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Physiol. Res. 50: 536-546, 2001

MINIREVISÃO

Mecanismo de ação do Alloxan e da Estreptozotocina nas

células B do pâncreas do rato
T. SZKUDELSKI

Departamento de Fisiologia e Bioquímica Animal, Universidade de Agricultura, Poznan, Polónia

Recebido em 2 de novembro de 2000

Aceite em 20 de março de 2001

Resumo
O alloxano e a estreptozotocina são amplamente utilizados para induzir diabetes experimental em animais. O
mecanismo da sua ação nas células B do pâncreas tem sido intensamente investigado e é agora bastante bem
compreendido. A ação citotóxica de ambos os agentes diabetogénicos é mediada por espécies reactivas de oxigénio,
mas a fonte da sua geração é diferente no caso do aloxano e da estreptozotocina. O aloxano e o produto da sua redução,
o ácido dialúrico, estabelecem um ciclo redox com a formação de radicais superóxido. Estes radicais sofrem dismutação
em peróxido de hidrogénio. Seguidamente, formam-se radicais hidroxilo altamente reactivos através da reação de
Fenton. A ação das espécies reactivas de oxigénio com um aumento simultâneo maciço da concentração de cálcio
citosólico provoca a destruição rápida das células B. A estreptozotocina entra na célula B através de um transportador
de glucose (GLUT2) e provoca a alquilação do ADN. Os danos no ADN i n d u z e m a ativação da poli ADP-
ribosilação, um processo que é mais importante para a diabetogenicidade da estreptozotocina do que os próprios danos
no ADN. A poli ADP-ribosilação leva à depleção do NAD celular+ e do ATP. O aumento da desfosforilação do ATP
após o tratamento com estreptozotocina fornece um substrato para a xantina oxidase, resultando na formação de radicais
superóxidos. Consequentemente, são também gerados peróxido de hidrogénio e radicais hidroxilo. Além disso, a
estreptozotocina liberta quantidades tóxicas de óxido nítrico que inibe a atividade da aconitase e participa na lesão do
ADN. Como resultado da ação da estreptozotocina, as células B são destruídas por necrose.

Palavras chave
Alloxano - Estreptozotocina - Células B pancreáticas - Mecanismo de ação - Diabetes

A indução de diabetes experimental no rato As células B do pâncreas, bem como em todo o

utilizando substâncias químicas que destroem
seletivamente as células B pancreáticas é muito
conveniente e simples de utilizar. As substâncias mais
comuns para induzir a diabetes no rato são o aloxano e a
estreptozotocina. A compreensão das alterações na
organismo após o tratamento com aloxano ou
estreptozotocina, são essenciais para a utilização destes
compostos como agentes diabetogénicos. Os distúrbios
metabólicos em ratos tratados com aloxano e
estreptozotocina foram descritos recentemente por
Szkudelski et al.
INVESTIGAÇÃO
FISIOLÓGICAIS
SN 0862-8408
©2001 Institute of Physiology, Academy of Sciences of Czech Republic, Prague, Czech Republic Fax+420224920590
E-mail physres@biomed.cas.cz http://www.biomed.cas.cz/physiolres/s.htm
538 Szkudelski Vol. 50

de uma supressão completa da resposta das ilhotas à

(1998). Esta revisão centra-se na elucidação do
glicose,
mecanismo de ação citotóxica do aloxano e da
estreptozotocina nas células B do pâncreas do rato.

