Assessoria de Comunicao Social

Secretaria de Defesa Agropecuria

Departamento de Sade Animal
Esplanada dos Ministrios, Bloco D, Anexo A, 3o andar
CEP 70043-900 Braslia/DF
E-mail: tub-bru@agricultura.gov.br
www.agricultura.gov.br

Central de Relacionamento: 0800 61 1995

PROGRAMA NACIONAL DE CONTROLE E ERRADICAO DA BRUCELOSE E DA TUBERCULOSE ANIMAL - PNCEBT

Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento

PROGRAMA NACIONAL DE CONTROLE E

ERRADICAO DA BRUCELOSE E DA
TUBERCULOSE ANIMAL (PNCEBT)

PRESIDENTE DA REPBLICA

Luiz Incio Lula da Silva

MINISTRO DA AGRICULTURA, PECURIA E ABASTECIMENTO

Roberto Rodrigues
SECRETRIO EXECUTIVO

Lus Carlos Guedes Pinto

SECRETRIO DE DEFESA AGROPECURIA

Gabriel Alves Maciel

DIRETOR DO DEPARTAMENTO DE SADE ANIMAL

Jorge Caetano Junior

COORDENADOR GERAL DE COMBATE S DOENAS

Jamil Gomes de Souza

CHEFE DA DIVISO DE BRUCELOSE E TUBERCULOSE

Jos Ricardo Lbo

Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento

PROGRAMA NACIONAL DE CONTROLE E ERRADICAO

DA BRUCELOSE E DA TUBERCULOSE ANIMAL (PNCEBT)
Manual Tcnico

Braslia - 2006
3

AUTORES

Andrey Pereira Lage

Eliana Roxo
Ernst Eckehardt Muller
Fernando Padilla Poester
Joo Crisostomo Mauad Cavallro
Jos Soares Ferreira Neto
Pedro Moacyr Pinto Coelho Mota
Vitor Salvador Pico Gonalves
ORGANIZAO

Vera Cecilia Ferreira de Figueiredo

Jos Ricardo Lbo
Vitor Salvador Pico Gonalves
REVISO BIBLIOGRFICA

Neuza Arantes Silva

REVISO DE TEXTO

Attilio Brunacci
AGRADECIMENTOS

Carlos Eduardo Tedesco Silva SFA-MS/MAPA

Maria Carmen de Rezende Costa SFA-MG/MAPA
Maria do Carmo Pessa Silva SEAB/PR
Orasil Romeu Bandini SFA-MS/MAPA

Catalogao na Fonte
Biblioteca Nacional de Agricultura - BINAGRI
permitida a reproduo parcial ou total desta obra, desde que citada a fonte.
Brasil. Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento.
Programa Nacional de Controle e Erradicao da Brucelose e da Tuberculose Animal
(PNCEBT) / organizadores, Vera Cecilia Ferreira de Figueiredo, Jos Ricardo Lbo, Vitor Salvador
Pico Gonalves. - Braslia : MAPA/SDA/DSA, 2006.
188 p.
ISBN 85-99851-01-2
1. Doena animal - Brucelose - Controle 2. Doena Animal - Tuberculose - Controle I.
Lage, Andrey Pereira. II. Roxo, Eliana. III. Muller, Ernst Eckehardt. IV. Poester, Fernando
Padilla. V. Cavallro, Joo Crisostomo Mauad. VI. Ferreira Neto, Jos Soares. VII. Mota,
Pedro Moacyr Pinto Coelho. VIII. Gonalves, Vitor Salvador Pico. IX. Secretaria de Defesa
Agropecuria. X. Departamento de Sade Animal. XI. Ttulo.
AGRIS 4110; L73
CDU 639.1.091

Apresentao

O Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento, ao

instituir o Programa Nacional de Controle e Erradicao da Brucelose
e da Tuberculose Animal (PNCEBT), reconheceu essas doenas como
destacados problemas de sade animal e de sade pblica no Brasil.
So zoonoses causadoras de considerveis prejuzos econmicos e
sociais, em virtude do impacto que produzem na produtividade
dos rebanhos e dos riscos que acarretam sade humana.
Um pas com um servio oficial de defesa sanitria animal
bem estruturado deve ser capaz de atuar com eficcia no controle
e na erradicao dessas doenas. Sendo detentor do maior rebanho
comercial de bovinos do mundo, o Brasil precisa colocar no mercado
produtos de origem animal de qualidade e baixo risco sanitrio
para consumidores internos e externos cada vez mais exigentes.
Aps ampla discusso com os vrios segmentos envolvidos,
o grupo de trabalho responsvel pela elaborao do PNCEBT
concebeu um programa com estratgias e objetivos muito claros,
calcado em padres internacionais e que envolve, na sua execuo,
instituies de ensino e pesquisa em medicina veterinria e grande
nmero de mdicos veterinrios que atuam no setor privado. Com
isso, o servio oficial de defesa sanitria animal pode concentrar
suas aes no estabelecimento das polticas pblicas de sade
animal e nas atividades de fiscalizao e de certificao.
Nada obstante isso, de essencial importncia a participao
dos pecuaristas e da agroindstria, beneficirios primeiros da maior
eficincia produtiva dos rebanhos e da certificao de propriedades
livres e monitoradas para brucelose e tuberculose, pois tero a
possibilidade de ofertar produtos com diferencial de qualidade e
maior valor agregado.
Jorge Caetano Junior
Diretor do Departamento de Sade Animal
5

Prefcio

O Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento (MAPA)

iniciou, no ano 2000, o processo de elaborao de uma proposta de
programa para o controle da brucelose e da tuberculose animal. O
assunto era tema de discusso recorrente em eventos tcnicos e
cientficos, em fruns especializados, em teses de ps-graduao,
ou, simplesmente, nas conversas entre veterinrios e produtores
pecurios. Aes de saneamento de rebanhos, ou mesmo programas
locais implementados por cooperativas, eram conhecidos. As
autoridades sanitrias do Rio Grande do Sul, na dcada de 60, e de
Minas Gerais, trs dcadas mais tarde, haviam iniciado programas
sistemticos de vacinao contra a brucelose bovina. O prprio MAPA
publicou legislao de controle da brucelose em 1976, porm sem
que isso fosse seguido de implementao de um programa especfico.
Apesar de todos os esforos, as aes que visavam combater
estas enfermidades careciam de padronizao, de princpios
metodolgicos claramente definidos com abordagem populacional,
e, sobretudo, no constituam um esforo organizado e estruturado
que configurasse um programa sanitrio. Assim, tornava-se
necessrio repensar a estratgia de combate a estas zoonoses para
construir as bases de um programa sanitrio adequado situao
epidemiolgica, s caractersticas do setor pecurio brasileiro e
infra-estrutura de servios veterinrios disponvel.
Para elaborar a proposta de programa, o MAPA instituiu um
grupo de trabalho multidisciplinar, cuja misso durou seis meses.
Durante esse perodo, foram realizadas reunies com representantes
do servio de defesa sanitria, dos produtores, do setor agroindustrial,
das associaes de classe e, ainda, com pesquisadores e acadmicos.
Chegou-se, por fim, a uma proposta baseada em algumas idiaschave, que abriam caminho para uma nova abordagem do problema.
7

Em primeiro lugar, ficou claro que no seria possvel, nem

desejvel, comear as aes de controle com medidas caractersticas
de fases avanadas de erradicao. O exemplo principal desse
equvoco era a tendncia de exigir a realizao de testes diagnsticos
em todas as situaes de trnsito de animais, inclusive para a
participao em qualquer tipo de evento ou aglomerao. Tal
exigncia levaria a realizar vrios milhes de testes de brucelose e
tuberculose todos os anos, sem controle de qualidade e sem resultar
em saneamento dos focos existentes.
O combate a doenas crnicas de tipo endmico no pode
depender apenas da preveno da disseminao do agente
infeccioso, uma vez que este pode manter-se em equilbrio, e por
muito tempo, em rebanhos infectados. Ou seja, ou se eliminam as
fontes de infeco, fazendo o saneamento dos focos, ou a incidncia
de enfermidade permanecer inalterada. necessrio ressaltar que
os animais reagentes aos testes diagnsticos devem ser eliminados,
o que requer algum controle dos mdicos veterinrios privados e
oficiais sobre o destino dos animais.
Para atingir o objetivo de eliminao progressiva de focos,
optou-se por um programa voluntrio de certificao de rebanhos
livres, garantindo-se a isonomia deste conceito. A adeso dos
produtores ao programa depender dos estmulos e restries aos
quais forem expostos. Se os programas de qualidade do leite e da
carne forem incorporando o controle da brucelose e da tuberculose,
exigindo que os produtos sejam procedentes de propriedades livres,
a preocupao com a sade animal e a sade pblica ser entendida
como parte do processo de produo, mais do que como uma
imposio do servio de defesa sanitria, aplicando o princpio da
segurana dos alimentos do campo mesa. A defesa sanitria estar
fazendo apenas uma parte do combate a essas zoonoses,
assumindo a tarefa de certificao sanitria junto ao produtor. O
envolvimento de toda a cadeia produtiva, e do consumidor, que
vai determinar a eficcia de implementao do programa de
certificao de propriedades livres.
8

Para envolver as grandes propriedades de produo de carne

existentes no Brasil, elaboraram-se medidas adaptadas s condies
de manejo e ao tamanho desses rebanhos, as quais justificam a
criao do programa de propriedades monitoradas. Esses rebanhos
estaro sujeitos a um sistema de monitoramento permanente que
visa prevenir a introduo do agente infeccioso e garantir baixos
nveis de risco de manuteno de situaes endmicas.
A vacinao de bezerras contra a brucelose foi considerada
prioritria em razo de a prevalncia ser alta em quase todo o pas.
Com essa medida espera-se reduzir significativamente a prevalncia
e a incidncia da brucelose em um prazo de 10 anos. Os exemplos
de sucesso em Minas Gerais e no Rio Grande do Sul so motivo
para acreditar no acerto dessa estratgia. O PNCEBT tambm um
programa aberto a inovaes, como a introduo de novas vacinas
ou testes de diagnstico. Essa caracterstica importante para
garantir que os produtores e os mdicos veterinrios tenham acesso
constante a mtodos de boa eficcia e de custo baixo.
Finalmente, o PNCEBT envolve os mdicos veterinrios, as
universidades e centros de pesquisa como parte ativa de todo o
processo. Esta uma soluo nova no Brasil, baseada na idia de
que a grande capacidade tcnica instalada das instituies de ensino
e pesquisa e a disponibilidade de servios veterinrios existentes
no Pas podem e devem dar uma contribuio importante a todas
as fases de um programa de sade animal.
Acreditamos que as estratgias e normas seguidas pelo PNCEBT
so adequadas e podem transformar o combate brucelose e
tuberculose em um esforo organizado de todos os setores ligados
produo pecuria e promoo da sade pblica. A partir de
agora ser necessrio monitorar o andamento e o impacto das
medidas propostas. S o tempo mostrar os erros e os acertos e
tornar mais evidentes as necessidades de corrigir ou de reforar o
rumo seguido.
Comit Cientfico Consultivo do PNCEBT
9

10

Sumrio
PROGRAMA NACIONAL DE CONTROLE E ERRADICAO
DA BRUCELOSE E DA TUBERCULOSE ANIMAL (PNCEBT) ....................... 15
Apresentao do Programa ............................................................... 15
Breve Diagnstico da Situao Atual ...................................................... 15
Objetivos Especficos do Programa ......................................................... 17
Estratgias ......................................................................................... 17
Propostas Tcnicas .............................................................................. 18
Vacinao contra Brucelose ............................................................ 18
Certificao de Propriedades Livres de Brucelose e Tuberculose ........... 19
Certificao de Propriedades Monitoradas para
Brucelose e Tuberculose ............................................................. 20
Controle do Trnsito de Animais ................................................. 21
Habilitao e Capacitao de Mdicos Veterinrios ..................... 21
Diagnstico e Apoio Laboratorial ....................................................... 22
Brucelose ................................................................................... 22
Tuberculose ............................................................................... 23
Participao do Servio Veterinrio Oficial ............................................... 24
BRUCELOSE BOVINA (Brucella abortus) .............................................. 25
Definio .......................................................................................... 25
Etiologia ........................................................................................... 25
Epidemiologia ................................................................................... 26
Situao no Brasil ...................................................................... 26
Perdas Econmicas ..................................................................... 27
Resistncia ................................................................................. 28
Mecanismos de Transmisso .............................................................. 29
Patogenia ......................................................................................... 31
Sinais Clnicos e Leses ...................................................................... 32
Resposta Imune contra a Brucelose na Infeco e na Vacinao .......... 33
Diagnstico ...................................................................................... 36
Mtodos Diretos ........................................................................ 36
Mtodos Indiretos ou Sorolgicos .............................................. 36
11

Testes de Triagem .................................................................. 38

Teste de Soroaglutinao com Antgeno
Acidificado Tamponado (AAT) ....................................... 38
Teste do Anel em Leite (TAL) .......................................... 39
Testes Confirmatrios .......................................................... 39
Teste do 2-Mercaptoetanol (2-ME) ................................ 39
Teste de Soroaglutinao em Tubos (SAT) ...................... 40
Fixao de Complemento (FC) ....................................... 40
Novos Mtodos de Diagnstico ........................................... 41
Teste de Elisa Indireto (I-Elisa) ........................................ 41
Teste de Elisa Competitivo (C-Elisa) ................................ 41
Teste de Polarizao de Fluorescncia (FPA) .................... 42
Controle da Brucelose ....................................................................... 42
Vacinas contra Brucelose ................................................................... 43
Vacina B19 ................................................................................ 44
Vacina no Indutora de Anticorpos Aglutinantes ......................... 45
Doena no Ser Humano .................................................................... 45
Bibliografia ........................................................................................ 47
TUBERCULOSE BOVINA (Mycobacterium bovis) .............................. 51
Definio ........................................................................................... 51
Etiologia ............................................................................................ 51
Epidemiologia .................................................................................... 52
Distribuio ................................................................................ 52
Importncia Econmica ................................................................. 53
Mecanismos de Transmisso ................................................................. 53
Patogenia .......................................................................................... 55
Diagnstico ........................................................................................ 57
Diagnstico Clnico ...................................................................... 58
Diagnstico Anatomopatolgico .................................................... 58
Diagnstico Bacteriolgico ............................................................ 59
Diagnstico Alrgico-cutneo ........................................................ 60
Tuberculinas ......................................................................... 61
Mecanismos da Reao Alrgica Tuberculina ........................... 61
12

Equipamentos para os Testes de Tuberculinizao ..................... 63

Mtodos de Turberculinizao ................................................ 64
Cuidados na Tuberculinizao de Rebanhos .............................. 64
Novos Mtodos de Diagnstico da Tuberculose Bovina ...................... 65
Controle da Tuberculose ...................................................................... 66
Tuberculose Humana de Origem Bovina .................................................. 68
Bibliografia ........................................................................................ 68
PROPRIEDADES DOS TESTES DE DIAGNSTICO E IMPLICAES NO
DELINEAMENTO DE ESTRATGIAS SANITRIAS .................................... 73
O Caso dos Programas de Controle da Brucelose e da Tuberculose ...... 73
Concluso .......................................................................................... 79
Bibliografia ........................................................................................ 79
COLHEITA DE MATERIAL PARA EXAME LABORATORIAL ........................ 81
Exame Direto (bacteriolgico) ................................................................ 81
Tuberculose ................................................................................ 82
Brucelose .................................................................................... 83
Exame Histopatolgico ........................................................................ 84
Exame Indireto (sorolgico) .................................................................. 84
Identificao e Encaminhamento do Material de Necropsia ........................ 87
Preenchimento do Formulrio de Encaminhamento
de Amostra para Diagnstico ................................................................ 88
PROTOCOLO PARA DIAGNSTICO DA BRUCELOSE ............................... 91
Diagnstico Sorolgico ..................................................................... 91
Antgenos .................................................................................. 91
Identificao dos Animais .......................................................... 91
Testes ........................................................................................ 91
Teste do Antgeno Acidificado Tamponado (AAT) ................. 91
Teste do Anel em Leite (TAL) ................................................ 93
Teste do 2-Mercaptoetanol (2-ME) ...................................... 96

13

PROTOCOLO PARA DIAGNSTICO DA TUBERCULOSE ...................... 103

Diagnstico Alrgico ......................................................................... 103
Tuberculinas .............................................................................. 103
Equipamentos ........................................................................... 103
Identificao dos Animais ........................................................... 103
Testes ....................................................................................... 104
Teste Cervical Simples (TCS) ................................................... 104
Teste Cervical Comparativo (TCC) ........................................... 106
Teste da Prega Caudal (TPC) .................................................. 109
ELIMINAO DE ANIMAIS ................................................................ 111
MTODOS DE DESINFECO .......................................................... 113
Bibliografia ...................................................................................... 115
PERGUNTAS E RESPOSTAS SOBRE NORMAS E PROCEDIMENTOS .... 117
Vacina contra Brucelose ..................................................................... 117
Cadastramento de Mdicos Veterinrios ............................................... 119
Habilitao de Mdicos Veterinrios ..................................................... 120
Antgenos para Brucelose e Turbeculinas .............................................. 121
Diagnstico de Brucelose ................................................................... 122
Diagnstico de Tuberculose ................................................................ 125
Destino dos Animais Reagentes Positivos .............................................. 128
Trnsito Interestadual e Aglomeraes de Bovinos e
Bubalinos (Feiras e Exposies) ........................................................ 129
Certificao de Estabelecimento de Criao Livre de
Brucelose e Tuberculose ................................................................... 130
Certificao de Estabelecimento de Criao Monitorado
para Brucelose e Tuberculose .............................................................. 134
LEGISLAO PNCEBT ....................................................................... 141
ENDEREOS DAS SUPERINTENDNCIAS FEDERAIS DE
AGRICULTURA, PECURIA E ABASTECIMENTO SFAs/MAPA ..... 181

14

Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento

PROGRAMA NACIONAL DE CONTROLE E ERRADICAO

DA BRUCELOSE E DA TUBERCULOSE ANIMAL (PNCEBT)

Apresentao do Programa
O Programa Nacional de Controle e Erradicao da Brucelose
e da Tuberculose Animal (PNCEBT) foi institudo em 2001 pelo
Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento (MAPA) com
o objetivo de diminuir o impacto negativo dessas zoonoses na sade
humana e animal, alm de promover a competitividade da pecuria
nacional. O PNCEBT introduziu a vacinao obrigatria contra a
brucelose bovina e bubalina em todo o territrio nacional e definiu
uma estratgia de certificao de propriedades livres ou
monitoradas.

Breve Diagnstico da Situao Atual

A brucelose, causada por Brucella abortus, e a tuberculose,
ocasionada por Mycobacterium bovis, esto disseminadas por todo
o territrio nacional; a sua prevalncia e distribuio regional,
porm, no esto bem caracterizadas. Sabe-se que a brucelose
atinge tanto o gado de corte como o gado de leite, enquanto a
tuberculose um problema mais srio para os produtores de leite.
Ambas as enfermidades afetam a populao de bubalinos.
O ltimo diagnstico de situao da brucelose bovina em
nvel nacional foi realizado em 1975, tendo sido estimada a
porcentagem de animais soropositivos em 4% na Regio Sul, 7,5%
na Regio Sudeste, 6,8% na Regio Centro-Oeste, 2,5% na Regio
Nordeste e 4,1% na Regio Norte. Posteriormente, outros
levantamentos sorolgicos por amostragem, realizados em alguns
15

Estados, revelaram pequenas alteraes na prevalncia de brucelose:

no Rio Grande do Sul, a prevalncia passou de 2,0% em 1975,
para 0,3% em 1986, aps uma campanha de vacinao bem
sucedida; em Santa Catarina, passou de 0,2% em 1975, para 0,6%
em 1996; no Mato Grosso do Sul, a prevalncia estimada em 1998
foi de 6,3%, idntica ao valor encontrado em 1975 para o territrio
mato-grossense; em Minas Gerais, passou de 7,6% em 1975, para
6,7% em 1980; no Paran, a prevalncia estimada em 1975 foi de
9,6%, passando para 4,6% de bovinos soropositivos em 1989. Os
dados de notificaes oficiais indicam que a prevalncia de animais
soropositivos se manteve entre 4% e 5% no perodo de 1988 a 1998.
Entre 1989 e 1998, os dados de notificaes oficiais de
tuberculose bovina indicam uma prevalncia mdia nacional de 1,3%
de animais infectados.
Um levantamento realizado em 1999, no Tringulo Mineiro e
nas regies do centro e sul de Minas Gerais, envolvendo
aproximadamente 1.600 propriedades e 23.000 animais, estimou a
prevalncia aparente de animais infectados em 0,8%. No mesmo
estudo, foram detectadas 5% de propriedades com animais
reagentes, sendo importante destacar que esse valor subiu a 15%
no universo de propriedades produtoras de leite com algum grau de
mecanizao da ordenha e de tecnificao da produo.
A partir da instituio do Programa em 2001, um inqurito
soroepidemiolgico para a brucelose est sendo realizado em nvel
nacional, com critrios padronizados e encontra-se em fase
adiantada. Os critrios para a realizao de estudo de prevalncia
da tuberculose no Pas esto sendo estabelecidos.
Antes do lanamento do PNCEBT, o controle da brucelose
estava regulamentado pela Portaria Ministerial nO 23/76, que no
vinha obtendo a eficcia desejada. O mesmo aplica-se ao problema
da tuberculose, cujas normas e procedimentos de controle s com
este Programa passaram a estar regulamentados em nvel nacional.
importante destacar a iniciativa da Associao Brasileira de
Buiatria que, em 1999, organizou grupos de discusso sobre o
16

controle da tuberculose bovina no Brasil e culminou no

encaminhamento de uma proposta de ao ao MAPA em dezembro
desse mesmo ano.
Quanto brucelose e tuberculose dos sunos, o controle
feito de acordo com as normas de certificao de granjas de
reprodutores sudeos da Secretaria de Defesa Agropecuria/MAPA,
que estabelecem procedimentos de diagnstico e controle na
populao de matrizes.
A brucelose ovina e caprina de importncia epidemiolgica,
causada por Brucella melitensis, no foi diagnosticada no Brasil at
o presente momento. A epididimite ovina, provocada por Brucella
ovis, no considerada nas medidas propostas neste Programa,
pois trata-se de doena com caractersticas prprias, pelo que ser
considerada no mbito de programas de controle de doenas dos
ovinos. No existem dados sobre tuberculose ovina e caprina no
Brasil que justifiquem a implantao de medidas especficas visando
o controle sistemtico da doena em pequenos ruminantes.

Objetivos Especficos do Programa

Reduzir a prevalncia e a incidncia de novos focos de
brucelose e de tuberculose.
Criar um nmero significativo de propriedades certificadas
como livres de brucelose e tuberculose ou monitoradas
para brucelose e tuberculose, e que ofeream ao
consumidor produtos de baixo risco sanitrio.

Estratgias
A estratgia deste programa consiste em um conjunto de
medidas sanitrias compulsrias, associadas a aes de adeso
voluntria.
As medidas compulsrias tm eficcia comprovada e
permitem obter uma importante reduo da prevalncia e da
17

incidncia das duas doenas a custos reduzidos. Trata-se da

vacinao de bezerras contra a brucelose e do controle do trnsito
de animais destinados reproduo. importante ressaltar que a
prioridade neste Programa a vacinao contra a brucelose.
As aes de adeso voluntria dizem respeito certificao
de propriedades livres e de propriedades monitoradas, que nada
mais so do que um instrumento que os produtores e o setor
agroindustrial utilizaro para agregar valor aos seus produtos.
Assim sendo, este no um programa apenas do governo
federal e dos governos estaduais; um projeto que dever envolver
o setor produtivo e suas comunidades, o setor industrial e os
consumidores, no esquecendo os mdicos veterinrios que atuam
no setor privado. Em outras palavras, o setor pblico dever atuar
como agente certificador dentro de um processo que envolve
diretamente toda a cadeia produtiva.
Para garantir a qualidade tcnica das aes do Programa, foi
elaborada uma srie de medidas que visam:
capacitar mdicos veterinrios e laboratrios, tanto oficiais
como privados;
padronizar os mtodos de diagnstico utilizados;
permitir as aes de fiscalizao e monitoramento que
cabem ao servio oficial de defesa sanitria animal;
melhorar a integrao desse servio de defesa sanitria com
o servio oficial de inspeo de produtos de origem animal.

Propostas Tcnicas
Vacinao contra Brucelose
Estabeleceu-se um prazo at dezembro de 2003 para cada
Estado implantar em todo o seu territrio a obrigatoriedade de
vacinao de bezerras contra a brucelose. A vacinao s poder ser
realizada sob a responsabilidade de mdicos veterinrios; estes devero estar cadastrados no servio oficial de defesa sanitria animal de
seu Estado de atuao. Em regies onde houver carncia de veterin18

rios privados, ou nos casos em que eles no atendam plenamente s

necessidades do Programa, o servio oficial de defesa sanitria animal
poder executar ou supervisionar as atividades de vacinao. Esperase que, at dezembro de 2010, ao menos 80% da populao de
fmeas adultas tenham sido vacinadas entre 3 e 8 meses de idade.
Quando essa meta for atingida, a prevalncia de brucelose dever
situar-se em nveis que permitam passar fase de erradicao.
O PNCEBT tambm autoriza a vacinao de fmeas com idade
superior a oito meses, desde que sejam utilizadas vacinas que no
interfiram com os testes de diagnstico e atendam aos critrios
estabelecidos em norma especfica.

Certificao de Propriedades Livres de

Brucelose e Tuberculose
Os procedimentos de certificao de propriedades livres de
brucelose e de tuberculose obedecem aos princpios tcnicos
estabelecidos pela Organizao Mundial de Sade Animal (OIE) e,
portanto, acreditados e aceitos internacionalmente. A sua aplicao
foi ajustada realidade dos sistemas de produo brasileiros e s
necessidades do PNCEBT. A adeso ao processo de certificao
voluntria e seria extremamente positiva a implementao de
mecanismos de incentivo e de compensao. Tais iniciativas devero
ser desenvolvidas em colaborao com todos os atores da cadeia
produtiva, principalmente a indstria.
O saneamento das propriedades que entram em processo
de certificao deve ser realizado testando todos os animais e
sacrificando os reagentes positivos. Os testes em todo o rebanho
sero repetidos at a obteno de trs testes sem um nico animal
reagente positivo, ao longo de um perodo mnimo de nove meses.
Uma vez terminado o saneamento, a propriedade obtm o
certificado de livre dessas doenas, cuja manuteno depende do
cumprimento de todas as regras e normas sanitrias estabelecidas.
As propriedades certificadas ficam obrigadas a repetir os testes
anualmente. importante destacar a exigncia de dois testes
19

negativos para o ingresso de animais na propriedade, se eles no

forem provenientes de outra propriedade livre. Os testes de diagnstico para brucelose so realizados exclusivamente em fmeas de idade
igual ou superior a 24 meses, desde que vacinadas entre 3 e 8 meses;
em machos e fmeas no vacinadas, realizam-se a partir dos 8 meses
de idade. Sero submetidos a testes de diagnstico para tuberculose
todos os animais com idade igual ou superior a 6 semanas.
As atividades de saneamento para a certificao de
propriedades livres ou monitoradas sero desenvolvidas por mdicos
veterinrios privados habilitados, depois de aprovados em curso
de treinamento reconhecido pelo MAPA. O servio oficial de defesa
sanitria animal dever monitorar e fiscalizar essas atividades.

Certificao de Propriedades Monitoradas para

Brucelose e Tuberculose
Existe uma dificuldade de aplicao das normas tcnicas
estabelecidas para propriedades livres em estabelecimentos de
criao extensiva e com muitos animais, como caracterstico da
pecuria de corte no Brasil. Por esse motivo, criou-se a certificao
de propriedade monitorada para brucelose e tuberculose, tambm
de adeso voluntria. Nelas, os testes de diagnstico so realizados
por amostragem, seguindo procedimentos estabelecidos no
Regulamento do PNCEBT. Se no forem detectados animais
reagentes positivos, a propriedade receber o certificado de
monitorada para brucelose e tuberculose. Se forem encontrados
animais reagentes positivos, os animais no includos na
amostragem sero submetidos a testes de diagnstico, e todos os
animais reagentes positivos sero sacrificados ou destrudos.
Somente aps essa etapa a propriedade receber o certificado de
monitorada para brucelose e tuberculose.
Em propriedades monitoradas, os testes sero realizados
apenas em fmeas com mais de 24 meses e em machos
reprodutores, com periodicidade anual para brucelose e a cada
dois anos para tuberculose (aps obtidos dois testes anuais de
20

rebanho para tuberculose, com resultados negativos). S podero

ingressar na propriedade animais com dois testes negativos ou
provenientes de propriedades de condio sanitria igual ou
superior. semelhana das propriedades livres, as propriedades
monitoradas so obrigadas a ter superviso tcnica de mdico
veterinrio habilitado.
O certificado de propriedade monitorada para brucelose e
tuberculose ser atribudo exclusivamente a fazendas de gado de
corte. O MAPA entende que esta uma forma eficaz de diminuir a
prevalncia de tais enfermidades em propriedades com grande
nmero de animais e de criao extensiva, enquanto garante o
reconhecimento oficial de um trabalho sistemtico de vigilncia e
saneamento. Para as indstrias exportadoras de carne, muito
importante poder dar garantias aos mercados consumidores de
que o seu produto provm de propriedades de criao onde o
controle dessas doenas feito de forma sistemtica, aplicando-se
princpios de gesto de risco.

Controle do Trnsito de Animais Destinados Reproduo,

e Normas Sanitrias para a Participao em Exposies,
Feiras, Leiles e em outras Aglomeraes de Animais
O PNCEBT estabelece exigncias de diagnstico para efeito
de trnsito interestadual de animais destinados reproduo.
Animais que participam de exposies tambm devem ser
submetidos a teste de diagnstico, ou ser provenientes de
propriedade livre. A emisso de Guia de Trnsito Animal (GTA) ser
tambm condicionada comprovao da vacinao das fmeas
da propriedade contra a brucelose, qualquer que seja a finalidade
do trnsito animal.

Habilitao e Capacitao de Mdicos Veterinrios

O PNCEBT envolve um grande nmero de aes sanitrias
profilticas e de diagnstico a campo. Assim sendo, torna-se
necessrio habilitar mdicos veterinrios do setor privado para
21

atuarem junto ao PNCEBT, sob superviso do MAPA e das Secretarias

de Agricultura dos Estados. A vacinao contra brucelose dever
ser realizada sob responsabilidade de mdicos veterinrios. Por
tratar-se de vacina viva atenuada, sua compra s poder ser efetuada
mediante a apresentao da receita emitida por mdico veterinrio.
Esses profissionais ficaro obrigatoriamente cadastrados no servio
veterinrio oficial de seu Estado de atuao.
Para executar as atividades de diagnstico a campo e
participar do programa de certificao de propriedades livres ou
monitoradas, o MAPA s habilitar mdicos veterinrios que tenham
sido aprovados em curso de treinamento em mtodos de
diagnstico e controle de brucelose e tuberculose, previamente
reconhecido por esse Ministrio. Esses cursos so ministrados em
instituies de ensino ou pesquisa de todo o Pas com o objetivo
de atualizar os conhecimentos dos profissionais que vo atuar no
Programa e, sobretudo, de padronizar as aes sanitrias. Os
instrutores desses cursos sero habilitados por meio da participao
em seminrios de referncia do Programa Nacional, organizados
pelo MAPA e oferecidos regularmente.
A capacitao dos profissionais do setor privado e a sua
participao neste Programa Nacional representam um desafio e
uma oportunidade para a classe mdico-veterinria demonstrar
sua capacidade de contribuir para a soluo de importantes
problemas de sade pblica e de sade animal, a partir da
integrao do servio veterinrio oficial com o setor privado e da
constante melhoria do padro de servios oferecidos aos
pecuaristas.

Diagnstico e Apoio Laboratorial

A eficcia de um programa nacional de combate a qualquer
doena depende, em parte, da qualidade e da padronizao dos
procedimentos de diagnstico utilizados. Os testes para diagnstico
indireto reconhecidos como oficiais so:
22

Brucelose
1) o teste do antgeno acidificado tamponado, que muito
sensvel e de fcil execuo, o teste de triagem realizado por
mdicos veterinrios habilitados, por laboratrios credenciados ou
por laboratrios oficiais credenciados;
2) os animais que reagirem ao teste de triagem podero ser
submetidos a um teste confirmatrio, o 2-Mercaptoetanol, que
mais especfico, e executado por laboratrios credenciados ou
por laboratrios oficiais credenciados;
3) o teste de fixao de complemento, ou outro que o
substitua, realizado em laboratrios oficiais credenciados para
efeito de trnsito internacional, como teste confirmatrio em
animais reagentes ao teste de triagem, ou para diagnstico de
casos inconclusivos ao teste do 2-Mercaptoetanol;
4) o teste do anel em leite poder ser utilizado para
monitoramento da condio sanitria de propriedades livres ou
como ferramenta de diagnstico em sistemas de vigilncia
epidemiolgica; pode ser executado por mdicos veterinrios
habilitados, por laboratrios credenciados ou por laboratrios
oficiais credenciados.

Tuberculose
1) o teste cervical simples a prova de rotina em gado de
leite devido sua boa sensibilidade;
2) o teste da prega ano-caudal pode ser utilizado como prova
de triagem, porm, exclusivamente em gado de corte;
3) o teste cervical comparativo a prova confirmatria para
animais reagentes ao teste da prega ano-caudal ou ao teste cervical
simples; todavia, tambm pode ser empregado como nica prova
diagnstica em rebanhos com histrico de reaes inespecficas.
Os testes acima mencionados colocam o diagnstico de
brucelose e de tuberculose no Brasil em sintonia com os padres
internacionais, e, em particular, com as recomendaes do Cdigo
23

Zoossanitrio Internacional da OIE. Entretanto, o MAPA pretende

atualizar os mtodos de diagnstico medida que novos e melhores
testes forem surgindo.

