Resumo DIAGNSTICOS, TCNICAS e IMUNOLGICO

(Exames Parasitolgicos)

COCCIDIOSES (Parasitos) OPORTUNISTAS

Isospora belii
DIAGNSTICO LABORATORIAL
Pesquisa de oocistos nas fezes:
Mtodo de concentrao de Ritchie microscopia ptica (com lugol) ou contraste
de fase
Mtodo de Hoffmann
Autofluorescncia: oocistos fluorescem sob luz ultravioleta (UV)
Filtro: 330-380 nm oocistos de colorao azul

TCNICAS DE COLORAO
Kinyoun (a frio) ou Ziehl-Neelsen modificado oocistos de colorao vermelha
Auramina-rodamina cor amarelo-esverdeada em microscopia de fluorescncia
Pesquisa de oocistos em aspirados duodenais Bipsia de tecido (duodeno)

Cyclospora cayetanensis
DIAGNSTICO LABORATORIAL
Pesquisa de oocistos (imaturos) nas fezes
mtodo de concentrao de Ritchie (o nmero de oocistos eliminados nas
fezes muito baixo)
Microscopia por contraste de fase ou luz UV: autofluorescncia
Filtro: 330-365 nm (oocistos de colorao azul)
450-490 nm (oocistos de colorao verde)

Tcnicas de colorao:
Kinyoun (oocistos de colorao vermelha) - oocisto cido-resistente varivel
Safranina-azul-de-metileno - oocisto de colorao uniforme

Diagnstico diferencial com C. parvum

tamanho do oocisto / cido-resistncia varivel.

Cryptosporidium parvum
DIAGNSTICO LABORATORIAL
Pesquisa de oocisto nas fezes
mtodos de concentrao como formol-acetato ou ritchie +
colorao por
Kynioun, Ziehl-Nielsen ou Safranina.

Alberto Galdino - Biomedicina

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(Exames Parasitolgicos)
DIAGNSTICO IMUNOLGICO
Deteco de antgenos em amostras fecais utilizando-se anticorpos monoclonais
Ensaios Imunoenzimticos: ELISA e imunocromatogrficos
Imunofluorescncia
Deteco de anticorpos por ELISA

PROTOZORIOS

Entamoeba histolytica/ E. dspar

IMUNOLGICO
Fagocitose de eritrcitos e de bactrias
Efeitos citopticos
Resistncia lise pelo complemento
Produo de enzimas proteolticas

Homens so mais susceptveis a amebase invasiva

-hormnios
-fatores ligados ao cromossomo X
Diferenas nos genes HLA classe II pode afetar o repertrio de protenas apresentada as
clulas T CD4+.

IgE Nveis elevados correspondem a infeco intestinal ativa, so pobres marcadores de

abscessos amebianos. Papel na defesa desconhecido.
IgA anti-Gal dificultam a colonizao do intestino. Est correlacionada a resistncia ou
proteo aps o restabelecimento da infeco invasiva.

Cisteina proteinases cliva componentes da matrix extracelular permitindo o incio do

processo inflamamatrio no intestino
Ocorre produo de mediadores inflamatrios como COX- 2, IL-1, IL8, Inos
Migrao de neutrfilos e macrfagos para o local aumentando o dano tecidual
Os trofozotos so capazes de lisar neutrfilos, eosinfilos e macrfagos no ativados
Os trofozotos so cobertos pelo complexo lipofosfoglicoconjugado e GPI
(glicofosfatidilinositol), dificultando a adeso dos componentes do complemento
As cisteinas proteinases clivam C3, gerando C3b, destroem C3a e C5a.
Apresenta reatividade cruzada com CD59, inibindo a formao do MAC
CLIVAM IgA e IgG
Produzem fator inibitrio de locomoo de moncitos (MLIF)
MLIF inibe a motilidade dos macrfagos, moncitos e neutrfilos e suprime a produo de
NO.

A AMEBASE OCORRE EM CONSEQUNCIA DO DESEQUILBRIO PARASITO-HOSPEDEIRO

QUER DECORRENTE DE MECANISMOS ADAPTATIVOS DA AMEBA,
QUER RESULTANTE DE FALHAS NA RESPOSTA IMUNOLGICA OU DE AMBOS.

