artigo original

MARCOS FABIANO SIGWALT; ROGRIO DE FRAGA, GERALDO CANTO; GIOVANNA OLIVIRI; ANDRESSA GULIN ; DIOGO FALCO, RICARDO HASSE, ALBERTO CESER F. LIMA

origem e tipos de fagcitos

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RUBS, Curitiba, v.1, n.1, p.25-35, p.17-24, jan./mar. jan./mar. 2005 2005

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RESUMO
Os fagcitos so componentes celulares da imunidade inata ou natural responsveis pela primeira linha de defesa do organismo contra infeces, eliminando os microrganismos invasores (patgenos) atravs de um mecanismo efetor denominado fagocitose. O presente estudo apresenta uma reviso sobre os tipos de clulas fagocticas, bem como sobre sua origem e maturao. Palavras-chave: fagcitos, granulcitos polimorfonucleares, neutrfilos, moncitos e macrfagos.

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Juliana Puka, Heloisa Helena Ribas Vieira de Mattos, Ana Cristina Gavron, Su-Ellen de Oliveira Vianna e Rogrio Saad Vaz

ORIGEM E TIPOS DE FAGCITOS Juliana Puka1 - UnicenP, Heloisa Helena Ribas Vieira de Mattos1- UnicenP, Ana Cristina Gavron1- UnicenP, Su-Ellen de Oliveira Vianna1- Unicenp e Rogrio Saad Vaz2- UnicenP

1 INTRODUO As respostas imunes envolvem, primeiramente, o reconhecimento do patgeno ou antgeno e, em seguida, a elaborao de uma reao dirigida a este elemento, com a finalidade de elimin-lo do organismo. Entretanto, antes mesmo desse encontro com os patgenos, dispomos de mecanismos de defesa essenciais, como as barreiras epiteliais (pele e mucosas), que impedem a entrada de microorganismos do ambiente externo, e a presena de clulas efetoras e protenas plasmticas, que podem ser rapidamente ativadas na presena desses microorganismos ou de substncias produzidas na infeco, iniciando reaes para sua eliminao. Esses mecanismos constituem a imunidade inata, a primeira e evolutivamente mais antiga forma de defesa do organismo contra infeces, que, alm de combater os microorganismos e seus produtos, estimula as respostas imunes adquiridas, para obter uma defesa otimamente eficaz e controlar a enorme diversidade de patgenos existentes. Quando algum microorganismo rompe essas barreiras, entrando nos tecidos ou na circulao, d-se incio inflamao, a reao celular da imunidade inata em que as clulas efetoras, representadas principalmente por fagcitos, atacam os microorganismos e recrutam mais leuccitos para o stio de infeco, com o objetivo de eliminar o agente infeccioso atravs da fagocitose e reparar o dano tecidual. 2 ORIGEM DAS CLULAS DO SISTEMA IMUNE Durante o perodo de desenvolvimento embrionrio, a hematopoiese (gerao de clulas sangneas) ocorre inicialmente em pequenas ilhas de clulas mesodrmicas do saco vitelino e mesnquima para-artico e, mais tarde, aproximadamente a partir da sexta semana de gestao, no fgado e bao fetais.(1-3) Gradualmente e em especial a partir do quinto ms de gestao, a medula ssea vai assumindo essa funo, de forma que, aps o nascimento, a hematopoiese ocorre em sua maior parte na medula vermelha de ossos, como o esterno, as vrtebras, os ossos ilacos e as costelas.(2-5) Assim, no adulto, a medula ssea o local de gerao de todas as clulas sangneas circulantes,(1-12) embora o fgado e o bao possam ser recrutados como stios de hematopoiese diante de uma leso da medula ou uma demanda excepcional de produo de novas clulas sangneas.(1-3,5) Todas essas clulas originam-se de clulas comuns indiferenciadas presentes, aps o nascimento, somente na medula ssea, as clulas-tronco ou stem-cells (SC), que proliferam com objetivo de auto-renovao, isto , produzem clones ou um pool de clulastronco de reserva na medula, e, pela sua alta capacidade de proliferao e diferenciao, geram progenitores, como as clulas-tronco hematopoiticas pluripotentes (HSC) e linhagens sangneas particulares.(1,2,6,8-11) Atravs da ao de uma citocina denominada fator de clula1 2

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Alunos do UnicenP. Doutorando em biotecnologia pela UFPR e professor dos cursos de Farmcia e Medicina do UnicenP- rvaz@unicenp.br

