Cromatografia Gasosa

Cromatografia Gasosa
Princ
Princ

pios B
pios B

sicos
sicos
Dr. Marcelo Del Grande
Qu Qu mico de Aplica mico de Aplica o o
SINC do Brasil
CROMATOGRAFIA
Princpio Bsico
Separao de misturas por interao diferencial dos seus
componentes entre uma FASE ESTACIONRIA (lquido ou
slido) e uma FASE MVEL (lquido ou gs).
Separao em GC
Separao ocorre na coluna
Duas fases so envolvidas:
Fase estacionria
Fase mvel (gs de arraste)
Fase estacionria reside dentro da coluna
Fase mvel move sobre a fase estacionria
Por que migram a uma taxa diferente?
Interaes intermoleculares atraem molculas para a fase estacionria
Ex.: ligao de hidrognio
Interao mais fraca
Interao mais forte
Fase Estacionria
Fatores que Afetam a Separao
Estrutura qumica do composto (1)
Fase estacionria (2)
Temperatura da coluna (3)
M
S
M
S
(1) (2)
(3)
M
S
M
S
T mais alta
T mais baixa
CROMATOGRAFIA
Modalidades e Classificao
FM = Lquido
FM = Gs
Cromatografia
Lquida
Cromatografia
Gasosa (CG)
Em CG a FE
pode ser:
Slida
Lquida
Cromatografia
Gs-Slido (CGS)
Cromatografia
Gs-Lquido (CGL)
CROMATOGRAFIA GASOSA
Aplicabilidade
Quais misturas podem ser separadas por CG ?
Misturas cujos constituintes sejam
VOLTEIS/SEMI-VOLTEIS
(para uma substncia qualquer poder ser
arrastadapor um fluxo de um gs ela
deve se dissolver - pelo menos parcialmente -
nesse gs)
DE FORMA GERAL:
CG aplicvel para separao e anlise
de misturas cujos constituintes tenham
PONTOS DE EBULIO de at 300
o
C
e que termicamente estveis.
O Cromatgrafo a Gs
1
2
3
4
6
5
1 - Reservatrio de Gs e Controles de Vazo / Presso.
2 - Injetor (Vaporizador) de Amostra.
3 - Coluna Cromatogrfica e Forno da Col una.
4 - Detector.
5 - Eletrnica de Tratamento (Amplificao) de Sinal.
6 - Registro de Sinal (Registrador ou Computador).
Observao: em vermelho: temperatura controlada
Injetores
Parte do cromatgrafo a gs onde a
amostra introduzida no
cromatgrafo a gs
Vaporiza amostra (solvente +
compostos alvo)
Mistura vapor com fase mvel
(gs de arraste)
Transfere vapor para dentro da
coluna
Forma mais simpl es:
Cmara de aquecimento
Injector liner/glass insert
Linhas de fluxo de gs
Entrada de
gs de arraste
Fluxo da coluna
Entrada da amostra
Glass liner/
injector liner/
glass insert
Qualidades desejveis para injetor
GC
Injeo de amostra para dentro da fase mvel sem disperso
da amostra ou tailing (efeito cauda)
Vaporizar todos solutos i nstantaneamente sem decomposio
trmica
Evitar difuso de componentes da amostra na fase mvel
No tenha contaminao da amostra
No tenha perda da amostra
Injetores GC Capilar da Shimadzu
Injeo a frio, bom para
compostos termicamente
instveis, de alto ponto de
ebulio ou para volume grande
de amostra
Programmed Temperature
Vaporizing (PTV) Injector
Injeo a frio, bom para
compostos termicamente
instveis
On-Column Injector (OCI)
Vaporizao / Injeo a quente Injetor Wide Bore
Vaporizao / Injeo a quente Injetor Split/Splitless
Tipo / Uso Injetor
INSTRUMENTAO
Parmetros de Injeo
TEMPERATURA DO INJETOR Deve ser suficientemente elevada para que a
amostra vaporize imediatamente, mas sem decomposio
Regra Geral: T
inj
= 50
o
C acima da temperatura de ebulio do componente
menos voltil
VOLUME INJETADO Depende do tipo de coluna e do estado fsico da
amostra
COLUNA
Amostras
Gasosas
Amostras
Lquidas
empacotada
= 3,2 mm
0,1 ml ... 50 mL 0,2 L ... 20 L
capilar
= 0,25 mm
0,001 ml ... 0,5 mL 0,01 L ... 3 L
Slidos: convencionalmente se dissolve em um solvente adequado e
injeta-se a soluo
Injetor Split/Splitless