1. O mecanismo de ação do aloxano

O aloxano (2,4,5,6-tetraoxipirimidina; 5,6-dioxi-ura-

cil) foi descrito pela primeira vez por Brugnatelli em
1818. Wöhler e Liebig utilizaram o nome "alloxan" e
descreveram a sua síntese por oxidação do ácido úrico
(para revisão, ver Lenzen e Panten 1988). As
propriedades diabetogénicas deste fármaco foram
relatadas muitos anos mais tarde por Dunn, Sheehan e
McLethie (1943), que estudaram o efeito da sua
administração em coelhos e relataram uma necrose
específica das ilhotas pancreáticas. Desde então, a
diabetes aloxana tem sido comummente utilizada como
modelo animal de diabetes mellitus dependente de
insulina (IDDM).
O aloxano exerce a sua ação diabetogénica quando é
administrado por via parentérica: intravenosa,
intraperitoneal ou subcutânea. A dose de aloxano
necessária para induzir a diabetes depende da espécie
animal, da via de administração e do estado nutricional.
As ilhotas humanas são consideravelmente mais
resistentes ao aloxano do que as da ratazana e do rato
(Eizirik et al. 1994). A dose intravenosa mais
frequentemente utilizada deste medicamento para induzir
diabetes em ratos é de 65 mg/kg de peso corporal
(Gruppuso et al. 1990, Boylan et al. 1992). Quando o
aloxano é administrado por via intraperitoneal ou
subcutânea, a sua dose efectiva deve ser 2-3 vezes
superior. A dose intraperitoneal inferior a 150 mg/kg
b.w. pode ser insuficiente para induzir diabetes no rato
(Katsumata et al. 1992, 1993). Os animais em jejum são
mais susceptíveis ao aloxano (Katsumata et al. 1992,
Szkudelski et al. 1998), enquanto o aumento da glicose
no sangue proporciona uma proteção parcial (Bansal et
al. 1980, Szkudelski et al. 1998).
O mecanismo de ação do aloxano foi intensamente
estudado, predominantemente in vitro, e está atualmente
bem caracterizado. Utilizando ilhéus isolados (Weaver et
al. 1978b) e pâncreas de rato perfundido (Kliber et al.
1996), foi demonstrado que o aloxano provoca um
aumento súbito da secreção de insulina na presença ou na
ausência de glicose. Este fenómeno surge imediatamente
após o tratamento com aloxano e não é observado após
exposição repetida dos ilhéus a este agente diabetogénico
(Weaver et al. 1978b). O aumento súbito da concentração
de insulina no sangue foi também observado in vivo
imediatamente após a injeção de aloxano em ratos
(Szkudelski et al. 1998). A libertação de insulina induzida
pelo aloxano é, no entanto, de curta duração e é seguida
2001 Ação do Alloxano e da 539
Estreptozotocina