Participao do Servio Veterinrio Oficial

A credibilidade das atividades propostas neste Programa,
principalmente a certificao de propriedades, est diretamente
associada s aes de monitoramento e fiscalizao do servio
veterinrio oficial. Uma vez que este no vai executar as aes
sanitrias, o seu papel de rgo certificador de qualidade ser
garantido atuando em pontos crticos do processo. Por exemplo, o
servio oficial poder, em qualquer momento, realizar diagnsticos
por amostragem em propriedades certificadas e far um
acompanhamento direto dos testes finais que conferem o certificado
de propriedade livre.
Um ponto fundamental a integrao do servio de inspeo
de produtos de origem animal neste Programa, em virtude do seu
papel tanto na proteo ao consumidor como na vigilncia
epidemiolgica. Com tal objetivo, ser estabelecido um fluxo
sistemtico de informaes nosolgicas entre o servio de inspeo
e o servio de defesa sanitria animal.
Finalmente, deve ser ressaltada a necessidade de integrar o
controle da brucelose e tuberculose nos programas de educao
sanitria.

24

Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento

BRUCELOSE BOVINA (Brucella abortus)

Definio
A brucelose uma doena infecto-contagiosa provocada por
bactrias do gnero Brucella. Produz infeco caracterstica nos
animais, podendo infectar o homem. Sendo uma zoonose de
distribuio universal, acarreta problemas sanitrios importantes e
prejuzos econmicos vultosos. As principais manifestaes nos
animais como abortos, nascimentos prematuros, esterilidade e
baixa produo de leite contribuem para uma considervel baixa
na produo de alimentos. No homem, a sua manifestao clnica
responsvel por incapacidade parcial ou total para o trabalho.
Tendo em vista ser o presente manual parte integrante do
Programa Nacional de Controle e Erradicao da Brucelose e da
Tuberculose Animal (PNCEBT) em bovinos e bubalinos, os conceitos
emitidos a seguir sero dirigidos a essas duas espcies animais.

Etiologia
Dentro do gnero Brucella, so descritas seis espcies
independentes, cada uma com seu hospedeiro preferencial: Brucella
abortus (bovinos e bubalinos), Brucella melitensis (caprinos e ovinos),
Brucella suis (sunos), Brucella ovis (ovinos), Brucella canis (ces) e
Brucella neotomae (rato do deserto). Duas novas espcies, recentemente isoladas de mamferos marinhos esto sendo estudadas.
As trs espcies principais, tambm denominadas clssicas,
so subdivididas em biovariedades ou biovares: B. abortus 7
biovares; B. melitensis 3 biovares; B. suis 5 biovares.
25

As bactrias do gnero Brucella so parasitas intracelulares

facultativos, com morfologia de cocobacilos Gram-negativos, imveis;
podem apresentar-se em cultivos primrios com morfologia colonial
lisa ou rugosa (rugosa estrita ou mucide). Essa morfologia est
diretamente associada composio bioqumica do lipopolissacardeo da parede celular, e para algumas espcies tem relao com
a virulncia. B. abortus, B. melitensis e B. suis normalmente
apresentam uma morfologia de colnia do tipo lisa; quando evoluem
para formas rugosas ou mucides, deixam de ser patognicas. J as
espcies B. ovis e B. canis apresentam uma morfologia de colnia
permanentemente do tipo rugosa ou mucide.
Embora os bovinos e bubalinos sejam suscetveis B. suis
e B. melitensis, inequivocamente a espcie mais importante a
B. abortus, responsvel pela grande maioria das infeces.

Epidemiologia
Situao no Brasil
Estudos mostram que a brucelose bovina parece estar
disseminada por todo o territrio brasileiro, com maior ou menor
prevalncia dependendo da regio estudada. Em 1975, foram
verificadas as seguintes prevalncias em animais, por regies:
Sul, 4%; Sudeste, 7,5%; Centro-Oeste, 6,8%; Nordeste, 2,5% e
Norte, 4,1%.
Posteriormente, alguns Estados realizaram estudos sorolgicos por amostragem, os quais no evidenciaram grandes
alteraes em relao aos ndices nacionais verificados em 1975.
No Rio Grande do Sul, a prevalncia decresceu de 2%, em
1975, para 0,3%, em 1986. Em Santa Catarina, passou de 0,2%,
em 1975, para 0,6%, em 1996. No Mato Grosso do Sul, a
prevalncia estimada em 1998 foi de 6,3%, semelhante de 1975
no antigo Estado do Mato Grosso. Em Minas Gerais, passou de
7,6%, em 1975, para 6,7%, em 1980. No Paran, a prevalncia
estimada em 1975 foi de 9,6%, passando para 4,6% em 1989.
26

Os dados oficiais, publicados no Boletim de Defesa Sanitria

Animal, mostram que a prevalncia de animais positivos no Brasil
manteve-se entre 4% e 5% no perodo entre 1988 e 1998.
Apesar dos poucos estudos realizados visando identificao
das biovariedades de Brucella isoladas de bovdeos no Brasil, j
foram identificadas B. abortus biovares 1, 2 e 3 e B. suis biovar 1.
Alm dessas espcies, de igual modo j foram identificadas B. canis
e B. ovis infectando animais domsticos. At o presente momento,
a B. melitensis, principal agente etiolgico da brucelose caprina,
no foi identificada no Brasil.

Perdas Econmicas
Nos bovinos e bubalinos, a brucelose acomete, de modo
especial, o trato reprodutivo, gerando perdas diretas devido,
principalmente, a abortos, baixos ndices reprodutivos, aumento
do intervalo entre partos, diminuio da produo de leite, morte
de bezerros e interrupo de linhagens genticas. As propriedades
onde a doena est presente tm o valor comercial de seus animais
depreciado; as regies onde a doena endmica encontram-se
em posio desvantajosa na disputa de novos mercados.
Estimativas mostram ser a brucelose responsvel pela
diminuio de 25% na produo de leite e de carne e pela reduo
de 15% na produo de bezerros. Mostram ainda que, em cada
cinco vacas infectadas, uma aborta ou torna-se permanentemente
estril.
Dentro das perdas indiretas, deve-se salientar as que resultam
em infeces humanas. Na maioria das vezes, quando a enfermidade
no tratada na fase aguda, o curso crnico da doena no homem
produz perdas econmicas de vulto. Essas perdas esto relacionadas
com os custos do diagnstico e tratamento, muitas vezes requerendo
internaes prolongadas. Alm disso, no deve ser esquecido o custo
do perodo decorrente da ausncia ao trabalho.
No Brasil, no existem estudos concretos sobre os prejuzos
econmicos ocasionados pela brucelose bovina ou bubalina.
27

Nos Estados Unidos, estimou-se, em 1983, que as perdas por

brucelose bovina foram da ordem de 32 milhes de dlares, apesar
do programa americano ter-se iniciado h mais de 40 anos.

Resistncia
As bactrias do gnero Brucella, apesar de permanecerem
no ambiente, no se multiplicam nele; elas so medianamente
sensveis aos fatores ambientais. Entretanto, a resistncia diminui
quando aumentam a temperatura e a luz solar direta ou diminui a
umidade.
A pasteurizao um mtodo eficiente de destruio de
Brucella sp, assim como as radiaes ionizantes.
A sobrevivncia de Brucella sp em esterco lquido
inversamente proporcional temperatura dele, pois pode sobreviver
nesse material por 8 meses a 15C, enquanto que s resiste por 4
horas se a temperatura do material for de 45 50C.
O Quadro 1 mostra o tempo de resistncia de Brucella sp em
algumas condies ambientais.
Quadro 1 Resistncia de Brucella sp em algumas condies ambientais

Condio ambiental
Luz solar direta
Solo
Fezes

gua

4 5 horas

seco
mido
a baixas temperaturas

Dejetos

Tempo de sobrevivncia
4 dias
65 dias
151 185 dias
120 dias

esgoto

8 240/700 dias

altas temperaturas

4 horas 2 dias

potvel

5 114 dias

poluda

30 150 dias

Feto sombra

180 dias

Exsudato uterino

200 dias

Adaptado de Wray (1975), OMS (1986) e Crawford et al. (1990).

28

Mecanismos de Transmisso
No animal infectado, as localizaes de maior freqncia do
agente so: linfonodos, bao, fgado, aparelho reprodutor
masculino, tero e bere. As vias de eliminao so representadas
pelos fluidos e anexos fetais eliminados no parto ou no
abortamento e durante todo o puerprio , leite e smen.
A principal fonte de infeco representada pela vaca prenhe,
que elimina grandes quantidades do agente por ocasio do aborto
ou parto e em todo o perodo puerperal (at, aproximadamente,
30 dias aps o parto), contaminando pastagens, gua, alimentos
e fmites. Essas bactrias podem permanecer viveis no meio
ambiente por longos perodos, dependendo das condies de
umidade, temperatura e sombreamento, ampliando de forma
significativa a chance de o agente entrar em contato e infectar um
novo indivduo suscetvel.
A porta de entrada mais importante o trato digestivo, sendo
que a infeco se inicia quando um animal suscetvel ingere gua e
alimentos contaminados ou pelo hbito de lamber as crias recmnascidas. Uma vaca pode adquirir a doena apenas por cheirar
fetos abortados, pois a bactria tambm pode entrar pelas mucosas
do nariz e dos olhos.
O tempo transcorrido entre a exposio ao agente infeccioso
e o aparecimento dos sintomas visveis o que se define como
perodo de incubao. No caso da brucelose, esse perodo pode
ser de poucas semanas e at mesmo de meses ou anos.
Considerando-se o momento em que ocorre a infeco, o perodo
de incubao inversamente proporcional ao tempo de gestao,
ou seja, quanto mais adiantada a gestao, menor ser o perodo
de incubao.
A transmisso pelo coito parece no ser de grande
importncia entre bovinos e bubalinos. Na monta natural, o smen
depositado na vagina, onde h defesas inespecficas que dificultam
o processo de infeco.
29

Entretanto, um touro infectado no pode ser utilizado como

doador de smen; isso porque, na inseminao artificial, o smen
introduzido diretamente no tero, permitindo infeco da fmea
com pequenas quantidades do agente, sendo por isso importante
via de transmisso e eficiente forma de difuso da enfermidade
nos plantis.
A transferncia de embries realizada segundo os protocolos
internacionalmente preconizados de lavagem e tratamento para a
reduo da transmisso de agentes infecciosos , no apresenta
risco de transmisso de brucelose entre doadoras infectadas e
receptoras livres da doena.
Fmeas nascidas de vacas bruclicas podem infectar-se no
tero, durante ou logo aps o parto. Quando infectadas, essas
fmeas em geral abortam na primeira prenhez, e s apresentam
resultados positivos para os testes sorolgicos no decorrer da
gestao. Esse fenmeno ocorre em freqncia baixa, porm, apesar
de no impedir o avano dos programas de controle e erradicao,
invariavelmente acarreta considervel retardo na obteno de bons
resultados deles.
Vrias espcies domsticas ou silvestres so suscetveis
infeco por B. abortus, entretanto, so consideradas como
hospedeiros finais da infeco, pois no transmitem o agente
novamente aos bovinos. Entre aquelas espcies em condies de
ter alguma importncia na epidemiologia da brucelose bovina,
podem ser citados: os eqdeos, que podem apresentar leses
articulares abertas, principalmente de cernelha; os ces, que podem
abortar pela infeco; e os saprfagos, pela possibilidade de levar
restos de placenta ou feto de um lugar para outro.
A principal forma de entrada da brucelose em uma
propriedade a introduo de animais infectados. Quanto maior
a freqncia de introduo de animais, maior o risco de entrada
da doena no rebanho. Por essa razo, deve-se evitar introduzir
animais cuja condio sanitria desconhecida. O ideal que
esses animais procedam de rebanhos livres ou, ento, que sejam
30

submetidos rotina diagnstica que lhes garanta a condio de

no infectados.

Patogenia
A B. abortus geralmente entra no organismo do hospedeiro
pela mucosa oral ou nasal. Aps a penetrao na mucosa, as
bactrias se multiplicam e so fagocitadas. Em geral, quando ocorre
a entrada pela via digestiva, as tonsilas so um dos principais pontos
de multiplicao do agente.
Uma das caractersticas da infeco por Brucella sp o fato
de a bactria poder resistir aos mecanismos de destruio das clulas
fagocitrias e sobreviver dentro de macrfagos por longos perodos.
Essa localizao intracelular um dos mecanismos de evaso do
sistema imune, porque protege as brucelas da ao do
complemento e de anticorpos especficos.
Aps a multiplicao no stio de entrada, a B. abortus
transportada, livre ou dentro de macrfagos, para os linfonodos
regionais, nos quais pode permanecer por meses. Se a bactria
no for destruda ou no se tornar localizada, h disseminao
para vrios rgos por via linftica ou hematgena. As localizaes
preferenciais so: linfonodos, bao, fgado, aparelho reprodutor
masculino, bere e tero. Eventualmente, pode instalar-se nas
articulaes mais exigidas, dando origem a leses denominadas
higromas, que podem supurar. Devido ao seu tropismo por algumas
substncias, como o eritritol, grande parte das brucelas se localiza
nos testculos e no tero gestante.
A infeco do tero gestante ocorre por via hematgena. As
brucelas multiplicam-se inicialmente no trofoblasto do placentoma,
infectando tambm as clulas adjacentes, levando a uma reao
inflamatria da placenta. Alm disso, h infeco do feto, de igual
modo por via hematgena.
As leses placentrias raramente atingem todos os
placentomas; em geral, apenas parte deles afetada. Tais leses
31

inflamatrio-necrticas de placentomas, que impedem a passagem

de nutrientes e oxignio da me para o feto, assim como provocam
a infeco macia do feto por B. abortus, so as responsveis pelo
aborto.
Com o desenvolvimento de imunidade celular aps o primeiro
aborto, h uma diminuio do nmero e do tamanho das leses
de placentomas nas gestaes subseqentes. Com isso, o aborto
torna-se infreqente, aparecendo outras manifestaes da doena,
como, por exemplo, a reteno de placenta, a natimortalidade ou
o nascimento de bezerros fracos.

Sinais Clnicos e Leses

A brucelose pode manifestar-se de maneira distinta conforme
o hospedeiro. Nos bovinos e bubalinos, a principal manifestao
clnica o aborto, que ocorre em torno do stimo ms de gestao.
Aps a infeco, o aborto quase sempre acontece na primeira
gestao, mas, em decorrncia do desenvolvimento da imunidade
celular, pouco freqente na segunda gestao aps a infeco, e
muito raro nas subseqentes. Os animais infectados apresentam
uma placentite necrtica, sendo comum a reteno de placenta.
Aps o primeiro aborto, so mais freqentes a presena de
natimortos e o nascimento de bezerros fracos.
O feto geralmente abortado 24 a 72 horas depois de sua
morte, sendo comum sua autlise. No h nenhuma leso
patognomnica da brucelose no feto abortado, mas, com
freqncia, observa-se broncopneumonia supurativa.
Nos rebanhos com infeco crnica, os abortos concentram-se
nas fmeas primparas e nos animais sadios recentemente
introduzidos.
Nos machos existe uma fase inflamatria aguda, seguida de
cronificao, freqentemente assintomtica. As bactrias podem
instalar-se nos testculos, epiddimos e vesculas seminais. Um dos
possveis sinais a orquite uni ou bilateral, transitria ou permanente,
32

com aumento ou diminuio do volume dos testculos. Em outros

casos, o testculo pode apresentar um aspecto amolecido e cheio
de pus. Leses articulares tambm podem ser observadas.

Resposta Imune contra a Brucelose

na Infeco e na Vacinao
As bactrias do gnero Brucella so parasitas intracelulares
facultativos, com capacidade de se multiplicar e sobreviver dentro
de macrfagos. Em razo dessa habilidade, a proteo contra a
infeco e a eliminao da bactria do organismo hospedeiro
dependem primariamente da resposta imune mediada por clulas.
Tal resposta d-se pela interao de clulas fagocitrias neutrfilos
e macrfagos e de clulas especficas, linfcitos T auxiliares e
citotxicos. Apesar de existirem metodologias para se medir a
intensidade dessa resposta imune celular, essas tcnicas, por serem
complexas e de difcil execuo, no so utilizadas na rotina de
diagnstico da infeco por Brucella sp.
Alm da resposta imune celular, anticorpos especficos
(imunidade humoral) contra a cadeia O tambm so produzidos
durante a infeco. Os anticorpos dirigidos contra o
lipopolissacardeo (LPS) de Brucella sp tm sido bastante estudados,
de modo especial por serem detectados com facilidade em provas
sorolgicas. A maioria das imunoglobulinas presentes no soro de
bovinos e bubalinos da classe G (IgG1 e IgG2), seguidas das
classes M (IgM) e A (IgA).
A resposta humoral de bovinos infectados por B. abortus ou
vacinados com B19, caracteriza-se pela sntese dos quatro isotipos
principais de imunoglobulinas. A resposta sorolgica ps-infeco
ou vacinao produz-se a partir da primeira semana, aparecendo,
em primeiro lugar, o isotipo IgM e, logo aps, o IgG1. As respostas
de IgG2 e IgA aparecem mais tarde, aumentam gradativamente,
mas permanecem em nveis baixos (Figura 1). A observao por
perodos prolongados da resposta humoral em animais infectados
33

demonstra que h um leve decrscimo dos nveis de IgM, enquanto

que os de IgG1 permanecem altos, inalterados. A IgG2 e IgA
permanecem em nveis mais baixos e estveis (Figura 2). A
observao por perodo prolongado em animais vacinados com
B19, quando vacinados at 8 meses, demonstra que o nvel de
anticorpos decresce rapidamente, atingindo ttulos inferiores a 25
UI depois de 12 meses (Figura 3). Por outro lado, se a vacinao for
realizada acima de 8 meses de idade, os ttulos vacinais tendem a
permanecer elevados por mais tempo, podendo gerar reaes falsopositivas nos testes indiretos de diagnstico.
Figura 1 Resposta dos principais isotipos de anticorpos em
bovinos infectados com amostra patognica de
Brucella abortus ou vacinados com B19

Fonte: Adaptado de Nielsen et al., 1996.

34

Figura 2 Resposta a longo termo dos principais isotipos de

anticorpos em bovinos infectados com amostra
patognica de Brucella abortus

Fonte: Adaptado de Nielsen et al., 1996.

Figura 3 Resposta a longo termo dos principais isotipos de

anticorpos em bovinos vacinados com a amostra B19
de Brucella abortus

Fonte: Adaptado de Nielsen et al., 1996.

35

Diagnstico
O diagnstico da brucelose pode ser feito pela identificao
do agente por mtodos diretos, ou pela deteco de anticorpos
contra B. abortus por mtodos indiretos.

Mtodos Diretos
Os mtodos diretos incluem o isolamento e a identificao
do agente, imunohistoqumica, e mtodos de deteco de cidos
nucleicos, principalmente a reao da polimerase em cadeia (PCR).
O isolamento e a identificao da B. abortus a partir de
material de aborto (feto, contedo estomacal de feto, placenta)
ou de secrees apresentam resultados muito bons se a colheita e
o transporte da amostra forem bem realizados e se a amostra for
processada em laboratrios capacitados e com experincia.
Entretanto, devido ao risco de contaminao humana durante o
processamento da amostra, poucos so os laboratrios que realizam
o exame.
A imunohistoqumica pode ser procedida em material de
aborto aps a fixao em formol e permite tanto a identificao
do agente como a visualizao de aspectos microscpicos do tecido
examinado.
A PCR detecta um segmento de DNA especfico da B. abortus
em material de aborto, em secrees e excrees. uma tcnica
bastante sensvel e especfica, mas requer equipamentos sofisticados
e pessoal treinado.

Mtodos Indiretos ou Sorolgicos

O conhecimento da dinmica das imunoglobulinas nos
diferentes estgios da resposta imune tem orientado o desenvolvimento de inmeros testes sorolgicos. Esses testes visam
demonstrar a presena de anticorpos contra Brucella sp em vrios
fluidos corporais, como soro sanguneo, leite, muco vaginal e smen.
Um teste sorolgico perfeito deveria detectar infeco nos estgios
36

iniciais da doena, antes da ocorrncia do aborto, e deveria

discriminar anticorpos de vacinao e de infeco; da mesma
maneira, no deveria apresentar reaes falso-positivas ou falsonegativas. Ainda no existe tal teste para o diagnstico da brucelose.
Acrescente-se que nenhuma doena conta com um recurso
diagnstico com esse desempenho.
As reaes falso-positivas so decorrentes de dois fatores
distintos. Primeiro, a reao pode ocorrer devido presena de
anticorpos no especficos presentes nas infeces por outras
bactrias, como Yersinia enterocolitica O:9, Salmonella sp,
Escherichia coli O:157, ou Pseudomonas sp. Segundo, podem
decorrer como resultado da vacinao com B19 aps a idade
recomendada.
A resposta sorolgica infeco por Brucella sp influenciada
por muitos fatores, os quais refletem no desempenho das diferentes
provas sorolgicas. Destacam-se, entre esses fatores, o longo e
varivel perodo de incubao da doena, durante o qual a sorologia
pode ser negativa, a condio vacinal dos animais, a natureza do
desafio, a variao individual de resposta vacinao e infeco
e o estgio da gestao no momento da infeco. A melhor
estratgia que tem sido validada por vrios pases que
conseguiram avanos significativos no combate brucelose
costuma ser a combinao de testes, utilizados em srie. Essa
estratgia tem como base a escolha de um teste de triagem de
fcil execuo, barato e de boa sensibilidade, seguido de um teste
confirmatrio, a ser realizado apenas nos soros que resultarem
positivos no teste anterior, geralmente mais elaborado, porm com
melhor especificidade que o teste de triagem. Esse teste
confirmatrio tem que ter tambm boa sensibilidade.
A quantidade de testes indiretos disponveis para o
diagnstico de brucelose bastante ampla; cada pas, segundo
suas disponibilidades e caractersticas, deve escolher aqueles que
melhor se adaptem sua estratgia. Em geral, os testes sorolgicos
so classificados segundo o antgeno utilizado na reao. Nos testes
37

de aglutinao (lenta, com antgeno acidificado, do anel em leite,

de Coombs), de fixao do complemento ou imunofluorescncia
indireta, o antgeno representado por clulas inteiras de B. abortus.
Nos testes de imunodifuso em gel (dupla ou radial), Elisa (indireto
e competitivo), hemlise indireta e Western blot, o antgeno
representado pelo lipopolissacardeo da parede celular da B. abortus
semipurificado.
A escolha dos mtodos sorolgicos precisa levar em
considerao o custo, o tamanho e as caractersticas da populao
sob vigilncia, a situao epidemiolgica da doena, a sensibilidade
e a especificidade dos testes, bem como a utilizao de vacinas.
No Brasil, o PNCEBT definiu como oficiais os seguintes testes:
Antgeno Acidificado Tamponado (AAT), Anel em Leite (TAL), 2Mercaptoetanol (2-ME) e Fixao de Complemento (FC). Os dois
primeiros como testes de triagem; os dois ltimos como
confirmatrios. Clulas inteiras da amostra de B. abortus 1119-3
so utilizadas na preparao dos antgenos.
Testes de Triagem
Teste de Soroaglutinao
com Antgeno Acidificado Tamponado (AAT)
preparado com o antgeno na concentrao de 8%,
tamponado em pH cido (3,65) e corado com o Rosa de Bengala.
o teste de triagem do rebanho. A maioria dos soros de animais
bacteriologicamente positivos apresenta reao a essa prova. Como
podem ocorrer alguns poucos casos de reaes falso-positivas em
decorrncia da utilizao da vacina B19, sugere-se a confirmao
por meio de testes de maior especificidade para se evitar o sacrifcio
de animais no infectados. uma prova qualitativa, pois no indica
o ttulo de anticorpos do soro testado. A leitura revela a presena
ou a ausncia de IgG1. Nas provas clssicas de aglutinao, reagem
tanto anticorpos IgM como IgG, enquanto que, nessa prova, reagem
somente os isotipos da classe IgG1. O pH acidificado da mistura
38

soro-antgeno inibe a aglutinao do antgeno pelas IgM. O AAT

detecta com maior precocidade as infeces recentes, sendo, nesse
aspecto, superior prova lenta em tubos.
Teste do Anel em Leite (TAL)
Foi idealizado para ser aplicado em misturas de leite de vrios
animais, uma vez que a baixa concentrao celular do antgeno
(4%) torna-o bastante sensvel. Empregam-se mais comumente
antgenos corados com hematoxilina, que d a cor azul caracterstica
reao positiva. Se existirem anticorpos no leite, eles se combinaro
com as B. abortus do antgeno, formando uma malha de complexo
antgeno-anticorpo que, por sua vez, ser arrastada pelos glbulos
de gordura, fazendo com que se forme um anel azulado na camada
de creme do leite (reao positiva). No havendo anticorpos
presentes, o anel de creme ter a colorao branca, e a coluna de
leite permanecer azulada (reao negativa). uma prova de grande
valor no s para se detectar rebanhos infectados, como tambm
para se monitorar rebanhos leiteiros livres de brucelose. Tal prova
tem limitaes, pois poder apresentar resultados falso-positivos
em presena de leites cidos, ou provenientes de animais portadores
de mamites ou, ainda, de animais em incio de lactao (colostro).
Testes Confirmatrios
Teste do 2-Mercaptoetanol (2-ME)
uma prova quantitativa seletiva que detecta somente a
presena de IgG no soro, que a imunoglobulina indicativa de
infeco crnica. Deve ser executada sempre em paralelo com a
prova lenta em tubos. Baseia-se no fato de os anticorpos da classe
IgM, com configurao pentamrica, degradarem-se em
subunidades pela ao de compostos que contenham radicais tiol.
Essas subunidades no do origem a complexos suficientemente
grandes para provocar aglutinao. Desse modo, soros com
predomnio de IgM apresentam reaes negativas nessa prova e
39

reaes positivas na prova lenta. A interpretao dos resultados

dada pela diferena entre os ttulos dos soros sem tratamento (prova
lenta), frente ao soro tratado com 2-ME.
Os resultados positivos na prova lenta e negativos no 2-ME
devem ser interpretados como reaes inespecficas ou como devido
a anticorpos residuais de vacinao com B19.
Resultados positivos em ambas as provas indicam a presena
de IgG, que so as aglutininas relacionadas com infeco, devendo
os animais ser considerados infectados.
Teste de Soroaglutinao em Tubos (SAT)
Tambm chamada de prova lenta porque a leitura dos
resultados feita em 48 horas , a prova sorolgica mais antiga
e ainda hoje bastante empregada. utilizada em associao com
o teste do 2-Mercaptoetanol para confirmar resultados positivos
em provas de rotina. uma prova padronizada frente a um soro
padro internacional, sendo o resultado expresso em unidades
internacionais.
A prova permite identificar uma alta proporo de animais
infectados, porm, costuma apresentar resultados falso-negativos,
no caso de infeco crnica e, em algumas situaes, podem
aparecer ttulos significativos em animais no infectados por B.
abortus como decorrncia de reaes cruzadas com outras
bactrias. Em animais vacinados com B19 acima de 8 meses, uma
proporo importante deles pode apresentar ttulos de anticorpos
para essa prova por um longo tempo, ou permanentemente.
Fixao de Complemento (FC)
Este teste tem sido empregado em diversos pases que
conseguiram erradicar a brucelose ou esto em fase de erradic-la.
o teste de referncia recomendado pela Organizao Mundial de
Sade Animal (OIE) para o trnsito internacional de animais. Na
brucelose bovina, apesar de a FC detectar tanto IgG1 como IgM, o
isotipo IgG1 muito mais efetivo como fixador do complemento.
40

Animais infectados permanecem positivos por perodos mais

longos e com ttulos de anticorpos fixadores de complemento mais
elevados do que os detectados nas provas de aglutinao. Em
animais vacinados acima de 8 meses de idade, os anticorpos que
fixam complemento desaparecem mais rapidamente do que os
aglutinantes.
um teste trabalhoso e complexo, que exige pessoal treinado
e laboratrio bem equipado.

Novos Mtodos de Diagnstico

Teste de Elisa Indireto (I-Elisa)
Existem vrios protocolos de I-Elisa que tm apresentado
bons resultados. Emprega-se como antgeno o lipopolissacardeo
de B. abortus imobilizado em placas de 96 poos. Como conjugado,
utiliza-se um anticorpo monoclonal anti-IgG1 bovina conjugado com
a peroxidase. Agentes quelantes (EDTA/EGTA) so utilizados para
minimizar reaes no especficas. O teste possui alta sensibilidade;
entretanto, sua especificidade assemelha-se quela do AAT.
Teste de Elisa Competitivo (C-Elisa)
Neste teste, utiliza-se tambm como antgeno imobilizado
na fase slida o lipopolissacardeo (LPS) de B. abortus. No momento
da prova, o soro a testar misturado com um anticorpo monoclonal
especfico contra a cadeia O de B. abortus. Um conjugado
peroxidase-anti-IgG utilizado para detectar o anticorpo
monoclonal ligado ao antgeno imobilizado na fase slida do teste.
Quanto maior a quantidade de anticorpos anticadeia O de
Brucella sp no soro testado, maior a competio com o anticorpo
monoclonal especfico e menor a quantidade de cor desenvolvida.
Por comparao com um controle, possvel determinar a
quantidade relativa de anticorpos anti-Brucella no soro teste. um
teste muito sensvel e especfico, e recomendado pela Organizao
Mundial de Sade Animal (OIE) como teste confirmatrio para o
diagnstico de brucelose, assim como a FC. Seu custo elevado.
41

Teste de Polarizao de Fluorescncia (FPA)

O antgeno utilizado no teste preparado com o
polissacardeo O, tambm denominado cadeia O, de B. abortus,
conjugado com o isotiocianato de fluorescena. A prova se
fundamenta na comparao de velocidades dos movimentos
aleatrios das molculas em soluo. O tamanho molecular o
principal fator que influencia a velocidade de rotao de uma
molcula, sendo inversamente proporcional a ela. Havendo anticorpos
no soro, haver a formao dos complexos anticorpo-antgenoconjugado, cuja velocidade de rotao ser inferior do antgenoconjugado isolado. Determina-se a velocidade de rotao das
molculas com o auxlio de um equipamento de iluminao por luz
polarizada. Por meio da utilizao de controles e de soro pr-titulado,
possvel calcular a quantidade de anticorpos presente no soro
testado. O teste concludo em poucos minutos; pode ser realizado
em soro e leite e tem-se mostrado muito promissor para o diagnstico
de brucelose tambm em outras espcies.

Controle da Brucelose
O controle da brucelose apoia-se basicamente em aes de
vacinao massal de fmeas e diagnstico e sacrifcio dos animais
positivos. So tambm muito importantes as medidas
complementares, que visam diminuir a dose de desafio caso
ocorra a exposio bem como importante o controle de trnsito
para os animais de reproduo. Programas de desinfeco e
utilizao de piquetes de pario so iniciativas simples que trazem
como resultado a diminuio da quantidade de brucelas vivas
presentes no ambiente. Isso representa diminuir a dose de desafio,
o que, por sua vez, significa aumentar os ndices de proteo da
vacina e diminuir a chance de a bactria infectar um novo suscetvel.
Com uma cobertura vacinal ao redor de 80% ou seja,
quando cerca de 80% das fmeas em idade de procriar de uma
42

populao estiverem vacinadas , a freqncia de animais infectados

ser bastante baixa. Portanto, uma reduo importante da
prevalncia pode ser obtida utilizando apenas um bom programa
de vacinao. Por essa razo, a vacinao deve ser priorizada nas
fases iniciais do programa, quando as prevalncias so elevadas.
A eliminao das fontes de infeco, feita por meio de uma
rotina de testes diagnsticos com sacrifcio dos positivos, a base
das aes que visam criar propriedades livres da doena.
Em resumo, inicialmente deve-se baixar a prevalncia com
um bom programa de vacinao e, paulatinamente, ir aumentando
as aes de diagnstico para a obteno de propriedades livres.
Em regies onde a freqncia da doena muito baixa, a
implantao de eficientes sistemas de vigilncia, adaptados
realidade local, pode ser de grande valia na descoberta de focos
de brucelose.
Assim sendo, os mtodos de controle da brucelose so
bastante simples. O mais importante conhecer muito bem tanto
a epidemiologia da doena, quanto a populao em que as aes
devero ser desenvolvidas, e escolher a melhor estratgia para
implement-las.

Vacinas contra Brucelose

Desde a identificao do agente etiolgico da brucelose, vrios
pesquisadores tm procurado desenvolver vacinas que sejam
protetoras e que no interfiram no diagnstico da doena. Em
decorrncia desses estudos, vem sendo desenvolvido um grande
nmero de vacinas vivas atenuadas, mortas, de subunidades,
recombinantes e de DNA. Muitas dessas vacinas mostraram-se pouco
protetoras, como as vacinas mortas, ou ainda esto em fases de
testes, como as vacinas de subunidades, recombinantes e de DNA.
As vacinas vivas atenuadas so aquelas que efetivamente
foram e ainda so utilizadas nos programas de controle da
43

brucelose. Duas delas, recomendadas pela Organizao Mundial

de Sade Animal (OIE), so as mais empregadas: a B19 e a vacina
no indutora de anticorpos aglutinantes (amostra RB51). Ambas
so boas indutoras de imunidade celular.

