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A CLNICA DIA A DIA

Guia de recolha de amostras

em dermatologia
Citologia, tricograma, raspagens, culturas, etc. Concerteza j ouviu falar de todas estas tcnicas. Mas, saber utilizar a tcnica mais adequada para realizar a recolha?
Os problemas dermatolgicos desenvolvem-se com uma grande variedade de leses. Numa primeira consulta, aps uma extensa anamnese, deveria ser realizada uma recolha de amostras bsicas das leses cutneas. As correctas anlises e interpretao das amostras recolhidas dependem, em grande parte, da tcnica utilizada para realizar a recolha. Este artigo pretende abordar as diferentes tcnicas utilizadas na obteno de amostras numa primeira consulta de dermatologia, que variam em funo do tipo e localizao da leso, assim como da suspeita clnica.
Pilar Brazis Glria Pol UNIVET Servio de Diagnstico Veterinrio

A citologia est indicada em qualquer problema de pele, especialmente em doenas descamativas, alopcias e naquelas que se desenvolvem com prurido. Citologia
A citologia est indicada em qualquer problema de pele, especialmente nos casos das doenas descamativas, alopcias e naquelas doenas que se desenvolvem com prurido. De uma maneira geral, esta tcnica deveria realizar-se de forma rotineira, j que permite observar a presena de bactrias, fungos, leveduras e diagnosticar infeces bacterianas e/o fngicas. Consoante a zona e o tipo de leso, poder-se- utilizar uma modalidade diferente.
Tcnica da impresso fita cola Indicada quando a superfcie cutnea lisa e tem pouca gordura, utilizada para avaliar a presena da levedura Malassezia. Tambm de bastante utilidade para identificar clulas inflamatrias como neutrfilos, clulas epiteliais nucleadas (se se suspeitarem de alteraes da queratinizao), presena de bactrias e parasitas que residam na superfcie (como Cheyletiella).

As 5 tcnicas mais frequentes

As tcnicas mais utilizadas na recolha de amostras em dermatologia so as seguintes:

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Citologia Raspagens superficiais e profundas Tricograma Cultura de fungos Cultura microbiolgica

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Deve-se colocar um pedao de fita cola sobre a superfcie a analisar. Aps pressionar, o pedao de fita cola descolado da pele de forma rpida e procede-se colorao por qualquer tcnica standard, tipo Diff Quick, sem passar pela primeira soluo (alcolica). O pedao de fita cola, j com a colorao, analisado ao microscpio (figura 1).
Impresso directa com lmina til quando a pele se apresenta com gordura, hmida ou se fr observada supurao. realizada colocando directamente a lmina sobre a superfcie a analisar e fazendo presso para que o material cutneo fique aderido. Depois deixa-se secar ao ar e procede-se colorao (figura 2). Tcnica da Ansa Nos ouvidos, espaos interdigitais e pregas cutneas, recomenda-se a utilizao de uma ansa para recolher material da superfcie da pele. Se a superfcie estiver muito seca, deve-se humedecer a ansa com uma soluo salina estril. Uma vez recolhida a amostra, esta espalhada pela lmina de uma forma homognea e deixa-se secar para posteriormente proceder sua colorao (figuras 3 e 4). Material necessrio para a citologia Cada uma das diferentes tcnicas utilizadas na recolha de amostras em dermatologia requer determinado tipo de material. No caso da citologia, deve-se ter em conta a tcnica eleita: Tcnica da impresso fita cola: Fita cola Lmina Tcnica de colorao Impresso directa com lmina: Lmina Tcnica de colorao Tcnica com ansa: Ansa Lmina Tcnica de colorao

Figura 1. Preparao da impresso fita cola para observao ao microscpio.

M. Bardag

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Figura 2. Citologia por impresso sobre uma leso na extremidade posterior.

Raspagens superficiais e profundas

As raspagens so importantes para detectar a presena de parasitas, que podem encontrar-se nas camadas mais superficiais ou mais profundas da pele. recomendvel recorrer a esta tcnica nos casos de doenas que se desenvolvam
G. Zanna Figura 3. Introduo do material no ouvido para a recolha da amostras.
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Raspagem profunda (at provocar algum sangramento): para evidenciar a presena de parasitas do gnero Demodex.
Tcnica de raspagem Deve ser retirado o plo da zona de onde se v realizar a raspagem. Depois coloca-se uma gota de leo de forma a impregnar a lmina do bisturi que se utilizar para a raspagem. E necessrio beliscar a zona a raspar e ter ateno s pregas de pele (figura 5). O material recolhido com a lmina do bisturi colocado na lmina, e homogeneizado com o leo. De seguida, cobre-se a lmina com a lamela para impedir que o material seque, e observa-se ao microscpio (figura 6).

Figura 4. Colocao numa lmina do material recolhido com uma ansa.