mesmo quando se utilizam concentrações elevadas (16,6

mM) deste açúcar (Kliber et al. 1996).
O Alloxan é uma substância hidrofílica e instável. A
sua semi-vida a pH neutro e a 37 °C é de cerca de 1,5
min, sendo mais longa a temperaturas mais baixas
(Lenzen e Munday 1991). Por outro lado, quando é
utilizada uma dose diabetogénica, o tempo de
decomposição do aloxano é suficiente para permitir que
este atinja o pâncreas em quantidades deletérias.
A ação do aloxano no pâncreas é precedida pela sua
rápida absorção pelas células B (Weaver et al. 1978a,
Boquist et al. 1983). Foi proposto que a rápida absorção
pelas células secretoras de insulina é uma das
características importantes que determinam a
diabetogenicidade do aloxano. Outro aspeto diz respeito
à formação de espécies reactivas de oxigénio (Heikkila
et al. 1976). No fígado também se regista uma absorção
semelhante de aloxano. No entanto, o fígado e outros
tecidos são mais resistentes às espécies reactivas de
oxigénio do que as células B pancreáticas e esta
resistência protege-os contra a toxicidade do aloxano
(Malaisse et al. 1982, Tiedge et al. 1997). A formação
de espécies reactivas de oxigénio é precedida pela
redução do aloxano. Nas células B do pâncreas, a sua
redução ocorre na presença de diferentes agentes
redutores. Uma vez que o aloxano apresenta uma
elevada afinidade para os compostos celulares que
contêm SH, a glutationa reduzida (GSH), a cisteína e os
grupos sulfidrilo ligados às proteínas (incluindo as
enzimas que contêm SH) são muito susceptíveis à sua
ação (Lenzen e Munday 1991). No entanto, outros
agentes redutores, como o ascorbato, podem também
participar nesta redução (Zhang et al. 1992). Lenzen et
al. (1987) propuseram que um dos compostos contendo
SH essenciais para a secreção adequada de insulina
induzida pela glucose é a glucocinase (EC 2.7.1.2),
sendo muito vulnerável ao aloxano. O aloxano reage
com dois grupos -SH no lado de ligação do açúcar da
glucoquinase, resultando na formação de uma ligação
dissulfureto e na inativação da enzima. A glicose pode
proteger a glucocinase contra a inativação, impedindo o
acesso do aloxano aos grupos -SH da enzima (Lenzen et
al. 1987, 1988, Lenzen e Mirzaie-Petri 1991).
O ácido dialúrico é formado como resultado da
aloxana
redução. Em seguida, é re-oxidado de novo em aloxano,
estabelecendo um ciclo redox para a geração de radicais
superóxidos (Munday 1988). A reação entre o aloxano e
o ácido dialúrico é um processo em que se formam
radicais intermédios de aloxano (HA• ) e um "composto
305" não identificado (absorção máxima a 305 nm). Este
último surge quando o aloxano é reduzido pela GSH
(Sakurai e Ogiso 1991). Os radicais superóxido são
540 Szkudelski
capaz de libertar iões férricos da ferritina e de os reduzir a
iões ferrosos. O Fe3+ também pode ser reduzido por
radicais de aloxano (Sakurai e Ogiso 1995). Além disso,
os radicais superóxido sofrem dismutação em peróxido de
hidrogénio:
O•− •−
2 +O +2H
+ →H
22 2 O+ O2
Esta reação pode ocorrer espontaneamente ou pode ser
catalisada pela superóxido dismutase ( EC 1 .15.1.1)
Um dos alvos das espécies reactivas de oxigénio
é o ADN dos ilhéus pancreáticos. A sua fragmentação
ocorre em células B expostas ao aloxano (Takasu et al.
1991a, Sakurai e Ogiso 1995). Os danos no ADN
estimulam a poli ADP-ribosilação, um processo que
participa na reparação do ADN. Alguns inibidores da poli
ADP-ribosilação podem limitar parcialmente a toxicidade
do aloxano. No entanto, sugere-se q u e este efeito se
deve à sua capacidade de eliminar os radicais livres e não
a uma restrição da poli ADP-ribosilação iniciada pelo
aloxano (Sandler e Swenne 1983, LeDoux et al. 1988).
Verificou-se também que a superóxido dismutase, a
catalase (EC 1.11.1.6) (Grankvist et al. 1979, Grankvist
1981, Jörns et al. 1999) e os sequestradores não