Vacina B19
A vacina B19 uma amostra de B. abortus lisa, que foi isolada
do leite de uma vaca Jersey em 1923. Depois de acidentalmente
esquecida por mais de um ano temperatura ambiente, a amostra
perdeu a virulncia e desde a dcada de 1930 tem sido utilizada
como vacina. Essa vacina foi empregada em vrios pases que
erradicaram a doena como, por exemplo, Austrlia, Canad,
Dinamarca, Inglaterra, Holanda, Sucia, entre outros. Foi tambm
a vacina utilizada no programa de controle nos EUA at a primeira
metade da dcada de 1990. No Brasil, a vacina obrigatria para
bezerras com idade entre 3 e 8 meses.
A B19 atenuada para fmeas jovens; pode, entretanto,
causar orquite nos machos e provocar aborto se administrada
durante a gestao. Pode ainda infectar o homem, e dar origem
doena. Portanto, no se recomenda a vacinao de machos ou
fmeas gestantes com a amostra B19. Durante a vacinao, devem
ser adotadas certas precaues quanto proteo individual (uso
de culos de proteo, luvas, etc.) e quanto ao descarte de seringas
e frascos de vacinas.
Por ser uma amostra lisa de B. abortus, a B19 induz a
formao de anticorpos especficos contra o LPS liso e pode interferir
no diagnstico sorolgico da brucelose. A persistncia desses
anticorpos est relacionada com a idade de vacinao. Se as fmeas
forem vacinadas com idade superior a 8 meses, h grande
probabilidade de produo de anticorpos que perdurem e interfiram
no diagnstico da doena aps os 24 meses de idade. Quando a
vacinao ocorre at os 8 meses de idade, tais anticorpos
desaparecem rapidamente, e os animais acima de 24 meses so
totalmente negativos nas provas sorolgicas.
44

Vacina no Indutora de Anticorpos Aglutinantes

(amostra RB51)
A vacina elaborada com uma amostra de B. abortus rugosa
atenuada, originada da amostra lisa virulenta 2308 que sofreu
passagens sucessivas em meio contendo concentraes
subinibitrias de rifampicina. Ela possui caractersticas de proteo
semelhantes s da B19, porm, por ser uma amostra rugosa, no
induz a formao de anticorpos anti-LPS liso e no interfere no
diagnstico sorolgico da doena.
Atualmente, a vacina no indutora de anticorpos aglutinantes
(amostra RB51) a vacina oficial do programa de controle de
brucelose dos EUA, do Mxico e do Chile. Tambm est aprovada
em outros pases onde vem sendo utilizada. No Brasil, ser
empregada para a vacinao estratgica de fmeas adultas.
Por ser uma vacina viva, o seu manuseio exige as mesmas
precaues da B19, j referidas.

Doena no Ser Humano

A brucelose humana uma doena importante, mas de difcil
diagnstico porque apresenta sintomatologia inespecfica.
A transmisso da doena ocorre pelo contato do agente com
mucosas ou solues de continuidade da pele. O grande risco para
a sade pblica decorre da ingesto de leite cru ou de produtos
lcteos no submetidos a tratamento trmico (queijo fresco, iogurte,
creme, etc.), oriundos de animais infectados. A carne crua com
restos de tecido linftico e o sangue de animais infectados podem
conter microorganismos viveis e, portanto, de igual modo
representam risco para a populao humana consumidora.
A brucelose uma zoonose que apresenta um forte
componente de carter ocupacional: tratadores e veterinrios, por
fora de suas atividades, freqentemente manipulam anexos
placentrios, fluidos fetais e carcaas de animais, expondo-se ao
risco de infeco quando esses materiais provm de animais
45

infectados. O manuseio da vacina B19, que patognica para o

homem, tambm pe em risco algumas classes de profissionais.
Magarefes, trabalhadores da indstria de laticnios e donas-decasa, pelo contato com carne ou leite contaminados, so igualmente
indivduos sujeitos a um maior risco de infeco. Laboratoristas,
por manipularem grandes massas bacterianas na produo de
vacinas e antgenos, ou mesmo na rotina de diagnstico direto,
podem infectar-se por meio de solues de continuidade da pele
ou pelo contato com mucosas, sobretudo a conjuntiva e a mucosa
respiratria (a inalao uma eficiente forma de infeco).
No ser humano, os quadros clnicos mais graves so
provocados pela B. melitensis, decrescendo em gravidade quando
a doena decorrente da infeco por B. suis e, assim,
sucessivamente para a B. abortus e B. canis.
O perodo de incubao no ser humano pode variar de uma a
trs semanas at vrios meses. A doena produzida pela B. abortus
agente mais difundido no nosso meio e responsvel pelo real
problema da brucelose bovina no pas , na grande maioria das
vezes caracterizada por sintomas inespecficos, presentes nos
processos bacterianos generalizados nos quais se destacam a febre,
a sudorese noturna, e as dores musculares e articulares.
A enfermidade tanto pode manifestar-se de forma branda,
com evoluo para a cura espontnea, quanto grave e prolongada,
acompanhada por toxemia. Seu curso pode ser dividido em duas
fases, sendo a febre intermitente recorrente uma caracterstica
marcante. Na fase aguda prevalecem a febre, a debilidade, a
cefalia, as dores musculares e articulares, a sudorese noturna
intensa, os calafrios e prostrao. O quadro agudo pode evoluir
para toxemia, trombocitopenia, endocardite e outras complicaes,
podendo levar morte. Geralmente confundida com gripe
recorrente, sendo observadas fadiga, cefalia, dores musculares e
sudorese. Algumas das complicaes mais freqentes so
tromboflebite, espondilite e artrite perifrica.
46

Em geral, o tratamento feito pela administrao de uma

associao de antibiticos por seis semanas. As drogas mais
utilizadas so tetraciclinas, doxiciclina e rifampicina. Convm
salientar que em caso de infeco acidental com a amostra RB51,
o uso da rifampicina no indicado.

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49

50

Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento

TUBERCULOSE BOVINA (Mycobacterium bovis)

Definio
A tuberculose causada pelo Mycobacterium bovis uma
zoonose de evoluo crnica que acomete principalmente bovinos
e bubalinos. Caracteriza-se pelo desenvolvimento progressivo de
leses nodulares denominadas tubrculos, que podem localizar-se
em qualquer rgo ou tecido.
Tendo em vista ser o presente manual parte integrante do
Programa Nacional de Controle e Erradicao da Brucelose e da
Tuberculose Animal (PNCEBT) em bovinos e bubalinos, os conceitos
emitidos a seguir sero dirigidos a essas duas espcies animais.

Etiologia
As bactrias causadoras da tuberculose pertencem famlia
Mycobacteriaceae, gnero Mycobacterium. So bastonetes curtos
aerbicos, imveis, no capsulados, no flagelados, apresentando
aspecto granular quando corados, medindo de 0,5 a 7,0 m de
comprimento por 0,3 m de largura, sendo a lcool-cidoresistncia a sua propriedade mais caracterstica. No entanto, muitas
dessas caractersticas, inclusive a tintorial, superpem-se nos gneros
Mycobacterium, Nocardia, Rhodococcus e Corynebacterium.
Trs espcies de hospedeiros contriburam para a perpetuao
da tuberculose atravs dos sculos: o bovino, o homem e as aves
em geral.
As micobactrias do complexo M. tuberculosis (M.
tuberculosis, M. bovis e M. africanum) so as principais causadoras
da tuberculose nos mamferos.
51

O M. bovis tem um amplo espectro de patogenicidade para

as espcies domsticas e silvestres, principalmente bovinos e
bubalinos, e pode participar da etiologia da tuberculose humana.
A doena humana causada pelo M. bovis tambm denominada
tuberculose zoontica.
O M. tuberculosis a principal causa de tuberculose no ser
humano. Pode infectar bovinos, porm no causa doena
progressiva nessa espcie; todavia, ocasionalmente, pode
sensibiliz-los ao teste tuberculnico.
O M. avium o causador da tuberculose em vrias espcies
de aves e integrante do complexo MAIS (M. avium, M.
intracellulare e M. scrofulaceum). As micobactrias do complexo
MAIS causam leses granulomatosas nos linfonodos do trato gastrointestinal de sunos, a linfadenite granulomatosa, que leva a srias
perdas no abate desses animais. No ser humano, a infeco pelas
micobactrias do complexo MAIS tem importncia para os
indivduos com deficincia imunolgica. As micobactrias do
complexo MAIS no so patognicas para os bovinos e bubalinos;
entretanto, provocam reaes inespecficas tuberculinizao,
dificultando o diagnstico da tuberculose nessas espcies.

Epidemiologia
Distribuio
Os pases que implantaram programas de controle da
tuberculose animal ao longo do sculo passado, com bases em
tuberculinizao e sacrifcio dos animais reagentes, conseguiram
reduzir consideravelmente a freqncia de animais infectados.
Nos dias atuais, a prevalncia da doena maior nos pases
em desenvolvimento, e menor nos pases desenvolvidos, onde o
controle e a erradicao encontram-se em fase avanada. Alguns
pases da Europa j erradicaram a doena; outros esto na etapa
final de erradicao, com prevalncias baixas. Na Amrica Latina e
Caribe existem reas com prevalncia que ultrapassa 1%. No Brasil,
52

dados de notificaes oficiais indicam uma prevalncia mdia

nacional de 1,3% de animais reagentes tuberculina no perodo
de 1989 a 1998. Em Minas Gerais, um estudo realizado pelo
Instituto Mineiro de Agropecuria (IMA) em 1999, envolvendo
aproximadamente 1.600 propriedades e 23.000 animais, estimou
uma prevalncia de 0,85% de animais reagentes ao teste de
tuberculinizao. No mesmo estudo, foram detectados 5% de
propriedades com animais reagentes.

Importncia Econmica
No Brasil, no decorrer dos ltimos anos, verificou-se que o
controle da tuberculose bovina no motivou os mdicos veterinrios,
os criadores, as autoridades sanitrias e os consumidores de
produtos de origem animal. Em parte, isso se deve ao fato de ser
uma doena crnica que no apresenta sinais clnicos alarmantes
aborto, febre alta, queda abrupta de produo como o caso
das doenas de carter agudo.
Quando, por alguma razo, o criador alertado para o
problema da tuberculose e procura auxlio profissional, a prevalncia
no rebanho revela-se alta, de maneira geral.
A importncia econmica atribuda doena bovina est
baseada nas perdas diretas resultantes da morte de animais, da
queda no ganho de peso e diminuio da produo de leite, do
descarte precoce e eliminao de animais de alto valor zootcnico
e condenao de carcaas no abate. Estima-se que os animais
infectados percam de 10% a 25% de sua eficincia produtiva. Existe
ainda a perda de prestgio e credibilidade da unidade de criao
onde a doena constatada.

Mecanismos de Transmisso
A mais significativa fonte de infeco para os rebanhos o
bovino ou o bubalino infectados. A principal forma de introduo
da tuberculose em um rebanho a aquisio de animais infectados.
53

Outras espcies de animais podem assumir papel importante

como reservatrio do M. bovis, em condies de introduzir ou
reintroduzir a doena em rebanhos bovinos. Em pases
desenvolvidos, onde a tuberculose bovina encontra-se em fase final
de erradicao ou j erradicada, espcies silvestres assumem
importncia como reservatrio do M. bovis para bovinos. Na Europa,
verificou-se que o texugo (Meles meles) fez a tuberculose bovina
ressurgir em reas de onde j havia sido erradicada. Na Nova
Zelndia, um pequeno marsupial silvestre (Trichossurus vulpecula)
apontado como um dos principais responsveis pela reinfeco
de bovinos pelo M. bovis. Nos EUA, acredita-se que os cervdeos
tenham alguma importncia como reservatrio de M. bovis para
bovinos. No Brasil, certamente existem espcies silvestres suscetveis
ao M. bovis, mas desconhecida a importncia desses animais
como reservatrio do agente para bovinos.
Eventualmente, o homem com tuberculose causada pelo M.
bovis pode ser fonte de infeco para os rebanhos.
Em um animal infectado, o M. bovis eliminado pelo ar
expirado, pelas fezes e urina, pelo leite e outros fluidos corporais,
dependendo dos rgos afetados. A eliminao do M. bovis tem
incio antes do aparecimento dos sinais clnicos.
A principal porta de entrada do M. bovis a via respiratria;
a transmisso, em aproximadamente 90% dos casos, ocorre pela
inalao de aerossis contaminados com o microorganismo. O trato
digestivo tambm porta de entrada da tuberculose bovina,
principalmente em bezerros alimentados com leite proveniente de
vacas com mastite tuberculosa e em animais que ingerem gua ou
forragens contaminadas. Nesse caso, o complexo primrio localizarse- nos rgos digestivos e linfonodos regionais.
Em estbulos, ao abrigo da luz, o M. bovis tem condies de
sobreviver por vrios meses. Alguns fatores podem contribuir para
que a enfermidade se propague com maior eficincia. Entre eles,
destacam-se de modo especial a aglomerao dos animais em
estbulos e a inadequao das instalaes zootcnicas. Ambos os
54

fatores podem ampliar a sobrevivncia da bactria no ambiente e

propiciar o contato estreito e freqente entre os animais infectados
e suscetveis.
Raramente vacas com tuberculose genital transmitem a
doena ao feto pela via transplacentria. Pode ocorrer transmisso
sexual nos casos de epididimite e metrite tuberculosa. A infeco
cutnea pode ocorrer por contato com objetos contaminados.
Porm, esses trs ltimos mecanismos de transmisso so pouco
freqentes.
A infeco pelo M. bovis se propaga nos animais
independentemente do sexo, da raa ou da idade. A introduo e
a manuteno da doena em um rebanho so fortemente
influenciadas por caractersticas da unidade de criao, entre as
quais se destacam o tipo de explorao, o tamanho do rebanho, a
densidade populacional e as prticas zootcnicas e sanitrias.
Observa-se que a doena mais freqente em rebanhos leiteiros
do que em rebanhos de corte. Contudo, quando bovinos de corte
e bubalinos so mantidos em confinamento ou submetidos a
condies naturais de aglomerao em torno de bebedouros
durante a seca ou nas partes mais altas das pastagens durante as
enchentes ficam submetidos s mesmas condies de risco.
Constituem prticas comuns que podem introduzir a doena no
rebanho tanto a alimentao de bezerros com leite de vacas
tuberculosas quanto a aquisio de receptoras de embrio sem
controle sanitrio.

Patogenia
Aproximadamente 90% das infeces pelo M. bovis em
bovinos e bubalinos ocorrem pela via respiratria por meio da
inalao de aerossis contaminados com o microorganismo. Uma
vez atingido o alvolo, o bacilo capturado por macrfagos, sendo
o seu destino determinado pelos seguintes fatores: virulncia do
microorganismo, carga infectante e resistncia do hospedeiro.
55

Na fase seguinte, caso no sejam eliminados, os bacilos multiplicarse-o dentro dos macrfagos at destru-los. Os bacilos liberados
pelos macrfagos infectados sero fagocitados por outros
macrfagos alveolares ou por moncitos recm-chegados da
corrente circulatria, atrados pelos prprios bacilos liberados, ou
por fatores quimiotticos produzidos pelo hospedeiro. A terceira
fase comea quando cessa essa multiplicao, cerca de 2 a 3
semanas aps a inalao do agente infeccioso, e caracterizada
por resposta imune mediada por clulas e reao de hipersensibilidade retardada. Nessa fase, em decorrncia da reao de
hipersensibilidade retardada, o hospedeiro destri seus prprios
tecidos por meio da necrose de caseificao para conter o
crescimento intracelular das micobactrias. Com a mediao dos
linfcitos T, ocorre a migrao de novas clulas de defesa, culminando com a formao dos granulomas. Tais granulomas so
constitudos por uma parte central, por vezes com rea de necrose
de caseificao, circundada por clulas epiteliides, clulas gigantes,
linfcitos, macrfagos e uma camada perifrica de fibroblastos.
Os bacilos da leso tuberculosa do parnquima pulmonar propagam-se ao linfonodo satlite, no qual desencadeiam a formao
de novo granuloma, constituindo, assim, o complexo primrio.
As leses pulmonares tm incio na juno bronquoloalveolar com disseminao para os alvolos e linfonodos brnquicos,
podendo regredir, persistir estabilizadas ou progredir. A
disseminao da infeco para outros rgos pode ocorrer
precocemente durante o desenvolvimento da doena, ou numa
fase tardia, provavelmente em funo de uma queda na imunidade
do animal. A generalizao da infeco pode assumir duas formas:
1) miliar, quando ocorre de maneira abrupta e macia, com entrada
de um grande nmero de bacilos na circulao; 2) protrada, mais
comum, que se d por via linftica ou sangunea, acometendo o
prprio pulmo, linfonodos, fgado, bao, bere, ossos, rins, sistema
nervoso central, disseminando-se por, praticamente, todos os
tecidos.
56

As leses macroscpicas tm, em geral, colorao amarelada

em bovinos, e ligeiramente esbranquiadas em bfalos; apresentamse na forma de ndulos de 1 a 3 cm de dimetro, ou mais, que
podem ser confluentes, de aspecto purulento ou caseoso, com
presena de cpsula fibrosa, podendo apresentar necrose de
caseificao no centro da leso ou, ainda, calcificao nos casos
mais avanados. Embora possam estar presentes em qualquer tecido
do animal, as leses so encontradas com mais freqncia em
linfonodos (mediastnicos, retrofarngeos, bronquiais, parotdeos,
cervicais, inguinais superficiais e mesentricos), em pulmo e fgado.
Sendo uma doena de evoluo muito lenta, os sinais clnicos
so pouco freqentes em bovinos e bubalinos. Em estgios
avanados, e dependendo da localizao das leses, os bovinos
podem apresentar caquexia progressiva, hiperplasia de linfonodos
superficiais e/ou profundos, dispnia, tosse, mastite e infertilidade,
entre outros.

Diagnstico
O diagnstico da tuberculose bovina pode ser efetuado por
mtodos diretos e indiretos. Os diretos envolvem a deteco e
identificao do agente etiolgico no material biolgico. Os
indiretos pesquisam uma resposta imunolgica do hospedeiro ao
agente etiolgico, que pode ser humoral (produo de anticorpos
circulantes) ou celular (mediada por linfcitos e macrfagos).
A tuberculinizao uma medida da imunidade celular contra
M. bovis por uma reao de hipersensibilidade retardada (tipo IV).
A reao tuberculnica, a bacteriologia e a histopatologia
so os mtodos mais utilizados para o diagnstico da tuberculose
bovina e bubalina. A grande inespecificidade dos sinais clnicos, a
dificuldade de isolamento do M. bovis do animal vivo e o baixo
nvel de anticorpos durante o perodo inicial de infeco fazem
com que os diagnsticos clnico, bacteriolgico e sorolgico tenham
um valor relativo.
57

O diagnstico clnico, associado tuberculinizao, possibilita

a identificao de animais com tuberculose avanada, os quais
geralmente apresentam um decrscimo da sensibilizao alrgica,
podendo, por vezes, chegar anergia. Pode-se afirmar que existem
mtodos diagnsticos adequados para o desenvolvimento de
programas de controle e erradicao da tuberculose bovina;
entretanto, no existe um mtodo diagnstico da tuberculose
bovina que tenha uma eficcia absoluta. A prova tuberculnica, a
vigilncia epidemiolgica em matadouros, os controles sanitrios,
o diagnstico de laboratrio, so todos elementos bsicos que
devem ser empregados com critrio e de modo adequado a cada
situao epidemiolgica. Independentemente dos mtodos de
diagnstico utilizados, fundamental que os animais positivos sejam
abatidos, evitando-se, assim, a disseminao da tuberculose.

Diagnstico Clnico
Possui valor relativo, porque o animal pode estar infectado
com um foco localizado e apresentar-se aparentemente sadio. O
diagnstico clnico torna-se importante para os animais com
tuberculose avanada, para os quais o teste tuberculnico perde
seu valor pela possibilidade do fenmeno da anergia tuberculina.
Os sinais clnicos mais freqentes so a caquexia progressiva e a
tosse seca, curta e repetitiva. Animais tuberculosos, quando
submetidos marcha forada, tendem a posicionar-se atrs dos
demais, demonstrando cansao e baixa capacidade respiratria.
Pode ocorrer linfadenomegalia localizada ou generalizada.

Diagnstico Anatomopatolgico
A inspeo de carcaa ou a necropsia detalhada constituem
importantes ferramentas no diagnstico da tuberculose bovina.
As leses provocadas pelo M. bovis no so patognomnicas
da tuberculose bovina. Apresentam colorao amarelada em
bovinos, e ligeiramente esbranquiadas em bfalos. So ndulos
de 1 a 3 cm de dimetro ou mais, que podem ser confluentes, de
58

aspecto purulento ou caseoso, com presena de cpsula fibrosa,

podendo apresentar necrose de caseificao no centro da leso,
ou, ainda, calcificao nos casos mais avanados. Em 70% a 90%
dos casos, as leses encontram-se em linfonodos de cabea e trax,
e 66% dos animais necropsiados apresentam apenas uma nica
leso visvel. Em 95% dos casos, as leses esto localizadas em
linfonodos (mediastnicos, retrofarngeos, bronquiais, parotdeos,
cervicais, inguinais superficiais e mesentricos), pulmo e fgado.
Com menor freqncia, podem estar presentes em intestino e tecido
mamrio, ou em qualquer outro rgo ou tecido do animal.
Animais reagentes ao teste tuberculnico podem no
apresentar leses visveis a olho nu; isso no significa, porm, que
se trata de reao falso-positiva. As leses podem estar em estgios
iniciais de evoluo, ou simplesmente no terem sido encontradas
pela necropsia.
Fragmentos de tecido com leses sugestivas de tuberculose
(ndulos caseosos em linfonodos, pulmo, fgado, etc.) podem ser
enviados para exame histopatolgico em frasco de boca larga
(plstico ou vidro), hermeticamente fechado, imersos em soluo
de formaldedo a 10%, observando-se a proporo de uma parte
de amostra para 10 de formaldedo.

Diagnstico Bacteriolgico
O diagnstico definitivo da tuberculose realizado mediante
o isolamento e a identificao do agente por mtodos bacteriolgicos.
Amostras frescas podem ser fixadas em lmina e coradas pelo
mtodo de Ziehl-Neelsen para a pesquisa de bacilos lcool cido
resistentes (BAAR), contudo, a sensibilidade do mtodo baixa, e
um resultado positivo sugere fortemente tratar-se de micobactria,
mas no informa a espcie. Essa mesma colorao pode ser
empregada para colnias isoladas em meios de cultura. Muitas
caractersticas, inclusive a propriedade tintorial, superpem-se nos
gneros Mycobacterium e Nocardia, tornando difcil, em alguns
casos, a diferenciao entre ambos.
59

O diagnstico bacteriolgico por isolamento requer um longo

perodo de incubao (30 a 90 dias), pois o M. bovis cresce
lentamente em meios de cultura artificiais. Para permitir o
isolamento de qualquer bactria do gnero Mycobacterium sp,
recomenda-se a semeadura concomitante nos meios de cultura
Lwenstein-Jensen e Stonebrink-Lesslie.
As anlises bacteriolgicas completas s sero necessrias
nas seguintes situaes:
confirmao da presena de infeco tuberculosa em
bovinos de um pas ou regio onde no foi comprovada
anteriormente;
estudo de animais positivos ao teste tuberculnico, nos
quais no se observaram leses macroscpicas sugestivas
de tuberculose. Nesses casos, a pesquisa bacteriolgica
ser feita especialmente em amostras de linfonodos do
trato respiratrio e intestinal;
confirmao da presena de infeco em animais positivos
ao teste tuberculnico, com ou sem leses macroscpicas,
de uma propriedade considerada livre de tuberculose;
pesquisa de micobactrias em leses sugestivas de
tuberculose, encontradas durante a inspeo sanitria
post-mortem de animais provenientes de unidades de
criao monitoradas para tuberculose;
pesquisa de micobactrias em amostras de leite e de outros
produtos de origem animal;
necropsias de animais com reaes inespecficas, nos quais
so encontradas leses sugestivas de tuberculose.

Diagnstico Alrgico-cutneo
O diagnstico alrgico-cutneo com tuberculina o
instrumento bsico para programas de controle e erradicao da
tuberculose bovina em todo o mundo. Pode revelar infeces
incipientes a partir de 3 a 8 semanas da exposio ao
Mycobacterium, alcanando boa sensibilidade e especificidade e
60

sendo considerado pela OIE como tcnica de referncia. Para que

realmente funcione como ferramenta diagnstica em um programa
de controle, indispensvel que o procedimento seja padronizado
quanto produo das tuberculinas, equipamentos para realizao
das provas, tipos de provas e critrios de leitura.
Tuberculinas
A tuberculina pode ser definida como um extrato obtido de
filtrados de cultivos de Mycobacterium sp previamente esterilizados
pelo calor, para ser utilizado com o propsito de medir a hipersensibilidade retardada causada pela infeco por micobactrias. A
tuberculina preparada pela primeira vez por Robert Koch, em
1890 atualmente denominada tuberculina velha (OT-Old
tuberculin).
Em 1934, Seibert desenvolveu a tuberculina conhecida como
PPD (Purified Protein Derivative), em que as protenas so separadas
do meio de cultura por precipitao, purificadas por lavagens com
cidos e fosfatos e diludas na concentrao adequada para uso.
No Brasil, a prova tuberculnica realizada com o PPD bovino,
produzido a partir da amostra AN5 de M. bovis, contendo 1 mg
de protena por mL (32.500 UI). No teste cervical comparativo,
utiliza-se tambm o PPD avirio, produzido a partir da amostra D4
de M. avium, contendo 0,5 mg de protena por mL (25.000 UI).
As tuberculinas devem ser mantidas sob a temperatura de 2 a 8 C
(no congelar) e tm validade de um ano aps a data de fabricao.
Os frascos precisam ser protegidos da luz solar direta durante os
trabalhos de campo. Uma vez aberto um frasco de tuberculina, seu
contedo deve ser utilizado num nico dia, descartando-se eventuais
sobras. O PPD bovino apresenta-se sob a forma lquida incolor e o
PPD avirio, sob a forma lquida com colorao vermelho claro.
Mecanismos da Reao Alrgica Tuberculina
Alergia significa uma reao anormal e especfica do
organismo aps sensibilizao por uma substncia estranha.
61

A reao alrgica tuberculina ocorre de vrias maneiras: aps

infeco por micobactrias, administrao parenteral de protenas
micobacterianas, inoculao de micobactrias inativadas ou vacina
BCG. Na prtica, a alergia tuberculnica indica que o organismo
est infectado por bacilos virulentos, atenuados, inativados, vacinais
ou ambientais, no significando que tenha imunidade contra a
tuberculose, nem indicando o rgo ou local da infeco ou
extenso das leses.
A reao mediada por clulas e classificada como reao
de hipersensibilidade retardada do tipo IV. Quando se injeta a
tuberculina na pele de um animal normal, no ocorre nenhuma
resposta significativa. Mas, ao injet-la em um animal infectado
por micobactrias, portanto, sensibilizado para a tuberculina,
ocorrer uma resposta de hipersensibilidade retardada com
endurecimento e edema progressivo no local da inoculao, que
atinge seu mximo s 72 horas, com uma variao de at 6 horas
para mais ou para menos. Aps esse tempo, a reao tende a
diminuir lentamente. A intensidade da reao cutnea pode ser
quantificada pela mensurao do tamanho do endurecimento ou
do engrossamento da pele. A reao tuberculina pode evoluir
para uma necrose central, algumas vezes acompanhada por vescula
e endurao caractersticas de uma hipersensibilidade intensa.
Aps a inoculao, a tuberculina fagocitada e processada,
e seus peptdeos so apresentados no complexo principal de
histocompatibilidade (MHC) do tipo II na superfcie celular de
macrfagos. A resposta especfica inicia-se quando linfcitos T
sensibilizados reconhecem, ento, os antgenos tuberculnicos e
secretam citocinas, entre elas o interferon gama. Algumas dessas
citocinas ativam clulas endoteliais venulares que recrutam
moncitos e outros leuccitos do sangue; outras convertem os
moncitos em macrfagos ativados capazes de eliminar o antgeno.
As clulas T envolvidas na reao de hipersensibilidade retardada
so, em geral, do tipo CD4+ Th1.
62

H bovinos que, embora infectados, no reagem

tuberculinizao devido a uma deficincia temporria do sistema
imunitrio, induzida por inoculaes sucessivas de tuberculina ou
aplicao de altas concentraes do antgeno, denominada
dessensibilizao. um fenmeno de curta durao e cessa quando
a populao de linfcitos T restabelecida. Reaes falso-negativas
tambm podem ocorrer em tuberculinizaes prximas ao parto
ou em animais com alimentao deficiente. Em animais com
tuberculose generalizada, ou em estgios finais da doena, h um
excesso de antgeno circulante que induz uma imunossupresso
especfica e, por conseqncia, uma inibio da produo de
citocinas necessrias ativao de macrfagos participantes da
reao de hipersensibilidade retardada. Trata-se do fenmeno de
anergia referido em pginas anteriores.
Equipamentos para os Testes de Tuberculinizao
A qualidade da prova tuberculnica conseqncia direta da
escolha dos instrumentos para realiz-la. Devem ser adotados os
equipamentos desenvolvidos especificamente para essa finalidade.
A seringa com dosador automtico de 0,1 mL indispensvel e
pode ser acompanhada por cinto e bainha, acessrios bastante
teis que permitem prescindir de auxlio para as tarefas de tricotomia
e mensurao. As agulhas devem ser pequenas (3 a 4 mm) e finas
(< 26 G). Seringas e agulhas precisam estar limpas e esterilizadas
antes do uso. importante que agulhas e seringas estejam livres
de desinfetantes e anti-spticos. Uma pequena quantidade de
vaselina lquida suficiente para a lubrificao do mbolo. O
cutmetro equipado com cabo facilita o manuseio do instrumento,
e a mola fornece presso regular nas medidas. A ponta do cutmetro
mais larga evita aprofundamento indevido, principalmente em
medidas de reaes edematosas. Os locais de inoculao no bovino
devem ter o plo raspado com lmina de barbear simples ou
mquina de tosquiar.
63

Mtodos de Turberculinizao
Para o diagnstico de rotina da tuberculose bovina, a
tuberculinizao um mtodo rpido, seguro e econmico e serve
para pesquisar a sensibilidade dos animais s tubrculo-protenas
especficas. O mtodo preconizado o intradrmico nas suas trs
modalidades, ou seja, prega caudal, cervical simples e comparativo.
O teste da prega caudal o mtodo de execuo mais simples
e prtico e, portanto, quando h necessidade da realizao de um
teste de triagem, a escolha natural. importante lembrar que,
pela legislao, esse teste admitido para utilizao de rotina,
exclusivamente em estabelecimentos de criao especializados na
pecuria de corte.
Considera-se que a sensibilidade do teste cervical simples
maior do que a do teste da prega da cauda. Alm disso, menos
subjetivo, pois o resultado advm da tomada de medidas com o
cutmetro.
O teste cervical comparativo, com PPD bovino e avirio
aplicados simultaneamente, deve ser utilizado como teste
confirmatrio, por sua maior especificidade em relao aos testes
simples. Esse teste permite eliminar a maior causa de reaes falsopositivas, que so as infeces por micobactrias ambientais. Esse
deve ser o teste de eleio para rebanhos com alta freqncia de
reaes inespecficas, evitando-se os prejuzos decorrentes da
eliminao de animais falso-positivos.
Cuidados na Tuberculinizao de Rebanhos
A realizao de testes tuberculnicos em rebanho requer os
seguintes cuidados especiais:
as tuberculinas precisam ser mantidas sob refrigerao
(2 a 8 C), evitando-se o seu congelamento;
os animais a serem tuberculinizados devero estar
devidamente contidos e identificados;
a inoculao intradrmica da tuberculina s perfeita
quando h formao de uma ppula;
64

 animais infectados h menos de 40 dias podem no

responder aos testes tuberculnicos;
novo teste tuberculnico s dever ser realizado aps um
perodo mnimo de 60 dias;
a intensidade da reao alrgica tuberculina no proporcional evoluo da doena no organismo do animal;
um nico teste tuberculnico no garante ausncia de
infeco;
a observao cuidadosa do rebanho, de preferncia aps
movimentao, pode permitir a individualizao de animais
com os seguintes sintomas: tosse crnica, dificuldade
respiratria, problemas digestivos e timpanismo,
claudicao; sinais clnicos que podem estar presentes em
animais anrgicos tuberculinizao;
na anamnese de rebanhos infectados deve ser levada em
considerao a possvel existncia de portadores da infeco
entre os tratadores, os gatos e ces da propriedade;
os animais reagentes tm que ser isolados e sacrificados
ou destrudos;
os funcionrios da propriedade precisam ser submetidos
periodicamente a exames mdicos;
em rebanho com tuberculose, as pessoas que lidam com
os animais devem ser encaminhadas para exame mdico;
as fmeas que estiverem no perodo compreendido entre
15 dias antes e 15 dias depois do parto, no devem ser
submetidas ao teste tuberculnico, pois podem apresentarse menos reativas nesse perodo.

Novos Mtodos de Diagnstico da

Tuberculose Bovina
Nos ltimos anos, os avanos da biologia molecular e a
evoluo dos conhecimentos sobre a imunidade contra as
micobactrias levaram ao aparecimento de novos mtodos diretos
e indiretos para o diagnstico da tuberculose bovina.
65

Dentro dos mtodos indiretos surgiram novos testes

sorolgicos, que visam detectar alteraes dos componentes sricos
na resposta infeco pelo M. bovis, e mtodos de avaliao
in vitro da resposta imunolgica celular contra o M. bovis.
O desenvolvimento de um mtodo para a deteco de
interferon gama aps estimulao do sangue total com PPD
mostrou-se muito til e especfico para detectar animais
tuberculosos, e vem sendo empregado como teste complementar
da tuberculinizao em alguns pases, como Austrlia e Nova
Zelndia.
Os mtodos diretos passaram por uma verdadeira revoluo
em virtude do desenvolvimento do mtodo molecular denominado
reao da polimerase em cadeia (PCR), que tem como princpio
bsico a deteco de um fragmento de DNA especfico do gnero
ou ento do complexo M. tuberculosis. Mtodos de biologia
molecular esto sendo desenvolvidos para detectar diretamente o
agente em amostras clnicas, para identificar o agente isolado pelos
mtodos clssicos de bacteriologia e para avaliar a variao gentica
dentro de uma espcie de micobactria.
As tcnicas moleculares j encontram alguma aplicao
prtica dentro dos programas de controle e erradicao da
tuberculose bovina, sendo utilizadas de forma complementar aos
procedimentos bacteriolgicos clssicos.
Quanto aos mtodos indiretos, nenhum novo mtodo
apresentou desempenho que justificasse a substituio dos testes
tuberculnicos padres.

