“Métodos e Técnicas em Análises

Clínicas”

Prof. Dr. Alexandre Torchio Dias

2023

 Conteúdo Programático:

O profissional do laboratório clínico; terminologia médica,

Avaliação da qualidade no laboratório (sensibilidade, especificidade, precisão e
exatidão na etapa analítica)

Hematologia e Hemostasia

Bioquímica e os métodos analíticos

Perfil hepático: das doenças virais às obstrutivas

Gasometrias: como interpretar o deseqilíbrio ácido-básico

Perfil lípídico e marcadores cardíacos: das doenças metabólicas ao impacto clínico no

infarto agudo do miocárdio

Perfil renal e as complicações clínicas – da uroanálise às provas bioquímicas

Microbiologia: métodos e testes microbiológicos relacionados às diferentes doenças

Doenças infecciosas e autoimunes: provas laboratoriais e alterações clínico-laboratoriais

Parasitologia: testes laboratoriais e doenças parasitárias

Casos Clínicos

O exame laboratorial tem por

finalidade...

Apoiar o corpo clínico no diagnóstico de

enfermidades

“Eficiência, qualidade e confiabilidade”

 Importância do Laboratório Clínico

❑ ~ 70% dos diagnósticos são realizados

embasados nos exames laboratoriais

❑ 60 – 70% das decisões clínicas são tomadas de

acordo com resultados dos exames laboratoriais

Guimarães et al, 2011

 Importância do Laboratório Clínico

❑ EUA – Erros diagnósticos – causa mais

comum de processos e reivindicações
judiciais

❑ Segurança do paciente!

Guimarães et al, 2011

 O exame e suas etapas de

realização:
Processo em 03 etapas:

Fase Pré-analítica
Fase Analítica
Fase Pós Analitica

LAUDO E SUA INTERPRETAÇÃO ➔ CONDUTA CLÍNICA!




 Fase analítica
Por que ocorrem erros??

Negligência

Falta de atenção

Desconhecimento técnico-científico

Estresse contínuo

Erros nas fases pré-analítica!

 Fase Pré-analítica

60 – 90% dos erros laboratoriais

estão concentrados nesta fase!!!

Guimarães et al, 2011

 Fase Pré-analítica
Erro pré-analítico Frequência %
Coleta de amostra inadequada 0.6
Interpretação incorreta do pedido 3.8
Perda da solicitação médica 1.9
Erro de identificação do paciente 8.8
Coleta em tubo inadequado 8.1
Amostra colhida do membro com infusão 1.9
Tubo vazio 6.9
Não cadastro do pedido 2.5
Volume do tubo incorreto 13.1
Amostra sem refrigeração 1.9
Perda do tubo 3.1

Guimarães et al, 2011

SBPC
J. Bras. Patol. Med. Lab. vol.45 no.6 Rio de Janeiro Dec. 2009
Laboratório de Análises Clínicas

Alguns exemplos de não-

conformidades!!!

Diagnosticados na fase analítica

Plasma adequado – amostra OK!
Hemólise
Hemólise
Comparação: Soro normal e hemolisado
Coágulos...
Coágulo
Coágulo
Lipemia

SBPC
 Impacto na fase analítica
Condição: teste realizado em material não-conforme!

• Falsos resultados

• Conduta clínica inadequada!



Coágulo... danos ao paciente!
E aos demais pacientes...???



Gasometria
Hemograma
Equipamentos automatizados
e semi-automatizados em
Bioquímica Clínica
Relação dos principais setores do LAC e exemplos de exames
realizados nos áreas técnicas
Setor Exemplos de Exames
Hemograma (eritrograma, leucograma e plaquetograma),
Provas de coaulação, Tipagem ABO e Sistema RH, Provas de
Hematologia Clínica e Hemostasia
Coombs direto e indireto, contagem de reticulócitos, prova
de falcização, Curva de Resistência Osmótica.
Gasometria, Dosagens de: glicemia, amilase, lipase, ácido
úrico, proteínas totais e frações, perfil renal (uréia,
Bioquímica Clínica e Gasometria creatinina, clearence de creatinina, proteinúrias) provas
AST, ALT, FAL, GGT, bilirrubinas total e frações, cálcio iônico,
ionograma, Colesterol total e frações, Enzimas cardíacas.

Culturas de bactérias e fungos, provas de antibióticoterapia

Microbiologia Clínica
Imunologia Clínica, Hormônios e Sorologia
Dosagem de proteinúria em Urina de 24 horas, Urina tipo I,
Uroanálise e Fluidos Corporais
Parasitologia Clínica
Outros testes
(antibiograma), Baciloscopia (Pesquisa de BK), Provas de
Identificação e classificação bacteriana, Hemocultura.
Prova para Sífilis (VDRL), Hormônios sexuais masculinos e
femininos, Hormônios tireoidianos, Provas de
autoimunidade, Sorologias para diferentes doenças e
agentes, dentre outros.
Análise dos líquidos cavitários (líquor, líquido ascético,
líquido pleural, líquido sinovial).
Provas Protoparasitológicas, Sangue Oculto nas Fezes.
Pesquisa molecular, cariotipagem, FISH, Arrays, MLPA.
 Conceitos básicos em Análises
Clínicas
» Valor de referência (VR) » Exatidão

» Testes qualitativos » Precisão

» Testes quantitativos
» Média e desvio padrão

» Especificidade
» Erros aleatórios
» Sensibilidade
» Erros sistêmicos

 Alguns conceitos...
» Especificidade - potencialidade do teste de detectar de maneira correta indivíduos sadios, ou
seja, relaciona-se a capacidade de identificar de maneira inequívoca os indivíduos não-doentes.

– Os testes com elevada especificidade possuem baixa probabilidade de apresentarem

resultado falso-positivo, ou seja, de evidenciar indivíduos saudáveis como doentes.

» Sensibilidade - potencialidade do teste detectar uma ínfima porção do analito na amostra, ou

seja, é a capacidade de detectar de maneira correta os pacientes doentes.
– O teste com alta sensibilidade é muito utilizado para triagem diagnóstica, com
possibilidade ínfima de revelar resultados falso-negativos.

» Um bom teste laboratorial - elevada especificidade e sensibilidade, as quais devem estar

equilibradas conforme a proposta do teste laboratorial.

 Relação E/S
» A relação de sensibilidade e especificidade é avaliada utilizando-se ferramentas de
validação como a Curva ROC (Receiver Operator Characteristic).
» A curva ROC é um instrumento que inibe os erros diagnósticos, contribuindo para a
padronização dos testes laboratoriais, minimizando a ocorrência de resultados falso-
negativos e falso-positivos.

» Desta forma, os testes laboratoriais apresentam valores preditivos positivos e valores

preditivos negativos. O Valor Preditivo Positivo (VPP) representa a probabilidade de
uma pessoa doente apresentar resultado de teste laboratorial positivo.
» Já, o Valor Preditivo Negativo (VPN) representa a probabilidade de uma pessoa sem
doença ter resultados compatíveis com a normalidade.

» A sensibilidade, especificidade, os VPP e VPN são determinados com base nos

estudos populacionais, o que contribui para o equilíbrio e confiabilidade do teste.

Exatidão e Precisão
 Avaliação da qualidade no laboratório

Interpretação de gráficos de Controle de Levey-

Jennings e Regras de Westgard na rotina
laboratorial bioquímica

Prof. Dr. Alexandre Torchio Dias

2023

O que é Qualidade?
 Controles de Qualidade
Controle de Qualidade Interno Controle de Qualidade Externo
Curva de Gauss
 Controle de Qualidade Interno
Controle Resultados:
INTRAlaboratorial
Avaliados de acordo com:
Alvo
– Amostras conhecidas DP dos testes
(hematologia, soros controles
para bioquímica, sorologia,
hormônios, etc...) Regras de Westgard
Curva de Levey-Jennings

– Níveis diferentes de Possível detectar:

controles
(Alto, Normal e Baixo) Tendência
Perda de exatidão
Perda de precisão

 Conceitos
Tendência: Valores que tendenciam para um determinado lado do gráfico

Perda de exatidão: Não ter resultados exatos e corretos - pontos deixam a esperada oscilação em
torno da média e se deslocam para cima, ou para baixo.

Perda da precisão: Reprodutibilidade de resultados - Imprecisão: Elevação da aleatoriedade.

Mesmo com resultados oscilando em torno da média - pontos se distanciam muito da mesma.

> 3DP - rejeição da corrida analítica;

Gráfico de Levey-Jennings

Gráfico que traz os resultados dos controles em função do tempo

Levey & Jennings - 1950

Henry e Segalove -Definição de limites de ±3 desvios padrão.

As Regras Múltiplas de Westgard

Funcionalidade: interpretar os resultados no

sistema de Controle Interno da Qualidade (CIQ).

Método: combinação de critérios de decisão, com o

objetivo de perceber comportamentos
inadequados em uma ou mais corridas analíticas -
indicação do número de vezes que uma situação
ocorre e pelo limite no gráfico de controle.

Objetivos: identificar não conformidades, esclarecer

informações sobre o tipo de erro apresentado
(sistemático ou aleatório)

Ideal - utilização de pelo ao menos 2 níveis de

controle!

 Regras de Westgard
• Regra 1:3s - Rejeição: • Regra R:4s - Regra de
Rejeição:
– Controle ultrapassou o limite de 3 x
+/- DP
– Diferença entre os resultados dos dois
controles é maior que 4DP (para 2 níveis
– Limite de rejeição para o gráfico de de CQ)
Levey-Jennings.

 Regras de Westgard
• Regra 4:1s - Regra de • Regra 7x - Regra de
Rejeição: Rejeição:
– Quando 4 resultados de um controle – Resultados de controle
excedem os mesmos limites, ou seja, • Em um lado do gráfico
Alvo +/- 1s – 7 dias consecutivos
– Não necessário que
ultrapassar limites de 2/3 x DP

 Regras de Westgard
• Regra 7T - Regra de
Rejeição:
– Resultados de controle
• 7 dias consecutivos tendenciando
para um dos lados do gráfico
• Regra 10x - Regra de
Rejeição:
– Resultados de controle
• Em um lado do gráfico 10 dias
consecutivos

• não é necessário ultrapassar

limites de +/- 2/3 x DP

 Ação:

- Analisar o erro, com ação sistematizada para

correção do problema - SIM - OK!
NÃO - Suspensão do
teste!

Erros aleatórios e sistemáticos

Como identificá-los?
 Controle de Qualidade Externo

Resultados:

Avalia EXATIDÃO!

Modelo IAL
Controle Instituto Adolfo Lutz
INTERlaboratorial
–Amostras conhecidas
aliquotadas
(hematologia, bioquímica, sorologia, hormônios,
etc...) - amostras são avaliadas por laboratórios parceiros

Acreditação no Laboratório de Análises Clínicas

 Concluindo...

Os exames laboratoriais são cruciais para

o diagnóstico inequívoco dos pacientes!
 DÚVIDAS?

Exercício