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A Histria e os marcos da Microbiologia

Em todos os lugares em que voc olhar, mesmo que no possa v-los, existe um mundo
oculto de microrganismos. Eles so encontrados em toda parte, seja no seu corpo, nos
oceanos, nas rochas, no seu celular, na sua alimentao e muitos outros lugares
imaginveis.
A microbiologia o estudo desse mundo dos microrganismos e de suas atividades. Estuda
a forma, a estrutura, a reproduo, a fisiologia, o metabolismo e a identificao dos seres
microscpicos. Tem interesse em sua distribuio natural, suas relaes recprocas e com
outros seres vivos, seus efeitos benficos e prejudiciais sobre os homens e as alteraes
fsicas e qumicas que provocam em seu meio ambiente.
A produo do queijo, do iogurte, do po, da cerveja, do vinho no seriam possveis sem a
presena de microrganismos. O processo de fermentao, por exemplo, o que d essa
caracterstica de sabor, textura e cheiro dos alimentos, como no caso da levedura usada
na produo de lcool em algumas bebidas. Apesar de sua m reputao, os
microrganismos so principalmente benficos ou tem um efeito neutro sobre nossas vidas,
mesmo que algumas das vezes possam afetar nossa sade.

Teorias sobre Microbiologia


Abiognese
Alguns cientistas acreditavam que os microrganismos se formavam espontaneamente a
partir da matria orgnica em decomposio ou putrefao, essa forma de multiplicao
chamou-se abiognese ou gerao espontnea.

Biognese
Outros acreditavam que as sementes destas criaturas microscpicas estavam sempre
presentes no ar, de onde ganham acesso aos materiais e ali crescem desde que as
condies sejam adequadas ao seu desenvolvimento. Organismos vivos provm apenas

de outros organismos vivos, a essa forma de multiplicao dos microrganismos chamou-se


biognese.

Primeiras observaes sobre Microrganismos


Egpcios: Protegiam tumbas com esporos de Aspergillus.
Bblia: Descrio da lepra (1000 a.C.), proibio do consumo de certas carnes
(Deuteronmio 600 a.C.).
Grcia (~400aC): Tucdides verificou que os pacientes que sobreviviam praga ficavam
protegidos e podiam cuidar dos doentes.
China (50 a.C.): uso de sandlias mofadas para o controle de infeces bacterianas nos
ps.
Roma (100 d.C.): Marcus Varro alertava que diminutas criaturas de certos ambientes
entravam no corpo e causavam doenas.

Linha do tempo e marcos da Microbiologia


1665 Robert Hook: primeira observao das clulas
1673 Van Leeuwenhoek: primeiras observaes de microrganismos vivos
1796 Edward Jenner: Primeira vacina
1861 Pasteur: Gerao espontnea refutada
1864 Pasteur: Pasteurizao
1876 Robert Koch: Teoria do germe da doena
1881 Robert Koch: Crescimento de bactrias em meios slidos (meio de cultura)
1884 Christian Gram: Desenvolvido mtodo Gram de colorao bacteriana
1887 Petri: Inventada a placa de Petri
1928 Alexander Fleming: Descoberta da Penicilina
1944 Avery, MacLeod & McCartey: DNA o material gentico

1953 Watson e Crick: Descobriram a estrutura do DNA


1962 Edelman e Porter: Anticorpos
1981 Margulis: Origem das clulas eucariticas
1983 Kary Mullis: Inventada Reao em Cadeia da Polimerase (PCR)

Personagens Brasileiros na Microbiologia


Oswaldo Cruz (1872-1917)
Nasceu em So Luiz do Paraitinga SP.
Com 14 anos matriculou-se na Faculdade de Medicina.
Em paris (Instituto Pasteur) se especializou em microbiologia e soroterapia.
1993 nomeado Diretor Geral de sade Pblica com a misso de combater as 3 principais
epidemias que assolavam o Rio de Janeiro: febre amarela, peste bubnica e varola.
1907 anunciou a erradicao da febre amarela.
1909 passou a se dedicar ao Instituto de Manguinhos (Fundao Oswaldo Cruz Fiocruz)