Controle da Tuberculose
O controle da tuberculose fundamenta-se no bloqueio de
pontos crticos da cadeia de transmisso da doena.
O primeiro passo a ser dado em uma unidade de criao
conhecer a situao sanitria do rebanho. A identificao das fontes
de infeco feita por meio da implementao de uma rotina de
66

testes tuberculnicos com abate dos animais reagentes. O exame

clnico pode ser til nos casos de anergia. Na compra de animais,
antes da introduo no rebanho, deve-se test-los na origem e
test-los de novo logo aps a entrada no quarentenrio da unidade
de criao, respeitando-se o intervalo mnimo de 60 dias entre os
testes. Adotar como regra a aquisio de animais de propriedades
livres da doena. O risco de infeco menor em rebanhos fechados.
importante que a sade dos trabalhadores da propriedade
seja rotineiramente monitorada. Aes sobre possveis
reservatrios domsticos, sinantrpicos ou silvestres devem ser
consideradas.
Instalaes adequadas, que permitem boa ventilao e exposio direta luz solar, contribuem para prevenir a contaminao
do ambiente. Recomenda-se higienizar e desinfetar periodicamente
todas as instalaes, especialmente os bebedouros e os cochos
(hipoclorito de sdio 5%, fenol 5%, formaldedo 3%, cresol 5%).
Deve-se abolir a utilizao do leite de vacas reagentes para
qualquer finalidade, e em quaisquer circunstncias.
Constituem medidas importantes o monitoramento dos
rebanhos pela deteco de leses tuberculosas realizado pelo
servio de inspeo de carcaas quando do abate dos animais , e
o controle de trnsito e de participao em exposies, feiras e
leiles.
A inspeo sanitria dos produtos de origem animal
destinados ao consumo humano e a pasteurizao ou esterilizao
do leite e derivados diminuem os riscos de transmisso do M. bovis
ao homem.
Apesar de diversos estudos sobre vacinao e tratamento da
tuberculose bovina, at o presente, os resultados obtidos no
justificam a adoo dessas medidas como forma de controle da
enfermidade. Alm disso, em pases que alcanaram grande sucesso
com programas implementados para o combate tuberculose
bovina, essas prticas no foram utilizadas; e, portanto, no esto
contempladas na estratgia de ao do PNCEBT.
67

Tuberculose Humana de Origem Bovina

Bovinos infectados podem ser responsveis por parte dos
casos de tuberculose humana causada pelo M. bovis, principalmente
em reas de alta prevalncia de infeco e onde no existe controle
sanitrio dos produtos de origem animal. O homem adquire a
doena por meio da ingesto de leite e derivados crus oriundos de
vacas infectadas. O risco maior para crianas, idosos e pessoas
com deficincia imunolgica, nas quais ocorrem principalmente as
formas extrapulmonares. Os tratadores de rebanhos infectados e
os trabalhadores da indstria de carnes constituem os grupos
ocupacionais mais expostos doena. Nesses grupos, a principal
forma clnica observada a pulmonar.
A incidncia da tuberculose humana de origem animal tem
diminudo nos pases onde existem campanhas de combate
tuberculose bovina e a pasteurizao do leite obrigatria.
Atualmente, nos pases anglo-saxnicos, a incidncia da infeco
humana por M. bovis baixa e limitada a um grupo de idade
mais avanada. Na Gr-Bretanha, apesar da reduo da infeco
humana por cepas bovinas, a tuberculose dessa origem continua
ocorrendo.
Convm observar que, no ser humano, o exame clnico e a
baciloscopia do escarro no permitem a diferenciao entre a
infeco pelo M. bovis e M. tuberculosis. Essa distino s possvel
pelo isolamento e pela identificao do agente.

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71

72

Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento

PROPRIEDADES DOS TESTES DE DIAGNSTICO

E IMPLICAES NO DELINEAMENTO
DE ESTRATGIAS SANITRIAS

O Caso dos Programas de Controle

da Brucelose e da Tuberculose
Os planos de combate tuberculose e brucelose envolvem
aes de profilaxia sanitria que dependem da utilizao de testes
para diagnstico indireto. Entre elas destacam-se:
deteco de rebanhos infectados mediante realizao de
testes peridicos;
saneamento de rebanhos infectados, com a realizao de
testes sistemticos e sacrifcio dos animais reagentes;
proteo de rebanhos no infectados, comprovando a
condio sanitria de animais que ingressam no plantel
indene, por meio de testes de diagnstico realizados na
origem e durante a quarentena no destino;
comprovao da condio de rebanho ou de zona livre,
mediante a realizao de testes peridicos.
Assim, o controle e a erradicao dessas doenas dependem
em grande medida da correta utilizao e interpretao de testes
diagnsticos. Como esses testes nunca so perfeitos, torna-se
necessrio avaliar a probabilidade de acerto do diagnstico.
O desempenho de um teste pode ser avaliado por
caractersticas intrnsecas, como sensibilidade e especificidade, e
por caractersticas extrnsecas, como os valores preditivos positivo
e negativo.

73

O quadro abaixo mostra um exemplo hipottico de aplicao

de um teste diagnstico.
INFECO
Infectado No Infectado
TESTE

Total

Positivo (+)

45 (a)

38 (b)

83

Negativo ()

5 (c)

912 (d)

917

50

950

1000 (N)

Total

Sensibilidade (SEN) a probabilidade de um animal infectado

ser classificado como positivo pelo teste de diagnstico. Testes de
baixa sensibilidade resultam em maior nmero de animais falsonegativos. Considerando o exemplo que se apresenta no quadro
acima, teramos SEN = [a/(a+c)] = 45/50 = 0,90 ou 90%, ou seja,
a cada 100 animais infectados, o teste classificaria 90 como positivos
e 10 como negativos (falso-negativos).
Especificidade (ESP) a probabilidade de um animal no
infectado ter resultado negativo no teste de diagnstico. Testes de
baixa especificidade resultam em maior nmero de falso-positivos.
Nesse caso, teramos ESP = [d/(b+d)] = 912/950 = 0,96 ou 96%,
isto , a cada 100 animais no infectados, o teste classificaria 96
como negativos e 4 como positivos (falso-positivos).
Nos testes indiretos quantitativos, existe sempre um ponto de
corte, ou seja, um determinado ttulo de anticorpos (na brucelose)
ou um aumento da espessura da dobra da pele na reao cutnea
de hipersensibilidade retardada (na tuberculose), a partir do qual o
teste considerado positivo. Os valores de SEN e ESP de um
determinado teste dependem do ponto de corte e esto inversamente
relacionados. Se o ponto de corte do teste diagnstico for modificado
para aumentar a sensibilidade, a especificidade diminuir. De maneira
inversa, se o ponto de corte do teste diagnstico for modificado
para elevar a especificidade, haver perda de sensibilidade.
Em situaes reais, o verdadeiro estado sanitrio do animal
(isto , infectado ou no) no conhecido; conhecido apenas o
74

resultado do teste. Por essa razo, importante saber a proporo

de animais com resultado positivo que realmente esto infectados
valor preditivo positivo (VPP) e a proporo de animais com
resultado negativo que no esto infectados, valor preditivo negativo
(VPN).
Nesse caso, teramos VPP = [a/(a+b)] = 45/83 = 0,54 =
54%, ou seja, a cada 100 animais positivos no teste, 54 esto
realmente infectados. Estes valores so indicativos da confiana
que temos de que um resultado negativo corresponde a um animal
no infectado (VPN) e de que um resultado positivo de um animal
infectado (VPP). O VPN seria igual a [d/(c+d)] = 912/917 = 0,995
ou 99,5%, o que significa que 99,5% dos animais negativos no
esto infectados.
Os valores preditivos so determinados pelos valores de SEN
e ESP do teste utilizado e pela prevalncia da doena na populao
submetida ao diagnstico, ou seja, variam em funo da situao
epidemiolgica, como ilustra o exemplo da Figura 1.
Figura 1 Efeito da variao de prevalncia (PREV), entre 1% e 100%,
sobre os valores preditivos positivo (VPP) e negativo (VPN)
de um teste de diagnstico com sensibilidade (SEN) de 80%
e especificidade (ESP) de 99%

75

Quando a prevalncia da enfermidade inferior a 10%, o

VPN de um teste de sensibilidade apenas moderada (80%) muito
alto e tende a aumentar medida que a prevalncia da doena
diminui. O VPP segue trajetria inversa, sendo muito baixo quando
a prevalncia inferior a 10%, diminuindo ainda mais medida
que a prevalncia da doena tambm diminui. Em conseqncia,
num programa de erradicao baseado em teste e sacrifcio de
animais, a proporo de animais com reaes falso-positivas que
so sacrificados aumenta medida que a campanha avana e a
prevalncia da enfermidade diminui. Portanto, quando a prevalncia
da doena diminui, cresce a necessidade de diminuir a proporo
de reaes falso-positivas, o que conseguido por meio de ganhos
em especificidade dos mtodos diagnsticos. A interao da
especificidade do teste com a prevalncia da doena na
determinao do VPP ilustrada na Figura 2.
Figura 2 Efeito de diferentes valores de especificidade (ESP), entre
80,0% e 99,9%, sobre o valor preditivo positivo (VPP) de
vrios testes diagnsticos, assumindo que todos teriam
sensibilidade (SEN) de 80%, para valores de prevalncia
(PREV) entre 1% e 100%

76

A proporo de falso-positivos bastante influenciada pela

especificidade do teste utilizado, qualquer que seja a prevalncia
da doena (Figura 2). Para valores de prevalncia muito baixos,
mesmo um teste de boa especificidade (99%) resulta em alta
proporo de falso-positivos. Assim sendo, quando o diagnstico
feito em populaes de baixa prevalncia, deve ser utilizado um teste
de especificidade prxima a 100%. Se no houver um nico teste
com essa caracterstica, podero ser empregados dois testes em
seqncia; o primeiro teste, ou de triagem, serve para detectar
animais reagentes, os quais so submetidos a novo teste para
diagnstico confirmatrio. O teste de triagem precisa ter boa
sensibilidade, ser barato e de fcil execuo. O teste confirmatrio
deve ter especificidade muito alta e tambm boa sensibilidade.
A realizao de testes em seqncia, quando se faz o teste
confirmatrio nos indivduos reagentes ao teste de triagem,
aumenta a especificidade do procedimento diagnstico e diminui
o nmero de falso-positivos.
Com esse objetivo, no controle da brucelose, utiliza-se o teste
do Antgeno Acidificado Tamponado como teste de triagem,
seguido de teste confirmatrio (2-Mercaptoetanol ou Fixao de
Complemento) nos animais reagentes. No controle da tuberculose,
o Teste na Prega Ano-caudal, com PPD bovina, pode ser utilizado
para triagem, seguido de Tuberculinizao Comparativa, com PPD
bovino e avirio, nos animais reagentes.
Uma vez confirmada a condio de foco de um rebanho,
necessrio eliminar todos os animais infectados. A experincia
mostra que esse processo mais difcil em rebanhos grandes do
que em rebanhos pequenos, dado que, quanto maior for o nmero
de animais infectados, maior ser o risco de no detectar todos
eles com apenas um teste. Por exemplo: com uma SEN individual
de 95% (muito boa), esse risco ser de 5% se houver apenas um
animal infectado; de 10% se houver dois animais infectados e de
40% se houver 10 animais infectados. Tal evidncia fundamentou
a deciso de alguns pases, como os EUA, de sacrificar todos os
77

animais quando uma grande parte do rebanho estivesse infectada.

Uma alternativa menos radical consiste em realizar testes
sistemticos em todo o rebanho, com intervalos peridicos, at
que no exista mais nenhum animal positivo. O saneamento ser
mais rpido e eficaz se forem utilizados testes de boa sensibilidade,
repetidos ao longo do tempo.
Em programas de erradicao da tuberculose bovina, quando
a prevalncia da enfermidade e o VPP so muito baixos, a vigilncia
epidemiolgica em locais de abate assume papel mais importante
do que o teste sistemtico de animais na propriedade. Em alguns
pases que atingiram prevalncia muito baixa (EUA, Austrlia e
Uruguai), a vigilncia nos matadouros foi o principal meio de
deteco de novos casos de tuberculose. Quando se descobre um
caso de tuberculose na inspeo de carnes, o servio de defesa
sanitria animal realiza uma investigao na propriedade de origem
do animal afetado. Trata-se de uma estratgia que tem sido bem
sucedida. Todavia, alguns aspectos devem ser realados:
1) quando a prevalncia baixa, o VPP da inspeo visual
igualmente baixo (muitas leses no so tuberculosas) e, portanto,
as leses devem ser enviadas para exame histopatolgico e/ou
microbiolgico;
2) a SEN da inspeo de rotina baixa (de acordo com alguns
autores, varia entre 33% e 67%), uma vez que muitos animais tm
apenas uma nica leso, de difcil deteco;
3) a vigilncia epidemiolgica em matadouros s pode
substituir o teste de tuberculinizao sistemtica quando todos os
animais da populao sob vigilncia so abatidos em
estabelecimentos com inspeo veterinria.

78

Concluso
O combate s doenas dos animais exige que os veterinrios
que dele participam saibam interpretar os resultados dos testes de
triagem e/ou confirmatrios, em funo do contexto epidemiolgico
e dos objetivos do diagnstico. No existem testes perfeitos, e o
diagnstico ter sempre uma margem de erro. O bom
conhecimento das propriedades dos testes permite aumentar a
probabilidade de acerto e melhorar a eficcia das aes sanitrias.
No existem receitas aplicveis a qualquer situao nem testes
infalveis; existem, sim, princpios epidemiolgicos que no s devem
ser compreendidos, como tambm adaptados a situaes diversas.

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80

Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento

COLHEITA DE MATERIAL
PARA EXAME LABORATORIAL

Convm salientar que manipular materiais infectados, ou

potencialmente infectados, com Brucella sp. e M. bovis perigoso,
exigindo cuidados especiais, uma vez que a sua manipulao
uma das importantes formas de transmisso da brucelose e
tuberculose ao ser humano.
Equipamentos de proteo individual, como culos de
segurana, aventais de manga longa, luvas descartveis e mscaras
com filtros P-2 ou P-3, devem ser usados ao manipular material
suspeito de conter Brucella abortus ou Mycobacterium bovis.
imprescindvel que todo material a ser colhido seja
devidamente identificado e acondicionado, devendo ser conduzido
ao laboratrio acompanhado de uma ficha completa contendo o
histrico do caso e o maior nmero possvel de informaes
referentes a ele. Sero empregados recipientes resistentes e prova
de vazamentos. O material utilizado na colheita deve ser
desinfectado ou destrudo.

Exame Direto (bacteriolgico)

O sucesso no cultivo bacteriolgico de amostras de campo
depende de uma srie de fatores. A forma de colheita, o tipo de
pea anatmica, a quantidade de material colhido, o
acondicionamento, o transporte, o tempo aps colheita e o tempo
de estocagem constituem alguns dos fatores que interferem
significativamente no resultado do diagnstico laboratorial. Os
materiais devem ser resfriados imediatamente aps a colheita ou
congelados, se demorarem mais de 12 horas em trnsito. Ao chegar
81

ao laboratrio, devem ser congelados ou mantidos congelados se

no forem processados logo em seguida.
Os materiais precisam ser acondicionados em frascos ou em
sacos plsticos prova de vazamentos e de tamanho apropriado,
de modo a evitar excesso de ar, o que prejudica a refrigerao. Em
lugar de frascos rgidos, devem ser preferidos sacos plsticos estreis
do tipo whirl-pak, que se adaptam ao tamanho e forma dos
rgos coletados.
As peas (fragmentos de linfonodos ou rgos) podem ser
encaminhadas dentro de frascos de boca larga no estreis; que
devem, porm, estar limpos e secos, sem resduos (por exemplo:
sangue, fezes e outros), no ultrapassando mais da metade do
recipiente de envase. As amostras, dentro dos recipientes, devem
ser acondicionadas em sacos de polietileno (plsticos) transparentes
e resistentes. Amostras de animais diferentes devero ser
acondicionadas em separado e devidamente identificadas. Podem
ser utilizados frascos coletores universais.

Tuberculose
Em geral, as amostras de origem animal remetidas ao
laboratrio para diagnstico de tuberculose so linfonodos ou
partes de rgos/tecidos procedentes de matadouro sob inspeo
sanitria. So tambm provenientes de necropsias realizadas no
estabelecimento de criao por um mdico veterinrio.
Para avaliar melhor as leses dos rgos e/ou dos tecidos,
devem ser efetuados cortes durante a inspeo ou necropsia. Devem
ser colhidos preferencialmente linfonodos do trato respiratrio:
mediastinais (anteriores, posteriores e ventrais), bronquiais
(esquerdo, direito, dorsal ou mdio) e pulmonares. Observar a pleura
e o tecido pulmonar por palpao, a fim de constatar reas com
leses nodulares. Observar presena de leses tuberculosas nos
linfonodos mesentricos e leses hepticas. Deve-se inspecionar
ainda os linfonodos da cabea e os cervicais.
82

De preferncia, colher os fragmentos logo aps a morte do

animal. Retirar somente a leso de aspecto caseoso, evitando
resduos como, por exemplo, sangue e outros lquidos. importante
colher parte do tecido lesado e parte do tecido normal de uma
mesma pea, perfazendo um total de at 200 gramas. Enviar
tambm parte do material em soluo de formol a 10% para exames
histopatolgicos.

Brucelose
O material ideal para o isolamento de Brucella sp o
proveniente do aborto. Entre os materiais de eleio destacam-se:
Feto e anexos fetais
O feto pode ser enviado inteiro, acondicionado em sacos
plsticos duplos prova de vazamentos. Se for mediante necropsia
efetuada no prprio estabelecimento, colhe-se lquido do abomaso,
pulmo, linfonodo bronquial, bao, fgado e suabe retal. No caso
de membranas fetais, escolher aqueles cotildones que apresentem
aspecto anormal, com perda da cor e do brilho caracterstico; eles
devero ser cuidadosamente manipulados (usar luvas e mscaras
especiais com pelo menos 95% de eficincia) em funo da alta
concentrao de bactrias presentes.
Exsudato vaginal
A eliminao de B. abortus pode durar vrias semanas aps
o parto ou o aborto. O exsudato vaginal deve ser colhido mediante
o uso de suabes especiais ou pipetas de inseminao. Existem suabes
comerciais com meio de transporte que mantm as bactrias viveis
por perodos mais prolongados.
Leite
Antes da colheita, o bere precisa ser cuidadosamente lavado
e feita tambm a assepsia dos tetos. Colher em frascos esterilizados
83

cerca de 20 mL de leite de cada teto, desprezando-se os primeiros

jatos. Enviar o quanto antes ao laboratrio sob refrigerao (2 a
8C) ou congelado (-20C), caso permanea mais de 12 horas em
trnsito at o laboratrio, para evitar a proliferao de
contaminantes. Colher primeiro dos tetos que esto afastados do
operador. Fazer a assepsia das mos antes de realizar a colheita em
outro animal.
Animais necropsiados ou colheita em matadouro
Os materiais de escolha so aqueles do sistema retculoendotelial. Os linfonodos mais importantes so os supramamrios,
os parotdeos, os retrofarngeos, os ilacos internos e os prescapulares. Alm deles, o bao, os cotildones, o tero e o bere
so tambm importantes nas fmeas. Nos machos, alm dos
linfonodos citados e do bao, so tambm importantes os testculos,
a prstata, os epiddimos e as vesculas seminais.

Exame Histopatolgico
Para o exame histopatolgico, podem ser remetidas amostras
dos mesmos linfonodos ou rgos indicados na colheita para
diagnstico de brucelose ou tuberculose, com ou sem leso
macroscpica. Fragmentos em torno de 0,5 cm x 1,0 cm x 1,0 cm
devem ser fixados em um volume 50 vezes maior de formol a 10%
e enviados ao laboratrio temperatura ambiente. Esse material
no deve ser congelado ou resfriado.

Exame Indireto (sorolgico)

Sangue
A colheita de sangue para a obteno de soro com o qual
sero realizados os testes para o diagnstico da brucelose, alm de
ser mais simples, oferece menos risco de contgio ao profissional, se
comparada com a colheita de material para o exame bacteriolgico.
84

O material preferencialmente utilizado para colher a amostra

deve ser constitudo de tubos que contm vcuo (sem
anticoagulante) e siliconizados, que facilitam a retrao do cogulo,
com agulhas individuais e descartveis. Tubos e agulhas
convencionais podem tambm ser utilizados; apresentam, porm,
o inconveniente de necessitar de limpeza, de preparao e
distribuio, alm de acrescentarem risco biolgico na manipulao.
As tarefas da colheita exigem o cumprimento de algumas
normas, que podem ser assim resumidas:
a amostra de sangue colhida deve cobrir no mnimo 50%
da capacidade de um tubo de 10 mL;
para se obter um bom soro, os tubos com sangue devem
ser mantidos temperatura ambiente por, no mnimo, 2
ou 3 horas, ao abrigo da luz, at que ocorra a coagulao
sangnea. Aps a separao do cogulo, transferir o soro
para um frasco limpo e seco. No usar frascos ou tubos
midos, porque podem hemolisar o sangue;
os frascos contendo o soro devero ser enviados o quanto
antes ao laboratrio e em horrio de recepo previamente
estabelecido; evita-se, assim, a deteriorao do material.
Caso sejam enviados ao laboratrio em algumas horas,
devero ser refrigerados, ou congelados;
os tubos sero identificados de tal forma que o nmero
corresponda ao especificado na folha de campo;
nas folhas de campo constaro somente os dados
estritamente necessrios, tais como nome do proprietrio,
nmero de animais na propriedade, nmero total de
amostras colhidas, espcie, sexo, situao relativa
vacinao (data da vacinao), e outros dados
considerados de interesse diagnstico.

Leite (para o Teste do Anel em Leite)

A correta colheita da amostra fundamental para a obteno
de resultados confiveis. As amostras para a realizao desse teste
devem ser colhidas de mistura de leite em lato, no mximo de
85

trs lates, ou em tanque, no mximo de um. Misturar o leite para

que o creme no se separe e esteja bem homogneo. Colher o leite
utilizando como conservante o formol a 1%, ou o cloreto de
mercrio a 2%, na proporo de 1 mL de conservante para cada
10 mL de leite. O leite deve ser refrigerado e enviado ao laboratrio.
A prova pode ser influenciada pelos seguintes fatores:
amostra de leite mal homogeneizada, contendo excesso
ou falta de gordura;
agitao excessiva;
aquecimento excessivo. Acima de 45C e durante cinco
minutos, h uma queda acentuada de anticorpos;
excessivo tempo e temperatura de armazenamento.
Amostras armazenadas a 4C, durante at duas semanas,
podem ser usadas para o teste, j que no se produzem
perdas nos ttulos de anticorpos, sucedendo o contrrio
com o aumento de temperatura.
A prova pode apresentar resultados falso-positivos nas
seguintes situaes:
utilizao de leite fresco, ou seja, quando o teste
realizado no mesmo dia da colheita. Em geral, essa
situao desaparece depois da refrigerao do leite;
alterao do leite como conseqncia de mamites que
do origem presena de protenas, clulas e bactrias
no habituais, que dificultam a leitura da prova;
presena de colostro.
A agitao suave do leite no recipiente de colheita
imprescindvel para uma boa homogeneizao da gordura.

86

Identificao e Encaminhamento do
Material de Necropsia
Aps o acondicionamento do material no recipiente de envase,
deve-se identific-lo com uma etiqueta (ver modelo de Etiqueta 1)
e acomod-lo em um saco plstico, evitando o contato direto da
etiqueta com o material refrigerante (o que poderia danific-la,
tornando impossvel a identificao). Uma vez acondicionada e
identificada, a amostra dever ser remetida ao laboratrio o mais
rpido possvel e em recipiente isotrmico (isopor) com gelo
(preferencialmente os reciclveis). Na parte externa do recipiente
isotrmico afixar o endereo do laboratrio (ver modelo de
Etiqueta 2). Caso no seja possvel o envio imediato, a amostra
poder ser congelada e encaminhada posteriormente.
Modelo de Etiqueta 1 Identicao do material de necropsia

A etiqueta dever ser elaborada pelo prprio responsvel pela

colheita, contendo os dados do modelo abaixo:
Origem:
SIF:

Data da colheita

Lacre:
Material enviado:
Responsvel pela colheita:
MAPA/Manual do PNCEBT /2005

87

Modelo de Etiqueta 2 Endereo do laboratrio

(Nome do laboratrio ao qual est sendo enviado o material)

Endereo:
Municpio:

UF:

CEP:
Telefone: ( )

Fax: ( )

E-mail:
MAPA/Manual do PNCEBT /2005

Preenchimento do Formulrio de Encaminhamento

de Amostras para Diagnstico
Os formulrios (ver modelos de Formulrios 1 e 2) devero
ser corretamente preenchidos e encaminhados juntamente com
as amostras. ESSES FORMULRIOS NO DEVERO SER
ACONDICIONADOS NO INTERIOR DO RECIPIENTE ISOTRMICO
EM QUE SE ENCONTRA A AMOSTRA.

88

Modelo de Formulrio 1 Encaminhamento de amostras para

diagnstico de brucelose
ESPAO RESERVADO PARA O LABORATRIO

Condio na recepo: ( ) Congelada

( ) Satisfatria

( ) Resfriada
Data do recebimento:
( ) Insatisfatria Recebido por:

I - DADOS DO REMETENTE
1. Local:
2. Registro:

(este campo destina-se a peas originrias de matadouros

sob Inspeo Federal, Estadual ou Municipal)

3. Endereo:
Rua, Av.:
Complemento:

n
Bairro:

Municpio:
Telefone:
E-mail:

UF:
Fax:

CEP:

II - DADOS DA AMOSTRA
1. Origem do animal (propriedade, proprietrio, localizao, Municpio, Estado):
2. Espcie animal:
3. Raa:
4. Animal vacinado: ( ) Sim

Data:

Sexo:
Idade:
/
/

( ) No
( ) No se sabe
5. Abortos na propriedade: ( ) Sim
( ) No
6. Testes sorolgicos: ( ) Sim
Quando:
/
/
( ) No
( ) No se sabe
7. Resultado da sorologia:
8. Histrico:
9. Destino da carcaa: ( ) condenao total
10.
11.
12.
13.

( ) No se sabe
Quais:

( ) condenao parcial

( ) destruio na propriedade
Pea(s) anatmica(s) enviada(s) ao laboratrio:
N Lacre:
Responsvel pela colheita:
Data da colheita:
/
/

CRMV:

14. Encaminhamento ao laboratrio: ( ) Congelada ( ) Resfriada

Obs:

MAPA/Manual do PNCEBT /2005

89

Modelo Formulrio 2 Encaminhamento de amostras para

diagnstico de tuberculose
ESPAO RESERVADO PARA O LABORATRIO

Condio na recepo: ( ) Congelada

( ) Satisfatria
I - DADOS DO REMETENTE
1. Local:
2. Registro:
3. Endereo:
Rua, Av.:
Complemento:
Municpio:
Telefone:
E-mail:

( ) Resfriada
Data do recebimento:
( ) Insatisfatria Recebido por:

(este campo destina-se a peas originrias de matadouros

sob Inspeo Federal, Estadual ou Municipal)

n
Bairro:
CEP:

UF:
Fax:

II - DADOS DA AMOSTRA
1. Origem do animal (propriedade, proprietrio, localizao, Municpio, Estado):
2. Espcie animal:
Sexo:
3. Raa:
Idade:
4. Animal tuberculinizado: ( ) Sim Data:
/
( ) No
( ) No se sabe
5. O animal foi: ( ) Sacrificado
Data:
( ) Encontrado morto
Data:
( ) Abatido (matadouro) Data:
6. Outras mortes ou casos na propriedade: ( ) Sim
( ) No

Resultado*: (B A):
Interpretao:
Obs: B:
mm A:
/
/
/
/
/
/
Mesma espcie animal?

7. Histrico:
8. Destino da carcaa: ( ) condenao total
( ) condenao parcial
( ) destruio na propriedade
9. Pea(s) anatmica(s) enviada(s) ao laboratrio:
10. N Lacre:
11. Responsvel pela colheita:
CRMV:
12. Data da colheita:
/
/
13. Encaminhamento ao laboratrio: ( ) Congelada ( ) Resfriada
Obs:

MAPA/Manual do PNCEBT /2005

B: diferena em mm aps 72 horas da inoculao da PPD bovina
A: diferena em mm aps 72 horas da inoculao da PPD aviria

90

mm
mm

Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento

PROTOCOLO PARA DIAGNSTICO

DA BRUCELOSE

Diagnstico Sorolgico
O diagnstico sorolgico da brucelose bovina e bubalina ser
feito por mdico veterinrio habilitado, bem como por laboratrios
credenciados.

Antgenos
Devero ser utilizados somente aqueles aprovados e
controlados pelo MAPA. Os antgenos devero ser transportados e
conservados em temperatura de, no mnimo, +2C e de, no
mximo, +8C, bem como protegidos da luz solar direta.

Identificao dos Animais

Os animais sero identificados individualmente, quer por
tatuagem, quer por outra forma, inclusive pelo Registro Genealgico; podero tambm ser identificados pelo mtodo definido
para o programa de rastreabilidade do MAPA.

