UNIVERSIDADE FEDERAL FLUMINENSE

ANÁLISE INSTRUMENTAL | ESPECTROFOTOMETRIA NO VISÍVEL

ANGÉLICA SOUSA

complexo colorido com máxima absorção em

INTRODUÇÃO
510 nm. Veja a reação na imagem abaixo:
É possível a utilização de espectrofotometria
para identificar uma espécie química, como o
ferro, pois cada espectro é único. Essa técnica
na região ultravioleta e visível (UV-Vis)
baseia-se na capacidade de absorção dos
grupos absorventes que estão presentes nos
compostos. Quando uma fonte de radiação
eletromagnética incide sobre a amostra, parte Figura 2 - Complexo formado entre Fe e
dessa radiação incidente é transmitida, outra ortofenantrolina²
parte é absorvida e outra é refletida. Assim, é
possível obter dados de absorvância ou
transmitância em função do comprimento de OBJETIVO
onda, esse dados podem ser lidos no espectro Medir o espectro de absorção do complexo
de absorção (ou transmissão). ferro(II)-ortofenantrolina, seleção do
Entretanto, para essa determinação o pH do comprimento de onda para determinação
meio precisa manter-se ácido. Dessa forma é espectrofotométrica de ferro e determinação
utilizado um tampão ácido, isso garante que a de ferro em amostra desconhecida.
hidroquinona fique em seu estado natural e
METODOLOGIA
assim pode reagir constantemente com o Fe³+ Preparar uma solução de hidroquinona:
convertendo-o em Fe²+, sem que se esgote a ➢ Dissolver 0,5 g de hidroquinona em
fonte de hidrônio. Observe a imagem a seguir: 50 mL de água (essa solução deve ser
preparada na hora do uso).

Utilizar 6 balões volumétricos de 100mL:

➢ Aguardar 15 minutos antes de
avolumar os balões com água
destilada;
➢ Colocar no 1º balão 5,0 mL da solução
padrão Fe 10 ppm, 2,0 mL de
Hidroquinona, 5,0 mL
ortofenantrolina, 8,0mL de solução
tampão e avolumar com água
Figura 1 - Reação de conversão da p-quinona em destilada;
Hidroquinona¹ ➢ No 2º colocar 10,0 mL da solução 2,0
mL de Hidroquinona, 5,0 mL
Ainda é necessário realizar uma etapa de ortofenantrolina, 8,0mL de solução
conversão do ferro em espécie absorvente, tampão e avolumar com água
devido ao fato de que os cátions férricos não destilada;
absorverem na faixa do UV-Vis, para que a ➢ No 3º balão 20,0 mL da solução
absorção ocorra nesta faixa espectral. padrão Fe 10 ppm, 2,0 mL de
A espécie utilizada para que o ferro possa ser Hidroquinona, 5,0 mL
absorvido é a ortofenantrolina, agente ortofenantrolina, 8,0mL de solução
complexante, ao reagirem formam um tampão e avolumar com água
destilada;
 ➢ No 4º balão 25,0 mL da solução
padrão Fe 10 ppm, 2,0 mL de
Hidroquinona, 5,0 mL
ortofenantrolina, 8,0mL de solução
tampão e avolumar com água
destilada;
➢ No 5º balão 25,0 mL de água destilada
e avolumar com água destilada;
➢ No 6º balão 25,0 mL de amostra e
avolumar com água destilada;
➢ Após homogeneização acondicionar Gráfico 1 - Curva de Calibração | Comprimento de
cada solução em um béquer de 100 Onda x Absorvância Fe 10 ppm
mL, separadamente;
➢ Acondicionar separadamente cada Definido o melhor comprimento de onda (510
solução em uma cubeta para análise. nm), analisou-se a absorvância nas demais
concentrações. As concentrações dos balões
1, 2, 4 e 5 foram calculadas pela fórmula:
RESULTADO E DISCUSSÃO
Foram determinados alguns comprimentos de C1⋅V1=C2⋅V2
onda na faixa entre 400 a 700 nm para avaliar
a amostra no espectrofotômetro, obtendo a Dessa forma, C1 é a concentração de 10 ppm
absorvância nesses pontos específicos. Veja a em mol/L), V1 o volume de 5,0mL, 10,0mL,
seguir na tabela 1: 20,0mL ou 25,0mL pipetados da solução
padrão, V2 o volume de 100,0mL da
capacidade do balão e C2 a concentração a ser
descoberta. Veja as concentrações
encontradas e absorvâncias determinadas na
tabela 2 a seguir:

Tabela 2 - Concentração x Absorvância Fe

Deve-se converter a concentração de 10 ppm

de Ferro em molaridade (mol/L), pela
Tabela 1 - Comprimento de Onda x Absorvância
Ferro 10 ppm
fórmula:
𝐶
𝑀= 𝑚 × 1000
No comprimento de onda 510 nm
(Absorvância de 0,407) tem-se o ponto
máximo onde é alcançado o comprimento de Onde, M é a molaridade expressa em mol/L,
onda que determinará a melhor absorvância C a concentração em ppm e m a massa molar.
de cada amostra a ser analisada. Observe o Então:
ponto máximo no gráfico 1 abaixo: 10
𝑀= 55,845 × 1000

𝑀 = 0, 0001791 mol/L
Já para descobrir a concentração do balão 3
(amostra) temos a lei de Lambert-Beer: 𝑋𝑣−𝑋𝐿
𝐸𝑟 = 𝑋𝐿
· 100
𝐴 = ε⋅𝑏⋅𝑐
|9651 − 11000|
E pela equação da inclinação da reta 𝐸𝑟 = 11000
· 100
encontra-se a concentração da amostra, balão
3:
𝐸𝑟 = 12, 26%
∆𝐴
ε = ∆𝐶·𝑏
Considerando 𝐸𝑅, o valor de ε estimado é

𝐴2 − 𝐴1 = ε ⋅ 𝐶2 − 𝐶1⋅ 𝑏 aceitável pois representa uma variação, em

relação ao valor real, menor que 15%.

𝐴2− 𝐴1 CONCLUSÃO
𝐶2 = ε·𝑏
+ 𝐶1 Para verificar a linearidade fotométrica de
espécies não absorventes como os cátions
0,2744 − 0,322 férricos é preciso estar atento a algumas
𝐶2 = 9648
+ 0, 00003582 etapas para a transformação dessa amostra
para uma espécie absorvente, sendo
necessário saber mecanismos de manejo para
𝐶2 = 0, 00003084 𝑚𝑜𝑙/𝐿 serem realizados na solução inicial para que
ocorra essa conversão de forma efetiva.
Ajustado o valor da concentração de Fe em Além disso, analisar soluções com baixa
molaridade, torna-se possível encontrar a concentração, geralmente expressa em ppm,
linearidade fotométrica. Veja no Gráfico 2: do analito de interesse necessita de cuidados
redobrados, pois certamente precisará realizar
cálculos iniciais de conversão da unidade de
concentração, para só então poder da
seguimento a análise de dado.

REFERÊNCIAS
1. ROBERTS, J. D.; CASERIO, M. C. Basic
principles of organic chemistry. ‌

2. BREITKREITZ, M.C.; SOUZA, A.M.;

POPPI, R.J. Experimento didático de
Gráfico 2 - Concentração x Absorvância Fe quimiometria para planejamento de
experimentos: avaliação das condições
O valor de R2 (coeficiente de determinação) experimentais na determinação
da reta mostra que a curva é fidedigna e os espectrofotométrica de ferro II com
procedimentos foram executados o-fenantrolina. Um tutorial, parte III. Química
corretamente, isso se confirma devido ao R² Nova, São Paulo, v.37, n.3, p.566, 2014.
ser 1 (quanto mais próximo de 1,0 melhor é a
curva em relação à amostra) 3. MATOS, Renato Camargo. Metodologia
Analítica Espectrofotometria UV -vis. Agosto
Encontrada a absortividade molar pela de 2012.
equação da reta podemos comparar com o
4
valor citado na literatura (ϵ = 1, 1 × 10 )³
pela equação do erro relativo:
4. HARRIS, D. C. Análise Química
Quantitativa. 7 ed. Tradução de Bordinhão, J.
[et al.]. Rio de Janeiro: LTC, 2008.

5. SKOOG, D. A. et al. Princípios de análise

instrumental. Porto Alegre: Bookman, 2002.