enzimáticos de radicais hidroxilo (Ebelt et al. 2000)
protegem contra a toxicidade do aloxano. Por
conseguinte, os produtos químicos que conferem
propriedades anti-oxidantes e inibem a poli ADP-
ribosilação podem atenuar a toxicidade do aloxano.
Tem-se argumentado que a glucose contraria a
citotoxicidade do aloxano in vitro e in vivo. Esta
capacidade, no entanto, não resulta apenas da proteção da
glucocinase. O efeito protetor da glucose contra a morte
necrótica das células B pode dever-se à interação do
açúcar com o transportador de glucose GLUT2, o que
resulta numa absorção limitada de aloxano (Jörns et al.
1997).
Vol. 50
(Malaisse 1982). Na presença de Fe2+ e de peróxido de
hidrogénio, formam-se então radicais hidroxilo altamente
reactivos de acordo com a reação de Fenton (Fig. 1):
Fe2+ + H O22 →Fe3+ + OH− + OH•−
A ação dos radicais hidroxilos após tratamento com
aloxano foi demonstrada in vitro (Grankvist 1981,
Munday 1988) e in vivo (Kurahashi et al. 1993).
Fig. 1. Mecanismo de geração de espécies
reactivas de oxigénio induzidas pelo aloxano
em células B do pâncreas de rato. GKa, GKi -
glucocinase ativa e inativa, respetivamente;
HA• - radicais de aloxano; [Ca ]2+i -
concentração de cálcio intracelular.
Foi anteriormente proposto que a ação da
glicose está também relacionada com o seu metabolismo
e com o aumento da produção de equivalentes redutores
(NADH e NADPH), acelerando a recirculação do
glutatião. Sabe-se que a GSH fornece proteção contra os
radicais livres (Donnini et al. 1996). Assim, pode desviar
o peróxido de hidrogénio da via que conduz à formação
de radicais hidroxilo (Malaisse 1982, Malaisse-Lagae et
al. 1983, Pipeleers e van de Winkel 1986):
GSSG + 2 NADPH →2 GSH + 2
NADP H O22
+ +2 GSH→GSSG +
2 H O2
Além disso, Sakurai e Ogiso (1991) observaram
que a geração in vitro de radicais hidroxila na presença de
aloxana depende fortemente da concentração de GSH. A
GSH em baixas concentrações potenciou a formação
destes radicais, enquanto que o consumo de oxigénio, a
autoxidação do ácido dialúrico e a formação de radicais
hidroxilo foram significativamente inibidos em
concentrações mais elevadas. O GSH em concentrações
elevadas pode também inibir a geração de HA• e
neutralizar diretamente os radicais hidroxilo. Os radicais
tiilo (GS• ) formados nesta reação são depois convertidos
em GSSG:
GSH + OH•− → GS• + H2 O GS•
+GS• → GSSG
2001
De facto, nas ilhotas de rato incubadas com
aloxano, o teor de GSH e a relação GSH/GSSG
diminuíram (Malaisse et al. 1982), enquanto a glucose
provocou o efeito oposto.
Na experiência in vivo, a glucose administrada a
ratos
20 min antes do aloxano restringiu parcialmente o
aumento induzido pelo aloxano na atividade da glutationa
peroxidase (EC 1.11.1.9) e atenuou a queda da atividade
não proteica do fígado
grupos -SH (especialmente glutatião reduzido)
(Szkudelski et al. 1998). A ação protetora deste açúcar é,
no entanto, fortemente dependente da dose de glicose e
de aloxano (Harman e Fischer 1982, Gorray et al. 1983).
Foi proposto que as perturbações na homeostase
do cálcio intracelular constituem um passo importante na
ação diabetogénica do aloxano. Este conceito foi
confirmado por experiências in vitro e in vivo que
demonstraram que o aloxano eleva a concentração de Ca
livre citosólico2+ nas células B pancreáticas (Kim et al.
1994, Park et al. 1995). Este efeito resulta de vários
eventos: influxo de cálcio induzido pelo aloxano a partir
do fluido extracelular, mobilização exagerada de cálcio a
partir de reservas intracelulares e a sua eliminação
limitada do citoplasma. O influxo de cálcio pode resultar
da capacidade do aloxano para despolarizar as células B
pancreáticas (Dean e Matthews 1972). A despolarização
da membrana celular abre os canais de cálcio dependentes
da voltagem e aumenta a entrada de cálcio nas células.
