobo abdominal posterior. Ambos os lobos estão conectados por uma
estreita região mediana na margem posterior do cefalotórax, que é claramente visível
em fêmeas maduras. O par de ovidutos estende-se dos lobos cefalotorácicos e abre-
se nos coxopoditos do terceiro par de pereiópodes (Figs. 2 e 4A). A gônada possui
uma zona de oogônias (zona germinativa) e oócitos (zona de crescimento), todos
circundados por uma fina camada de tecido conjuntivo (Fig. 4A e B).
Diferenças histológicas foram encontradas de acordo com o estágio de
desenvolvimento ovariano. Os ovários RUD têm uma zona germinativa com oogônias,
ovócitos pré-telogênicos e ovócitos primários colocados como um eixo na porção dorso-
medial de cada ovário (Fig. 4BeE). Os oócitos pré vitelogênicos são caracterizados por
diferentes estágios de condensação cromossômica da prófase meiótica, com um
citoplasma reduzido fortemente basofílico nos estágios iniciais da prófase até o
paquíteno e muito poucas ou nenhuma célula folicular (Fig. 4C). Durante o diplóteno
os oócitos pré-telogênicos apresentam núcleo grande e nucléolo visível e o citoplasma
é principalmente basofílico e homogêneo (Fig. 4B e C). Além dos oócitos primários pré-
telogênicos, e algumas vezes entre eles, há oócitos primários em vitelogênese primária,
ou fase endógena, com grânulos de vitelo imaturos e poucas gotículas lipídicas no
citoplasma. Os grânulos de gema imatura formam vesículas pequenas e acidófilas
cercadas por citoplasma basofílico (Fig. 4D). Esses grânulos de gema são positivos
para polissacarídeos e proteínas neutros, formando uma glicoproteína (Fig. 4E e F). O
volume nuclear é ligeiramente constante entre oócitos pré-telogênicos e primários e o
núcleo tem dois nucléolos visíveis (Fig. 4D).
Os oócitos primários são circundados por células foliculares estreitas com
6
Estrutura e Desenvolvimento de Artrópodes 63 (2021) 101060
núcleos grandes e planos; as células foliculares circundam progressivamente os
oócitos formando os folículos ovarianos (Fig. 4D).
O início da vitelogênese secundária (fase exógena) ocorre nos ovários DEV.
Durante esta fase os oócitos primários são acidófilos e amarelos devido aos grandes
grânulos de gema maduros que são isolados do citoplasma e são reativos a
polissacarídeos e proteínas neutros (Fig. 4GeI). Os grânulos de gema durante a
vitelogênese secundária são facilmente detectados e maiores do que na vitelogênese
primária (Fig. 4G e H) e as gotículas lipídicas (vesículas transduzidas) também são
maiores (Fig. 4H). Durante a vitelogênese secundária dos ovários de DEV, o tamanho
dos oócitos aumenta acentuadamente à medida que o número de grânulos de gema
maduros também aumenta (Fig. 5AeC).
Os grânulos de gema maduros estão concentrados ao redor do núcleo (Fig. 5B). Os
oócitos primários são cercados por células foliculares e os grânulos de vitelo maduro
parecem estar fundidos entre si sob o microscópio de luz. Os grânulos de gema
maduros são fortemente reativos a proteínas e positivos a polissacarídeos neutros,
constituindo coproteínas gli (Fig. 5B e C).
Os oócitos primários MAT caracterizam-se pelo fim da vitelogênese secundária,
marcado pelo aparecimento de um córion glicoproteináceo estreito e células foliculares
com núcleos achatados. Os grânulos de gema maduros acidofílicos e glicoproteináceos
grandes formam massas fundidas (Fig. 5DeF). Os grânulos de glicoproteína e as
grandes gotículas lipídicas estão espalhadas por todo o citoplasma entre os grânulos
de gema maduros (Fig. 5DeF). As fêmeas ovígeras, que ovularam recentemente,
apresentaram espaços no lúmen ovariano, formando folículos ovais e numerosos
folículos atrésicos. Nenhum polissacarídeo ácido foi detectado em oócitos primários
durante o desenvolvimento ovariano (Fig. 5G). O ovário de fêmeas ovígeras possui
muitas células (hematócitos ou células foliculares) que reabsorvem os grânulos de
vitelo dos oócitos não desovados. Oócitos primários em vitelogênese primária e alguns
oócitos em vitelogênese secundária são visíveis e estão reiniciando o ciclo de
desenvolvimento ovariano (Fig. 5H e I).
Os gonóporos femininos são ligeiramente alongados (Fig. 6A e B) e orientados
para a região posterior do corpo. Cada gonóporo é ornamentado com uma coroa
orientadora de ovos de cerdas longas com base lisa e ápice plumoso (Fig. 6C e D),
formando um cone alongado posteromedialmente, que se orienta para a região central
do esterno e também para os pleópodes abdominais (Fig. . 6A e B). O esterno
cefalotorácico é modificado para formar a câmara esternal cercada por cerdas do tipo
serrilhada e paposa (Fig. 6A, C e D).
As cerdas serruladas e paposas localizam-se na margem distal da coxa, alargando a
área da câmara (Fig. 6). A margem posterior da câmara esternal cria uma prega ventral
saliente com apenas uma fileira de cerdas com base lisa e ápice ramificado e cerdas
do tipo serrilhada e paposa (Fig. 6A e E).
O sistema reprodutor masculino é composto por um par de testículos em forma
de H colocados sobre o hepatopâncreas e o coração. Os testículos gêmeos estão
quase completamente fundidos entre si e formam uma longa massa através do eixo
cefalotorácico ântero-posterior. O grande par de vasos deferentes estende-se da região
testicular anterior.
Cada vaso deferente (VD) é dividido em três regiões: proximal (PVD), medial (MVD) e
distal (DVD). O PVD é curto e convoluto e se estende como um tubo reto que desce
ventralmente para formar o MVD. O DVD é a parte mais ventral e dilatada do VD,
estendendo-se até a ampola ou ducto ejaculatório (Fig. 7A).
De acordo com sua histologia, o testículo é classificado como tipo lobular e cada
lóbulo possui células com quase o mesmo estágio de maturação, como espermatogônias
e espermatócitos primários e segundos (Fig. 7BeD). As espermatogônias estão na
periferia do lóbulo testicular e são circundadas por células acessórias. As células
acessórias ovais/arredondadas têm núcleos centrais com um ou dois nucléolos
conspícuos e blocos de heterocromatina. Os espermatócitos primários arredondados
são caracterizados por diferentes estágios de prófase meiótica
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Fig. 4. Sistema reprodutor feminino nas fases rudimentar (RUD) e em desenvolvimento (DEV). A. Ovário (OV) com lobos anterior (AL) (cefalotorácico) e posterior (PL) (abdominal) e região mediana (MR). B.
Ovário RUD (OV) com oogônias (OO), oócitos previtelogênicos (PVO) em diferentes estágios da prófase meiótica ao lado de uma zona de crescimento com oócitos em vitelogênese primária (OPV) (fase
endógena) e oócitos previtelogênicos (PVO) na fase paquítena (flecha Negra). C. Estágio de condensação cromossômica com detalhes da fase de paquíteno (ponta de seta preta) e cromossomos na fase de
diplóteno (ponta de seta branca). D. Durante a vitelogênese primária (OPV), os grânulos de gema imatura (IY) formam vesículas acidófilas (ponta de seta preta) cercadas pelo citoplasma basofílico com poucas
gotículas lipídicas (ponta de seta branca). EeF. Caracterização histoquímica de grânulos de gema imatura (IY) positivos para polissacarídeos neutros (PAS) e proteínas (Xilidina ponceau) (ponta de seta preta).
GeH. Ovário ED (OV) com ovócitos em vitelogênese secundária (OSV) apresentando grânulos de gema madura (seta preta) maiores que gema imatura (IY) (ponta de seta preta). Os oócitos contêm vesículas
mais lúcidas (ponta de seta branca) em comparação com o estágio anterior. IeJ. Sua caracterização toquímica de oócitos primários com grânulos de gema madura (IY) (seta preta) e gotículas lipídicas (ponta
de seta branca) e um grânulo de gema imatura (IY) isolados no citoplasma (ponta de seta preta) reativo a polissacarídeos acidófilos neutros (PAS) e proteínas (Xilidina Pounceau). Célula folicular (FC), núcleo
(N) e nucléolo (NU).

