VALIDAÇÃO DO TESTE RESPIRATÓRIO COM URÉIA-13C

REALIZADO COM ESPECTROSCOPIA INFRAVERMELHO EM

PACIENTES MENORES DE 12 ANOS DE IDADE

Aluno: Rodrigo Strehl Machado

Orientadora: Elisabete Kawakami

Departamento de Pediatria
UNIFESP/EPM
Métodos Não-invasivos – H. pylori

SOROLOGIA
•Simplicidade, baixo custo
•Confiável em adolescentes
•Controle de tratamento

ANTÍGENO NAS FEZES

•ELISA de captura
Poucos estudos em crianças
 Teste Respiratório com Uréia-13C

ESPECTROMETRIA DE MASSA
ANÁLISE A LASER

ESPECTROSCOPIA INFRAVERMELHO
•Manutenção simplificada
•Técnica automatizada
•Maior amostra de ar
•Equipamento mais barato
 Teste Respiratório com Uréia-13C em Crianças e Adolescentes

Estudo N (idade) Protocolo (Aparelho, Número de Sensibilidade

Coletas, Refeição Teste, Dose) Especificidade
Vandenplas et al, 95 (2a – 15a) IRMS, 5 coletas, sorvete, 2mg/kg 96%
1992 93%
Koletzko et al, 36 (4a – 17a) NDIRS, 3 coletas, ácido cítrico, 100%
1995 75mg 94,4%
Delvin et al, 79 (até 18a) IRMS, 5 coletas, sorvete, 2mg/kg 100%
1999 100%
Kindermann et 149 (1a – 17,9a) IRMS, 3 coletas, suco de maçã, 100% / 93,2%
al, 2000 < 6 anos: 53 75mg Esp. < 6a: 88,1%
Ni et al, 53 (10a – 14a) NDIRS, 2 coletas, água, 100mg 100% e 100%
2000
Ogata et al, 47 (4a – 19a) IRMS, 2 coletas, ácido cítrico, 93,1% e 78,9%
2001 2mg/kg
 Teste Respiratório com Uréia-13C

•Estudos crianças - lactentes

•Maior número de falsos positivos
•Maior concentração de resultados em torno do ponto de corte
•Dificuldades técnicas
Teste Respiratório com Uréia-13C e Intensidade da Colonização

•Valor do TRU-13C: •esvaziamento gástrico

•distribuição da uréia
•atividade da urease

•Densidade bacteriana: histologia, cultura quantitativa

•Densidade bacteriana : úlcera péptica e insucesso terapêutico
 Objetivos

•Validar o TRU-13C com espectroscopia infravermelho não dispersiva

isótopo seletiva em pacientes com idade inferior a 12 anos submetidos a
endoscopia digestiva alta

•Comparar a intensidade da colonização da mucosa gástrica por

Helicobacter pylori, avaliada por histologia, com os valores obtidos no TRU-
13
C com espectroscopia infravermelho não dispersiva isótopo seletiva
 Casuística

•107 (M:F 1,3:1), 6m - 11a 8m (mediana 5a 3m)

•Antibióticos, Bloqueadores H2, IBP, Bismuto

Critérios de Exclusão •Não consentimento
•Distúrbios de coagulação

•Consentimento
Inclusão
•EDA com biópsias
•Questionário
•Teste Respiratório
 Indicação da Endoscopia e Idade dos 107 pacientes

Indicação de Endoscopia 0 ¬ 2 anos 2 ¬ 6 anos 6 ¬ 12a Total

n (%) n (%) n (%) n (%)

Dor abdominal 0 27 (50,0) 27 (50,0) 54 (100)

Refluxo Gastresofágico 7 (30,4) 12 (52,2) 4 (17,4) 23 (100)
SÍndrome de má-absorção 6 (28,6) 13 (61,9) 2 (9,5) 21 (100)
Hemorragia digestiva 1 (25,0) 2 (50,0) 1 (25,0) 4 (100)
Controle de tratamento 0 0 4 (100) 4 (100)
Anemia 1 (100) 0 0 1 (100)

Total 15 (14,0) 54 (50,5) 38 (35,5) 107(100)

 Diagnóstico H. pylori

Teste Rápido 2 fragmentos de antro

da Urease Uréia 100mg; Água destilada 1ml
Fenol vermelho 1%: 1gota

Histologia
2 fragmentos de antro
H&E e Giemsa Modificado
Sistema de Sydney Modificado

Cultura
2 fragmentos de antro
Ágar-BHI
Morfologia e Bioquímica
 Padrão-ouro

Infectados Histologia e Teste Rápido da Urease positivos

ou Cultura positiva

Não-infectados Histologia negativa

Teste Rápido da Urease negativo
Cultura negativa

Indefinidos Histologia e Teste Rápido da Urease discordantes

Cultura negativa
Pacientes excluídos (3)
 Teste Respiratório com Uréia-13C

•Amostras de ar: basal e 30 minutos

•Coleta: máscara ou sopro

•Bolsas aluminizadas de 1,3 litros

•Dose de uréia- 13C : 50 mg (75mg > 30kg)

•Refeição teste: suco de laranja integral 100ml (200ml > 30kg, 50ml < 2a)

•NDIRS (IRIS®, Wagner Analysen)

Teste Respiratório com Uréia-13C
 Teste Respiratório com Uréia-13C: Expressão dos Resultados

Delta Over Baseline (DOB) •ð: diferença por mil na [13CO2]

•DOB: diferença entre ð basal e ð 30 minutos
•Ponto de Corte: 4‰

Taxa de Hidrólise de Uréia •Cálculo: DOB, produção de CO2

•Ponto de Corte: 10µg/min
Escala Análoga – Sistema de Sydney Modificado

Dixon et al, 1996

 Análise Estatística

• Amostra

• Mediana e Variação

• Proporções

• Qui-quadrado

• Sensibilidade e Especificidade

• Razão de probabilidade
 Infecção por Helicobacter pylori e Idade

Idade (anos) H. pylori positivo H. pylori negativo Total

n (%) n (%) n (%)
0¬2 1 (07,1) 13 (92,9) 14 (100)

2¬6 14 (25,9) 40 (74,1) 54 (100)

6 ¬ 12 18 (50,0) 18 (50,0) 36 (100)

Total 33 (31,7) 71 (68,3) 104 (100)

 Resultados da Endoscopia e Infecção por Helicobacter pylori

Infectados Não Infectados Total

Resultado n (%) n (%) n (%)

Exame Normal 16 (23,9) 51 (76,1) 67 (100)

Nodularidade Antral 13 (100) 0 13 (100)
Duodenite 4 (50,0) 4 (50,0) 8 (100)
Esofagite Distal 0 7 (100) 7 (100)

Enantema Antral 0 5 (100) 5 (100)

Gastrite Erosiva 0 3 (100) 3 (100)

UD cicatrizada 0 1 (100) 1 (100)
Total 33 (31,7) 71 (68,3) 104 (100)
 Valores de ð basal, ð em 30 minutos e DOB

Todos H. pylori positivo H. pylori negativo

Medida Variação (Mediana)

ð basal -29,1 a –17,3 -29,1 a –21,6 -28,3 a –17,3

-24,6 -25,2 -24,4
ð 30 minutos -27,6 a 83,9 -24,9 a 83,9 -27,6 a –0,6
-22,7 7,3 -23,9
DOB -1,5 a 105,5 0,3 a 105,5 -1,5 a 23,1
1 31,6 0,5
 Teste Respiratório com Uréia-13C - DOB

TRU-13C H. pylori positivo H. pylori negativo Total

Positivo 32 3 35

Negativo 1 68 69

Total 33 71 104

•Sensibilidade: 97% (IC 95%: 94% - 99,9%)

•Especificidade: 95,8% (IC 95%; 93,4% - 98,2%)

•Razão de Probabilidade: teste positivo 22,95

teste negativo 0,03
 Taxa de Hidrólise de Uréia

TRU-13C H. pylori positivo H. pylori negativo Total

Positivo 32 3 35

Negativo 1 68 69

Total 33 71 104

•Sensibilidade: 97% (IC 95%: 94% - 99,9%)

•Especificidade: 95,8% (IC 95%; 93,4% - 98,2%)

•Razão de Probabilidade: teste positivo 22,95

teste negativo 0,03
Teste Respiratório com Uréia-13C
Taxa de Hidrólise de Uréia (µg/min) e DOB (‰)
 Teste Respiratório com Uréia-13C – Influência da Idade

Idade (anos) Sensibilidade Especificidade Razão de Probabilidade

(IC95%) (IC95%) Positivo Negativo

0¬6 93,3% 96,2% 24,7 0,07

( 86,9% - 99,8%) (93,6% - 98,8%)
6 ¬ 12 100% 94,4% 18 0
(82,4% a 100%) (74,2% a 99%)
DOB (‰) dos pacientes não infectados e Idade (anos)
DOB (‰) dos pacientes infectados e Idade (anos)
 Infiltrado de Células Linfomononucleares

Infectados Não-infectados

21% 10% 1%
+++ 12% ++ +++
+

+ 28%
++
61%
67%
 Infiltrado de Neutrófilos

Infectados Não-infectados

6% 32% 1%
+++ ++
+
++
58%
+

36%

67%
 Densidade Bacteriana

Infectados

24%
3%
+++

+ 18%
++

55%
 Teste Respiratório e Densidade Bacteriana

Densidade Bacteriana (n) DOB (‰) THU (µg/min)

Variação (mediana) Variação (mediana)
 
Ausente / Leve (7) 0 - 71,67 (32,8) 0,6 – 212 (81,7)

Moderado / Intenso (26) 9,5 - 105,5 (31,1) 25,5 – 172 68,9)

 Conclusões

• O TRU-13C é um método acurado para o diagnóstico de infecção por

Helicobacter pylori em crianças e fornece valores distantes do ponto de
corte, possibilitando uma nítida diferenciação entre resultados positivos e
negativos

• Não há relação entre o grau de colonização da mucosa gástrica e os

valores do TRU-13C