Failace R et al

Rev. bras. hematol. hemoter. 2004;26(3):159-166

Artigo / Article

Avaliao dos critrios de liberao direta dos resultados de hemogramas

atravs de contadores eletrnicos
Evaluation of the direct liberation criteria of hemogram results from electronic counters

Rafael Failace1
Patricia Pranke2

Os aparelhos de automao em hematologia oferecem alta sensibilidade e preciso

na realizao do hemograma na rotina do laboratrio de hematologia. Para avaliar os critrios de liberao dos hemogramas por interfaceamento direto entre os
contadores eletrnicos e o setor de emisso dos laudos, foram examinadas 247
lminas de hemogramas. Entre essas, 149 lminas foram consideradas concordantes com os critrios de liberao por interfaceamento direto enquanto 98 foram
consideradas no concordantes pelos contadores automatizados Sysmex SE 9500
e Cell Dyn 4000. Dentre os hemogramas concordantes, a microscopia sem acesso
aos dados numricos mostrou alterao em apenas uma lmina, a qual era clinicamente irrelevante. Por outro lado, entre os 98 hemogramas no concordantes, 32
apresentavam alteraes. Os dados encontrados comprovam a satisfatria sensibilidade dos sistemas de automao analisados. As lminas dos hemogramas no
concordantes foram reexaminadas, com o objetivo de avaliar os resultados eletrnicos. Esse fato permitiu a anlise das causas das reprovaes com sugestes para
eventuais simplificaes do sistema. O presente trabalho mostrou que os resultados emitidos pelos contadores automticos analisados apresentam uma alta correlao com a avaliao microscpica. Conclui-se, portanto, que os resultados dos
hemogramas liberados pelos aparelhos analisados so satisfatrios e estes aparelhos so confiveis para a rotina no laboratrio de hematologia. Rev. bras. hematol.
hemoter. 2004;26(3):159-166.
Palavras chave: Hemograma; automao; Cell Dyn 4000; Sysmex SE 9500.

Introduo

o uso da anlise diferencial de leuccitos automatizada

tem se tornado comum em um grande nmero de laboratrios.2 No entanto, algumas amostras analisadas pelos contadores automatizados de clulas ainda requerem avaliao atravs da distenso de sangue perifrico para permitir a observao de anormalidades morfolgicas e outras
alteraes.1 Sendo assim, na maioria dos laboratrios que
usam contadores que fornecem frmula leucocitria com
identificao de cinco a nove tipos celulares, o exame ao

Sem a habilidade e a velocidade dos modernos contadores automatizados em hematologia, os laboratrios

clnicos seriam incapazes de analisar eficientemente o grande volume de amostras que recebem diariamente. Os instrumentos automatizados oferecem alta sensibilidade e
preciso na quantificao das clulas sangneas,1 bem
como na contagem diferencial de leuccitos. Desde 1980,

Laboratrios Weinmann-Faillace, Curso de Especializao em Anlises Clnicas, PUCRS.

Curso de Especializao em Anlises Clnicas, PUCRS, Departamento de Anlises Clnicas, Faculdade de Farmcia, PUCRS,
Departamento de Anlises Clnicas da Faculdade de Farmcia e Programa de Ps-graduao em Clnica Mdica da
Faculdade de Medicina, UFRGS.

Correspondncia para: Patricia Pranke

Av. Ipiranga n. 2752 Faculdade de Farmcia UFRGS
Laboratrio de Hematologia - 3 andar
90610-000 Porto Alegre-RS Brasil
Telefone: (51) 3316-5257 ppranke@adufrgs.ufrgs.br