Vantagem:
Previne introduo de
compostos no
volteis da amostra
Desvantagem:
Discriminao dos
compostos com alto
ponto de ebulio e
termicamente instveis
Dois modos de inj eo em
um nico injetor
Fluxo de gas
de arraste
Fluxo Split
Fluxo de purga do
septo
Fluxo da coluna
Injeo Split
Para amostras com
concentraes mais altas
Razo Split = Fluxo de que
sai por Split / Fluxo da
Coluna
Vantagem:
Pico com bom formato
em geral
Carrier
Split
Purga do septo
Injeo Splitless
Para compostos de
nvel trao
Bom para amostras
semi-volteis (pontos
de ebulio do analito
so acima de ~150C)
Arraste
Split*
Purga do Septo*
* Fechado antes e
durante injeo
Injetor On-Column (OCI)
Toda amostra introduzida
diretamente na coluna
Amostra pode ser introduzida a
temperatura relativamente baixa
Temperatura do injetor pode ser
programada (rampa)
- por ex.: 50C (0.1min) 100 C/min
280 C (20min)
No ocorre o splitting da amostra
Sem discriminao dos compostos
com alto ponto de ebulio
Minimiza decomposio de
compostos termicamente instveis
Rpida contaminao da coluna por
compostos no volteis
Entrada do
Ar para
esfriamento
Sada do Ar
para
esfriamento
OCI Insert
Gs de
arraste
Entrada do
Ar para
esfriamento
Injetor de Vaporizao com Temperatura
Programada (PTV)
Amostra pode ser injetada a
temperatura relativamente baixa
Temperatura do injetor pode ser
programa (rampa)
- por ex.: 50C (0.1min) 100 C/min
280 C (20min)
Amostra introduzia atravs do glass
insert (tipo PTV)
Pode ser usado modo split ou
splitless
Sem discriminao para compostos
de alto ponto de ebuli o
Minimiza decomposi o de
compostos termicamente instveis
Possibilidade de injetar grande
volume de amostra
Entrada do gs de
arraste
Sada do fluxo
split
Sada da purga
de septo
Sada de Ar
Para
esfriamento
Glass Insert
Por que usar glass insert:
Eliminar contato da
amostra com metal
(corpo do injetor)
Aquecimento uniforme
para melhor vaporizao
da amostra
Silylated glass
wool
Glass insert da Shimadzu para
aplicaes com colunas capilares
INSTRUMENTAO
Gs de Arraste
Fase Mvel em CG: NO interage com a amostra - apenas a carrega atravs
da coluna. Assim usualmente referida como G G S DE ARRASTE S DE ARRASTE
Requisitos:
INERTE No deve reagir com a amostra, fase estacionria ou superfcies do
instrumento.
PURO Deve ser isento de impurezas que possam degradar a fase estacionria.
Impurezas tpicas em gases e seus efeitos:
oxida / hidrolisa algumas FE
incompatveis com DCE
H
2
O, O
2
Hidrocarbonetos
rudo no sinal de DIC
INSTRUMENTAO
Gs de Arraste
Requisitos:
CUSTO Gases de altssima pureza podem ser muito caros.
COMPATVEL COM DETECTOR Cada detector demanda um gs de arraste
especfico para melhor funcionamento.
Seleo de Gases de Arraste em Funo do Detector:
He , H
2
DCT
DIC
N
2
, H
2
DCE
N
2
, Ar + 5% CH
4
C
U
S
T
O
PUREZA
A
B
C
A = 99,995 % (4.5)
B =99,999 % (5.0)
C =99,9999 % (6.0)
INSTRUMENTAO
Alimentao de Gs de Arraste
Componentes necessrios linha de gs:
controladores de vazo / presso de gs
dispositivos para purificao de gs ( traps )
1
2
3
4
5
6
1 - Cilindro de Gs
2 - Regulador de Presso Primrio
3 - Trapspara eliminar impurezas do gs
4 - Regulador de Presso Secundrio
5 - Regulador de Vazo (Controlador Diferencial de Fluxo)
6 - Medidor de Vazo (Rotmetro)
Nota: Tubos e Conexes: Ao
Inox ou Cobre
Tipos de Coluna
1. Comprimento 0.5-5m (Max 2m)
2. Dimetro externo 2-4mm
3. Enchimento de 0.5 a 25% de fase lquida
4. H vrios tipos de fase lquida. O tipo apropriado
Deve ser selecionado porque o nmero de pratos
Tericos no to alto.