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tronco ou ligante c-Kit, sintetizado pelas clulas estromais da medula ssea, essas clulastronco imaturas tornam-se responsivas a outras citocinas, necessrias para a hematopoiese normal da medula ssea e para a adequao de sua resposta aos estmulos.(6) Essas citocinas hematopoiticas, geralmente fatores estimuladores de colnias (CSF), podem ser produzidas por clulas estromais e macrfagos da medula ssea ou, para reposio de leuccitos consumidos durante reaes inflamatrias e imunes, por macrfagos ativados por microorganismos e citocinas ou por linfcitos T estimulados por antgenos.(6) Portanto, sob a influncia de diversos fatores, como interaes celulares e presena de citocinas solveis, e sob a ao de vrios fatores de crescimento e indutores de diferenciao nos stios de hematopoiese, as clulas-tronco hematopoiticas pluripotentes diferenciam-se em diferentes linhagens celulares,(1-6,9,10) promovendo o crescimento da maioria ou de todas as clulas envolvidas na resposta imune (fig.1)

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Figura 1 Desenvolvimento das diferentes linhagens de clulas sangneas.

Todas as clulas do sistema imune originam-se a partir de clulas-tronco autorenovveis (SC) da medula ssea, que se dividem formando um pool de clulas-tronco de reserva e as clulas-tronco hematopoiticas pluripotentes (HSC). Estas sofrem diferenciao, originando os progenitores mielide (CFU-GEMM) e linfide (CFU-L) e as quatro principais linhagens celulares sangneas megacarioctica, eritride, mielide e linfide que originam, respectivamente, plaquetas, eritrcitos e, fundamentais para o funcionamento do sistema imunolgico, granulcitos, fagcitos mononucleares e linfcitos. Mastcitos e clulas dendrticas no esto representados. (CFU = unidade formadora de colnia; G = granulcitos; E = eritrcitos; M = megacaricitos; M = moncitos; L = linfcitos; Eo = eosinfilos; B = basfilos).

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DESENVOLVIMENTO DOS FAGCITOS Os fagcitos ou clulas fagocticas so clulas do sistema imune divididas em dois grupos principais fagcitos mononucleares e granulcitos polimorfonucleares. O termo granulcitos empregado para englobar eosinfilos, neutrfilos e basfilos, que apresentam grande quantidade de grnulos citoplasmticos e recebem essa denominao conforme o comportamento desses grnulos diante dos corantes utilizados na preparao para microscopia.(4-7,13) Essas clulas apresentam um ncleo irregular multilobulado, especialmente os neutrfilos (denominados polimorfonucleares ou PMN comumente), e tm diferentes funes efetoras importantes na inflamao aguda, porm apenas neutrfilos e, supostamente, eosinfilos,(4,13) apresentam capacidade de fagocitose e destruio de microrganismos ingeridos. J os fagcitos mononucleares, divididos em moncitos e macrfagos, constituem o grupo mais importante de clulas fagocitrias de longa vida, a linhagem fagoctica mononuclear, que tem funo de neutralizao, englobamento e destruio de partculas, incluindo os agentes infecciosos, bem como iniciao e coordenao de outras fases da resposta imunolgica. (4-6,9-12,14) Assim, pode-se dizer que os fagcitos so de origem mielide, isto , que so gerados a partir de um progenitor mielide comum. Nesse processo, denominado mielopoese (fig. 1), a clula-tronco hematopoitica pluripotente diferencia-se em unidade formadora de colnia mielide, reconhecida pela sigla CFU-GEMM pelo seu potencial de originar granulcitos, eritrcitos, moncitos e megacaricitos.(1-3) Sob influncia e regulao positiva de fatores estimuladores de colnia (CSF) e interleucinas (tipos 1, 3, 4, 5 e 6) produzidos por clulas estromais da medula ssea e por formas maduras e diferenciadas de clulas mielides e linfides, bem como sob regulao negativa de fatores como o TGF, este progenitor mielide diferencia-se em CFU-GM. Esta unidade formadora de colnia, por sua vez, direcionada para o desenvolvimento dos moncitos, origina os monoblastos, que se diferenciam em pr-moncitos e, finalmente, em moncitos, que deixam a medula diferenciados incompletamente e migram, atravs dos vasos sangneos, para os vrios rgos e sistemas teciduais onde amadurecem e tornam-se macrfagos. Por outro lado, quando direcionada para a via neutroflica, a CFU-GM origina mieloblastos, que se diferenciam em pr-mielcitos, mielcitos e metamielcitos, que amadurecem e so liberados na circulao como neutrfilos.(1-3,6,8) TIPOS DE FAGCITOS 1) Neutrfilos Os neutrfilos so importantes clulas da imunidade inata que atuam nas fases mais iniciais das respostas inflamatrias, migrando do sangue para os tecidos com o objetivo de ingerir e destruir microorganismos (fagocitose) e evitar a infeco.(1,2,4,6) Constituem a populao mais abundante de leuccitos circulantes, com aproximadamente 50 bilhes de clulas no sangue ou metade a dois teros de todos os leuccitos circulantes, destinadas a responder rapidamente e em grande nmero toda vez que houver alguma leso tecidual.(6,15-17) Aps sua produo na medula ssea, estimada em mais de 1011 clulas por dia, permanecem retidos como reserva por um perodo adicional de cinco dias, sendo ento liberados na corrente sangnea, onde, em condies normais, circulam por cerca de 6 a 12 horas em mdia.(6)