(Fig. 7C). O mesmo lóbulo pode apresentar concomitantemente espermatócitos
primários e células metáfase II produzindo espermatócitos secundários que são
caracterizados por núcleos com cromatina basofílica homogênea.
Embora os espermatócitos secundários e as espermátides iniciais apresentem
características semelhantes, estas últimas são menores, aproximando-se do tamanho
de espermatozóides (Fig. 7D). Os espermatozóides maduros livres são imersos em
uma secreção basofílica tipo I no lúmen dos túbulos seminíferos (Fig. 7B e D). Os
espermatozoides possuem uma espiga e várias projeções radiais que compõem a
estrutura da vesícula acrossomal; o núcleo está localizado no corpo principal do
espermatozóide (Fig. 7D e E).

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Fig. 5. Sistema reprodutor feminino nos estágios de desenvolvimento (DEV) e maduro (MAT). A. O número de grânulos de gema de glicoproteína madura aumenta à medida que o volume celular aumenta acentuadamente
aumenta. BeC. Características histoquímicas de oócitos ED com grânulos de gema maduros (Y) no perinúcleo (ponta de seta preta). Os grânulos de gema madura (Y) são reativos a polissacarídeos neutros (PAS) e
fortemente positivos a proteínas (Xilidina ponceau). DE. Oócitos MAT no final da vitelogênese secundária (OSV) marcado pela presença de uma glicoproteína fina
córion (seta preta) e células foliculares finas (FC) (ponta de seta) com núcleos achatados. EeF. Características histoquímicas de oócitos MAD com grânulos de gema maduros (Y) reativos a neutro
polissacarídeos (PAS) e fortemente positivo para proteínas (Xilidina ponceau). G. Folículos ovarianos negativos para polissacarídeos ácidos (Alcian Blue). Ele eu. Fêmeas ovígeras imediatamente
após a ovulação com espaços no lúmen do ovário formando folículos ovulados (FO). Na mesma imagem observam-se vários folículos atrésicos (TA). Muitas células (ponta de seta preta) reabsorvem
os grânulos de gema não ovulados (seta preta). Oócitos na vitelogênese primária (OPV) e vitelogênese secundária (OSV) do ciclo de desenvolvimento ovariano. Tecido conjuntivo (TC),
lipídio (LI), núcleo (N) e nucléolo (NU).

O PVD é dividido em um anterior (PVDa) e um posterior
(PVDp). As porções são diferenciadas por um conglomerado celular que está
localizado em uma das faces VD no PVDa (Fig. 7E e
F) e é conspícuo e forma um tiflossolo no PVDp (Fig. 7G).
O PVD tem um epitélio escamoso cúbico a simples com
núcleos e cobertos por uma fina camada de tecido muscular. As células em
os PVDa, que posteriormente formarão o tiflossolo, são maiores em um dos
as faces VD (Fig. 7E). Os espermatozoides estão inseridos em um
secreção basofílica tipo I composta por proteínas e quase
ocupando completamente o lúmen do PVD (Fig. EeH). O espermatozóide de
P. potimirim possui corpo principal subovóide com
núcleo grande fortemente basofílico e o cálice acrossomal com o
vesícula acrossomal com projeções laterais 5e6 e uma espiga. o
espermatozóides são agregados em grupos de células 2e3, principalmente no
PVDp (Fig. 7HeJ). O tiphlosole no PVDp dobra-se em direção ao
região central do VD, produzindo uma secreção tipo II (Fig. 7G).
As secreções do tipo I são reativas a polissacarídeos e proteínas neutros e
as secreções do tipo II são fortemente reativas a ambos os compostos (Fig.
7I e J). Portanto, o PVDp possui glicoproteína e
secreções de polissacarídeos ácidos do tipo I e II (Fig. 7K).
Tanto o MVD quanto o DVD são mais largos que o PVD e têm um tamanho cúbico a
epitélio escamoso simples com núcleos com muitos blocos heterocromáticos.
O tiphlosole ainda é visível até a ligeira expansão do DVD (Fig. 8A). Há uma
maior concentração de

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Fig. 6. Microscopia eletrônica de varredura do esternito feminino e gonóporos (G). A. Vista ventral do esternito feminino com detalhes dos cinco pares de pereiópodes (IeV) e a ampla depressão que forma a
câmara esternal (asterisco) completamente circundada por cerdas dos tipos serrulado e pappose (ponta de seta branca). O par de gonóporos (G) conspícuo e alongado em cada coxa do terceiro par de
pereiópodos ornamentado com uma coroa ovo-guia de cerdas longas do tipo pappose (seta preta) orientadas para a região central do esterno em direção aos pleópodos abdominais (seta branca) . A margem
distal da coxa apresenta cerdas tipo serrilhadas (ponta de seta preta) que alargam a área da câmara esternal. A margem posterior da câmara esternal cria uma prega ventral protuberante com apenas uma
fileira dos tipos cerdas serrilhadas e paposas (seta branca). B. Detalhe do gonóporo e coroa-guia do ovo do tipo cerdas serrilhadas (S). Observe a margem distal da coxa ornamentada com cerdas retas
(serrilhadas) CD. Detalhe das cerdas tipo serrilhadas, cerdas longas com base lisa (seta branca) e cerdas tipo paposas plumosas (ponta de seta branca) nos gonóporos. E. Seta na margem do esternito com
base lisa e estreita e ápice ramificado, tipo cerdas paposas (ponta de seta branca). A margem posterior da câmara esternal cria uma prega ventral saliente (ponta de seta branca).

massa espermática e espermatozóides no MVD e DVD. Os
espermatozóides são incorporados na secreção do tipo I, formando
uma massa de espermatozóides. Esta massa de espermatozóides é
circundada por uma fina secreção acelular tipo II formando uma camada
secundária (Fig. 8A e B). Uma secreção mais espessa do tipo III forma
a terceira camada do espermatóforo primordial e é produzida pelo
tiflossolo. Portanto, a secreção do tipo III parece ser derivada da
secreção do tipo II que foi modificada por compostos produzidos pelas células
Essa suposição é baseada na similaridade histoquímica das secreções
dos tipos II e III; a secreção do tipo III parece ser uma variação menos
concentrada do tipo II (Fig. 8C e D). O mesmo
as características histoquímicas observadas no PDV estão presentes
nas secreções dos tipos I e II. A secreção do tipo II é fortemente reativa
a polissacarídeos neutros (PAS) e proteínas (Xilidina ponceau),
enquanto a secreção do tipo I é menos reativa a proteínas. As
secreções dos tipos II e III são igualmente fortemente reativas às
proteínas. A secreção do tipo III é menos reativa a polissacarídeos
neutros quando comparada com a secreção do tipo II que é responsável
pela
adesãodo
epiteliais doVD.
espermatóforo à superfície esternal feminina (Fig. 8C
e D). As células do tiflossolo não têm mais uma estrutura diferenciada
no DVD e são compostas por um epitélio simples. O fluido seminal tem
as mesmas características histoquímicas encontradas no MVD, indicando que as s
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Fig. 7. Sistema reprodutor masculino. A. Morfologia macroscópica e o par de testículos em forma de H (T) está quase completamente fundido entre si, formando uma massa alongada no eixo anteroposterior
do cefalotórax. O ducto deferente é dividido em uma região proximal (PVD) contínua à região medial tubular reta (MVD), e a região mais ventral e dilatada, o ducto deferente distal (DVD) que se estende até a
ampola (AT) ou ducto ejaculatório. BeC. Aspecto geral do testículo tipo lobular (T) (coloração com hematoxilina e eosina). Cada lóbulo possui células aproximadamente no mesmo estágio de maturação
(espermatogônia (SPG) e espermatócitos primários (SPC1) e secundários (SPC2)). As espermatogônias (SPG) na periferia dos testículos (ST) estão associadas às células acessórias. Espermatócitos primários
arredondados (SPC1) caracterizados por diferentes estágios de prófase meiótica (seta preta). DE. No mesmo lóbulo testicular, existem espermatócitos primários e células metáfase II produtoras de
espermatócitos secundários (SPC2) (com núcleo com cromatina basofílica homogênea), que se diferenciam em espermátides iniciais. Essas espermátides têm núcleos significativamente menores (N),
semelhantes aos espermatozóides (SPZs) (seta preta). Espermatozoides maduros livres (SPZ) imersos em secreção tipo I (S1) no lúmen do túbulo seminífero. EeF. Na porção anterior do PVDa uma célula se
aglomera em uma das faces do vaso deferente. Secreção do tipo I reativa a proteínas (Xilidina ponceau). G. Tiflossolo (TP) conspícuo na porção posterior do PVDp que se dobra em direção à região central
do ducto e produz principalmente secreção do tipo II (S2). H. Espermatozóides (SPZ) incorporados na secreção do tipo I (S1). O espermatozóide (SPZ) possui corpo principal obovóide com núcleo volumoso e
vesícula acrossomal com projeções laterais 5e6. IeJ. A secreção do tipo I (S1) é reativa a polissacarídeos e proteínas neutros; A secreção do tipo II (S2) é fortemente reativa tanto para PAS quanto para
Xilidina ponceau. K. Secreção negativa para polissacarídeos ácidos usando Alcian Blue. Epitélio (EP), lúmen (L), tecido muscular (M) e núcleo (N).