Tubo
Material de enchimento
Coluna Empacotada
Coluna capilar
Capilar (i.d. 0.25mm, 0.5mm)
Fase estacionria
(revestimento lquido)
1. Comprimento 12-60m
2. Dimetro externo 0.1, 0.22, 0.32, 0.53mm
3. Material : slica fundida, metal inerte
4. Os tipos de fase lquida so em nmero menor.
Colunas: Definies Bsicas
EMPACOTADA
= 3 a 6 mm
L = 0,5 m a 5 m
Recheada com sl ido pulverizado (FE sli da ou FE
lqui da depositada sobre as partculas do recheio)
CAPILAR
= 0,1 a 0,5 mm
L = 5 m a 100 m
Paredes internas recobertas com um filme fino
(frao de m) de FE lquida ou sli da
Colunas
Empacotada
Capilar
Se o material de enchimento no
for colocado na coluna de forma
compacta e uniforme, os espaos
vazios resultantes funcionaro
como cmaras de diluio da
amostra.
Menor eficincia
Anlise mais lenta
Mais economica
Maior capacidade de carga
Maior quantidade de amostra
E
m
p
a
c
o
t
a
d
a
s
Capacidade de processamento da
amostra inferior. Satura
rapidamente.
Menor quantidade de amostra
Maior comprimento => maior
eficincia
Separao de misturas
complexas
Anlise mais rpida
Maior separao
C
a
p
i
l
a
r
e
s

DESVANTAGENS VANTAGENS
Colunas: Definies Bsicas
Fase estacionria
Cromatografia gs lquido (~90%)
Polisiloxano
Polietilenoglicol
Cromatografia gs slido (~10%)
Material slido adsorvente, por ex.: molecul ar sieves,
alumina, etc.
Uso: hidrocarbonetos muito volteis (e.g. CH
4
), gases
inorgnicos (por. ex.: N
2
, CO
2
)
CH
3
CH
2
CH
2
CH
2
CN
CH
2
CH
2
CF
3
R =
methyl
cyanopropyl
trifluoropropyl
phenyl
HO CH
2
CH
2
O H
n
-O-Si-O-Si-O-
R R
R R
Seleo da fase estacionria
100% dimetil polisiloxano
Apolar
Exemplos de analitos: solventes, produtos de petrleos, sabores,
hidrocarbonetos saturados
5% difenil 95% dimetil polisiloxano
Apolar
Exemplos de analitos: aromas, pesticidas, hidrocarbonetos
aromticos
35% difenil 65% dimetil polisiloxano
Polaridade mdia
Exemplos de analitos: pesticidas contendo nitrognio
Polietileno glicol
Polar
Exemplos de analitos: FAMEs, cidos graxos, aromas e lcoois
Referncia: http://www.restekcorp.com/colsel/colsel2.htm
FASES ESTACIONRIAS
Conceitos Gerais
LQUIDOS Depositados sobre a superfcie de: slidos porosos inertes (colunas
empacotadas) ou de tubos finos de materiais inertes (colunas capilares)
FE
lqui da
SUPORTE
Slido
inerte
poroso
Tubo capilar
de material
inerte
SLIDOS Colunas recheadas com material finamente granulado (empacotadas)
ou depositado sobre a superfcie interna do tubo (capilar)
Para minimizar a perda de FE l quida por volatilizao, normalmente ela :
Entrecruzada: as cadeias
polimricas so
quimicamente ligadas entre si
Quimicamente ligadas: as cadeias
polimricas so presas ao suporte
por ligaes qumicas
FASES ESTACIONRIAS
Caractersticas de uma FE ideal
SELETIVA Deve interagir diferencialmente com os
componentes da amostra.
Regra geral: a FE deve ter caractersticas tanto quanto possvel prximas das dos solutos
a serem separados (polar, apolar, aromtico ...)
FE Seletiva: separao
adequada dos
constituintes da amostra
FE pouco Seletiva: m
resoluo mesmo com coluna
de boa eficincia
COLUNAS CAPILARES
Fast GC: Colunas Capilares Finas
Destilao simulada de l eo diesel:
Coluna: HP-1 (10 m x 0.10 mm x 0.40 m)
T
COL
: 35C / 40C min
-1
/ 0,75 min A 310C
Gs de Arraste: He @ 90 ml.min
-1
Detector: FID
Alm de colunas finas: necessrio controle acurado de vazo (controle
eletrnico de presso) e altas velocidades de aquecimento da col una.
O que Fast GC ?
