Efeito do Etileno na Abciso Foliar

Trabalho n4

Daniela Costa e Sousa Filipa Frana de Barros Lus Manuel M. V. L. Tavares Marta Filipa P. M. Gonalves

Fisiologia Vegetal Licenciatura em Bioqumica Com a orientao das docentes: Paula Melo Fernanda Fidalgo 2011-2012

Este trabalho tem o objetivo de estudar as consequncias das alteraes da quantidade de etileno que atuam ao nvel da abciso foliar de uma planta, relacionando a ao desta hormona com outra tambm muito influente neste processo, as auxinas.

Introduo
Por altura do Outono, a alterao de determinadas condies, nomeadamente a diminuio de luz, leva a que a taxa de fotossntese diminua significativamente, ou seja, a planta armazena menor quantidade de energia. Esta condio induz nas plantas um processo de defesa, que se repercute na diminuio de gastos de energia. Para isso, a planta tende a desenvolver mecanismos para provocar a queda das folhas, pois tem assim menos constituintes para alimentar e onde gastar as reservas nutricionais originrias da fotossntese. Para este efeito, a planta sofre uma regulao hormonal, que ir controlar o processo de abciso foliar, na qual intervm dois tipos de hormonas vegetais essenciais: o etileno e as auxinas. O etileno uma fito hormona produzida pelas plantas superiores. Usualmente, as regies meristemticas e nodais so as mais ativas na biossntese de etileno, a qual aumenta durante a abciso foliar e a sinescncia floral, bem como durante o amadurecimento dos frutos. Este, sendo um gs, liberta-se do tecido, difunde-se na fase gasosa atravs dos espaos intercelulares e para o exterior do tecido. biologicamente ativo em concentraes muito baixas e a sua sntese estimulada por vrios factores, incluindo o estado de desenvolvimento, as condies ambientais e outras fito hormonas. As auxinas so outro tipo de fito hormonas envolvidas na abciso foliar. As variaes de concentrao desta fito-hormona tm um papel importante na produo do etileno, pelo que as duas mantm uma estreita relao. Uma teoria que diz respeito ao controlo da abciso foi proposta por Reid em 1995 e d um papel importante ao gradiente da auxina que se estabelece entre o limbo e o caule. Defende que no controlo hormonal da abciso se podem distinguir trs fases sequenciais: Quando ainda no houve sinal para se iniciar a abciso, as folhas produzem auxinas, que so enviadas para o caule, estabelecendo-se um gradiente de auxina; nesta fase, quando os nveis de auxina so elevados, as clulas da zona de abcisao esto insensveis ao etileno. Seguidamente h uma reduo nos nveis de auxina e aumento da produo do etileno, as clulas da zona de abciso tornam-se sensveis ao etileno. Numa terceira fase, as clulas sensibilizadas da zona de abciso vo produzir as enzimas que degradam a parede celular, levando a abciso. O objetivo deste trabalho foi a anlise da influncia destas hormonas e de outras substncias anlogas ou suas inibidoras no processo de abciso foliar.

Daniela Sousa; Filipa Barros; Lus Tavares; Marta Gonalves

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Material e mtodos
Reagentes: NAA (cido naftalenoactico) 1% em lanolina previamente aquecida; Ciclo-heximida 1 g/mL em lanolina previamente aquecida; Agar 3% (p/v); Tampo fosfato 0,05 M pH 7,5; Ethrel (cido 2-cloroetil-fosfnico) 100 mg/dm3; Tiossulfato de prata (0,1M).

Execuo laboratorial: 1. Selecionaram-se segmentos de folhas de Jacaranda sp. com 4 pares de pnulas. Destacaram-se os 2 pares de pnulas mais basais e removeu-se 1/3 do limbo das restantes pnulas. 2. Colocaram-se 6 explantes em cada caixa de Petri, qual foi removida uma poro de agar e efetuaram-se os tratamentos a seguir descritos (A-F): A - Sem tratamento. B - NAA 1% em lanolina diretamente sobre a zona de abciso. C Antes de se terem colocado os explantes, a parte da placa sem agar foi forrada com papel de filtro. Deitou-se 1 mL da soluo de Ethrel sobre o papel de filtro. Adicionouse 1 mL de tampo fosfato 0,05 M pH7,5 e colocaram-se, ento, os explantes no agar. Vedou-se imediatamente a placa com parafilme. D Aplicou-se ciclo-heximida em lanolina sobre a zona de abciso. E Aplicou-se ciclo-heximida em lanolina sobre a zona de abciso, e Ethrel + tampo fosfato na placa (como em C). F Como em A, mas os explantes usados foram previamente mergulhados na soluo de tiossulfato de prata (durante cerca de 30-60 min., na obscuridade).

3. Colocaram-se as placas de Petri na obscuridade, temperatura ambiente.

Daniela Sousa; Filipa Barros; Lus Tavares; Marta Gonalves

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Resultados
Aps a preparao da experincia, contabilizou-se diariamente o nmero total de pnulas cadas at ao momento da observao, para cada placa individualmente, ao longo de 7 dias.

Dia 1 2 3 4 5 6 7

% de abciso 0 0 14 28 84 100 100

100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0 0 1 2

Placa A

% de abciso

3 Dia

Figura 1. Tabela e grfico correspondentes aos resultados da Placa A.