Alberto Galdino - Biomedicina

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(Exames Parasitolgicos)
DIAGNSTICO LABORATORIAL
EXAME COPROPARASITOLGICO
1. identifica trofozotos e cistos - no diferencia E. histolytica/ E. dispar
2. no caracteriza a patogenicidade, exceto trofozoto contendo hemcias (caracterstico da
amebase invasiva)
3. depende a competncia do microscopista - confuses de cistos com leuccitos
polimorfonucleares e trofozotos com macrfagos em fezes lquidas.

exame fresco - 20 To Ambiente ou 4oC at 4 horas

COLORAO - Tricromo
MTODOS DE CONCENTRAO
1. centrfugo flutuao no sulfato de zinco (Faust)
2. centrifugao em ter - Ritchie
3. sedimentao espontnea

SUBSTNCIAS QUE PODEM INTERFERIR NO

EXAME:laxantes c/ leo mineral antibiticos.

EXAMES SOROLGICOS
- Importante na distino de espcies
- positividade superior a 95% em pacientes com colite amebiana e abscessos hepticos

Testes utilizados:
ELISA
HEMAGLUTINAO INDIRETA
IMUNODIFUSO EM GEL
IMUNOFLUORESCNCIA INDIRETA: antgenos provenientes de culturas axnicas.
TESTES PARA DETECO DE ANTGENOS NAS FEZES PADRES ELETROFORTICOS DE
IZOENZIMAS (ZIMODEMOS)
PCR (POLYMERASE CHAIN REACTION)
Amplificao de fragmentos de DNA (1milho)
DNA proveniente de trofozotos ou cistos
H diferena de 5% na sequncia de nucleotdeos nas cepas patognicas e no patognicas.

Giardia lamblia
IMUNOLGICO
- Obstruo mecnica
- Liberao de substncias citopticas
- Liberao de toxinas que desencadeiam uma resposta inflamatria
- Renovao das clulas do epitlio intestinal

Alberto Galdino - Biomedicina

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(Exames Parasitolgicos)
DIAGNSTICO CLNICO
Clinicamente, indigesto ligeira, diarreia acompanhada de clicas e flatulncia
Diferencial:
lcera pptica
Desinteria (bacilar, amebiana, virtica)
Balantidase

DIAGNSTICO LABORATORIAL
Direto: formas vegetativas e cistos
Mtodos de Faust e Cols.
Perodos negativos

HELMINTOS
Ascaris lumbricoides
IMUNOLGICO
Resposta imune Th2, com mastocitose, eosinofilia e produo de anticorpos no
funcionais.
Opsonizao.
Mastcitos: Lise Direta e (Indireta: via histamina eosinfilos)
Macrfagos M IL-1, TNF- produo de muco pelas clulas caliciformes
-IgE: aumento da contrao da musculatura lisa (processo de arreio)

DIAGNSTICO CLNICO
Sinais e sintomas + imagem: radiografia (anlise do parnquima heptico: focos
necrticos).
Como o parasito no se multiplica dentro do hospedeiro, a exposio contnua a ovos
infectados a nica fonte responsvel pelo acmulo de vermes adultos no intestino do
hospedeiro.

DIAGNSTICO LABORATORIAL
Mtodo Direto: ver ovos, larvas, vermes
- Anlise macroscpica (Simples observao, Tamisao)
- Anlise microscpica (Hoffman, Mtodos de contagem ovos)
- Kato Katz
< 5000 ovos / g de fezes ( 1-4 vermes)
5000 -10000 ovos/ g (5 - 10 vermes)
> 10000 ( mais de 10 vermes)
- Pesquisa de larvas (Escarro, Aspirado de estmago)

Mtodo indireto: imunolgicos (no satisfatrio)

Indicado apenas nas fases de migrao larvria e nas infeces apenas com machos.

Alberto Galdino - Biomedicina

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(Exames Parasitolgicos)

Toxocara canis
Os animais domsticos e silvestres possuem uma sria de parasitos, cujas larvas infectantes s
so capazes de completar o ciclo quando alcanam seu hospedeiro prprio. Quando essas
larvas infectam um hospedeiro anormal, como o homem, a maioria delas no ser capaz de
evoluir nesse hospedeiro, podendo ento realizar migraes atravs do tecido subcutneo ou
visceral. No atingem a maturidade sexual, produzindo respectivamente as sndromes:
LARVA MIGRANS CUTNEA, LARVA MIGRANS VISCERAL e LARVA MIGRANS OCULAR.

DIAGNSTICO LABORATORIAL
Hemograma, bipsias, dados radiolgicos
ELISA
TRATAMENTO
CURA ESPONTNEA: Anti-helminticos, anti-histamnico, corticosteroide

-Fundamenta-se em todos os dados clnicos, hematolgicos, radiolgicos e imunolgicos.

-O exame de fezes SEMPRE NEGATIVO, visto no competar-se no homem a evoluo de
Toxocara (a no ser que tenha ocorrido ingesto de L5).
-H xito em ELISA, utilizando-se como antgenos, larvas L2, mantidas em cultura

Strongyloides stercoralis
IMUNOLGICO
Produo de IgG, IgA, IgM e IgE
Resposta Th2 (IL4,Il5,IL10 e IL13) protetora.

A resposta imune doena do verme parasitrio principalmente do tipo TH2, com

uma complexa interao entre anticorpos como o IgE, IgG4, citocinas (principalmente
IL-4 e IL-5) e eosinfilos circulantes e dos tecidos (eosinofilia e mastocitose).
Em pacientes sob tratamento com corticosteroides pode ver a supresso aguda de
eosinfilos e ativao de clulas T, enquanto o HTLV-1 aumenta a produo de IFN-
gama e reduo dos nveis de IgE.
M IL-1, TNF-: Estimula a atividade das clulas: Aumento da contrao da
musculatura lisa.

DIAGNSTICO CLNICO
- dificultado, uma vez que aproximadamente 50% dos casos no h sintomas: quando estes
existem, so comuns em outras helmintases intestinais.
-A trade clssica de diarria, dor abdominal e urticria sugestiva e a eosinofilia e os achados
radiogrficos e sorolgicos podem auxiliar na suspeita diagnstica.
-Uma histria de permanncia ou residncia em reas endmicas e a presena de eosinofilia
perifrica (em indivduos imunocompetentes, no sujeito a esterides) so muito teis.

DIAGNSTICO LABORATORIAL
Mtodos Diretos: Parasitolgico de Fezes
Mtodos Indiretos: Hemograma, Imunolgicos, Imagem, Biologia Molecular

Alberto Galdino - Biomedicina

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(Exames Parasitolgicos)

Parasitolgico de Fezes:
- Hoffman
- Ritchie ou Formol-ter
E, de acordo com a aula:
- Bearmann Moraes
- Rugai
- Coprocultura Harada & Mori

Pesquisa de larvas em secrees:

- Lquidos orgnicos = BAL, escarro, urina, lquido pleural
- Bipsia
- Esfregao citolgico

Raio X, ultrasonografia - alterao no relevo mucoso Duodenojejunal

ELISA
Endoscopia digestiva
Biopsia intestinal

~~ ANCILOSTOMASE / NECATORASE ~~
Ancylostoma duodenale e Necator americanus
IMUNOLGICO
A eosinofilia marcante na fase aguda da patologia, apresentando, tambm, uma
pequena elevao das quantidades de IgE e IgG. Apesar de aparecerem na fase aguda,
esses anticorpos so insuficientes para evitar reinfeces.
Na fase crnica, ocorre aumento significativo da quantidade de IgE e das
imunoglobulinas IgG, IgA e IgM.

DIAGNSTICO CLNICO
Difcil, inespecfico.
Pode ser coletivo quando realizado a partir da observao epidemiolgica da
populao ou individual (atravs da anamnese e associao de sintomas cutneos,
pulmonares e intestinais, com ou sem anemia).

DIAGNSTICO LABORATORIAL
Parasitolgico, imunolgico e imagem.
- Para diagnosticar o parasitismo, realizado o teste qualitativo para deteco de ovos de
ancilostomdeos nas fezes atravs da sedimentao espontnea (Hoffman), de sedimentao
e centrifugao (Blagg e cols.) e flutuao (Willis).
HOFFMAN
WILLIS
HARADA-MORI

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(Exames Parasitolgicos)
- possvel determinar quantitativamente o grau da infeco atravs do mtodo de Stoll
(resultado expresso no nmero de ovos por grama de fezes OPG).
Testes imunolgicos como a imunofluorescncia, fixao de complemento, hemaglutinao,
precipitao e ELISA podem ser utilizados, porm so pouco usados na prtica.