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microscpio s realizado em casos selecionados.3,4 Existem diversos aparelhos disponveis no mercado que realizam o hemograma automatizado. Dentre estes, o Cell Dyn
4000 e o Sysmex SE 9500 tm sido utilizados para a anlise
do sangue perifrico5-8 mostrando resultados satisfatrios
para a contagem de reticulcitos,8-11 eritroblastos12 e
plaquetas.13 Os contadores automticos como o Cell Dyn
4000 tm mostrado bons resultados para a anlise de clulas em apoptose14 e para a anlise do aspirado de medula
ssea.15,16 O Sysmex SE 9500 tem sido utilizado para estimar a presena de clulas progenitoras hematopoiticas
em sangue perifrico aps mobilizao com fatores de crescimento, por afrese.17,18,19
Nos laboratrios brasileiros considerados de grande porte, a microscopia realizada de acordo com os seguintes critrios: idade, procedncia das amostras, pedidos mdicos especficos, alarmes nos resultados dos contadores eletrnicos e, principalmente, limites mnimos e
mximos arbitrados para cada parmetro numrico.4 O arbtrio de critrios muito amplos, limitando a porcentagem
de casos a examinar, facilita o trabalho, mas amplia o nmero de dados perdidos.20 Apesar da tecnologia eletrnica propiciar resultados confiveis e anlises de alta qualidade, tais aparelhos no so capazes de identificar muitas
alteraes hematolgicas, que podem ser clinicamente significativas ou biologicamente relevantes. A tabela 1 apresenta as alteraes hematolgicas que no so identificadas pelos contadores eletrnicos. Por outro lado, critrios muito restritos contribuem de modo insuficiente para
viabilizar um setor de hematologia sobrecarregado financeiramente pelo alto custo da tecnologia importada.

O presente trabalho teve por objetivo avaliar os critrios adotados na central de Hematologia dos Laboratrios Weinmann-Faillace (Porto Alegre), para a liberao de
hemogramas sem microscopia complementar. Visou, tambm, apreciar a seqncia de casos rejeitados, correlacionando-os com a microscopia.
Casustica e Mtodos
Foram selecionadas 247 lminas de hemogramas,
sendo 149 hemogramas aprovados automaticamente pelos contadores automticos dos Laboratrios WeinmannFaillace e 98 hemogramas reprovados. As amostras foram
selecionadas aleatoriamente, de pacientes ambulatoriais
provenientes dos vrios pontos de coleta do laboratrio.
A idade e o sexo dos pacientes no foram considerados
como parmetros de escolha ou excluso.
As amostras de sangue perifrico coletadas em EDTA
foram processadas em um contador Sysmex SE 9500 (155
casos) e um Cell Dyn 4000 (92 casos). Para fins do presente trabalho foram emitidos os resultados dos aparelhos de
automao e distendidas lminas dos 247 hemogramas as
quais foram renumeradas por um tcnico independente.
Os resultados excludos pelos critrios descritos na
tabela 2 foram impressos automaticamente pelos contadores automticos e recolhidos pelo operador, que
distendeu e corou as respectivas lminas. As lminas foram, ento, examinadas pelo profissional, a quem coube a
liberao final dos resultados para o sistema central de
processamento de dados.
Tabela 2
Parmetros numricos de excluso da
liberao automtica

Tabela 1
Alteraes hematolgicas no identificadas pelos
contadores eletrnicos4
Eritrograma

Policromatofilia
Pecilocitose
Eliptcitos
Esfercitos
Acantcitos
Incluses (Howell-Jolly,
pontilhado basfilo)
Eritroblastos < 5: 100 leuccitos
Rouleaux
Drepancitos

Leucograma

Granulaes txicas
Desvio esquerda sem neutrofilia
Corpos de Dhle
Anomalia de Pelger-Hut
Plasmcitos
Linfcitos atpicos sem linfocitose
Blastos <5%
Hairy cells

Valores inferiores a Valores superiores a

Eritrcitos
Hemoglobina
Hematcrito
VCM
HCM
CHCM
RDW
Leuccitos
Neutrfilos
Neutrfilos
Linfcitos
Linfcitos
Moncitos
Moncitos
Eosinfilos
Eosinfilos
Basfilos
Basfilos
Plaquetas

3,8 milhes/L
11,0 g/dL
33,0%
75 fL
25,0 pg
31,0%
11,0%
3.600/L
1.800/L
30%
800/L
10%
100/L
1%
*
*
*
*
140.000/L

5,8 milhes/L
18,1 g/dL
50,0%
100,0 fL
34 pg
35,0%
15,0%
12.000/L
7.100/L
75%
3.600/L
60%
1.000/L
15%
3600/L
30%
200/L
2%
500.000/L

* no h excluso para valores mnimos

Obs: Os valores foram arbitrados pelos profissionais do laboratrio,
baseado na experincia dos mesmos

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Procedimento tcnico
Na rotina dos laboratrios Weinmann-Faillace, os
resultados considerados aprovados pelos contadores eletrnicos so normalmente emitidos sem interferncia humana, com interfaceamento dos resultados para o sistema
de processamento de dados. Para os hemogramas reprovados, a distenso de lmina e exame microscpico so
exigidos normalmente. Os critrios para a confeco e avaliao das distenses de sangue perifrico so: (a) idade
menor de 8 anos, devido a dificuldade de definir valores
de referncia nesse grupo etrio; (b) procedncia dos pacientes: todos os pacientes internados ou do setor de
emergncia dos hospitais atendidos pelos laborat-rios;
(c) solicitaes mdicas especficas (pesquisa de linfcitos
atpicos, esfercitos e outros); (d) limites dos parmetros
numricos, arbitrados pelos profissionais do laboratrio,
de acordo com a tabela 2 e (e) alarmes emitidos pelos aparelhos. Os principais alarmes (Flags) compreendem: Imm
Gran (granulcitos imaturos), Bands (bastes), Blasts
(blastos), Variant-Lymphs (linfcitos atpicos), NRBC (eritroblastos), Ptl. Clumps (agregados plaquetrios), Review
slide (revisar lmina), Abn.Lymphs/aged (linfcitos anormais/envelhecidos) e Flafgs (incerteza no resultado).
As lminas, sem os resultados, foram fornecidas para
anlise microscpica (microscopia sem acesso aos dados
numricos). A microscopia foi realizada atravs de um instrumento Leitz, com oculares wide field de 10 aumentos e
objetiva de imerso de 50 aumentos. Foi seguido um rigoroso critrio seqencial em relao observao das trs
sries celulares, tentando notar alteraes morfolgicas e
estimar, em bases apenas visuais, alteraes numricas.
A avaliao iniciou-se pela inspeo da srie vermelha, focalizando campos onde os eritrcitos tocavam-se
sem se sobreporem. Foram observados a forma, as dimenses, a colorao (com especial ateno para policromatofilia) e o empilhamento eritrocitrio. Para a estimativa
de plaquetas durante a microscopia sem acesso aos dados numricos, o operador observou o nmero de plaquetas distribudas na lmina sem cont-las. Posteriormente, durante o reexame das lminas, de posse dos resultados, a contagem de plaquetas foi levada a efeito pelo
mtodo de Fnio21 onde as plaquetas foram contadas em
campos de aproximadamente 200 eritrcitos e o clculo
estimado de plaquetas foi realizado baseado no nmero
de eritrcitos por microlitro. Por fim, a srie branca foi
observada. A contagem diferencial de leuccitos foi realizada em todos as amostras analisadas, usando um
Leukotron LS, avaliando-se 100 clulas. Ateno especial
foi dada para a morfologia e possveis atipias de neutrfilos
e linfcitos. Os resultados foram considerados aprovados ou reprovados de acordo com a respectiva ausncia
ou presena de alteraes. Aps a microscopia sem acesso aos dados numricos das 247 lminas, entre as 98 lminas reprovadas automaticamente pelo sistema, as 32 lmi-

nas reprovadas pelo autor foram reexaminadas acompanhadas dos respectivos resultados.
A anlise estatstica foi realizada utilizando-se o programa SPSS 8.0 com 95% de intervalo de confiana. Foi
realizada uma avaliao comparativa entre a contagem diferencial de leuccitos pela microscopia convencional e
os resultados liberados pelos aparelhos Cell Dyn 4000 e
Sysmex SE 9500. As anlises estatsticas foram realizadas
atravs do Teste T e Wilcoxon, observando-se a mdia da
diferena no nmero de clulas encontradas entre as contagens diferenciadas realizadas pelo autor e o aparelho.
Resultados
Entre os hemogramas utilizados para este trabalho,
o ndice de no concordncia nas anlises entre os resultados obtidos pelos contadores automticos Cell Dyn 4000
e Sysmex SE 9500 e os critrios de liberao por interfaceamento direto foi de 40%, sendo que 60% foram concordantes e liberados por interfaceamento direto.
Dentre as 149 lminas de hemogramas concordantes pelo sistema, quando a anlise da distenso sangnea
foi realizada, apenas uma lmina apresentou leve pecilocitose na srie vermelha. Os 98 hemogramas no concordantes pelos aparelhos (Sysmex n = 75 e Cell Dyn n =
23) foram analisados atravs de microscopia das distenses sangneas e as causas de reprovao pelo sistema esto descritas na tabela 2.
As causas que levaram os aparelhos a serem no
concordantes com os critrios de liberao por interfaceamento direto das amostras esto descritas na tabela
3. Aps a anlise microscpica, foram notadas alteraes
Tabela 3
Causas de no concordncia pelo sistema
(Sysmex = 75, Cell Dyn = 23)
Causas

n=

Causas

Idade

Neutrofilia (/L ou %)

n=
14

Erro (sem critrio)

Neutropenia (/L ou %)

15

Baixo valor de E, Hgb ou Hct

17

Linfocitose (/L ou %)

10

Alto valor de E

Linfopenia (/L ou %)

Alto valor de Hct

Monocitose (/L ou %)

Alto valor de VCM

17

Basofilia (/L ou %)

Baixo valor de VCM

Trombocitose

Alto valor de HCM

Trombocitopenia

Baixo valor de CHCM

Alto valor de VPM

Alto valor de CHCM

Flags: Plt clumps

Alto valor de RDW

Frmula com ***

Imm Gran

Obs: E = eritrcitos, Hgb = hemoglobina, Hct = hematcrito.

Nmero maior de 98 por haver resultados no concordantes por
mais de um critrio.
Flags: Plt clumps (agregados plaquetrios), Imm Gran (granulcitos
imaturos).

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em 32 lminas atravs da microscopia sem acesso aos dados numricos, conforme a tabela 4.
Os resultados dos nmeros relativos do diferencial
de leuccitos para os valores de neutrfilos, linfcitos,
moncitos, eosinfilos e basfilos foram realizados comparando-se os resultados obtidos pelo aparelho e pela
microscopia. Os resultados para os valores de neutrfilos
esto representados na figura 1 para demonstrao.
Entre os 98 hemogramas no concordantes, em duas
amostras a no concordncia foi devida ao fato do Sysmex
SE 9500 no ter feito a contagem diferencial completa. Por
isso, as figuras 1C e 1D mostram os resultados comparativos de 96 amostras no concordantes, sendo 73 do total
de 75 amostras com resultados no concordantes obtidos
pelo Sysmex SE 9500. Em uma das amostras reprovadas

Tabela 4
Alteraes notadas pela microscopia sem acesso aos
dados numricos (32 casos)
Causas

n=

Causas

n=

Rouleaux

Pancitopenia

Pecilocitose

Leucopenia

Policromatofilia

Neutrofilia

Microcitose/hipocromia

Neutropenia

E fragmentados/policromasia

Linfocitose

Trombocitose

Linfopenia

Trombocitopenia

Monocitose

Agregados plaquetrios

Desvio esquerda

Obs: Nmero maior de 32 por haver lminas com mais de uma alterao.
E = eritrcitos

A
100

100

90

90

80

80

70

70

60
Neutrfilos Sysmex

60

Neutrfilos Cell Dyn

50
40
30
20
10

50
40
30
20
10
0

0
0

10

20

30

40

50

60

70

80

90

10

20

30

40

50

60

70

80

90

100

100
Neutrfilos Microscopia

Neutrfilos Microscopia

D
100

100
90

80

80
70

60

60
Neutrfilos Sysmex

Neutrfilos Cell Dyn

50
40
30
20
10
0
0

10

20

30

40

50

60

70

80

90

100

40

20

0
0

20

40

60

80

100

Neutrfilos Microscopia

Neutrfilos Microscopia

Fig. 1 Resultados comparativos entre o nmero relativo de neutrfilos obtidos atravs de microscopia e aparelho: (A) resultado
de 69 amostras aprovadas pelo aparelho Cell Dyn 4000; (B) resultado de 80 amostras aprovadas pelo aparelho Sysmex SE 9500;
(C) resultado de 23 amostras reprovadas pelo aparelho Cell Dyn 4000 e (D) resultado de 73 amostras reprovadas pelo aparelho
Sysmex SE 9500.

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Tabela 5
devido ao aparelho Sysmex no ter realizado a conAnlise estatstica da avaliao comparativa entre a contagem diferencial
tagem diferencial completa, a observao micros- de leuccitos pela microscopia convencional e os resultados concordantes
cpica mostrou presena de desvio esquerda com para liberao direta atravs dos aparelhos de automao em hematologia.
As anlises estatsticas foram realizadas pelo Teste T e Wilcoxon,
34% de neutrfilos bastonados, 3% de mielcitos
utilizando-se o programa SPSS 8.0
e 1% de pr-mielcitos. Alm desta, o desvio
esquerda foi confirmado em mais duas lminas atraHemogramas Aprovados
vs da microscopia.
Cell Dyn 4000 (n =69)
Sysmex SE 9500 (n = 80)
Um dos casos de no concordncia pelo apaTest T
Wilcoxon
Test T
Wilcoxon
relho Sysmex SE 9500 tratava-se de uma leucemia
Mdia *
p=
p=
Mdia * p =
p=
linfoctica crnica cuja contagem de leuccitos foi
N
e
u
t
r