Testes
Teste do Antgeno Acidificado Tamponado (AAT)
Material
Antgeno para AAT
Soros a testar
Pipetas de Bang
Micropipetador de 30 L ou de volume ajustvel
Ponteiras
Placas com quadrados de 4 cm delimitados
91

 Misturadores de plstico ou de metal

Caixa com luz indireta para leitura
Soro controle positivo
Soro controle negativo
Agitador de placas (opcional)
Precaues na execuo do teste
1) O antgeno, quando no estiver em uso, precisa
permanecer sempre entre 2C e 8C. Em caso de sua utilizao
para realizar um pequeno nmero de testes, dividi-lo em alquotas
e retirar da geladeira apenas a quantidade a ser utilizada a cada
dia, evitando, assim, a perda de sensibilidade pelo constante
resfriamento/aquecimento do antgeno.
2) A temperatura de execuo desejvel ser em torno de
22C 4C, devendo-se evitar temperaturas muito abaixo ou muito
acima desse valor.
3) As placas, os misturadores e as pipetas devem ser limpos
com gua corrente logo aps o uso. Imergi-los em uma soluo de
detergente neutro por duas horas ou, de preferncia, durante a
noite. Em seguida, lav-los em gua corrente e, na seqncia, em
gua destilada. Secar em estufa ou temperatura ambiente.
4) Antes de utilizar os misturadores nos prximos soros a
serem testados, limp-los em gua destilada e enxug-los em papel
toalha.
5) Soros excessivamente hemolisados devem ser desprezados,
porque podem apresentar resultados falso-positivos.
6) Em todos os testes devem ser simultaneamente testados
soros controle positivo e negativo.
Tcnica
1) Equilibrar os soros e o antgeno temperatura ambiente,
por, pelo menos, 30 minutos. Caso os soros estejam congelados, o
perodo de equilbrio temperatura ambiente deve ser maior.
Homogeneizar os soros antes de realizar a prova.
92

2) Preencher os protocolos de prova, identificando a

localizao de cada soro.
3) Ao utilizar o micropipetador de 30 L ou a pipeta de Bang
dotada de uma pra de borracha, ou outro dispositivo de pipetagem
que evite o uso da boca, dispensar 30 L (ou da marca de 0,04 at
0,01 na pipeta de Bang) de soro por rea da placa; depositar essa
quantidade sobre a placa de vidro, encostando nela a ponta da
pipeta em ngulo de 45.
4) Agitar suavemente o antgeno e colocar uma gota (30 L)
ao lado do soro, sem ser nele misturado.
5) Misturar, por meio de misturador simples ou mltiplo, o
soro e o antgeno com movimentos circulares, de modo a obter
um crculo aproximado de 2 cm.
6) Agitar a placa com movimentos oscilatrios, numa
freqncia de, aproximadamente, 30 movimentos por minuto, de
modo a permitir que a mistura soro-antgeno flua lentamente dentro
de cada crculo; a placa deve ser agitada continuamente por 4
minutos.
7) Colocar a placa na caixa de leitura com luz indireta e realizar
a leitura.
8) Anotar os resultados.
9) Desconsiderar as reaes de aglutinao que ocorrerem
aps os 4 minutos.
Interpretao dos resultados
Presena de grumos REAGENTE
Ausncia de grumos NO REAGENTE
Teste do Anel em Leite (TAL)
Material
Antgeno para TAL
Amostras do leite a ser testado
Tubos de 10 mm x 75 mm ou 10 mm x 100 mm
Grade para tubos
93

 Pipetas de 1 mL
Micropipetador calibrado para 30 L
Estufa ou banho-maria a 37C
Precaues na execuo do teste
1) As amostras para realizar o teste devem ser colhidas de
mistura de leite em lato, no mximo de trs lates por amostra,
ou em tanque, sendo no mximo um tanque por amostra. Antes
de colher a amostra, homogeneizar suavemente o leite. Colher o
leite utilizando como conservante o formol a 1%, ou o cloreto de
mercrio a 2%, na proporo de 1 mL de conservante para cada
10 mL de leite. O leite deve ser refrigerado e enviado ao laboratrio.
As amostras podem ser mantidas entre 2C e 8C por at duas
semanas.
2) As amostras de leite devem ser mantidas entre 2C e 8C
por, pelo menos, 24 horas antes da realizao do TAL.
3) Uma amostragem incorreta poder levar a contedo com
excesso ou com insuficincia de creme, o que ir interferir na
realizao do TAL.
4) A agitao excessiva da amostra quebra os glbulos de
gordura e interfere na formao da camada de creme na superfcie
do leite.
5) O aquecimento do leite acima de 45C diminui a
quantidade de anticorpos anti-Brucella sp presentes na amostra.
6) O congelamento ou a pasteurizao da amostra podem
ocasionar resultados falso-negativos, portanto, tais amostras no
devem ser utilizadas no TAL.
7) Leite cido, leite recentemente colhido, leite contendo
colostro, leite de vacas no perodo de secagem e leite de vacas com
mamite podem apresentar resultados falso-positivos.
8) O tamanho do rebanho pode influenciar no resultado do
teste quando o leite colhido de lates. Para tanto, e em funo
do tamanho do rebanho, deve-se aumentar a quantidade de leite
a ser utilizada no TAL, mantendo-se constante o volume do antgeno
94

(30 L). Para rebanhos com at 150 vacas em lactao, utiliza-se

1 mL de leite. Para rebanhos com 151 a 450 vacas em lactao,
utilizam-se 2 mL de leite. Nos rebanhos com 451 a 700 vacas em
lactao, utilizam-se 3 mL de leite. Rebanhos com mais de 700
vacas em lactao devem ser divididos em lotes menores para a
realizao do TAL.
9) Em todos os testes devem ser simultaneamente testadas
amostras de leite controle positivo e negativo.
Tcnica
1) Equilibrar as amostras de leite e o antgeno temperatura
ambiente por, pelo menos, 60 minutos.
2) Misturar bem as amostras de leite.
3) Colocar 1 mL de leite em tubos 10 mm x 100 mm. A
coluna de leite deve ter, no mnimo, 2 cm.
Obs.: Em funo do tamanho do rebanho, a quantidade de
leite a ser utilizada no teste (empregando-se a mesma quantidade
de antgeno, 30 L) deve ser aumentada para 2 mL ou 3 mL,
conforme as recomendaes do item 8 das Precaues na execuo
do teste.
4) Adicionar ao leite uma gota (30 L) de antgeno.
5) Tampar o tubo e misturar por inverso vrias vezes.
6) Deixar em repouso por 1 minuto e verificar se a mistura
est homognea. No deve sobrar antgeno nas paredes do tubo.
7) Incubar por 1 hora a 37C.
8) Proceder leitura.
9) Anotar os resultados.
Interpretao dos resultados
Anel de creme azul e coluna
de leite branca ou azulada: REAGENTE
Anel de creme branco e
coluna de leite azul:

NO REAGENTE
95

Teste do 2-Mercaptoetanol (2-ME)

Material
Antgeno para a soroaglutinao lenta em tubo
2-Mercaptoetanol
Salina 0,85%
Salina 0,85%, fenicada 0,5%
Amostras de soro a testar
Soro controle positivo com ttulo alto
Soro controle positivo com ttulo mdio
Soro controle positivo com ttulo baixo
Soro controle negativo
Tubos de 10 mm x 75 mm ou 10 mm x 100 mm
Grade para tubos
Pipetas de Bang ou micropipetadores de volume ajustvel
Dispensador automtico de 1 mL
Dispensador automtico de 2 mL
Pipetas de 10 mL
Caixa com luz indireta para a leitura
Estufa a 37C
Vidraria para diluio dos reagentes
Precaues na execuo do teste
1) A diluio do antgeno para a srie de tubos com 2-ME
deve ser realizada em soluo salina a 0,85%, sem adio de fenol,
pois este interfere com o 2-ME.
2) Recomenda-se fazer as diluies do antgeno 12 horas
antes do uso.
3) Os antgenos diludos devem ser conservados sob
refrigerao (2C a 8C), podendo ser utilizados por um perodo
de at uma semana.
4) O 2-ME sensvel luz e ao calor e se deteriora rapidamente
por exposio ao ar. Deve ser mantido em frascos de cor mbar,
hermeticamente fechados e sob refrigerao.
96

5) O 2-ME txico para o ser humano e deve ser manuseado

em capela de exausto.
6) Em cada jornada de trabalho, deve ser includo pelo menos
um soro selecionado especialmente, com alto contedo de anticorpos
IgM anti-Brucella e que no contenha IgG detectvel pelo teste do
2-ME, bem como outro soro reagente na SAL e 2-ME.
7) Em cada teste sero includos tambm tubos de controle
de antgeno, usando-se soros testados positivos de ttulo conhecido
e soro negativo.
8) Foi estabelecido que a incubao a 37C durante 48 3
horas suficiente para se obter o mximo de aglutinao num
soro de baixo contedo de aglutininas. Esse perodo de incubao
suficiente para o diagnstico de rotina.
9) O Teste do 2-Mercaptoetanol incubado e lido junto com
o Teste de Soroaglutinao (lenta) em Tubos. Ocasionalmente, o
tubo da diluio 1:25 pode estar um pouco opaco na prova do 2ME, ainda que os tubos subseqentes estejam claros. Tal fato no
deve ser considerado como resultado negativo do teste.
10) A diferena de ttulos entre ambos os testes (caso ela
ocorra) interpretada como a capacidade aglutinante do soro em
decorrncia de anticorpos da classe IgM. A presena de IgG
geralmente est associada com infeco ativa. Assim sendo, toda
reao positiva no teste do 2-ME (a partir de 1:25) deve ser
considerada como indicativa de infeco. Em animais vacinados,
predominam aqueles anticorpos sensveis ao 2-ME (IgM),
apresentando usualmente resultados negativos.
11) Animais no incio de infeco apresentam a maioria
dos anticorpos da classe IgM, apresentando-se negativos prova
do 2-ME.
Tcnica
1) Diluir o antgeno para soroaglutinao lenta em tubos
100 vezes em soluo salina a 0,85% contendo 0,5% de fenol.
Concentrao final 0,045.
97

2) Diluir o antgeno para soroaglutinao lenta em tubos 50

vezes em soluo salina a 0,85% sem adio de fenol. Concentrao
final 0,090%.
3) Preparar soluo de 2-ME a 0,1 M misturando-se 7,8 mL
de 2-ME a 992,20 mL de soluo salina a 0,85% sem fenol, ou
volumes menores, proporcionalmente.
4) Para cada amostra de soro a testar, colocar, em uma
estante, duas fileiras de quatro tubos.
5) Identificar o primeiro tubo de cada fileira com o nmero
correspondente ao soro a testar.
6) A primeira fileira corresponde s quatro diluies do soro
do teste de soroaglutinao lenta em tubos e deve ser marcada
com uma letra T. A outra fileira, em que se far o teste do 2-ME,
deve ser marcada com a letra M.
7) Com uma pipeta de Bang, dotada de uma pra de
borracha, ou outro dispositivo de pipetagem que evite o uso da
boca, carrega-se o soro at passar um pouco da graduao superior.
Com um papel absorvente, limpa-se o extremo da pipeta;
mantendo-se esta em posio vertical sobre a parede do tubo que
contm a amostra, deixa-se escorrer o soro at que o fundo do
menisco no interior da pipeta esteja nivelado com a sua graduao
superior.
8) Com a pipeta no fundo do primeiro tubo da primeira fileira,
deixa-se fluir 0,08 mL de soro. No segundo tubo, deposita-se 0,04
mL, no terceiro, 0,02 mL e no quarto, 0,01 mL.
9) Repete-se o procedimento descrito para depositar as
mesmas quantidades de soro na segunda fileira de tubos (srie do
2-ME).
10) Para todas as amostras de soro, repete-se o procedimento
de forma similar, pipetando os soros para cada duas fileiras de
tubos adequadamente identificados.
11) Incluir os soros controle positivos com atividade aglutinante conhecida.
12) Incluir o soro controle negativo no teste do 2-ME.
98

13) Com o dispensador automtico de 2 mL ou pipeta de

10mL, agregam-se a cada um dos quatro tubos das fileiras T, 2 mL
do antgeno diludo 1:100 (0,045% de clulas) em salina fenicada
(0,5% de fenol).
14) Com o dispensador automtico de 2 mL (regulado para
1 mL), ou pipeta de 10 mL, agrega-se 1 mL de soluo de 2-ME
0,1 M (diludo em soluo salina sem fenol) a cada um dos tubos
das fileiras M.
15) Mistura-se bem, agitando a estante.
16) Deixar as estantes com as amostras em repouso durante
30 minutos temperatura ambiente.
17) Aps os 30 minutos, empregando-se outro dispensador
automtico, ou outra pipeta de 10mL, agrega-se a cada tubo da
fileira M, 1 mL do antgeno diludo 1:50 (0,09 % de clulas) em
soluo salina fisiolgica (sem fenol). A concentrao final do
antgeno na soluo ser 0,045% e a do 2-ME ser de 0,05M.
18) Mistura-se bem, agitando a estante.
19) Incubar a 37C por 48 3 horas.
20) A leitura do teste feita atravs de uma fonte de luz
indireta contra um fundo escuro e opaco, com uma forte luz que
atravesse os tubos. As fontes de luz estranhas devem ser reduzidas.
As interpretaes baseiam-se no grau de aglutinao do antgeno
e na firmeza dos grumos, aps agitao suave dos tubos.
21) Anotar os resultados. Se houver interesse na determinao
do ttulo final de um soro, poder ser empregado o mtodo de
diluies seriadas (dobradas).
Interpretao dos resultados
O grau de aglutinao em cada uma das distintas diluies
deve ser classificado como: completo (+), incompleto (I) ou
negativo ():
Reao completa aquela em que o lquido da mistura
soro-antgeno aparece translcido e a agitao suave no
rompe os grumos;
99

 Reao incompleta aquela em que a mistura soroantgeno aparece parcialmente translcida, e uma suave
agitao no rompe os grumos;
Reao negativa aquela em que a mistura soroantgeno aparece opaca ou turva, e uma agitao suave
no revela grumos.
A interpretao dos resultados da prova realizada segundo
os Quadros 1 e 2.
Quadro 1 Interpretao da prova do 2-ME para fmeas com
idade igual ou superior a 24 meses e vacinadas
entre 3 e 8 meses de idade

2-ME
SAL

NR

25 I

25

50 I

100 I

100

200 I

NR

25 I

25

50 I

50

100 I

100

Inc

Inc

200 I

Inc

Inc

200

Inc

Inc

+ : positivo
: negativo
Inc : reao inconclusiva
: combinao que no pode ocorrer

100

50

2-ME : 2-Mercaptoetanol
SAL : soroaglutinao lenta
NR : no reagente
I : reao incompleta

200

Quadro 2 Interpretao da prova do 2-ME para fmeas no

vacinadas e machos com idade superior a 8 meses

2-ME
SAL

NR

25 I

25

50 I

50

100 I

100

200 I

NR

25 I

25

50 I

50

Inc

Inc

100 I

Inc

Inc

100

Inc

Inc

200 I

Inc

Inc

200

Inc

Inc

+ : positivo
: negativo
Inc : reao inconclusiva
: combinao que no pode ocorrer

200

2-ME : 2-Mercaptoetanol
SAL : soroaglutinao lenta
NR : no reagente
I : reao incompleta

101

Teste do Antgeno
Acidificado
Tamponado
Reao Positiva

Teste do Anel em Leite

Tubo da esquerda:
negativo
Tubo da direita:
positivo

Teste do
2-Mercaptoetanol
1o Tubo da esquerda:
positivo

Teste de Fixao de
Complemento

Negativo
102

Positivo

Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento

PROTOCOLO PARA DIAGNSTICO

DA TUBERCULOSE

Diagnstico Alrgico
O diagnstico alrgico da tuberculose bovina ser feito por
mdico veterinrio habilitado, empregando-se provas de
tuberculinizao intradrmica.

Tuberculinas
Devero ser utilizadas somente as tuberculinas PPD (Purified
Protein Derivative Derivado Protico Purificado) bovina e aviria,
produzidas segundo as normas do Ministrio da Agricultura,
Pecuria e Abastecimento (MAPA), sendo as partidas controladas e
aprovadas pelo Ministrio. As tuberculinas devero ser
transportadas e conservadas em temperatura de, no mnimo, +2C
e de, no mximo, +8C, e protegidas da luz solar direta. O contedo
dos frascos, aps sua abertura, dever ser usado no mesmo dia.

Equipamentos
Para a realizao dos testes diagnsticos de tuberculose, ser
obrigatria a utilizao de seringas e cutmetros adequados:
seringas: seringas multidoses calibradas para 0,1 mL, com
agulhas de calibre 22 G x 3 mm ou 4 mm de comprimento;
cutmetro: cutmetros especficos para tuberculinizao
de bovdeos.

Identificao dos animais

Os animais sero identificados individualmente, quer por
tatuagem quer por outra forma, inclusive pelo Registro Genealgico;
ou podero ser identificados pelo mtodo definido para o programa
de rastreabilidade do MAPA.
103

Testes
Teste Cervical Simples (TCS)
Realizao do teste
Para a tuberculinizao simples, a inoculao de tuberculina
PPD bovina ser feita na regio cervical, no tero mdio, e a uma
distncia igual das bordas superior e inferior do pescoo, ou
escapular, na regio da espinha da escpula e a 20 cm da cernelha.
A regio ser demarcada por tricotomia, devendo-se evitar
local com leso ou ndulos de parasitos. A espessura da dobra da
pele ser determinada com o auxlio de cutmetro antes da inoculao,
e as medidas sero anotadas no formulrio para exame de brucelose
e tuberculose, de acordo com as normas para habilitao.
A tuberculina PPD bovina ser inoculada por via intradrmica
na dosagem de 0,1 mL. A formao de uma ppula no local indica
que a inoculao foi correta.
Leitura e interpretao dos resultados
Aps 72 6 horas da inoculao, ser realizada nova medida
da dobra da pele no local de inoculao da tuberculina PPD bovina,
sendo o resultado anotado no respectivo campo do formulrio
para exame de brucelose e tuberculose .
O aumento da espessura da dobra da pele (B) ser assim
calculado: da medida da dobra da pele 72 horas aps a inoculao
(B72), subtrai-se a medida da dobra da pele tomada no dia da
inoculao para a tuberculina PPD bovina (B0). O resultado ser
anotado no respectivo campo do formulrio para exame de
brucelose e tuberculose (B= B72B0). Os resultados obtidos sero
interpretados de acordo com os critrios definidos na Tabela 3 do
Regulamento Tcnico do PNCEBT (ver pgina 155).

104

Tricotomia

Medida da espessura da dobra da pele (em mm)

Inoculao
intradrmica de
tuberculina
(PPD bovino)

105

Teste Cervical Comparativo (TCC)

o teste confirmatrio utilizado em animais reagentes ao
Teste Cervical Simples (TCS) e ao Teste da Prega Caudal (TPC).
tambm recomendado como teste de rotina para estabelecimentos
de criao com ocorrncia de reaes inespecficas, estabelecimentos certificados como livres e para estabelecimentos de criao
de bubalinos, visando garantir boa especificidade diagnstica.
Realizao do teste
Para o TCC, as tuberculinas sero inoculadas por via
intradrmica na dosagem de 0,1 mL, sendo o PPD avirio inoculado
cranialmente e o PPD bovino caudalmente. A formao de uma
ppula no local indica que a inoculao foi correta.
A inoculao de tuberculina PPD aviria ser feita na regio
cervical, na juno do tero anterior e do tero mdio e a uma
distncia igual das bordas superior e inferior do pescoo, ou
escapular, frente da espinha da escpula, e a 20 cm da cernelha.
A tuberculina PPD bovina ser inoculada na regio cervical, na
juno do tero mdio e tero posterior e a uma distncia igual
das bordas superior e inferior do pescoo, ou escapular, atrs da
espinha da escpula, e a 20 cm da cernelha, havendo uma distncia
mnima de 15 a 20 cm entre as duas inoculaes. Recomenda-se
que a inoculao seja efetuada de um mesmo lado de todos os
animais do estabelecimento de criao.
Os locais sero demarcados por tricotomia, devendo-se evitar
reas com leso ou ndulos de parasitos. A espessura da dobra da
pele ser determinada com o auxlio de cutmetro antes da
inoculao. As medidas da dobra da pele do local da inoculao
da tuberculina PPD aviria e da tuberculina PPD bovina sero
anotadas nos respectivos campos no formulrio para exame de
brucelose e tuberculose.

106

Leitura e interpretao dos resultados

Aps 72 6 horas da inoculao, ser realizada nova medida
da dobra da pele no local de inoculao da tuberculina PPD aviria
e da tuberculina PPD bovina, sendo os resultados anotados nos
respectivos campos do formulrio para exame de brucelose e
tuberculose.
O aumento da espessura da dobra da pele ser assim calculado:
da medida da dobra da pele 72 horas aps a inoculao, subtrai-se
a medida da dobra da pele tomada no dia da inoculao para a
tuberculina PPD aviria (A) e a tuberculina PPD bovina (B). Os
resultados sero anotados nos respectivos campos no formulrio
para exame de brucelose e tuberculose. A diferena de aumento da
dobra da pele provocado pela inoculao da tuberculina PPD bovina
(B) e da tuberculina PPD aviria (A) ser calculada subtraindo-se
A de B. Anota-se o valor no campo respectivo do formulrio para
exame de brucelose e tuberculose. Os resultados das diferenas
(B A) sero interpretados de acordo com os critrios definidos
na Tabela 4 do Regulamento Tcnico do PNCEBT (ver pgina 157).

cm
15 a 20

Tricotomia

Medida da espessura da
dobra da pele (em mm)

107

Inoculao intradrmica de tuberculina (PPD avirio):

formao de ppula

Inoculao
intradrmica de
de tuberculina
(PPD bovino)

Reao
tuberculnica
positiva

Reao
inespecfica

108

Teste da Prega Caudal (TPC)

Esse teste s poder ser empregado em rebanhos de corte
como prova de triagem ou como monitoramento.
Realizao do teste
A tuberculina PPD bovina ser inoculada por via intradrmica
na dosagem de 0,1 mL, 6 cm a 10 cm da base da cauda, na juno
da pele pilosa e da pele glabra. Antes da inoculao, o local deve
estar limpo. A formao de uma ppula no local indica que a
inoculao foi correta. A inoculao da tuberculina PPD poder ser
feita na prega caudal de quaisquer dos lados; recomenda-se,
todavia, que, para um determinado rebanho, seja utilizado o mesmo
lado para inoculao.
Leitura e interpretao dos resultados
Aps 72 6 horas da inoculao ser realizada a leitura do
teste, comparando-se, por avaliao visual e palpao, a prega
inoculada com a prega do lado oposto.
Qualquer aumento de espessura na prega inoculada
REAGENTE.
classificar o animal como REAGENTE

Inoculao de PPD
bovino

Reao tuberculnica
positiva
109

110

Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento

ELIMINAO DE ANIMAIS

Os animais que apresentarem testes diagnsticos positivos

para tuberculose ou brucelose devero, preferencialmente, ser
encaminhados ao abate sanitrio em estabelecimentos com servio
de inspeo de carcaas.
Como alternativa, eles podero ser destrudos na prpria
unidade de criao, observados os critrios abaixo especificados.
preciso salientar, ainda, que a destruio do animal precisa
ser acompanhada pelo servio oficial de defesa sanitria animal.
1) A destruio deve ser feita por mtodo que assegure uma
morte rpida e sem espalhamento de sangue. De preferncia, dentro
da cova onde o animal ser enterrado (considerar Resoluo CFMV
N 714, de 20 de junho de 2002).
2) No se aconselha fazer necropsia, pois so agentes
zoonticos. Na eventualidade de realizao de necropsia,
necessrio usar o equipamento de proteo individual e
descontaminar todos os materiais utilizados.
3) A cova deve ser feita em terreno estvel e seco, distante
de poos e cursos de gua, de nascentes e de bebedouros, para se
evitar a contaminao do lenol fretico. A carcaa ser recoberta
por um estrato de terra de aproximadamente 2 metros, impedindo
que animais escavadores e minhocas tragam os patgenos para a
superfcie.
4) Havendo necessidade de descontaminao de materiais
(instrumentos de necropsia, vestimentas, botas, etc.), recomenda-se
a fervura por 30 minutos ou, como alternativa, a imerso em
desinfetantes qumicos.
111

112

Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento

MTODOS DE DESINFECO

O Mycobacterium bovis e a Brucella abortus so agentes que

podem sobreviver durante meses no meio ambiente, aumentando
sua chance de infectar outros suscetveis. Portanto, a adoo de
programas de desinfeco de currais, de estbulos e demais locais
de aglomerao de animais adquire grande importncia como
medida complementar ao combate a esses patgenos. uma
prtica que pode ser aplicada s criaes intensivas e semiintensivas, pois haver bvias restries s extensivas. Para estas,
recomenda-se um eficiente manejo das pastagens e piquetes,
permitindo que os elementos naturais reduzam a sobrevivncia
desses patgenos no ambiente. Boa insolao, baixa umidade e
altas temperaturas so fatores que restringem a sua sobrevivncia.
Quanto ao programa de desinfeco, no basta simplesmente
aplicar o desinfetante. Deve-se, preliminarmente, desimpedir o local
por meio da remoo de camas, palhas e esterco de todas as
superfcies internas e externas, inclusive das reentrncias. O material
recolhido ser queimado ou tambm submetido desinfeco.
Em seguida, aplica-se o desinfetante, observando-se atentamente
as recomendaes do fabricante, tendo o cuidado de distribu-lo
bem sobre as superfcies.
Veculos que transportam animais infectados devem de igual
modo ser cuidadosamente desinfectados. Pastagens utilizadas por
animais infectados que abortaram ou pariram precisam permanecer
em descanso por, pelo menos, dois meses.
Na eventualidade de haver contaminao de reas de terra
nua ou com vegetao rasteira, recomenda-se delimitar o terreno
para o espalhamento de p de cal (hidrxido de clcio) e posterior
113

aradura ou revolvimento da terra para que as camadas superficiais

do solo entrem em contato e misturem-se adequadamente cal.
Em seguida, o solo dever ser nivelado e compactado com rolo ou
socador, a fim de criar condies anaerbicas nas suas camadas
mais profundas.
Um detalhe bastante importante a escolha do princpio
ativo. Os Quadros 1, 2 e 3 listam os desinfetantes mais adequados
e orientam quanto melhor forma de aplic-los.
Quadro 1 Quantidade de desinfetante a ser utilizada para cada tipo
de material a ser desinfetado

Item a ser
desinfectado

Unidade

Quantidade de
desinfetante a
ser utilizado (L)

m2

Pisos de terra

m2

Utenslios

kg

Roupas de trabalho

kg

Veculos em geral

Instalaes
Esterco lquido

Fonte: Adaptado de Russel et al. (1984).

114

Quadro 2 Desinfetantes utilizados em casos de brucelose bovina

Tempo de Temperatura
Desinfetante Concentrao
exposio de utilizao
Cal (hidrxido
15%
1 hora
Ambiente
de clcio)
Cresis
5%
1 hora
Ambiente
Fenol
1%
1 hora
37C
Formol
Hipoclorito
de clcio
Hipoclorito
de sdio
Soda custica

5%1

1 hora

Ambiente

2,5%

1 hora

Ambiente

2,5%

1 hora

Ambiente

2% 3%

3 horas

60C

Uso indicado
Instalaes, solo
Instalaes
Instalaes
Instalaes,
utenslios e roupas
Instalaes e
utenslios
Instalaes e
utenslios
Instalaes e
utenslios

Fonte: Adaptado de Russel et al. (1984).

1
Equivalente a 2% de formaldedo

Quadro 3 Desinfetantes utilizados em casos de tuberculose bovina

Tempo de Temperatura
Desinfetante Concentrao
exposio de utilizao
Cal (hidrxido
20%
3 horas
Ambiente
de clcio)
Cresis
5%
3 horas
Ambiente
Fenol
5%
3 horas
37C
Formol
Hipoclorito
de clcio
Hipoclorito
de sdio
Soda custica

7,5%1

3 horas

Ambiente

5%

3 horas

Ambiente

5%

3 horas

Ambiente

2% 3%

3 horas

60C

Uso indicado
Instalaes, solo
Instalaes
Instalaes
Instalaes,
utenslios e roupas
Instalaes e
utenslios
Instalaes e
utenslios
Instalaes e
utenslios

Fonte: Adaptado de Russel et al. (1984).

1
Equivalente a 3% de formaldedo

Bibliografia
RUSSEL, A.D.; YARNYCH, V.S.; KOULIKOVSKII, A.V. (Ed.). Guidelines on
disinfection in animal husbandry for prevention and control of zoonotic
diaseses. Geneva: World Health Organization,1984.(WHO/VPH/84.4).
115

116

Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento

PERGUNTAS E RESPOSTAS SOBRE

NORMAS E PROCEDIMENTOS
Colaboraram na elaborao deste Captulo:
Maria Carmen de Rezende Costa (SFA-MG/MAPA) e Maria do Carmo Pessa e Silva (SEAB/PR)

Vacina contra Brucelose

1. POR QUE VACINAR CONTRA BRUCELOSE?

Para induzir imunidade ou proteo contra a doena e

diminuir a prevalncia da brucelose bovina e bubalina. Quanto maior
for o nmero de fmeas vacinadas, maior ser a imunidade do
rebanho, menor o nmero de animais suscetveis e menor a
possibilidade de difuso da doena.
2. QUAIS ANIMAIS DEVEM SER VACINADOS?

Todas as fmeas bovinas e bubalinas entre 3 e 8 meses de

idade, somente uma vez na vida. proibida a vacinao de machos
de qualquer idade e de fmeas com idade superior a 8 meses.
Sendo vacinada at os 8 meses, evita-se que a fmea apresente
ttulos aglutinantes persistentes em testes sorolgicos, aps os 24
meses de idade.
3. QUE TIPO DE VACINA PODE SER UTILIZADA?

Para a vacinao de fmeas entre 3 e 8 meses de idade

obrigatrio o uso da vacina com amostra B19. Como uma vacina
viva atenuada, apresenta riscos para a sade humana e, portanto,
deve ser SEMPRE aplicada sob a responsabilidade tcnica de um
mdico veterinrio.
A utilizao de vacinas produzidas com outras amostras, que
no a B19, para fins de vacinao estratgica, ser disciplinada em
norma especfica do MAPA.
4. QUEM APLICA A VACINA?

Mdico veterinrio cadastrado na Unidade Veterinria Local

(UVL) do servio oficial de defesa sanitria animal, ou um vacinador
117

devidamente treinado e supervisionado por esse mdico veterinrio.

Onde no houver mdicos veterinrios cadastrados, ou em regies
onde eles no atenderem plenamente demanda do PNCEBT, o
servio oficial de defesa sanitria animal poder assumir a
responsabilidade tcnica ou, mesmo, a execuo da vacinao.
5. COMO CADASTRAR-SE PARA FAZER A VACINAO?

O mdico veterinrio deve solicitar o cadastramento em uma

Unidade Veterinria Local do servio oficial de defesa sanitria
animal do(s) Estado(s) onde trabalha.
6. ONDE E COMO ADQUIRIR A VACINA?

Em estabelecimentos comerciais de produtos de uso

veterinrio, registrados no servio oficial de defesa sanitria animal.
obrigatria a apresentao de receita emitida por mdico
veterinrio cadastrado ou por mdico veterinrio oficial, nos
casos em que estes assumirem a responsabilidade direta pela
vacinao.
7. PRECISO EMITIR UMA RECEITA PARA CADA PROPRIEDADE?

No. O mdico veterinrio cadastrado poder adquirir vacina

para mais de uma propriedade com uma nica receita apresentada
em um estabelecimento comercial. Contudo, dever ser emitido um
atestado de vacinao para cada propriedade atendida.
8. COMO CONSERVAR A VACINA?

Deve ser mantida sob refrigerao, em temperatura entre

2C e 8C, e ao abrigo do sol, inclusive durante o processo de
vacinao das bezerras. Ao ser reconstituda na forma lquida, a
vacina deve ser imediatamente aplicada, no podendo ser utilizada
posteriormente.
9. COMO PREPARAR A VACINA PARA O USO?

A vacina liofilizada deve ser reconstituda imediatamente

antes do uso. Deve ser agitada de maneira suave durante alguns
minutos. Sobras de vacina no podem ser aproveitadas.
118

10. QUAIS SO OS CUIDADOS NA APLICAO DA VACINA?

Por ser uma vacina viva e patognica para o homem, deve

ser manuseada com cuidado, evitando-se a contaminao. Portanto,
recomenda-se o uso de culos e luvas de proteo. Aps o uso, os
frascos, as aguhas e seringas devem ser esterilizados e descartados
adequadamente.
11. COMO APLIC-LA?

Usar agulhas e seringas estreis descartveis, e no usar

desinfetantes. Pode-se tambm utilizar agulhas e seringas aps
fervura. O volume de vacina usado para cada bezerra, assim como
sua via de inoculao, deve ser conforme a recomendao do
laboratrio fabricante (seguir a orientao da bula).
12. COMO IDENTIFICAR AS FMEAS VACINADAS?

As bezerras devero ser marcadas a ferro candente com a

letra V, acompanhada do algarismo final do ano da vacinao, no
lado esquerdo da cara. As fmeas destinadas ao registro genealgico, quando devidamente identificadas, ou aquelas identificadas
individualmente por sistema aprovado pelo MAPA, ficam excludas
da obrigatoriedade da marcao a fogo, sendo que, nesse caso,
dever ser utilizado modelo especfico de atestado de vacinao.
13. COMO COMPROVAR A VACINAO?

Por meio de atestado, emitido pelo mdico veterinrio

cadastrado responsvel pela vacinao, conforme a legislao
vigente. O atestado dever ser encaminhado pelo proprietrio
Unidade Veterinria Local do servio oficial de defesa sanitria
animal, onde a propriedade est cadastrada. obrigatria a
comprovao da vacinao de bezerras, no mnimo, uma vez por
semestre.

Cadastramento de Mdicos Veterinrios

14. POR QUE SE CADASTRAR?

Para que a vacinao de bezerras contra a brucelose possa

ter reconhecimento oficial. O servio oficial de defesa sanitria
119

animal poder contatar o mdico veterinrio cadastrado sempre

que houver necessidade de fiscalizar e monitorar as aes, ou para
fornecer informaes oficiais.
15. QUEM FAZ O CADASTRAMENTO?

O servio oficial de defesa sanitria animal estadual.

16. QUANDO SE CADASTRAR?

No h prazo limite para cadastramento. Basta procurar um

escritrio do servio oficial de defesa sanitria animal do Estado.

Habilitao de Mdicos Veterinrios

17. POR QUE SE HABILITAR E QUAIS OS DIREITOS DO
HABILITADO?

Para realizar testes de diagnstico de rotina para brucelose

(Antgeno Acidificado Tamponado AAT e Teste do Anel em
Leite TAL) e tuberculose em bovinos e bubalinos.
Para ser responsvel pelo processo de saneamento das
propriedades, visando certificao de LIVRE ou MONITORADA
para brucelose e tuberculose.
O mdico veterinrio habilitado atua sob superviso do servio
oficial de defesa sanitria animal.
18. O QUE PRECISO PARA SER HABILITADO E QUAIS OS
DEVERES DO HABILITADO?

Estar inscrito no(s) Conselho(s) de Medicina Veterinria da(s)

Unidade(s) Federativas(s) de atuao.
Ter sido aprovado em curso de treinamento em mtodos de
diagnstico e controle da brucelose e tuberculose, reconhecido
pelo DSA/MAPA, e realizado por instituio de ensino ou pesquisa
em Medicina Veterinria.
Cumprir o Regulamento Tcnico e demais normas complementares do PNCEBT.
Possuir infra-estrutura e material adequado execuo dos
testes de diagnstico.
120

Fornecer informaes e apresentar relatrios de atividades,

relacionados com o PNCEBT Unidade Veterinria Local do servio
oficial de defesa sanitria animal.
19. ONDE SE HABILITAR?

Ao concluir o curso de treinamento e de posse do certificado,

o veterinrio dever formalizar seu pedido de habilitao junto a
uma Unidade Veterinria Local do servio oficial de defesa sanitria
animal, onde ir, estando habilitado, apresentar os relatrios de
atividades relacionados ao PNCEBT.
20. QUAL A ABRANGNCIA PARA ATUAO DO HABILITADO?

Todo o territrio da Unidade Federativa na qual o mdico

veterinrio foi habilitado. Para atuar em mais de uma Unidade da
Federao, o mdico veterinrio dever estar inscrito no respectivo
CRMV, procurar o servio oficial de defesa sanitria animal desse
outro Estado, apresentar o certificado de concluso do curso de
treinamento e formalizar seu pedido de habilitao.
21. QUAL A ABRANGNCIA DO CURSO DE TREINAMENTO?

O curso tem validade em todo o territrio nacional, desde

que seja reconhecido pelo DSA/MAPA.

Antgenos para Brucelose e Tuberculinas

22. QUAIS SO OS TESTES PARA DIAGNSTICO DA BRUCELOSE?

Para uso do mdico veterinrio habilitado so: Antgeno

Acidificado Tamponado (AAT) e Teste do Anel em Leite (TAL).
Para uso dos laboratrios credenciados so: Antgeno
Acidificado Tamponado (AAT), 2-Mercaptoetanol (2-ME) e Teste
do Anel em Leite (TAL).
Para uso dos laboratrios oficiais credenciados so: Antgeno
Acidificado Tamponado (AAT), 2-Mercaptoetanol (2-ME), Teste do
Anel em Leite (TAL) e Fixao de Complemento (FC).
O teste de Fixao de Complemento s ter valor oficial se
realizado em laboratrio oficial credenciado.
121

23. QUAIS SO AS TUBERCULINAS UTILIZADAS?

Para o Teste Cervical Simples (TCS) e o Teste da Prega Caudal

(TPC) o PPD bovino.
Para o Teste Cervical Comparativo (TCC) so os PPD bovino e
PPD avirio.
24. ONDE ADQUIRI-LOS?

No servio oficial de defesa sanitria animal do Estado.

25. COMO ADQUIRI-LOS?

Mediante preenchimento de formulrio prprio, no local onde

for adquirir os produtos biolgicos.
26. QUANDO ADQUIRI-LOS?

Sempre que necessrio. Para aquisio de novos produtos

biolgicos, dever ser apresentado relatrio de utilizao dos
insumos adquiridos anteriormente.
27. QUEM PODE ADQUIRI-LOS?

Somente os mdicos veterinrios habilitados junto ao

PNCEBT, os laboratrios credenciados, os laboratrios oficiais
credenciados, as instituies de ensino ou pesquisa em medicina
veterinria e os mdicos veterinrios cadastrados no Servio
Oficial como responsveis tcnicos de granjas de sudeos.
28. COMO CONSERVAR E UTILIZAR OS PRODUTOS BIOLGICOS?