Schistosoma mansoni
A patogenia da doena est ligado a vrios fatores, tais como cepa do parasito, carga
parasitria adquirida, idade, estado nutricional e resposta imunitria da pessoa. De todos estes
fatores parece que os dois mais importantes so a carga parasitria e a resposta do sistema
imune do paciente. Assim, em populao com a mdia do nmero de ovos nas fezes muito
elevada, mais frequente a forma hepatoesplnica e as formas pulmonares. sabe-se tambm
que as alteraes cutneas e hepticas so grandemente influenciadas pela resposta imune do
paciente, frente aos antgenos dos esquistossmulos e dos ovos.

DIAGNSTICO CLNICO
No diagnstico clnico, deve-se levar em conta a fase da doena. Alm disso, de fundamental
importncia a anamnese detalhada do caso do paciente. O diagnstico pode ser direto atravs
de exame de fezes, bipsia ou raspagem da mucosa retal; ou ainda atravs de mtodos
imunolgicos ou indiretos.

Hoffman, Pons e Janer

Kato-katz
Bipsia ou raspagem da mucosa retal

DIAGNSTOCO IMUNOLGICO
RFC
Hemaglutinao indireta
RIFI
ELISA
PCR

Enterobius vermicularis
PATOGENIA
O paciente s nota que alberga o verme quando sente prurido anal (principalmente a
noite) ou quando v o verme nas fezes.
Em infeces maiores, pode provocar enterite catarral por ao mecnica e irritativa.
O ceco apresenta-se inflamado, e s vezes, o apndice tambm atingido.
O ato de coar a regio anal pode lesar ainda mais o local, possibilitando infeco
bacteriana secundria.

- Ao mecnica: eroses (inflamao catarral)

- Ao irritativa: ao das fmeas e substncia gelatinosa durante a ovoposio
- Hipersensibilidade: prurido anal + crises urticrias

Alberto Galdino - Biomedicina

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(Exames Parasitolgicos)
* Irritao perianal prurido anal perda de sono, irritabilidade masturbao/erotismo
* Eritema/congesto/muco
* Escoriaes na pele
* Apendicite

DIAGNSTICO CLNICO
prurido anal + sinais de irritao cutnea + Eosinofilia 4-15%

DIAGNSTICO LABORATORIAL
mtodos diretos e indiretos
- Anlise macroscpica: (simples observao / tamisao)
- Anlise microscpica: (Hoffman pesquisa de ovos / Graham ou fita adesiva)
- Anlise histolgica

OS MTODOS DE ROTINA NO SO TEIS NO DIAGNSTICO DA ENTEROBIOSE.

Trichuris trichiura
IMUNOLGICO
Hipersensibilidade aos produtos metablicos
A resposta imune Th2
Mastocitose intestinal, eosinofilia e aumento de IgE e IgG4

DIAGNSTICO
O diagnostico clnico no especifico, devendo ser complementado pelo laboratorial.

DIAGNSTICO LABORATORIAL
Presena de ovos nas fezes: principal mtodo utilizado o mtodo Kato-Katz
(quantitativo e qualitativo).
Vermes no nus (olho nu)

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(Exames Parasitolgicos)

~~ TENASE E CISTICERCOSE ~~
Taenia saginata e Taenia solium
IMUNOLGICO
Cisticercose
Aumentos significativos de infcitos T e B, de eosinfilos no sangue e LCR
Predominncia de IgG, havendo aumento menos acentuado de IgE e IgM (indicando
que a resposta imunolgica, tanto celular quanto humoral ao parasito est relacionada
com a quantidade e viabilidade de cisticercos, localizao nos rgos, ou na
musculatura ou com a reatividade imunolgica do hospedeiro.
O cisticerco capaz de produzir um escape da resposta imune humoral. O
componente C1q pode ser inibido pela ao da paramiosina.
A taenistatina inibe as vias clssicas e alternativas do complemento, e parece interferir
juntamente com outros fatores com a proliferao de linfcitos e com a funo dos
macrfagos, inibindo a resposta celular.
Nos paciente com neurocisticercose tem-se observado aumento da concentrao das
imunoglobulinas IGg, IgM, IgE, IGA e IgD.