f
i
l
o
s
0
,
1
2
5
0
,
7
8
5
0
,
8
4
1
0
,
6
2
7
0
,
1
0
5
0
,085
de 76.000 leuccitos/L. A contagem diferencial
L
i
n
f

c
i
t
o
s
0
,
5
3
3
0
,
2
2
3
0
,
2
2
0
1
,
4
2
9
<
0
,
0
0
1
0
,001
mostrava 14,2% de neutrfilos, 77,1% de linfcitos,
M
o
n

c
i
t
o
s
0
,
2
3
0
0
,
4
0
0
0
,
4
2
0
0
,
2
8
0
0
,
1
8
4
0
,131
7,9% de moncitos, 0,1% de eosinfilos e os basfiEosinfilos 0,310 0,014
0,009
0,106 0,363
0,238
los no foram contados. Ao realizar a contagem diferencial de leuccitos por microscopia, observaBasfilos
0,223 <0,001
<0,001
0,415 <0,001
<0,001
ram-se 2% de neutrfilos, 97% de linfcitos e 1% de
* mdia da diferena percentual do nmero de clulas encontradas pelo aparelho
moncitos.
e pela microscopia realizada pelo operador
Quanto contagem de plaquetas, sete amostras apresentaram trombocitopenia pela automao
(uma pelo Cell Dyn 4000 e seis pelo Sysmex SE 9500).
Tabela 6
O operador observou apenas uma trombocitopenia
Anlise estatstica da avaliao comparativa entre a contagem
durante a microscopia sem acesso aos dados numdiferencial de leuccitos pela microscopia convencional e os resultados
no concordantes para liberao direta atravs dos aparelhos de
ricos em lmina. Durante o reexame das lminas, de
automao em hematologia. As anlises estatsticas foram realizadas
posse dos resultados, nestas sete amostras a conpelo Teste T e Wilcoxon, utilizando-se o programa SPSS 8.0.
tagem de plaquetas pelo mtodo de Fnio confirHemogramas Reprovados
mou a trombocitopenia em todas as amostras. No
Cell Dyn 4000 (n =23)
Sysmex SE 9500 (n =75 )
entanto, uma das amostras continha agregados de
plaquetas, cuja alterao foi acusada pelo Sysmex
Mdia *
p=
p=
Mdia *
p=
p=
SE 9500. A presente observao invalidou a contaNeutrfilos
1,700
0,021
0,025
0,984 **
0,051**
0,124**
gem de plaquetas nesta amostra. Sendo assim, os
Linfcitos
2,278
0,007
0,006
1,743
0,001
0,001
valores para a contagem de plaquetas obtidos nas
Moncitos
0,165
0,768
0,879
0,521**
0,071**
0,072**
outras seis amostras com trombocitopenia, avaliaEosinfilos
0,352
0,270
0,140
0,236
0,143
0,019
das por automao e pelo autor, mostraram uma alta
Basfilos
0,226
0,001
0,001
0,358*** < 0,001*** < 0,001***
correlao com p= 0,962.
As anlises estatsticas das avaliaes com- * mdia da diferena percentual do nmero de clulas encontradas pelo aparelho
parativas entre a contagem diferencial de leuc- e pela microscopia realizada pelo operador
** n = 73 (aparelho no contou 2 amostras)
citos pela microscopia convencional e os resulta- *** n = 72 (aparelho no contou 3 amostras)
dos aprovados e reprovados para a liberao direta
atravs dos aparelhos de automao em hematologia encontram-se, respectivamente, nas tabelas 5 e 6.
do que os critrios de liberao de resultados por interfaceamento direto so amplamente satisfatrios. A anlise
Discusso
estatstica das amostras aprovadas diretamente pelos aparelhos (tabela 5) mostrou alta correlao nas contagens
Vrios trabalhos na literatura tm mostrado a eficide neutrfilos e moncitos entre a microscopia convencincia e a sensibilidade dos dois aparelhos de automao
onal e os dois aparelhos e na contagem de linfcitos pelo
analisados no presente estudo, utilizados na rotina de um
Cell Dyn 4000. Embora a contagem de linfcitos pelo
laboratrio de hematologia.2,5,6,22 No entanto, no existe
Sysmex SE 9500 tenha mostrado diferena estatstica, esta
uma concordncia total com os critrios de liberao auno clinicamente importante, uma vez que a diferena
tomtica de hemogramas. H considervel variao nos
mdia entre o nmero relativo de linfcitos comparando a
equipamentos, nas populaes atendidas pelos laboratcontagem microscpica e automatizada foi de apenas 1,4%
rios e no nvel de sensibilidade requerido.20,23
clulas. A contagem de eosinfilos mostrou alta correlaO exame das 149 lminas dos casos concordantes
o pelo Sysmex SE 9500 e a microscopia convencional e
pelo sistema apresentou apenas uma alterao sem grancorrelao moderada com o Cell Dyn 4000. A mdia da
de importncia clnica (leve pecilocitose), comprovandiferena de eosinfilos entre a contagem automatizada

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do Cell Dyn 4000 e a do autor foi de 0,3% das clulas,

mostrando ser altamente confivel. Grimaldi e Scopacasa24
j haviam mostrado alta correlao do Cell Dyn 4000 com
a contagem manual de neutrfilos e linfcitos e correlao, tambm, nas contagens de moncitos e eosinfilos.
O presente estudo mostrou baixa correlao em relao
contagem de basfilos, resultado j descrito na literatura,
onde foi demonstrada uma pequena correlao para a contagem de basfilos em amostras devido baixa contagem
desta clula. No entanto, em contagens de basfilos com
2% ou mais, a correlao parece ser satisfatria.24 Peng et
al6 mostraram que o Sysmex SE 9500 oferece excelentes
resultados para as contagens das trs linhagens celulares
(leuccitos, eritrcitos e plaquetas) e dosagem de
hemoglobina.
O exame das 98 lminas no concordantes pelo sistema (tabela 6), por outro lado, mostra que a rejeio
igualmente satisfatria. A correlao estatstica entre o
nmero de clulas encontradas pelo autor e os resultados
liberados pelos aparelhos foi menor em comparao aos
hemogramas aprovados. Com exceo de moncitos e
eosinfilos, as outras clulas apresentaram diferenas
estatsticas importantes. Esses dados confirmam a sensibilidade e confiabilidade dos aparelhos estudados.
Tornou-se consenso nos laboratrios de hematologia que os resultados sejam liberados com os laudos
diretamente emitidos dos aparelhos de automao quando nenhuma alterao for identificada pelos aparelhos. A
observao obrigatria da distenso sangnea em amostras onde alteraes so indicadas garante a confiana
dos resultados do hemograma no laboratrio de anlises
clnicas. No entanto, a prtica da microscopia em todos os
hemogramas economicamente invivel pelo grande nmero destes. Se, por um lado, existe a necessidade de reduo da observao microscpica devido aos custos,
por outro lado, deve-se ter a certeza que os resultados
liberados diretamente oferecem qualidade satisfatria. No
entanto, embora a possibilidade de dispensar a observao microscpica em todos os hemogramas pelo profissional experiente esteja longe de ser alcanada, o nmero
de resultados falso-positivos foi de 67%, reprovando estes hemogramas sem necessidade. Embora seja prefervel
que resultados falso-positivos e no falso-negativos sejam liberados pelos aparelhos, o nmero de resultados
falso-positivos poderia ser reduzido visando a reduo
de custos do laboratrio.
O presente trabalho mostrou alta correlao quanto
contagem de plaquetas entre a avaliao automatizada e
microscpica, mostrando alta eficincia em relao a esta
contagem, embora Cohen et al25 tenham mostrado alta
prevalncia de pseudotrombocitopenia em amostras analisadas pelos aparelhos automatizados. Segundo
Hoedemakers et al,26 outro resultado falso-positivo freqentemente encontrado atravs de anlise pelo Cell Dyn