Os produtos devem ser conservados sob refrigerao (2C a

8C) e usados sempre dentro do prazo de validade. No podem ser
congelados.

Diagnstico de Brucelose
29. QUAIS ANIMAIS DEVEM SER TESTADOS?

As fmeas de idade igual ou superior a 24 meses, desde que

vacinadas entre 3 e 8 meses; os machos e a as fmeas no vacinadas,
a partir dos 8 meses de idade. Excluem-se desses os animais
castrados.
122

As fmeas submetidas a testes sorolgicos, no intervalo de

15 dias antes e at 15 dias aps o parto, devero ser retestadas no
perodo de 30 a 60 dias aps o parto.
Para certificao de propriedade MONITORADA, os testes
sero aplicados apenas em fmeas com idade igual ou superior a
24 meses e nos machos reprodutores, de acordo com o estabelecido
no regulamento tcnico do PNCEBT.
30. FMEAS VACINADAS (AMOSTRA B19) PODEM SER
TESTADAS?

Podem, desde que com idade igual ou superior a 24 meses.

31. ANIMAIS DE PROPRIEDADES QUE NO ESTIVEREM SENDO
CERTIFICADAS PODEM SER TESTADOS?

Sim, desde que os animais POSITIVOS sejam marcados,

afastados da produo e isolados at serem SACRIFICADOS ou
DESTRUDOS, num prazo mximo de 30 dias. Os testes s podem
ser realizados por mdicos veterinrios habilitados ou por
laboratrios credenciados pelo MAPA.
32. QUAIS TESTES PODEM SER FEITOS PELO MDICO
VETERINRIO HABILITADO?

O Teste do Antgeno Acidificado Tamponado (AAT) e o Teste

do Anel em Leite (TAL).
33. COM QUAL FINALIDADE SER UTILIZADO O TESTE DO
ANEL EM LEITE?

Para monitorar a condio sanitria de estabelecimentos de

criao. Este teste poder ser usado por veterinrios habilitados,
por laboratrios credenciados ou, ainda, pelo servio oficial de
defesa sanitria animal.
34. QUAL A CONDUTA A SER ADOTADA EM REBANHOS QUE
APRESENTAREM O TESTE DO ANEL EM LEITE POSITIVO ?

Em caso de positividade, os animais do estabelecimento de

criao devero ser submetidos a TESTES SOROLGICOS individuais
para diagnstico de brucelose.
123

Esquema 1
Diagnstico da Brucelose

124

Diagnstico de Tuberculose
35. QUAIS TESTES PODEM SER FEITOS PELO MDICO
VETERINRIO HABILITADO?

So os testes alrgicos: de tuberculinizao cervical simples,

cervical comparativo e na prega caudal.
36. EM QUE CIRCUNSTNCIA PERMITIDO O TESTE
NA PREGA CAUDAL?

Somente quando o teste aplicado em rebanhos de corte.

37. EM QUE CIRCUNSTNCIA RECOMENDADO O TESTE
CERVICAL SIMPLES?

Como diagnstico de rotina, em virtude de ser a prova de

tuberculinizao de maior sensibilidade.
38. EM QUAIS CIRCUNSTNCIAS RECOMENDA-SE O TESTE
CERVICAL COMPARATIVO?

Em animais reagentes ao Teste da Prega Caudal e ao Teste

Cervical Simples.
tambm recomendado como teste de rotina para estabelecimentos de criao com ocorrncia de reaes inespecficas,
estabelecimentos certificados como livres e para estabelecimentos
de criao de bubalinos, visando garantir boa especificidade
diagnstica.
39. QUAIS EQUIPAMENTOS DEVEM SER USADOS PARA
DIAGNSTICO DE TUBERCULOSE?

Equipamento para tricotomia, cutmetro, agulhas intradrmicas e seringas multidoses especficas para tuberculinizao em
bovinos.
40. ANIMAIS DE PROPRIEDADES QUE NO ESTIVEREM EM
SANEAMENTO OU CERTIFICADAS PODEM SER TESTADOS?

Podem, desde que os animais POSITIVOS sejam marcados,

afastados da produo e isolados at serem SACRIFICADOS ou
125

DESTRUDOS, num prazo mximo de 30 dias. Em todos os casos,

os testes s podem ser realizados por mdicos veterinrios
habilitados no PNCEBT.
41. QUAIS ANIMAIS DEVEM SER TESTADOS?

Todos os bovinos e bubalinos, machos e fmeas, com mais

de 6 semanas de idade.
As fmeas no reagentes aos testes de diagnstico realizados
no intervalo de 15 dias antes do parto e at 15 dias aps o parto,
devero ser retestadas no perodo de 60 a 90 dias aps o parto,
obedecendo a um intervalo mnimo de 60 dias entre os testes.
Para certificao de propriedade MONITORADA, sero
testadas as fmeas com idade igual ou superior a 24 meses, e os
machos reprodutores da mesma faixa etria.
42. QUAL A CONDUTA QUANDO O RESULTADO FOR
INCONCLUSIVO?

Se for realizado Teste Cervical Simples, o animal reagente

positivo ou inconclusivo poder ser sacrificado (ou destrudo), em
um prazo mximo de 30 dias ou, ainda, ser submetido ao Teste
Cervical Comparativo com intervalo de 60 a 90 dias aps o teste
anterior.
Se for feito teste comparativo e o resultado tambm for
inconclusivo, o animal poder ser sacrificado (ou destrudo) em
um prazo mximo de 30 dias ou ainda ser submetido a segundo
teste comparativo com intervalo mnimo de 60 dias entre os testes.
Se o resultado desse segundo teste comparativo tambm
for inconclusivo, o animal ser classificado como reagente positivo
e DEVER ser marcado a ferro candente com letra P no lado direito
da cara, isolado de todo rebanho e sacrificado (ou destrudo) no
prazo mximo de 30 dias.

126

Esquema 2
Diagnstico da TTuberculose
uberculose

127

Destino dos Animais Reagentes Positivos

43. O QUE FAZER COM OS ANIMAIS POSITIVOS?

Em primeiro lugar, retir-los da produo e isol-los dos

demais animais do rebanho. Marcar com ferro candente um P no
lado direito da cara. No prazo mximo de 30 dias encaminh-los
ao abate em estabelecimento com inspeo sanitria oficial, ou
destru-los na propriedade, desde que com acompanhamento do
servio oficial de defesa sanitria animal.
44. AS CRIAS RECM-PARIDAS DE FMEAS POSITIVAS
PODEM SER APROVEITADAS?

Sim, desde que o animal recm-nascido seja separado

imediatamente da me POSITIVA e alimentado com colostro e leite
de fmea NEGATIVA. Posteriormente, esse animal dever ser
submetido aos testes para diagnstico de brucelose e tuberculose.
45. O LEITE DAS FMEAS POSITIVAS
PODE SER APROVEITADO?

No. Os animais POSITIVOS devem ser marcados e afastados

da produo imediatamente, at que sejam sacrificados. O leite
NO poder ser usado nem para consumo humano, nem para
alimentao de qualquer espcie animal.
46. A CARNE DE ANIMAIS POSITIVOS
PODE SER CONSUMIDA?

A carne pode ter aproveitamento condicional, segundo

critrios estabelecidos pelo Servio de Inspeo de Produtos de
Origem Animal. Se o animal for destrudo no estabelecimento de
criao, a carne NO deve ser aproveitada para consumo humano,
nem como alimento para qualquer espcie animal.

128

Trnsito Interestadual e Aglomeraes de

Bovinos e Bubalinos (Feiras e Exposies)
47. QUAIS ANIMAIS DEVEM SER TESTADOS EM CASO DE
EXPOSIES E LEILES DE REBANHO DE ELITE?

Teste de brucelose: machos e fmeas acima de 8 meses de

idade. Excluem-se desse teste os animais cujo destino final seja o
abate (animais de corte), fmeas de at 24 meses, desde que
vacinadas entre 3 e 8 meses de idade, os animais castrados e os
animais procedentes de estabelecimento de criao livre de brucelose.
Teste de tuberculose: machos e fmeas com idade igual ou
superior a 6 semanas. Excluem-se desse teste os animais cujo destino
final seja o abate (animais de corte) e aqueles provenientes de
estabelecimento de criao livre de tuberculose.
48. QUANDO ELES DEVEM SER TESTADOS?

At 60 dias antes do transporte ou do incio do evento.

49. QUAL O PRAZO DE VALIDADE DOS TESTES DE
BRUCELOSE E TUBERCULOSE?

Valem por 60 dias.

50. QUAL A DOCUMENTAO NECESSRIA PARA TRNSITO
INTERESTADUAL DE ANIMAIS DESTINADOS REPRODUO?

Para fins de trnsito interestadual de machos e de fmeas, das

espcies bovina e bubalina, destinados reproduo, obrigatria
a apresentao de testes NEGATIVOS para brucelose e tuberculose.
Para a tuberculose, os animais devem ser testados a partir
das 6 semanas de idade e, para a brucelose, a partir dos 8 meses
de idade (machos e fmeas no vacinadas).
No caso de fmeas de at 24 meses de idade e VACINADAS
contra brucelose, necessrio que conste na GTA a vacinao contra
brucelose, que ser comprovada na Unidade Veterinria Local onde
o documento de trnsito foi emitido.
Ficam excludos dos testes os animais oriundos de estabelecimento de criao livre de brucelose e tuberculose ou monitorado
para brucelose e tuberculose.
129

Certificao de Estabelecimento de
Criao Livre de Brucelose e Tuberculose
51. OBRIGATRIA?

No. A certificao voluntria.

52. COMO INICIAR O PROCESSO DE CERTIFICAO?

preciso ter um mdico veterinrio habilitado que se

responsabilizar pelo saneamento da propriedade. O proprietrio,
ento, dever solicitar formalmente a certificao junto Unidade
Veterinria Local do servio oficial de defesa sanitria animal do
Estado onde o estabelecimento se encontra cadastrado.
53. QUEM FAZ A CERTIFICAO?

o MAPA, juntamente com o servio oficial de defesa sanitria

animal do Estado.
54. ONDE A CERTIFICAO TEM VALIDADE?

Em todo o territrio nacional.

55. A CERTIFICAO TEM PRAZO DE VALIDADE?

Sim. A validade de 12 meses, sendo, portanto, necessria

a revalidao, conforme o Regulamento do PNCEBT.
56. QUEM EMITE O DOCUMENTO DE ESTABELECIMENTO
CERTIFICADO?

o MAPA, juntamente com o servio oficial de defesa sanitria

animal do Estado.
57. QUAIS AS MEDIDAS PARA CERTIFICAR UM
ESTABELECIMENTO DE CRIAO COMO LIVRE DE BRUCELOSE E
TUBERCULOSE?

Ter assistncia tcnica de um mdico veterinrio habilitado e

custear as atividades de controle da brucelose e tuberculose.
Utilizar sistema de identificao individual dos animais
indicado pelo MAPA, ou, na ausncia deste, possuir sistema de
identificao animal prprio, desde que aprovado localmente pelo
servio oficial de defesa sanitria animal.
130

Vacinar todas as fmeas bovinas e bubalinas entre 3 e 8 meses

de idade contra brucelose.
Para brucelose: realizar testes de todo o rebanho, num
intervalo de 30 a 90 dias entre testes, at que se obtenha resultado
negativo em todos os animais testados. Todos os reagentes positivos
devero ser sacrificados ou destrudos; aps essa etapa, dever ser
obtido um segundo teste de rebanho negativo com intervalo de
90 a 120 dias (do primeiro) e um terceiro teste de rebanho negativo
com intervalo de 180 a 240 dias (do segundo). No ltimo exame, a
colheita dever ser acompanhada pelo servio oficial de defesa
sanitria animal e os testes realizados em laboratrio oficial
credenciado. Obtidos os 3 testes de rebanho NEGATIVOS
CONSECUTIVOS, o estabelecimento de criao estar apto a receber
o certificado de LIVRE de brucelose (Esquema 3).

Esquema 3
Etapas de saneamento Brucelose

AAT Teste do Antgeno Acidificado Tamponado

2-ME Teste do 2-Mercaptoetanol
FC Teste de Fixao de Complemento

Quando o rebanho sofre uma reinfeco, perde temporariamente o certificado. Nesse caso, poder recuperar a condio
de livre aps a obteno de dois testes de rebanho negativos,
131

realizados com intervalo de 30 a 90 dias, sendo o primeiro realizado

30 a 90 dias aps o sacrifcio ou destruio do ltimo animal
reagente positivo.
Para tuberculose: devero ser realizados testes de rebanho
com intervalo de 90 a 120 dias entre testes, at que se obtenha
resultado NEGATIVO em todos os animais testados. Todos os
reagentes positivos devero ser sacrificados ou destrudos; aps
essa etapa, dever ser obtido um segundo teste de rebanho negativo
com intervalo de 90 a 120 dias (do primeiro) e um terceiro teste de
rebanho negativo com intervalo de 180 a 240 dias (do segundo),
sendo este ltimo acompanhado pelo servio oficial de defesa
sanitria animal. Obtendo-se os 3 testes CONSECUTIVOS
NEGATIVOS, a propriedade estar apta a receber o certificado de
LIVRE de tuberculose (Esquema 4).

Esquema 4
Etapas de saneamento Tuberculose

TCS: Teste Cervical Simples

TCC: Teste Cervical Comparativo
Obs: Os estabelecimentos de criao com rebanho de corte que optem pela certificao
de livre de tuberculose, podero, ainda, utilizar o Teste da Prega Caudal (TPC).

Quando o rebanho se reinfecta, perde temporariamente o

certificado. Neste caso, poder recuperar a condio de livre aps
obteno de dois testes de rebanho negativos, realizados com
132

intervalo de 90 a 120 dias, sendo o primeiro realizado 90 a 120

dias aps o sacrifcio ou destruio do ltimo animal reagente
positivo.
58. O ESTABELECIMENTO DE CRIAO PODE SER CERTIFICADO
COMO LIVRE PARA BRUCELOSE OU PARA TUBERCULOSE
SEPARADAMENTE?

Sim. O certificado ser emitido separadamente, conforme

o progresso do saneamento para cada enfermidade. Porm, o
saneamento dever ser feito, obrigatoriamente para ambas as
doenas, at que se alcance a certificao de estabelecimento de
criao livre para brucelose e tuberculose.
59. QUAL O TEMPO MNIMO PARA UMA PROPRIEDADE
OBTER O CERTIFICADO?

de 270 dias, ou seja, 9 meses aproximadamente.

60. QUAIS SO AS CONDIES PARA INGRESSO DE ANIMAIS
EM PROPRIEDADES CERTIFICADAS OU EM PROCESSO DE
CERTIFICAO COMO LIVRE DE BRUCELOSE E TUBERCULOSE?

Que sejam oriundos de outra propriedade LIVRE de brucelose

e/ou de tuberculose. Caso contrrio, os animais devem apresentar
dois testes consecutivos NEGATIVOS para brucelose e/ou
tuberculose.
Brucelose: o primeiro teste deve ser feito na origem, 30
dias antes do embarque, e o segundo at 30 dias aps a chegada
no destino. Os animais devem ser mantidos isolados at o segundo
resultado negativo. Caso no seja possvel mant-los isolados no
destino, os dois testes podero ser efetuados na origem, com
intervalo de 30 a 60 dias entre testes.
Tuberculose: o primeiro teste deve ser feito na origem, 30
dias antes do embarque, e o segundo at 90 dias aps a chegada
no destino, num intervalo mnimo de 60 dias entre testes. Os animais
devem ser mantidos isolados at o segundo resultado negativo.
Caso no seja possvel mant-los isolados no destino, os dois testes
podero ser efetuados na origem durante os 90 dias que antecedem
o embarque, com intervalo mnimo de 60 dias entre testes.
133

Certificao de Estabelecimento de Criao

Monitorado para Brucelose e Tuberculose
61. OBRIGATRIA?

No. A adeso voluntria.

62. COMO INICIAR O PROCESSO DE CERTIFICAO?

preciso ter um mdico veterinrio habilitado que se

responsabilizar pelo saneamento da propriedade. O proprietrio
dever, ento, solicitar formalmente a certificao junto Unidade
Veterinria Local do servio oficial de defesa sanitria animal do
Estado onde o estabelecimento se encontra cadastrado.
63. QUEM FAZ A CERTIFICAO?

o MAPA, juntamente com o servio oficial de defesa sanitria

animal do Estado.
64. QUAIS ESTABELECIMENTOS PODERO SER CERTIFICADOS
COMO MONITORADOS?

Somente os estabelecimentos especializados em pecuria de

corte.
65. A CERTIFICAO TEM PRAZO DE VALIDADE?

Sim. A validade de 12 meses, sendo, portanto, necessria

a revalidao, conforme o determinado pelo Regulamento Tcnico
do PNCEBT.
66. QUEM EMITE O DOCUMENTO DE ESTABELECIMENTO
CERTIFICADO?

o MAPA, juntamente com o servio oficial de defesa sanitria

animal do Estado.
67. QUAIS AS MEDIDAS PARA CERTIFICAR UM ESTABELECIMENTO
DE CRIAO MONITORADO PARA BRUCELOSE E TUBERCULOSE?

O estabelecimento de criao deve ter assistncia tcnica de

um mdico veterinrio habilitado e custear as atividades de controle
da brucelose e tuberculose.
134

Deve utilizar o sistema de identificao individual dos animais

indicado pelo MAPA, ou, na ausncia deste, possuir um sistema de
identificao animal prprio, desde que aprovado localmente pelo
servio oficial de defesa sanitria animal.
Vacinar todas as fmeas bovinas e bubalinas entre 3 e 8 meses
de idade contra brucelose.
Deve realizar testes de brucelose e tuberculose por
amostragem aleatria. Quando forem detectados animais reagentes
positivos nos testes por amostragem, ou quando for isolado o
agente da tuberculose bovina em leses detectadas na inspeo
post-mortem durante o abate, todas as fmeas com idade igual ou
superior a 24 meses e todos os machos reprodutores devem ser
submetidos a testes de diagnstico, destinando os reagentes
positivos ao sacrifcio ou destruio.
Os testes de rebanho por amostragem devem ser realizados
em intervalos de 10 a 12 meses. Depois de terem sido realizados
dois testes de rebanho por amostragem, com resultados negativos,
os testes de tuberculose passam a ser realizados em intervalos de
18 a 24 meses.
O certificado ser emitido aps a obteno de um teste com
100% da amostragem inicial negativa. Caso existam animais
positivos, o certificado somente poder ser emitido aps o exame
de todas as fmeas a partir de 24 meses de idade e machos
reprodutores, no includos na amostragem inicial, com a
destruio/sacrifcio de todos os positivos.
68. QUAL A CONDUTA EM CASO DE SEREM DETECTADAS
LESES SUGESTIVAS DE TUBERCULOSE AO EXAME
POST-MORTEM DE ANIMAIS ORIUNDOS DE ESTABELECIMENTOS
DE CRIAO MONITORADOS?

O Servio de Inspeo Oficial do estabelecimento de abate

dever enviar amostras das leses suspeitas a laboratrio indicado
pelo Departamento de Sade Animal. Confirmando-se infeco por
Mycobacterium bovis, a Unidade Veterinria Local do servio oficial
de defesa sanitria animal ser comunicada e determinar que o
estabelecimento de criao de origem dos animais proceda a teste
135

de diagnstico para tuberculose em todas as fmeas a partir de 24

meses de idade e em todos os machos reprodutores. Todos os
animais reagentes positivos devem ser destinados ao sacrifcio ou
destruio.
69. QUANDO UM ESTABELECIMENTO DE CRIAO PODE OBTER
O CERTIFICADO DE MONITORADO?

Aps testar a amostra de animais reprodutores (machos e

fmeas com idade igual ou superior a 24 meses) e obtiver todos os
resultados negativos ou, em caso de diagnosticar reagentes
positivos, todo o restante do plantel de reprodutores for submetido
a teste e forem eliminados todos os animais reagentes positivos.
70. O ESTABELECIMENTO DE CRIAO PODE SER CERTIFICADO
COMO MONITORADO PARA BRUCELOSE OU PARA TUBERCULOSE
SEPARADAMENTE?

No. A certificao de estabelecimento de criao monitorado

ser feita de modo obrigatrio para brucelose e tuberculose
simultaneamente.
71. O QUE PRECISO PARA INGRESSO DE ANIMAIS EM
ESTABELECIMENTO DE CRIAO CERTIFICADO COMO
MONITORADO?

Que sejam oriundos de estabelecimento de criao LIVRE de

brucelose ou MONITORADO para brucelose e tuberculose ou que
tenham, no mnimo, dois testes consecutivos NEGATIVOS para
brucelose. O primeiro teste deve ser feito na origem, durante
os 30 dias que antecedem o embarque, e o segundo, ser feito at
30 dias aps a chegada no destino, num intervalo mnimo de 30
dias entre testes. Os animais devem ser mantidos isolados at o
segundo resultado negativo.
Que sejam oriundos de estabelecimento de criao LIVRE de
tuberculose ou MONITORADO para brucelose e tuberculose ou que
tenham, no mnimo, dois testes consecutivos NEGATIVOS para
tuberculose. O primeiro teste deve ser feito na origem, durante os
30 dias que antecedem o embarque, e o segundo, at 90 dias
136

aps a chegada no destino, num intervalo mnimo de 60 dias entre

testes. Os animais devem ser mantidos isolados at o segundo
resultado negativo.

Esquema 5
Etapa de testes para obteno do certificado de
monitorado para Brucelose:

AAT: Teste do Antgeno Acidificado Tamponado

2-ME: Teste do 2-Mercaptoetanol
FC: Teste de Fixao de Complemento

Se um animal da amostragem inicial (ver Tabela 1, pg. 139)

apresentar resultado positivo, todas as fmeas a partir de 24 meses
de idade e machos reprodutores no includos nessa amostragem
devero ser examinados.
O certificado ser emitido aps a obteno de um teste com
100% da amostragem inicial negativa. Caso existam animais
positivos, o certificado somente poder ser emitido aps o exame
de todas as fmeas a partir de 24 meses de idade e machos reprodutores no includos na amostragem inicial, com a destruio/
sacrifcio de todos os positivos.
A repetio peridica do teste ser realizada utilizando tabela
para esta finalidade (ver Tabela 2, pg. 139), em intervalos de 10 a
12 meses.
137

Esquema 6
Etapa de testes para obteno do certificado de
monitorado para tuberculose:

*A critrio do proprietrio e/ou do veterinrio habilitado, a amostragem inicial poder ser

testada utilizando o TCS ou TCC.
TPC: Teste da Prega Caudal
TCS: Teste Cervical Simples
TCC: Teste Cervical Comparativo

Se algum animal da amostragem inicial (ver Tabela 1, pg.

139) apresentar resultado positivo no TPC, ser realizado o TCC.
Caso esse teste seja positivo, todas as fmeas a partir de 24 meses
de idade e machos reprodutores no includos nessa amostragem
devero ser examinados.
O certificado ser emitido aps a obteno de um teste, com
100% da amostragem inicial negativa. Caso existam animais
positivos, o certificado somente poder ser emitido aps o exame
de todas as fmeas a partir de 24 meses de idade e machos
reprodutores no includos na amostragem inicial, com a
destruio/sacrifcio de todos os positivos.
As repeties do teste por amostragem (ver Tabela 2, pg.
139) sero realizadas 10 a 12 meses aps o primeiro teste. Aps
obter-se dois resultados negativos consecutivos em todos os animais
testados, a repetio peridica do teste ser efetuada em intervalos
de 18 a 24 meses.
138

Seleo de Animais a Serem Testados

Tabela 1 Tabela de amostragem para o teste inicial em
estabelecimento de criao monitorado
(Art. 74 - Regulamento PNCEBT)
Nmero de fmeas a partir de 24 meses
de idade e de machos reprodutores
existentes no estabelecimento

Nmero de fmeas a partir de 24 meses

de idade e de machos reprodutores que
devem ser testados (*)

< 350
351 500
501 750
751 1500
1501 5000
> 5000

255
300
350
400
440
460

(*) Parmetros de amostragem: 1) probabilidade de deteco de um ou mais animais

reagentes (grau de confiana) = 99%; 2) porcentagem mnima esperada de animais
reagentes no rebanho = 1%.

Tabela 2 Tabela de amostragem para a repetio peridica do teste

em estabelecimento de criao monitorado
(Art.75 - Regulamento PNCEBT)
Nmero de fmeas a partir de 24 meses
de idade e de machos reprodutores
existentes no estabelecimento

Nmero de fmeas a partir de 24 meses

de idade e de machos reprodutores que
devem ser testados (*)

< 350
351 500
501 750
751 1500
1501 5000
> 5000

200
225
250
270
290
300

(*) Parmetros de amostragem: 1) probabilidade de deteco de um ou mais animais

reagentes (grau de confiana) = 95%; 2) porcentagem mnima esperada de animais
reagentes no rebanho = 1%.

139

Uma vez separados os animais na faixa etria especfica para

colheita de sangue, necessrio fazer uma seleo aleatria dos
que sero testados. Para tanto, dever ser empregado o mtodo
exemplificado no quadro abaixo, conhecido como amostragem
aleatria sistemtica.

Amostragem aleatria sistemtica

Em uma amostragem aleatria sistemtica, so
sorteados n animais, pertencentes a uma populao
composta por um total de N animais. Em primeiro lugar,
sorteia-se um nmero aleatrio menor ou igual a N/n ao
acaso. Depois so sorteados animais em intervalos regulares
iguais a N/n.
Exemplo: para obter uma amostra de 300 (n) animais
com mais de 2 anos, em um rebanho composto por 6000
(N) animais com mais de 2 anos de idade. Sortear um
nmero ao acaso entre 1 e 20 (N/n = 6000/300 = 20),
por exemplo 05.
Sangrar o animal n 05 pela ordem de passagem
no brete; depois, testar mais 299 animais em intervalos de
20: 25, 45, 65, 85, 105, 125, 145, 165, ...(at 6.000).

140

Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento

LEGISLAO PNCEBT

Contedo
Instruo Normativa Ministerial no 02/2001 ................ 141
Institui o PNCEBT

Instruo Normativa SDA no 06/2004 ............................. 142

Regulamento Tcnico do PNCEBT

Portaria SDA no 10/2003 ....................................................... 176

Institui o Comit Cientfico Consultivo
sobre brucelose e tuberculose animal (CCBT)

Portaria DDA no 73/2003 ....................................................... 177

Estabelece a composio do Comit Cientfico Consultivo
sobre brucelose (B. abortus) e tuberculose animal (M. bovis)

Portaria DDA no 11/2004 ....................................................... 178

Exclui o Estado de Santa Catarina da obrigatoriedade de
vacinao das fmeas bovinas e bubalinas contra a brucelose

Instruo Normativa SDA no 59/2004 ............................... 179

Altera o artigo 32 do Regulamento Tcnico do PNCEBT
Obs: 1 - O contedo aqui apresentado no substitui os textos originais
publicados no DOU.
2 - Outras normas complementares podem no constar desta
coletnea.

Instruo Normativa no 2, de 10 de janeiro de 2001

O MINISTRO DE ESTADO DA AGRICULTURA E DO
ABASTECIMENTO, no uso da atribuio que lhe confere o art. 87,
pargrafo nico, inciso II, da Constituio, tendo em vista o disposto
no Regulamento de Defesa Sanitria Animal, aprovado pelo Decreto
n 24.548, de 3 de julho de 1934, e o que consta do Processo n
21000.006179/2000-97, resolve:
141

Art. 1 Instituir o Programa Nacional de Controle e

Erradicao da Brucelose e da Tuberculose Animal.
Art. 2 Atribuir ao Secretrio de Defesa Agropecuria a
incumbncia de baixar o Regulamento Tcnico do Programa e
expedir as instrues necessrias plena implementao das
atividades de combate s supracitadas doenas no Pas.
Art. 3 Esta Instruo Normativa entra em vigor na data de
sua publicao.
Art. 4 Fica revogada a Portaria n 23, de 20 de janeiro de
1976.
MARCUS VINICIUS PRATINI DE MORAES
Publicada no DOU n 08, de 11 de janeiro de 2001, Seo I, p. 5

Instruo Normativa SDA no 06, de 8 de janeiro de 2004

O SECRETRIO DE DEFESA AGROPECURIA, DO MINISTRIO
DA AGRICULTURA, PECURIA E ABASTECIMENTO, no uso da
atribuio que lhe confere o art. 15, inciso II, do Decreto 4.629, de
21 de maro de 2003, tendo em vista o disposto no Regulamento
do Servio de Defesa Sanitria Animal, aprovado pelo Decreto n
24.548, de 3 de julho de 1934,
Considerando a necessidade de padronizar e garantir a
qualidade dos instrumentos e das aes profilticas, de diagnstico,
de saneamento de rebanhos e de vigilncia sanitria ativa,
relacionadas ao combate brucelose e tuberculose,
Considerando a necessidade de definir o papel dos rgos
pblicos de defesa e inspeo sanitria animal no combate a essas
enfermidades e sua integrao com os pecuaristas, com instituies
de ensino ou pesquisa, com mdicos veterinrios que atuam no
setor privado e com laboratrios no pertencentes rede do
Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento, e o que consta
do Processo 21000.012771/2003-71, resolve:
Art. 1 Aprovar o Regulamento Tcnico do Programa
Nacional de Controle e Erradicao da Brucelose e Tuberculose
Animal.
142

Art. 2 Subdelegar ao Diretor do Departamento de Defesa

Animal competncia, no que couber, para baixar atos complementares a este Regulamento.
Art. 3 Esta Instruo Normativa entra em vigor na data de
sua publicao.
Art. 4 Fica revogada a Instruo Normativa SDA n 2, de
10 de janeiro de 2001.
MAAO TADANO
Publicada no DOU n 07, de 12 de janeiro de 2004, Seo 1, p. 6-10.