do MVD e do DVD irão compor o espermatóforo primordial quando
exteriorizado.
A abertura elíptica alargada do gonóporo masculino nas coxas do
quinto par de pereiópodes carece de opérculo (Fig. 9A e B) e tem
poucas cerdas e sensilas lisas na margem medial (Fig. 9B e C). A face
posterior (caudal) do gonóporo é conspícua e direciona a exteriorização
da secreção do espermatóforo da região ventral para a abdominal (Fig.
9AeC).
Os espermatozóides foram encontrados na margem do lúmen do
gonóporo e podem indicar que podem ter sido ejaculados durante a
anestesia e fixação dos indivíduos. A maioria dos espermatóforos foi
perdida durante a preparação da amostra (Fig. 9CeE). A análise SEM
corroborou a descrição morfológica dos espermatozóides.
Através da visão do pólo acrossômico, pode-se observar que a coluna
é mais fina que as projeções laterais (Fig. 9D). Através de uma vista de
pólo nuclear, o núcleo é arredondado e cercado por uma onda ondulada

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Fig. 8. Sistema reprodutor masculino. AeB. Região medial do vaso deferente (MVD) com epitélio simples cúbico (EP) com células alongadas. Massa espermática e espermatozóides (SPZ) incorporados nas
secreções tipo I (S1) e tipo II (S2) e a terceira camada adicional de secreção tipo III (S3). CeD. Características histoquímicas da secreção tipo I (S1) reativa a polissacarídeos e proteínas neutros. A secreção
do tipo II (S2) é fortemente reativa a polissacarídeos neutros e positiva a proteínas (Xilidina ponceau). A secreção do tipo III (S3) também é positiva para polissacarídeos neutros e fortemente reativa para
polissacarídeos neutros (PAS e Xilidina ponceau). EeF. A região distal do ducto deferente (DVD) com secreções do Tipo I (S1), II (S2) e III (S3) tem as mesmas características histoquímicas observadas no
MVD, indicando que o espermatóforo primordial é formado pelo espermatozoide seminal. secreção do MVD e DVD quando exteriorizados. Lúmen (L), tecido muscular (M), tiflossolo (TP).

membrana plasmática. As projeções laterais no núcleo formam 5e6
estruturas longas e cônicas (Fig. 9E).
Indivíduos indiferenciados (sem caracteres secundários externos
masculinos ou femininos) apresentam ovários primordiais imaturos na
região dorsal, acima do hepatopâncreas (Fig. 10A). As oogônias
formam aglomerados de pequenas células com núcleos com material
genético em diferentes estágios de compactação. A análise de
diferentes indivíduos mostrou uma grande variação no número de
oócitos primários pré-telogênicos com citoplasma basofílico homogêneo.
Outros estágios da prófase meiótica foram identificados com base no cromossomo
condensação (Fig. 10B e C). Um em cada sete indivíduos tinha um
sistema reprodutor masculino rudimentar representado por testículos
primordiais na região dorsal acima do hepatopâncreas. As futuras
células testiculares são muito semelhantes às células germinativas
femininas. Essas células são menores do que as descritas anteriormente
e possuem núcleos em atividade mitótica (espermatogônias) com
material genético em diferentes estágios de condensação e circundados
por células acessórias em proliferação (Fig. 10D e E). A descrição do
VD em indivíduos imaturos não foi possível, pois muitos túbulos
apresentavam um lúmen vazio que pode ou não ser o VD imaturo.

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Fig. 9. Microscopia eletrônica de varredura do esternito masculino e abertura do gonóporo (OP). A. Vista ventral do esternito masculino, com detalhes dos cinco pares de pereiópodes (IeV), sem a câmara
esternal (asterisco). Abertura gonópora ampla (OP) (seta branca) sem opérculo (asterisco) nas coxas do quinto par de pereiópodes. B. Visão geral das coxas do quinto par de pereiópodes; seta indica a
abertura do gonóporo livre de opérculo (OP). CeD. Gonóporo (G) com ampla abertura elíptica sem opérculo e com muitas sensilas lisas (ponta de seta branca) na margem medial. A margem da abertura
posterior (seta branca) é espessa e conspícua quando comparada com a abertura anterior (pontas de seta pretas). E. Espermatozóides (SPZ) na periferia da margem interna dos gonóporos masculinos (G). O
espermatozóide em vista de pólo acrossomal mostra a ponta fina (seta) e projeções laterais da vesícula acrossomal (pontas de seta). O outro espermatozóide está em vista de pólo nuclear mostrando o núcleo
arredondado (N) abaixo da membrana plasmática com uma superfície irregular. Projeções laterais da vesícula acrossomal (pontas de seta) formando 5e6 estruturas longas e cônicas.

4. Discussão às mulheres mais tarde na vida (Bauer, 2000). O presente estudo

demonstrou que o sistema sexual em P. potimirim é uma característica fixa,
4.1. Hermafroditismo protândrico uma vez que nossos experimentos comportamentais e análises anatômicas
e microscópicas evidenciaram que a espécie é gonocórica. No experimento
O segundo sistema sexual mais comum entre os carideanos é a realizado para determinar se existem diferentes estratégias de acasalamento
protandria. Em pelo menos 31 espécies de camarões, incluindo P. mexicana, e se os machos amadurecem como fêmeas, todos os machos de P.
os indivíduos de uma população se reproduzem primeiro como machos e mudampotimirim morreram alguns dias após a cópula. Esses indivíduos morreram sem

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Fig. 10. Sistema reprodutivo de indivíduos indiferenciados (coloração de hematoxilina e eosina). A. Ovário primordial imaturo (POV) na região dorsal acima do hepatopâncreas.
BeC. Oogônias (OO) formando aglomerados de pequenas células com núcleos com cromatina em diferentes níveis de compactação (seta branca). Oócitos primários pré-vitelogênicos (PVOs) (ponta de seta
preta) com diferentes estágios de prófase meiótica diferenciados pelo grau de condensação cromossômica (seta preta). DeE. Indivíduos com sistema reprodutor masculino rudimentar com ênfase no testículo
primordial (PT). Os futuros gametas masculinos mostram o núcleo com atividade meiótica (espermatogônia-SPG) e material genético em diferentes estágios de condensação (ponta de seta branca) cercado
por células acessórias em mitose. Sistema digestivo (DS), epitélio (EP), células foliculares (FC), tecido muscular (M) e núcleo (N).

indicação de crescimento ou maturação do sistema reprodutivo, ou
seja, ausência de mudança de sexo. Assim, P. potimirim é uma espécie
gonocórica como a maioria dos camarões carídeos, com indivíduos
produzindo apenas gametas masculinos ou femininos durante toda a
vida (Baeza, 2009). Exemplos bem estudados do mesmo padrão
incluem Rhynchocinetes typus Milne Edwards, 1837, Hippolyte
obliquimanus Dana, 1852, Pontonia margarita Smith in Verrill (1869) e
Hippolyte williamsi Smitth 1924 (Terossi et al., 2008; Baeza, 2008a;
Espinoza- Fuenzalida et al., 2008).
Nossos experimentos também demonstram que não há cópula entre
possíveis fêmeas ovígeras e fêmeas não ovígeras, anulando a
possibilidade de hermafroditismo protândrico simultâneo. Além disso,
não houve evidência de fertilização entre
fêmeas ovígeras e fêmeas não ovígeras, conforme relatado por Bauer
e Holt (1998), Baeza (2008b), Baeza e Anker (2008) e Baeza et al.
(2008). Análises histológicas do sistema reprodutor de fêmeas ovígeras
e não ovígeras também confirmaram a ausência de ovotestículos ou
qualquer evidência de testículos primordiais de uma fase masculina
anterior. Apenas uma grande estrutura ovariana, repleta de ovócitos em
diferentes estágios de desenvolvimento, foi encontrada. Além disso,
apenas testículos funcionais foram observados em machos maduros,
enquanto em indivíduos não diferenciados foram encontrados apenas
testículos primordiais ou ovários primordiais, sem qualquer sinal de
ocorrência simultânea de ambas as gônadas. Observações SEM da
morfologia externa também confirmam o gonocorismo da espécie. O
único gonóporo feminino e masculino nas coxas do terceiro e quinto par de pereóp