4000 a indicao errnea da presena de blastos. Os

autores criaram um modelo avaliando o alarme de indicao de blastos pelo aparelho combinado com a contagem
de leuccitos. O modelo foi testado e passou a ser utilizado na rotina do laboratrio, o que reduziu 45% a necessidade de examinar as distenses sangneas pela microscopia quanto a esta indicao, sem perda significativa da
sensibilidade clnica.
Apesar da lista apresentada na tabela 1 de dados
perdidos pelo aparelho ser extensa, a maioria das alteraes citadas acompanha-se de alteraes numricas (ex.: anemia, leucocitose), indicando a necessidade de microscopia complementar, evitando resultados
falso-negativos. Se, por um lado, muitas alteraes
morfolgicas ou de incluses eritrocitrias so imperceptveis pelos aparelhos, geralmente estas alteraes
s so clinicamente significativas quando acompanhadas de alteraes quantitativas, as quais so indicadas
pelos aparelhos. Algumas anomalias, como eliptocitose,
Pelger-Hut, entre outras, so curiosas, mas geralmente
no tm significado clnico.
A anlise dos resultados atravs de microscopia
permitiu diversas consideraes. O nmero de casos excludos pela idade requer anlise devido s freqentes
diferenas encontradas nos hemogramas de criana. Nos
17 casos de anemia, a microscopia possibilitou verificar a
presena de rouleaux em cinco casos que, devido ausncia de outras alteraes, pode ser sugestiva de anemia
de doena crnica.4,27 A policromatofilia presente em trs
casos era sugestiva de regenerao da medula ssea e a
pecilocitose foi observada em dois casos de anemia. A
presena de eritrcitos irregularmente contrados e mordidos em um caso de anemia sugeriu a suspeita de anemia por hemlise oxidativa.4,23,28
No nico caso com eritrocitose (eritrcitos: 6,71 milhes/L, VCM: 65,3fL), a microscopia teve resultados
apenas complementares, pois os ndices hematimtricos
j demonstravam ser um caso sugestivo de -talassemia
menor .4,23
O hematcrito e o HCM so ndices calculados pelo
computador a partir de determinaes diretas feitas pelo
equipamento (eritrcitos x VCM, hemoglobina eritrcitos,
respectivamente).4,23,29 Esses foram critrios nicos de excluso em dois casos. Sendo ndices redundantes, sugere-se retir-los dos critrios de reprovao.
Em 15 casos com VCM entre 100 e 105 fL, nenhuma
vez foi notada macrocitose microscopia sem acesso aos
dados numricos. O reexame com pesquisa orientada foi
redundante: no mostrou neutrfilos hipersegmentados,
presena de ovalcitos ou sinais displsicos. O significativo nmero de casos no presente trabalho sugere a necessidade de pesquisa prospectiva que, se confirmar os
dados obtidos, permitir elevao do limiar de rejeio,
talvez para valores de VCM maiores de 105 fL.

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Em um caso com VCM de 114 fL, o rouleaux impossibilitava notar a macrocitose ao microscpio. O caso de
macrocitose, com VCM de 110 fL correspondeu mesma
lmina sugestiva de anemia por hemlise oxidativa 4,23,28
descrita anteriormente.
A CHCM, embora seja um ndice derivado (hemoglobina hematcrito ou HCM VCM),4,23 por variar pouco nas populaes eritrides, internacionalmente utilizada para avaliao dos resultados dos aparelhos de automao. Resultados de CHCM entre 30% e 36% no so
notados na microscopia. Valores baixos sem causa bvia
justificam a passagem da amostra em aparelho de automao alternativo.
Nos sete casos com RDW entre 15% e 18%, em trs
lminas havia pecilocitose e em quatro casos nada foi notado. Em um caso com RDW de 24,7% havia acentuada
pecilocitose, anisocromia e anisocitose visual sugerindo
uma anemia ferropnica em tratamento ou anemia
sideroblstica.4,23 Estes dados mostram que a rejeio baseada no RDW deve ser mantida.
Entre as alteraes da frmula leucocitria listadas
na tabela 3, a microscopia posterior confirmou os resultados do aparelho. Os nmeros da frmula eletrnica parecem ser mais fidedignos do que os da frmula convencional. Por outro lado, nos casos de neutrofilia, a microscopia
foi indispensvel para evidenciar ou excluir desvio esquerda, presente em trs dos 14 casos.
O alarme do aparelho do tipo Plt Clumps (plaquetas
agregadas) mostrou ser relevante e mostrou a necessidade
de ser confirmado atravs de microscopia, invalidando a
contagem de plaquetas (um caso). Houve flags *** em cinco casos pelo Sysmex SE 9500. Observou-se que as cinco
amostras no foram processadas pela aparelho no mesmo
dia, concluindo-se, portanto, que no deve ser influncia
de m limpeza do aparelho. Houve quatro casos de Imm
Gran (granulcitos imaturos) no Cell Dyn 4000. No entanto, nenhuma alterao foi observada nestas lminas, mostrando o alto ndice de resultados falso-positivos. A observao microscpica mostrou, ainda, que a viable leukocyte
fraction (frao de leuccitos viveis) estava acima de 0,995
em trs casos e em 0,987 no caso restante, no decorrendo,
portanto, de m conservao da amostra.
Os resultados obtidos confirmam a sensibilidade e
confiabilidade dos aparelhos de automao analisados,
mostrando que os mesmos so importantes instrumentos
na rotina dos laboratrios de hematologia.