Verificou-se também que o aloxano exerce um efeito
estimulador no efluxo mitocondrial de Ca2+ com uma
ação inibidora simultânea na captação de Ca2+ pelas
mitocôndrias (Nelson e Boquist 1982, Lenzen et al.
1992). Foi também registada a restrição da remoção de
cálcio das células devido à inibição induzida pelo aloxano
da Ca2+ -ATPase da membrana plasmática do fígado
(Seckin et al. 1993). O efeito do aloxano na concentração
intracelular de cálcio parece ser mediado, pelo menos
parcialmente, pelo H O22 , uma vez que o próprio
peróxido de hidrogénio exerce um efeito semelhante na
concentração de cálcio nas células B (Park et al. 1995).
Assim, o já referido aumento súbito do
A libertação de insulina das células B tratadas com
aloxano (Weaver et al. 1978b, Kliber et al. 1996) pode
ser um dos efeitos do aumento da concentração de Ca
citosólico induzido pelo aloxano2+ (Weaver et al. 1978b,
Kim et al. 1994). A concentração exagerada deste ião
contribui para a libertação suprafisiológica de insulina e,
juntamente com espécies reactivas de oxigénio, causa
danos nas células B pancreáticas.
Os resultados das experiências com antagonistas
dos canais de cálcio confirmaram o papel importante do
cálcio citosólico na ação citotóxica do aloxano.
Ação do Alloxano e da 541
Estreptozotocina
O pré-tratamento de ratos com verapamil impediu o
aumento induzido pelo aloxano na concentração de Ca
das células B2+ e aboliu o efeito estimulador do aloxano
na libertação de insulina (Kim et al. 1994). Os
antagonistas dos canais de cálcio (verapamil e diltiazem)
também suprimiram a hiperglicemia e o aparecimento da
diabetes provocada pelo aloxano em ratos (Katsumata et
al. 1992, Kim et al. 1994).
Em suma, a ação tóxica do aloxano nas células B
pancreáticas, descrita há muitos anos por Dunn et al.
(1943), é a soma de vários processos, como a oxidação de
grupos -SH essenciais, a inibição da glucocinase, a
geração de radicais livres e perturbações na homeostase
do cálcio intracelular.
Muitos investigadores sugeriram que a
seletividade da ação do aloxano não é totalmente
satisfatória. Experiências recentes confirmaram esta
objeção. Verificou-se que a dose diabetogénica de
aloxano diminuía os grupos -SH, acompanhada de um
aumento simultâneo da atividade da glutationa peroxidase
no fígado do rato, dois minutos após a sua administração
(Szkudelski et al. 1998). Simultaneamente, a concentração
de insulina no sangue aumentou drasticamente. Esta
insulinémia exagerada não provocou, contudo, qualquer
redução significativa da glicemia, o que sugere uma
diminuição da sensibilidade periférica à insulina no curto
espaço de tempo após o tratamento com aloxano
(Szkudelski et al. 1998). Observou-se também que o
aloxano intensificava a lipólise basal e induzida pela
epinefrina em adipócitos isolados de ratos e que a
insulina não conseguia limitar este efeito (Kandulska et
al. 1999).
Assim, ao utilizar o aloxano para evocar a
diabetes, os animais devem ser examinados após um
período de tempo adequado para minimizar os efeitos
secundários da ação do aloxano. Deve igualmente
salientar-se que o intervalo da dose diabetogénica de
aloxano é bastante estreito e que mesmo uma
sobredosagem ligeira pode ser geralmente tóxica,
causando a perda de muitos animais. Esta perda deve-se
muito provavelmente à toxicidade necrótica das células
tubulares renais, em especial quando são administradas
doses demasiado elevadas de aloxana (Lenzen et al.
1996).
2. O mecanismo de ação da estreptozotocina
A estreptozotocina (STZ, 2-desoxi-2-(3-(metil-3-
nitrosoureido)-D-glucopiranose) é sintetizada por
Streptomycetes achromogenes e é utilizada para induzir
diabetes mellitus dependente e não dependente de
insulina (IDDM e NIDDM, respetivamente).
O intervalo da dose de STZ não é tão estreito como
no caso do aloxano. A dose intravenosa única
542 Szkudelski Vol. 50

frequentemente utilizada em ratos adultos para induzir

IDDM situa-se entre 40 e 60
2001 Ação do Alloxano e da 543
Estreptozotocina

vivo e in vitro quando administrada em doses múltiplas.

mg/kg p.a. (Ganda et al. 1976), mas também são
A ação intracelular da STZ resulta em alterações
utilizadas doses mais elevadas. A STZ também é eficaz
do ADN nas células B pancreáticas, incluindo a sua
após a administração intraperitoneal de uma dose
fragmentação
semelhante ou superior, mas uma dose única inferior a 40
mg/kg p.a. pode ser ineficaz (Katsumata et al. 1992). Por
exemplo, quando 50 mg/kg b.w. de STZ são injectados
por via intravenosa em ratos alimentados, a glicose no
sangue (determinada 2 semanas após o tratamento) pode
atingir cerca de 15 mM (Szkudelski, observações não
publicadas).
A STZ também pode ser administrada em doses
baixas múltiplas. Este tratamento é utilizado
predominantemente no rato e a indução da IDDM é
mediada pela ativação de mecanismos imunitários. No
entanto, Ziegler et al. (1984) e Wright e Lacy (1988)
demonstraram que a ativação não específica do sistema
imunitário através do adjuvante completo de Freund
antes das injecções de STZ permite reduzir a sua dose
diabetogénica mesmo no rato.
A NIDDM pode ser facilmente induzida em
ratos por tratamento intravenoso ou intraperitoneal com
100 mg/kg
b.w. STZ no dia do nascimento. Este método de indução
da DNDM foi descrito pela primeira vez por Portha et al.
(1974). Às 8-10 semanas de idade e posteriormente, os
ratos tratados com STZ no período neonatal manifestam
uma hiperglicemia basal ligeira, uma resposta prejudicada
ao teste de tolerância à glucose (Portha et al. 1979) e uma
perda de sensibilidade das células B à glucose (Giroix et
al. 1983).
A ação da estreptozotocina nas células B é
acompanhada por alterações características das
concentrações de insulina e de glicose no sangue. Duas
horas após a injeção, a hiperglicemia é observada com
uma queda concomitante da insulina no sangue. Cerca de
seis horas mais tarde, ocorre hipoglicemia com níveis
elevados de insulina no sangue. Por fim, a hiperglicemia
desenvolve-se e os níveis de insulina no sangue
diminuem (West et al. 1996). Estas alterações nas
concentrações de glicose e insulina no sangue reflectem
anomalias na função das células B. A STZ prejudica a
oxidação da glucose (Bedoya et al. 1996) e diminui a
biossíntese e a secreção de insulina (Bolaffi et al. 1987,
Nukatsuka et al. 1990b). Observou-se que a STZ
inicialmente aboliu a resposta das células B à glucose. A
seguir, surge um retorno temporário da reatividade,
seguido da sua perda permanente e de danos nas células
(West et al. 1996).
A STZ é absorvida pelas células B pancreáticas
através do transportador de glucose GLUT2. Verificou-se
que uma expressão reduzida de GLUT2 impede a ação
diabetogénica da STZ (Schnedl et al. 1994, Thulesen et
al. 1997). Wang e Gleichmann (1995, 1998) observaram
que a própria STZ restringe a expressão de GLUT2 in
544 Szkudelski Vol. 50