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respectivamente, foram observadas em indivíduos maduros, rejeitando com
segurança a premissa de que esta espécie é uma PSH. Baeza (2009) relatou
que machos de Lysmata galapagensis Schmitt, 1924 e L. boggessi Rhyne e
Lin, 2006 tornaram-se PSH em quatro meses. Os machos começam a
apresentar sinais de maturação ovariana durante os períodos de intermuda,
quando a gônada estava cheia de grandes ovócitos verdes (vitelogênicos),
mudando para um PSH e acasalando como fêmeas logo após a muda. Este
não é o caso de P. potimirim, todos os machos morreram dias após a cópula
durante nossos experimentos.
4.2. Comportamento de acasalamento
O acasalamento de P. potimirim inicia-se com um comportamento de
interação, em que o macho toca sutilmente todo o corpo da fêmea com a
antena e antênula. O uso de flagelos antenais quimiotáteis longos durante o
acasalamento foi descrito em outras espécies de camarões (Duffy e Thiel,
2007). Johnson Jr. (1969) e Zhang et al. (1998) relataram o entrelaçamento
de antenas e antênulas (como uma exibição masculina) e o abraço quelípede
como atos pré-copulatórios. Embora os machos de P. potimirim não tenham
quelípedes tão robustos quanto alguns outros carídeos, o toque de antena e
antênula foi suficiente para iniciar o comportamento de acasalamento.
Enquanto os machos mostraram uma breve guarda pré-copulatória durante o
comportamento de acasalamento e ficaram inativos após uma cópula, as
fêmeas copularam com mais de um macho. Segundo Bauer (1996), os
machos podem copular com mais de uma fêmea e esse comportamento
inativo não foi registrado em nenhuma outra espécie de camarão pequeno.
A alta taxa de encontros aleatórios entre espécies de camarões ativos e
agregados na natureza foi responsável pela evolução da estratégia de busca
pura do macho para o comportamento de acasalamento (Bauer e Abdalla,
2001), comum a muitas espécies de carídeos (Correa e Thiel, 2003; Bauer,
2004 ). ). A falta de comportamento de cortejo, guarda pós-copulatória da
fêmea e a alta taxa de agregação são indicativos de que uma estratégia de
busca pura ocorre em P. potimirim e parece ser mais eficiente do que o
comportamento de guarda do parceiro.
A cópula de P. potimirim ocorre na posição abdome vs abdome, em que
o macho fica perfeitamente alinhado perpendicularmente ao abdome da
fêmea para realizar a transferência espermatofórica. Este posicionamento é
semelhante ao que foi descrito como o comportamento de cópula em outras
espécies de carídeos e estenopodídeos (Hoglund, 1943; Bauer, 1976, 1996,
2002a, 2002b; Chow et al., 1982; Berg e Sandifer, 1984; Boddeke et al . .,
1991; Bauer e Abdalla, 2001; Martínez e Dupre, 2010 ; Gregati et al., 2014).
4.3. Anatomia funcional do sistema reprodutor
Nossa análise microscópica indicou o gonocorismo de P. potimirim com
base na presença de ovários e testículos rudimentares em indivíduos imaturos
sem caracteres sexuais externos secundários. Não houve evidência de
ovotestis (gônada com testículo e ovário ocorrendo simultaneamente)
independentemente do tamanho corporal dos indivíduos, portanto, nenhum
dos tipos de protandria descritos por Bauer (2000; 2001) e Baeza (2018) pôde
ser confirmado nas espécies que estudamos. estudado aqui. Esses achados
trazem uma análise morfológica e histológica mais refinada para a questão do
possível hermafroditismo, principalmente com indivíduos indiferenciados, e
concorda com Grilli et al. (2014), que estudaram P. potimirim e P. brasiliana.
A morfologia geral do sistema reprodutor feminino segue o padrão de
outros grupos carideanos, mas foram detectadas diferenças quanto ao
tamanho e extensão das gônadas desenvolvidas. O ovário de P. potimirim
estende-se dorsalmente até o terceiro somito abdominal e os lobos são
separados por um fino tecido conjuntivo na região média do lobo anterior. O
ovário estende-se dorsalmente até o primeiro somito abdominal em Hippolyte
inermis Leach, 1815, estudado por Cobos et al. (2005) e é restrito ao
cefalotórax
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Estrutura e Desenvolvimento de Artrópodes 63 (2021) 101060
em espécies do gênero Macrobrachium, analisadas por Valenti (1985) e
Bauer (2004) e de camarões de profundidade, como Alvinocaris muricola
Willians, 1988, por Ramirez-Llodra e Segonzac (2006).
Os ovários em estágio de desenvolvimento RUD apresentam alta
concentração de ovogônias com núcleos grandes e ovócitos primários pré-
telogênicos e ovócitos primários completamente circundados por células
foliculares. As células em desenvolvimento nesta fase são semelhantes às de
outros Decapoda na mesma fase de desenvolvimento ovariano, como
espécies de Penaeidae Rafinesque (1815) (Campos et al., 2009) e Palae
monidae Rafinesque, 1815 (Soonklang et al ., 2009). 2012; Paschoal e Zara,
2017). O mesmo padrão de desenvolvimento foi registrado nas superfamílias
braquiuranas Majoidea Samouelle, 1819 (Lanteigne et al., 1996; Rotllant et
al., 2007), Portunoidea Rafin esque, 1815 (Zara et al., 2013; Garcia Bento et
al. , 1815). 2020) e Ocy podoidea Rafinesque, 1815 (Castiglioni et al., 2007).
Oogônias e oócitos pré-telogênicos na prófase meiótica inicial têm um
citoplasma basofílico homogêneo. Uma vez iniciada a vitelogênese endógena,
vesículas citoplasmáticas caracterizam a gema imatura que é reativa a
polissacarídeos neutros. Em oócitos primários de P. potimirim a gema imatura
também é reativa a proteínas, o que caracteriza o início da gênese primária
do vitelo (Charniaux-Cotton, 1980, 1985; Subramoniam, 2017; Garcia Bento
et al., 2020). As vesículas acidófilas (eosinofílicas) de P. potimirim são mais
bem caracterizadas como vesículas de glicoproteínas, pois não são reativas
a polissacarídeos ácidos. Esse achado amplia a descrição anterior de que a
vitelogênese endógena de Decapoda é caracterizada apenas por grânulos
positivos para PAS (Charniaux-Cotton, 1980, 1985; Subramoniam, 2017). A
gema dos oócitos na vitelogênese primária é produzida no retículo
endoplasmático rugoso com provável participação do complexo de Golgi.
Portanto, a produção desses grânulos de gema imatura é resultado da
expressão de genes exclusivos de oócitos na vitelogênese endógena
(Mollemberg et al., 2017; Garcia-Bento et al., 2020).
O papel do complexo de Golgi na produção de grânulos de gema durante a
vitelogênese primária de crustáceos foi amplamente registrado (Hinsch e
Cone, 1969; Eurenius, 1973; Dhainaut e De Leersnyder, 1976; Beams e
Kessel, 1980; Arnaud et al. , 1982; Rotllant et al., 2007; Subramoniam, 2017;
Mollemberg et al., 2017; Garcia-Bento et al., 2020). Outras organelas celulares
podem participar da produção endógena de gema durante a vitelogênese
primária.
Em Maja brachydactyla Balss, 1922 as mitocôndrias têm um papel essencial
não apenas como centro energético, mas também na formação de grânulos
de gema imaturos (Rotllant et al., 2007).
A vitelogênese secundária em P. potimirim é a fase em que os oócitos
primários e, portanto, os ovários, apresentam coloração intensa. Os ovários
RUD têm uma coloração esbranquiçada e a cor começa a se intensificar no
início do estágio DEV. A alta concentração de gema madura no citoplasma
dos oócitos durante a vitelogênese secundária é resultado da conversão da
vitelogenina em vitelina ou grânulos de gema da hemolinfa por vesículas
revestidas que formam as vesículas pinocíticas. Durante o estágio DEV, essas
vesículas pinocíticas se fundem com grânulos de gema imaturos ou com
grânulos maduros acumulados de processos anteriores (estágios DEVeMAT),
aumentando o tamanho dos grânulos de gema (Subramonian, 2017;
Mollemberg et al., 2017; Garcia-Bento et al., 2020). Os grânulos de gema
maduros aparentemente altamente fundidos de P. potimirim são uma
característica esperada, uma vez que esses grânulos grandes serviriam como
reserva energética para o desenvolvimento larval, ocupando quase todo o
citoplasma.
Além desse grande acúmulo de vitelo no final do processo vitelogênico, os
oócitos maduros apresentam diversas gotículas lipídicas, que são reservatórios
de energia. As gotículas lipídicas são mais abundantes que os grânulos de
glicogênio e estão presentes durante todo o desenvolvimento ovariano, mas
principalmente nos estágios finais de desenvolvimento, quando aumentam
em quantidade e tamanho, como em Macrobrachium rosembergi de Man,
