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INTRODUÇÃO
ALGUNS CONCEITOS
VANTAGENS E DESVANTAGENS
DISCUSSÃO DE CASOS
CASO 1
JORDAN, CANINO, PIT BULL, 2 ANOS.
O QUE FAZER?
FASES DO DIAGNÓSTICO
§ Histórico
§ Epidemiologia
§ Manifestações clínicas
CUSTO + DISPONIBILIDADE
INTERPRETAÇÃO
VANTAGENS:
§ Fácil coleta de material
DESVANTAGENS:
§ Janela imunológica
§ Soroconversão tardia (imunossuprimidos)
§ Existem cães que nunca farão a soroconversão/cães positivos parasitologicamente que podem
se tornar soronegativos
§ Infecção crônica (imunossilenciosos)
§ Teste positivo com Ac maternos (3 meses)
§ Ac podem perdurar por toda a vida
§ Variantes genéticas não detectadas pelo teste
§ Erros dos ensaios laboratoriais
SOROLOGIA - INTERPRETAÇÃO
ELISA x RIFI
● D.O. (“cut-off”)
● Região endêmica x região não endêmica
● Diferenças de sensibilidade e especificidade entre
os métodos
● Ag totais x Ag recombinantes
Marcio, pessoal
INTERPRETAÇÃO
LEISHMANIOSE
ELISA (+) 9 1 0 5 0 0 0
(-) 5 12 12 1 10 8 13
RIFI (+) 6 0 0 0 5 0 0
(-) 8 13 12 6 5 8 13
rK39 (+) 0 1 0 3 1 1 3
(-) 14 12 12 3 9 7 10
Zanette (2006)
INTERPRETAÇÃO
LEISHMANIOSE
16
INTERPRETAÇÃO
LEISHMANIOSE
“... como implicações práticas nas atividades de controle da lv canina na capital mineira, o programa sacrificou 12.924 animais falsos positivos e
deixou de sacrificar 2.003 animais falsos negativos...” Soroprevalência do estudo foi de 3,64%
INTERPRETAÇÃO
LEISHMANIOSE
PROVAS DIFERENCIADAS:
§ Real-Time PCR
http://www.uece.br/ppgcv/dmdocument
http://www.bio.fiocruz.br/
s/eudsonjunior.pdf
SOROLOGIA x MOLECULAR
LEISHMANIOSE
SOROLOGIA x MOLECULAR
LEISHMANIOSE
§ 710 cães foram estudados
§ 40% dos cães apresentaram manifestações clínicas indicativas de
Leishmaniose
§ 36,3% (285/710) infecção foi detectada
§ 4,5% (32/710) qPCR
§ 16,2% (115/710) ELISA
§ 15,6% (111/710) detectado pelos dois testes
§ 17,9% (127/710) foram classificados como doentes
SANGUE - EVITAR
§ MO
§ Linfonodo DAR
§ Pele PREFERÊNCIA
§ SWAB de conjuntiva
CASO 1
JORDAN, CANINO, PIT BULL, 2 ANOS.
¯ TITULAÇÃO
RESULTADOS EXAMES SOROLÓGICOS
ELISA – RESULTADO INDETERMINADO
200pb
100pb 120pb
PM 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26
200pb 120pb
100pb
Márcio – HOVET-AM
Márcio – HOVET-AM
O QUE FAZER?
CASO 2
§ Canil em SP
§ Nunca saiu de SP
§ ELISA
SNAP 4 DX
Teste positivo: FALSO-POSITIVO
Brasil: A. platys – trombocitopenia branda
Reação cruzada
§ RIFI: maior sensibilidade que ELISA
§ ImmunoComb®
§ Esfregaço sanguíneo: fase aguda à @ 5% dos suspeitos Márcio – HOVET-AM (2008)
encontra-se a mórula.
INTERPRETAÇÃO
ERLIQUIOSE
Abstract
Abstract
Canine ehrlichiosis and anaplasmosis are important tick-borne diseases with a worldwide distribution. Information Background: Nowadays, Ehrlichia canis receives increasing attention because of its great morbidity and mortality in
has been continuously collected on these infections in Europe, and publications have increased in recent years. animals. Dogs in the subclinical and chronic phases can be asymptomatic, and serological tests show cross-reactivity
Prevalence rates are high for Ehrlichia and Anaplasma spp. infections in dogs from different European countries. The and fail to differentiate between current and past infections. Moreover, there could be low parasitaemia, and E. canis
goal of this article was to provide a practical guideline for veterinary practitioners on the diagnosis, treatment, and might be found only in target organs, hence causing results to be negative by polymerase chain reaction (PCR) on
prevention of ehrlichiosis and anaplasmosis in dogs from Europe. This guideline is intended to answer the most blood samples.
common questions on these diseases from a practical point of view. Methods: We evaluated by PCR the prevalence of E. canis in blood, liver, spleen, lymph node and bone marrow sam-
ples of 59 recently euthanised dogs that had ticks but were clinically healthy.