ATP
(Yamamoto et al. 1981, Morgan et al. 1994).
Experiências recentes provaram que a principal razão
para a morte das células B induzida pela STZ é a
alquilação do ADN (Delaney et al. 1995, Elsner et al.
2000). A atividade alquilante da STZ está relacionada
com a sua porção de nitrosouréia, especialmente na
posição O6 da guanina. Após a injeção de STZ em ratos,
foram encontradas diferentes purinas metiladas nos
tecidos d e s t e s animais (Bennett e Pegg 1981).
Uma vez que a STZ é um dador de óxido
nítrico (NO) e que se verificou que o NO provoca a
destruição das células dos ilhéus pancreáticos, foi
proposto que esta molécula contribui para os danos no
ADN induzidos pela STZ (Kröncke et al. 1995, Morgan
et al. 1994). A participação do NO no efeito citotóxico
da STZ foi confirmada em várias experiências (Turk et
al. 1993, Kröncke et al. 1995). As células B pancreáticas
expostas à STZ manifestaram alterações características
da ação do NO, ou seja, um aumento da atividade da
guanilil ciclase e uma maior formação de cGMP (Turk
et al. 1993). A STZ não é, contudo, um dador
espontâneo de óxido nítrico (Kröncke et al. 1995). Esta
molécula é libertada quando a STZ é metabolizada no
interior das células, mas a NO sintase não é necessária
para este efeito (Kröncke et al. 1995). Por outro lado, a
redução da concentração de NO nas células dos ilhéus
pancreáticos através da inibição da forma induzível da
óxido nítrico sintase contrariou parcialmente a clivagem
do ADN induzida pela STZ (Bedoya et al. 1996). Um
efeito semelhante pode ser obtido por sequestradores de
NO (Kröncke et al. 1995). No entanto, os resultados de
várias experiências fornecem provas de que o NO não é
a única molécula responsável pelo efeito citotóxico da
STZ. Verificou-se que a STZ gera espécies reactivas de
oxigénio, que também contribuem para a fragmentação
do ADN e evocam outras alterações deletérias nas
células (Takasu et al. 1991b, Bedoya et al. 1996). A
formação de aniões superóxido resulta tanto da ação da
STZ nas mitocôndrias como do aumento da atividade da
xantina oxidase (EC 1.1.3.22). Foi demonstrado que a
STZ inibe o ciclo de Krebs (Turk et al. 1993) e diminui
substancialmente o consumo de oxigénio pelas
mitocôndrias (Nukatsuka et al. 1990b). Estes efeitos
limitam fortemente a produção de ATP mitocondrial e
causam a depleção deste nucleótido nas células B
(Nukatsuka et al. 1990b, Sofue et al. 1991). A restrição
da produção de ATP mitocondrial é parcialmente
mediada pelo NO. Verificou-se que esta molécula se liga
à aconitase, que contém ferro, inibindo a atividade da
enzima (Welsh e Sandler 1994).
O aumento da desfosforilação do ATP aumenta
o fornecimento de substrato para a xantina oxidase (as
células B possuem uma atividade elevada desta enzima)
e aumenta a produção de ácido úrico - o produto final do
2001
degradação (Nukatsuka et al. 1990a). Em seguida, a
xantina oxidase catalisa a reação em que se forma o anião
superóxido (Nukatsuka et al. 1988). Como resultado da
geração do anião superóxido, formam-se peróxido de
hidrogénio e radicais hidroxilo (Nukatsuka et al. 1990a,
Takasu et al. 1991b). A inibição da xantina oxidase pelo
alopurinol restringe o efeito citotóxico da STZ in vitro. O
pré-tratamento das células B com este inibidor impediu a
diminuição da secreção de insulina induzida pela STZ
(Nakatsuka et al. 1990a).
Pode afirmar-se que as potentes propriedades
alquilantes da STZ são a principal razão da sua
toxicidade. No entanto, a ação sinérgica do NO e das
e s p é c i e s reactivas de oxigénio pode também
contribuir para a fragmentação do ADN e outras
alterações deletérias causadas pela STZ. O NO e as
espécies reactivas de oxigénio podem atuar
separadamente ou formar o altamente tóxico peroxinitrato
(ONOO; Fig. 2). Por conseguinte, os antioxidantes
intracelulares ou os sequestradores de NO atenuam
substancialmente a toxicidade da STZ.
Fig. 2. Mecanismo dos eventos tóxicos induzidos pela
estreptozotocina (STZ) nas células B do pâncreas do
rato. MIT - mitocôndria; XOD - xantina oxidase
Referências
BANSAL R, AHMAD N, KIDWAI JR: Interação aloxano-glicose: efeito da incorporação de14 C-leucina nas ilhotas
pancreáticas de ratos. Ata Diabetol Lat 17: 135-143, 1980.
Ação do Alloxano e da 545
Estreptozotocina
Os danos no ADN induzidos pela STZ activam a
poli ADP-ribosilação (Sandler e Swenne 1983). Este
processo conduz à depleção do NAD celular+ , a uma
maior redução do teor de ATP (Heller et al. 1994) e à
subsequente inibição da síntese e secreção de insulina
(Nukatsuka et al. 1990b). O conceito de consequências
desfavoráveis do aumento da poli ADP-ribosilação como
resultado da ação da STZ foi confirmado por experiências
que revelaram que a inibição deste processo previne a
toxicidade deste agente diabetogénico. Verificou-se que a
3-aminobenzamida, um forte inibidor da poli(ADP-
ribose) sintase, protegeu contra a ação da STZ em ratos,
mesmo quando esta substância foi administrada 45-60
minutos após a STZ (Masiello et al. 1985, 1990). Um
outro inibidor da poli(ADP-ribose) sintase, a
nicotinamida, que também é um eliminador de radicais
livres de oxigénio, exerceu a melhor proteção quando foi
administrado pouco depois da STZ (Masiello et al. 1990).
O fracasso da ação protetora da nicotinamida
administrada após a STZ deve-se provavelmente a uma
redução potente do teor de ATP celular pela STZ, uma
vez que a absorção de nicotinamida depende do ATP
(Sofue et al. 1991). O efeito protetor da 3-
aminobenzamida e da nicotinamida foi também
confirmado in vitro (Masiello et al. 1990).
Foi sugerido que alguns inibidores da p o l i
ADP-ribosilação podem também exercer um efeito
protetor devido às suas propriedades de eliminação do
radical hidroxilo (LeDoux et al. 1988). No entanto, no
caso da STZ, investigações recentes em ratinhos
deficientes em poli(ADP-ribose) polimerase
demonstraram que a própria inibição da poli ADP-
ribosilação previne a lesão das células B induzida pela
STZ e a hiperglicemia (Pieper et al. 1999). Assim, pode
afirmar-se que a ativação da poli ADP-ribosilação é de
maior importância para a diabetogenicidade da STZ do
que a geração de radicais livres e de danos no ADN per
se.
O cálcio, que também pode induzir a necrose,
não parece desempenhar um papel significativo na
necrose provocada pela STZ, uma vez que os
antagonistas dos canais de cálcio não protegem as células
B contra a estreptozotocina, como acontece no caso do
aloxano (Katsumata et al. 1992).
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Pedidos de reimpressão
T. Szkudelski, Department of Animal Physiology and Biochemistry, University of Agriculture, 60-637 Wolynska 35,
Poznan, Polónia.