1879 (Soonklang et al., 2012). e Macrobrachuim
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M. Machado, FC Salti, G. Bertini et al.
amazonicum (Paschoal et al., 2019; Paschoal e Zara, 2020). Em
contraste, apenas pequenas gotículas lipídicas são vistas em caranguejos
Mithracidae e Portunidae durante o desenvolvimento ovariano (Rotllant
et al., 2007; Mollemberg et al., 2017; Garcia-Bento et al., 2020). Os
ovócitos grandes no final da vitelogênese secundária apresentam gema
com acúmulo de carotenóides, proporcionando a coloração intensa dos
ovários (Adiyodi e Subramonian, 1983; Jasmani et al., 2000; Zara et al.,
2013; Mollemberg et al., 2017; Paschoal et al., 2019).
Com base em suas características histológicas, podemos classificar
os testículos de P. potimirim como o tipo lobular descrito para os
braquiuros. Cada lobo tem a maioria de suas células na periferia dos
túbulos no mesmo estágio de maturação (ou seja, espermatogônias e
oócitos primários e secundários) (Nagao e Manuhara, 2003; Simeo et
al., 2009 ; Watanabe et al., 2020). Essa morfologia é semelhante à dos
camarões carídeos gonocóricos e hermafroditas (Chow et al., 1982; Sagi
et al., 1988; Silva et al., 2009; Nunes et al., 2010; Poljaroen et al., 2010;
Cobos et al. al., 2011; Fransozo et al., 2016; Paschoal e Zara, 2017,
2018; Tomas et al., 2019). Em relação à morfologia das regiões do VD,
o PVD e o DVD de P. potimirim são caracterizados pela presença do
tiflosole no PVDp. O tiflossolo do DVD é incorporado ao epitélio e não é
mais visível devido à produção de fluido seminal. O tiflossolo também
está ausente em uma ou mais porções de VD de outras espécies
carideanas, como Mac robrachium rosenbergii (descrito como “epitélio
colunar alto” por Chow et al., 1982), e como uma dobra celular no MVD
de Neocardina davidi Bouvier , 1904 por Tomas et ai. (2019). A
localização do tiphlosole pode variar em camarões Dendobranchiata. Em
Farfantepe naeus duorarum (Burkenroad, 1939) (como Penaeus por
Bauer e Cash, 1991) e F. aztecus (Ives, 1891) por Chow et al. (1991)
localiza-se na região mediana do VD. Em Litopenaeus setiferus
(Linnaeus, 1767) (como Penaeus por Bauer e Cash, 1991) e L. vannamei
(Boone, 1931) por Chow et al. (1991) estende-se até o ducto ejaculatório.
Finalmente, em Litopenaeus schmitti (Burkenroad, 1936) de Fransozo et
al. (2016) foram detectados dois tiflossolos na região mediana e distal
do VD, o que permitiria a formação de um espermatóforo mais complexo.
Com base nas semelhanças histoquímicas encontradas em P.
potimirim, a secreção do tipo III em MVD e DVD foi provavelmente
derivada da secreção do tipo II por secreções adicionais das células
epiteliais. Isso é diferente do padrão encontrado em camarões
hermafroditas, que possuem pouca secreção (Braga et al., 2009; Nunes
et al., 2010; Baeza, 2018). O volume de espermatozóides e secreções
dos tipos I, II e III está aumentado no MVD e DVD, indicando que eles
podem formar o espermatóforo. Este volumoso espermatóforo requer
um aporte energético altamente dispendioso e pode ser uma característica é tão profundo quanto a câmara esternal de P. potimirim. A câmara
diferencial dos camarões carídeos gonocóricos, quando comparados às
espécies hermafroditas. A secreção do tipo I, altamente energética e
neutra, rica em polissacarídeos, pode ajudar na nutrição e manutenção
da viabilidade dos espermatozóides, como proposto para outros carídeos
(Tomas et al., 2019). Alguns autores atribuem essa característica à
secreção nos cenospérmicos arredondados/alongados, ou mesmo
cleistospérmicos, espermatóforos dos caranguejos Podo tremata e
Eubrachyura (Beninger et al.,1993; Zara et al., 2012, 2014;Nascimento
e Zara, 2013 ). ; Tiseo et al., 2014; Garcia-Bento et al., 2020; Watanabe
et al., 2020). As secreções dos tipos I e II atuam na manutenção da
forma e dureza do cordão espermático durante a ejaculação e auxiliam
na fixação do espermatóforo ao esterno feminino (Bauer, 2004).
Diferentemente de outros carídeos, os espermatozoides de P.
potimirim são organizados em grupos de células 3e4 entre a secreção do tipo histológicas
Esses pequenos grupos de espermatozóides estão presentes em toda a
extensão do VD e parecem ser exclusivos das espécies de Atyidae,
semelhante ao proposto para o carídeo Neocaridina davidi (Bouvier,
1904) por Tomas et al. (2019).
Estrutura e Desenvolvimento de Artrópodes 63 (2021) 101060
4.4. Morfologia externa e suas funções durante a
transferência e fertilização do espermatóforo
Os caracteres diagnósticos de P. potimirim incluem quelípedes e o
segundo par de pereiópodes terminando com várias cerdas plumosas
em ambos os sexos e grande apêndice masculino em forma de lâmina
recortada com espinhos robustos nos machos (Torati e Mantelatto, 2012;
Grilli et al., 2014). . Os apêndices masculinos masculinos ocorrem na
maioria das espécies carideanas, com poucas exceções, como o gênero
Synalpheus (Bauer, 2004; Toth e Bauer, 2007 , 2008)
únicos e são extremamente
nas espécies Potimirim.
Embora o papel ativo dos apêndices masculinos na transferência de
espermatozóides nunca tenha sido demonstrado, em P. potimirim pode
ser inferido pela sua estreita associação com a abertura do gonóporo e
pela grande quantidade de secreção de VD transferida para as fêmeas
(espermatóforo). Portanto, os apêndices masculinos cerosos de P.
potimirim provavelmente não são a única estrutura utilizada para segurar
a fêmea durante a cópula. Esse papel pode ser desempenhado tanto
pelos apêndices masculinos quanto pelo gonóporo masculino largo com
margens espessas levemente direcionadas para o abdome. Esses
recursos juntos permitiriam que o macho se apoiasse na fêmea durante
a cópula e ajudaria a transferência e adesão do espermatóforo ao
esternito feminino. Modificações do apêndice masculino de machos
carídeos que garantem a eficiência da fixação do esperma ao corpo
feminino foram descritas em Palaemon squilla (Linnaeus, 1758) (Hoglund
1943) e Heptacarpus pictus Stimpson, 1851 (Bauer, 1976), Palaemonetes
pugio Holthuis 1949 (Berg e Sandifer, 1984), e R. typus (Martínez e
Dupre, 2010).
A câmara esternal das fêmeas forma uma ampla depressão delimitada
pela coxa do pereiópodo e por uma prega esternal posterior.
As margens da câmara são circundadas por cerdas que ajudam a reter
o grande material espermatofórico. A deposição do volumoso
espermatóforo que preenche a câmara esternal feminina é possibilitada
pela posição em que ocorre a cópula, pela grande abertura do gonóporo
masculino e pela provável influência dos apêndices masculinos. Portanto,
a câmara esternal de P. potimirim é uma modificação do macho para
receber grande quantidade de fluido seminal (espermatóforo) do macho
e pode ser outro caráter indicativo do gonocorismo. Nos camarões
hermafroditas estudados, essa modificação parece estar ausente, sendo
o esterno quase plano, enquanto os vasos deferentes são finos e não
tão volumosos (Baeza, 2010a, 2010b, 2018; Baeza e Piantoni, 2010).
Embora as fêmeas gonocóricas de M. amazonicum (Heller, 1862) e
Cherax quadricarinatus (von Martens, 1868) tenham um esterno profundo
e liso (Vazquez e Lopez-Greco, 2007 ; Paschoal e Zara, 2017), ele não
esternal feminina possui uma morfologia peculiar que está relacionada
ao gonóporo levemente alongado direcionado aos pleópodes. Esta
característica gonópora parece ser única entre os carideanos já
estudados. O gonóporo possui uma fileira de cerdas longas e cônicas
situadas no interior da câmara, que provavelmente auxiliam tanto na
fixação do espermatóforo no gonóporo quanto na passagem do oócito,
otimizando a fertilização e o movimento dos óvulos em direção ao
abdômen.
Em conclusão, nosso estudo resolve a controvérsia da suposta
protandria simples (mudança de sexo masculino para feminino) e
hermafroditismo protândrico simultâneo (sistema sexual com uma fase
masculina precoce e uma fase posterior em que ambos os sexos são
funcionais) em P. potimirim . Fornecemos evidências comportamentais,
I. e morfológicas de que P. potimirim é uma espécie gon
ocórica. Se a hipótese de que P. mexicana é uma espécie hermafrodita
(Alonso-Reyes et al., 2010) for verdadeira, esse sistema sexual não
parece ser um caráter compartilhado entre outros membros do gênero.
15
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M. Machado, FC Salti, G. Bertini et al. Estrutura e Desenvolvimento de Artrópodes 63 (2021) 101060