Adolph Lutz (1855-1940)


Nasceu no Rio de Janeiro
Formou-se em Medicina em 1979
1885 foi trabalhar como cientista em Hamburgo investigando o bacilo da lepra
1983 dirigiu o Instituto Bacteriolgico de So Paulo ( Instituto Adokpho Lutz)

Vital Brazil (1865-1950)


Mineiro, em 1981 se formou na faculdade de medicina do Rio de Janeiro
1899 organizou um laboratrio na fazenda Butantan
1901 o laboratrio da fazenda se tornou Instituto Butantan
1919 transferiu-se com sua equipe para Niteri e fundou o Instituto Vital Brazil.

Meios de Cultura Como diferenciar meio


enriquecido, seletivo e diferencial
Os meios de cultura tem papel fundamental em microbiologia e auxiliam a
anlise e identificao de microrganismos
Como uma cincia biolgica aplicada, a microbiologia trabalha com vrios
problemas prticos importantes da medicina, agricultura e indstria. Por
exemplo, a maioria das doenas de animais e plantas e causada por
microrganismos, so ainda importantes como agentes de fertilizao do solo

e tambem em muitos processos industriais em larga escala, como a


produo de antibiticos e protenas humanas. Assim, tanto os aspectos
prejudiciais como os beneficos dos microrganismos afetam a nossa vida.
O estudo de microrganismos est presente, por exemplo, em laboratrios de
microbiologia quando h a necessidade de isolar microrganismos de
amostras clnicas e fazer com que os mesmos se desenvolvam em meios de
cultura, conseguindo informaes para identificao de patgenos
presentes. Nos laboratrios de pesquisa, na obteno de antibiticos, testar
novos agentes microbianos e produo de vacinas. Assim como em
laboratrios de engenharia genetica e industriais, nos quais so
amplamente utilizados como coadjuvantes na produo de alimentos e
bebidas.
A maior parte dos estudos envolvendo microrganismos depende de sua
capacidade de desenvolvimento in vitro e isto s e possvel criando um
ambiente adequado para seu crescimento. Existem muitas maneiras de se
estimular o crescimento e diversos tipos de microrganismos podem ser
cultivados in vitro, incluindo vrus, bacterias, fungos e protozorios. Os
meios de culturas so preparaes qumicas que possuem em sua
formulao, nutrientes necessrios para que os microrganismos possam se
multiplicar permitindo seu estudo e anlise.
Uma cultura de microrganismos e considerada uma cultura pura quando
apenas um tipo de organismo est presente, j uma cultura mista e quando
populaes de organismos diferentes esto presentes. Quando usado pela
primeira vez, o meio de cultura deve ser esteril, o que significa que
nenhuma forma de vida est presente antes da inoculao com o
microrganismo.
Uma das maneiras de se classificar os meios de cultura baseia-se no
conhecimento de sua exata constituio. Um meio quimicamente definido e
aquele no qual todos os constituintes so conhecidos. Um meio complexo e
aquele no qual a exata constituio no e conhecida e podem conter
extratos modos ou digeridos de animais, peixes, leveduras e vegetais, que
fornecem os nutrientes, as vitaminas e os minerais necessrios.
Os meios de cultura tambem podem ser classificados como lquidos, slidos
ou semi-slidos. Os meios lquidos (tambem conhecidos como caldos), assim
como os semi-slidos, so acondicionados em tubos de ensaio. J os meios
slidos so preparados adicionando-se gar ao meio lquido e posterior
colocao em tubos de ensaio ou placas de Petri, onde o meio se solidifica.
A composio de um meio satisfatrio depender da especie que se est
tentando identificar e cultivar, porque as necessidades nutricionais variam
muito entre os microrganismos, sendo ainda que a funo do meio depende
da sua composio.
Meio de Cultura Enriquecido