G. Zanna G. Pol Figura 5. Raspagem cutnea numa zona lesionada.

As raspagens so importantes para detectar a presena de parasitas, que podem ser encontrados nas camadas mais superficiais ou mais profundas da pele.

Material necessrio Para realizar uma raspagem de pele precisaremos de: Lmina de bisturi leo mineral Lmina Lamela

Tricograma
O tricograma, ou anlise do plo, uma tcnica de bastante utilidade naqueles pacientes que apresentem alopecia e nos casos em que se suspeitar de dermatofitose. Permite avaliar a fase de crescimento na qual os plos se encontram e se se apresentam de alguma forma afectados pelo prurido dos animais. Esta tcnica especialmente til em gatos nos quais difcil saber se a alopcia se deve queda espontnea do plo, ou se auto-induzida por o animal se lamber. Com a ajuda de pinas, deve-se arrancar plos da zona de pele afectada (se se tratar de uma

com descamao e prurido, mediante suspeita da presena de algum parasita.

Tipos de raspagens A profundidade da raspagem varia em funo do parasita que se pretenda encontrar: Raspagem superficial: para detectar parasitas dos gneros de Cheyletiella spp., Otodectes spp., Sarcoptes spp. ou Notoedres spp.
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leso circular melhor recolher plos dos bordos da leso) e coloc-los numa lmina. Observa-se depois ao microscpio com baixa intensidade lumnica para avaliar a estrutura do plo (figura 7).

Figura 6. Preparao do material recolhido na raspagem para visualizao ao microscpio.

Cultura de fungos
A cultura de fungos deve ser realizada nos casos em que exista uma suspeita de dermatofitose e em pacientes que apresentem um quadro com alopecia, ppulas, pstulas e/ou crostas. Para a realizao desta tcnica deve-se desinfectar a zona com lcool a 70% e esperar uns minutos. Com a ajuda das pinas, recolhem-se plos e descamaes da periferia da leso, que se devem colocar num recipiente estril para o envio ao laboratrio.

Cultura microbiolgica
As culturas bacterianas a partir de leses cutneas esto indicadas nos pacientes que sofram de infeces recidivantes e nos casos onde, na citologia cutnea, se visualizarem bacilos Gram (-). No caso das otites, as culturas microbiolgicas deveriam ser sempre realizadas para evitar recidivas e evoluo da cronicidade. Devem realizar-se em leses o mais intactas possvel, e nunca se dever desinfectar a superfcie da pele. Em funo da leso presente, utiliza-se uma das tcnicas abaixo referidas. Pstulas e ppulas: deve-se romper a superfcie com a ajuda de uma agulha estril e recolher o material que sai com a zaragatoa para cultura.

O tricograma especialmente til em gatos que apresentem alopcia, nos quais difcil saber se esta devida a uma queda espontnea do plo ou auto-induzida pelo lamber do prprio animal.

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Antes de se obter uma amostra para cultura microbiolgica recomendvel suspender durante uma semana a administrao de qualquer tipo de antibitico.
Colaretes epidrmicos: passa-se a ansa 3-4 vezes pela leso, e introduz-se no meio de cultura. Fstula: introduz-se a ansa ao mximo na leso, evitando tocar a superfcie. Aps recolher a amostra, introduz-se a ansa num meio de cultura estril. importante que o transporte da amostra para o laboratrio dure menos de 24 horas. Antes de proceder recolha da amostra recomendvel suspender durante uma semana a administrao de qualquer tipo de antibitico.

Juntamente com qualquer amostra enviada ao laboratrio para realizar uma cultura, aconselha-se enviar sempre uma citologia da leso.

Figura 7. Imagem de um tricograma ao microscpio.

Glossrio
ALOPCIA. Queda natural ou patolgica do plo, caracterstica de muitas doenas de pele. BACILO. Bactria alargada cuja forma faz lembrar um basto recto. CITOLOGIA. Anlise de clulas para diagnosticar qual a doena que se encontra na causa da leso da pele. DESCAMAO. Desprendimento da epiderme seca em forma de pedaos de pele. GRAM. As bactrias podem ser divididas em dois grupos: Gram positivo (+) e Gram negativo (-). Esta diviso baseia-se na capacidade de reaco das bactrias frente ao mtodo de colorao, desenvolvido por Christian Gram em 1884. As que adquirem cor com o corante so Gram (+) e aquelas que no adquirem cor com o corante so Gram (-). PPULA. Leso da pele de consistncia slida que faz relevo. inferior a 1 cm. PRURIDO. Sensao de ardor que faz com que os animais se cocem. O facto de se coarem continuamente pode levar ao aparecimento de leses importantes na pele. PSTULA. Pequena elevao da pele cheia de pus. Normalmente tem uma cor amarelada, embora tambm possa ser avermelhada. RECIDIVA. Reaparecimento da doena depois de um perodo de cura.

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L. Ordeix