DIAGNSTICO CLNICO
Tenase
O diagnstico pode ser clnico (mais difcil por ser predominantemente assintomtica).
- Parasitolgico de fezes (direto fita gomada/clice de sedimentao e indireto toxinas)
O exame laboratorial para investigao de ovos mais utilizado empregando mtodos
rotineiros como o mtodo de Faust e Hoffman, ou pelo mtodo da fita gomada.
-Para o diagnstico especfico/diferencial, h necessidade de se fazer tamizao (lavagem em
peneira fina) de todo o bolo fecal, recolher as proglotes existentes e identific-las pela
morfologia da ramificao uterina.
Mtodos de Rotina (ovos)
-FAUST
-HOFFMAN
-GRAHAM
Tamizao

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(Exames Parasitolgicos)
Cisticercose
- Imagem (raio X, ultrassonografia, RMN, tomografia etc.)
- Imuno (ELISA, imunofluorescncia) pouca utilidade.
Tem como base aspectos clnicos, epidemiolgicos e laboratorias. O diagnstico laboratorial
fundamentado em observaes anatomopatolgicas das bipsias, necropsias e cirurgias. O
cisticerco pode ser identificado por meio direto, atravs de exame oftalmoscpico de fundo de
olho ou ainda pela presena de ndulos subcutneos no exame fsico.

PARASITAS SANGUNEOS
Leishmania sp.
LEISHMANIOSE TEGUMENTAR e LEISHMANIOSE VISCERAL

DIAGNSTICO
Exames Parasitolgicos: PESQUISA DIRETA
Cultivo (in vitro)
Inoculao em animais (Hamster)/( in vivo)
Histopatologia
Puno Aspirativa

Estirao Sanguneo
Coloca-se pequena gota de sangue em uma extremidade de uma lmina e com outra lmina
puxa-se a gota com movimento regular homogneo, dando-se uma inclinao de
aproximadamente 45 lmina que executa a preparao.

Gota Espessa
- Coloca-se uma ou duas gotas de sangue no centro da lmina e com o canto de outra
lmina ou da lanceta que foi usada na puno, espalha-se o sangue com movimento
circular, at se obter uma rea de cerca de 1 cm de dimetro (Malria), ou movimento
de estiramento at se obter um retngulo de bordas bem delimitadas(Filariose).
- Uma vez seca, cobre-se a preparao com gua destilada ou mergulha-se a lmina em um
recipiente contendo-se gua destilada. 10 min A gua destilada tem por finalidade
desemoglobinizar a preparao.

IMUNOLGICO
ANORMALIDADES DO SI STEMA IMUNE NA LEISHMANIOSE VISCERAL
Resposta imune celular intensamente deprimida com anergia nos pacientes graves
in vivo: diminuio acentuada ou ausncia de teste de htt espec fico para leishmanina
(TESTE DE MONTENEGRO)
diminuio de testes gerais de imunidade celular (candidina e ppd)

HIPERATIVAO DE LINFCITOS B
ATIVAO POLICLONAL E Ag-ESPEC FICA (LPG e GP 63)
INTENSO INFILTRADO DE PLASMCITOS
INTENSO AUMENTO DE GAMA-GLOBULINAS (AT 8 %)
ASSOCIADO DIMINUIO DE ALBUMINA RESULTA EM INVERSO DA RELAO
ALBUMINA /GLOBULINA.

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(Exames Parasitolgicos)

DIAGNSTICO IMUNOLGICO
Intradermorreao de Montenegro (IDRM)
Sorologia
Imunofluorescncia Indireta (IFI)
ELISA
WESTERN-BLOT
Anticorpos monoclonais e isoenzimas
PCR (Polymerase Chain Reaction): amplificao do DNA

EXAMES COMPLEMENTARES
HEMOGRAMA:
Anemia
Leucopenia
Neutropenia
Linfocitose relativa
Trombocitopenia
Plasmocitose

SUMRIO DE URINA:
Albuminria
ELETROFORESE DAS PROTEINAS SRICAS
Inverso da relao albumina globulina (albumina globulina)
BIOQUMICA
Elevao das aminotranferases (2 a 3x)
Aumento das bilirrubinas, da uria e da creatinina.

EXAMES LABORATORIAIS SEGUINDO CADA FASE

Perodo Inicial
Hemograma revela anemia.
Leuccitos sem alteraes significativas e com predomnio de linfcitos.
VHS elevado.
Hiperglobulinemia.
Sorologias so reativas.
Teste de intradermorreao de Montenegro negativa.
Aspirado do bao e da medula ssea geralmente mostram as formas amastigotas do
parasita.

Perodo de Estado
Pancitopenia.
Inverso da relao albumina/globulina, com hipergamaglobulinemia.
Elevao das aminotranferases (2 a 3x)
Aumento das bilirrubinas, da uria e da creatinina.
Nveis de anticorpos anti-Leishmania elevados.
Intradermorreao de Montenegro negativa.
Encontro de amastigotas em aspirado de medula ssea, de bao, de linfonodos e
fgado.

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(Exames Parasitolgicos)
Perodo Final
Em casos de no diagnstico, h febre contnua e comprometimento mais intenso do
estado geral.
Pode se instalar quadro de desnutrio.
Outras manifestaes: hemorragias, ictercia e ascite.
Infeces bacterianas secundrias.

Diagnstico Diferencial
Malria
Febre tifide: anemia mais leve, esplenomegalia menor e globulinas normais.
Salmonelose
Esquistossomose mansnica:
Leucocitose com eosinofilia.
Linfomas e leucemias agudas.

Montenegro + = Parasitolgico

Trypanosoma cruzi
Tripomastigota (forma infectante) cinetoplasto posterior ao ncleo
Epimastigota
Amastigota (vertebrados) presente nos macrfagos.

IMUNOLGICO
1 Interao parasita/clula
2 Rompimento
3 Liberao de fragmentos celulares e antgenos parasitrios
4 Inflamao focal aguda proporcional aos ninhos de parasitas
5 Formao de Ac IgG e IgM
6 Reduo da parasitemia

PASSO 1: A infeco = vetor (barbeiro) fazendo repasto sanguneo e deixando suas fezes
PASSO 2: A invaso de clulas (inicialmente macrfagos)
PASSO 3: a disseminao no hospedeiro vertebrado.
Infeco Local Ndulos Linfticos SNC/CORAO/TGI

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(Exames Parasitolgicos)

Fase Aguda (90%)

Assintomtica ~ 3 meses
Fase Crnica (70%) crnicos indeterminados / (30%) crnicos sintomticos
~10% forma cardaca
~10% sintomas digestivos
~10% formas mistas

DIAGNSTICO LABORATORIAL
FASE AGUDA: presena do parasita no sangue e na medula ssea, incio de formao de
anticorpos.
PARASITOLGICO
Exame de sangue a fresco e em gota espessa
Esfregao sanguneo (Giensa)
Cultura de sangue ou material de bipsia(NNN ,LIT)
Inoculao em camundongo
IMUNOLGICO
RIFI, ELISA(IgM),
Hemaglutinao indireta

FASE CRNICA: baixa parasitemia, presena de AC

PARASITOLGICO
Xenodiagnstico, Hemocultura,
Inoculao em camundongos
IMUNOLGICO
ELISA (IgG), RIFI (IgG), Hemaglutinao Indireta, OUTROS
LMCo (Lise mediada por complemento)
PCR (Reao em cadeia da Polimerase)
1 PARASITOLGICO + ou 2 IMUNOLGICOS +

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(Exames Parasitolgicos)

Toxoplasma gondii
Taquizotos (forma ativa/FASE AGUDA)
Cistos (Bradizotos)
Oocistos (fezes de gatos).

IMUNOLGICO
Quando um hospedeiro se infecta com o parasito, ocorre multiplicao na porta de entrada e
logo em seguida ocorre a sua disseminao por todo o organismo atravs das vias sangunea e
linftica. Durante este perodo, inicia-se a formao de anticorpos especficos e o
desenvolvimento de mecanismos imunes celulares que so responsveis pela destruio dos
taquizotos extracelulares. Como consequncia, durante a fase crnica da toxoplasmose,
somente os bradizotos ou taquizoto intracelulares persistem e so responsveis pela
manuteno de ttulos sorolgicos que podem durar toda a vida do hospedeiro.

IMUNIDADE HUMORAL
A pesquisa de Igm e IGA em recm-nascidos so utilizadas para o diagnstico de toxoplasmose
congnita, pois no atravessam a placenta e quando presentes no soro indicam a produo
pelo prprio feto, em resposta a uma infeco pelo T.gondii.

IMUNIDADE CELULAR
No inicio a infeco de T.gondii, os macrfagos englobam os taquizotos nos fagossomos, onde
os parasitos devem se multiplicar. A multiplicao inibida quando ocorre fuso entre
fagossomos e lisossomos e estes devem ser estimulados pelo IFN-y
Uma vez ativados, os macrfagos inibem ou matam T.gondii atravs da rupitura oxidativa ou
por um mecanismo por L-arginina. H, tambm, alguma evidncia surgindo que o fator de
necrose tumoral alfa (TNF-alfa) deve agir em sigenergismo com IFN-y para aperfeioar a
ativao dos macrfagos.
Os macrfagos e IFN-y so, sem dvida, importantes na imunidade contra T.gondii.

1.Taquizoitas opsonizados por anticorpo perdem a capacidade de inibir fuso lisossoma-

fagossoma
2. Anticorpos revestem o parasito e promovem a sua captao preferencial por macrfagos
onde sero destrudos, isto desviam o parasitismo de clulas no fagocticas para clulas
Fagocticas.

DIAGNSTICO
- A pesquisa de formas parasitrias, ao contrrio das demais infeces, dificilmente elemento
diagnstico, sendo somente realizada durante os exames anatomopatolgicos dos casos fatais
ou raramente por bipsias.
Pesquisa do Parasito;
Cultura do Parasito;
PCR
Inoculao em camundongos

Alberto Galdino - Biomedicina

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(Exames Parasitolgicos)
DIAGNSTICO IMUNOLGICO
Teste do corante ou reao de Sabin Feldman (FSF):
Usado para diagnstico individual na fase aguda ou crnica da doena.
Reao de fixao de complemento (RFC):
uma reao que apresenta maior sensibilidade na fase aguda da doena.
Reaes de imunofluorescncia indireta (RIF):
um dos melhores mtodos, sensvel e seguro, e pode ser usado na fase aguda. Como
crnica da doena.
Hemaglutinao indireta (HA):
simples e bastante sensvel mtodo de diagnstico. Porm, inadequado para o
diagnstico precoce, pois no detecta toxoplasmose congnita em recm-nascido.
Imunoensaio enzimtico ou teste ELISA:
um dos mais usados para screening inicial de toxoplasmose em seres humanos.
Imunoblot:
realizada a eletroforese dos antginos em gel de poliacrilamida, para a separao dos
componentes proticos os quais so transmitidos para um papel de nitrocelulose e
posteriormente processados contra o soro a ser testado e visualizado atravs de uma
reao especfica. (No um teste usado rotineiramente).

Os mtodos mais usados atualmente RIF e ELISA.

Testes de avidez de IgG

Teste ELISA modificado (ELISA-Uria)
Avaliao da maior ou menor facilidade de dissociao da ligao antgenoanticorpo
Teste ELISA-IgG
Etapa de ligao antgeno-anticorpo
Lavagem com soluo caotrpica de Uria 6M
Prossegue-se a reao pela adio do anticorpo conjugado enzima e o substrato
Baixa avidez: Acentuada diminuio do
ttulo em relao ao ttulo original sem
tratamento com Uria
Ttulo aps uria / Ttulo original X 100
Western blotting

Alberto Galdino - Biomedicina

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(Exames Parasitolgicos)
Wuchereria bancrofti
Diagnstico Clnico
difcil devido a semelhana com outras doenas, mas em reas endmicas casos de febre
recorrente associada a adenolinfangite pode ser indicativo de infeco filarial.

Diagnstico Laboratorial
-Pesquisa de microfilrias atravs do exame de gota espessa (usada em inquritos
epidemiolgicos por ser rpida prtica e econmica), outro exame a filtrao em membrana
de policarbonato ou ainda o mtodo de Knott.
-Os testes sorolgicos para pesquisa de anticorpos no adequada pois no distingui
indivduos parasitados de indivduos curados, outro problema so os resultados cruzados
devido a outras helminroses, uma forma de ainda serem usados os testes sorolgicos atravs
da pesquisa de antgenos circulantes.
-Pesquisa de DNA e pesquisa de vermes adultos (ultra-sonografia, linfocitografia).
-A coleta do material o mais indicado no perodo da noite, pois a microfilaremia no sangue
perifrico melhor no perodo noturno, caso a coleta no seja possvel no perodo da noite,
administra-se dietilcarbamazina e faz a coleta aps 20 a 60 minutos.

Pesquisa de Microfilrias
Gota espessa
Filtrao em membrana de policarbonato
Knott
Exame direto

Diagnstico por Imagem

Ultrassom (pesquisa de vermes adultos)
Linfocintigrafia (Avaliao dos Vasos Linfticos)

Diagnstico Sorolgico
Pesquisa de Anticorpos
IMF
ELISA (IgG e IgG4)

Pesquisa de Antgenos
ELISA (Og4C3)
ICT card (AD12)

Alberto Galdino - Biomedicina