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Modulações induzidas por níquel no metabolismo do fósforo e outros parâmetros de crescimento do trigo Vol. 11(1) pp.
1-4, maio de 2020
Disponível on-line https://www.interesjournals.org/basic-clinical-studies.html
DOI: http://dx.doi.org/10.14303/irjps.2020.003
Copyright © 2020 Revistas de Pesquisa Internacionais

Artigo de pesquisa completo

Modulações induzidas por níquel no


metabolismo do fósforo e outros parâmetros de crescimento d
, Shabeer Ahmad Dar2, Haneef
Naveed Gulzar1 *, Asif Hussain Hajam1 , Ishfaq Shafi Khan2
Mohammad Bhat2
1
Departamento de Botânica, Jamia Hamdard, 110062 Nova Delhi Índia
2
Centro de Pesquisa para o Desenvolvimento, Universidade da Caxemira, 190006 Srinagar, Índia

*E-mail do autor correspondente: naveedgulzar789@gmail.com

Abstrato

O níquel é considerado um micronutriente indispensável para as plantas, porém em concentração excessiva revela-se tóxico para as plantas
e a toxicidade deste metal tem sido atribuída ao seu efeito negativo em diversos parâmetros fisiológicos e bioquímicos como fotossíntese,
nutrição mineral, açúcar relação transporte e água vegetal. Neste estudo, foi avaliado que diferentes concentrações de níquel afetam
apreciavelmente os níveis de açúcar solúvel, prolina e glicinabetaína ao longo do metabolismo do fósforo em duas cultivares de trigo (UP2382
e VL616), mas a cultivar VL616 foi mais responsiva ao estresse por níquel. O presente estudo abrangeu duas linhas experimentais
envolvendo simultaneamente o tratamento de níquel, a saber. 50 ÿM (T1), 100 ÿM (T2) e 150 ÿM (T3) em ambas as cultivares (UP2382 e
VL616).
Os resultados do estudo indicaram alterações altamente significativas (p < 0,001) nos parâmetros biológicos avaliados em plantas de trigo
tratadas com níquel em comparação com seus controles. O estudo propôs que a cultivar VL616 foi mais responsiva ao estresse por níquel,
conforme evidenciado pelo maior acúmulo de açúcar, glicina betaína e teores de prolina, e exibiu diminuição mínima nos níveis de fosfato
durante o curso dos tratamentos com níquel do que a cultivar UP2382. Pode haver aumento nos níveis de ácido salicílico e ácido abcessico
na cultivar UP2382 do que na cultivar VL616, o que torna a cultivar UP2382 menos suscetível ao estresse por níquel. Dessa forma, o estresse
por Níquel leva à alteração de diversos parâmetros biológicos nas plantas de trigo e ao aumentar a concentração desse micronutriente, há
alterações variáveis nesses parâmetros. No entanto, as plantas combatem os factores de stress abióticos regulando os níveis destes
parâmetros biológicos.

Palavras-chave: Níquel; Estresse Abiótico; Plantas de trigo; Fósforo; Micro nutriente