Fast = E
Fast = E Fast = Efficient
fficient fficient
E
EExcellent
xcellent xcellent
E
EEasy
asy asy
Princpios de Fast GC
Fast GC colunas tpicas
Dimetro do liner 0.1 mm
comprimento 10 m
filme: 0.1-0.4 m
Princpios de Fast GC
Efficient
Fast GC requer no somente um fator mas um pacote
completo
1. pequeno ID columns Alta Presso
2. pequeno ID Alta Res. Grandes Rampas
3. Alta final Temp Rap Resfriamento
4. Picos Rpidos Detector Rpido
(sampling sampling frequency frequency, , filter filter time time constant constant)
Requisitos para Fast GC
Efficient
Fast GC requer um sistema completo
GC-2010
1. Alta Presso 970 Kpa
2. Grandes Rampas 70C/min lin
3. Rpido Resfriamento 6min (450C a 50C)
4. Rpido Detector 250Hz sampling 4 ms filter time
frequency constant
Requisitos para Fast GC
Const. Linear Velocity Mode
Fast Aplicao
BETX
Liquido
He 35 cm/sec (26.5 kPa)
RTX-5 30m, 0.53 mm, 3m
H
2
200 cm/sec (732.7 kPa)
10 m, 0.1mm, 0.4m
fast GC
BTEX 5ppm SPLIT 10:1
SPLIT 30:1
normal GC
SPLIT 30:1
Requisitos para Fast GC
Rpida resposta do detector crucial para
Fast GC
60 Hz
10 Hz
5 Hz
2 Hz
1 Hz
Inj:340
o
, Det:360
o
, Column 1, H
2
124cm/sec @35
o
, Split 20:1
Oven:35
o
to 100
o
@40
o
/min,Press:416kPa to 970kPa400kPa/min
Peak basewidth2 sec
Requisitos para Fast GC
Liner 1 mm ID, column: SPB5 1m, 0.1 mm, 0.1 m, InjectionVolume0.2 l
Sample: Chlorodecane, InjectionVolume0.2 l
FWHM 40 msec
Peak width 0.1s
Requisitos para Fast GC
Ajuste do parmetro Filter Time Filter Time para melhor
resoluo
Filter: 100 ms,
Sampling250 Hz
Filter: 10 ms
Sampling 250 Hz
Kerosene
Requisitos para Fast GC
GC anal ysi s Peak width (FWHM) (s) Fi ter time const (ms) Sampling
(Hz)
Conventional > 1.0 > 200 < 10
Fast convent 0.5-1 50-100 10-
20
Fast 0.1-0.5 10-50 20-
100
Ultrafast <0.1 <10 >100
GC-2010 min 4 ms 250 Hz
Applicao:
Butter FAMEs Conventi onal Anal ysi s by Prof. Mondello, Messina
Column: Rtx Wax 30 m x 0.25 mm i.d. 0.25 m film Inj. Vol.: 1 l (1:10 in hexane); Split Ratio: 1:50 (250 C)
T. Progr.: 50 C to 250 C at 3.0 C/min
P. Progr.: 53 kPa at linear velocity constant Carrier: H
2
;u: 36.2 cm/s;
Detector: FID (250 C) H
2
: 50 mL/min, Air: 400 mL/min, Make-up: 50 mL/min kPa (N
2
)
Sampling Rate: 40 msec; Filter Time Constant: 200 msec
2.5 5.0 7.5 10.0 12.5 15.0 17.5 20.0 22.5 25.0 27.5 30.0 min
0e3
50e3
100e3
150e3
200e3
250e3
300e3
350e3
uV
1
2
3
4
5
6
7
8
10
11
1
2
1
3
1
4
1
6
1
8
1
9
2
1
2
3
2
6
2
8
25
2
9
3
6
3
5
3
3
9
3
0
1
5
2
2
C4:0 19) C15:0
2) C5:0 20) C15:1
3) C6:0 21) C16:0 iso
4) C7:0 22) C16:0
5) C8:0 23) C16:1
6) C9:0 24) C17:0 anteiso
7) C10: 25) C17:0 iso
8) C10:1 26) C17:0
9) C11:0 27) C17:1
10) C12:0 28) C18:0 iso
11) C12:1 29) C18:0
12) C12:1 isomer 30) C18:1 9
13) C13:0 31) C18:1 7
14) C14:0 iso 32) C18:2 ?
15) C14:0 33) C18:2 6
16) C14:1 34) C18:2 ?
17) C15:0 anteiso 35) C18:3 3
18) C15:0 iso 36) C18:2 con.