Regulamento Tcnico do Programa Nacional de Controle

e Erradicao da Brucelose e da Tuberculose Animal
Captulo I
Das Definies
Art. 1 Para efeitos deste Regulamento, considera-se:
I brucelose: zoonose causada pela Brucella abortus,
caracterizada por causar infertilidade e aborto no final da gestao,
afetando principalmente as espcies bovina e bubalina;
II tuberculose: zoonose de evoluo crnica, causada pelo
Mycobacterium bovis, que provoca leses granulomatosas, afetando
principalmente as espcies bovina e bubalina;
III servio de defesa oficial: o servio de defesa sanitria
animal, nos nveis federal, estadual ou municipal;
IV unidade local do servio de defesa oficial: escritrio do
servio de defesa animal estadual que, sob coordenao de
mdico veterinrio oficial, responsvel pelas aes de vigilncia e
ateno veterinria em um ou mais municpios;
V servio de inspeo oficial: o servio de inspeo de
produtos de origem animal, nos nveis federal, estadual ou municipal;
VI sacrifcio: o abate sanitrio de animais reagentes aos
testes de diagnstico para brucelose ou tuberculose, realizado em
estabelecimento sob servio de inspeo oficial, de acordo com a
legislao pertinente;
143

VII destruio: o procedimento de eliminao de animais

reagentes aos testes de diagnstico para brucelose ou tuberculose
no prprio estabelecimento de criao, obedecendo a critrios
definidos pelo Departamento de Defesa Animal;
VIII estabelecimento de criao: local onde so criados
bovinos ou bubalinos sob condies comuns de manejo;
IX estabelecimento de criao em certificao:
estabelecimento de criao que est cumprindo os procedimentos
de saneamento previstos neste Regulamento, visando obter o
certificado de livre de brucelose e tuberculose;
X estabelecimento de criao livre de brucelose: estabelecimento de criao que obteve certificado de livre de brucelose
aps concluir saneamento para esta enfermidade e mantm rotina
de diagnstico prevista neste Regulamento;
XI estabelecimento de criao livre de tuberculose:
estabelecimento de criao que obteve certificado de livre de
tuberculose aps concluir saneamento para esta enfermidade e
mantm rotina de diagnstico, prevista neste Regulamento;
XII estabelecimento de criao monitorado para brucelose
e tuberculose: estabelecimento de criao especializado em pecuria
de corte que mantm rotina de diagnstico, em fmeas com idade
igual ou superior a 24 (vinte e quatro) meses e em machos
reprodutores, de acordo com o previsto neste Regulamento;
XIII laboratrio credenciado: laboratrio que recebe, por
delegao de competncia do Departamento de Defesa Animal,
ato de credenciamento para realizao de diagnstico laboratorial
de brucelose ou tuberculose;
XIV laboratrio oficial credenciado: laboratrio de instituio
federal, estadual ou municipal, que tenha sido credenciado pelo
Departamento de Defesa Animal, para realizar diagnstico
laboratorial de brucelose ou tuberculose;
XV laboratrio de referncia: laboratrio pertencente rede
do Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento;
XVI mdico veterinrio cadastrado: mdico veterinrio que
atua no setor privado, cadastrado no servio de defesa oficial
estadual para executar a vacinao contra a brucelose ou outras
144

atividades previstas no Programa Nacional de Controle e Erradicao

da Brucelose e Tuberculose Animal;
XVII mdico veterinrio habilitado: o mdico veterinrio
que atua no setor privado e que, aprovado em Curso de
Treinamento em Mtodos de Diagnstico e Controle da Brucelose
e Tuberculose, reconhecido pelo Departamento de Defesa Animal,
est apto a executar determinadas atividades previstas no
Programa Nacional de Controle e Erradicao da Brucelose e da
Tuberculose Animal, sob a superviso do servio de defesa oficial
estadual e federal;
XVIII mdico veterinrio oficial: mdico veterinrio do servio
de defesa oficial;
XIX proprietrio: todo aquele que seja possuidor,
depositrio ou, a qualquer ttulo, mantenha em seu poder ou sob
sua guarda bovinos ou bubalinos;
XX rebanho: conjunto de animais criados sob condies
comuns de manejo, em um mesmo estabelecimento de criao;
XXI animais de rebanho geral: animais no registrados em
entidades reconhecidas pelo Ministrio da Agricultura, Pecuria e
Abastecimento;
XXII animais registrados: animais de valor zootcnico,
registrados em entidades reconhecidas pelo Ministrio da
Agricultura, Pecuria e Abastecimento;
XXIII teste de rotina: o primeiro teste de diagnstico para
brucelose ou tuberculose, usualmente aplicado em grande nmero
de animais com condio sanitria desconhecida para aquelas
enfermidades, visando identificar animais com suspeita de infeco
ou obter diagnstico conclusivo;
XXIV teste(s) confirmatrio(s): um ou mais testes utilizados
para obter diagnstico conclusivo em animais que apresentaram
previamente reao em teste de rotina;
XXV teste de rebanho: um ou mais testes de diagnstico
aplicados simultaneamente em todos os animais presentes num
rebanho, excluindo-se aqueles que, de acordo com este
Regulamento, no devem ser submetidos a testes de diagnstico
para brucelose ou tuberculose;
145

XXVI prevalncia: nmero total de animais infectados em

um determinado momento, dividido pelo nmero total de animais
em risco de adquirir a infeo, no mesmo momento;
XXVII incidncia: nmero de novos casos de animais
infectados em uma determinada populao, durante um perodo
de tempo especificado;
XXVIII sensibilidade de diagnstico: capacidade de um teste
de diagnstico classificar como positivos animais infectados;
XXIX especificidade de diagnstico: capacidade de um teste
de diagnstico classificar como negativos animais no infectados.
Captulo II
Dos Objetivos do Programa e da Estratgia de Atuao
Art. 2 O Programa Nacional de Controle e Erradicao da
Brucelose e Tuberculose Animal tem como objetivos especficos:
I baixar a prevalncia e a incidncia da brucelose e da
tuberculose;
II certificar um nmero elevado de estabelecimentos de
criao, nos quais o controle e erradicao destas enfermidades
sejam executados com rigor e eficcia, objetivando aumentar a
oferta de produtos de baixo risco para a sade pblica.
Art. 3 A estratgia de atuao do Programa Nacional de
Controle e Erradicao da Brucelose e Tuberculose Animal baseada
na adoo de procedimentos de defesa sanitria animal compulsrios, complementados por medidas de adeso voluntria que
visam proteger a sade pblica e desenvolver os fundamentos de
aes futuras para a erradicao dessas enfermidades. Considerando a epidemiologia da brucelose e da tuberculose, as medidas
sanitrias deste Programa so principalmente aplicadas populao
de bovinos e bubalinos, devendo ser destacadas:
I a vacinao obrigatria de fmeas, entre trs e oito meses
de idade, contra a brucelose, que visa baixar a prevalncia e a
incidncia desta enfermidade;
II o controle do trnsito interestadual de animais destinados
reproduo e da participao de machos e fmeas reprodutores
146

em exposies, feiras, leiles e outras aglomeraes animais, com

o objetivo de evitar a disseminao da brucelose e da tuberculose;
III a certificao voluntria de estabelecimentos de criao
livres de brucelose e tuberculose, nos quais so aplicadas rigorosas
medidas de saneamento e vigilncia sanitria ativa, que contribuiro
para combater essas doenas, para melhorar o padro sanitrio
dos produtos de origem animal, principalmente do leite e derivados,
e para agregar valor aos produtos da pecuria;
IV a certificao voluntria de estabelecimentos de criao
monitorados para brucelose e tuberculose, que procura os mesmos
objetivos definidos no inciso anterior, porm utilizando procedimentos de gesto de risco adaptados s condies de manejo e ao
tamanho dos rebanhos de corte.
Art. 4 Para execuo de atividades previstas neste Programa,
o servio de defesa oficial habilitar mdicos veterinrios que atuam
no setor privado e credenciar laboratrios que no pertencem
rede do Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento, sendo
necessrio capacitar os profissionais envolvidos e padronizar as
aes por eles desenvolvidas.
1 Para habilitao de mdicos veterinrios, sero reconhecidos e padronizados cursos especficos de treinamento em mtodos
de diagnstico e controle da brucelose e tuberculose, realizados
em instituies de ensino ou pesquisa em medicina veterinria.
2 O Departamento de Defesa Animal credenciar
laboratrios privados e oficiais para garantir capacidade de
diagnstico adequada s necessidades deste Programa.
Art. 5 A eficcia das aes sanitrias depende da qualidade
e padronizao dos mtodos de diagnstico e dos instrumentos
profilticos utilizados. Este Programa contempla e padroniza
tcnicas disponveis no pas e referenciadas pela Organizao
Mundial de Sade Animal (OIE), que garantem sensibilidade e
especificidade de diagnstico adequadas. Prev-se a possibilidade
de introduzir novos testes de diagnstico e vacinas, de forma a
acompanhar os avanos cientficos e tecnolgicos.
Art. 6 A credibilidade das medidas propostas neste
Programa est diretamente associada s aes de monitoramento
147

e fiscalizao do servio de defesa oficial, realizadas em colaborao

com o servio de inspeo oficial. O servio de defesa oficial
certificar a qualidade e eficcia das medidas sanitrias, atuando
em pontos crticos do Programa.
Captulo III
Da Vacinao Contra a Brucelose
Art. 7 obrigatria a vacinao de todas as fmeas das
espcies bovina e bubalina, na faixa etria de trs a oito meses.
1 A marcao das fmeas vacinadas obrigatria,
utilizando-se ferro candente, no lado esquerdo da cara, com um V,
conforme figura a seguir, acompanhado do algarismo final do ano
de vacinao.

2 Excluem-se do disposto no 1 as fmeas destinadas

ao Registro Genealgico, quando devidamente identificadas, e as
fmeas identificadas individualmente por meio de sistema aprovado
pelo Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento.
Art. 8 A vacinao ser efetuada sob a responsabilidade
tcnica de mdico veterinrio cadastrado, utilizando dose nica de
vacina viva liofilizada, elaborada com amostra 19 de Brucella abortus
(B19).
Pargrafo nico. Onde no houver mdicos veterinrios
cadastrados ou em regies onde eles no atenderem plenamente
a demanda do PNCEBT, o servio de defesa oficial poder assumir
a responsabilidade tcnica ou mesmo a execuo da vacinao.
Art. 9 O cadastro de mdicos veterinrios ser gratuito.
Art. 10. proibida a utilizao da vacina B19 em machos
de qualquer idade e em fmeas com idade superior a 8 (oito) meses.
148

Art. 11. obrigatria a comprovao da vacinao das

bezerras na unidade local do servio de defesa oficial, no mnimo
uma vez por semestre.
Pargrafo nico. A comprovao da vacinao ser feita por
meio de atestado emitido por mdico veterinrio cadastrado, de
acordo com normas e usando modelo a ser definido pelo
Departamento de Defesa Animal.
Art. 12. A vacinao de fmeas com idade superior a oito
meses poder ser autorizada com imungenos que no interferem
nos testes de diagnstico, nas condies definidas pelo
Departamento de Defesa Animal.
Art. 13. O Diretor do Departamento de Defesa Animal poder
alterar as estratgias e normas de vacinao de acordo com a
evoluo da situao epidemiolgica dos Estados ou parte deles.
Captulo IV
Da Produo, Controle e Comercializao de Vacinas
Contra a Brucelose
Art. 14. A produo e o controle de todas as partidas de
vacina liofilizada obedecero s normas do Departamento de Defesa
Animal.
Art. 15. Para comercializao de vacina ser exigida a
apresentao de receita emitida por mdico veterinrio cadastrado,
a qual ficar retida no estabelecimento comercial disposio da
fiscalizao do servio de defesa oficial.
Pargrafo nico. O estabelecimento responsvel pela
comercializao da vacina fica obrigado a comunicar a compra,
venda e estoque de vacina, na unidade local do servio de defesa
oficial estadual, utilizando modelo estabelecido pelo Departamento
de Defesa Animal.
Art. 16. A demanda anual de vacinas em cada Estado dever
ser notificada pelo servio de defesa oficial estadual ao servio de
defesa oficial federal no Estado, at o ms de novembro do ano
anterior.
149

Captulo V
Da Produo, Controle e Distribuio de Antgenos para
Diagnstico de Brucelose
Art. 17. Os antgenos a serem utilizados nos testes sorolgicos
para diagnstico de brucelose sero o antgeno acidificado
tamponado, o antgeno para soroaglutinao lenta e o antgeno
para o teste do anel em leite, produzidos e controlados segundo
normas aprovadas pelo Departamento de Defesa Animal.
Pargrafo nico. Outros antgenos podero ser utilizados para
diagnstico de brucelose, aps aprovao e nas condies definidas
pelo Departamento de Defesa Animal.
Art. 18. A distribuio de antgenos ser controlada pelo
servio de defesa oficial, devendo os mesmos ser fornecidos somente
a mdicos veterinrios habilitados, a laboratrios credenciados, a
laboratrios oficiais credenciados e a instituies de ensino ou
pesquisa.
1 O mdico veterinrio habilitado responsvel pela
aquisio do antgeno dever fornecer ao servio de defesa oficial
relatrio de utilizao do mesmo, segundo condies a serem
definidas pelo Departamento de Defesa Animal.
2 A partir da data de publicao deste Regulamento, at
31 de julho de 2004, mdicos veterinrios cadastrados sero
autorizados a adquirir antgeno para diagnstico sorolgico de
brucelose, respeitando as condies estabelecidas pelo
Departamento de Defesa Animal.
Captulo VI
Do Diagnstico Indireto da Brucelose
Art. 19. A realizao de testes de diagnstico indireto para
brucelose dever obedecer a este Regulamento e seguir
recomendaes complementares determinadas pelo Departamento
de Defesa Animal.
Art. 20. Os testes sorolgicos de diagnstico para brucelose
sero realizados em:
150

I fmeas com idade igual ou superior a 24 meses, vacinadas

entre trs e oito meses de idade;
II fmeas no vacinadas e machos, com idade superior a
oito meses.
1 Fmeas submetidas a testes sorolgicos de diagnstico
para brucelose no intervalo de 15 dias antes do parto at 15 dias
aps o parto devero ser retestadas entre 30 a 60 dias aps o
parto.
2 Excluem-se dos testes sorolgicos de diagnstico para
brucelose os animais castrados.
Art. 21. O teste do Antgeno Acidificado Tamponado (AAT)
ser utilizado como teste de rotina, de acordo com as seguintes
condies e critrios:
I ser realizado por mdico veterinrio habilitado, por
laboratrio credenciado, por laboratrio oficial credenciado ou,
at 31 de julho de 2004, por mdico veterinrio cadastrado;
II a presena de qualquer aglutinao classificar o animal
como reagente ao teste;
III animais no reagentes so considerados negativos;
IV animais reagentes podero ser submetidos a teste
confirmatrio ou, a critrio do mdico veterinrio habilitado, ser
destinados ao sacrifcio ou destruio, conforme o disposto no
Captulo IX.
Art. 22. O teste do 2-Mercaptoetanol (2-ME) ser utilizado
como teste confirmatrio, em animais reagentes ao teste do AAT,
de acordo com as seguintes condies e critrios:
I ser realizado por laboratrio credenciado ou laboratrio
oficial credenciado;
II a interpretao do teste obedecer s Tabelas 1 e 2:

151

Tabela 1 Interpretao do teste do 2-ME para fmeas com idade

igual ou superior a 24 meses, vacinadas entre trs e oito
meses de idade
Teste de soroaglutinao
lenta (UI/ml)

Teste do 2-ME
(UI/ml)

Interpretao

< 50

< 25

negativo

> 100

< 25

inconclusivo

> 25

> 25

positivo

UI - Unidade Internacional

Tabela 2 Interpretao do teste do 2-ME para fmeas no vacinadas

e machos, com idade superior a oito meses
Teste de soroaglutinao
lenta (UI/ml)

Teste do 2-ME
(UI/ml)

Interpretao

< 25

< 25

negativo

> 50

< 25

inconclusivo

> 25

> 25

positivo

UI - Unidade Internacional

III animais reagentes inconclusivos podero ser, a critrio

do mdico veterinrio habilitado:
a) submetidos ao teste de fixao de complemento; ou
b) retestados em um intervalo de 30 a 60 dias, usando o
teste do 2-ME, sendo classificados como reagentes positivos se
apresentarem, no reteste, resultado positivo ou segundo resultado
inconclusivo; ou
c) destinados ao sacrifcio ou destruio, conforme o disposto
no Captulo IX.
Art. 23. O teste de Fixao de Complemento ser utilizado
como teste confirmatrio, realizado e interpretado de acordo com
recomendaes do Departamento de Defesa Animal, e dever ser:
I realizado por laboratrio oficial credenciado;
152

II utilizado para o trnsito internacional de animais;

III utilizado para teste de animais reagentes ao teste do
AAT ou de animais que apresentaram resultado inconclusivo ao
teste do 2-ME.
Art. 24. O Teste do Anel em Leite (TAL) poder ser utilizado
pelo servio de defesa oficial, ou por mdico veterinrio habilitado,
para monitoramento de estabelecimentos de criao certificados
como livres de brucelose, ou para outros fins, segundo critrios
estabelecidos pelo servio de defesa oficial.
1 Considera-se o resultado do teste como positivo quando
a intensidade da cor do anel for igual ou maior que a da coluna de
leite.
2 Considera-se o resultado do teste como negativo quando
a intensidade da cor do anel for menor que a da coluna de leite.
3 Em casos de positividade, os animais do estabelecimento
de criao devero ser submetidos a testes sorolgicos individuais
para diagnstico de brucelose.
Art. 25. Outros testes de diagnstico para brucelose podero
ser utilizados para complementar ou substituir os testes
especificados nos arts. 21, 22, 23 e 24, aps aprovao e nas
condies estabelecidas pelo Departamento de Defesa Animal.
Captulo VII
Da Produo, Controle e Distribuio de Tuberculinas
Art. 26. Sero utilizadas somente tuberculinas PPD (Derivado
Protico Purificado) bovina e aviria, produzidas e controladas de
acordo com normas estabelecidas pelo Departamento de Defesa
Animal.
Art. 27. O controle da distribuio de tuberculinas ser
efetuado pelo servio de defesa oficial, devendo as mesmas ser
fornecidas somente a mdicos veterinrios habilitados e a
instituies de ensino ou pesquisa.
153

 1 O mdico veterinrio habilitado responsvel pela

aquisio da tuberculina dever fornecer ao servio de defesa oficial
relatrio de utilizao da mesma, segundo condies a serem
definidas pelo Departamento de Defesa Animal.
2 A partir da data de publicao deste Regulamento at
31 de julho de 2004, mdicos veterinrios cadastrados sero
autorizados a adquirir tuberculina, respeitando as condies
estabelecidas pelo Departamento de Defesa Animal.
Captulo VIII
Do Diagnstico Indireto da Tuberculose
Art. 28. Para o diagnstico indireto da tuberculose, sero
utilizados testes alrgicos de tuberculinizao intradrmica em
bovinos e bubalinos com idade igual ou superior a seis semanas, a
serem realizados por mdico veterinrio habilitado ou, at 31 de
julho de 2004, por mdico veterinrio cadastrado.
Pargrafo nico. Fmeas submetidas a teste de diagnstico
para tuberculose no intervalo de 15 dias antes do parto at 15 dias
aps o parto devero ser retestadas entre 60 a 90 dias aps o
parto, obedecendo a um intervalo mnimo de 60 dias entre testes.
Art. 29. obrigatria a utilizao de material prprio para
tuberculinizao, seguindo as determinaes do Departamento de
Defesa Animal.
Art. 30. O Teste Cervical Simples (TCS) o teste de rotina
recomendado, observando-se as seguintes condies e critrios:
I deve ser realizado com inoculao intradrmica de
tuberculina PPD bovina, na dosagem de 0,1 mL, na regio cervical
ou na regio escapular de bovinos, devendo a inoculao ser
efetuada de um mesmo lado de todos os animais do
estabelecimento de criao;
II o local da inoculao ser demarcado por tricotomia e a
espessura da dobra da pele medida com cutmetro antes da
inoculao;
154

III aps 72 horas, mais ou menos 6 horas da inoculao,

ser realizada nova medida da dobra da pele, no local de inoculao
da tuberculina PPD bovina;
IV o aumento da espessura da dobra da pele (B) ser
calculado subtraindo-se da medida da dobra da pele 72 horas,
mais ou menos 6 horas, aps a inoculao, a medida da dobra da
pele no dia da inoculao da tuberculina PPD bovina;
V os resultados em bovinos sero interpretados de acordo
com a Tabela 3:
Tabela 3 Interpretao do teste cervical simples em bovinos
Caractersticas da reao
B (mm)

Sensibilidade

Consistncia

Outras
alteraes

Interpretao

0 a 1,9

negativo

2,0 a 3,9

pouca dor

endurecida

delimitada

inconclusivo

2,0 a 3,9

muita dor

macia

exsudato,
necrose

positivo

> 4,0

positivo

VI os animais reagentes inconclusivos podero ser

submetidos a teste confirmatrio, em um intervalo de 60 a 90 dias
ou, a critrio do mdico veterinrio habilitado, ser considerados
positivos e destinados ao sacrifcio ou destruio, conforme o
disposto no Captulo IX;
Art. 31. O teste da prega caudal (TPC) pode ser utilizado
como teste de rotina, exclusivamente em estabelecimentos de
criao especializados na pecuria de corte e de acordo com as
seguintes condies e critrios:
I a tuberculina (PPD) bovina ser inoculada por via
intradrmica na dosagem de 0,1 mL, seis a dez centmetros da
base da cauda, na juno das peles pilosa e glabra, devendo a
inoculao ser efetuada de um mesmo lado da prega caudal de
todos os animais do estabelecimento de criao;
155

II a leitura e interpretao dos resultados sero realizadas

72 horas, mais ou menos 6 horas, aps a inoculao da tuberculina,
comparando-se a prega inoculada com a prega do lado oposto,
por avaliao visual e palpao;
III qualquer aumento de espessura na prega inoculada
classificar o animal como reagente;
IV os animais reagentes podero ser submetidos a teste
confirmatrio, num intervalo de 60 a 90 dias, ou, a critrio do
mdico veterinrio habilitado, ser destinados ao sacrifcio ou
destruio, conforme o disposto no Captulo IX.
Art. 32. O Teste Cervical Comparativo (TCC) o teste
confirmatrio utilizado em animais inconclusivos ao Teste Cervical
Simples e reagentes ao Teste da Prega Caudal, descritos nos arts.
30 e 31. tambm recomendado como teste de rotina para
estabelecimentos de criao com ocorrncia de reaes
inespecficas, estabelecimentos certificados como livres e para
estabelecimentos de criao de bubalinos, visando garantir boa
especificidade diagnstica, devendo ser utilizado de acordo com
as seguintes condies e critrios:
I as inoculaes das tuberculinas PPD aviria e bovina sero
realizadas por via intradrmica, na dosagem de 0,1 mL, na regio
cervical ou na regio escapular, a uma distncia entre as duas
inoculaes de 15 a 20 cm, sendo a PPD aviria inoculada
cranialmente e a PPD bovina caudalmente, devendo a inoculao
ser efetuada de um mesmo lado de todos os animais do
estabelecimento de criao;
II os locais das inoculaes sero demarcados por tricotomia
e a espessura da dobra da pele medida com cutmetro, antes da
inoculao;
III aps 72 horas, mais ou menos 6 horas, da inoculao,
ser realizada nova medida da dobra da pele, no local de inoculao
das tuberculinas PPD aviria e bovina;
IV o aumento da espessura da dobra da pele ser calculado
subtraindo-se da medida da dobra da pele 72 horas, mais ou menos
6 horas, aps a inoculao, a medida da dobra da pele no dia da
156

inoculao para a tuberculina PPD aviria (A) e a tuberculina PPD

bovina (B). A diferena de aumento da dobra da pele provocada
pela inoculao da tuberculina PPD bovina (B) e da tuberculina
PPD aviria (A) ser calculada subtraindo-se A de B.
V os resultados do teste comparativo em bovinos sero
interpretados de acordo com a Tabela 4:
Tabela 4 Interpretao do teste cervical comparativo em bovinos

B - A (mm)

Interpretao

B < 2,0

negativo

B < A

<0

negativo

B > A

0,0 a 1,9

negativo

B > A

2,0 a 3,9

inconclusivo

B > A

> 4,0

positivo

VI os animais reagentes inconclusivos podero ser

submetidos a um segundo teste cervical comparativo, num intervalo
mnimo de 60 dias entre os testes, ou, a critrio do mdico
veterinrio habilitado, ser considerados positivos e destinados ao
sacrifcio ou destruio, conforme disposto no Captulo IX;
VII os animais que apresentarem dois resultados
inconclusivos consecutivos sero classificados como reagentes
positivos;
VIII os resultados em bubalinos podero ser interpretados
de acordo com a Tabela 4, at a determinao de critrios de
interpretao especficos para essa espcie.
Art. 33. Outros testes de diagnstico para tuberculose
podero ser utilizados para complementar ou substituir os testes
especificados nos arts. 30, 31 e 32, aps aprovao e nas condies
estabelecidas pelo Departamento de Defesa Animal.

157

Captulo IX
Dos Animais Reagentes Positivos aos Testes de
Diagnstico para Brucelose ou Tuberculose
Art. 34. Animais reagentes positivos a teste de diagnstico
para brucelose ou tuberculose sero marcados a ferro candente
no lado direito da cara com um P contido num crculo de oito
centmetros de dimetro, conforme figura a seguir.

Art. 35. Animais reagentes positivos devero ser isolados de

todo o rebanho e sacrificados no prazo mximo de 30 (trinta) dias
aps o diagnstico, em estabelecimento sob servio de inspeo
oficial, indicado pelo servio de defesa oficial federal ou estadual.
1 Animais reagentes positivos devero ser imediatamente
afastados da produo leiteira.
2 O servio de inspeo oficial do estabelecimento onde
ser realizado o sacrifcio dever ser notificado da chegada dos
animais com antecedncia mnima de 12 horas, de forma a permitir
a adoo das medidas previstas na legislao pertinente.
3 Animais reagentes positivos devero chegar ao
estabelecimento de abate acompanhados de Guia de Trnsito
Animal (GTA), informando condio de positivo, conforme previsto
na legislao pertinente.
Art. 36. Na impossibilidade de sacrifcio em estabelecimento
sob servio de inspeo oficial, indicado pelo servio de defesa
oficial federal e estadual, os animais sero destrudos no
estabelecimento de criao, sob fiscalizao direta da unidade local
158

do servio de defesa oficial, respeitando procedimentos

estabelecidos pelo Departamento de Defesa Animal.
Art. 37. proibido o egresso de animais reagentes positivos
e de animais reagentes inconclusivos do estabelecimento de criao,
salvo quando comprovadamente destinados ao sacrifcio em
estabelecimento sob servio de inspeo oficial, indicado pelo
servio de defesa oficial federal ou estadual.
Captulo X
Da Habilitao e da Capacitao de Mdicos Veterinrios
Art. 38. As Delegacias Federais de Agricultura, em conjunto
com os servios de defesa sanitria animal dos Estados, habilitaro
mdicos veterinrios que atuam no setor privado para a realizao
de testes de diagnstico e atuao no processo de certificao de
propriedades, na respectiva Unidade da Federao.
Art. 39. O mdico veterinrio habilitado dever:
I estar em situao regular com o Conselho de Medicina
Veterinria da(s) Unidade(s) Federativa(s) de atuao;
II ter sido aprovado em Curso de Treinamento em Mtodos
de Diagnstico e Controle da Brucelose e Tuberculose, reconhecido
pelo Departamento de Defesa Animal;
III cumprir este Regulamento e outras normas complementares estabelecidas pelo Departamento de Defesa Animal;
IV possuir infra-estrutura e material adequado execuo
dos testes de diagnstico para brucelose e tuberculose, conforme
determinao do Departamento de Defesa Animal;
V fornecer informaes e apresentar relatrios de atividade,
relacionados com o Programa Nacional de Controle e Erradicao
da Brucelose e da Tuberculose Animal, na unidade local do servio
de defesa oficial, com periodicidade e em modelos estabelecidos
pelo Departamento de Defesa Animal.
Art. 40. A habilitao ser suspensa pela Delegacia Federal
de Agricultura em caso de descumprimento deste Regulamento
159

ou de outras normas estabelecidas em legislao sanitria do

Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento.
Art. 41. Mdicos veterinrios oficiais devero ser capacitados
e aprovados em Curso de Treinamento em Mtodos de Diagnstico
e Controle da Brucelose e Tuberculose, reconhecido pelo
Departamento de Defesa Animal.
Captulo XI
Do Reconhecimento de Cursos de Treinamento para
Habilitao e Capacitao de Mdicos Veterinrios
Art. 42. As instituies de ensino ou pesquisa em medicina
veterinria interessadas em oferecer Cursos de Treinamento em
Mtodos de Diagnstico e Controle da Brucelose e Tuberculose, com
o objetivo de capacitar e permitir a habilitao de mdicos veterinrios
que desejem participar do Programa Nacional de Controle e
Erradicao da Brucelose e Tuberculose Animal devero preencher
todos os requisitos definidos pelo Departamento de Defesa Animal.
Art. 43. Cada Curso de Treinamento em Mtodos de Diagnstico e Controle da Brucelose e Tuberculose ter a durao mnima
de 40 horas, no podendo ser excedido o nmero de 20
participantes.
Art. 44. As matrias terico-prticas lecionadas no Curso de
Treinamento em Mtodos de Diagnstico e Controle da Brucelose
e Tuberculose devero estar em conformidade com este
Regulamento e com outras normas complementares estabelecidas
pelo Departamento de Defesa Animal.
Art. 45. A aprovao no Curso de Treinamento em Mtodos
de Diagnstico e Controle da Brucelose e Tuberculose fica
condicionada avaliao terico-prtica.
Art. 46. O Departamento de Defesa Animal realizar
seminrios sobre o Programa Nacional de Controle e Erradicao
da Brucelose e da Tuberculose Animal, com o objetivo de habilitar
mdicos veterinrios instrutores dos cursos de treinamento em
160

mtodos de diagnstico e controle da brucelose e tuberculose e de

padronizar procedimentos.
Captulo XII
Do Credenciamento de Laboratrios para o Diagnstico
de Brucelose e de Tuberculose
Art. 47. O Departamento de Defesa Animal credenciar
laboratrios privados, aos quais sero delegadas funes de
diagnstico para brucelose ou tuberculose, cabendo-lhe determinar
quais os testes de diagnstico que sero realizados nesses laboratrios
e quais os requisitos necessrios para obter o credenciamento.
Art. 48. O Departamento de Defesa Animal credenciar
laboratrios oficiais, aos quais sero delegadas funes de diagnstico
para brucelose ou tuberculose, cabendo-lhe determinar quais os
testes de diagnstico que sero realizados nesses laboratrios e quais
os requisitos necessrios para obter o credenciamento.
Captulo XIII
Dos Laboratrios de Referncia
Art. 49. O Departamento de Defesa Animal designar
laboratrios de referncia para brucelose e tuberculose que devero:
I ser responsveis pela produo de antgenos de brucelose
e tuberculinas de referncia ou para utilizao em programas ou
em situaes excepcionais de interesse do Departamento de Defesa
Animal;
II realizar tcnicas diretas e indiretas de diagnstico para
brucelose e tuberculose em situaes a serem definidas pelo
Departamento de Defesa Animal;
III efetuar o controle oficial das partidas de antgenos de
brucelose e tuberculinas produzidas no pas;
IV controlar a qualidade das vacinas comerciais contra a
brucelose;
V realizar o isolamento e a caracterizao epidemiolgica
de amostras de campo em situaes a serem definidas pelo
Departamento de Defesa Animal;
161

VI executar e colaborar em trabalhos de pesquisa e avaliar

novos mtodos de diagnstico e novas vacinas.
Art. 50. Os laboratrios de referncia devero fornecer
amostras padro para a produo de antgenos, alrgenos e
imungenos.
Captulo XIV
Das Disposies Gerais para Estabelecimento de Criao
Certificado, ou em Certificao, para a Condio de Livre
de Brucelose e de Tuberculose
Art. 51. O certificado de estabelecimento de criao livre de
brucelose ou de tuberculose ser emitido pela Delegacia Federal
de Agricultura.
Art. 52. A certificao de estabelecimento de criao livre de
brucelose e de tuberculose de adeso voluntria, devendo ser
formalmente solicitada na unidade local do servio de defesa oficial,
na qual o estabelecimento de criao encontra-se cadastrado.
Art. 53. O estabelecimento de criao certificado, ou em
certificao, para a condio de livre de brucelose e tuberculose
fica obrigado a:
I cumprir medidas de controle e erradicao da brucelose e
da tuberculose, previstas neste Regulamento;
II ter superviso tcnica de mdico veterinrio habilitado;
III utilizar sistema de identificao individual dos animais,
indicado pelo Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento
ou, na ausncia deste, possuir sistema de identificao animal
prprio, desde que aprovado pelo servio de defesa oficial;
IV custear as atividades de controle e erradicao da
brucelose e da tuberculose.
Art. 54. O ingresso de animais em estabelecimento de criao
certificado, ou em certificao, para a condio de livre de brucelose
e tuberculose fica condicionado a:
162

I terem origem em estabelecimento de criao livre de

brucelose ou realizar 2 (dois) testes de diagnstico para brucelose,
cumprindo os seguintes requisitos:
a) os dois testes devero ter resultado negativo;
b) o primeiro teste dever ser realizado durante os 30 (trinta)
dias que antecedem o embarque e o segundo teste at 30 (trinta)
dias aps o ingresso no estabelecimento de criao de destino,
num intervalo mnimo de 30 dias entre testes, sendo que os animais
devero permanecer isolados desde o ingresso no estabelecimento
at o segundo resultado negativo;
c) caso no seja possvel manter os animais isolados no
estabelecimento de criao de destino, os dois testes podero ser
efetuados durante os 60 dias que antecedem o embarque, num
intervalo de 30 a 60 dias entre testes;
d) os testes sero realizados por mdico veterinrio habilitado,
por laboratrio credenciado ou por laboratrio oficial credenciado;
e) fmeas de at 24 meses de idade, vacinadas entre trs e
oito meses de idade, s podem ingressar no estabelecimento de
criao se forem provenientes de estabelecimento de criao livre
de brucelose.
II - terem origem em estabelecimento de criao livre de
tuberculose ou realizarem dois testes de diagnstico para
tuberculose, cumprindo os seguintes requisitos:
a) os dois testes devero ter resultado negativo;
b) o primeiro teste dever ser realizado durante os 30 (trinta)
dias que antecedem o embarque e o segundo teste at 90 dias
aps o ingresso no estabelecimento de criao de destino, num
intervalo mnimo de 60 dias entre testes, sendo que os animais
devero permanecer isolados desde o ingresso no estabelecimento
at o segundo resultado negativo;
c) caso no seja possvel manter os animais isolados no
estabelecimento de criao de destino, os dois testes podero ser
efetuados durante os 90 dias que antecedem o embarque, num
intervalo mnimo de 60 dias entre testes;
d) os testes sero realizados por mdico veterinrio habilitado.
163

Art. 55. O mdico veterinrio oficial poder, em qualquer

momento e sem nus para o proprietrio, colher material biolgico
para testes de diagnstico para brucelose ou tuberculose e
acompanhar ou realizar testes de diagnstico para tuberculose,
com o objetivo de verificar e validar a condio sanitria do
estabelecimento de criao certificado, ou em certificao.
Captulo XV
Do Saneamento para Certificao de Estabelecimento
de Criao Livre de Brucelose
Art 56. O estabelecimento de criao que entra em
saneamento para obter certificado de livre de brucelose deve
cumprir as medidas seguintes:
I realizar testes de rebanho para diagnstico de brucelose,
num intervalo de 30 a 90 dias entre testes, at obter um resultado
negativo, sendo que os animais reagentes positivos devero ser
sacrificados ou destrudos, conforme o disposto no Captulo IX;
II o saneamento termina aps obter-se 3 (trs) testes de
rebanho negativos consecutivos, num intervalo de 90 a 120 dias
entre o primeiro e o segundo testes e de 180 a 240 dias entre o
segundo e o terceiro testes;
III animais com reao inconclusiva aos testes de diagnstico
para brucelose devero ser isolados de todo o rebanho e retestados
30 a 60 dias aps o teste anterior;
IV a colheita de sangue para realizao do terceiro teste de
rebanho, especificado no inciso II, dever ser acompanhada por
mdico veterinrio do servio de defesa oficial estadual e os testes
devero ser efetuados em laboratrio oficial credenciado, cabendo
ao mdico veterinrio habilitado informar unidade local do servio
de defesa oficial a data da colheita de sangue, com antecedncia
mnima de 15 dias.