INTRODUÇÃO (Cempel & Nikel, 2006). Estes compostos acabam por se acumular no
solo e no ambiente e podem ser facilmente absorvidos pelas plantas.
O níquel, um dos importantes poluentes metálicos da Terra, é motivo de Assim, podem entrar na cadeia alimentar e causar efeitos deletérios aos
preocupação significativa, porque a sua concentração está a aumentar animais e à vida humana (Cempel & Nikel, 2006). O crescimento e o
rapidamente nos solos de diferentes partes do mundo (Faryal et al., 2007; metabolismo das plantas são grandemente influenciados pelas
Atiq-ur-Rehman & Iqbal, 2008). O níquel forma um micronutriente essencial concentrações de níquel. Em concentrações mais baixas de níquel, mostra-
para o crescimento das plantas e também é um componente da enzima se benéfico para o crescimento e desenvolvimento das plantas, mas em
urease, necessária para o metabolismo do nitrogênio nas plantas concentrações mais elevadas apresenta efeitos deletérios nas plantas
superiores. Para o funcionamento metabólico normal das plantas, os (Kochian, 1991; Welch, 1995; Hasinur et al., 2005). O Ni está presente na
micronutrientes desempenham um papel essencial, mas em concentrações forma hidratada na solução do solo Ni (H2 O)2
mais elevadas são tóxicos para as plantas. A concentração de níquel no 6+
(Yusuf et al., 2011). Embora os
meio ambiente é consequentemente elevada pelas emissões de níquel efeitos tóxicos do excesso de níquel sejam evidentes durante o
provenientes de uma variedade de processos naturais e antropogênicos. desenvolvimento da cultura, a fase de germinação é considerada a mais
O aumento na concentração de níquel por meio de processos naturais sensível, particularmente ao níquel. O aumento da concentração deste
inclui o intemperismo de minerais e rochas, enquanto diferentes compostos micronutriente inibe a germinação de sementes e o crescimento de
de níquel (como acetato de níquel, carbonato de níquel, hidróxido de plântulas de diferentes espécies de plantas (Farooqi et al., 2009).
níquel e óxido de níquel) são usados em uma variedade de processos A inibição do crescimento induzida pelo Ni tem sido atribuída à regulação
industriais que compõem esse micronutriente e leva à toxicidade negativa da síntese protéica e das atividades de algumas enzimas-chave
responsáveis pela mobilização de alimentos.
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2 Int. Res. J. Planta. Ciência.

reservas durante a germinação das sementes (Bishnoi et al., 1993). nm usando tolueno como branco. A concentração de prolina nas
Além disso, o Ni é um competidor ativo bem conhecido de uma série de amostras foi calculada em relação à curva padrão de prolina, expressa
micro e macroelementos indispensáveis e supostamente reduz a em ÿg g-1 de peso fresco.
absorção de elementos nas sementes em germinação, resultando assim
em má germinação e estabelecimento de plântulas (Korner et al. , 1987; Teor de açúcar solúvel nas folhas
A fim de superar os efeitos negativos das altas concentrações de níquel O teor de açúcar solúvel foi estimado empregando o método fenol-ácido
nas plantas, a adição de suplemento Ca2+ poderia ser usada para sulfúrico de (Dubois et al., 1956). Resumidamente, 0,5g de amostras de
superar o efeito negativo. folhas foram extraídas adicionando 80% (v/v) de metanol mantendo a
solução a 70°C em um banho d'água. O extrato resultante foi centrifugado

O trigo é uma cultura cultivável importante depois do arroz em todo o a 5.000 x g por 10 min a 4°C. O sobrenadante foi coletado e tratado com

mundo. O presente estudo foi conduzido para avaliar o efeito de diferentes fenol a 5% e ácido sulfúrico a 98%. A mistura reacional foi mantida por 1
concentrações de Níquel em diferentes parâmetros em duas cultivares de hora e então a absorbância foi medida a 485 nm. O teor de açúcar

trigo. Neste cenário, constatou-se que maiores concentrações deste solúvel foi calculado em mMg-1FW.

micronutriente provocam alterações razoáveis no teor de fósforo e outros


parâmetros em ambas as cultivares. Entretanto, a cultivar UP2382
Estimativa do conteúdo de glicina betaína
apresentou maior resistência ao estresse por Níquel que a cultivar VL616.
O conteúdo de glicina betaína foi determinado seguindo o procedimento
de (Grieve & Grattan, 1983). Resumidamente, 0,5 g de material foliar
foram homogeneizados com 20 ml de água mili-Q por 48 horas e
MATERIAIS E MÉTODO
filtrados. O filtrado foi diluído com volume igual de H2SO4 1M mantido
Sementes autenticadas de dois genótipos (UP2382 e VL616) de Triticum em água gelada durante 1 hora para resfriamento e então foi adicionado
aestivum foram retiradas da Divisão de Genética, IARI, Nova Delhi, Índia. reagente iodeto-iodo de potássio frio. A mistura foi suavemente agitada
Após lavagem completa das sementes com água, as sementes foram em vórtice, armazenada a 4°C durante a noite e centrifugada a 12.000
esterilizadas superficialmente com cloreto mercúrico a 0,01%. As sementes xg por 15 min a 4°C. Os cristais de periodeto precipitados foram
foram novamente lavadas com água destilada e semeadas em vasos recolhidos e dissolvidos em 1,2-dicloroetano, e a absorvância foi medida
contendo a mistura de areia e vermiculita (1:1). Após a germinação, três a 365 nm após 2 h utilizando glicinabetaína (dissolvida em H2SO4 1 M )
plantas foram mantidas em cada vaso (Hummert International, Earth City, como padrão. O conteúdo de glicinebetaína foi calculado em ÿg g-1 FW.
MO, EUA) e as plantas foram cultivadas em solução Hoagland (Hoagland
& Arnon 1950) de um quarto da concentração durante os primeiros 10
dias. Nos próximos dez dias com metade da solução de Hoagland e com
Estimativa do teor de fosfato
força total nos últimos dez dias. As plantas foram cultivadas em câmara
de crescimento sob condições controladas de luz (fotoperíodo de 16h), O teor de fosfato foi estimado pelo método de (Ames, 1966).
temperatura (270 C) e umidade (60%). Os tratamentos seguintes foram Resumidamente, 0,5g de amostra de folha foi coletada em cadinho de sílica.
administrados a plantas com 30 dias de idade, T0 = 0 ÿM Ni, T1 = 50 ÿM Adicionou-se-lhe um ml de Mg (NO3 ).6H2O a 10% (em etanol a 95%)
Ni, T2 = 100 ÿM Ni, T3 = 150 ÿM Ni. Os genótipos tratados foram colhidos antes de o transformar em pó numa mufla a 600ÿC durante quatro horas.
em triplicata juntamente com o controle de cada genótipo durante a Mistura de reação (2,3 ml) contendo 10% de ácido ascórbico e 0,42% de
amostragem. 48 plantas de cada variedade foram agrupadas em 4 grupos, (NH4 ) 6Mo7O24.4H2O (preparada em H2SO4 0,5M ) na proporção de
cada grupo incluindo 3 plantas de cada variedade. Folhas de plantas com 1:6 e a solução foi mantida por 10 min a 45ÿC para completar a reação.
30 dias de idade foram extirpadas e utilizadas para exame experimental. reação. A absorbância foi medida a 820 nm e o teor de fósforo foi
Todo o procedimento experimental envolve a utilização de três réplicas calculado a partir da curva padrão preparada usando KH2 PO4 de grau
biológicas. analítico . O teor de fosfato foi determinado em ÿg g-1 FW.

Análise estatística
Estimativa do conteúdo de prolina
Realizamos a análise estatística utilizando ANOVA unidirecional utilizando
O conteúdo de prolina foi determinado seguindo o método de (Bates et o teste de faixa múltipla de Duncan (SPSS17.0); Os resultados foram
al., 1973). 0,5 g de amostra de folha foi homogeneizada em ácido comparados quanto à significância em p<0,05 e os resultados foram
sulfossalicílico a 3% (10ml) seguido de centrifugação a 10.000 rpm por 10 apresentados como média ± DP (n = 3).
minutos. O sobrenadante (2ml) foi colocado em tubo de ensaio e foram
RESULTADOS E DISCUSSÃO
adicionados 2 ml de ninidrina ácida juntamente com 2 ml de ácido acético
glacial. A mistura foi incubada a 100 ÿC em banho-maria por uma hora e
Alterações induzidas por estresse de níquel no conteúdo de prolina
os tubos foram colocados em banho de gelo para finalizar a reação. 4ml
de tolueno foram adicionados a cada tubo e misturados vigorosamente
em vórtex por 10-30 segundos. A camada sobrenadante foi retirada da O teor de prolina aumentou linearmente com o aumento da concentração
mistura e a absorbância medida a 520 de Ni. A cultivar VL616 apresentou maiores teores deste aminoácido que
a UP2382 em todos os tratamentos, significando
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Gulzar N, et al. 3