0.0
33.0
Aplicao:
Butter FAMEs Fastest Anal ysi s by Prof. Mondello, Messina
Column: Rtx Wax 10 m x 0.10 mm i.d. 0.10 m film Inj. Vol.: 0.2 l (1:20 in hexane); Split Ratio:
1:200 (250 C)
T. Progr.: 50 C to 250 C at 90.0 C/min
P. Progr.: 400 kPa at linear velocity constant Carrier: H
2
;u: 116.0 cm/s;
Detector: FID (250 C) H
2
: 50 mL/min, Air: 400 mL/min, Make-up: 50 mL/min kPa (N
2
)
Sampling Rate: 4 msec; Filter Time Constant: 50 msec
0.25 0.50 0.75 1.00 1.25 1.50 1.75 min
0e3
10e3
20e3
30e3
40e3
50e3
60e3
70e3
80e3
90e3
100e3
110e3
uV
Run time: 2 min
Speed gain: 16.5
1
2
3
4
5
6
7
8
10
11
1
2
1
3
1
4
1
6
1
8
1
9
2
1
2
3
2
6
2
8
2
5
2
9
3
6
3
5
3
3
9
3
0
1
5
2
2
0.0
2.0
U
L
T
R
A
F
A
S
T
Aplicao: Aromas e Fragrncias
Anlise de leos Essenciais
Column: Rtx-5MS 30 m x 0.25 mm i.d. 0.25
m film Inj. Vol.: 1l (1:5 in hexane); Split
Ratio: 1:50 (300 C)
T. Progr.: 50 C to 250 C at 3.0 C/min P.
Progr.: 52.7 kPa at linear velocity constant
Carrier: H
2
;u: 36.0 cm/s;
Detector: FID (300 C) H
2
: 50 mL/min, Air:
400 mL/min, Make-up: 50 mL/min kPa (N
2
)
Sampling Rate: 40 msec; Filter Time
Constant: 200 msec
Column: Rtx-5MS 10 m x 0.1 mm i.d. 0.1 m
film Inj. Vol.: 0.4 l (1:5 in hexane); Split
Ratio: 1:400 (300 C)
T. Progr.: 40 C to 300 C at 50.0 C/min
P. Progr.: 265.3 kPa at linear velocity
constant Carrier: H
2
;u: 81.5 cm/s;
Detector: FID (350 C) H
2
: 50 mL/min, Air:
400 mL/min, Make-up: 50 mL/min kPa (N
2
)
Sampling Rate: 4 msec; Filter Time
Constant: 50 msec
5 10 15 20 25 30 35 40 min
0
5000
10000
15000
20000
25000
30000
35000
40000
uV Chromatogram
0.25 0.50 0.75 1.00 1.25 1.50 1.75 2.00 2.25 2.50 2.75 3.00 min
0
5000
10000
15000
20000
25000
30000
35000
40000
45000
50000
55000
uV Chromatogram
CONVENTI ONAL
FASTEST
43.0 min.
3.2 min.
Bergamot
INSTRUMENTAO
Temperatura da Coluna
T
E
M
P
E
R
A
T
U
R
A

D
A

C
O
L
U
N
A
CONTROLE CONFIVEL DA TEMPERATURA DA COLUNA ESSENCIAL PARA
OBTER BOA SEPARAO EM CG
INSTRUMENTAO
Forno da Coluna
Caractersticas Desejveis de um Forno:
AMPLA FAIXA DE TEMPERATURA DE USO Pelo menos de
T
ambiente
at 400
o
C. Sistemas criognicos (T < T
ambiente
) podem ser
necessrios em casos especiais.
TEMPERATURA INDEPENDENTE DOS DEMAIS MDULOS No
deve ser afetado pela temperatura do injetor e detector.
TEMPERATURA UNIFORME EM SEU INTERIOR Sistemas de
ventilao interna muito eficientes para manter a temperatura
homognea em todo forno.
INSTRUMENTAO
Forno da Coluna
Caractersticas Desejveis de um Forno:
FCIL ACESSO COLUNA A operao de troca de coluna pode
ser freqente.
AQUECIMENTO E ESFRIAMENTO RPIDO Importante tanto em
anlises de rotina e durante o desenvolvimento de metodologias
analticas novas.
TEMPERATURA ESTVEL E REPRODUTVEL A temperatura
deve ser mantida com exatido e preciso de 0,1C.
Em cromatgrafos modernos (depois de 1980),
o controle de temperatura do forno totalmente operado por microprocessadores.
INSTRUMENTAO
Programao Linear de Temperatura
Misturas complexas (constituintes com volatilidades muito
diferentes) separadas ISOTERMICAMENTE:
T
COL
BAIXA:
- Componentes mais volteis so
separados
- Componentes menos volteis demoram a
eluir, saindo como picos mal definidos
T
COL
ALTA:
- Componentes mais volteis no so
separados
- Componentes menos volteis eluem mais
rapidamente
INSTRUMENTAO
Detectores
Dispositivos que examinam continuamente o material eluido, gerando sinal
quando da passagem de substncias que no o gs de arraste
Grfico Sinal x Tempo = CROMATOGRAMA
Idealmente: cada substncia separada aparece
como um PICO no cromatograma.
INSTRUMENTAO
Detectores
Mais Importantes:
DETECTOR POR CAPTURA DE ELTRONS (DCE OU ECD)
Supresso de corrente causada pela absoro de eltrons por
eluatos altamente eletroflicos.
DETECTOR POR CONDUTIVIDADE TRMICA (DCT OU TCD)
Variao da condutividade trmica do gs de arraste.
DETECTOR POR IONIZAO EM CHAMA (DIC OU FID) ons
gerados durante a queima dos eluatos em uma chama de H
2
+ ar.
REGISTRO
DE
SINAL
ANALGICO
Registradores XY
DIGITAL
Integradores
Computadores
DETECTORES
Definies Gerais
Dispositivos que geram um sinal eltrico proporcional
quantidade eluida de um analito
~ 60 detectores j usados em CG
~ 15 equipam cromatgrafos comerci ais
4 respondem pela maior parte das aplicaes
DCT TCD
Detector por
Condutividade
Trmica
DIC FID
Detector por
Ionizao em
Chama
DCE ECD
Detector por
Captura de
Eletrons
EMMS
Detector
Espectromtrico de
Massas
DETECTORES
Parmetros Bsicos de Desempenho
QUANTIDADE MNIMA DETECTVEL Massa de um analito que gera um
pico com altura igual a trs vezes o nvel de rudo
S
I
N
A
L

(
S
)
RUDO (N)
= 3
S
N
RUDO Qualquer componente do sinal gerado pelo detector que no se
origina da amostra
Fontes
de
Rudo
Contaminantes nos gases
Impurezas acumuladas no detector
Aterramento eltrico deficiente
DETECTORES
Classificao
UNIVERSAIS:
Geram sinal para qualquer
substncia eluida.
SELETIVOS:
Detectam apenas substncias
com determinada propriedade
fsico-qumica.
ESPECFICOS:
Detectam substncias que
possuam determinado elemento
ou grupo funcional em suas
estruturas
DETECTORES
Detector por Condutividade Trmica
PRINCPIO Vari ao na condutividade trmica do gs quando da eluio
de um analito.
Cela de Deteco do DCT:
1
2
3
5
4
i
1 Bloco metlico (ao)
2 Entrada de gs de arraste
3 Sada de gs de arraste
4 Filamento metlico (liga W-Re) aquecido
5 Alimentao de corrente eltrica para
aquecimento do filamento
A taxa de transferncia de calor entre um corpo quente e um
corpo frio depende da condutividade trmica do gs no espao
que os separa
Se a condutividade trmica do gs diminui, a quantidade de calor
transferido tambm diminui - o corpo quente se aquece.
DETECTORES
Detector por Condutividade Trmica
Configurao tradicional do DCT: bloco metlico com quatro celas interligadas em par -
por duas passa o efluente da coluna e por duas, gs de arraste puro:
CELAS DA AMOSTRA
CELAS DE
REFERNCIA
C
O
R
T
E

S
U
P
E
R
I
O
R
CELAS DA
AMOSTRA
CELAS DE
REFERNCIA
C
O
R
T
E

L
A
T
E
R
A
L
Quando da elui o de um composto com condutividade trmica menor que a do gs de
arraste puro:
Diferena de
resistncia eltrica
entre os filamentos
de amostra e
referncia
Filamentos nas celas
de amostra se aquecem
Resistncia eltrica dos
filamentos nas celas de
amostra aumenta
Filamentos nas celas
de referncia no se
aquecem
Resistncia eltrica dos
filamentos nas celas de
referncia fica constante
DETECTORES
Detector por Condutividade Trmica
Os filamentos do DCT so montados numa ponte de Wheatstone que transforma a
diferena de resistncia quando da elui o de amostra numa diferena de voltagem:
V Fonte de CC / Bateria (18 V a 36 V, tpico)
F Ajuste da corrente nos filamentos
I Medida da corrente nos filamentos (100 mA - 200 mA, tpico)
B
1
B
2
Balanceamento / ajuste de zero
R
1
R
2
Filamentos das celas de referncia
A
1
A
2
Filamentos das celas de amostra
DETECTORES
Caractersticas Operacionais do DCT
SELETIVIDADE Observa-se sinal para qualquer substncia eluida diferente do
gs de arraste = UNIVERSAL
SENSIBILIDADE / LINEARIDADE Dependendo da configurao particular e do
analito: QMD = 0,4 ng a 1 ng com linearidade de 10
4
(ng - dezenas de g)
VAZO DE GS DE ARRASTE O sinal proporcional concentrao do analito
no gs de arraste que passa pela cela de amostra.
VAZO DE GS DE ARRASTE CONSTANTE
DURANTE A ELUIO
VARIAO DA VAZO DE GS DE
ARRASTE DURANTE A ELUIO
F
c
= 0
Com DCT, a rea dos picos cromatogrficos MUITO dependente da
vazo do gs de arraste !!!