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Dentro desse perodo, se no forem recrutados para algum stio de inflamao, sofrem morte celular programada (apoptose), sendo posteriormente fagocitados por macrfagos residentes no fgado ou no bao. Do contrrio, isto , existindo alguma leso ou infeco, so levados para o local atravs de um gradiente de concentrao de fatores quimiotticos e, ao alcanar este local, aderem rapidamente ao endotlio, migrando atravs das paredes dos vasos e invadindo os tecidos afetados, onde comeam imediatamente a ingerir bactrias, restos celulares ou partculas estranhas presentes, podendo se acumular em grande nmero.(4,6,15-17) No entanto, morrem aps a digesto do material internalizado, formando o pus em situaes de infeces por bactrias piognicas.(9,12,17) Morfologicamente (fig.2), as clulas maduras apresentam forma esfrica, entre 10 e 15 m de dimetro, numerosas projees ciliares, abundantes grnulos citoplasmticos (especficos em maior nmero, no corados com corantes bsicos ou cidos, contendo enzimas para digesto do material a ser ingerido e azurfilos, que so lisossomos verdadeiros) e um ncleo segmentado em cerca de 3 a 5 lbulos polimrficos conectados, o que lhes d a denominao de leuccitos polimorfonucleares ou neutrfilos segmentados.(2,4-6,9,10,16) 2) Fagcitos Mononucleares Os macrfagos e seus precursores circulantes, os moncitos, exercem papis centrais na imunidade inata e na adquirida e so clulas efetoras importantes para a eliminao de microorganismos. Realizando a fagocitose e funcionando como clulas acessrias para a ativao das respostas adquiridas, constituem um dos mais importantes tipos de clulas fagocticas e clulas apresentadoras de antgenos do organismo, combatendo microorganismos, processando e exibindo antgenos em sua superfcie para que estes possam ser reconhecidos por linfcitos T e secretando uma enorme variedade de substncias biologicamente ativas nos tecidos circundantes, como as citocinas. Estas substncias, por sua vez, criam um estado de inflamao no stio de infeco, atraindo e ativando clulas inflamatrias e protenas plasmticas para combate da infeco, e servem como segundos sinais para a ativao de linfcitos T e da imunidade adquirida, isto , tornam os macrfagos responsveis pelo controle da proliferao, diferenciao e funo efetora dos linfcitos e pela iniciao e coordenao de quase todos os tipos de respostas imunolgicas adquiridas.(6,9,10,12,15,18) Os moncitos no so muito abundantes na circulao perifrica, constituindo cerca de 1 a 6% de todas as clulas sangneas nucleadas. Aps sua produo na medula ssea, so liberados para o sangue, onde podem permanecer por apenas um dia ou circular por perodos mais extensos at atingirem os tecidos, onde se diferenciam em macrfagos teciduais ou histicitos, que ficam dispostos em todos os stios onde os microorganismos possam entrar no hospedeiro, como, por exemplo, no tecido conjuntivo subepitelial, nos interstcios dos rgos parenquimatosos, no revestimento dos sinusides vasculares do fgado e do bao e nos seios linfticos dos linfonodos.(6,9,18,19) Nesses locais, seu tempo de sobrevida de aproximadamente dois a quatro meses ou at anos, ou seja, tm vida muito mais longa do que os neutrfilos e, diferentemente destes, no so terminalmente diferenciados quando deixam a medula ssea, podendo sofrer diviso celular em um stio inflamatrio. Tm funo fundamentalmente semelhante dos neutrfilos nas respostas inatas, mas, de modo geral, migram mais lentamente e persistem por muito mais tempo nos stios de inflamao, sendo as clulas efetoras dominantes nos estgios mais tardios dessas respostas, cerca de 1 a 2 dias aps a infeco.(4,6,17-19)

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Morfologicamente, os moncitos so clulas relativamente grandes, maiores do que a maioria dos linfcitos circulantes, arredondadas, com dimetro entre 10 e 20 mm, ncleo em forma de ferradura ou feijo com cromatina frouxa, citoplasma abundante e finamente granuloso, contendo lisossomos, vacolos fagocticos, filamentos do citoesqueleto e vrias organelas necessrias para a sntese de protenas (fig. 2). J os macrfagos, em geral, apresentam citoplasma abundante e caractersticas semelhantes s dos moncitos, porm com forma amebide ou epiteliide, por sua semelhana com as clulas epiteliais da pele. Entretanto, podem assumir diferentes formas, fundindo-se para formar clulas gigantes, diferenciando-se em formas especializadas em tecidos particulares ou, quando ativados por algum estmulo, formas ligeiramente maiores do que as clulas inativas, com maior metabolismo, motilidade e atividade fagoctica, amplamente eficazes na destruio de bactrias e outros patgenos (fig. 2).

Figura 2 Representao esquemtica da morfologia das clulas fagocticas.

Os neutrfilos maduros apresentam forma esfrica, ncleo composto por 3 a 5 lbulos conectados e citoplasma com abundantes grnulos neutros (A). Os moncitos, relativamente maiores, apresentam forma esfrica, ncleo em forma de ferradura e citoplasma abundante com grnulos finos, lisossomos e vacolos fagocticos (B). J os macrfagos apresentam caractersticas citoplasmticas semelhantes aos moncitos e podem assumir formas epiteliides ou amebides (C), formas ligeiramente maiores macrfagos ativados (D), fundir-se para formar clulas gigantes ou sofrer diferenciao em formas especializadas. Os rgos e tecidos, em especial trato gastrintestinal, pulmes, fgado, bao e tecido conjuntivo, contm clulas fagocticas derivadas dos moncitos sangneos e estrategicamente localizadas, para que possam encontrar e combater diferentes microorganismos. Na maioria deles, encontram-se apenas clulas fagocticas individuais difusamente espalhadas, que permanecem indistinguveis em condies normais e que se assemelham entre si em aspecto e funo. J em alguns tecidos, esses fagcitos esto especialmente abundantes e exibem caractersticas morfolgicas distintas, sendo reconhecidos por nomes especficos de acordo com sua localizao (Tabela 1). Porm, independente de seu aspecto ou sua localizao, todos estes fagcitos circulantes ou teciduais derivam de moncitos circulantes e constituem um grupo de fagcitos de linhagem fagoctica mononuclear, o sistema fagoctico mononuclear ou monoctico-macrofgico.(4,5,6,9,12,13,18,19) Alm disso, alguns fagcitos mononucleares podem se diferenciar em outro tipo de clula, as clulas dendrticas, que exercem importantes papis na induo das respostas dos linfcitos T aos antgenos proticos. Essas clulas apresentam projees membranosas ou espiculares e localizam-se nos epitlios da pele e dos sistemas gastrintestinal e respiratrio, as principais portas de entrada para os microorganismos. Como exemplo, podem-se citar as clulas de

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Langerhans da epiderme, que tm como funo a captura e transporte de antgenos proticos da pele para linfonodos de drenagem, apresentando esses antgenos a linfcitos T virgens e estimulando-os para a continuidade do processo de defesa. Quando essas clulas amadurecem e instalam-se nos linfonodos, so denominadas clulas dendrticas interdigitantes, que so clulas maduras, residentes em regies de linfcitos T dos linfonodos e responsveis pela exibio de antgenos s clulas T.(6,10,11,18,19)
Tabela 1 Nomenclatura e localizao de fagcitos do sistema fagoctico mononuclear.

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ABSTRACT
The phagocytes are cellular components of innate or natural immunity responsible for the first line of defense of the organism against infections, eliminating the invading microorganisms (pathogens) through an effector mechanism called phagocytosis. This study presents a revision of the types of phagocytic cells, as well as on its origin and maturation. Key words: phagocytes, polymorphonuclear granulocytes, neutrophils, monocytes and macrophages.

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