o potencial diferencial das duas cultivares em termos de regulação da significativo (P > 0,05) em T2 em comparação aos seus respectivos
defesa associada à prolina durante condições de estresse (Tabela 1). controles (Tabela 1). O aumento do teor de açúcares pode ser devido ao
metabolismo alterado de carboidratos na planta para sintetizar açúcares
para manter o crescimento sob estresse. Nossos resultados foram
Mudança no teor de açúcar das folhas durante o estresse com Ni apoiados pelos estudos anteriores de (Amini & Ehsanpourr, 2005).
Durante nosso estudo houve um aumento significativo no teor de açúcar
total com o aumento do tratamento com níquel com o nível máximo exibido A glicina betaína mantém o equilíbrio osmótico e a estabilidade das
pela cultivar VL616 (Tabela 1). proteínas e das membranas (Chen e Murata, 2011).
VL616 apresentou aumento altamente significativo (P <0,001) no conteúdo
Variação no teor de glicinebetaína das folhas durante o estresse com
de glicina betaína em T3 em comparação com seu controle.
Ni
Entretanto, UP2382 apresentou aumento significativo (P < 0,05) em
Houve aumento considerável no nível de glicinabetaína com aumento nas relação ao seu controle em T3 e não significativo (P > 0,05) em T2 em
concentrações de níquel. A cultivar VL616 foi mais responsiva com o relação ao seu controle (Tabela 1). O nível aumentado de glicina betaína
maior acúmulo desses osmólitos (Tabela 1). pode ser atribuído ao aumento da síntese deste osmólito sob condições
de estresse. Uma tendência semelhante de aumento de glicina betaína foi
observada anteriormente em sorgo, milho, tomate, algodão e trigo
Mudanças no metabolismo do fósforo sob estresse de Ni
(Saneoka et al., 2001; Park et al. ., 2004;

Houve um declínio considerável no nível de fosfato nas plantas sob


tratamentos com níquel, possivelmente devido à diminuição na absorção
O fósforo é um elemento essencial tanto para a estrutura celular quanto para as
de fosfatos do solo. A cultivar UP2382 foi mais responsiva com declínio
funções úteis na planta. É parte integrante dos ácidos nucléicos e das membranas
máximo no teor de fósforo em comparação à cultivar VL616 (Tabela 1).
e desempenha um papel indispensável na fotossíntese e na sinalização celular.
O tratamento com níquel induziu mudanças substanciais no metabolismo do
A prolina é um dos osmólitos primários que tem papel fundamental no fósforo do trigo, conforme revelado pela alteração nos níveis de fosfato e nas
ajuste osmótico além de funcionar na defesa antioxidante e estabilização enzimas metabolizadoras de fosfato, incluindo a fosfatase ácida e a fosfatase
de proteínas e organelas (Sumitra et al., 2006; Anjum et al., 2014). As alcalina. Os resultados mostraram que no monitoramento dos níveis de fosfato
plantas de trigo exibiram alterações consideráveis no teor de prolina em nas plantas durante o tratamento com níquel, houve diminuição do fosfato durante
ambas as cultivares após os tratamentos com níquel. O resultado do teor os tratamentos com níquel. Há uma diminuição altamente significativa (P <0,001)
de prolina mostrou aumento altamente significativo (P < 0,001) nos níveis de fosfato na cultivar (UP2382) em comparação com o seu controle,
conforme mostrado na (Tabela 1). A resposta do trigo ao tratamento com níquel
em T3 em comparação com seu controle na cultivar VL616. No entanto, foi dependente tanto do cochilo quanto do cultivar. Ni, o micronutriente em
ambas as cultivares (UP2382 e VL616) apresentaram aumento significativo concentrações mais baixas tem algum papel no crescimento e desenvolvimento
(P <0,5) no teor de prolina enquanto T2 conforme mostrado na (Tabela 1). das plantas, mas quando a concentração deste micronutriente é elevada, resulta
A possível razão para o incremento na síntese de prolina pode em níveis de estresse nas plantas e em concentrações mais altas leva à inibição
possivelmente ser o aumento dos níveis deste aminoácido em plantas
do crescimento e desenvolvimento de cloróticos, necróticos e processos de
estressadas com níquel. Nossos resultados estão de acordo com as
murcha nas plantas. As plantas podem desenvolver com eficiência sintomas de
descobertas anteriores de maior teor de prolina em cultivares de trigo por
fatores de estresse e resultar na alteração das concentrações de parâmetros
(Iqbal et al., 2014).
bioquímicos. Neste estudo, o VL616 apresentou maiores alterações nos níveis de
Os açúcares também desempenham um papel crucial na manutenção das diversos parâmetros bioquímicos do que o cultivar UP2382, resultando que o
vias metabólicas primárias e no ajuste osmótico. Quase metade do cultivar VL616 foi mais propenso ao estresse.
equilíbrio osmótico total mantido pelas plantas sob estresse é devido
apenas aos açúcares solúveis. Nossos resultados mostraram aumento
altamente significativo (P < 0,001) no teor de açúcares solúveis em T2 e
T3 na cultivar (VL616), porém a cultivar (UP2382) em T3 apresentou
aumento significativo (P < 0,05) e não-

Tabela 1. Alteração em vários conteúdos de fosfato e outros parâmetros bioquímicos.


Para T1 T2 T3
Parâmetros
(Ao controle) (50 ÿmNi) (100 ÿmNi) (150 ÿmNi)
V1 6,3±0,32a V1 7,9±0,12a V1 8,7±0,14b V1 11,3±0,12b
Prolina
V2 6,82±0,10a V2 8,7±0,08b V2 9,4±0,16b V2 13,8±0,08bc
V1 5,81±0,08a V1 6,5±0,20a V1 8,83±0,20b V1 10,7±0,15b
Açúcar solúvel V2 5,83±0,24a V2 7,10±0,08b V2 10,1±0,29bc V2 13,2±0,37bc
V1 5,3±0,12a V1 6,8±0,08a V1 8,4±0,19a V1 10,4±0,06b
Glicina betaína V2 5,3±0,34a V2 9,5±0,20b V2 11,6±0,26b V2 14,0±0,28bc
V1 13,3±0,33bc V1 8,5±0,26b V1 6,5±0,20a V1 5,4±0,16a
Fosfato V2 12,1±10,3bc V2 10,3±0,10bc V2 9,8±0,04b V2 6,2±0,24a
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4 Int. Res. J. Planta. Ciência.

Os valores são representados como média ± DP (n = 3). Os Bishnoi N, Sheoran I, Singh R (1993). Efeito do cádmio e do níquel na mobilização de
reservas alimentares e atividades de enzimas hidrolíticas na germinação de
dados foram analisados por ANOVA usando o teste de faixa
sementes de feijão bóer. Biol. Planta 35, 583.
múltipla de Duncan (SPSS17.0); a P > 0,05 (não significativo), b
Cempel M, Nikel G (2006). Níquel: uma revisão de suas fontes e toxicologia ambiental.
P < 0,05 (significativo em comparação com seu controle), bc P <
Revista Polonesa de Estudos Ambientais 15: 375-382.
0,001 (altamente significativo em comparação com seu controle)

CONCLUSÃO Chen T, Murata N (2011). A glicinebetaína protege as plantas contra o estresse abiótico:
mecanismos e aplicações biotecnológicas. Ambiente de células vegetais 34: 1–20.
Os resultados obtidos neste estudo indicaram que a toxicidade do níquel nas
plantas leva à inibição dos processos de crescimento, clorótico, necrótico e
Desingh R, Kanagaraj G (2007). Influência do estresse salino na fotossíntese e nos
murcha. A toxicidade deste metal tem sido atribuída ao seu efeito negativo na sistemas antioxidantes em duas variedades de algodoeiro.
fotossíntese, na nutrição mineral, no transporte de açúcar e nas relações Gen Appl Fisiologia Vegetal 33:221–234.

hídricas. O Ni em diferentes concentrações influencia consideravelmente as Dubois M, Gilles KA, Hamilton JK, Rebers PA, Smith F (1956).
reações bioquímicas das plantas, incluindo o metabolismo do fósforo e os Método colorimétrico para determinação de açúcares e substâncias relacionadas.
Anal. Química. 28:350-356.
conteúdos de glicinabetaína e prolina. Em resposta ao estresse, as plantas
apresentam alterações variáveis nesses parâmetros bioquímicos. Neste Farooqi ZR, Zafar Iqbal M, Kabir M, Shafiq, M (2009). Efeitos tóxicos do chumbo e do
estudo, duas linhagens de trigo apresentaram respostas diferentes aos aditivos cádmio na germinação e no crescimento de plântulas de Albizia lebbeck (L.) Benth.
Pacote. J. Bot. 41(1): 27-33.
de níquel em concentrações variáveis e os resultados determinaram que a
variedade VL616 é grandemente influenciada pelos níveis de estresse, pois há Faryal R, Tahir F, Hameed A (2007). Efeito da irrigação com águas residuais no solo e
alteração máxima nesses parâmetros bioquímicos em comparação com a na sua micro e macroflora. Pacote. J. Bot. 39:193–
204
variedade UP2382. Essas descobertas variáveis nos resultados podem ser
devidas à presença de alto teor de flavonóides, fitoalexinas, compostos Grieve CM, Grattan SR (1983). Ensaio rápido para determinação de compostos de
amônio quaternário solúveis em água. Solo Vegetal 70: 303-307.
fenólicos e aumento nas vias de sinalização de defesa na cultivar UP2382 do
que na VL616 para combater o estresse, pois devido ao aumento dos níveis
Hasinur R, Shamim S, Shah A, Shigenao KW (2005). Efeitos do níquel no crescimento
de estresse dos metais pesados, UP2382 é considerado resistente que o
e composição de micronutrientes metálicos em plantas de cevada cultivadas em
VL616. solução nutritiva. J. Nutrição Vegetal 28: 393-404.

Iqbal N, Umar S, Khan NA, Khan MIR (2014). Uma nova perspectiva dos fitohormônios
na tolerância à salinidade: regulação do metabolismo da prolina. Meio Ambiente.
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O estudo indicou que o níquel é considerado um micronutriente Kochian LV (1991). Mecanismos de absorção e translocação de micronutrientes nas
plantas, In: Micronutrientes na Agricultura. (Ed.): JJ Mortvedt. Sociedade de
essencial para as plantas, porém em concentrações excessivas
Ciência do Solo da América, Madison, WI pp.
este metal torna-se tóxico para a maioria das espécies vegetais.
Este estudo ajudará os pesquisadores a utilizar os micronutrientes
Körner LE, Møller LM, Jensén P (1987). Efeitos do Ca2+ e outros cátions divalentes na
de maneira adequada e aplicações maiores desse micronutriente
absorção de Ni2+ pelas raízes de cevada excisadas.
serão fatais para o crescimento das plantas e levarão ao estresse Fisiol. Planta 71: 49-54.
abiótico nas plantas.
Pandey N, Sharma CP (2002). Efeito dos metais pesados no crescimento e metabolismo
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Parque E, Jeknic J, Sakamoto Z, DeNoma A, Yuwansiri J, Murata R, Chen NTHH


O autor gostaria de agradecer ao departamento de Botânica da (2004). A engenharia genética da síntese de glicina betaína no tomate protege
Universidade Jamia Hamdard por fornecer todas as instalações sementes, plantas e flores dos danos causados pelo frio. Planta J.40:474–487.
laboratoriais para a conclusão deste trabalho.
Saneoka H, Ishiguro S, Moghaieb REA (2001). Efeito da salinidade e do ácido abscísico
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