DETECTORES
Caractersticas Operacionais do DCT
TEMPERATURAS DE OPERAO Quanto maior a diferena entre a temperatura
dos filamentos e do bloco metlico maior a resposta.
Temperatura do filamento, T
F
: entre 300
o
C e 350
o
C. funo da corrente de
alimentao dos filamentos, i.
i T
F
Sinal
Limitaes:
- Correntes excessivas podem fundir o filamento ( tpicos do
filamento = 20 m)
- Diminuio do tempo de vida til dos filamentos (oxidao por
traos de O
2
no gs de arraste)
Temperatura do bloco, T
B
: mantida to baixa quanto possvel
T
B
Sinal
Limitao:
- Temperaturas excessi vamente bai xas podem provocar a condensao de
anali tos nas cel as (erros anal ticos, danos aos filamentos)
DETECTORES
DCT: Aplicaes
1 Separao e quantificao de compostos que no geram sinal em outros
detectores (gases nobres, gases fixos)
2 Por ser um detector no-destrutivo, pode ser usado em CG preparativa ou
deteco seqencial com dois detectores em tandem
Coluna: CP Sil 5CB
(50 m x 0.32 mm x 5 m)
Gs de Arraste: He @ 3 ml.min
-1
T
COL
: 40C Detector: DCT
1 N
2
2 CH
4
3 CO
2
4 n-C
2
5 NH
3
6 n-C
3
7 i-C
4
8 n-C
4
Separao de Gases Fixos e Hidrocarbonetos:
DETECTORES
Detector por Ionizao em Chama
PRINCPIO Formao de ons quando um composto queimado em uma
chama de hidrognio e oxignio
O efluente da coluna misturado com
H
2
e O
2
e queimado. Como numa chama
de H
2
+ O
2
no existem ons, ela no
conduz corrente eltrica.
Quando um composto orgnico elui, ele
tambm queimado. Como na sua
queima so formados ons, a chama
passa a conduzir corrente eltrica
DETECTORES
Detector por Ionizao em Chama
COLETOR
FLAME TIP
BLOCO
AR
H
2
COLUNA
O ar e o H
2
difundem para o interior do
coletor, onde se misturam ao efluente da
coluna e queimam:
Uma diferena de potencial eltrico
aplicada entre o flame tip e o coletor -
quando se formam ons na chama, flue uma
corrente eltrica:
DETECTORES
Detector por Ionizao em Chama
Qumica da Chama de Hidrognio:
Incandescncia
Reao
Quebra
Estrutura da chama
trs regies bsicas
Regio de quebra Mistura dos gases, pr-aqueci mento, incio da quebra das molcul as de H
2
, O
2
e dos
anali tos.
Zona de reao Reaes exotrmicas com produo e/ou consumo de radicais H, O, OH, HO
2
(provenientes do H
2
), CH e C
2
(proveniente do anali to) e ons CHO
+
(anali to).
Zona de i ncandescncia Emi sso de l uz por decaimento de espcies excitadas: OH (luz UV), C
H
e C2
(visvel).
Queima de substncias com
ligaes C-H
CH + O CHO
+
+ e
-
1 on formado a cada ~10
5
tomos de C
queimados
Queima de H
2
Formam-se apenas radicais !!!
DETECTORES
Caractersticas Operacionais do DIC
SELETIVIDADE Seletivo para substncias que contm ligaes C-H em sua estrutura
qumica.
(como virtualmente todas as substncias analizveis por CG so orgni cas, na prtica o DIC UNIVERSAL)
Compostos que NO produzem resposta no DIC:
Gases nobres
H
2
, O
2
, N
2
CO, CO
2
, CS
2
CCl
4
, peralogenados
NH
3
, N
x
O
y
SiX
4
(X = halognio)
H
2
O
HCOOH, HCHO *
DIC
DCT
N
2
CH
4
CO
2
O
2
DETECTORES
Caractersticas Operacionais do DIC
VAZES DE GASES Alm do gs de arraste, as vazes de alimentao de ar
(comburente) e hidrognio (combustvel) devem ser otimizadas.
Grficos Sinal x Vazo de Gases tpicos:
S
I
N
A
L
150 300 450 600 15 30 45 60
AR H
2
O sinal se mantm aproximadamente constante em uma larga faixa de
vazes de ar e H
2
VARIAES NAS VAZES DE AR E H
2
AFETAM APENAS MARGINALMENTE
O SINAL = MAIORES REPRODUTIBILIDADE E REPETIBILIDADE
DETECTORES
Detector por Captura de Eltrons
PRINCPIO Supresso de um fluxo de el trons lentos (termais) causada pela sua
absoro por espcies eletroflicas
Um fluxo contnuo de eletrons lentos
estabelecido entre um ando (fonte
radioativa -emissora) e um catodo.