Contribuições do autor
MM, Planejou, preparou e desenhou os procedimentos do estudo
(experimentos, dissecções, análises histológicas, fotografia e análise
Baeza, JA, Piantoni, C., 2010. Sistema sexual, razão sexual e grupo de vida no camarão Thor
amboinensis (De Man): relevância para teorias de monopolização de recursos e alocação de
sexo. Biol. Touro. 219, 151e165.
Bauer, RT, 1976. Comportamento de acasalamento e transferência de espermatóforos no camarão
Heptacarpus pictus (Stimpson) (Decapoda: Caridea: Hippolytidae). J. Nat. Hist. 10, 415e440.

dos resultados); redigiu o manuscrito (rascunho original) e editou e

revisou o manuscrito. FCS realizou as análises histológicas, fotografias
e análises dos resultados); discutiu os resultados; editou e revisou o
manuscrito. GB Coorientou o desenvolvimento do estudo, editou e
revisou o manuscrito. FJZ
Recursos fornecidos, dissecações, metodologia (análises histológicas
e MEV e micrografias); discutiu os resultados, revisou e editou as
placas. MLNF Orientado quanto à hipótese central desenvolvida no
estudo; e adquiriu financiamento, revisou e editou o manuscrito. Todos
os autores leram e aprovaram a versão final do manuscrito.
Reconhecimentos
Bauer, RT, 1996. Um teste de hipóteses sobre os sistemas de acasalamento dos machos e a muda
da fêmea em camarões decápodes, usando Sicyonia dorsalis (Decapoda: Penaeaoidea). J. Crustac.
Biol. 16, 429e437.
Bauer, RT, 2000. Hermafroditismo simultâneo em camarões carideanos: um sistema sexual único e
intrigante no Decapoda. J. Crustac. Biol. 20, 116e128.
Bauer, RT, 2001. Hermafroditismo em camarão: o sistema sexual e sua relação com atributos
socioecológicos. Interscience 26, 434 e439.
Bauer, RT, 2002a. Teste de hipóteses sobre o valor adaptativo de uma fase masculina estendida no
camarão hermafrodita Lysmata wurdemanni (Caridea: Hippo lytidae). Biol. Touro. 203, 347e357.
Bauer, RT, 2002b. Ecologia reprodutiva de um hermafro rodita protândrico simultâneo , o camarão
Lysmata wurdemanni (Decapoda: Caridea: Hippolytidae).
J. Crustac. Biol. 22, 742e749.
Bauer, RT, 2004. Camarões Notáveis: História Natural e Adaptações dos Carideans, 1ª edição.
Imprensa da Universidade de Oklahoma, Norman.
Bauer, RT, 2006. Mesmo sistema sexual, mas sociobiologia variável: evolução do hermafroditismo
protândrico simultâneo em camarões Lysmata. Integr. Comp. Biol. 46, 430e438.

A FJZ agradece a Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal
de Nível Superior - CAPES-CIMARII #1989/2014e23038.004
309/2014-51), a Fundação de Amparo à Pesquisa de São Paulo -
FAPESP JP# 205/ 04707-4, e Biota Intercrusta # 2018/13685-5.
Agradecemos ao Laboratório de Microscopia Eletrônica da FCAV,
UNESP e Jaboticabal e à Dra. Claudia Fiorillo pelo suporte técnico.
MLNF e MM agradecem ao Programa de Zoologia do Instituto de
Biociências da Universidade do Estado de São Paulo - UNESP,
Botucatu, Brasil pela bolsa de mestrado em ciências (número do
arquivo: 133876 / 2019-5) e apoio logístico do Conselho Nacional de
Desenvolvimento Científico e Tecnológico -CNPq a MM. A FJZ
também agradece ao CNPq pela bolsa de pesquisa PQ#303314/2017
e #309298/2020-2. Os autores agradecem aos revisores anônimos
Bauer, RT, Abdalla, JH, 2001. Táticas de acasalamento de machos no camarão Palaemonetes pugio
(Decapoda, Caridea): guarda pré-copulatória do macho versus busca pura. Etologia 17, 185e199.
Bauer, RT, Cash, CE, 1991. Estrutura do espermatóforo e anatomia do ducto ejaculatório em Penaeus
setiferus, P. duorarum e P. aztecus (Crustacea: Decapoda): homologias e significado funcional.
Trans. Sou. Microsc. Soc. 110, 144e162.
Bauer, RT, Holt, GJ, 1998. Hermafroditismo simultâneo no camarão marinho Lysmata wurdemanni
(Caridea: Hippolytidae): um sistema sexual não descrito no Decapod Crustacea. Mar. Biol. 132,
223e235.
Bauer, RT, Thiel, M., 2011. Primeira descrição de um sistema de acasalamento de busca pura e
protandria no camarão Rhynchocinetes uritai (Decapoda: Caridea). J. Crustac.
Biol. 31, 286e295.
Beams, HW, Kessel, RG, 1980. Ultraestrutura e vitelogênese no oócito do crustáceo, Oniscus asellus.
J. Submicr. Citol. Patol. 12, 17e27.
Beninger, PG, Lanteigne, C., Elner, RW, 1993. Processos reprodutivos revelados por experimentos de
deiscência de espermatóforos e por histologia, ultraestrutura e histoquímica do sistema reprodutivo
feminino no caranguejo da neve Chionoecetes opilio (O. Fabricius). J. Crustac. Biol. 13, 1e16.

que aprimoraram o manuscrito com sugestões relevantes. Este Berg, AV, Sandifer, PA, 1984. Comportamento de acasalamento do camarão de grama Palaemonetes
trabalho foi realizado de acordo com as leis brasileiras (Fernando José pugio Holthuis (Decapoda, Caridea). J. Crustáceo. Biol. 3, 417e424.
Zara, licença permanente nº 34587 para a coleção de Material Berkeley, AA, 1929. Reversão sexual em Pandalus danae. Sou. Nat. 63, 571e573.
Boddeke, R., Bosschieter, JR, Goudswaard, PC, 1991. Mudança de sexo, acasalamento e transferência
Zoológico MMA/IBAMA/SISBIO e Conselho de Gestão do Patrimônio GenéticodeSisGen nº AECD880).
esperma em Crangon crangon (L.). In: Bauer, RT, Martin, JW (Eds.), Crustacean Sexual
Biology. Columbia University Press, Nova York, pp. 246e270.
Braga, AA, Lopez-Greco, LS, Santos, DC, Fransozo, A., 2009. Evidência morfológica para
Referências hermafroditismo protândrico simultâneo no Carideano Exhippo lysmata oplophoroides. J. Crustac.
Biol. 29, 34e41.
Adiyodi, RG, Subramonian, T., 1983. Arthropoda-Crustacea. In: Adiyodi, KG, Adiyodi, RG (Eds.), Braga, AA, Nunes, ET, Lopez-Greco, LS, Mathias, Camargo-, MI, Fransozo, V., 2016. Características
Biologia Reprodutiva de Invertebrados, Oogênese, Oviposição e Oossorção, vol. 1. Wiley-Sons, histológicas e histoquímicas da oogênese no camarão hermafrodita protândrico simultâneo
Nova York, pp. 443e495. Exhippolysmata oplophoroides (Decapoda: Caridea). Micron 88, 60e67.
Alonso-Reyes, P., Bortolini-Rosales, JL, Alvarez, F., 2010. Análise discriminante aplicada aos grupos
sexuais de Potimirim mexicana, camarão hermafrodita protândrico . Rev. Mex. Biodivers. 81, 187 Brook, HJ, Rawlings, TA, Davies, RW, 1994. Mudança de sexo Protogynous no isópode intertidal
e 192. Gnorimosphaeroma oregonense (Crustacea: Isopoda). Biol. Touro. 187, 99e111.
Anger, K., Moreira, GS, 1998. Características morfométricas e reprodutivas de espécies tropicais
camarões carideanos. J. Crustac. Biol. 18, 823e838. Campos, BR, Dumont, LLC, D'Incao, F., Branco, JO, 2009. Desenvolvimento ovariano e
Arnaud, J., Brunet, M., Mazza, J., 1982. Estudo da oogênese em Centropages typ icus. comprimento de primeira maturação do camarão-barbo-mar Xiphopenaeus kroyeri (Heller)
(Copepoda, Calanoida). Repr. Nutr. Dev. 22, 537e555. com base em análise histológica. Náuplio 17, 9e12.
Baeza, JA, 2008a. Monogamia social no camarão Pontonia margarita, simbionte da Pinctada Carpenter, A., 1978. Protandry no camarão de água doce, Paratya curvirostris (Heller, l862)
mazatlantica, na costa tropical do leste do Pacífico. Mar. Biol. 153, 387e395. (Decapoda: Atyidae) com uma revisão do fenômeno e sua significância no Decapoda. J.
Roy. Soc. NZ 3, 343e358.
Baeza, JA, 2008b. Hermafroditismo protândrico simultâneo nos camarões Lys mata bahia e L. Castiglioni, DS, Negreiros-Fransozo, ML, Lopez Greco, LS, Silveira, AF, Silveira, SO, 2007.
intermedia. Invertebr. Biol. 127, 181e188. Desenvolvimento gônado em fêmeas de siri Uca rapax (Crustacea, Brachyura, Ocypodidae)
Baeza, JA, 2009. Hermafroditismo simultâneo protândrico é uma característica conservada em utilizando técnicas macro e microscópicas.
Lysmata (Caridea: Lysmatidae): implicações para a evolução do hermafroditismo no gênero. Iheringia Ser. Zool. 97, 505e510.
Smithsonian Contrib. Mar. Sci. 38, 95e110. Charniaux-Cotton, H., 1980. Estudos experimentais de reprodução em crustáceos malacostraca.
Baeza, JA, 2010a. O estilo de vida simbiótico e suas consequências evolutivas: monogamia social e Descrição da vitelogênese e de seu controle endócrino. In: Clark Jr., WH, Adams, TS (Eds.),
alocação sexual no camarão hermafrodita Lysmata pederseni. Avanços na Reprodução de Invertebrados.
Ciências Naturais 97, 729e741. Elsevier, Holanda do Norte, pp. 177e186.
Baeza, JA, 2010b. Observações do sistema sexual e da história natural do camarão semi- Charniaux-Cotton, H., 1985. Vitellogenesis e seu controle em malacostraca Crustacea.
terrestre Merguia rhizophorae. Invertebr. Biol. 129, 266e276. Sou. Zool. 25, 197e206.
Baeza, JA, 2013. Filogenia molecular multilocus de camarões quebrados (gênero Lysmata e Chow, S., Ogasawara, Y., Taki, Y., 1982. Sistema reprodutor masculino e fertilização do camarão
aliados): um teste da hipótese 'Tomlinson-Ghiselin' explicando a evolução do hermafroditismo Palemonid Macrobrachium rosenbergii. Nippon Suisan Gakkaishi 48, 177e183.
simultâneo. Mol. Filogeneto. Evoluir 69, 46e62.
Baeza, JA, 2018. Sistemas sexuais em camarões (Infraordem Caridea Dana, 1852), com Chow, S., Dougherty, MM, Dougherty, WJ, Sandifer, PA, 1991. Formação de espermatóforos nos
especial referência à origem histórica e valor adaptativo do hermafroditismo protândrico camarões brancos Penaeus setiferus e P. vannamei. J. Crustac.
simultâneo. In: Leonard, JL (Ed.), Transições entre Sistemas Sexuais. Springer, Nova York, Biol. 11, 201e216.
pp. 269e310. Cobos, V., Díaz, V., Raso, G., Enrique, J., Manjon-Cabeza, ME, 2005. Insights sobre o sistema
Baeza , JA , Anker , A. , 2008 . sp., uma nova espécie de camarão hermafrodita do sul do Caribe. reprodutor feminino em Hippolyte inermis (Decapoda, Caridea): esta espécie é realmente
J. Crustac. Biol. 28, 148e1 hermafrodita? Invertebr. Biol. 124, 310e320.
Baeza, JA, Reitz, J., Collin, R., 2008. Hermafroditismo protândrico simultâneo e razão sexual no Cobos, V., Díaz, V., Raso, J.E.G., Manjon-Cabeza,M.E., 2011. The male reproductive system of
camarão Lysmata nayaritensis. J. Nat. Hist. 41, 2843e2850. Hippolyte inermis Leach 1815 (Decapoda, Caridea). Helgol. Mar. Res. 65, 17e24.

16
Machine Translated by Google
M. Machado, FC Salti, G. Bertini et al.
Correa, C., Thiel, M., 2003. Sistemas de acasalamento em camarões carídeos (Decapoda: caridea) e suas
consequências evolutivas para o dimorfismo sexual e biologia reprodutiva. Rev. Chil. Hist. Nat. 76,
187e203.
Dhainaut, A., De Leersnyder, M., 1976. Estudo citoquímico e ultra- estrutural e evolução da evolução
oocitária do caranguejo Eriocheir sinensis. I. Oogênese natural. Arco. Biol. 87, 261e282.
Duffy, JE, Thiel, M., 2007. Ecologia Evolutiva de Sistemas Sociais e Sexuais: Crustáceos como Organismos
Modelo. Oxford University Press, Nova York.
Espinoza-Fuenzalida, NL, Thiel, M., Dupre, E., Baeza, JA, 2008. Hippolyte wil liamsi é gonocórico ou
hermafrodita? Um estudo multi-abordagem e uma revisão dos sistemas sexuais em camarões
Hippolyte. Mar. Biol. 155, 623e635.
Eurenius, L., 1973. Um estudo de microscópio eletrônico sobre o desenvolvimento de oócitos do caranguejo
Cancer pagurus L. com referência especial à formação da gema (Crustacea).
Z. Morphol. eco Animais 75, 243e254.
Fransozo, V., Fernandes, AB, Lopez-Greco, LS, Zara, FJ, Santos, DC, 2016. Morfologia funcional do
sistema reprodutor masculino do camarão branco Lito penaeus schmitti (Burkenroad, 1936) (Crustacea,
Penaeidea) comparada para outro Litopenaeus. Invertebrado Toque Dev. 60, 161 e 174.
Garcia Bento, MA, Nascimento, FA, Mantelatto, FL, Zara, FJ, 2020. Desenvolvimento ovariano em siri:
histoquímica comparativa e ultraestrutura de Callinectes ornatus e Arenaeus cribrarius (Brachyura,
Portunidae).
Célula de Tecido 66.
Gregati, RA, Fransozo, V., Lopez-Greco, LS, Negreiros-Fransozo, ML, Bauer, RT, 2014. Morfologia funcional
do sistema reprodutor e transferência espermática em Stenopus hispidus (Crustacea: Decapoda:
Stenopodidea), e sua relação ao sistema de acasalamento. Invertebr. Biol. 133, 381e393.
http://dx.doi.org/10.1037/0021-843X.101.1.13 Grilli, NDM, Terossi, M., Mantelatto, FL, 2014. O sistema
sexual dos camarões de água doce do gênero Potimirim Holthuis (Decapoda: Caridea : Atyidae): existe
um padrão neste gênero? março Freshw. Res. 65, 759 e
Hinsch, GW, Cone, MV, 1969. Observações ultraestruturais de vitelogênese no caranguejo-aranha, Libinia
emarginata LJ Cell Biol. 40, 336e342.
Hoffmann, P., Negreiros-Fransozo, ML, 2010. Ciclo reprodutivo e fecundidade de Potimirim glabra (Kingsley,
1954) (Caridea, Atyidae) de um riacho litorâneo.
Invertebr. Reproduzir. Dev. 54, 133e141.
Hoglund, H., 1943. Sobre a biologia e desenvolvimento larval de Leander squilla (L.) forma typica de Man-
Svenska. Escritos. Nova série Biologia 2, 1e44.
Jasmani, S., Kawazoe, I., Shih, TW, Suzuki, Y., Aida, K., 2000. Níveis de hemolinfa vitello genin durante o
desenvolvimento ovariano no camarão kuruma Penaeus japo nicus. Peixe. Sci. 66, 535e539.
Johnson Jr., VR, 1969. Comportamento associado à formação de pares em bandas
camarão Stenopus hispidus (Olivier). Paz Conhecer 23, 40 e 50.
Junqueira, L.C.U., Junqueira, L.M.M.S., 1983. Tecnicas b asicas de citologia e histologia. 1st ediç~
ao, S~ ao Paulo.
Lanteigne, C., Beninger, PG, Gionet, C., 1996. Ontogenia de caracteres sexuais primários femininos nos
caranguejos Majid Chionoecetes opilio e Hyas coarctatus. J. Crustáceo.
Biol. 6, 501e514.
Machado, MC, Hoffmann, P., Gonçalves, GRL, Negreiros-Fransozo, ML, 2020. Maturidade sexual
do pequeno camarão Potimirim brasiliana Villalobos, 1959 (Crustacea, Atyi dae), da costa
sudeste do Brasil. J. Neotropic. Bio. 17, 1e14.
Mantelatto, FL, Vera-Silva, AL, Prado, BM, Pileggi, LG, 2021. Análise filogenômica revela fluxo gênico
entre populações do camarão de água doce Poti mirim brasiliana (Caridea, Atyidae) ao longo de sua
ampla distribuição. Ano. Acad. Brás.
Cien. 93, e20190384.
Martínez, R., Dupre, E., 2010. Transferência de espermatóforos no camarão rocha Rhynchocinetes
typus (Caridea: Rhynchocinetidae). O t. Am. J. Aquat. Res. 38, 265e269.
Mello, M.L.S., Vidal, B.C., 1980. Pr aticas de biologia celular, 1th edition. Funcamp,
Campinas.
Mollemberg, M., Zara, FJ, Santana, W., 2017. Morfologia e ultraestrutura do ciclo ovariano adulto em
Mithracidae (Crustacea, Decapoda, Brachyura, Majoidea).
Helgol. Mar. Res. 71, 14.
Nagao, J., Munehara, H., 2003. Ciclo anual de maturação testicular no capacete
crab Telmessus cheiragonus. Fish. Sci. 69, 1200e1208.
Nascimento, FAD, Zara, FJ, 2013. Desenvolvimento do sistema reprodutor masculino em Callinectes
ornatus Ordway, 1863 (Brachyura: Portunidae). Náuplio 21
161e177.
Nunes, ET, Braga, AA, Santos, DC, Camargo-Mathias, MI, 2010. Citodiferenciação durante a
espermatogênese do hermafrodita caridea Exhippolysmata oplophoroides. Micron 41, 585e591.
Paschoal, LRP, Oliveira, LJF, Andrioli, GC, Zara, FJ, 2019. Seco ou molhado? Qual a melhor
escolha para determinar os índices gonadossomáticos e hepatossomáticos em fêmeas de
Macrobrachium amazonicum? Aquacult. Res. 50, 3589e3596.
Paschoal, LRP, Zara, FJ, 2017. Primeiro registro de intersexualidade no camarão do rio Amazonas
Macrobrachium amazonicum (Heller, 1862) (Caridea: Palaemonidae).
J. Crustac. Biol. 37, 507e511.
17
Estrutura e Desenvolvimento de Artrópodes 63 (2021) 101060
Paschoal, LRP, Zara, FJ, 2018. Contagem de espermatozóides de populações de Macrobrachium
amazonicum (Heller, 1862) com histórias de vida distintas, com introdução de um método de contagem
simples. Aquacultura 491, 368e374.
Paschoal, LRP, Zara, FJ, 2020. Tamanho no início da maturidade sexual em fenótipos de Macrobrachium
amazonicum (Heller, 1862): uma abordagem integrativa. Um. Acad. Sutiãs.
Cien. 92, 1e19.
Poljaroen, J., Vanichyiriyakit, R., Tinikul, Y., Phoungpetchara, I., Linthong, V., Weerachatyanukul, W.,
Sobhon, P., 2010. Espermatogênese e espermatozoides maduros distintos no camarão gigante de
água doce, Macrobrachium rosenbergii (De Man, 1879). Zool. Anz. 249, 81e94.
Ramirez-Llodra, EZ, Segonzac, M., 2006. Biologia reprodutiva de Alvinocaris mur icola (Decapoda: Caridea:
Alvinocarididae) de infiltrações frias na bacia do Congo.
J. Mar. Biol. Associação Reino Unido 86, 1347e1356.
Rotllant, G., Gonzalez-Gurriaran, E., Fernandez, L., Benhalima, K., Ribes, E., 2007.
Maturação ovariana do caranguejo-aranha multidesovado Maja brachydactyla (Decapoda: Majidae)
com especial referência à formação da gema. Mar. Biol. 152, 383e394.
Sagi, A., Milner, Y., Cohen, D., 1988. Espermatogênese e armazenamento de esperma nos testículos dos
morfotipos masculinos comportamentalmente distintos de Macrobrachium rosenbergii (Decapoda,
Palaemonidae). Biol. Touro. 174, 330e336.
Silva, GMF, Ferreira, MAP, Von Ledebur, EICF, Rocha, RM, 2009. Análise da estrutura gonadal de
Macrobrachium amazonicum (Heller, 1862) de uma população selvagem: uma nova visão sobre a
caracterização de morfotipos. Aquacult. Res. 40, 798e803.
Simeo, CG, Ribes, E., Rotllant, G., 2009. Anatomia interna e ultraestrutura do sistema reprodutor masculino
do caranguejo-aranha Maja brachydactyla (Decapoda: Brachyura). Célula de Tecido 41, 345e361.
Soonklang, N., Wanichanon, C., Stewart, MJ, Stewart, P., Meeratana, P., Hanna, PJ, Sobhon, P., 2012.
Ultraestrutura de oócitos em diferenciação e vitelogênese no camarão gigante de água doce,
Macrobrachium rosenbergii ( De Man). Microsc. Res.
Tecnologia 75, 1402e1415.
Subramoniam, T., 2017. Biologia Sexual e Reprodução em Crustáceos, 1ª Edição
ção. Academic Press uma marca da Elsevier, Londres.
Terossi, M., Lopez Greco, LS, Mantelatto, FL, 2008. Hippolyte obliquimanus (Decapoda: Caridea:
Hippolytidae): uma espécie de camarão gonocórico ou hermafrodita ? Mar. Biol. (Berl.) 154, 127e135.
Tiseo, GR, Mantelatto, FLM, Zara, FJ, 2014. A cleistospermia e a cenospermia estão relacionadas
à transferência de espermatozoides? Estudo comparativo do sistema reprodutor masculino de
Pachygrapsus transversus e Pachygrapsus gracilis (Brachyura: Grapsi dae). J. Crustac. Biol.
34, 4e716.
Tomas, AL, Garcia Bento, MA, Mutti, LD, Zara, FJ, Lopez Greco, LS, 2019.
Novos insights sobre a anatomia masculina, formação de espermatóforos e estrutura espermática em
Atyidae: o camarão cereja vermelho Neocaridina davidi. Invertebr.
Biol. 138, 17e28.
Torati, LS, Mantelatto, FL, 2012. Mudança ontogenética e evolutiva da morfologia externa do
camarão neotropical Potimirim (Holthuis, 1954) explicada por uma filogenia molecular do
gênero. J. Crustac. Biol. 32, 625e640.
Toth, E., Bauer, RT, 2007. A técnica de sexagem de gonóporos permite a determinação de
proporções sexuais e composição de auxiliares em camarões eussociais. Mar. Biol. 151, 1875 e 1886.
Toth, E., Bauer, RT, 2008. Populações de Synalpheus paraneptunus (Crustacea: Decapoda:
Caridea) com gonóporos intersexuais: um enigma sexual entre os camarões-esponja. Invertebr.
Reproduzir. Dev. 51, 49e59. ~
Valenti, W.C., 1985. Cultivo de Camaroes de ~ Agua Doce. 2th ediç ao. Editora Nobel, Sao Paulo ~
.
Vazquez, FJ, Lopez-Greco, LS, 2007. Fêmeas intersexuais na garra vermelha do lagostim, Cherax
quadricarinatus (Decapoda: Parastacidae). Rev. Biol. Tropa 55, 25e32.
Villalobos, AF, 1959. Contribuição ao conhecimento dos Atyidae do México. II (Crustáceos, Decapoda).
Estudo de algumas espécies do gênero Potimirim (¼
Ortmannia), com descrição de uma nova espécie do Brasil. Annals Inst. Biol.
Univ. Nac. Outono. México , Bot. 30, 269 e 330.
Watanabe, TT, Nascimento, FA, Mantelatto, FL, Zara, FJ, 2020. Ultraestrutura e histoquímica do
sistema reprodutor masculino de Callinectes Stimpson, 1860 (Brachyura: Portunidae). J.
Morphol. 20e0169.
Zara, FJ, Gaeta, HH, Costa, TM, Toyama, MH, Caetano, FH, 2013. A histoquímica do ciclo ovariano
e sua relação com o peso do hepatopâncreas no siri-azul Callinectes danae (Crustacea:
Portunidae). Acta Zool. 94, 134e146.
Zara, FJ, Raggi Pereira, GR, Sant'Anna, BS, 2014. Alterações morfológicas no receptáculo seminal
durante o desenvolvimento ovariano no siri -do-mar Arenaeus cribarius. Biol. Touro. 227, 19e32.
Zara, FJ, Toyama, MH, Caetano, FH, Lopez-Greco, LS, 2012. Espermatogênese, espermatóforo e
produção de fluido seminal no siri-azul adulto Callinectes danae (Portunidae). J. Crustac. Biol.
2, 249e262.
Zhang, D., Lin, J., Creswell, RL, 1998. Comportamento emaranhado e desova do camarão coral em
faixas Stenopus hispidus em laboratório. J. Crustac. Biol. 18, 511e518.