Um meio enriquecido corresponde a um caldo ou meio slido contendo um


grande suprimento de nutrientes que promove o crescimento dos
microrganismos
fastidiosos.
Geralmente
so
meios
que
foram
suplementados com materiais altamente nutritivos. O gar-Sangue e um
exemplo de meio slido enriquecido utilizado rotineiramente nos
laboratrios de bacteriologia clnica.
Meio de Cultura Seletivo
O meio seletivo permite o crescimento de certos tipos de microrganismos e
inibe o crescimento de outros microrganismos. Ele contem inibidores,
geralmente antibiticos, que tornam invivel o crescimento de certos
microrganismos, sem inibir o crescimento do microrganismo alvo. Por
exemplo, o gar MacConkey inibe o crescimento de bacterias grampositivas, selecionando assim as bacterias gram-negativas.
Meio de Cultura Diferencial
Utilizados para diferenciar microrganismos ou grupos de microrganismos em
um meio. A presena de determinados corantes ou de produtos qumicos
nos meios produziro certas alteraes caractersticas ou padres de
crescimento que so utilizados para a identificao ou a diferenciao de
microrganismos. Por exemplo, o gar MacConkey e frequentemente
utilizado para diferenciar vrios bacilos gram-negativos isolados de
amostras de fezes. As bacterias gram-negativas que so capazes de
fermentar a lactose (um ingrediente do gar MacConkey) produzem colnias
rosas, enquanto aquelas incapazes de fermentar a lactose produzem
colnias incolores. Assim, o gar MacConkey diferencia as bacterias gramnegativas fermentadoras (LF) das no fermentadoras da lactose (NLF).
Os vrios tipos de meios (enriquecido, seletivo, diferencial) no so
mutuamente exclusivos. Como vimos, o gar MacConkey e tanto um meio
seletivo quanto diferencial.

Tipos
AGAR SANGUE BASE
Aplicao:
um meio de uso geral e pode ser utilizado sozinho ou com a adio de
substncias como sangue ou soro, para cultivo de microrganismos fastdios
(exigentes) tais como: estreptococos, pneumococos e meningococos. O
Agar Sangue Base e destinado para uso com suplementao de sangue.
Embora certos testes de diagnsticos podem ser realizados diretamente
neste meio. Testes bioqumicos e se indicado, imunolgicos usando culturas
puras so recomendados para identificao completa.

Aparncia do Meio: Desidratado: P castanho, fludo e homogneo.


Preparado: P vermelho-cereja e transparente.
Controle de Qualidade:
Microrganismos
Streptococcus pneumoniae
Escherichia coli
Streptococcus pyogenes
Staphylococcus aureus

ATCC

Crescimento

Hemlise

6305

Bom

Alfa

25922

Bom

19615
25923

Bom

Beta

Bom

Beta

Descarte:
No descartar em esgotos ou lixos domesticos. O produto deve ser tratado
conforme as regulaes oficiais administrativas. Solues em excesso e no
reciclveis destinar para empresa responsvel. As embalagens
contaminadas devem ser eliminadas como produto no utilizado.
GAR MAC CONKEY. FRASCO 500 G
Aplicao: O Agar Mac Conkey e um meio seletivo utilizado para o
isolamento e identificao da Enterobacteriaceae encontradaem fezes,
urina, guas residuais e alimentos. O meio tambem e utilizado para
diferenciar coliformes de cepas enterobacterias patognicas no
fermentadoras de lactose.
Controle de Qualidade:
Microrganismos
Caractersticas

ATCC

Enterococcus faecalis

19433

Escherichia coli
rosas com precipitados

25922

Crescimento

Parcialmente inibido

bom

Colnias

Colnias

Proteus mirabilis
incolores

25933

Bom

Salmonella typhimurium

14028

Inibido

Referncias
G., ENGELKIRK, Paul, DUBEN-ENGELKIRK, Janet, and BURTON, Gwendolyn R.
W.Burton Microbiologia para as Cincias da Sade, 9 edio.
Guanabara Koogan, 2012.T., MADIGAN, Michael, MARTINKO, John M.,
DUNPLAP, Paul V., and CLARK, David P.Microbiologia de Brock, 12 edio.
ArtMed, 2011

Como os microrganismos se desenvolvem em um Meio


de Cultura?
Podemos ver uma rvore apodrecendo ou sentir o cheiro do leite azedando, mas podemos
no compreender o que est ocorrendo a nvel microscpico. Em ambos os casos, os
microrganismos esto agindo. A rvore apodrece quando os microrganismos decompe a
madeira, o leite azeda devido produo de cido ltico pelas bactrias. Assim, como
todos os organismos, os microrganismos usam nutrientes para o crescimento e para todas
as outras funes essenciais vida.
Quando falamos em crescimento, estamos nos referindo ao nmero e no ao tamanho das
clulas. Os microrganismos em crescimento esto, na verdade, aumentando seu nmero e
se acumulando em colnias. Por meio do entendimento das condies necessrias,
podemos estimular e controlar o crescimento dos que estamos interessados em analisar,
como microrganismos patognicos ou que contaminam gua e degradam alimentos.
Aqui entram os meios de cultura que fornecem as condies ideais para que isso ocorra.

O que so Meios de Cultura?


Os meios de cultura so insumos preparados em laboratrios que fornecem os nutrientes
para o crescimento e desenvolvimento de microrganismos (como bactrias, fungos e
leveduras) fora do seu habitat natural. Existe uma variedade enorme destes meios e so

utilizados para anlises laboratoriais e estudos cientficos em diversas reas,


principalmente em pesquisas de alimentos, gua, cosmticos e microbiologia clnica.
Alm dos nutrientes e condies ambientais favorveis para esse cultivo, muitos critrios
devem ser considerados. Diferentes microrganismos possuem diferentes necessidades,
por isso o meio de cultura adaptado para satisfazer essas necessidades, utilizando
nutrientes especficos dependendo do microrganismo de interesse.

Cultivo de Microrganismos
Para entender como todo esse processo ocorre em um ambiente controlado, vamos
verificar as ferramentas e etapas envolvidas:
Meio de cultura base que oferece nutrientes, favorecendo o crescimento de

determinado microrganismo.
Inculo quando os microrganismos de interesse so colocados em um meio de

cultura para iniciar o crescimento.

Cultura quando microrganismos crescem e se multiplicam no meio.

Placa de Petri recipiente estril, constitudo por uma base e tampa, ideal para
crescimento da amostra em condies controladas.
gar substncia em gel colocada na placa de Petri que suporta e propicia o

crescimento dos microrganismos.

O gar Bacteriolgico um gar purificado no qual impurezas, pigmentos e sais


foram removidos ou reduzidos ao mnimo. um extrato hidrossolvel extrado
de algas vermelhas e pode ser utilizado como agente solidificante em meio
de cultura bacteriolgico ou para determinar motilidade e crescimento
de anaerbios e microaerfilos.

Alas de Inoculao utilizada para inocular a amostra, sem danificar o meio de

cultura.

Primeiro preparado o gar (muitos deles j contm os nutrientes necessrios para a


cultura) que em seguida despejado na placa de Petri, formando uma camada no fundo.
Depois que a soluo endurece, o microrganismo pode ser inoculado, geralmente atravs
de uma ala de inoculao. Nesta etapa alguns cuidados devem ser tomados para que
no haja nenhuma contaminao e s o microrganismo de interesse esteja presente. As
placas de Petri devem ser incubadas e armazenadas em posio invertida de forma que o
gar fique para cima, assim a condensao no cair sobre a amostra interrompendo a
superfcie de crescimento.

Confira o vdeo com o protocolo comumente utilizado para o crescimento dos


microrganismos em laboratrio, que compreende o desenvolvimento de uma colnia a
partir de uma ou algumas clulas para posterior estudo ou anlise.