Na passagem de uma substncia
eletroflica alguns eltrons so
absorvidos, resultando uma
supresso de corrente eltrica.
DETECTORES
Detector por Captura de Eletrons
1
2
3
4
5
1 Ando (fonte radioativa - emissora)
2 Sada de gases 3 Catodo
4 Cavidade 5 Coluna cromatogrfica
DETECTORES
Detector por Captura de Eletrons
Mecanismo de Captura de Eletrons
1 Gerao de eletrons lentos pela interao entre a radiao molculas do gs de arraste
G e molculas de bloqueador ( quencher ) Q

-
+ G G
+
+ e
-
+ e* energia

-
+ G G* + Q G + e
-
+ Q energia
2 Eletrons lentos so capturados pela espcie eletroflica AB
AB + e
-
AB
-
+ energia
O decrscimo na corrente eltrica fluindo pela cela de deteco proporcional
concentrao a da espcie absorvente no gs de arraste
I
b
corrente de repouso
I
e
corrente na el uio do anali to
K constante de captura
DETECTORES
Caractersticas Operacionais do DCE
FONTE RADIOATIVA O ando deve estar dopado com um istopo radioativo
- ou - emissor
Emprego universal em DCE comerciai s:
3
H (
-
, 0,02 MeV)
Sob a forma de Ta
3
H
3
T
det
deve ser < 225
o
C
Maior sensibilidade
63
Ni (
-
, 0,06 MeV)
Usado como
63
Ni
0
Maior linearidade
til at ~400
o
C
85
Kr,
90
Sr,
99
Tc,
147
Pm,
241
Am,
226
Ra
Raramente
usados:
63
Ni preferido em
equipamentos
modernos
- Maior durabilidade
- Maior estabilidade trmica
- Menor risco de uso (radioatividade)
DETECTORES
Caractersticas Operacionais do DCE
TEMPERATURA DO DETECTOR Dependncia do sinal com temperatura de
operao bastante significativa
Vari ao de 3
o
C na temperatura
Erro de ~ 10% na rea dos picos
Magnitude e sinal do erro depende do composto analisado !
POLARIZAO DOS ELETRODOS Vrios modos de polarizao possveis
VOLTAGEM PULSADA Menos anomalias eltricas: maior sensibilidade e
linearidade.
VOLTAGEM CONSTANTE Pouco usada modernamente - picos
cromatogrficos podem ser deformados.
TEMPERATURA DO DCE DEVE SER RIGIDAMENTE CONTROLADA
DETECTORES
Caractersticas Operacionais do DCE
GS DE ARRASTE Funcionamento do DCE muito dependente da natureza do gs de
arraste
MAIS USADOS:
N
2
Ar + 5% CH
4
Geram eltrons lentos
quando bombardeados com
-
O gs deve ser o mais puro possvel !!!
(traos de H
2
O e O
2
comprometem o sinal do DCE)
!
Adsoro de contaminantes sobre
os eletrodos causa deformao
nos picos
DETECTORES
DCE: Aplicaes
Contaminantes em ar atmosfrico - deteco paralela DIC + DCE
DIC
DCE
1, 2, 3 - Hidrocarbonetos aromticos 4, 5, 6 - Hidrocarbonetos clorados
Tipos de Injeo - Lquida
Maioria das amostras introduzidas no GC so lqui das
Microseringa normalmente usada para injeo de amostras
lquidas
Capacidade da seringa: normalmente 10 microlitros
Formato da agulha:
Amostragem Headspace
(HS)
Extrao de compostos orgnicos volteis e semi-
volteis presentes na matriz lquida ou slida, por
ex. VOCs na gua, solventes residuais no materi al
de embalagem, fragrnci as em alimentos, etc.
Como funciona:
1. Incubao da amostra
2. Equilbrio termodinmico.
Concentrao dos analitos na fase
vapor representativo quele
presente na amostra original
3. Um volume fico de vapor
amostrado e introduzido
para dentro do GC
Incubao
Equilbrio
Amostragem SPME
Fibra de slica fundida
revestida com material
adsortivoexposta a
amostra num vial selado.
Analitos so adsorvidos no
material de revestimento
da fibra, tanto da soluo
ou do headspace.
Analitos so termicamente
dessorvidosda fibra e
entra no GC
Adsoro
Dessoro
Injeo de Amostra
Automatizada
Shimadzu Auto-injetor / Auto-
amostrador:
AOC-20i e AOC-20s
Injeo de amostras
lquidas
AOC-5000
Injeo Lquida
Injeo/amostragem de
Headspace
Injeo/amostragem de
SPME
Obrigado pela ateno!!!