Ácidos Nucleicos

✓ Cromossoma – porção de DNA associado a proteínas, altamente

condensadas (homólogos – mesmas características)
✓ Nucleossoma – unidade fundamental de cromatina, o material que
constitui os cromossomas das células eucariontes
✓ Telómeros – estruturas constituídas por fileiras repetitivas de DNA que
formam as extremidades dos cromossomas
✓ Centrómero – é a região mais condensada do cromossomo,
normalmente localizada no meio dessa estrutura, onde as cromatídeos-irmãos entram em contato
✓ Cariótipo – conjunto de cromossomas dentro de um núcleo de uma célula
✓ Cromatídeo – cada um dos dois filamentos de DNA formados pela duplicação de um cromossoma
✓ Cromatina – complexo de DNA, RNA e proteínas que está presente no núcleo em forma de um longo
filamento
✓ Genoma – toda a informação hereditária de um organismo que está codificada no seu DNA
✓ Nucléolo – região que apenas contém RNA e proteínas
✓ Nucleótido – possui uma pentose, uma base nitrogenada e um grupo fosfato

Pirimidina – (pontes de hidrogénio) – Purina Os nucleótidos ligam-se entre si por ligações

fosfodiéster entre o grupo fosfato de um nucleótido
Timina/uracilo Adenina
e o carbono 3' da pentose do nucleótido seguinte.
Citosina Guanina
Uma cadeia polinucleotídica tem duas
extremidades: a extremidade 5' e a extremidade 3'. A polimerização de uma cadeia ocorre no sentido 5'-3'.
O RNA é, geralmente, formada por uma cadeia polinucleotídica simples, mas, em alguns casos, pode
dobrar-se sobre si mesma por complementaridade de bases e adquirir formas variáveis. No RNA, a adenina
(A) emparelha com o uracilo (U) em vez de timina (T). Tipos de RNA: RNA de transferência (tRNA); RNA
mensageiro (mRNA); RNA ribossómico (rRNA).
Nota: o DNA é uma cadeia dupla hélice e antiparalela; as bases azotadas encontram-se voltadas para
dentro, devido ao seu caráter hidrofóbico, enquanto o grupo fosfato e a pentose se encontram voltados
para o exterior, pois são hidrofílicas.

Replicação do DNA
Na replicação intervêm vários tipos de enzimas, destacando-se a helicase, que desenrola e abre a dupla
hélice, e a DNA polimerase, que leva à formação de cadeias complementares do DNA molde, por adição de
nucleótidos e seguindo a regra A – T e G – C.
1) Desenrolamento do DNA – Helicase (enzima): ocorre a quebra das pontes de hidrogénio, para a
separação das duas cadeias da molécula original de DNA formando uma bolha de replicação.
2) Atuação da Primase (enzima): introduz nucleótidos de RNA – o primer – fornecendo uma extremidade
3’OH livre para a DNA polimerase.
3) Atuação da DNA polimerase (enzima) e DNA ligase:
✓ formação de ligações por pontes de hidrogénio de novos nucleótidos de DNA, com as bases
complementares das cadeias molde da molécula original;
✓ ligação do grupo fosfato (ligado ao carbono 5’ da pentose) de um nucleótido à pentose do
nucleótido anterior (através do carbono 3’OH) – ligação fosfodiéster (covalente);
✓ continuação da incorporação de nucleótidos do meio, por complementaridade, com formação de
duas novas cadeias, polimerizadas de 5’ – 3’, antiparalelas em relação às cadeias moldes de DNA;
✓ correção de erros, no caso das células eucarióticas.
Como as cadeias do DNA são antiparalelas e as DNA polimerases apenas constroem novas cadeias de DNA
no sentido 5'-3', uma das novas cadeias é sintetizada
continuamente (cadeia leading) e a outra
descontinuamente por meio de segmentos denominados
fragmentos de Okazaki, que se formam à medida que o
garfo da replicação avança (cadeia lagging).
Nota: estão tambem envolvidas neste processo single
strand binding proteins (estabilização das cadeias simples
para não se voltarem a juntar) e topoisomerases (impede a
acumulação de superenrolamentos).
Sendo assim, a replicação é:
✓ Bidirecional – ocorre para ambos os lados da Origem de replicação; as cadeias complementares são
sintetizadas com orientação antiparalela à da cadeia molde, no sentido 5'-3';
✓ Semidescontínua – uma cadeia cresce de modo contínuo, a outra cresce de modo descontínuo, sendo
os fragmentos unidos entre si por ligases;
✓ Semiconservativa – cada cadeia de DNA parental serve de molde à formação de uma nova cadeia,
resultando duas cadeias duplas, cada uma constituída por uma cadeia parental e uma cadeia nova.

Experiência de Meselson e Stahl

Cultivaram, durante várias gerações, bactérias num meio contendo precursores de nucleótidos marcados
com o isótopo pesado do nitrogénio (15N). Numa segunda etapa, transferiram aquelas bactérias para um
meio contendo apenas o isótopo leve do nitrogénio (14N). Foram retiradas três amostras bacterianas do
meio 14N: a primeira amostra imediatamente a seguir à transferência (G0 – pesadas), a segunda amostra
após o primeiro ciclo de replicação do DNA (G1 – híbridas) e a terceira após o segundo ciclo de replicação
(G2 – híbridas e leves). As moléculas de DNA bacteriano das três amostras foram extraídas e centrifugadas,
para que se separassem de acordo com as respetivas densidades.
Replicação semiconservativa – cada uma das moléculas originadas contém uma cadeia completa da
molécula original e uma cadeia nova.

Replicação conservativa – preserva a molécula original e gera uma molécula inteiramente nova.
Replicação dispersiva – produz duas moléculas com DNA original e novo, intercalados ao longo das
cadeias.
Resultados:
✓ As bactérias que tinham sido cultivadas num meio com 15 N (G0 – geração
parental) possuem um DNA denso, que se deposita no fundo do tubo.
✓ Depois de transferidas para um meio com 14 N, na geração G1 – 1a
geração –, cada molécula de DNA tem uma cadeia com 15N e outra com
14N (100% – híbridas) isto é, apresenta uma densidade intermédia entre o
DNA só com 15N e o DNA só com 14N.
✓ Na 2ageração, G2 obtêm-se 50% de moléculas de DNA com 15N14N e a
mesma percentagem de moléculas só com 14N.
Experiência de Kornberg

Experiência de Griffth Experiência de Avery

Laboratório
✓ Macerar – desagregar e separar as células / romper as paredes celulares
✓ Detergente – destruir as membranas celulares que são constituídas maioritariamente por lípidos
✓ Sal – os iões Na+ ajudam a diminuir as repulsões para que o DNA fique mais junto para a sua extração
✓ Álcool etílico – precipitar o DNA
✓ Estufa – o choque térmico causa uma libertação de gases que ajudam na ascensão do precipitado
✓ Sumo de ananás – as protéases contidas nele destroem as histonas para o DNA ser mais puro