164

Captulo XVI
Da Certificao de Estabelecimento de
Criao Livre de Brucelose
Art. 57. O certificado de estabelecimento de criao livre de
brucelose ser emitido pela Delegacia Federal de Agricultura,
condicionado ao cumprimento dos requisitos seguintes:
I todas as fmeas, entre trs e oito meses de idade, devem
ser vacinadas contra a brucelose com vacina B19;
II devem submeter-se a testes de diagnstico para brucelose
todos os animais especificados no art. 20;
III obter trs testes de rebanho negativos consecutivos,
realizados com intervalo de 90 a 120 dias entre o primeiro e o segundo
testes e de 180 a 240 dias entre o segundo e o terceiro testes.
Art. 58. O certificado de estabelecimento de criao livre de
brucelose tem validade de 12 (doze) meses.
Art. 59. A renovao do certificado de estabelecimento de
criao livre de brucelose dever ser requerida anualmente na
unidade local do servio de defesa oficial, apresentando resultado
negativo nos testes de diagnstico para brucelose, realizados em
todos os animais especificados no art. 20.
Art. 60. O mdico veterinrio habilitado dever informar
unidade local do servio de defesa oficial a data de colheita de
sangue para realizao dos testes mencionados no art. 59, com
antecedncia mnima de 15 dias.
Art. 61. A renovao do certificado pode ser prorrogada por
um perodo mximo de 90 dias, quando da necessidade de realizar
novo teste de diagnstico para brucelose em animais que
apresentem resultado inconclusivo no reteste anual.
Art. 62. A deteco de um ou mais animais reagentes
positivos em teste realizado por mdico veterinrio habilitado ou
por mdico veterinrio oficial ou aps confirmao de suspeita
165

clnica resultar na suspenso temporria do certificado de

estabelecimento de criao livre de brucelose. Para retorno
condio de livre necessrio obter 2 (dois) testes de rebanho
negativos, realizados com intervalo de 30 a 90 dias, sendo o primeiro
efetuado 30 a 90 dias aps o sacrifcio ou destruio do ltimo
animal reagente positivo.
Pargrafo nico. A colheita de sangue para realizao do
segundo teste de rebanho, para retorno condio de livre, dever
ser acompanhada por mdico veterinrio do servio de defesa oficial
estadual e os testes devero ser efetuados em laboratrio oficial
credenciado. O mdico veterinrio habilitado dever informar
unidade local do servio de defesa oficial a data da colheita de
sangue, com antecedncia mnima de 15 dias.
Captulo XVII
Do Saneamento para Certificao de Estabelecimento
de Criao Livre de Tuberculose
Art. 63. O estabelecimento de criao que entra em
saneamento para obter certificado de livre de tuberculose deve
cumprir as medidas seguintes:
I realizar testes de rebanho para diagnstico de tuberculose
em todos os animais especificados no art. 28, num intervalo de 90
a 120 dias entre testes, at obter um teste de rebanho negativo,
sendo os animais reagentes positivos sacrificados ou destrudos,
conforme o disposto no Captulo IX;
II o saneamento termina aps obter-se trs testes de
rebanho negativos consecutivos, num intervalo de 90 a 120 dias
entre o primeiro e o segundo testes e de 180 a 240 dias entre o
segundo e o terceiro testes;
III animais com reaes inconclusivas aos testes de
diagnstico para tuberculose devero ser isolados de todo o
rebanho e retestados 60 a 90 dias aps o teste anterior;
IV a realizao do terceiro teste de rebanho, especificado
no inciso II, dever ser acompanhada por mdico veterinrio do
servio de defesa oficial estadual, cabendo ao mdico veterinrio
166

habilitado informar unidade local do servio de defesa oficial a

data do teste, com antecedncia mnima de 15 dias.
Captulo XVIII
Da Certificao de Estabelecimento de Criao Livre de
Tuberculose
Art. 64. O certificado de estabelecimento de criao livre de
tuberculose ser emitido pela Delegacia Federal de Agricultura,
condicionado obteno de trs testes de rebanho negativos
consecutivos, realizados num intervalo de 90 a 120 dias entre o
primeiro e o segundo testes e de 180 a 240 dias entre o segundo e
o terceiro testes.
Art. 65. O certificado de estabelecimento de criao livre de
tuberculose tem validade de 12 (doze) meses.
Art. 66. A renovao do certificado de estabelecimento de
criao livre de tuberculose dever ser requerida anualmente na
unidade local do servio de defesa oficial, apresentando resultado
negativo nos testes de diagnstico para tuberculose, realizados
em todos os animais com idade igual ou superior a seis semanas.
Art. 67. O mdico veterinrio habilitado dever informar
unidade local do servio de defesa oficial a data de realizao dos
testes mencionados no art. 66, com antecedncia mnima de 15
dias.
Art. 68. A renovao do certificado pode ser prorrogada por
um perodo mximo de 90 dias quando da necessidade de realizar
novo teste de diagnstico para tuberculose em animais que
apresentem resultado inconclusivo no reteste anual.
Art. 69. A deteco de um ou mais animais reagente(s)
positivo(s) em teste realizado por mdico veterinrio habilitado ou
por mdico veterinrio oficial, ou aps confirmao de suspeita clnica,
resultar na suspenso temporria do certificado de estabelecimento
de criao livre de tuberculose. Para retorno condio de livre
167

necessrio obter dois testes de rebanho negativos, realizados com

intervalo de 90 a 120 dias, sendo o primeiro realizado 90 a 120 dias
aps o sacrifcio ou destruio do ltimo animal reagente positivo.
Pargrafo nico. A realizao do segundo teste de rebanho,
para retorno condio de livre, dever ser acompanhada por mdico
veterinrio do servio de defesa oficial estadual. O mdico veterinrio
habilitado dever informar unidade local do servio de defesa oficial
a data da realizao do teste, com antecedncia mnima de 15 dias.
Art. 70. A deteco de leses sugestivas de tuberculose
durante a inspeo sanitria post-mortem de animais provenientes
de estabelecimento de criao livre de tuberculose implica no envio
de amostras de leses suspeitas ao laboratrio indicado pelo
Departamento de Defesa Animal e, em se confirmando infeco
por Mycobacterium bovis, todos os animais de idade igual ou
superior a seis semanas devem ser submetidos a testes de
diagnstico para tuberculose, destinando os reagentes positivos
ao sacrifcio ou destruio, aplicando-se o disposto no art. 69.
Captulo XIX
Da Certificao de Estabelecimento de Criao
Monitorado para Brucelose e Tuberculose
Art. 71. O certificado de estabelecimento de criao
monitorado para brucelose e tuberculose ser emitido pela
Delegacia Federal de Agricultura.
Art. 72. A certificao de estabelecimento de criao
monitorado para brucelose e tuberculose de adeso voluntria e
restrita a estabelecimentos de criao especializados em pecuria
de corte, devendo ser formalmente solicitada na unidade local do
servio de defesa oficial, na qual o estabelecimento de criao
encontra-se cadastrado.
Art. 73. O estabelecimento de criao monitorado para
brucelose e tuberculose fica obrigado a:
I cumprir medidas de controle e erradicao da brucelose e
da tuberculose, previstas neste Regulamento;
168

II ter superviso tcnica de mdico veterinrio habilitado;

III utilizar sistema de identificao individual das fmeas
com idade igual ou superior a 24 meses e dos machos reprodutores,
indicado pelo Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento,
ou, na ausncia deste, possuir sistema de identificao animal
prprio, desde que aprovado pelo servio de defesa oficial;
IV vacinar todas as fmeas entre trs e oito meses de idade
contra a brucelose, com vacina B19;
V submeter a testes de diagnstico para brucelose e
tuberculose as fmeas de idade igual ou superior a 24 meses e os
machos reprodutores, sacrificando ou destruindo os animais
reagentes positivos, de acordo com o disposto no Captulo IX;
VI custear as atividades de controle da brucelose e da
tuberculose.
Art. 74. O primeiro teste de diagnstico para brucelose e
tuberculose efetuado no estabelecimento de criao monitorado
ser realizado por amostragem, conforme a Tabela 5, sendo os
animais escolhidos por mtodo aleatrio:
Tabela 5 Tabela de amostragem para o teste inicial em
estabelecimento de criao monitorado, segundo o nmero
de fmeas a partir de 24 meses de idade e de machos
reprodutores existentes no estabelecimento

Existentes

Devem ser testados (*)

< 350

255

351 500

300

501 750

350

751 1500

400

1501 5000

440

> 5000

460

(*) Parmetros de amostragem: (1) probabilidade de deteco de um ou mais animais

reagentes (grau de confiana) = 99%; (2) porcentagem mnima esperada de animais
reagentes no rebanho = 1%.

169

Art. 75. Aps o primeiro teste por amostragem, especificado

no art. 74, o estabelecimento de criao dever manter rotina de
diagnstico, realizando reteste peridico tambm por amostragem,
nas seguintes condies:
I os testes de diagnstico para brucelose devem ser
realizados num intervalo de 10 a 12 meses;
II os testes de diagnstico para tuberculose devem ser
realizados num intervalo de 10 a 12 meses, at obter-se dois
resultados negativos consecutivos em todos os animais testados,
passando ento a ser realizados num intervalo de 18 a 24 meses;
III o reteste peridico ser realizado de acordo com a
Tabela 6:
Tabela 6 Tabela de amostragem para o reteste peridico em
estabelecimento de criao monitorado, segundo o nmero
de fmeas a partir de 24 meses de idade e de machos
reprodutores existentes no estabelecimento

Existentes

Devem ser testados (*)

< 350

200

351 500

225

501 750

250

751 1500

270

1501 5000

290

> 5000

300

(*) Parmetros de amostragem: (1) probabilidade de deteco de um ou mais animais

reagentes (grau de confiana) = 95%; (2) porcentagem mnima esperada de animais
reagentes no rebanho = 1%.

Art. 76. No caso de serem detectados um ou mais animais

reagentes positivos aos testes de diagnstico para brucelose
durante as amostragens, especificadas nos arts. 74 e 75, em outro
teste realizado sob responsabilidade de mdico veterinrio
habilitado ou oficial, ou aps confirmao de suspeita clnica,
todas as fmeas a partir de 24 meses de idade e todos os machos
170

reprodutores, no includos na amostra inicial, devem ser testados

para essa enfermidade.
Art. 77. No caso de serem detectados um ou mais animais
reagentes positivos aos testes de diagnstico para tuberculose
durante as amostragens, especificadas nos arts. 74 e 75, em outro
teste realizado por mdico veterinrio habilitado ou oficial, ou aps
confirmao de suspeita clnica, todas as fmeas a partir de 24
meses de idade e todos os machos reprodutores, no includos na
amostra inicial, devem ser testados para essa enfermidade.
Art. 78. O certificado de estabelecimento de criao
monitorado para brucelose e tuberculose tem validade de 12 meses
e ser emitido aps a obteno de um teste com 100% da amostragem inicial negativa. Caso existam animais positivos, o certificado
somente poder ser emitido aps o exame de todas as fmeas maiores
de 24 meses de idade e machos reprodutores, no includos na
amostragem inicial, com a destruio/sacrifcio de todos os positivos.
Art. 79. A renovao do certificado de estabelecimento de
criao monitorado para brucelose e tuberculose dever ser
requerida anualmente na unidade local do servio de defesa oficial,
apresentando resultado negativo nos testes de diagnstico
realizados e na condio de todos os animais reagentes positivos
para brucelose e/ou tuberculose serem sacrificados ou destrudos,
conforme o disposto no Captulo IX.
Pargrafo nico. A renovao do certificado pode ser prorrogada por um perodo mximo de 90 dias, quando da necessidade
de realizar novo teste de diagnstico para brucelose ou tuberculose
em animais que apresentem resultados inconclusivos no reteste anual.
A prorrogao por igual perodo poder ser autorizada se for
necessrio sacrificar ou destruir animais reagentes positivos.
Art. 80. O mdico veterinrio habilitado dever informar
unidade local do servio de defesa oficial a data de realizao
dos testes mencionados no art. 79, com antecedncia mnima de
15 dias.
171

Art. 81. A deteco de leses sugestivas de tuberculose

durante a inspeo sanitria post-mortem de animais provenientes
de estabelecimento de criao monitorado para brucelose e
tuberculose implica no envio de amostras de leses suspeitas ao
laboratrio indicado pelo Departamento de Defesa Animal e, em
se confirmando infeco por Mycobacterium bovis, todas as fmeas
com idade igual ou superior a 24 meses e todos os machos
reprodutores devem ser submetidos a testes de diagnstico para
tuberculose, destinando os reagentes positivos ao sacrifcio ou
destruio, conforme o disposto no Captulo IX.
Art. 82. O ingresso de fmeas com idade igual ou superior a
24 meses e de machos reprodutores em estabelecimento de criao
monitorado para brucelose e tuberculose fica condicionado a:
I terem origem em estabelecimento de criao livre de
brucelose ou em estabelecimento de criao monitorado para
brucelose e tuberculose ou realizar dois testes de diagnstico para
brucelose, cumprindo os seguintes requisitos:
a) os dois testes devero ter resultado negativo;
b) o primeiro teste dever ser realizado durante os 30 dias
que antecedem o embarque e o segundo teste at 30 dias aps o
ingresso no estabelecimento de criao de destino, num intervalo
mnimo de 30 dias entre testes, sendo que os animais devero
permanecer isolados desde o ingresso no estabelecimento at o
segundo resultado negativo;
c) os testes sero realizados por mdico veterinrio habilitado,
por laboratrio credenciado ou por laboratrio oficial credenciado.
II terem origem em estabelecimento de criao livre de
tuberculose ou em estabelecimento de criao monitorado para
brucelose e tuberculose ou realizar dois testes de diagnstico para
tuberculose, cumprindo os seguintes requisitos:
a) os dois testes devero ter resultado negativo;
b) o primeiro teste dever ser realizado durante os 30 dias
que antecedem o embarque e o segundo teste at 90 dias aps o
ingresso no estabelecimento de criao de destino, num intervalo
mnimo de 60 dias entre testes, sendo que os animais devero
172

permanecer isolados desde o ingresso no estabelecimento at o

segundo resultado negativo;
c) os testes sero realizados por mdico veterinrio habilitado.
Art. 83. O mdico veterinrio oficial poder, em qualquer
momento e sem nus para o proprietrio, colher material biolgico
para testes de diagnstico para brucelose ou tuberculose e
acompanhar ou realizar testes de diagnstico para tuberculose,
com o objetivo de verificar e validar a condio sanitria do estabelecimento de criao monitorado para brucelose e tuberculose.
Captulo XX
Do Controle do Trnsito de Bovinos e Bubalinos
Art. 84. Para fins de trnsito interestadual de machos e de
fmeas, das espcies bovina e bubalina, destinados reproduo,
obrigatria a apresentao de resultados negativos aos testes de
diagnstico para brucelose e tuberculose, obedecendo ao que se
segue:
I a emisso da Guia de Trnsito Animal (GTA) fica
condicionada apresentao dos atestados de exames negativos
para brucelose e tuberculose, emitidos por mdico veterinrio
habilitado ou, at 31 de julho de 2004, por mdico veterinrio
cadastrado, os quais devero permanecer anexados via da GTA
que acompanha os animais;
II os testes de diagnstico devem ter sido realizados por
mdico veterinrio habilitado, por laboratrio credenciado, por
laboratrio oficial credenciado ou, at 31 de julho de 2004, por
mdico veterinrio cadastrado;
III os atestados de exames negativos para brucelose e
tuberculose sero vlidos por 60 (sessenta) dias, a contar da data
da colheita de sangue para diagnstico de brucelose e da realizao
do teste para diagnstico de tuberculose;
IV os testes de diagnstico para brucelose so obrigatrios
para os animais especificados no art. 20, excetuando-se os animais
com origem em estabelecimento de criao certificado como livre
173

de brucelose ou em estabelecimento de criao monitorado para

brucelose e tuberculose;
V os testes de diagnstico para tuberculose so obrigatrios
para animais de idade igual ou superior a seis semanas, excetuandose os animais com origem em estabelecimento de criao certificado
como livre de tuberculose ou em estabelecimento de criao
monitorado para brucelose e tuberculose.
Pargrafo nico. A partir de data a ser determinada pelo
Departamento de Defesa Animal, o trnsito interestadual de bovinos
e bubalinos destinados reproduo s ser permitido a animais
com origem em estabelecimento de criao certificado como livre
de brucelose e de tuberculose ou em estabelecimento de criao
monitorado para brucelose e tuberculose.
Art. 85. A emisso da GTA para trnsito de bovinos ou
bubalinos, qualquer que seja a finalidade, fica condicionada
comprovao de vacinao contra a brucelose no estabelecimento
de criao de origem dos animais, de acordo com o disposto no
Captulo III.
Art. 86. O trnsito internacional de animais, smen e
embries reger-se- pelas normas dispostas no Cdigo Zoosanitrio
Internacional, da Organizao Mundial de Sade Animal (OIE) ou
conforme normas especificadas em acordos internacionais firmados.
Captulo XXI
Da Participao em Exposies, Feiras, Leiles
e Outras Aglomeraes de Animais
Art. 87. Na emisso da Guia de Trnsito Animal (GTA) para
bovinos e bubalinos destinados participao em exposies, feiras,
leiles e outras aglomeraes de animais devem ser observados os
seguintes requisitos:
I para a brucelose:
a) atestado com resultado negativo a teste de diagnstico
para brucelose, efetuado at 60 dias antes do incio do evento,
174

para animais acima de oito meses de idade, emitido por mdico

veterinrio habilitado ou, at 31 de julho de 2004, por mdico
veterinrio cadastrado;
b) excluem-se dos testes os animais cujo destino final seja o
abate, as fmeas de at 24 meses de idade, desde que vacinadas
entre trs e oito meses de idade, os animais castrados e os animais
procedentes de estabelecimento de criao livre de brucelose;
c) comprovao de vacinao contra brucelose no
estabelecimento de criao de origem dos animais.
II para a tuberculose:
a) atestado com resultado negativo a teste de diagnstico
para tuberculose, efetuado at 60 dias antes do incio do evento,
para animais de idade igual ou superior a seis semanas, emitido
por mdico veterinrio habilitado ou, at 31 de julho de 2004, por
mdico veterinrio cadastrado;
b) excluem-se do disposto no item anterior os animais cujo
destino final seja o abate e aqueles provenientes de estabelecimento
de criao livre de tuberculose.
Art. 88. Animais de rebanho geral destinados participao
em leiles ficam dispensados da apresentao de atestados com
resultado negativo, exceto quando o servio oficial estadual julgar
necessrio.
Art. 89. A partir de data a ser determinada pelo Departamento de Defesa Animal, a emisso de GTA para participao de
bovinos e de bubalinos em exposies, em feiras e em leiles de
animais registrados fica condicionada origem em estabelecimento
de criao livre de brucelose e tuberculose.
Captulo XXII
Do Papel do Servio de Inspeo Oficial
Art. 90. O servio de inspeo oficial participa do Programa
Nacional de Controle e Erradicao da Brucelose e Tuberculose
Animal, em colaborao com o servio de defesa oficial, visando
175

melhorar a eficcia das aes de vigilncia sanitria e de

monitoramento deste Programa.
Art. 91. So atribuies especficas do servio de inspeo
oficial:
I realizar o abate sanitrio de animais identificados como
positivos para brucelose ou tuberculose;
II cumprir procedimentos higinico-sanitrios e fazer o
julgamento e destinao de carcaas e vsceras, conforme previsto
na legislao pertinente;
III comunicar ao servio de defesa oficial os achados de
matana, em carcaas e vsceras, sugestivos de tuberculose.

Portaria SDA no 10, de 07 de maro de 2003

O SECRETRIO DE DEFESA AGROPECURIA DO MINISTRIO
DA AGRICULTURA, PECURIA E ABASTECIMENTO, no uso da
atribuio que lhe confere o art. 83, inciso IV, do Regimento Interno
da Secretaria, aprovado pela Portaria Ministerial n 574, de 8 de
dezembro de 1998, tendo em vista o disposto no Regulamento do
Servio de Defesa Sanitria Animal, aprovado pelo Decreto n
24.548, de 3 de julho de 1934, e o que consta do Processo n
21000.000710/2003-61, resolve:
Art. 1 Instituir o Comit Cientfico Consultivo sobre Brucelose
(B.abortus) e Tuberculose animal (M. bovis) CCBT, cujas atribuies
incluiro:
I fornecer subsdios tcnico-cientficos ao Departamento
de Defesa Animal DDA;
II emitir pareceres tcnicos;
III elaborar propostas que visem melhorar o sistema de
controle da brucelose (B.abortus) e da tuberculose animal (M. bovis)
no pas, com destaque para as normas e mtodos de vigilncia,
profilaxia, diagnstico e controle dessas enfermidades.
Art. 2 O CCBT ser composto por profissionais especializados
nas diversas reas relacionadas sade animal, com destaque para
a medicina veterinria preventiva, epidemiologia e bioestatstica,
sade pblica, planejamento de programas e mtodos de defesa
176

sanitria animal, imunologia e tcnicas de diagnstico da brucelose

e tuberculose animal.
Art. 3 O Departamento de Defesa Animal DDA poder, se
necessrio, convocar pessoal tcnico dos setores pblico e privado
para prestar assessoramento ao CCBT.
Art. 4 O DDA dever estabelecer a composio do referido
Comit, definir a programao, as regras de funcionamento e indicar
seu coordenador.
Art. 5 Esta Portaria entra em vigor na data de sua publicao.
MAAO TADANO
Publicada no DOU n 48, de 11 de maro de 2003, Seo I p. 8

Portaria DDA no 73, de 04 de dezembro de 2003

O DIRETOR DO DEPARTAMENTO DE DEFESA ANIMAL, DA
SECRETARIA DE DEFESA AGROPECURIA, DO MINISTRIO DA
AGRICULTURA, PECURIA E ABASTECIMENTO, no uso da atribuio
que lhe confere o art. 84, inciso VIII, da Portaria Ministerial n 574,
de 8 de dezembro de 1998, tendo em vista o disposto na Portaria
SDA n 10, de 7 de maro de 2003 e o que consta no processo n
2100.006978/2003-14, resolve:
Art. 1 Estabelecer a composio do Comit Cientfico
Consultivo sobre Brucelose (B. abortus) e Tuberculose animal (M.
bovis) - CCBT no mbito do Programa Nacional de Controle e
Erradicao da Brucelose e Tuberculose Animal (PNCEBT), especificando a rea de atuao de cada um dos membros constituintes:
I Andrey Pereira Lage, especialista em medicina veterinria
preventiva - Universidade Federal de Minas Gerais;
II Eliana Roxo, especialista em diagnstico e controle de
brucelose e tuberculose Instituto Biolgico;
III Ernst Eckehardt Muller, especialista em medicina
veterinria preventiva Universidade Estadual de Londrina;
IV Fernando Padilla Poester, especialista em brucelose
Consultor do LARA/MG - MAPA;
177

V Joo Crisostomo Mauad Cavallro, especialista em defesa

sanitria animal DDA/SDA/MAPA;
VI Jos Soares Ferreira Neto, especialista em epidemiologia
veterinria e zoonoses Universidade de So Paulo;
VII Pedro Moacyr Pinto Coelho Motta, especialista em
tuberculose - LARA/MG - MAPA;
VIII Vitor Salvador Pico Gonalves, especialista em
epidemiologia veterinria e programas de sade animal
Universidade de Braslia.
Art. 2 O Coordenador do CCBT poder, se necessrio,
convocar pessoal tcnico dos setores pblico ou privado para
prestar-lhe assessoramento.
Art. 3 Devero ser realizadas trs reunies ordinrias do
CCBT por ano, podendo haver convocao de reunies
extraordinrias, desde que justificadas pelo seu Coordenador.
Art. 4 O Comit Cientfico Consultivo de que trata o art. 1
ser coordenado pelo mdico veterinrio Jos Ricardo Lbo,
representante do PNCEBT.
Art. 5 Esta Portaria entra em vigor na data de sua publicao.
JOO CRISOSTOMO MAUAD CAVALLRO
Publicada no DOU n 238, de 08 de dezembro de 2003, Seo II p. 4

Portaria DDA no 11, de 26 de janeiro de 2004

O DIRETOR DO DEPARTAMENTO DE DEFESA ANIMAL, DA
SECRETARIA DE DEFESA AGROPECURIA, DO MINISTRIO DA
AGRICULTURA, PECURIA E ABASTECIMENTO, no uso da atribuio
que lhe confere o art. 84, inciso VIII, do Regimento Interno da
Secretaria, aprovado pela Portaria Ministerial n 574, de 8 de
dezembro de 1998, o art. 13 da Instruo Normativa SDA n 06,
de 8 de janeiro de 2004,
178

Considerando que o resultado do inqurito soroepidemiolgico para brucelose bovina, realizado em 2002 pelas autoridades
sanitrias do Estado de Santa Catarina, revelou prevalncia muito
baixa de propriedades e animais infectados por essa doena;
Considerando que diante da prevalncia encontrada a
vacinao no trar efeitos benficos e ainda que o uso da vacina
elaborada com amostra B19 possa interferir nos resultados dos
testes de diagnstico, recurso sistematicamente utilizado em reas
em processo de erradicao, e o que consta do Processo n
21000.013020/2003-71, resolve:
Art. 1 Excluir o Estado de Santa Catarina da obrigatoriedade
de vacinao das fmeas bovinas e bubalinas contra a brucelose.
Art. 2 As aes a serem desenvolvidas nas reas em processo
de erradicao devero ser definidas em ato normativo especfico
do Departamento de Defesa Animal - DDA.
Art. 3 Esta Portaria entra em vigor na data de sua publicao.
JOO CRISOSTOMO MAUAD CAVALLRO
Publicada no DOU n 20, de 29 de janeiro de 2004, Seo 1, p. 3

Instruo Normativa SDA no 59, de 24 de agosto de 2004

O SECRETRIO DE DEFESA AGROPECURIA, DO MINISTRIO
DA AGRICULTURA, PECURIA E ABASTECIMENTO, no uso da
atribuio que lhe confere o art. 15, inciso II, do Anexo I, do Decreto
n 4.629, de 21 de maro de 2003, tendo em vista o disposto no
Regulamento do Servio de Defesa Sanitria Animal, aprovado pelo
decreto n 24.548, de 3 de julho de 1934, e que consta do Processo
n 21000.01277/2003-71, resolve:
Art. 1 Alterar, de 31 de julho de 2004 para 31 de julho de
2005, o prazo previsto nos arts. 18, 2, 21, inciso I, 27, 2, 28,
84, incisos I e II, 87, incisos I-a e II-a, respectivamente nos captulos
V, VI, VII, VIII, XX e XXI, do Regulamento Tcnico do Programa
179

Nacional de Controle e Erradicao da Brucelose e Tuberculose

Animal, aprovado pela Instruo Normativa DAS n 06, de 8 de
janeiros de 2004.
Pargrafo nico. Fica facultado ao Servio de Defesa Oficial
de cada Estado estabelecer data anterior a 31 de julho de 2005,
prevista no caput deste artigo.
Art. 2 O Art. 32 passa a vigorar com a seguinte redao:
"Art. 32. O teste cervical comparativo (TCC) o teste
confirmatrio utilizado em animais reagentes aos testes de rotina,
descritos nos arts. 30 e 31. tambm recomendado como teste de
rotina para estabelecimento de criao com ocorrncia de reaes
inespecficas, estabelecimentos certificados como livres e para
estabelecimentos de criao de bubalinos, visando garantir boa
especificidade diagnstica, devendo ser utilizado com as seguintes
condies e critrios:" (NR)
Art. 3 Esta Instruo entra em vigor na data de sua
publicao.
MAAO TADANO
Publicada no DOU n 165, de 26 de agosto de 2004, Seo I, p. 10

180

Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento

ENDEREOS DAS SUPERINTENDNCIAS

FEDERAIS DE AGRICULTURA, PECURIA E
ABASTECIMENTO SFAs
SERVIO DE DEFESA SANITRIA
AGROPECURIA SEDESA

SF
A/AC
SFA/AC

ACRE
RODOVIA AC-40, 793 SEGUNDO DISTRITO
69901-180 RIO BRANCO/AC
TEL: (68) 3212-1300 / 1324 FAX: 3212-1313 / 1318

SF
A/AL
SFA/AL

ALAGOAS
AVENIDA FERNANDES LIMA, 72
BAIRRO FAROL
57050-000 MACEI/AL
TEL: (82) 3315-7005 / 7000 FAX: 3221-7047 / 3315-7026

SF
A/AP
SFA/AP

AMAP
RUA TIRADENTES, 469 BAIRRO CENTRAL
68906-380 MACAP/AP
TEL: (96) 3223-3075 FAX: 3222-4467

SF
A/AM
SFA/AM

AMAZONAS
RUA MACEI, 460 ADRIANPOLIS
69057-010 MANAUS/AM
TEL: (92) 3232-8073 / 6129 FAX: 3232-8073

SF
A/BA
SFA/BA

BAHIA
LARGO DOS AFLITOS, S/N CENTRO
40060-030 SALVADOR/BA
TEL: (71) 3320-2406 / 7436 FAX: 3320-7403

181

182

SFA/CE

CEAR
AV. DOS EXPEDICIONRIOS, 3.442 BENFICA
60410-410 FORTALEZA/CE
TEL: (85) 3455-9208 / 9248 FAX: 3455-9268

SF
A/DF
SFA/DF

DISTRITO FEDERAL
SBN QUADRA 01, BLOCO D, 5 ANDAR
ED. PALCIO DO DESENVOLVIMENTO
70057-900 BRASLIA/DF
TEL: (61) 3329-7119 / 7118 FAX: 3326-2565

SF
A/ES
SFA/ES

ESPRITO SANTO
AV. NOSSA SENHORA DOS NAVEGANTES, 495, 8 ANDAR
EDIFCIO CENTRO EMPRESARIAL ENSEADA
ENSEADA DO SU
29050-420 VITRIA/ES
TEL: (27) 3137-2720 / 2732 FAX: 3137-2747

SF
A/GO
SFA/GO

GOIS
PRAA CVICA, 100, 6 ANDAR
CX. POSTAL 149
74003-010 GOINIA/GO
TEL: (62) 3221-7282 FAX: 3221-7277

SF
A/MA
SFA/MA

MARANHO
PRAA DA REPBLICA, 147 BAIRRO DIAMANTE
65020-150 SO LUS/MA
TEL: (98) 2106-1961 / 1965 FAX: 2106-1969

SF
A/MG
SFA/MG

MINAS GERAIS
AV. RAJA GABAGLIA, 245 CIDADE JARDIM
30380-090 BELO HORIZONTE/MG
TEL: (31) 3250-0416 / 0417 FAX: 3250-0405

SF
A/MT
SFA/MT

MATO GROSSO
ALAMEDA DR. ANNIBAL MOLINA, S/N PORTO
78115-140 VRZEA GRANDE/MT
TEL: (65) 3685-5598 / 1952 FAX: 3685-1145

SFA/MS

MATO GROSSO DO SUL

RUA DOM AQUINO, 2.696
79002-970 CAMPO GRANDE/MS
TEL: (67) 3325-7100 / 8866 FAX: 3325-7666

SF
A/P
A
SFA/P
A/PA

PAR
AV. ALMIRANTE BARROSO, 5.384 SOUZA
66610-000 BELM/PA
TEL: (91) 3214-8648 / 8647

SF
A/PB
SFA/PB

PARABA
BR-230, KM 14, ESTRADA JOO PESSOA/CABEDELO
58310-000 CABEDELO/PB
TEL: (83) 3246-1235 FAX: 3246-2535

SF
A/PE
SFA/PE

PERNAMBUCO
AV. GENERAL SAN MARTIN, 1.000 BONGI
50630-260 RECIFE/PE
TEL: (81) 3236-8500 / 8515 FAX: 3236-8516

SF
A/PI
SFA/PI

PIAU
RUA TAUMATURGO DE AZEVEDO, 2.315
64001-340 TERESINA/PI
TEL: (86) 3222-4545 / 4321 FAX: 3222-4324

SF
A/PR
SFA/PR

PARAN
RUA JOS VERSSIMO, 420 TARUMA
82820-000 CURITIBA/PR
TEL: (41) 3361-4000 / 4082 FAX: 3366-3260

SF
A/RJ
SFA/RJ

RIO DE JANEIRO
AV. RODRIGUES ALVES, 129, 8 ANDAR
20081-250 RIO DE JANEIRO/RJ
TEL: (21) 2253-7507 / 2291-4141 FAX: 2253-8182

SF
A/RN
SFA/RN

RIO GRANDE DO NORTE

AV. HILDEBRANDO DE GIS, 150 RIBEIRA
59010-000 NATAL/RN
TEL: (84) 3221-1741 / 1742 FAX: 3221-5698

183

184

SFA/RO

RONDNIA
BR-364, KM 5,5
78913-770 PORTO VELHO/RO
TEL: (69) 3216-5600 / 5610 FAX: 3222-2460

SF
A/RR
SFA/RR

RORAIMA
AV. SANTOS DUMONT, 1.470
BAIRRO APARECIDA
69306-040 BOA VISTA/RR
TEL: (95) 3623-9603 / 9605 FAX: 3623-9364

SF
A/RS
SFA/RS

RIO GRANDE DO SUL

AV. LOUREIRO DA SILVA, 515, 5 ANDAR
90010-420 PORTO ALEGRE/RS
TEL: (51) 3284-9513 / 9516 FAX: 3284-9512

SF
A/SC
SFA/SC

SANTA CATARINA
RUA FELIPE SCHIMIDT, 755 CENTRO
EDIFCIO EMBAIXADOR, BLOCO A
CAIXA POSTAL 1.502
88010-002 FLORIANPOLIS/SC
TEL: (48) 3261-9929 / 9930 FAX: 3261-9931

SF
A/SE
SFA/SE

SERGIPE
AV. JOO RIBEIRO, 428
BAIRRO SANTO ANTNIO
49065-000 ARACAJU/SE
TEL: (79) 3179-2468 / 2469 FAX: 3179-2466

SF
A/SP
SFA/SP

SO PAULO
AV. 13 DE MAIO, 1.558, 3 ANDAR BELA VISTA
01327-002 SO PAULO/SP
TEL: (11) 3251-0400 / 5742 FAX: 3287-8988

SF
A/TO
SFA/TO

TOCANTINS
AV. NS 1, 201 SUL, CONJ. 2, LOTE 05
77015-202 PALMAS/TO
TEL: (63) 3219-4300 / 4330 FAX: 3219-4305

ANOTAES

185

ANOTAES

186

ANOTAES

187

Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento

Secretaria de Defesa Agropecuria
Departamento de Sade Animal
Esplanada dos Ministrios, Bloco D, Anexo A, 3o andar
CEP 70043-900 Braslia/DF
E-mail: tub-bru@agricultura.gov.br

www.agricultura.gov.br
Central de Relacionamento: 0800 61 1995

188

Assessoria de Comunicao Social

Secretaria de Defesa Agropecuria

Departamento de Sade Animal
Esplanada dos Ministrios, Bloco D, Anexo A, 3o andar
CEP 70043-900 Braslia/DF
E-mail: tub-bru@agricultura.gov.br
www.agricultura.gov.br

Central de Relacionamento: 0800 61 1995

PROGRAMA NACIONAL DE CONTROLE E ERRADICAO DA BRUCELOSE E DA TUBERCULOSE ANIMAL - PNCEBT

Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento