Fundao Universidade Federal de Rondnia UNIR Ncleo de Sade NUSAU Medicina 1 Perodo Biologia Celular e Molecular Docente: Gleicilaine

ine Sena Casseb Discentes: Antnio Serpa Jeise Vieira Moiss Oliveira Rodrigo Raniri Tiago Pinheiro Walesca Agustini

Apoptose: Morte Celular Programada

Apoptose, Definio

Do grego queda como as folhas de uma rvore Se as clulas no so mais necessrias, elas cometem o suicdio, ativando uma programada morte intracelular. Morte Celular Programada

Quantidade de Apoptoses

Desenvolvimento do sistema nervoso de vertebrados, mais da metade das clulas morrem logo aps serem formadas.

Em um humano adulto saudvel bilhes de clulas morrem a cada hora na medula ssea e no intestino.
PARECE UM GRANDE DESPERDCIO, No?

Qual o propsito dessa massiva morte celular?

Tem-se respostas claras em alguns casos: CASO 1 Patas de um camundongo: iniciam com o formato de p (perodo embrionrio), e os dedos separam-se somente quando as clulas entre eles morrem

Caso 2
Quando um girino transforma-se em r, as clulas da cauda morrem , e a cauda, que no mais necessria para a r, desaparece.

Caso 3
Desenvolvimento do Sistema Nervoso, a morte celular, ajusta o nmero de clulas nervosas necessrias para o nmero de clulas-alvo que necessitam de enervao.

Funes da Apoptose
Elimina clulas danificadas ou prejudiciais Renovao de clulas epiteliais e hematopoiticas Manuteno do nmero constante de clulas em tecidos adultos Colapso endometrial durante a menstruao

Deleo de clulas nas criptas intestinais

Na regresso de tumores

Funes da Apoptose
Atua no desenvolvimento embrionrio: Eliminao do tecido larval durante metamorfose (anfbios e insetos) Regresso da cauda do girino Eliminao de tecidos entre os dedos (membrana interdigital)

Eliminao de neurnios em excesso

Mecanismo de defesa: Clulas infectadas por vrus Clulas com danos no DNA Clulas cancerosas

Exemplos da importncia da Apoptose no desenvolvimento

Exemplos

Exemplos

Exemplos

Apoptose x Necrose
NECROSE:
Processo patolgico (autlise das clulas): Resultado de uma leso macia no tecido caracterizada por: Inchao citoplsmatico e mitocondrial; Ruptura da membrana celular e vazamento do plasma celular; Resposta inflamatria e reao de tecido patolgico; Grande nmero de clulas afetadas simultaneamente.

APOPTOSE:
Evento de morte celular, geneticamente programada, que envolve uma srie de alteraes morfolgicas e fisiolgicas (processo de eliminao celular controlado) sequncia de eventos que levam a morte celular em uma variedade de diferentes sistemas.

Alteraes morfolgicas nas clulas durante a apoptose

Cromatina se compacta e o citoesqueleto se desarma ( a clula perde o contato com a clula vizinha) e se torna esfrica Molculas de DNA se fragmentam O citosol e as organelas se condensam

Consequncia direta da Fragmentao do DNA, tem-se a Fragmentao do Ncleo

Na superfcie celular aparecem protruses Cada protruso ir se desprender da superfcie celular e virar uma vescula apopttica As vesculas apoptticas so fagocitadas por macrfagos

Maquinaria intracelular responsvel pela apoptose

aparentemente semelhante em todas as clulas animais
Dependente de uma famlia de proteases que apresenta uma cistena no stio ativo clivando protenas-alvo em cido asprtico especfico. Elas so denominadas CASPASES.

Caspases

Caspases 2, 8, 9 e 10 Iniciadoras: clivam e ativam caspases efetoras Caspases 3, 6 e 7 Efetoras: quando ativadas fazem a clivagem de vrias protenas

Maquinaria intracelular responsvel pela apoptose

As caspases so sintetizadas na clula com um precursor inativo, ou procaspases, que so ativados pela clivagem do cido asprtico por outras caspases.
Uma vez ativadas, as caspases clivam e ativam outras procaspases, formando uma cascata de amplificao proteoltica. Algumas clivam a lmina nuclear, outras uma protena que mantm a enzima degradadora do DNA ( DNAse) inativa, liberando-a para digerir o DNA. Assim a clula se desmancha de forma rpida e ordenada, sendo rapidamente digerida por outras clulas.

 Como so ativadas as procaspases para iniciar a cascata da caspase?

A ativao feita por protenas adaptadoras;

Mltiplas cpias de procaspases iniciadoras se unem em um complexo;

Quando foradas a entrar no complexo, sua proximidade faz com que uma clive a outra. MTUA ATIVAO
A caspase ativada no topo da cascata cliva a prxima procaspase para estimular o sinal de morte que estendese para toda clula.

Ativao da apoptose por via extrnseca

Ocorre pela ativao de receptores da morte na superfcie da clula.

Linfcitos assassinos podem induzir apoptose produzindo a protena ligante Fas.

Ligante Fas:

Receptor da morte na Superfcie da Clula-alvo

1 - Agrupamento (Protenas Fas) 2 - Recruta adaptadores (protenas intracelulares) 3 - Ligam e agregam 4 Clivam e ativam procaspases-8 uma outra 5 - Caspase-8 ativada Ativam as prximas procaspases 6 - Apoptose.

 Quando as clulas esto estressadas ou danificadas podem matar a si prprias desencadeando a agregao das procaspases e a ativao dentro da clula.

Ativao da apoptose por via intrnseca

1) Mitocndrias induzidas 2) Citocromo C se liga e ativa a liberar citocromo C para a protena adaptadora: Apaf-1 dentro do citosol (apoptossomo) 3) Apaf-1 recruta caspase 9 que ativa a caspase 3 que vai atuar na APOPTOSE Exemplo: O DNA danificado pode desencadear a apoptose. Esta reao depende da protena p53, que pode ativar a transcrio dos genes codificadores de protenas que promovem a liberao do citocromo C da mitocndria. Estas protenas pertencem a famlia da Bcl-2.

Apoptose e regulao interna

Famlia Bcl-2

So protenas localizadas nas membranas intracelulares (mitocndrias, RE e membrana perinuclear) que ajudam a regular a ativao das procaspases. Algumas protenas dessa famlia inibem parcialmente a apoptose, ao bloquear a liberao do citocromo c da mitocndria, so elas: Bcl-2 e Bcl-XL. Outras so ativadoras da morte celular, so elas: Bad, Bax e Bak. A protena Bad, funciona como uma protena adaptadora e as Bax e Bak estimulam a liberao do citocromo c da mitocndria. Essas duas ltimas so ativadas pela Bid.

O excesso de Bcl-2, embora no seja suficiente para causar cncer, favorece a ao de outros oncogenes. Clulas que normalmente tm mais Bcl-2 quando so acometidas por cncer costumam ser mais resistentes e de difcil tratamento por serem menos sensveis aos mecanismos de apoptose. Ex: melancitos e melanoma. O gene p-53 o responsvel por desencadear a apoptose. Alm disso esse gene quando ativado, ativa tambm a dimerizao da Bax A protena Bcl-2 est ligada a Apaf-1.

Famlia IAP (inibidoras de apoptose)

So protenas que inibem a apoptose por duas vias:

se ligam a algumas procaspases para evitar sua ativao; se ligam as caspases inibindo sua atividade.

Quando a mitocndria libera o citocromo c para ativar a Apaf-1, elas tambm liberam uma protena que bloqueia as IAPs, aumentando em muito a eficincia do processo de ativao da morte celular. O programa de morte celular intracelular regulado por sinais extracelulares que podem ativar ou inibir a apoptose. Estes sinais moleculares atuam regulando os nveis ou atividade dos membros da famlia Bcl-2 e IAP.

INDUTORES DA APOPTOSE Esteroides; Glicocorticoides; Progesterona; Radicais livres; xido ntrico.

INIBIDORES DA APOPTOSE Testosterona; Progesterona; Prolactina; Hormnios de crescimento; Interleucinas.

Controle extracelular da diviso celular, do crescimento celular e da apoptose

Mitgenos: Estimulam a diviso celular, primeiramente pela liberao intracelular dos controles negativos que, de certa forma, bloqueiam o progresso do ciclo celular. Atuam tambm no crescimento, sobrevivncia, diferenciao ou migrao, dependendo das circunstncias e do tipo celular; Fatores de crescimento: Estimulam a clula a crescer (aumento da massa celular) ao promover a sntese de protenas e de outras macromolculas e pela inibio de sua degradao; Fatores de sobrevivncia: Suprimem a apoptose.

Sinais de proliferao anormal causam parada no ciclo celular ou morte celular

Oncogenes: Muitos componentes das vias de sinalizao intracelulares so codificados por genes que foram originariamente identificados como genes promotores de cncer. A mutao de um aminocido da Ras torna a protena permanentemente superativada, levando constante estimulao das vias de sinalizao Ras-dependentes, mesmo na ausncia de estimulao mitognica. Do modo semelhante, mutaes na Myc promovem excessivo crescimento celular e proliferao, resultando no desenvolvimento do cncer.

Sinais de proliferao anormal causam parada no ciclo celular ou morte celular

No entanto, quando experimentalmente superativadas, a ativao dos mecanismos do ponto de checagem leva parada no ciclo celular ou apoptose.

Excessivas estimulaes mitognicas produo de P19ARF inibe Mdm2: Responsvel pela degradao da p53

Aumento nos nveis de p53 = parada no ciclo celular ou apoptose

Obs.: Clulas possuem limitao intrnseca no nmero de divises

Fatores mitognicos
Oncogenes ativados (Ras e Myc) desafiam os mecanismos de sada do ciclo em caso de falha. Detectando sinais de crescimento inapropriados, o ponto de checagem intacto pode forar a sada da clula do ciclo (inibidor de CDK4, INK4A e o inibidor de Mdm2, p19ARF). Por exemplo, ativao de Ras oncognico (GTPase = cascata cinase MAP) leva a uma superregulao de INK4A, que bloqueia a hiperfosforilao mediada por ciclina-DCDK4 de RB, e provoca senescncia celular. Myc constitutivamente ativada, por outro lado, induz ARF, que bloqueia a atividade de MDM2 que degrada p53, e assim ativa este que, dependendo do tipo celular e das condies extracelulares, causa parada no ciclo ou apoptose.

Fatores mitognicos

Fatores mitognicos

Os fatores de sobrevivncia extracelular e a apoptose

Fatores de sobrevivncia: So molculas que se ligam aos receptores da superfcie celular e ativam as vias sinalizadoras que mantm o programa de morte (apoptose) suprimido.

Os fatores de sobrevivncia extracelular e a apoptose

Os fatores de sobrevivncia extracelular e a apoptose

Protenas-sinal inibitrias
As TGF- so as protenas-sinal mais bem entendidas por inibirem a proliferao de vrios tipos celulares, bloqueando a progresso do ciclo celular na G1 ou estimulando a apoptose. Protena morfognica do Osso (BMP)

A apoptose e as doenas
Controle de tumores e a regulao de populaes de clulas do sistema imune.

Alteraes nos genes responsveis pela autodestruio podem ser desastrosas.

Por ser indispensvel vida, a morte da clula deve seguir um plano meticuloso. Qualquer distrbio de sua regulao (tanto o excesso quanto a insuficincia) pode provocar uma variedade de doenas.

A apoptose e as doenas
APOPTOSE INSUFICIENTE CNCER DOENAS AUTO-IMUNES INFECES VIRTICAS APOPTOSE EXCESSIVA AIDS DOENAS NEURODEGENERATIVAS SNDROMES MIELODISPLSICAS LESES ISQUMICAS OSTEOPOROSE

Doenas associadas com diminuio da apoptose

Cncer - Clulas normais danificadas de modo irreversvel so eliminadas atravs da apoptose. Clulas cancergenas evitam a apoptose e continuam a multiplicar-se de maneira desregulada. Doenas autoimunes - falhas (no timo) na apoptose de clulas T que reagem com substncias do prprio organismo.

Infeces virais - inibem apoptose das clulas infectadas.

Doenas associadas com aumento da apoptose

AIDS - Destruio apopttica dos linfcitos T/CD4 induo da permeabilizao da membrana mitocondrial.