Keywords: Canine ehrlichiosis, canine anaplasmosis, Ehrlichia canis, Anaplasma phagocytophilum, Anaplasma platys,
consensus Results: In total, 52.55% of the blood PCRs for E. canis were negative, yet 61.30% yielded positive results from tissue
biopsies and were as follows: 63.15% from bone marrow; 52.63% from liver; 47.36% from spleen; and 15.78% from
lymph node. In addition, 33% had infection in three tissues (spleen, liver and bone marrow).
Introduction phylogenetically distant from E. canis, and therefore, Conclusions: Our results show the prevalence of E. canis from tissues of dogs that were negative by blood PCR. Ehrli-
Canine ehrlichiosis and anaplasmosis are important they were reclassified under the genera Anaplasma or chia canis DNA in tissue was 30% lower in dogs that tested negative in PCR of blood samples compared to those that
tick-borne diseases with a worldwide distribution. Neorickettsia [5]. were positive. However, it must be taken into account that some dogs with negative results were positive for E. canis
Ehrlichia canis was first identified in 1935 in Algeria; In 2002, a large amount of information on ehrlichial in other tissues.
dogs infested with ticks showed fever and anemia [1]. infections was gathered by the American College of Keywords: Ehrlichia canis, Biopsies, Spleen, Bone marrow, Liver, Lymph node
Later, during the Vietnam War, many military working Veterinary Internal Medicine (ACVIM) Infectious
dogs brought to Vietnam by the US army exhibited a Disease Study Group. That group published a Consensus
Background by the tick Rhipicephalus sanguineus (sensu lato), and,
severe disease called Tropical Canine Pancytopenia [2]. Statement on diseases caused by Ehrlichia spp. in small
Canine monocytic ehrlichiosis (CME) is caused by Ehrli- before infection, the bacteria replicate in monocytes and
INTERPRETAÇÃO
ERLIQUIOSE
ImmunoComb®
Kit para a detecção de
anticorpos IgG contra
Ehrlichia canis
http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S1098612X11002270
INTERPRETAÇÃO
ERLIQUIOSE Teste Reagente Não reagente
1:20 18
1:40 25
1:80 29
1:160 4
1:320 6
1:640 7
Não apresentaram titulação 11
Miranda (2013)
CASO 3
ANITA, CANINO, SRD, 3 ANOS
● Anamnese: prostração há 4 dias e hiporexia.
● Exame físico: bom estado geral, apatia e febre.
● Hemograma:
SUSPEITA DIAGNÓSTICA ?
§ Confirmação do diagnóstico
§ Fase da enfermidade
SOROLOGIA?
PCR?
RESULTADO:
Sorologia: Não reagente
PCR: POSITIVO
Exames complementares???
Márcio – HOVET-AM
CASO 4 HEMOGRAMA
Resultado Referência
● Mielograma
ß NORMAL à
ß Sheik à
Márcio – HOVET-AM
Márcio – HOVET-AM
CASO 4
SOROLOGIA PARA EHRLICHIA CANIS
Márcio – HOVET-AM
Márcio – HOVET-AM
REAGENTE
POSITIVO
Márcio – HOVET-AM
§ RIFI
DIAGNÓSTICO:
X
Arquivo pessoal Marcio Moreira
Arquivo pessoal Marcio Moreira
§ Vacinado
PCR
§ Vacinado + Infectado
INTERPRETAÇÃO
PIF
§ ELISA x RIFI (mais utilizado)
NÃO EXISTE
➢ Reação cruzada com outros coronavírus
DIAGNÓSTICO
➢ Resposta vacinal (não disponível no Brasil)
DEFINITIVO, APENAS
§ Positivo: contato com o vírus
NECRÓPSIA!
§ Negativo:
Ø Ausência de contato
Ø Janela imunológica
Ø Fase terminal: animal anérgico
Ø Contato e diminuição dos títulos (infectar)
CASO 6
FELINO, MACHO, 8 MESES
DPP® Leptospirose
http://www.bio.fiocruz.br/
CASO 7
CÃO, POODLE, 5 ANOS, FÊMEA
CASO 7
ERITROGRAMA
Valores Normais
Hemácias: 3,89 5,0-8,0 x 106/µl
Hemoglobia: 8,9 12,0-18,0 g/dL
Hematócrito: 28 37-54 (%)
VCM: 71,9 60,0-77,0
HCM: 22,8 22,0-27,0
CHCM: 31,7 31,0-36,0
PT (plasma): 8,1 5,5-7,7 g/dL
Plaquetas: 169.000 200-500 x103/mm3
Eritroblasto: 1 /100 leuc.
Outro:
Observações: Discretas anisocitose e policromasia. Plasma ictérico +++. Trombocitopenia
discreta.
CASO 7
LEUCOGRAMA
LEUCOGRAMA
Valores Normais
LEUCÓCITOS: 29800
6000 -16000/µl
RELATIVO ABSOLUTO
MIELÓCITOS 0 0 0
METAMIELÓCITOS 0 0 0
BASTONETES 5 1490
0-300
SEGMENTADOS 75 22350
3000-11500
LINFÓCITOS 11 3278 1000-4800
MONÓCITOS 5 1490 150-1350
EOSINÓFILOS 4 1192 150-1350
BASÓFILOS 0 0 raros