Dia 1 2 3 4 5 6 7

% de abciso 0 0 0 5,00 14,00 28,00 42,00

50 45 40 35 30 25 20 15 10 5 0

Placa B

% de abciso

Dia

Figura 2. Tabela e grfico correspondentes aos resultados da Placa B.

Daniela Sousa; Filipa Barros; Lus Tavares; Marta Gonalves

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Dia 1 2 3 4 5 6 7

% de abciso 0 50 75,0 83,0 100,0 100,0 100,0

100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0
0 1 2

Placa C

% de abciso

3 Dia

Figura 3. Tabela e grfico correspondentes aos resultados da Placa C.

Dia 1 2 3 4 5 6 7

% de abciso 0 0 5,0 17,0 28 50 50,0

50 40
% de abciso

Placa D

30 20 10 0 0 1 2 3 4 5 6 7

Dia

Figura 4. Tabela e grfico correspondentes aos resultados da Placa D.

Dia 1 2 3 4 5 6 7

% de abciso 0 0 42,00 50,0 56,0 75,0 100,0

100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0
0 1 2

Placa E

% de abciso

Dia

Figura 5. Tabela e grfico correspondentes aos resultados da Placa E.

Daniela Sousa; Filipa Barros; Lus Tavares; Marta Gonalves

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Dia 1 2 3 4 5 6 7

% de abciso 0 0 17,0 19,0 22 25 50

50 45 40 35 30 25 20 15 10 5 0
0 1 2

Placa F

% de abciso

Dia

Figura 6. Tabela e grfico correspondentes aos resultados da Placa F.

Abciso Foliar
100 90 80

70
60 50 40 30 20 10 0 0 1 2 3 4 5 6 7

Placa A
Placa B Placa C Placa D Placa E Placa F

Grfico 1. Resultados da abciso foliar em plantas de Jacaranda sp.

Daniela Sousa; Filipa Barros; Lus Tavares; Marta Gonalves

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Discusso
Esta experincia foi programada para a durao de sete dias. Para que se obtivesse resultados favorveis, no espao de tempo em causa, retirou-se a cada pnula cerca de 1/3 do limbo, para que a quantidade de auxina que atingisse o pecolo fosse reduzida. Esta remoo foi interpretada pela planta como um trauma, levando a que a produo de etileno fosse aumentada mais rapidamente, de modo a eliminar as folhas sem utilidade. Tambm se manteve as plantas em condies de pouca luminosidade para simular a situao real da poca caracterstica para a absciso foliar, o Outono. Estes dois fatores em conjunto foram condicionantes no sentido de se acelerar o processo de abciso foliar na experincia. Na placa A (controlo) a abciso deu-se completamente uma vez que, por um lado, no houve um aporte de nutrientes s pnulas, j que no estavam ligadas planta me; por outro lado, a remoo de um tero do limbo das folhas fez com que a produo de auxinas fosse minimizada, actuando com mais intensidade o etileno (que tambm foi estimulado pelo trauma) no pecolo das folhas, levando sua queda. Na placa B a abciso foi atrasada pela presena do NAA. O NAA, sendo uma auxina, inibiu o efeito do etileno no pecolo das folhas (caso contrrio, este levaria queda da folha), sendo esta a placa com a menor taxa de abciso no intervalo de tempo considerado. O NAA foi mantido em contacto com o pecolo graas lanolina. A placa C foi tratada com Ethrel. Este, ao ser metabolizado pela planta, foi convertido em etileno, acelerando a queda foliar. Esta foi a placa que perdeu as folhas mais rapidamente, por esta razo. (O tampo fosfato adicionado cria o pH adequado para a entrada do ethrel na planta). Na placa D, o pecolo das plantas foi tratado com cicloheximida, um inibidor da biossntese de protenas hidrolticas. Apesar do pecolo da planta ter estado sobre o efeito do etileno, a cicloheximida impediu que as protenas que o degradam fossem produzidas, atrasando o processo de abciso. Na placa E foram administrados a cicloheximida e o ethrel, que tm funes diferentes (o ethrel ajuda ao processo de abciso e a cicloheximida atrasa-o). Como se pode ver pelo grfico 1, a abciso deu-se completamente, pelo que se pode concluir que a aco do ethrel na abciso foliar significativamente mais importante do que da cicloheximida. No entanto, note-se que at ao terceiro dia, a abciso deu-se mais rapidamente do que nos restantes. Isto explicado por o ethrel ser absorvido mais rapidamente, actuando primeiro. A cicloheximida, absorvida mais lentamente, vai actuar posteriormente, notando-se o seu efeito mais tarde. (Mais uma vez, o tampo fosfato apenas criou as condies certas para a assimilao do ethrel pela planta). Na placa F, as plantas foram mergulhadas numa soluo de tiossulfato de prata durante um perodo de tempo curto e na obscuridade. O tiossulfato de prata um inibidor do etileno, pelo que a taxa de queda das folhas nesta placa foi baixa, no chegando a 100% de abciso no perodo considerado.
Daniela Sousa; Filipa Barros; Lus Tavares; Marta Gonalves

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Bibliografia

Taiz, L. and Zeiger, E. 2010. Plant Physiology, Fifth Edition. Sinauer Associates Melo P., Fidalgo F., 2011/2012. Fisiologia Vegetal Guia dos Trabalhos Prticos. Faculdade de Cincias da Universidade do Porto.

Daniela Sousa; Filipa Barros; Lus Tavares; Marta Gonalves

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