Doenas neurodegenerativas - Alzheimer e Parkinson apoptose precoce dos neurnios demncia progressiva, perda cognitiva e memria.
Infarto do miocrdio por isquemia - Necrose das clulas que dependem dos vasos afetados e apoptose das clulas vizinhas pela gerao de ROS. Osteoporose - Perda da massa ssea.

Mal de Alzheimer
Caracterizado como uma desordem crnica e progressiva, marcada pela perda seletiva e simtrica de neurnios motores, sensoriais e do sistema cognitivo. As placas so acmulos encontrados do lado de fora dos neurnios e so constitudas por uma pequena protena chamada beta-amilide, ou A-beta. Os emaranhados ficam dentro dos neurnios e de suas projees ramificadas (axnios e dendritos) e so formados por filamentos da protena tau.

Cascata do amiloide
O acmulo do b-amilide cerebral desencadearia uma srie de eventos que culminaria na morte neuronal e precipitao de protenas, mediante a formao das placas amiloidais e dos emaranhados neurofibrilares.

Sua presena txica para os neurnios adjacentes, pois induz a entrada descontrolada de clcio para dentro dos mesmos, o que d incio cascata apopttica atravs da ativao das caspases

Processo de formao das placas neurticas a partir da ao de uma Preselina mutante sobre a APP, produzindo a protena betaamilide.

Emaranhados Neurofibrilares
Protena normalmente presente nos neurnios, mas que na DA encontrase anormalmente hiperfosforilada. A protena tau importante para manter a integridade do sistema dos microtbulos que fazem o transporte de fatores trficos, neurotransmissores e protenas entre o corpo celular e dendritos e axnios e vice-versa.

Quando hiperfosforilada no se liga s protenas dos microtbulos, agrega-se na forma de filamentos helicoidais pareados e acumula-se.

Como prevenir
Os fatores induzidos pelos exerccios fsicos, juntamente com a dieta restrita, podem agir como protetores das protenas contra os radicais oxidantes, atuando na homeostase do clcio intracelular e inibindo a cascata bioqumica da apoptose, alm de contribuir para o crescimento de novas clulas nervosas. Esses so, portanto, fatores neurotrficos, os quais contribuem para a neurognese.

CNCER

Cncer e apoptose
As clulas cancerosas se dividem mais rapidamente do que as normais e geralmente so bem desorganizadas. Com o tempo, podem se empilhar umas sobre as outras, formando uma massa de tecido chamada tumor. Elas esto sempre procurando maneiras de se tornarem insensveis aos fatores apoptticos consequentes da privao do fator de crescimento e de perda de contatos com as clulas vizinhas.

Cncer e apoptose

Morte da clula impedida pela excessiva produo de protena inibidora do suicdio, a Bcl-2. Alguns tumores impedem a Fas de emitir sinais para ativar a maquinaria da apoptose ou produzem Fas-ligante para evitar a apoptose imunomediada.

Apoptose e Cncer
DEFEITOS NAS VIAS DE SINALIZAO DA APOPTOSE

CNCER

APOPTOSE: elimina as clulas com DNA lesado ou ciclo celular desregulado

ALTERAO DA APOPTOSE

INICIAO DO TUMOR

AUMENTA A PROGRESSO TUMORAL E PROMOVE METSTASES: Permitem as clulas tumorais sobreviverem durante o trnsito na circulao sangunea e crescerem em stios de tecidos ectpicos, sem os fatores de crescimento.

Cncer e Apoptose
Oncogenes:
Regulam ou controlam o crescimento e a proliferao celular

Atuam no controle do mecanismo da morte celular

BCL-2

IAP

INIBEM A APOPTOSE

FUNO DA PROTENA P53

~50% dos cnceres humanos apresentam mutao de p53 (fator de transcrio): -parada do ciclo celular -reparo do DNA -apoptose Mutao de p53

Resistncia quimio e radioterapia: clulas no entram em Apoptose

Limiar aumentado da apoptose: Pode conferir s clulas cancerosas resistncia a vrias formas de terapia. Apoptose: Tem uma funo importante na regulao do crescimento tumoral e resposta do tumor terapia.
Tratamento citotxico: radiao ou quimioterapia Resposta apopttica: Dependente da dose

Candidato da Terapia Antitumoral: Aumentando a resposta apopttica de tecidos cancerosos ou inibindo a resposta apopttica de tecidos normais