hematologia. O nmero de hemogramas com resultados

no concordantes pelos aparelhos foi elevado, o que levou avaliao microscpica. No entanto, a maioria dos
casos mostrou um alto nmero de resultados falso-positivos. Esse fato aumenta o custo dos laboratrios em relao necessidade de mo-de-obra especializada para a
microscopia nesses hemogramas. Sugere-se que alguns
parmetros possam ser mudados em relao aos limites
arbitrados para reduzir ainda mais o nmero de
hemogramas falso-positivos e, conseqentemente, reduzir os custos no laboratrio clnico. Entre estes parmetros
esto a elevao do valor de VCM para acima 105 fL como
valor de rejeio e que valores para hematcrito e HCM
no sejam usados como ndices de rejeio. No entanto, o
presente estudo mostrou tambm a importncia de se manterem os valores de referncia de outros parmetros com
critrios rgidos como nos ndices CHCM e RDW. O presente trabalho mostrou, tambm, que os valores arbitrados para a contagem diferencial dos leuccitos so importantes e confiveis. A observao microscpica cuidadosa dos hemogramas no concordantes pelo aparelho diminui a possibilidade de qualquer alterao presente no
ser observada e indicada no hemograma. Esses resultados mostraram a alta confiabilidade dos aparelhos de
automao em hematologia analisados, o que faz com que
o clnico possa ter mais segurana no diagnstico e acompanhamento dos pacientes.
Abstract
Automated equipment used in the hematological laboratory for
routine hemograms offers high sensitivity and great accuracy. In
order to evaluate the liberation criteria of hemograms by direct
interfacing between the electronic counters and the emission of
results, 247 hemogram slides were examined. Of these using the
Sysmex SE 9500 and Cell Dyn 4000 automated counters, 149
slides were considered concordant with liberation criteria by
direct interfacing while 98 were considered non-concordant. Of
the concordant hemograms, microscopy without access to the
numeric results showed alterations in only one slide, which was
considered clinically irrelevant. On the other hand, of the 98
non-concordant hemograms, 32 showed alterations. The results
demonstrate the satisfactory sensitivity of the automatic systems
analyzed. The slides with the non-concordant hemograms were
re-examined, in order to evaluate the electronic results. Thus, it
was possible to analyze the causes of the non-concordance and
give suggestions for possible simplifications of the system. This
study shows that the results emitted by the assessed automatic
counters presented a high level of correlation with the microscopy
count. Therefore, it can be concluded that the results of the
hemograms liberated by the devices are satisfactory and that these
devices are reliable for the routine use within the hematological
laboratory. Rev. bras. hematol. hemoter. 2004; 26(3):159-166.

Concluses
O presente trabalho mostra que resultados falsonegativos praticamente no existem, no que se refere
liberao do hemograma sem observao microscpica
da distenso sangnea pelo profissional. Esse fato mostra a confiabilidade dos aparelhos de automao em

Key words: Hemogram; automation; Cell Dyn 4000; Sysmex SE

9500.

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Rev. bras. hematol. hemoter. 2004;26(3):159-166

Failace R et al

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Gostaramos de agradecer ao Dr. Renato Failace, ao Farmacutico Bioqumico Diogo Pilger e ao setor de hematologia
dos laboratrios Weinmann-Faillace por todo o apoio na realizao deste trabalho.

13. Shimizu M, Yamamoto M, Miyachi H et al. Simple, rapid, and

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Atuaram, na avaliao, Dr. Paulo C. Naoum, como editor

associado, e dois revisores externos.
Publicado aps concordncia com o editor.
Conflito de interesse: no declarado

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Recebido: 03/03/2004
Aceito aps modificaes: 18/08/2004

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